鼠脑和脊髓中5_羟色胺_5_羟吲哚醋酸_去甲肾上腺素和多巴胺的快速测定法
一轮复习 苏教版 神经调节(1)作业
课时分层作业(二十四)神经调节(1)1．下列有关神经系统的叙述，错误的是()A．脊髓、脑干属于中枢神经系统B．位于大脑皮层的呼吸中枢是维持生命的必要中枢C．神经系统包括脑神经、脊神经和自主神经D．高级神经中枢和低级神经中枢对躯体运动都有调节作用B[脑和脊髓属于中枢神经系统，都有躯体运动中枢，但躯体运动的最高级中枢在大脑，脊髓和脑干中只有低级的躯体运动中枢，且都受大脑皮层高级运动中枢的调节。
脑可分为端脑、间脑、中脑、脑桥、小脑和延髓六个部分，通常把中脑、脑桥和延髓合称为脑干，脑干中有维持生命系统的基本中枢，如心血管中枢和呼吸中枢，呼吸中枢位于大脑皮层以下，B错误。
]2．如图是神经细胞结构模式图，结合图示分析，下列叙述正确的是()A．图中①是神经细胞的胞体B．图中②③④是突起，它们共同组成神经纤维C．该神经细胞的基本结构由胞体和突起组成D．神经细胞受到刺激后能产生冲动，但不能传导冲动C[图中①是细胞核，A错误；图中②是树突，③是轴突，④是神经末梢，神经细胞的突起一般包括一条长而分支少的轴突和数条短而呈树枝状分支的树突，轴突以及套在外面的髓鞘叫神经纤维，B错误；神经细胞的基本结构由胞体和突起组成，C正确；神经元受到刺激后能产生冲动，且能传导冲动，D错误。
] 3．下列关于神经胶质细胞的描述，错误的是()A．神经胶质细胞广泛分布于神经细胞之间，数量是神经细胞数量的10～50倍B．神经胶质细胞具有支持、保护、营养和修复神经细胞等多种功能C．神经细胞与神经胶质细胞一起，共同完成神经系统的调节功能D．神经胶质细胞参与构成神经纤维表面的髓鞘，用来接收信息并将信息传导至胞体D[神经胶质细胞参与构成神经纤维表面的髓鞘，与神经细胞一起共同完成神经系统的调节功能。
树突用来接收信息并将信息传导至胞体，D错误。
] 4．心脏的搏动受交感神经和副交感神经的调控，实验测定狗的正常心率为90次/分，阻断副交感神经心率为180次/分，阻断交感神经心率为70次/分。
液相色谱-串联质谱法测定海产品中5-羟色胺含量
５－羟色胺（５－ｈｙｄｒｏｘｙｔｒｙｐｔａｍｉｎｅ）又名血清
素，分子式Ｃ１０Ｈ１２Ｎ２Ｏ，是一种吲哚衍生物，分子量 １７６．２２，在海产品组织中广泛存在，是一种神经递
质。５－羟色胺被认为可能参与人体许多生理功能的
调节，也被认为是疼痛感、冷热感、亢奋感等的信
号传输物质。５－羟色胺的缺乏可引起抑郁、精神萎
结果与讨论
流动相的选择。５－羟色胺分子量小，极性强，
在色谱柱上的保留行为需要优化液相色谱的流动
相，比较以下三种流动相：水－甲醇；５ ｍｍｏｌ／Ｌ乙
酸铵水溶液－甲醇；５ ｍｍｏｌ／Ｌ乙酸铵水溶液（含
０．１％甲酸）－甲醇，结果见图１－３。
5-
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1%三氯 乙酸
甲醇
水
92
68
76
表中，１％三氯乙酸提取鱼肉中５－羟色胺 回收率在９０％以上，说明这种提取试剂提取５－ 羟色胺的效果相对于甲醇和水的提取效果好， 可能的原因是一方面１％三氯乙酸提供了酸性 环境利于５－羟色胺的提取，另一方面，１％三 氯乙酸是很好的除蛋白试剂，对于高蛋白的海 产品，１％三氯乙酸作为提取溶剂可以减少蛋 白带来的基质干扰。
表１ 流动相梯度洗脱程序
时间（min）
A/%
B/%
0.01
80.0
20.0
4.00
20.0
80.0
7.00
20.0
80.0
7.01
80.0
20.0
10.00
80.0
20.0
表２ 质谱参数
母离子 子离子 驻留时间 Q1电压 碰撞能量 Q3电压 （m/z） （m/z） （ms） （v） （ev） （v）
三、5-羟色胺（5-hydroxytryptamine,5-HT）
三、5-羟色胺(5-hydroxy tryptamine,5-HT)1. 5-HT在外周与中枢的分布5-羟色胺(5－hydroxytryptamin ,5-HT) 是1947 年由Rapport 首次在人血浆中发现并命名。
若干年后，Brodie发现利血平可耗竭内源性5-HT，由此提出5-HT可能与NA相同，为中枢的递质。
然而，直到Falck荧光测定技术的应用，才明确了儿茶酚胺的递质功能，同时也揭示了5-HT神经元的胞体定位及向间脑和端脑的纤维投射。
体内的5-HT有90%存在于消化道，绝大部分分布在粘膜的肠嗜铬细胞中，少量存在于肌间丛。
从肠粘膜进入血液中的5-HT主要被血小板摄取，还有一部分5-HT存在于各组织器官中的肥大细胞中。
