利用DAISYII体外模拟培养法测定真消化率
体外模拟法测定婴儿奶粉中蛋白质的消化率
跖
与人 体 消化 吸 收养 分 间存 在 很 大差 异 ， 不 足 以 准 确 地
％ 驺 ∞
３ 结 果
３． １ 各 种 粉 中 蛋 白 质 的 含 量
反 映 出 蛋 白 的 实 际 营 养 价 值 。人 体 及 动 物 实 验 法 是 测
Ⅵｎ Ⅳ ｗ． ｃ ｈ ｉ ｎ ａ ｄ ａ ｉ ｒ ｙ． ｎｅ ｔ
中 国 乳 品 工 业
ｄ ａ／ ｒ ｙＩ ＮＤＵ Ｓ Ｔ Ｒ Ｙ
ｒ ｐ ｇ ｙ ＠ｃ ｈ ｉ ｎ ａ ｊ ｏ ｕ ｒ ｎ １ ａ ． ｎ ｅ ｔ ． ｃ ｎ
体 外模 拟法测 定婴儿奶粉 中蛋 白质 的消化率
任大毫 ， 郭钨 ， ■贵成
量 进 行 测 定 是 很 有 必 要 的 。本 文 选 用 体 外 模 拟 法 测 定
（ ２ ）体 外 模 拟 消 化
① 体外 胃 的消化 。配 置 １ ０ ０ ｍＬ 奶样 （ 含２ ｇ 蛋 白
质） ， 于３ ７℃ 水 浴 锅 中 预 热 １ ０ ｍｉ ｎ。 加入 浓度 为１ ｍｏ ｌ ／ Ｌ 的 ＨＣ１ 调ｐ Ｈ 值 至 ３， 加 入 ０ ． ０ ４ ｇ胃 蛋 白 酶 和 ０ ． ０ ６ ｇ 凝 乳
Ａｎａ ｌ ｙ ｔ ｉ ｃ ａ ｌ ｍ ｅ ｔ ｈｏｄ ｆ ｏ ｒ ｔ ｈｅ ｄｅ ｔ ｅ ｒ ｍｉ ｎａ ｔ ｉ ｏｎ ｏｆ ｉ ｎｆ ａ ｎｔ ｆ ｏ ｍ ｕ ｒ ｌ ａ ｐｒ ｏｔ ｅ ｉ ｎ ｄｉ ｇｅ ｓ ｔ ｉ ｂｉ ｌ ｉ ｔ ｙ
ｉ ｎ ｖ ｉ ｔ ｒ ｏ
大 的产业 嘲 。一 些 不 法 分 子 为 了 牟 取 暴 利 ， 用 不 易 消 化
体外评定饲料氨基酸消化率的研究进展
Ｒ ｅ ｅ ｃ ｏｇ ｅ ｓ ｏ ｎ－ ｔ ｏ ｅ ｌ ｓ ａｒ ｈ ｐｒ ｒ ｓ ｆ ｉ ・ ｒ ｖａ ｕａｔｏｎ ｇ ｓ ｉ ｌｔ ｅ ｄ－ ｒ ｄｅ ａ ｉ ｉ ｖｉ ｉ ｏｎ ｄｉ ｅ ｔｂｉｉｙ ｏｆ ｆ ｅ － ａ ｍ ｎｏ ａｃ ｄ ｇ
ＡＢＳ ＴＲＡＣＴ ：Ａｌ ｔ ｎ ｖ ｔ ｏ ｍ ｅ ｈ ｄ ｏ ｖ ｌ ａ ｉ ｇ ｄ ｇｅ ｔｂ ｌ ｙ ａ ｄ ａ ａ ｌ ｂ ｌｔ ｆ ｆ ｅ — ａ ｅ ｐ ｏ ｅｎ （ ｍ ｉ ｏ ａ ｉ ） ｌ ｈｅ ｉ — ｉｒ ｔ ｏ ｓ ｆ ｒ ｅ ａ ｕ ｔｎ ｉ ｓ ｉ ｉｉ ｎ ｖ ｉ ｉ ｙ ｏ ｅ ｄ ｇｒ ｄ ｒ ｔ ｉ ｍ ｍ ａ ｉｅ ｏ ｈ ｉｓ ｉ ｅ，ｔ ｅｎｅ ｓ ｎ ｖｔ ｏ ｔｃ ｏｏ ｉｓｗｅ ｅｄ ｓ ｒｂ ｄ ｂ ｉｆｙ，ｎ ｍ ｅｙ ｓａ ｌ ｉｅ ｔｖ ｒ ｕ ｒｚ ｄ ｆｒｔ ｅｆｒ ｔｔｍ ｈ ｗｅ ｔｉ — ｉｒ ｅ ｈｎ ｌｇ ｅ ｒ ｅ ｃ ｉ ｅ ｒｅｌ ａ ｌ ｔ ｂ ｅｄｇ ｓｉｅ
摘 要 ： 对评 定饲 料 蛋 白质 （ 基 酸 ） 化 利 用率 的 各 种 体 外 方 法 进 行 归 纳 总 结 ， 次 时稳 定 消 化 酶 体 系 、 学 成 氨 消 首 化 分 估 测 法 、 物 模 型评 定 法 、 联 免 疫 法 、 算 机 消化 道 模 拟 法等 最 新 的 体 外技 术 进 行 了 简要 的 概 括 ， 出 了各 种 动 酶 计 指 体 外技 术 的适 用性 、 点 以及 研 究进 展 与 未 来 的 发 展 趋 势 ， 指 出 目前 研 究 领 域 存 在 的 误 区 ， 期 能 为今 后 的 研 缺 并 以
究 工作 提 供 帮助 。 关 键 词 ： 料 氨 基 酸 ； 外 评 定 ； 化 率 ； 究 进 展 饲 体 消 研 中 图 分 类 号 ：８ ６ ３ Ｓ １． ２ 文献标识码 ： Ａ 文 章 编 号 ：０ ３ ６ ０ （ ０ ０ ０ — ０ ５ — ０ １０ — ２ ２ ２ １ ） ７ ０ ３ ４
消化实验方法总结
《豆粕粉碎粒度与蛋白质体外消化率的关系研究》采用胃蛋白酶-胰酶两步法，通过体外模拟鸡体消化道内环境来比较不同粉碎力度豆粕的蛋白消化率，从而确定适合肉仔鸡生长的较适宜豆粕粉碎力度。
白消化率，从而确定适合肉仔鸡生长的较适宜豆粕粉碎力度。
平均粒径采用GB 6971-86 方法，体外试验采用Boisen 和Fernandez 等体外模拟消化方法。
等体外模拟消化方法。
胃蛋白酶最适浓度的选择1g 豆皮→豆皮→100ml 100ml 三角瓶三角瓶+25ml +25ml 磷酸缓冲液（磷酸缓冲液（pH=6.0 0.01M pH=6.0 0.01M ）+10ml 盐酸（盐酸（0.2M 0.2M 0.2M）→温和搅拌）→温和搅拌+1ml(15mg/ml,30mg/ml,45mg/ml,60mg/ml,75mg/ml,90mg/ml)的新鲜胃蛋白酶溶液（由0.01M HCl 配制）配制），pH=2.0 +0.5ml 抑菌剂（青霉素抑菌剂（青霉素++链霉素）→链霉素）→393939℃恒温水浴中震荡℃恒温水浴中震荡6h,6h,消消化后化后+20%+20%+20%黄基水杨酸黄基水杨酸5ml 5ml→室温静置→室温静置30min 30min→抽滤→干燥后残渣凯式定氮法测蛋白质含量→→抽滤→干燥后残渣凯式定氮法测蛋白质含量→计算蛋白质和干物质消化率。
