细胞培养常用培养基
细胞培养期末考试试题
细胞培养期末考试试题一、选择题（每题2分，共20分）1. 细胞培养中常用的培养基是：A. 蒸馏水B. 营养琼脂C. RPMI 1640D. 细菌培养基2. 细胞培养中，以下哪项不是细胞生长必需的：A. 温度B. 氧气C. 二氧化碳D. 紫外线3. 以下哪种细胞培养技术不涉及细胞的遗传改造：A. 转染B. 转导C. 克隆D. 原代培养4. 细胞培养中，pH值的维持主要依赖于：A. 细胞自身的代谢B. 培养基中的缓冲系统C. 培养箱的温湿度控制D. 定期更换培养基5. 细胞培养中，细胞传代的频率通常取决于：A. 细胞的密度B. 细胞的类型C. 培养基的成分D. 培养箱的CO2浓度二、填空题（每空2分，共20分）6. 细胞培养中，细胞的贴壁依赖于细胞表面的_________与培养基表面的_________。
7. 细胞培养过程中，细胞的增殖速率通常用_________来表示。
8. 细胞培养中，常用的细胞计数方法包括_________和_________。
9. 细胞培养时，细胞的形态变化可能预示着_________。
10. 细胞培养中，细胞的冻存通常使用含有_________的冷冻保护剂。
三、简答题（每题10分，共30分）11. 简述细胞培养中常用的传代方法及其优缺点。
12. 描述细胞培养过程中可能出现的污染类型及其预防措施。
13. 解释细胞培养中为什么要维持适宜的pH值，并说明如何调节。
四、论述题（每题15分，共30分）14. 论述原代细胞培养与次代细胞培养的区别及其在生物医学研究中的应用。
15. 讨论细胞培养技术在药物筛选和毒性测试中的应用及其重要性。
五、实验设计题（共30分）16. 设计一个实验方案，以评估不同培养条件对特定细胞株生长的影响。
请包括实验目的、原理、材料与方法、预期结果和可能的实验变量。
常见细胞系使用的培养基
常见细胞系使用的培养基细胞系培养基是在细胞体外培养时提供营养、调节生理功能和维持细胞生长所必需的基础培养液。
常见的细胞系培养基包括以下几种：1.基本培养基：(a) Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM)：DMEM是最常用的细胞培养基之一，可以满足大多数哺乳动物细胞的生长需求。
它包含丰富的氨基酸、维生素和硒等营养物质，pH 为7.4，细胞因子和血清可以根据需要添加。
(b)RPMI1640：RPMI1640是一种适用于淋巴细胞等肿瘤和免疫细胞的培养基。
它还包含可溶性蛋白、胎牛血清、植物血清和病毒适配因子等。
(c) Eagle's Minimum Essential Medium (EMEM)：EMEM是一种全面的培养基，适用于广泛的细胞系，并可添加血清、血清替代物或血清补充物来满足特定细胞系的需求。
(d) Iscove's Modified Dulbecco's Medium (IMDM)：IMDM是用于骨髓细胞和其他白细胞的培养基，也适用于一些其他特定的细胞系。
2.补充因子：(a)L-谷氨酸：可以通过促进蛋白质合成以及为细胞提供能量，促进细胞生长。
(b)胱氨酸：可以作为抗氧化剂，保护细胞免受氧化损伤。
3.血清和血清替代品：(a)胎牛血清(FBS)：FBS是最常用的培养基补充物之一，因为它含有多种生长因子、蛋白质和营养物质，可以促进细胞生长和增殖。
(b)马血清：适合一些特定的细胞系，可以替代FBS。
(c)血清替代品：血清替代品通常是人类血浆衍生物，不含动物血清，可以减少细胞系受到的外源性感染风险。
4.碳源和氮源：(a)葡萄糖：葡萄糖是最常用的碳源，可以提供细胞的能量需求。
(b)氨基酸：提供细胞各种生物合成的原料。
(c)谷氨酸/谷氨酰胺：作为氨基酸的前体，是合成蛋白质和核酸的重要物质。
5.生长因子和维生素：(a)血液集落刺激因子(CSFs)：CSFs可以促进造血系统细胞系的增殖和分化。
细胞培养方法
细胞培养方法
细胞培养是生物学实验中常用的一种技术手段，它可以提供大量的细胞用于实验研究。
正确的细胞培养方法对于细胞的生长、增殖和实验结果的准确性都至关重要。
下面将介绍一些常用的细胞培养方法及注意事项。
首先，准备培养基。
培养基是细胞生长所必需的营养物质和生长因子的混合物。
常用的培养基有DMEM、RPMI-1640等，根据不同细胞类型的要求选择适当的培养基。
在制备培养基时，需要注意无菌操作，避免细菌和真菌的污染。
其次，处理细胞。
从细胞库中取出细胞后，需要进行细胞的处理和传代。
处理细胞时，要注意细胞的密度和活性，避免细胞凝集和死亡。
传代时，要根据细胞的生长状态和密度进行适当的稀释，以保证细胞的健康生长。
接着，进行细胞的接种和培养。
将处理好的细胞按照一定的比例接种到预先涂有培养基的培养皿中，然后将培养皿放入培养箱中进行培养。
在培养过程中，需要定期观察细胞的生长状态，及时更换培养基，避免细胞过度生长或死亡。
最后，进行实验。
当细胞达到所需的数量和状态后，就可以进行相关的实验。
在实验过程中，需要注意培养皿的无菌操作，避免细菌和真菌的污染。
同时，要注意细胞的处理和操作方法，避免对细胞造成损伤。
总之，正确的细胞培养方法对于细胞的生长和实验结果至关重要。
只有严格遵守操作规程，做好无菌操作，才能得到可靠的实验结果。
希望本文介绍的细胞培养方法能够对大家有所帮助。
细胞培养各种培养基简介
DMEM、RIPA1640、F12、L15等细胞培养基的基本知识培养细胞的完全培养基由基础培养基（如MEM）和添加剂（如血清或无血清培养用的某些确定的激素及生长因子）组成，培养基的配方一直在改进，其中包括抗生素和抗有丝分裂剂等等。
一、基础培养基绝大多数培养基是建立在平衡盐溶液(BSS)基础上，添加了氨基酸、维生素和其它与血清中浓度相似的营养物质。
最广泛应用的培养基是Eearle`s MEM 的混合物，其中含有13种必须氨基酸、8种维生素。
而Ham`s F12 也包括非必须氨基酸，维生素的范围亦很广，另外常规含有无机盐和代谢添加剂（例如核苷酸）。
MEM/F12 这两种培养基各取1/2，形成神经生物学最通用的培养基。