中枢内5-HT的分布：（如上图所示）B1和B2细胞群主要位于延髓尾侧部中缝苍白核及中缝隐核；B3群细胞大多位于中缝大核；B4群位于第Ⅳ脑室底部，前庭神经核和展神经核的背部；B5群主要位于脑桥中缝核；B6群位于被盖背核的背内侧区，第Ⅳ脑室底头侧部，紧邻中线的细胞群；B7群数量最大，位于中缝背核及内侧纵束的背内侧和腹内侧部分；B8群位于中央上核；B9群主要位于脑内侧丘系及周围的细胞体。
上述可见，B1---B3群位于延髓，B4---B6群主要分布在脑桥，而B7---B9群位于中脑。
此外，5-HT能神经元也存在于儿茶酚胺能神经元的周围，例如，黑质致密部、下丘脑背内侧核、最后区、蓝斑核尾侧部均可见5-HT阳性神经元。
5-HT能神经纤维走向与肾上腺素能纤维走向大致相似，也分上行核下行两部分。
中枢尾侧端5-HT能神经元发出纤维主要投射至脊髓，而近头侧的5-HT能神经元投到前脑和间脑。
脑和脊髓几乎每一区域都接受5-HT能神经纤维的投射。
⒉ 5－HT的合成在5-HT的合成过程中，色氨酸的供应和TPH是限速因素。
TPH只存在与5-HT能神经元，而且含量较少，活性较低，因此是合成5-HT的限速酶。
西药执业药师药学专业知识(二)2020年真题-(1)
西药执业药师药学专业知识(二)2020年真题-(1)一、最佳选择题1. 属于短效苯二氮类的药物是______。
A.三唑仑B.艾司唑仑C.劳拉西泮D.替马西泮E.氟西泮正确答案：A[解析] 考察苯二氮类药物作用特点。
三唑仑是短效药，艾司唑仑、劳拉西泮和替马西泮是中效药，氟西泮和夸西泮是长效药。
2. 属于第一代抗精神病药物的是______。
A.氯氮平B.利培酮C.奥氮平D.氯丙嗪E.喹硫平正确答案：D[考点] 本题考查抗精神类药物分代。
[解析] 第一代抗精神病药物包括：氯丙嗪、氯哌噻吨、氯哌啶醇、舒必利。
3. 可用于治疗成人类风湿性关节炎，也可用于治疗狼疮性肾炎的药物是______。
A.双醋瑞因B.金诺芬C.布洛芬D.来氟米特E.柳氮磺吡啶正确答案：D[解析] 来氟米特用于治疗成人类风湿关节炎，有改善病情作用；狼疮性肾炎。
4. 下列中枢性镇咳药中，镇咳作用最强的药物是______。
A.可待因B.苯丙哌林C.喷托维林D.右美沙芬E.福尔可定正确答案：B[考点] 本题考查镇咳药作用强度。
[解析] 可待因作用强度约为吗啡的1/4，喷托维林镇咳作用强度约为可待因的1/3，苯丙哌林镇咳作用强度为可待因的2-4倍。
5. 适用于干咳、咳嗽伴黏稠痰的患者，但不宜长期使用，用药7日症状未缓解应停药的恶心性祛痰药物是______。
A.溴己新B.氨溴索C.乙酰半胱氨酸D.氯化铵E.羧甲司坦正确答案：D[考点] 本题考查祛痰药的分类。
[解析] 恶心性祛痰药包括：氯化铵、愈创甘油醚。
6. 关于法莫替丁用药注意事项的说法，错误的是______。
A.以原形从肾脏排泄，肾功能不全患者易造成药物在体内蓄积B.抑制肝脏细胞色素P450酶的活性，从而影响茶碱、华法林、地西泮等药物的代谢C.肾功能不全患者需要减少给药剂量或延长给药间隔D.与西咪替丁相比，对性激素的影响较轻E.妊娠期、哺乳期妇女禁用正确答案：B[考点] 本题考查法莫替丁临床用药评价及应用注意：①以原型从肾脏排泄，肾功能不全者更易蓄积。
高效液相色谱-荧光检测法同时测定大鼠不同脑区中的8种单胺类神经递质
高效液相色谱-荧光检测法同时测定大鼠不同脑区中的8种单胺类神经递质赵燕燕;刘丽艳;韩媛媛;白洁;杜光玲;高茜【摘要】A method for the simultaneous detection of L-dihydroxyphenylalanine , norepinephrine, epinephrine , dopamine ,3,4-dihydroxyphenylacetic acid , serotonin hydrochloride, 5-hydroxyindole-3-acetic acid and homovanillic acid in the different sections of mouse brains was established by using high performance liquid chromatography ( HPLC ) with fluorescence detection and isocratic elution. Before analysis, the sample was deproteinized by 0.60 mol/L