确定最适胃蛋白酶浓度为75mg/ml.胰酶最适浓度选择在最适（75mg/m ）胃蛋白酶液消化后的产物中加入10ml 磷酸缓冲液（0.2M pH=6.8）+5mlNaoH(0.6M)+1ml(70mg/ml,90mg/ml,110mg/ml,130mg/ml,150mg/ml)的胰酶溶液（由磷酸二氢钾缓冲液配制）pH=6.8→3939℃恒温水浴中震荡℃恒温水浴中震荡18h 18h→消化后→消化后→消化后+20%+20%+20%磺基水杨酸磺基水杨酸5ml 5ml→室温→室温静置30min 30min→抽滤，干燥后残渣按照凯式定氮法测其蛋白质含量，计算粗蛋白和干物质消化→抽滤，干燥后残渣按照凯式定氮法测其蛋白质含量，计算粗蛋白和干物质消化率，确定最适胰酶浓度为110mg/ml 110mg/ml。
过瘤胃体外模型的测定方法
过瘤胃体外模型的测定方法一、体外-人工模拟消化液法1，人工唾液配方(MeDougall，1948)-用来模拟动物口腔，测定过瘤胃前的释放率注：MgSO4（MgC12）准确称取一定质量1.0g(精确至0.0001g)样品放入250ml碘量瓶内，每个样做三个重复，加入200ml 人工唾液，溶于少量蒸馏水中定容至1000ml)，盖紧胶塞，在39℃的恒温水浴锅内分别消化0、6和12小时(消化过程中每隔1小时振动1次)，测定溶液中产品的含量，从而求得过瘤胃产品的释放率。
（先将除CaCl2以外的物质充分溶解，再将CaCl2溶解后倒入前者溶液中。
使用前向其中通入二氧化碳，使其pH在8.2左右。
并在39℃的水中温浴30分钟。
）➢McDougall E I. Studies on ruminant saliva, 1. The composition and output of sheep’s saliva.Bilchemical Journal, 1948, 43: 99- 109.2，人工模拟瘤胃液、真胃和十二指肠消化液准确称取一定质量(精确至0.0001g)过瘤胃产品，放入50mL具塞试管底部，加入20mL人工模拟消化液(pH为6.6、5.4和2.4的缓冲溶液，分别模拟动物瘤胃、真胃和十二指肠消化道近端的消化液)，盖紧试管塞，在39℃的恒温水浴摇床内消化0、12、24、48小时，取出后冲洗、过滤，滤液定容，测定滤液中产品的含量。
计算公式:产品瘤胃释放率(W1)=A2/A l x 100%式中:A l-产品中有效成分的含量；A2-产品在pH 6.6缓冲溶液滤液中有效成分的含量。
产品小肠释放率(W2)=A3/A1 x 100%式中:A3-产品在pH 2.4缓冲溶液滤液中有效成分的含量。
产品有效释放率（%）=(l-W1) x W2x100%。
➢Papas A M,Sniffen C J,Muscato T V. Effectiveness of rumen protected methionine for delivering methionine postruminally in dairy cows [J]. J Dairy Sci, 1984a, 67: 545~552.附：人工肠液的制备磷酸氢二钾胰蛋白酶胰脂肪酶胰淀粉酶氢氧化钠6.8g 0.25g 9.375g 83.3mg 调pH注：先将磷酸氢二钾加500ml水溶解，加入胰蛋白酶、胰脂肪酶和胰淀粉酶等，再定容至1000ml，用0.1M氢氧化钠调至适宜pH（6.0-8.0）；二、体外-瘤胃液培养法1，瘤胃液的采集晨饲（6：00）后2小时，由瘤胃内采集足量瘤胃液灌入经预热达到39℃并通有CO2的保温瓶中灌满后，立即盖严瓶口迅速返回实验室，经4层纱布过滤后，持续充入CO2气体5分钟。
利用DAISYII体外模拟培养法测定真消化率
利用DAISY II 体外模拟培养法测定真消化率A. 试剂a) 缓冲溶液A：g/LKH2PO4 10.0MgSO4•7H2O 0.5NaCl 0.5CaCl2•2H2O 0.1尿素(试剂级) 0.5b) 缓冲溶液B：g/LNa2CO3 15.0Na2S•9H2O 1.0c) 瘤胃液接种物。
d) 30 g/L十二烷基硫酸钠（中性洗涤剂）溶液。
称取18.61 g乙二胺四乙酸二钠(Na2EDTA,化学纯)和6.81g四硼酸钠(Na2B4O7·10H2O)同放入1 000 mL烧杯中,加少量水加热溶解后,再加入30 g十二烷基硫酸钠和10 mL乙二醇乙醚。
称取4.65 g无水磷酸氢二钠，置于另一烧杯中， 加少量水，微微加热溶解后倾于第一个烧杯中，稀释至1 000 mL。
此溶液pＨ在6.9~7.0左右（一般不需调整）。
(c) 无水亚硫酸钠（Na2SO3）。
(d) 丙酮：无色，并且蒸发后无残渣。
B.设备a) DAISYII 体外模拟培养箱b) 过滤装置- ANKOM F57滤袋c) 封口机d) 量筒– 1 L & 500 mLe) 热水瓶–2个f) 过滤用奶酪布g) ANKOM 220 纤维素分析仪C. 步骤a) 滤袋和样品准备1)将F57 滤袋在丙酮中浸泡3-5 min，然后放在通风橱中自然干燥。
用丙酮浸泡的目的是除掉表面剂，否则会影响微生物消化。