Dulbecco`s改良培养基——DMEM，现应用于快速生长的细胞，同MEM 含有相同的营养成分，但浓度高出2~4倍。
选择某种培养基，应仔细了解成分表，应知道大多数情形下培养基都有不足。
例如，有些培养基在氨基酸中包括有谷氨酸，而这种培养基虽广泛用于神经生物学领域，但它对某些对谷氨酸敏感的可能有细胞外毒性损伤的神经元而言，则并非最佳选择，特别是如果神经元生长在缺乏胶质的环境中时。
F12中含有硫酸亚铁，据报道也有神经毒效应。
在所有这些培养基中，谷氨酸比其他氨基酸有更高的浓度，这是因为它具有不稳定性以及在许多细胞培养中它常用作碳源。
对于神经元的培养常常在基础培养基中增加葡萄糖的含量到0.6%或者加入丙酮酸（若培养基中这两种物质缺乏时）。
MEM与F12均要用5%的CO2来平衡，DMEM含更高浓度的NaCO3，要用10%的CO2来平衡，当然也可以在较低CO2浓度下使用。
这些基础培养基的组成成分是建立在对不同细胞系生长的研究之上的，但通常在原代培养中使用也能有比较令人满意的结果。
原则上，HEPES作为缓冲剂可用来代替碳酸氢盐，以解除需要高浓度CO2培养环境的限制。
实际操作中并非如此简单。
显然，溶解的CO2与碳酸氢盐对良好的细胞生长是重要的。
细胞培养基种类与基本成分
(1)需要长期保存的血清必须储存于-20C-70C低温冰箱中。4C冰箱中保存 时间切勿超过1个月。由于血清结冰时体积会增加约10%，因此，血清在冻入 低温冰箱前，必须预留一定体积空间，否则易发生污染或玻璃瓶冻裂。
(5)切勿将血清在37C放置太久，否则血清会变得浑浊，同时血清中的有效成 分会破会而影响血清质量。
(6)血清中的沉淀物絮状物：主要是血清中的脂蛋白变性及解冻后血清中纤维
蛋白造成，这些絮状物不会影响血清本身的质量。可用离心3000rpm,5分钟去
除，也可不用处理。
显微镜下 小黑点”经过热处理过的血清，沉淀物的形成会显著增多。有些沉淀 物在显微镜下观察象 小黑点”常误认为血清受污染。一般情况下，此小黑点不 会影响细胞生长，但如果怀疑血清质量，则应立即停止使用，更换另一批号的血 清。
(2)一般厂商提供的血清为无菌，无需再过滤除菌。如发现血清有悬浮物，则 可将血清加入培养液内一起过滤，切勿直接过滤血清。
(3)瓶装血清解冻需采用逐步解冻法：-20C至-70C低温冰箱中的血清放入4C冰箱中溶解1天。然后移入室温，待全部溶解后再分装。在溶解过程中需不 断轻轻摇晃均匀(小心勿造成气泡)，使温度与成分均一，减少沉淀的发生。切
2、MEM细胞培 养基
又称低限量Eagle培养基 (Minimal Essential Medium) ，1959年在Eagle's基础 培养基(BME)上修改而来，删去赖氨酸、生物素，氨基酸浓度增加，适合多 种细胞单层生长，有可高压灭菌品种，是一种最基本、试用范围最广的培养基， 但因其营养成分所限，针对生产之特定细胞培养与表达时， 并不一定是使用效果 最佳或者最经济的培 养基。
细胞培养各种培养基简介
DMEM、RIPA1640、F12、L15等细胞培养基的基本知识培养细胞的完全培养基由基础培养基如MEM和添加剂如血清或无血清培养用的某些确定的激素及生长因子组成,培养基的配方一直在改进,其中包括抗生素和抗有丝分裂剂等等;一、基础培养基绝大多数培养基是建立在平衡盐溶液BSS基础上,添加了氨基酸、维生素和其它与血清中浓度相似的营养物质;最广泛应用的培养基是Eearle`s MEM 的混合物,其中含有13种必须氨基酸、8种维生素;而Ham`s F12 也包括非必须氨基酸,维生素的范围亦很广,另外常规含有无机盐和代谢添加剂例如核苷酸;MEM/F12 这两种培养基各取1/2,形成神经生物学最通用的培养基;Dulbecco`s改良培养基——DMEM,现应用于快速生长的细胞,同MEM含有相同的营养成分,但浓度高出2~4倍;选择某种培养基,应仔细了解成分表,应知道大多数情形下培养基都有不足;例如,有些培养基在氨基酸中包括有谷氨酸,而这种培养基虽广泛用于神经生物学领域,但它对某些对谷氨酸敏感的可能有细胞外毒性损伤的神经元而言,则并非最佳选择,特别是如果神经元生长在缺乏胶质的环境中时;F12中含有硫酸亚铁,据报道也有神经毒效应;在所有这些培养基中,谷氨酸比其他氨基酸有更高的浓度,这是因为它具有不稳定性以及在许多细胞培养中它常用作碳源;对于神经元的培养常常在基础培养基中增加葡萄糖的含量到0.6%或者加入丙酮酸若培养基中这两种物质缺乏时;MEM与F12均要用5%的CO2来平衡,DMEM 含更高浓度的NaCO3,要用10%的CO2来平衡,当然也可以在较低CO2浓度下使用;这些基础培养基的组成成分是建立在对不同细胞系生长的研究之上的,但通常在原代培养中使用也能有比较令人满意的结果;原则上,HEPES作为缓冲剂可用来代替碳酸氢盐,以解除需要高浓度CO2培养环境的限制;实际操作中并非如此简单;显然,溶解的CO2与碳酸氢盐对良好的细胞生长是重要的;Leiboviz`s L15培养基可用来在大气环境中令神经细胞生长,该培养基采用了与众不同的BSS作基础,它含有高浓度的氨基酸来提高缓冲能力,培养基中使用半乳糖作碳源,以阻止培养基中乳酸形成,少量溶解的CO2由丙酮酸代谢产生;这一培养基的优点是明显的,特别是在保持较高CO2有困难时,例如在长时间的显微操作及生理学研究中;L15培养基已用来成功的培养了外周神经元,但尚未在CNS神经元的发育研究中全面检测过;二、血清细胞在单纯的基础培养基中不能存活,在特殊类型的细胞培养中必须提供某些痕量营养物质及生长因子才能使细胞得以生长并维持生长状态;基础培养基常常要添加血清,血清终浓度多为5~20%;特殊用途的血清来源须用经验确定,广泛应用的血清种类有马血清与胎牛血清;胎牛血清中富含有丝分裂因子,常选其作增殖细胞用的血清,也用于细胞系和原代培养;而马血清常常用来作有丝分裂后的神经元培养;然而,很多人也将胎牛血清用于神经型血清；人类的胎盘血清,亦曾用于神经组织的器官类型的培养,也用在一些特殊培养种类中;血清的不同批号含有不同的成分,所以许多人发现,应该在使用前