perchloric acid, followed by adjusting pH value of the sample with 1.20 mol/LK2HPO4, addition of 0.1 g/L L-cysteine as antioxidant and 0.50 mmol/LNa2EDTA as complexing agent. The separation column was a Shim-packC18 column ( 250 m m ×4.6 mm, 5 μm ) and the mobile phase ( pH 3.8 ) was 13％ methanol containing 50 mmol/L citric acid , 50 mmol/L sodium acetate . 0.5 mmol/L 1-heptanesulfonic acid sodium salt, 5 mmol/L triethylamine and 0.5 mmol/L Na2EDTA. The flow rate was 1.0 mL/min. The injection volume was 10 μL. The emission and excitation wavelengths were 330 nm and 280 nm , respectively. Under the optimized separation conditions, the calibration curves showed good linearity within the concentrations of 1.25 -5000 μg/L ( r＞0.9999 ). The limits of detection were between 0.20 - 5.00 μg/L, the average recoveries were between 94.83％and 99. l9％. and the relative standard deviations ( RSDs ) were between0.08％ and 2.51％. The advantages of the method include easy and prompt operation,high recovery, low detection limit, good separation effect, high accuracy and precision. The method has practical value for detecting 8 monoamine neurotransmitters in biological samples.%采用高效液相色谱-荧光检测法同时测定了大鼠不同脑区中的左旋多巴、去甲肾上腺素、肾上腺素、多巴胺、二羟基苯乙酸、5-羟色胺、5-羟基吲哚乙酸及高香草酸8种单胺类神经递质的含量.样品经组织裂解液(0.60 mol/L 高氯酸、0.50 mmol/L Na2 EDTA、0.1 g/L L-半胱氨酸的混合水溶液)处理后,冷冻离心得到上清液;上清液中加入高氯酸沉淀剂(1.20 mol/L K2 HPO4、2.00 mmol/L Na2 EDTA的混合水溶液)处理后,冷冻离心、过滤.在该优化的色谱条件下,8种单胺类神经递质在1.25～5 000μg/L范围内线性关系良好(r＞0.999 9),最低检出限在0.20～5.00μg/L之间,平均回收率在94.83%～99.19%之间,相对标准偏差在0.08%～2.51%之间.该方法具有操作简便、快捷、回收率高、检出限低、分离度好、结果准确可靠等优点,可以用于体内8种单胺类神经递质的同时检测与分析.【期刊名称】《色谱》【年(卷),期】2011(029)002【总页数】6页(P146-151)【关键词】高效液相色谱;荧光检测;单胺类神经递质;脑;大鼠【作者】赵燕燕;刘丽艳;韩媛媛;白洁;杜光玲;高茜【作者单位】河北大学医学实验中心,河北,保定,071000;河北大学化学与环境科学学院,河北,保定,071002;河北大学化学与环境科学学院,河北,保定,071002;河北大学医学实验中心,河北,保定,071000;河北大学医学实验中心,河北,保定,071000;河北大学医学实验中心,河北,保定,071000;河北大学化学与环境科学学院,河北,保定,071002【正文语种】中文【中图分类】O658单胺类神经递质包括儿茶酚胺类化合物(去甲肾上腺素、肾上腺素、多巴胺)、吲哚胺类化合物(5-羟色胺)及相关代谢产物(多巴胺代谢前体左旋多巴、多巴胺代谢产物二羟基苯乙酸和高香草酸、5-羟色胺代谢产物5-羟基吲哚乙酸)。