对每个F57 滤袋称重，记录质量(m1)。
将天平归零，并向滤袋中直接称取0.25 g 样品 (m)注：进行48 h消化研究时，样品量也可以为0.5 g。
然而，最近研究表明样品量为0.25 g 时测定结果更准确。
2) 将每个滤袋封口，并防入Daisy II体外模拟培养箱消化罐中(每个罐中最多可以放25 样品)。
样品应平衡分布在消化罐分隔的两边。
同时至少包括一个空白滤袋，用于确定测定结果校正因子(C1)。
b) 混合缓冲溶液准备(每个消化罐)1) 将缓冲溶液A和B进行预热(39°C)。
体外模拟胃肠消化法在食物消化行为中的研究进展
100 I FOOD INDUSTRYI 理论THEORY体外模拟胃肠消化法在食物消化行为中的研究进展文 那吉 杨婷 赵檑昆明医科大学海源学院2. 体外模拟胃肠系统在食物消化行为中的研究进展2.1 单相静态胃肠模拟系统单相静态胃肠模拟系统（ssGS ）指的是对人类胃肠道环境的生理条件进行模拟，与此同时，将食物置于人工模拟的胃肠环境中，进而对食物在胃肠消化系统中的消化行为进行模拟研究的模拟体系。
一般情况下，通过加入含胃蛋白酶和胰蛋白酶并调节pH 值等操作来模拟人工胃肠消化液，在此基础上，建立一个模拟的胃肠道生理条件，进而对胃肠环境中的食物消化活动进行模拟。
KAFAOGLU B 等人利用单相静态模拟系统研究了坚果和种子中多种金属元素的生物利用度，发现经过胃肠环境进行模拟消化后，其中的金属微量元素更容易被吸收。
陈梦霏等人探究了模拟胃肠消化对蛹虫草蛋白质理化性质及抗氧化活性的影响，采用 SDS-PAGE 和酸水解法分析模拟胃肠消化前后蛋白质分子量分布及氨基酸的组成。
结果发现，经模拟胃肠消化后蛋白质分子量的主要分布范围发生了变化。
陆俊等人通过体外模拟胃肠消化法考察黑米、黑苦荞、黑麦等6种黑色食品在胃、肠道消化过程中抗氧化成分及其活性变化规律。
结果发现，通过模拟胃消化2h 后，黑小米和黑豆中多酚和黄酮释放增长比例分别增长28%和41%，进一步通过模拟肠消化2h 后，黑麦和黑绿豆中多酚和黄酮释放增长比例分别增长113%和52%。
引言食物进入人体经咀嚼后，会在胃部中停留约8min-3h ，之后才会被运输到小肠或十二指肠，其在胃、肠道的消化情况受pH 值、消化酶、无机盐等多种生理因素的影响。
BOUAYED J 等人发现胃消化作用能对植物中的多酚和黄酮等抗氧化活性成分的释放和吸收产生较大影响。
不可否认的是，直接使用人体进行消化实验所得数据更为精确，但由于在研究人体胃肠功能过程中存在一定的伦理性问题，研究结果还可能存在个体差异, 故难以在实验过程中得到普及。
两级离体消化率法测定的原理与主要步骤
两级离体消化率法测定的原理与主要步骤1. 了解两级离体消化率法说到两级离体消化率法，首先得问一句：你知道我们吃的东西是怎么消化的吗？别急，今天咱们就来聊聊这个“消化之旅”。
简单来说，这个方法是用来评估食物在肚子里能被分解成多少营养成分的。
就像是把美味的饭菜送到一个“测试舱”，看它能不能被“消化系统”友好地处理掉。
1.1 原理揭秘这方法的原理其实很简单，基本上就是模仿我们身体里的消化过程。
你想想，咱们吃的东西在肚子里经历了多少“折腾”：先是咀嚼，再是胃酸的“洗礼”，最后肠道里的细菌和酶来帮忙。
两级离体消化率法就是把这些步骤简化到实验室里，让食物在“模拟”的环境中接受测试。
1.2 重要性那么，这个法子到底有什么用呢？说白了，研究人员可以通过这种方法来了解不同食物的营养价值和消化能力。
比如，有些食物虽然看起来很健康，但经过测试后发现其实消化率不高，最后营养吸收的效果可能就大打折扣了。
就像是你买了个苹果，结果咬了一口发现里面全是坏的，真是让人心塞。
2. 主要步骤说到操作流程，那就得细细说道了。
要进行这个测试，步骤虽然多，但不难，跟做一道简单的家常菜差不多。
2.1 准备样品首先，你得准备好样品。
这就像备菜一样，选择你要测试的食物，可能是米饭、面条，甚至是蔬菜。
然后，把这些食物切成小块，越小越好，便于后面的处理。
对了，这里可别马虎，卫生问题可是第一位的！2.2 体外消化过程接下来就是正式的“消化”过程了。
首先把样品放进一个特制的容器，添加一定比例的消化酶和胃液，模拟咱们的胃。
这一步得讲究，温度、时间都要控制得当。
你可以想象一下，就像你把一锅水放在火上，等它煮沸。
然后，经过一段时间的“炖煮”，样品就会被分解得七七八八。
2.3 收集数据最后一步就是收集数据了。
通过过滤、离心等方式，把消化后的样品和未消化的部分分开。
然后，分析这些样品，看看有多少营养成分被释放出来，消化率到底是多少。
简而言之，就是看看你的食物在“胃里”表现得如何。
过瘤胃体外模型的测定方法
过瘤胃体外模型的测定方法一、体外-人工模拟消化液法1，人工唾液配方(MeDougall，1948)-用来模拟动物口腔，测定过瘤胃前的释放率注：MgSO4（MgC12）准确称取一定质量1.0g(精确至0.0001g)样品放入250ml碘量瓶内，每个样做三个重复，加入200ml 人工唾液，溶于少量蒸馏水中定容至1000ml)，盖紧胶塞，在39℃的恒温水浴锅内分别消化0、6和12小时(消化过程中每隔1小时振动1次)，测定溶液中产品的含量，从而求得过瘤胃产品的释放率。