对血清进行测试;大多数试剂商提供样品,所满意的批号即可选用,这样可以一次得到足够一年用量的血清,血清在使用前通常在56℃加热30分钟,这一过程称为灭活;三、无血清培养基1979年神经细胞培养出现了一个重要进展,用化学添加剂即可维持神经细胞存活与生长而不需要在培养基中添加血清;其工作基础是用合适的激素、营养物和促贴壁的物质的组合置换培养基中的成分,最后找到了适合大多数细胞培养的试剂配方,该配方称为N2,专门用于神经细胞培养,最早是用在B104大鼠神经母细胞瘤细胞系的培养;它的基础培养基是1：1的DMEM与H12的混合液,添加了胰岛素、转铁蛋白、黄体酮、腐胺和硒;胰岛素和胰岛素样生长因子对于大多数类型细胞的存活和生长有重要作用,硒是谷胱甘肽产生的合作因子,可能有助于过氧化物和超氧化物的水解,有报道说还能防止细胞的光照损伤;随后的其他配方如N1N3则含有较低浓度的转铁蛋白;未料到的是上述配方构成的培养基可以支持神经母细胞瘤细胞系快速增殖,随后又发展了能支持原代培养的各种神经元生长的培养基,这种培养基在许多实验室里已取代了有血清培养;在某些培养方案中,细胞直接进入无血清培养,这样的培养基可以消除来自血清的不均一性;更为重要的是,它们可用来检测生长因子以及其他促进神经元存活或生长的因子,或者用来检测那些可保护神经元免遭环境毒物损伤的制剂;专用于神经元的培养基在某些培养环境中还可以减低非神经元细胞的增殖,故可使神经元纯化;血清中含有的组分,例如血清蛋白,可作为代谢毒物清除剂使用并能聚集于培养基中;当缺乏这些成分时,如神经元在无血清培养基中生长时,特别容易为过氧化物及自由基伤害,这已被许多研究者注意到了;过氧化物酶以及超氧化物歧化酶可阻止培养基中过氧化物和超氧化物的累积,有报道讲可以促进低密度培养细胞的存活;有学者发现细胞存活可为氧分压的下降而促进;因而,无血清培养基的配方常含有抗氧化剂的试剂;例如,维生素E和丙酮酸,可作为过氧化物清除剂使用;上述这些影响在高密度培养时变小,特别是神经元与胶质共培养时,它们可以吸收和代谢神经元毒性物质如谷氨酸;应该注意,尽管无血清培养基是有化学限定性的,但在培养过程中它仍有变动,培养起始时可能有些物质缺乏,而后细胞的产物可能积累,从而使培养基的成分改变;这其实是有另一方面的好处,即条件培养基已培养过细胞的培养基的形成,条件培养基常常用来增加神经元和胶质细胞的发育;生长因子绝大多数哺乳类胚胎神经元有严格的营养要求,若不能提供适宜的生长因子或合适的因子组分,将会使绝大多数神经元在体外培养的数天中死亡;解决这一问题有两条思路,一是让培养细胞提供自己的营养因子,二是在培养基中加入纯的生长因子;如果细胞混合物能在高密度时生长,所需的生长因子便会积累到可观的数值,尤其当培养基很少变化时;若某种生长因子积累,而最后促使所需要的细胞类型能够生长;但是,这种对营养生长因子自身倚赖性亦有弊端,因为通常在混合细胞群体中细胞很难有同比例增殖,某些细胞会因生长条件的贫乏而受限制;另外,这种方法只能进行相当高密度的细胞培养;因为培养基的条件在细胞的较低密度时变的不够有效;不过某些时候纯化神经元群体的低密度培养可用条件培养基经过了高密度培养进行,或在胶质上生长的神经元所用过的培养基来支持;满足神经元营养需求的第二条途径是向培养基中加入生长因子;通常用于组培的通用适宜因子是神经生长因子NGF;不过,只有少数对这种蛋白质有反应的细胞类型的细胞才能生长;许多PNS类型的神经元在离体状态时表现出简单的营养需求,只需提供单一的营养因子就足以使其在低密度时增殖;例如,大鼠交感神经元仅需NGF即能存活,在其生存期间,这些神经元可在严格局限条件下生长好几个月即在无血清培养基中、或缺乏胶质细胞、或在化学限定基质上;有证据表明NGF是活体中交感神经元存活的生理调节因子;然而,交感神经元也对来自胶质细胞的神经营养因子GDNF有反应,还有NT3、LIF与CNTF也对其有作用;在不产生GDNF 或NT3的动物中,交感神经元会有损伤;在离体与活体营养需求之间的差别或许可以用在不同环境中NGF含量和分布的不同来解释,培养中的NGF弥散在整个环境中,而在活体内,大部分区域的含量是有限的;因此,NGF的重要性在于其合适的浓度;尽管在大多数实验中已经习惯了营养因子的最大效应使用量,其他营养因子的协同效应在亚优剂量下更容易观察到;此外,高浓度的营养因子可使细胞更能抵抗毒剂以及其他压力;相应的,低浓度的营养因子可能用来检查表现型,例如对自由基或氨基酸的毒性刺激剂量的反应;有许多其他的PNS培养系统只需单一营养因子就可使有实用价值的细胞保持在一定比例,广为人知的有雏鸡睫状自主神经节神经元和大鼠背根神经节感觉神经元;不过,这些模型也有局限性;例如,培养中的睫状神经节的神经元加入CNTF时,超过90%的神经元能存活一个很长时期,但并未有迹象表明它属于内源的靶细胞来源的营养因子,而是有争论的相关分子,GPA,扮演了这一角色;大鼠背根神经节含有好几种细胞群体,其中小细胞群、包括nocioceptive cell,对NGF有反应,但其他神经元,例如大细胞群中的proprioception 却对不同的神经营养因子有反应;因此,在大多条件下培养物的生长并不能忠实反映亲代群体的所有特性,这一问题在CNS的细胞培养中特别突出,因为已有的经验表明,没有一种培养基能适合于所有类型及亚类的神经细胞的生长;现有的证据已表明,CNS神经元的营养需求比PNS的更复杂;对脊髓运动神经元与视网膜节细胞神经元的研究表明,这些神经元与外周神经元相比能对更为广泛的营养因子起反应;例如,至少发现了15种不同的分子可在离体条件下增加神经元的存活;而且,已观察到运动神经元与视网膜对任何单独的营养因子的存活反应,与PNS中所观察到的典型反应相比,都要小得多;因此,大多数影响运动神经元及视网膜节细胞的营养因子仅仅只能支持神经元的亚群,而神经元的最佳存活要求诸多因子的结合;在视网膜节细胞的培养中,因子的最佳组合如BDNF、CNTF、IGF、bFGF包括了来自不同生长因子家族的代表;这一结果的普遍性尚待进一步的证实,但敲除单一的营养因子基因之后,没有表现出对CNS大多类群的神