超高效液相色谱-串联质谱法快速测定大鼠血清中8种神经递质
超高效液相色谱-串联质谱法快速测定大鼠血清中8种神经递质赵芳;李强;梁梅丽;闫艳;邢婕;秦雪梅;高晓霞【摘要】建立了同时测定8种神经递质(5-HT、GABA、Glu、ACH、NE、DA、5-HIAA和HVA)的超高效液相色谱-三重四极杆质谱方法(UHPLC-MS/MS),并用于大鼠血清样品的测定.大鼠血清经含0.1%甲酸-乙腈沉淀蛋白处理后,选用Waters ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm),以0.1%甲酸-乙腈为流动相梯度洗脱进行分离;采用电喷雾离子源(ESI),在正离子扫描下,采用多反应监测模式(MRM)对8种神经递质及内标化合物进行检测.结果表明,8种神经递质可在10 min内准确测定;定量限为1.8 ng/mL,且线性良好,相关系数均大于0.994,日内、日间精密度(n=6)≤9.2%,稳定性、加标回收率和基质效应等均符合分析要求.本方法分析时间短、准确度好、灵敏度高、专属性强、稳定性好、基质效应小,适用于血清中3类(单胺类、氨基酸类和乙酰胆碱)共8种神经递质的同时定量检测.%An ultra-high performance liquid chromatography tandem mass spectrometric ( LC-MS/MS ) method for simultaneous determination of 8 kinds of neurotransmitters (5-HT, GABA, Glu, ACH, NE, DA, 5-HIAA, HVA) in rat serum was developed.The blood samples were extracted by 0.1% formic acid in acetonitrile and separated on a Waters ACQUITY UPLC BEH C18(2.1 mm×100 mm, 1.7 μm) using gradient elution, with the mobile phase consisting of acetonitrile and 0.1% formic acid in water.The samples were then ioniZed with positive electrospray ( ESI+) , and detected under multiple reaction monitoring ( MRM ) mode.As a result, 8 kinds of neurotransmitters were determined accurately in 10 min with a limit ofquantitation of 1.8 ng/mL and intra-day and inter-day precisions of ≤9.2% ( n=6 ).This method showed a good linearity in detection of neurotransmitters and the linear correlation coefficients were greater than 0.994.Also the stability, recovery and matrix effect were eligible for the analysis.This method showed high accuracy, sensitivity, strong specificity, good stability, small matrix effect and short time for analysis, and was suitable for the quantitative determination of monoamine, amino acids and acetylcholine neurotransmittes in rat serum.【期刊名称】《分析化学》【年(卷),期】2018(046)001【总页数】8页(P121-128)【关键词】超高效液相色谱-串联质谱;神经递质;血清;含量测定【作者】赵芳;李强;梁梅丽;闫艳;邢婕;秦雪梅;高晓霞【作者单位】山西大学中医药现代研究中心,太原030006;山西大学中医药现代研究中心,太原030006;山西大学化学化工学院,太原030006;山西大学中医药现代研究中心,太原030006;山西大学化学化工学院,太原030006;山西大学中医药现代研究中心,太原030006;山西大学中医药现代研究中心,太原030006;山西大学中医药现代研究中心,太原030006;山西大学中医药现代研究中心,太原030006【正文语种】中文神经递质是在神经化学传递中充当“信使”的特定化学物质。