（先将除CaCl2以外的物质充分溶解，再将CaCl2溶解后倒入前者溶液中。
使用前向其中通入二氧化碳，使其pH在8.2左右。
并在39℃的水中温浴30分钟。
）➢McDougall E I. Studies on ruminant saliva, 1. The composition and output of sheep’s saliva.Bilchemical Journal, 1948, 43: 99- 109.2，人工模拟瘤胃液、真胃和十二指肠消化液准确称取一定质量(精确至0.0001g)过瘤胃产品，放入50mL具塞试管底部，加入20mL人工模拟消化液(pH为6.6、5.4和2.4的缓冲溶液，分别模拟动物瘤胃、真胃和十二指肠消化道近端的消化液)，盖紧试管塞，在39℃的恒温水浴摇床内消化0、12、24、48小时，取出后冲洗、过滤，滤液定容，测定滤液中产品的含量。
计算公式:产品瘤胃释放率(W1)=A2/A l x 100%式中:A l-产品中有效成分的含量；A2-产品在pH 6.6缓冲溶液滤液中有效成分的含量。
产品小肠释放率(W2)=A3/A1 x 100%式中:A3-产品在pH 2.4缓冲溶液滤液中有效成分的含量。
产品有效释放率（%）=(l-W1) x W2x100%。
➢Papas A M,Sniffen C J,Muscato T V. Effectiveness of rumen protected methionine for delivering methionine postruminally in dairy cows [J]. J Dairy Sci, 1984a, 67: 545~552.附：人工肠液的制备磷酸氢二钾胰蛋白酶胰脂肪酶胰淀粉酶氢氧化钠6.8g 0.25g 9.375g 83.3mg 调pH注：先将磷酸氢二钾加500ml水溶解，加入胰蛋白酶、胰脂肪酶和胰淀粉酶等，再定容至1000ml，用0.1M氢氧化钠调至适宜pH（6.0-8.0）；二、体外-瘤胃液培养法1，瘤胃液的采集晨饲（6：00）后2小时，由瘤胃内采集足量瘤胃液灌入经预热达到39℃并通有CO2的保温瓶中灌满后，立即盖严瓶口迅速返回实验室，经4层纱布过滤后，持续充入CO2气体5分钟。
一种三步体外技术测定养分小肠消化率的方法[发明专利]
![一种三步体外技术测定养分小肠消化率的方法[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/6c2365c5e2bd960591c677b2.png)
专利名称：一种三步体外技术测定养分小肠消化率的方法专利类型：发明专利
发明人：徐明,高明
申请号：CN201410016733.4
申请日：20140115
公开号：CN103760305A
公开日：
20140430
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明提出一种三步体外技术测定养分小肠消化率的方法，包括，瘤胃培养，酸处理，胰液培养三个步骤，本发明三步体外法技术中改变现有技术利用胰酶进行饲料处理的方法，直接使用胰液进行处理，除了能用来消化降解饲料样本中的瘤胃非降解饲料蛋白(RUP)外，本发明所采用的胰液法还为反刍动物小肠淀粉消化率、脂肪消化率的评价提供了一个很好的途径。
通过一次三步体外法就可以模拟出反刍动物对饲料中蛋白质、淀粉、脂肪的消化情况，测出蛋白质、淀粉、脂肪小肠消化率三个重要指标。
操作简单，易于实现且节约成本。
申请人：徐明
地址：010018 内蒙古自治区呼和浩特市赛罕区鄂尔多斯大街兴农小区考核办楼2单元501
国籍：CN
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验证体外消化的方法与评价_概述及解释说明
验证体外消化的方法与评价概述及解释说明1. 引言1.1 概述本文旨在探讨体外消化的方法与评价，针对这一主题进行综述和解释。
随着生物科技的发展，体外消化作为一种重要的研究手段被广泛应用于生命科学领域，尤其在食品营养学和消化疾病研究中具有重要意义。
1.2 文章结构本文将按以下顺序组织：首先介绍整篇文章的大纲结构，并详述各个部分的内容安排。
然后进入正文部分，逐步展开对方法与评价的概述、验证重要性的解释以及最后得出的结论。
1.3 目的本文旨在向读者介绍体外消化方法与评价方面的知识，并深入探讨其在实验设计和结果可信度方面的重要性。
通过详细描述相关概念、技术和原理，希望能够给读者提供一个全面而清晰的认识，从而增强他们对于该领域的理解和应用能力。
以上是文章“1. 引言”部分所包含内容，请您根据需要进一步完善和调整。
2. 正文体外消化是一种常见的实验方法，用于模拟人体内消化过程，以便研究食物的消化和吸收情况。
该方法广泛应用于食品科学、药物开发和营养学等领域中。
在体外消化实验中，通常需要模拟口腔、胃和小肠三个部位的消化过程。