经元的存活产生太大影响,这一观察与上述的事实是一致的;现已知少突胶质细胞的长期存活也需要众多营养因子的相互作用;四、抗生素在细胞培养中最常用的抗生素是青霉素常用浓度是25~100ui/ml与链霉素25~100μg/ml;这两种抗生素常混合使用;在一些实验室里,它们常规加入所有的培养基中;庆大霉素10~100μg/ml通常有广谱抗菌效应,并具有溶液稳定性,故也被一些实验室使用,特别是当有低水平的污染存在时更是这样;以上这些试剂对霉菌与酵母菌的污染均无效;尽管很多实验室在细胞系的培养基中常规加入抗生素作继代培养,但仍建议不要在原代培养中加入抗生素,其理由之一是获得的细胞是无菌的,原代培养时的细菌污染很少发生;其次,尽管认为抗生素对细胞代谢的影响可忽略,但最好避免使用它们,以免细胞生长环境的不稳定;最重要的是要意识到培养中主要污染物的类型,它们通常暗示了问题的来源;五、抗有丝分裂剂某些DNA合成抑制剂对分裂细胞有毒,但对没有DNA合成的细胞仅有轻微影响;由于神经元通常缺乏DNA合成能力,因此对抗有丝分裂剂没有多大反应;这样的试剂常常用于神经元的培养,以消除或减少非神经元群体;若要杀死所有的非神经元细胞,可以先加入血清或生长因子来保证有高比例的非神经元细胞进行DNA合成,此时再加入抗有丝分裂剂;但是,某些细胞在它的细胞周期的某些时相时对抗有丝分裂剂是不敏感的;不过,可以重复的将抗有丝分裂剂使用于增殖的细胞群体;在CNS神经元的培养中抗有丝分裂剂常常在星形细胞形成单层后加入,此时,星形细胞由于接触抑制而终止了DNA的合成即细胞停止增殖,它们不会因抗有丝分裂剂的加入而死亡;原代培养中用这种方法阻止成纤维细胞的过度增殖是十分必要的;有两种抗有丝分裂剂常用于神经元的培养：Fluorodexyuridine,是胸苷合成酶抑制剂,一般使用浓度为～10μM;尿苷10μM也常使用,可阻止不分裂细胞的RNA合成;另外,阿糖胞苷也常被使用,其使用浓度为5～50μM;使用任何一种抗有丝分裂剂,都必须考虑它的神经原毒性,应该确定最低效应的使用浓度;阿糖胞苷在很低的浓度下,也会对某些种类的神经元有毒性,可以造成特定神经原的死亡;其他的抗有丝分裂剂尚未表现出这种毒性;六、培养的保持培养物是应该保持在孵箱中的;孵箱可以自动将O2与CO2混合很快达到培养基的设计要求,空气中的氧浓度比血液和脑脊液中要高得多;对于某些细胞的生长,包括神经原,应使氧含量处在一个较低的水平;可以用孵箱达到这个标准,但这样的孵箱并未广泛使用;高湿度可避免培养皿中培养基的蒸发,保持孵箱中的湿度通常是在箱底部放上一大盆水,这水应该经常换,乘水容器应经常消毒以防霉菌生长;若孵箱曾被霉菌孢子严重污染过,那么要想完全去除污染则会非常困难;当培养物必须要长期保持在孵箱中时,应采用较少培养基的瓶、皿,且将盖子盖紧以避免蒸发,或采用相应的按比例供空气的孵箱;温度的精确调节应定期检查,孵箱温度常设置为37℃或较低温度;细胞在低温时可有较长时间的忍耐限度,但当温度升至39℃时,几小时内即死亡;维持培养物的最佳方案常常改变;例如培养胶质细胞时,要经常换液以使其增殖达到最大;而在培养某些神经原时,则要求尽可能少的换液,神经原在两次换液之间的条件下长的最好;大脑皮质的培养要求在不换液的情形下维持一个月以上;另一方面,象海马神经原那样的细胞,倚赖于条件培养基,若换液太频繁细胞就会衰退,此时,可采用1/3或1/2换液的方式;。
常用培养基及基本特性
常用培养基及基本特性1、RPMI-1640MediumRPMI-1640广泛应用于哺乳动物、特殊造血细胞、正常或恶性增生的白细胞，杂交瘤细胞的培养，是目前应用十分广泛的培养基。
主要用于悬浮细胞培养。
其它像K-562、HL-60、Jurkat、Daudi、IM-9等成淋巴细胞、T细胞淋巴瘤细胞以及HCT-15上皮细胞等均可参考使用2、Minimum Essential Medium（MEM）也称最低必需培养基，它仅含有12种必需氨基酸、谷氨酰胺和8种维生素。
成分简单，可广泛适应各种已建成细胞系和不同地方的哺乳动物细胞类型的培养。
MEM-Alpha一般用于培养一些难培养细胞类型，而其它没有特殊之处的细胞株则几乎均可采用MEM来培养。
3、DMEM-高糖（标准型）是一种应用十分广泛的培养基，可用于许多哺乳动物细胞培养,更适合高密度悬浮细胞培养。
适用于附着性较差，但又不希望它脱离原来生长点的克隆培养，也可用于杂交瘤中骨髓瘤细胞和DNA转染的转化细胞的培养。
4、DMEM-低糖（标准型）是一种应用十分广泛的培养基，可用于许多哺乳动物细胞培养。
低糖适于依赖性贴壁细胞培养，特别适用于生长速度快、附着性较差的肿瘤细胞培养。
5、DMEM/F12DMEM/F12培养基适于克隆密度的培养。
F12培养基成分复杂，含有多种微量元素，和DMEM 以1：1结合，称为DMEM/F12培养基（DME/F12medium），作为开发无血清配方的基础，以利用F12含有较丰富的成分和DMEM含有较高浓度的营养成分为优点。
该培养基适用于血清含量较低条件下哺乳动物细胞培养。
为了增强该培养基的缓冲能力，改良之一是在DMEM/F12（1：1）中加入15mMHEPES缓冲液。
16、McCoy’s5A9McCoy’s5A Medium主要为肉瘤细胞的培养所设计，可支持多种（如骨髓、皮肤、肺和脾脏等）的原代移植物的生长，除适于一般的原代细胞培养外，主要用于作组织活检培养、一些淋巴细胞培养以及一些难培养细胞的生长支持。
细胞实验试题及答案
细胞实验试题及答案1. 细胞培养中常用的培养基有哪些？- 答案：常用的细胞培养基包括DMEM、RPMI-1640、MEM、F12等。
2. 细胞传代时应注意哪些事项？- 答案：细胞传代时应注意以下事项：1. 使用无菌操作技术。
2. 确保培养基新鲜且无污染。
3. 传代时细胞应处于健康生长状态。
4. 传代比例要适当，避免细胞过于拥挤或过于稀疏。
3. 细胞冻存液的主要成分是什么？- 答案：细胞冻存液的主要成分包括：1. 基础培养基。
2. 冷冻保护剂（如DMSO）。
3. 血清。