HPLC_电化学检测法测定大鼠脑内的去甲肾上腺素和5_羟吲哚乙酸
文章编号:1008-9926(2002)03-0143-03 中图分类号:R927.1 文献标识码:AHP LC-电化学检测法测定大鼠脑内的去甲肾上腺素和52羟吲哚乙酸刘建芳①,侯艳宁,吴红海,刘会臣(中国人民解放军白求恩国际和平医院,临床药理室 河北 石家庄 050082)摘 要:目的 建立大鼠脑内单胺递质及其代谢产物的测定方法。
方法 大鼠脑组织匀浆液用高氯酸沉淀蛋白后,上清液直接用于HP LC分析。
采用Irregular2H C18色谱柱,流动相组成为0.1m ol・L-1NaH2PO42甲醇20.01m ol・L-1E DT A-0.2m ol・L-1辛基磺酸钠(87∶15∶1∶2.5,pH3.7),流速为0.8ml/min,温度为35℃,电化学检测器工作电压为0.8V。
结果 去甲肾上腺素和52羟吲哚乙酸分别在6.8～680ng・ml-1和3.8～380ng・ml-1范围内线性关系良好,去甲肾上腺素测定的日内和日间的RSD分别为7.5%和8.1%,52羟吲哚乙酸测定的日内和日间的RSD分别为2.0%和7.5%,两者回收率分别为103.0%和61.6%,检测限分别可达2ng・ml-1和1ng・ml-1。
结论 本法用于脑内单胺递质及其代谢物的测定,快速、简便、准确。
关键词:高效液相;电化学;去甲肾上腺素;52羟吲哚乙酸Determination of N orepinephrine and52hydroxyindoleacetic Acid in R at Brain by HPLC with E lectrochemical DetectionLI U Jian2Fang,H OU Y an2Ning,W U H ong2Hai,LI U Hui2Chen(Department of Clinical Pharmacology,Bethune International Peace H ospital of P LA,Shijiazhuang 050082,Hebei)ABSTRACT:Aim T o develop a HP LC method to determine m onoamine and its metabolites in rat brain.Methods The supernatants of protein2precipitated rat brain tissue hom ogenates by HClO4were directly injected into the chromatographic system.Irregular2H C18column was used for separation,a mixture of0.1m ol・L-1NaH2PO4,methanol,0.01m ol・L-1E D2 T A and0.2m ol・L-1s odium octylsulfonate(87∶15∶1∶2.5)was used as m obile phase,the flow rate was0.8ml/min,the column tem perature was35℃and the detector potential was0.8V.R esults N orepinephrine and52hydroxyindoleacetic acid have g ood linearity within the range of6.8～680ng・ml-1and3.8～380ng・ml-1respectively.Within2day and be2 tween2day precisions of the method were7.5%and8.1%for norepinephrine,2.0%and7.5%for52hydroxyin2 doleacetic acid,respectively.The recoveries of norepinephrine