首先是口腔阶段，通过加入唾液来模拟咀嚼和混合食物的过程；接着是胃阶段，将酸性胃液加入样品中，模拟胃酸对食物的分解作用；最后是小肠阶段，添加碱性液体以调节pH值，并加入胰液来模拟小肠酶对食物的进一步分解。
对于每个阶段的体外消化实验，需要合理选择试剂配比和温度条件，并进行适当的时间控制。
为了评估消化效果，可以测量营养物质（如蛋白质、脂肪等）的降解率或者采用特定指标（如酶活性）来评估关键成分的变化。
此外，在进行实验前还需考虑是否需要添加辅酶、金属离子或其他辅助物质以提高消化效果。
同时，需要注意防止可能的实验干扰因素，如光照、氧化等。
体外消化实验的结果可用于研究食物的生物利用率、营养价值和口感特性。
通过模拟人体内消化过程，我们可以了解不同食物在机体中的代谢情况，并为开发更好的食品添加剂、制药工艺和营养配方提供参考依据。
动物蛋白质的胃蛋白酶消化率(体外消化)
四、计算
甲基红—乙醇指示剂（2g/L）
次甲基蓝指示剂（1g/L）
临时将上述两种指示液等量混合为混合指示剂。
三、仪器：
半微量定氮器
微量滴定管：最小分度0.01ml
四、分析步骤：
试样处理：将试样除去脂肪、骨及腱后，绞碎搅匀，称取约10.0g，置于锥形瓶中，加100ml水，不时振摇，浸渍30min后过滤,滤液帜置冰箱备用。
2、分析：
合格的鱼粉，其粗蛋白质的胃蛋白酶消化率应不小于85%；羽毛粉应在75%以上。
植物油脂检验不皂化物测定法GB5535-85
本标准适用于商品植物油不皂化物的测定。
油脂中不皂化物即油脂皂化时，与碱不起作用的，不溶于水的物质，包括留醇，脂溶性维生素的色素等。
一、仪器和用具：
锥形瓶：250ml
冷凝管
蒸馏滴定：将盛有10ml吸收液及5滴~6滴混合指示液的锥形瓶置于冷凝管的下端，并使其下端插入吸收液的液面下，准确吸取5.0ml上述试样滤液于蒸馏器反应室内，加5ml氧化镁混悬液(10g/L)，迅速盖塞，并加水以防漏气，通入蒸汽，进行蒸馏，蒸馏5min即停止，吸收液用盐酸标准滴定溶液（0.010mol/L）或硫酸标准滴定溶液滴定，终点至蓝紫色。同时做试剂空白试验。
附：0.02mol/L硫代硫酸钠标准溶液的标定
1、标定：
精确称取0.15g于120℃烘3小时至恒重的基准重铬酸钾，置于碘量瓶中，溶于25ml水，加2g碘化钾及20ml硫酸溶液（20%），摇匀，于暗处放置10min。加150m水，用配制好的硫代硫酸钠溶液滴定。近终点时加3ml淀粉指示液(5g/L)，继续滴定至溶液由蓝色变为亮绿色。同时作空白试验。
模拟肠道消化实验报告
一、实验目的为了探究食物在人体肠道中的消化过程，本实验采用模拟肠道消化方法，对某种食物进行体外消化实验，观察食物在模拟肠道环境中的消化情况，并分析消化产物。
二、实验材料1. 实验试剂：模拟消化液、酶制剂、pH缓冲液、指示剂等；2. 实验器材：离心机、恒温箱、分光光度计、消化装置、烧杯、试管等；3. 实验样品：某种食物（如面粉、米饭等）。
三、实验方法1. 模拟消化液的制备：根据模拟肠道消化液成分，配制pH值为6.8的缓冲液，加入适量的消化酶，使酶浓度与人体肠道消化酶浓度相当。
2. 样品处理：将实验样品粉碎，过筛，称取适量样品置于烧杯中，加入适量的模拟消化液，搅拌均匀。
3. 模拟消化过程：将烧杯置于恒温箱中，模拟人体肠道温度（37℃），消化时间为2小时。
4. 消化产物检测：消化结束后，将消化液离心，取上清液进行以下检测：（1）蛋白质含量测定：采用双缩脲法检测消化液中的蛋白质含量；（2）淀粉含量测定：采用碘液法检测消化液中的淀粉含量；（3）脂肪含量测定：采用索氏抽提法检测消化液中的脂肪含量；（4）氨基酸含量测定：采用高效液相色谱法检测消化液中的氨基酸含量。
5. 数据分析：将实验数据与对照样品进行对比分析，评估实验样品在模拟肠道环境中的消化情况。
四、实验结果1. 蛋白质含量：实验样品在模拟肠道环境中的蛋白质含量较对照样品降低，说明蛋白质在模拟消化过程中得到了部分分解。
2. 淀粉含量：实验样品在模拟肠道环境中的淀粉含量较对照样品降低，说明淀粉在模拟消化过程中得到了部分分解。
3. 脂肪含量：实验样品在模拟肠道环境中的脂肪含量较对照样品降低，说明脂肪在模拟消化过程中得到了部分分解。
4. 氨基酸含量：实验样品在模拟肠道环境中的氨基酸含量较对照样品增加，说明蛋白质在模拟消化过程中被分解为氨基酸。
五、实验结论本实验采用模拟肠道消化方法，对某种食物进行了体外消化实验，结果表明：1. 实验样品在模拟肠道环境中的蛋白质、淀粉和脂肪含量均有所降低，说明这些营养成分在模拟消化过程中得到了部分分解；2. 实验样品在模拟肠道环境中的氨基酸含量增加，说明蛋白质在模拟消化过程中被分解为氨基酸。
动物消化率测定资料
内容
一.消化实验概述
二.体内消化实验
三.体外消化实验
四.指标测定方法
2021/7/6
消化率测定
2
一.消化实验概念、目的
1.概念： 以测定动物对饲料养分的消化能力或饲料养分的可消化性为目的的试验。
2.目的： 准确地量化饲料中各种养分被动物消化利用的程度，也是评定饲料营养价
值的重要方法。 3.种类（见图1）
4
二、体内消化实验
(1)全收粪法 1）优点：试验操作方便、测定较准确； 2）缺点：