4. 细胞凋亡的形态学特征有哪些？- 答案：细胞凋亡的形态学特征主要包括：1. 细胞体积缩小。
2. 细胞核浓缩。
3. 细胞膜泡化。
4. DNA片段化。
5. 细胞周期各阶段的特点是什么？- 答案：细胞周期各阶段的特点如下：1. G1期：细胞生长，进行RNA和蛋白质的合成。
2. S期：DNA复制。
3. G2期：细胞继续生长，准备进行分裂。
4. M期：细胞分裂。
6. 细胞转染常用的方法有哪些？- 答案：细胞转染常用的方法包括：1. 脂质体介导的转染。
2. 电穿孔。
3. 病毒载体转染。
7. 细胞克隆形成实验的步骤是什么？- 答案：细胞克隆形成实验的步骤包括：1. 细胞消化。
2. 细胞计数。
3. 细胞稀释。
4. 细胞培养。
5. 克隆选择。
6. 克隆扩增。
8. 细胞培养中常见的污染类型有哪些？- 答案：细胞培养中常见的污染类型包括：1. 细菌污染。
2. 真菌污染。
3. 支原体污染。
4. 病毒污染。
9. 细胞培养箱的基本条件是什么？- 答案：细胞培养箱的基本条件包括：1. 恒温。
2. 恒湿。
3. 5% CO2环境。
4. 无菌。
10. 细胞毒性实验中常用的检测方法有哪些？- 答案：细胞毒性实验中常用的检测方法包括：1. MTT法。
2. LDH释放法。
3. 细胞克隆形成实验。
4. 细胞存活率检测。
以上是细胞实验试题及答案的排版和格式示例。
细胞培养基种类及用途
细胞培养基种类及用途1. DMEM（Dulbecco's Modified Eagle Medium）：DMEM 是最常用的无血清培养基之一，是以鹰的鸟胚为基础改进而来的，含有大量氨基酸、糖类、维生素和一些重要的生长因子。
适用于大多数哺乳动物细胞的培养，具有优良的细胞增殖和生长效果。
2.RPMI1640：RPMI1640是一种由罗斯韦尔公立医院制备的细胞培养基，主要用于淋巴细胞、淋巴瘤和骨髓细胞的培养。
它具有高浓度的氨基酸和维生素，适合长期的培养以及体外细胞繁殖实验。
3. MEM（Minimum Essential Medium）：MEM 是一种最简单的细胞培养基，含有大量的必需氨基酸、维生素和果糖。
它广泛用于原代细胞和肿瘤细胞的培养，具有适应性强、成本低的优势。
4. FBS（Fetal Bovine Serum）：FBS 不是一种细胞培养基，而是培养基中添加的血清。
FBS 富含细胞生长因子、激素和营养物质，可提供所需的细胞补体和血浆蛋白。
它被广泛用于细胞培养中，可以促进细胞的增殖和生长。
5. StemPro MSC SFM：StemPro MSC SFM 是一种专门设计用于人类间充质干细胞（MSC）培养的无血清培养基。
它富含生长因子和维生素，可以维持 MSC 的干性状态，有利于其增殖和多向分化。
6. Neurobasal medium：Neurobasal 是一种特殊的神经元细胞培养基，用于神经元细胞的培养。
它含有许多神经营养因子和激素，能够促进神经细胞的生长和分化。
7.DMEM/F12：DMEM/F12是一种混合型细胞培养基，是DMEM和HAMF12培养基的混合产物。
它具有增强细胞的生存能力和增殖速度的优势，适用于许多类型的肿瘤细胞和原代细胞的培养。
细胞培养基的选择要根据具体实验目的和细胞类型来确定。
不同种类的细胞培养基在细胞生长、增殖和分化方面有不同的影响，因此合理的选择细胞培养基可以提高实验效果和数据可靠性。
细胞培养基的三类
细胞培养基的三类细胞培养是指将体外人工创造的环境条件下，细胞种子或组织细胞培育在实验室的某种物质基础上。
细胞培养基是实验室中进行细胞培养研究时的一个必需品，主要包括三类：基本培养基、特定培养基和增强培养基。
1.基本培养基基本培养基也称为通用培养基，通常包含细胞培养所必需的基本成分，如氨基酸、糖、盐和维生素等。
基本培养基的特点是能够满足多数类型的细胞生长所需的最基本条件，因此是细胞培养实验中最常用的一类培养基。
基本培养基中的成分也可根据需要进行调整和添加。
最常见的基本培养基是DMEM（Dulbecco's modified Eagle's medium）和RPMI-1640培养基。
DMEM培养基适用于许多不同类型的细胞生长，包括：成纤维细胞（fibroblasts）、上皮细胞（epithelial cells）和神经元（neurons）等。
RPMI-1640培养基则主要适用于细胞的代谢研究以及免疫学试验，如血清学反应及淋巴细胞的增殖等。
因为其中的碳酸氢钠缓冲液含有HEPES，其pH值更加稳定。
2.特定培养基特定培养基也称为选择性培养基，是设计用于一些特定类型的细胞生长所需的培养基。
这些培养基含有在基本培养基中并不包括的细胞成分。
它所包含的人工添加物质可以为特定类型的细胞提供更加适宜的环境，并使它们更快地生长和繁殖，从而更好地满足研究需要。
例如，L-15培养基适用于昆虫、鱼和某些哺乳动物细胞的培养；MEM （Minimum Essential Medium）培养基则适用于肾上腺细胞培养，含有很高的氨基酸和维生素含量；Brain-heart infusion Broth（BHI）培养基则适用于微生物培养研究。
3.增强培养基增强培养基是为了提高细胞的增殖率、减少细胞死亡率而设计的。
这种培养基包括ATCC存活素、胎牛血清(Bovine Serum)和其他生长因子。
这种培养基的使用通常需要更好的质量控制，以确保一致性。
各种细胞培养基的区别及应用
各种细胞培养基的区别及应用细胞培养基是用于体外培养细胞的一种重要介质，它可以为细胞提供生长所需的营养物质、生长因子、激素等。
根据不同的需求和应用领域，细胞培养基有很多种类和特点。
本文将对细胞培养基的区别及应用进行详细介绍，以帮助大家更好地了解和选择合适的细胞培养基。
一、细胞培养基的概述细胞培养基的发展历程可以追溯到上世纪50年代，随着生物科学研究的不断深入，细胞培养技术得到了广泛应用。
细胞培养基的研究和应用不仅为生物学基础研究提供了有力支持，还为医学、农业、工业等领域创造了巨大价值。
二、细胞培养基的区别1.基础培养基与专用培养基基础培养基：含有细胞生长所需的基本营养物质，如糖、氨基酸、维生素等，适用于大多数细胞的培养。
常见的基础培养基有DMEM、RPMI-1640、MEM等。
专用培养基：针对特定类型的细胞设计，具有较高的特定成分和较窄的营养成分范围，可以满足某些细胞对特定营养物质的需求。
如HEK293细胞培养基、MCF-7细胞培养基等。
2.天然培养基与合成培养基天然培养基：来源于动物血清、血浆等天然物质，含有丰富多样的生长因子、激素等，具有较高的生物活性。
常见的天然培养基有FBS（胎牛血清）、ABC（人血清）等。
合成培养基：通过化学合成或重组技术制备，成分明确、可定制。
可以根据细胞需求添加不同的生长因子、激素等，具有较高的可控性。
如MED64培养基、Synthemax培养基等。
3.液体培养基与固体培养基液体培养基：含水量较高，细胞在其中可以自由悬浮和生长。
常见的液体培养基有DMEM/F12、RPMI-1640等。
固体培养基：在液体培养基中添加固体成分，如琼脂、纤维素等，使细胞可以在固体表面附着生长。
常见的固体培养基有agarose、matrigel等。
4.不同种类的细胞对培养基的需求不同种类的细胞对培养基的需求不同，例如：- 淋巴细胞培养：需要较高浓度的氨基酸、维生素和血清；- 神经细胞培养：需要添加神经营养因子、生长因子等；- 肿瘤细胞培养：需要较高浓度的糖和血清。
培养基的概念和种类
培养基的概念和种类培养基是研究细胞生长、分化和繁殖的基础，是病原菌检测，细胞工程，医学实验，食品工业等领域必不可少的试剂。
本篇文章将从培养基的概念、种类、组成、制作方法、储存及培养技巧等方面详细介绍。
一、培养基的概念培养基是指一种为细胞提供必需营养物质的物质，它包括有机物和无机物，是为了维持细胞的生长、繁殖、分化等生理特性而进行培养的基础。
二、培养基的种类1. 基础培养基基础培养基是最基本的培养基，其主要作用是为细菌、真菌、植物等生物提供营养物质。
例如，葡萄糖盐基培养基是一种最常用的基础培养基。
2. 选择性培养基选择性培养基是一种通过添加特定厌氧、氧气、环境条件和选择不同适应能力的生物来选择生长的特定细菌。
例如，大肠杆菌的平板选择培养基。
3. 差异培养基差异培养基是一种利用生理、形态特征进行区分的培养基。
例如，Eosin-Methylene Blue平板是一种常用的选择性与差异性培养基，用于检测和分离大肠杆菌和嗜肠球菌。
4. 非选择性培养基非选择性培养基是为了检测快速生长的微生物而设计的。
其特点是含有丰富的营养物质以及足够的水分和氧气。
例如，Nutrient Agar（营养琼脂）是一种非选择性的培养基，用于生长细菌、真菌和一些酵母菌等。
5. 非固定基质培养基非固定基质培养基又称为液体培养基，其特点是无法形成固体琼脂层，可以提供大量的氧气、液体和营养物质。
例如，Tryptic Soy Broth培养基是一种常用的非固定基质培养基，用于生长各种微生物。
三、培养基的组成培养基的组成需要根据不同生物的要求来设定，但一般来讲，培养基的组成由以下成分构成：有机碳源、氮源、磷源、矿物质和微量元素。
1. 有机碳源有机碳源是促进微生物生长和代谢所必需的碳源化合物。
培养基可能含有多种有机碳源以提供足够的碳。
常见的有机碳源有葡萄糖、果糖、麦芽糖、葡萄糖酸等。
2. 氮源氮源是细胞合成蛋白质和核酸所必需的营养物质。
常用的氮源有胺基酸、蛋白胨、尿素等。
常用细胞培养基配方及缓冲液
常用细胞培养基配方及缓冲液细胞培养基是一种含有适当营养物质和生长因子的液体或凝胶，用于维持细胞的生长与繁殖。
常用的细胞培养基配方和缓冲液如下：一、常用的细胞培养基配方：1. DMEM（Dulbecco's Modified Eagle's Medium）-DMEM是最常用的细胞培养基之一，适用于多种种类的细胞培养。
-基本配方：-高糖DMEM：添加25mM葡萄糖-低糖DMEM：添加5.5mM葡萄糖-高氨基酸DMEM：添加高浓度的氨基酸，以促进细胞生长和蛋白质合成。
2.RPMI1640-适用于淋巴细胞和一些肿瘤细胞的培养。
-基本配方：-高糖RPMI1640：添加25mM葡萄糖-低糖RPMI1640：添加5.5mM葡萄糖-高氨基酸RPMI1640：添加高浓度的氨基酸。
3. MEM（Minimum Essential Medium）-MEM是最早用于细胞培养的培养基。
-基本配方：-高糖MEM：添加25mM葡萄糖-低糖MEM：添加5.5mM葡萄糖4. Ham's F-10-适用于肿瘤细胞和一些原代细胞的培养。
-基本配方：- 高糖Ham's F-10：添加25mM葡萄糖- 低糖Ham's F-10：添加5.5mM葡萄糖5.L-15-适用于多种种类的细胞培养。
-基本配方：- L-15培养基：必须在CO2-free环境下使用。
二、常用的缓冲液：1. 磷酸盐缓冲液（Phosphate Buffered Saline，PBS）-0.1MPBS的配方：-8gNaCl-0.2gKCl-1.44gNa2HPO4-0.24gKH2PO4-1L去离子水-调pH至7.42.HEPES缓冲液-基本配方：-119mMNaCl-5mMKCl-0.8mMMgSO4-0.4mMKH2PO4-2.4mMNaHCO3-20mMHEPES（pH7.4）-0.6mMCaCl23. Tris缓冲液-基本配方：- 25mM Tris- 192mM glycine-10%甘油-0.1%SDS-pH8.34. Hanks平衡盐液 (HBSS)-基本配方：-8gNaCl-0.4gKCl-0.146gKH2PO4-0.2gMgSO4-0.06gMgCl2-0.35gNaHCO3-0.06gNa2HPO4-pH7.45. Tris-EDTA-基本配方：- 1M Tris-HCl，pH 8.0-0.5MEDTA，pH8.0以上是常用的细胞培养基配方和缓冲液的一些例子，不同细胞类型和实验要求可能需要不同的培养基和缓冲液。
细胞培养常用培养基
细胞培养常用培养基高博，苏州大学医学部药学院药理学系1、RPMI-1640 MediumRPMI-1640广泛应用于哺乳动物、特殊造血细胞、正常或恶性增生的白细胞，杂交瘤细胞的培养，是目前应用十分广泛的培养基。