排泄物污染严重（易被饲料、毛、皮屑、尿污染） 采食量、排泄量难以准确记录 粪便需要及时保存和处理 工作量大
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消化率测定
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二、体内消化实验
3）全收粪法消化率计算公式
（食入养分 - 粪中养分）
表观消化率 =
种类见图1消化率测定2017610消化实验体内invivo消化实验vitro消化实验尼龙袋法nylonbagstechnique指示剂法消化道消化液人工消化液回肠末端收粪回肠指示剂内源指示剂外源指示剂消化实验方法剖析肛门收粪消化率测定20176101优点
消化率的测定
—干物质、能量、蛋白、钙、磷
制作人：XXX
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消化率测定
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二、体内消化实验
2）桥式瘘管 优点：其对荷术动物生理影响小， 手术成功率高；测量结果优于T型 瘘管。 缺点：人工手术复杂，饲养管理繁 重。
图2、桥型瘘管示意图
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消化率测定
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二、体内消化实验
3）回-直肠吻合术 优点：收粪简便，而且可收集全部粪样； 缺点：手术复杂、成功率低和护理相对麻烦。
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_菊苣体外干物质消化率近红外分析模型的建立
法，酶溶液选择与 配 制 参 照 ＪＬ Ｄｅ Ｂｏｅｖｅｒ［６］的 方 法，即 采 用 ０．２％的胃蛋白酶（Ｓｉｇｍａ，１∶１００ ００）溶 液 和 １０ｇ·Ｌ－１的 纤 维素酶（Ｏｎｏｚｕｋａ Ｒ－１０）溶 液，消 化 设 备 为 ＡＮＫＯＭ ＤａｉｓｙⅡ 型体外模拟培养箱，滤袋结构为２５μｍ 孔 隙 三 维 结 构，每 袋 采样量０．２５～１０ｇ，测 定 范 围 ０％ ～１００％，控 温 范 围 为 （４５ ±０．１）℃，结果标准 差 ≤０．１％，重 复 性 精 度 ≤０．２％。消 化 步骤按 ＡＮＫＯＭ ＤａｉｓｙⅡ 型 体 外 模 拟 培 养 法，称 取 一 定 量 的 样品装 入 Ｆ５７ 滤 袋 中，封 口，放 入 消 化 罐 中 恒 温 ４０ ℃ 各 消 化２４ｈ。每份样品平行测定三 次 取 均 值，结 果 以 干 物 质 （％） 表示。 １．４ 建立 ＮＩＲＳ定量分析模型
Ｔａｂｌｅ ２ Ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ｆｏｒ ｅｓｔａｂｌｉｓｈｉｎｇ ＮＩＲＳ ｍｏｄｅｌｓ ａｎｄ ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ｔｈｅ ｅｉｇｈｔ ｃａｌｉｂｒａｔｉｏｎｓ ｆｏｒ ＩＶＤＭＤ
编号 １ ２ ３ ４ ５ ６ ７ ８
光谱预处理 ｄｂ１ ｄｓ２
ｎｃｌ＋ｄｂ１ ｄｓ２
ｄｇ１＋ｎｌｅ ｍｆ＋ｄｂ１＋ｎｌｅ
２ 结 果 与 讨 论
２．１ ＩＶＤＭＤ 测定结果 样品ＩＶＤＭＤ 测定结果如表 １ 所 示，校 正 集 和 验 证 集 的
最小值、最大值、平均值和标准差都比较接 近，样 品 间ＩＶＤ－ ＭＤ 变幅很大，基 本 上 可 以 覆 盖 当 前 品 种 可 能 出 现 的 ＩＶＤ－ ＭＤ 变化范围，样品具有较强的代表性，可以很好地用于建
n07第七章 消化率的测定
饲料指示剂添加量:3%
粪中CF含量: 40%
粪中指示剂含量:6%
CF消化率= 100 － 3 × 40 ×100 6 40 = 50
消化能值的计算
直接测定
根据消化试验结果和结合能值测定进行 DE = （GE - FE）/采食量（kg） 例如
体重50Kg的猪，每日食入日粮2Kg，含总能33.47MJ，每日排粪中的总能为 8.34MJ，计算其采食饲料的的消化能。 饲料消化能 = （33.47-8.34）/2 =12.57（MJ/Kg）
第二组
基础日粮 + 被测饲料
试验期
基础日粮
消化率的计算
D(％) ＝ (B-A) X100 ＋ A F
式中：D为被测饲料养分消化率 A为基础饲粮养分消化率 B为混合饲粮养分消化率
F为被测饲料养分占混合饲粮该养分的比例。
假定
基础饲粮养分消化率不变 养分间无互作效应
四、消化试验的基本步骤与要求
1、动物选择 2、日粮配制 3、试验步骤 4、食糜的收集和处理
全收粪法养分消化率计算
例 1：测定仔猪饲粮CP消化率
日采食量：1000g， 饲粮CP含量：16% 日排粪量：250g， 粪中CP含量：12% CP消化率=
( 1000×16%-250×12%）
（1000×16%）
×100
= 81.2%
指示剂法养分消化率计算
例 2: 某饲粮消化实验结果如下,计算CF消化率