主要用于悬浮细胞培养。
其它像K-562、HL-60、Jurkat、Daudi、IM-9等成淋巴细胞、T细胞淋巴瘤细胞以及HCT-15上皮细胞等均可参考使用。
2、Minimum Essential Medium（MEM）也称最低必需培养基，它仅含有12种必需氨基酸、谷氨酰胺和8种维生素。
成分简单，可广泛适应各种已建成细胞系和不同地方的哺乳动物细胞类型的培养。
MEM-Alpha一般用于培养一些难培养细胞类型，而其它没有特殊之处的细胞株则几乎均可采用MEM来培养。
3、DMEM-高糖（标准型）是一种应用十分广泛的培养基，可用于许多哺乳动物细胞培养,更适合高密度悬浮细胞培养。
适用于附着性较差，但又不希望它脱离原来生长点的克隆培养，也可用于杂交瘤中骨髓瘤细胞和DNA转染的转化细胞的培养。
4、DMEM-低糖（标准型）是一种应用十分广泛的培养基，可用于许多哺乳动物细胞培养。
低糖适于依赖性贴壁细胞培养，特别适用于生长速度快、附着性较差的肿瘤细胞培养。
5、DMEM/F12DMEM/F12培养基适于克隆密度的培养。
F12培养基成分复杂，含有多种微量元素，和DMEM以1：1结合，称为DMEM/F12培养基（DME/F12 medium），作为开发无血清配方的基础，以利用F12含有较丰富的成分和DMEM含有较高浓度的营养成分为优点。
该培养基适用于血清含量较低条件下哺乳动物细胞培养。
为了增强该培养基的缓冲能力，改良之一是在DMEM/F12（1：1）中加入15 mM HEPES缓冲液。
6、McCo y’s 5AMcCoy’s 5A Medium 主要为肉瘤细胞的培养所设计，可支持多种（如骨髓、皮肤、肺和脾脏等）的原代移植物的生长，除适于一般的原代细胞培养外，主要用于作组织活检培养、一些淋巴细胞培养以及一些难培养细胞的生长支持。
细胞培养中常用到哪些培养基
细胞培养中常用到哪些培养基1、RPMI-1640 MediumRPMI-1640广泛应用于哺乳动物、特别造血细胞、正常或恶性增生的白细胞，杂交瘤细胞的培育，是目前应用非常广泛的培育基。
主要用于悬浮细胞培育。
其它像K-562、HL-60、Jurkat、Daudi、IM-9等成淋巴细胞、T细胞淋巴瘤细胞以及HCT-15上皮细胞等均可参考使用。
2、Minimum Essential Medium（MEM）也称低必需培育基，它仅含有12种必需氨基酸、谷氨酰胺和8种维生素。
成分简洁，可广泛适应各种已建成细胞系和不同地方的哺乳动物细胞类型的培育。
MEM-Alpha一般用于培育一些难培育细胞类型，而其它没有特别之处的细胞株则几乎均可采纳MEM来培育。
3、DMEM-高糖（标准型）是一种应用非常广泛的培育基，可用于很多哺乳动物细胞培育,更适合高密度悬浮细胞培育。
适用于附着性较差，但又不盼望它脱离原来生长点的克隆培育，也可用于杂交瘤中骨髓瘤细胞和DNA转染的转化细胞的培育。
4、DMEM-低糖（标准型）是一种应用非常广泛的培育基，可用于很多哺乳动物细胞培育。
低糖适于依靠性贴壁细胞培育，特殊适用于生长速度快、附着性较差的肿瘤细胞培育。
5、DMEM/F12DMEM/F12培育基适于克隆密度的培育。
F12培育基成分简单，含有多种微量元素，和DMEM以1：1结合，称为DMEM/F12培育基（DME/F12medium），作为开发无血清配方的基础，以利用F12含有较丰富的成分和DMEM含有较高浓度的养分成分为优点。
该培育基适用于血清含量较低条件下哺乳动物细胞培育。
为了增加该培育基的缓冲力量，改良之一是在DMEM/F12（1：1）中加入15mMHEPES缓冲液。
6、McCoy’sMcCoy’s Medium 主要为肉瘤细胞的培育所设计，可支持多种（如骨髓、皮肤、肺和脾脏等）的原代移植物的生长，除适于一般的原代细胞培育外，主要用于作组织活检培育、一些淋巴细胞培育以及一些难培育细胞的生长支持。
各种培养基的配方
各种培养基的配方培养基是科学研究中用于培养和繁殖细胞、组织和微生物的基础性工具。
不同类型的细胞和微生物需要不同的培养基来提供适宜的环境和营养物质。
下面将介绍几种常用的培养基的配方。
1. LB培养基（Luria-Bertani培养基）：成分：-蛋白胨：10g-酵母提取物：5g-NaCl：10g-纯水：1L2.硫酸亚铁葡萄糖培养基：成分：-硫酸亚铁：0.2g-葡萄糖：1g-磷酸二氢钠：0.5g-硫酸镁：0.1g-硫酸铵：0.5g-氯化钠：5g-纯水：1L3.TSB培养基（液体肉汤培养基）：成分：-蛋白胨：17g-酵母提取物：3g-NaCl：5g-纯水：1L4.TSB培养基（固体肉汤培养基）：成分：-蛋白胨：30g-酵母提取物：5g-NaCl：5g-琼脂：15g-纯水：1L5.M9盐基培养基：成分：-Na2HPO4：6g-KH2PO4：3g-NaCl：0.5g-NH4Cl：1g-MgSO4：0.1g-纯水：1L6.YPD培养基（酵母精蛋白培养基）：成分：-蛋白胨：10g-酵母提取物：20g-葡萄糖：20g-纯水：1L7. DMEM培养基（Dulbecco's修改Eagle's培养基）：成分：-高糖DMEM：950mL-胎牛血清：50mL- L-谷氨酰胺：2 mmol/L-纯水：1L8.RPMI-1640培养基：成分：-RPMI-1640培养基：950mL-胎牛血清：50mL- L-谷氨酰胺：2 mmol/L-纯水：1L9.MRS培养基（乳酸杆菌选择性培养基）：成分：-蛋白胨：10g-肉汤：10g-葡萄糖：20g-红茶提取物：1g-醋酸钠：5g-硫酸锌：0.5g-纯水：1L10.TSA培养基（肉汤琼脂培养基）：成分：-肉汤：30g-琼脂：15g-纯水：1L这些是常用的一些培养基的配方，不同细胞和微生物所需的培养基配方可能会有所不同。
在实验室中，根据研究的需要，可以根据具体要求对培养基进行调整和改良。
细胞培养常用培养基讲解学习
细胞培养常用培养基细胞培养常用培养基高博，苏州大学医学部药学院药理学系1、R PMI-1640 MediumRPMI-1640广泛应用于哺乳动物、特殊造血细胞、正常或恶性增生的白细胞，杂交瘤细胞的培养，是目前应用十分广泛的培养基。