消化率计算公式
（食入养分 - 粪中养分） X 100% 表观消化率= 食入养分 食糜养分组成
饲料中未消化的养分; 消化道分泌物; 消化道脱落细胞; 消化道微生物及其代谢产物。
回肠消化率研究方法
回肠消化率研究方法引言：回肠是消化系统中的重要部分，起着吸收和消化食物的作用。
了解回肠消化率对于研究食物消化过程和人体健康具有重要意义。
本文将介绍回肠消化率的研究方法。
一、动物实验研究方法1.1 动物模型选择在回肠消化率研究中，常使用小鼠、大鼠、豚鼠等动物作为实验模型。
选择适合的动物模型是保证研究结果准确性的基础。
1.2 实验前准备在进行实验之前，需要对实验动物进行适当的饲养和管理，确保实验动物的健康状况和饮食习惯，以减小实验误差。
1.3 实验操作实验操作包括给予实验动物特定食物或药物，并观察其在回肠中的消化过程。
可以通过活体解剖、组织切片、染色等方法来观察和分析回肠消化率。
1.4 数据分析通过对实验结果的定量分析和统计处理，可以得出回肠消化率的相关数据和结论。
常用的数据分析方法包括t检验、方差分析等。
二、体外研究方法2.1 制备回肠组织样本通过解剖实验动物，取得回肠组织样本，并进行适当的处理和保存，以保证实验的准确性和可靠性。
2.2 体外模拟消化利用体外模拟消化装置，模拟人体消化道中的酸碱环境和酶的作用，将待研究的食物样品与模拟消化液混合，进行一定时间的消化反应。
2.3 消化产物分析通过对消化反应产物的分析，包括pH值的测定、酶活性的检测等，可以获得回肠消化率的相关数据。
2.4 数据处理与分析通过对实验数据的处理和分析，可以得出回肠消化率的定量结果，并进行统计学分析，以验证实验结果的可靠性。
三、人体研究方法3.1 临床观察研究通过对一定数量的人群进行观察和调查，收集回肠消化率相关的信息，包括饮食习惯、消化道疾病等，从而了解回肠消化率的变化规律。
3.2 粪便分析通过对人体粪便样本的收集和分析，可以评估回肠消化率的高低。
常用的分析指标包括粪便中未消化食物残留的比例、粪便中特定酶活性的检测等。
3.3 呼气气体分析通过检测人体呼气气体中特定物质的含量，如氢气、二氧化碳等，可以间接评估回肠消化率的情况。
几种蛋白质原料体外消化率测定方法的比较
化的真实情况。 ｏｅ 和Ｅｇ （ ９） 蛋白 Ｂｉｎ ｇ ｍ １ ｓ ｕ １ 在胃 酶－ ９
胰蛋 白酶两步法 中利用标准过滤装置测得饲料蛋 白
质消化率与鼠和猪的真消化率十分接近， 他们认为这
种方法测得的蛋白质体外消化率经内源氮校正与回
用高， 而且对外界环境的要求较高， 季节、 温度、 光照
等都会影响消化率测定值。 体外消化法是利用精制的 消化酶或研究对象的消化道酶提取液在试管内进行
肠末端蛋白质表观消化率高度相关。 我国饲料原料品
种多， 营养成分含量差异大， 加工方式各异， 饲料原料
对不同鱼类的营养价值差异更大。 由于鱼类生活在水
的消化试验，其测定值可近似反映鱼对饲料的消化 率。此法能快速测定原料的相对利用率， 为营养师制
中， 测定鱼类饲料真消化率比 测定畜禽的更加困难。
所以寻找一种准确、 简便、 实用的消化率测定方法对 评价鱼类饲料的消化率有着十分重要的意义。 本试验
１ ． ３ 离体消化程 序 ．２ ２．
黄沦海等： 几种蛋白质原料体外消化率测定方法的比较
①胃蛋白酶处理
ａ 饲料样品２ 分别置于２０ ． 称取０ｇ ． ５ 份， ５ ｍ 带盖 ｌ 三角瓶中（ 每个样品测２ 个平行样） 。
ｂ 称取１７ 蛋白 准确到００ ） ．７ 胃 酶（ ． 准确 ７ｇ ．１ ， ０ｇ置
量一 消化后滤渣粗蛋白 含量） ／ 饲料样品 粗蛋白 含量
ｄ ． 将三角瓶置于（ １．℃台式恒温摇床中， ４ ０） ０ １ 以其 ２ 结 果 温度达到４℃时开始计时， ０ 震荡３， ｈ频率为８ 次／ｉ ０ ／ ｎ ２１ 饲料的粗蛋白含量 ｍ ， ．
《 门料工业）２０ 年第２ 直第 ２ 朋 －０５ ６ ０
ｊ柳 ． ９ １ ＞４率Ａ鲤方法韵毙钗 ｒＩＭＭ磺１０＊外Ｎｑ ｊＭｉｓ ４ ４ ０１ ＪＯｌ ， ｗＩ ｇ － Ｉｗ Ａｂ ＆ １ ｊ ，
体外消化模型的研究进展
体外消化模型的研究进展
陈责;贾慧
【期刊名称】《农产品加工》
【年(卷),期】2017(000)005
【摘要】体外消化模型是用于研究食物在消化过程中的结构变化、消化吸收率及成分释放的系统,现已被广泛应用于健康和营养方面的研究中。
其作为食品和药品分析中常用的工具,被用于分析食品及药品结构变化,以及生物利用度和消化率。
相比于体内消化试验,具有成本低、试验周期短、结果可重复性强等优点。
从模拟对象和发展历程等方面对已有的体外消化模型进行了归类和总结,分别介绍了静态模型、动态模型和细胞培养模型3类常用模型。
静态模型只能简单模拟消化过程,动态模型可以同时模拟胃肠道中化学作用和物理作用,另外细胞培养模型通常被制药工业用于评价潜在药物吸收机制的手段。
最后,结合微型化和程序自动化2个方面分析了体外消化模型的未来发展趋势。
【总页数】5页(P61-64)
【作者】陈责;贾慧
【作者单位】上海交通大学食品科学与工程系上海200240;上海交通大学食品科学与工程系上海200240
【正文语种】中文
【中图分类】R151
【相关文献】
1.脂质体在食品中的应用及体外消化研究进展 [J], 刘玮琳;魏富强;韩剑众
2.粪源菌在评定反刍动物粗饲料体外消化率上的研究进展 [J], 张吉鹍
3.体外消化模型的研究进展 [J], 陈责;贾慧
4.宏量营养素体外消化模型的研究进展 [J], 马田田;张一凡;任雪;冯欢欢;徐彩红
5.不同处理方式下蛋白质结构变化与体外消化性关系研究进展 [J], 郭蔚波;赵燕;徐明生;姚瑶;吴娜;杜华英;涂勇刚
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利用DAISY II 体外模拟培养法测定真消化率
A. 试剂
a) 缓冲溶液A：g/L
KH2PO4 10.0
MgSO4•7H2O 0.5
NaCl 0.5
CaCl2•2H2O 0.1
尿素(试剂级) 0.5
b) 缓冲溶液B：g/L
Na2CO3 15.0
Na2S•9H2O 1.0
c) 瘤胃液接种物。
d) 30 g/L十二烷基硫酸钠（中性洗涤剂）溶液。
称取18.61 g乙二胺四乙酸二钠(Na2EDTA,化学纯)和6.81g四硼酸钠(Na2B4O7·10H2O)同放入1 000 mL烧杯中,加少量水加热溶解后,再加入30 g十二烷基硫酸钠和10 mL乙二醇乙醚。
称取4.65 g无水磷酸氢二钠，置于另一烧杯中， 加少量水，微微加热溶解后倾于第一个烧杯中，稀释至1 000 mL。
此溶液pＨ在6.9~7.0左右（一般不需调整）。
(c) 无水亚硫酸钠（Na2SO3）。
(d) 丙酮：无色，并且蒸发后无残渣。
B.设备
a) DAISYII 体外模拟培养箱
b) 过滤装置- ANKOM F57滤袋
c) 封口机
d) 量筒– 1 L & 500 mL
e) 热水瓶–2个
f) 过滤用奶酪布
g) ANKOM 220 纤维素分析仪
C. 步骤
a) 滤袋和样品准备
1)将F57 滤袋在丙酮中浸泡3-5 min，然后放在通风橱中自然干燥。
用丙酮浸泡的目的是除掉表面剂，否则会影响微生物消化。
对每个F57 滤袋称重，记录质量(m1)。
将天平归零，并向滤袋中直接称取0.25 g 样品 (m)
注：进行48 h消化研究时，样品量也可以为0.5 g。
然而，最近研究表明样品量为0.25 g 时测定结果更准确。
2) 将每个滤袋封口，并防入Daisy II体外模拟培养箱消化罐中(每个罐中最多可以放25 样品)。
样品应平衡分布在消化罐分隔的两边。
同时至少包括一个空白滤袋，用于确定测定结果校正因子(C1)。
b) 混合缓冲溶液准备(每个消化罐)
1) 将缓冲溶液A和B进行预热(39°C)。
在容器中先加缓冲溶液A1330 ml，然后向其中加266 ml缓冲溶液B（比例为1:5)。
缓冲溶液A和B的用量要准确，以确保39°C混合溶液的pH 为6.8。
向每个装有样品滤袋的消化罐中加1600 ml 混合缓冲溶液。
2) 将装有样品和缓冲溶液的消化罐放入Daisy II 体外模拟培养箱，打开加热和搅拌(红色开关为电源)。
让消化罐温度平衡至少20-30 min。
同时收集准备瘤胃接种物。
c) 接种物准备与培养
所有的玻璃器皿要保持在 39°C。
1) 向2个热水瓶中加入39° C 水对其进行预热。
在收集瘤胃液前将热水倒掉。
采用适宜的
采集步骤，取至少2000 ml 瘤胃液，放入热水瓶中。
2) 将瘤胃液从热水瓶中倒出，放到混合器中。
向混合器的容器中冲入CO2 气体并快速混合30。
混合的目的是防止微生物黏附，确保用于体外消化微生物代表性。
将混合好的瘤胃液用4层奶酪布过滤到5升容量瓶中(预热39° C)。
用四层新的奶酪布过滤将其他热水瓶中的瘤胃液过滤到同一个5升容量瓶中。
容量瓶要持续充CO2。
3) 用量筒量取400 ml 瘤胃培养物。
从Daisy II 体外模拟培养箱中取出一个消化罐，向缓冲溶液和样品中加入量取好的400ml 培养物。
然后向消化罐中充CO2 气体30秒，然后盖好盖子。
4) 所有用到的消化罐都按照上述步骤重复操作。
注意：不要让CO2气体通过缓冲后的
培养物鼓泡，而是利用CO2 在消化罐上方形成气体层。
5) 培养（确保加热和搅拌开关已经打开）48小时后测定体外真消化率结果。
Incubate。
DAISY II体外模拟培养箱将始终保持温度39.5°C ± 0.5。
6) 培养结束，取出消化罐，排干液体。
用冷自来水冲洗至水澄清。
7) 将冲洗干净的滤袋放入ANKOM220 纤维分析仪器中，按照中性洗涤纤维（NDF）的测定步骤进行测定。
记录体外消化和NDF测定后滤袋+残渣质量（m2）。
注：滤袋也在做NDF测定之前放在冰箱或冰冻贮存。
D. 计算
体外真消化率（ IVTD，% ）= 100 – ((m2 - (m1 x C1)) x 100 / m)
其中：
m1 = 滤袋质量，g；
m= 样品质量，g；
m2= 体外消化和NDF测定后滤袋+残渣质量，g；
C1 = 空白袋校正系数(烘箱干燥后质量/开始空白滤袋质量)。
----------------------------------。