主要用于悬浮细胞培养。
其它像K-562、HL-60、Jurkat、Daudi、IM-9等成淋巴细胞、T细胞淋巴瘤细胞以及HCT-15上皮细胞等均可参考使用。
2、M inimum Essential Medium （MEM）也称最低必需培养基，它仅含有12种必需氨基酸、谷氨酰胺和8种维生素。
成分简单，可广泛适应各种已建成细胞系和不同地方的哺乳动物细胞类型的培养。
MEM-Alpha —般用于培养一些难培养细胞类型，而其它没有特殊之处的细胞株则几乎均可采用MEM来培养。
3、D MEM-高糖（标准型）是一种应用十分广泛的培养基，可用于许多哺乳动物细胞培养，更适合高密度悬浮细胞培养。
适用于附着性较差，但又不希望它脱离原来生长点的克隆培养，也可用于杂交瘤中骨髓瘤细胞和DNA转染的转化细胞的培养。
4、D MEM-低糖（标准型）是一种应用十分广泛的培养基，可用于许多哺乳动物细胞培养。
低糖适于依赖性贴壁细胞培养，特别适用于生长速度快、附着性较差的肿瘤细胞培养。
5、D MEM/F12DMEM/F12培养基适于克隆密度的培养。
F12培养基成分复杂，含有多种微量元素，和DMEM 以1：1结合，称为DMEM/F12培养基(DME/F12 medium)，作为开发无血清配方的基础，以利用F12含有较丰富的成分和DMEM含有较高浓度的营养成分为优点。
该培养基适用于血清含量较低条件下哺乳动物细胞培养。
为了增强该培养基的缓冲能力，改良之一是在DMEM/F12 (1：1)中加入15 mM HEPES缓冲液。
6、M cCoy s 5AMcCoy s 5A Medium主要为肉瘤细胞的培养所设计，可支持多种(如骨髓、皮肤、肺和脾脏等)的原代移植物的生长，除适于一般的原代细胞培养外，主要用于作组织活检培养、一些淋巴细胞培养以及一些难培养细胞的生长支持。
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细胞培养常用培养基
高博，苏州大学医学部药学院药理学系
1、RPMI-1640 Medium
RPMI-1640 广泛应用于哺乳动物、特殊造血细胞、正常或恶性增生的白细胞，杂交瘤细胞的培养，是目前应用十分广泛的培养基。
主要用于悬浮细胞培养。
其它像K-562 、HL-60 、Jurkat 、Daudi 、IM-9 等成淋巴细胞、T 细胞淋巴瘤细胞以及HCT-15 上皮细胞等均可参考使用。
2、Minimum Essential Medium （MEM ）
也称最低必需培养基，它仅含有12 种必需氨基酸、谷氨酰胺和8 种维生素。
成分简单，可广泛适应各种已建成细胞系和不同地方的哺乳动物细胞类型的培养。
MEM-Alpha 一般用于培养一些难培养细胞类型，而其它没有特殊之处的细胞株则几乎均可采用MEM 来培养。
3、DMEM- 高糖（标准型）
是一种应用十分广泛的培养基，可用于许多哺乳动物细胞培养,更适合高密度悬浮细胞培养。
适用于附着性较差，但又不希望它脱离原来生长点的克隆培养，也可用于杂交瘤中骨髓瘤细胞和DNA 转染的转化细胞的培养。
4、DMEM- 低糖（标准型）
是一种应用十分广泛的培养基，可用于许多哺乳动物细胞培养。
低糖适于依
赖性贴壁细胞培养，特别适用于生长速度快、附着性较差的肿瘤细胞培养。
5、DMEM/F12
DMEM/F12 培养基适于克隆密度的培养。
F12 培养基成分复杂，含有多种微量
元素，和DMEM 以 1 ：1 结合，称为DMEM/F12 培养基（DME/F12 medium ），作为开发无血清配方的基础，以利用F12 含有较丰富的成分和DMEM 含有较高浓度的营养成分为优点。
该培养基适用于血清含量较低条件下哺乳动物细胞培养。
为了增强该培养基的缓冲能力，改良之一是在DMEM/F12 （1：1）中加入
15 mM HEPES 缓冲液
6、McCoy ' s 5A
McCoy ' s 5A Medium 主要为肉瘤细胞的培养所设计，可支持多种（如骨髓、
皮肤、肺和脾脏等）的原代移植物的生长，除适于一般的原代细胞培养外，主要
用于作组织活检培养、一些淋巴细胞培养以及一些难培养细胞的生长支持。
例如Jensen 大鼠肉瘤成纤维细胞、人淋巴细胞、HT-29 、BHL-100 等上皮细胞。
7、Iscove ' s Modified Dulbecco Medium （IMDM）
Guilber 和Iscove 将Dulbecco ' Medium 改良为Iscove 'Mediums ，用于培养
红细胞和巨噬细胞前体。
此种培养液含有硒、额外的氨基酸和维生素、丙酮酸钠和HEPES 。
并用硝酸钾取代了硝酸铁。
IMDM 还能够促进小鼠 B 淋巴细胞，LPS 刺激的 B 细胞，骨髓造血细胞，T 细胞和淋巴瘤细胞的生长。
IMDM 为营养非常丰富的培养液，因此可以用于高密度细胞的快速增殖培养。
8、M-199 Medium
1950 年，Morgan 成功研制出具有确定化学成分的细胞培养液，即M-199 ，
主要用于鸡胚成纤维细胞培养。
此培养液必须辅以血清才能支持长期培养。
M-199 可用于培养多种种属来源的细胞，并能培养转染的细胞。
9、Leibovitz Medium （L-15 ）
L-15 培养液适用于快速增殖瘤细胞的培养，用于在CO2 缺乏的情况下培养
肿瘤细胞株。
此培养液采用磷酸盐缓冲体系，氨基酸组成进一步改良，并由半乳糖替代了葡萄糖。
10、Ham ' s F-10 培养基
适应小鼠细胞、人类二倍体的培养。
11、Ham ' s F-12 培养基
可以在加入很少血清的情况下应用，特别适合单细胞培养和克隆化培养，是无血清培养中常用的基础培养液。
12、William ' s Medium E 用于大鼠肝上皮细胞的长期细胞培养。
13、MCDB 131 培养液用于培养内皮细胞。
14、Opti-MEM I Reduced Serum Media 用于培养造血细胞。
15、植物血凝素（PHA ）增加细胞转化和DNA 合成。