and52hydroxyindoleacetic acid were103.0%and61.6%, the detection limit was2ng・ml-1and1ng・ml-1,respectively.Conclusion The method is fast,sim ple and accurate in the determination of m onoamine and its metabolites in the brain.KE Y WOR DS:HP LC;Rat brain;N orepinephrine;52hydroxyindoleacetic acid 单胺类递质去甲肾上腺素(NE)和52羟色胺(52 HT)在大脑许多功能的控制调节中起重要作用。
高效液相色谱_荧光法测定小鼠脑组织中的单胺类神经递质
·774· ◇调查与分析 ◇
安徽医科大学学报 A cta U n iversita tis M ed icina lis A nhu i 2009 Dec; 44 (6)
急性白血病 1 185例次住院患者血流感染特点及危险因素分析
秦 慧 ,杨明珍 ,宋万灯 ,武琳琳 ,缪华伟 ,程 歆 ,吴 炜 ,刘沁华 ,王永庆
安徽医科大学学报 A cta U n iversita tis M ed icina lis A nhu i 2009 Dec; 44 (6)
·773·
1. 4 统计学处理 数据结果以 x ±s表示 ,采用线 性回归最小二乘法计算单胺类神经递质的标准曲 线。
2 结果
2. 1 标准色谱图 实验得到各标准物质谱图见图 1, 3种标准物质都达到了基线分离 。得到了小鼠脑 组织匀浆样品的色谱图 (图 2) ,除了多巴胺前有一 大的未知峰与多巴胺未达到基线分离外 ,其余各种 化合物均达到基线分离 。标准液和脑匀浆样品中的 NE、DA 和 52HT的峰之间分离较好 (样品中 DA 与 杂质峰的分离尚有待改善 ) 。
相关系数 0. 999 7 0. 999 9 0. 998 9
2. 3 回 收率 和精 密度 的测 定 按 113 操 作 , 按 0110 g脑 (湿重 )加入 110 m l的比例加入低 、中 、高 浓度的标准溶液 ,于同日内分别测定 NE、DA 和 52 HT加入量的对照品脑组织匀浆样品 ,每种加入量样 品平行测定 5次 ,计算各种标准物不同浓度的脑组 织匀浆样品回收率 ,结果如表 3。连续测定混合标 准液 5次 , NE、DA 和 52HT的峰面积日内测定的相 对标准偏差分别为 217%、215%和 314%。
图 1 3种神经递质混合标准溶液色谱图 (1: NE; 2: DA; 3: 52HT)
第二章神经调节(背诵版)-2024-2025学年高二生物必背知识清单(浙科版2019选择性必修2)
第二章神经调节【例】神经递质多巴胺可引起突触后神经元兴奋，参与奖赏、学习、情绪等脑功能的调控，可卡因能对脑造成不可逆的损伤。
如下图是可卡因引起多巴胺作用途径异常的过程示意图。
据下图推测：吸食可卡因后，突触间隙中多巴胺含量___________（填上升或下降）长期使用可卡因会使人产生药物依赖，推测其原因为答案：上升长期使用可卡因会使突触后膜上多巴胺受体减少，使突触变得不敏感，必须使用更多可卡因才能维持兴奋。
/对多巴胺出现耐受性，需要较多多巴胺才能兴奋。
【例】在一定的电流强度范围内，随着刺激电流增强，肌肉收缩幅度_________，分析其原因是：不能越大神经由多条神经纤维组成，一定范围内刺激电流增强，兴奋的神经纤维数量增多【判断】离体坐骨神经在适宜范围内不断增大刺激强度，测得电表偏转幅度不变x 离体神经纤维在适宜范围内不断增大刺激强度，测得电表偏转幅度不变√离体神经纤维给予多次的阈下刺激（不能引起兴奋的刺激）可能测得电表偏转√一、【反射和反射弧】1.反射：神经调节的基本方式——反射的种类：条件反射+非条件反射】思考:一个完整的反射活动仅靠一个神经元能完成吗？至少需要几个?X 至少2个2.反射弧：神经调节的结构基础反射弧的组成：感受器——传入神经元——神经中枢——传出神经元——效应器【例】膝跳反射的感受器：肌梭效应器：伸肌兴奋①膝跳反射的反射弧是二元反射弧（但需要3个神经元共同参与）【判断】膝跳反射中反射中枢就是传入神经元与传出神经元之间的突触（√）【例】屈肌反射时屈肌收缩、伸肌舒张（不兴奋）刺激D，屈肌收缩——属于反射吗？——x完整反射弧刺激中央后回产生痛觉——属于反射吗？X总结：反射——需要完整的反射弧【兴奋在神经纤维上的传导】1.神经元（又称神经细胞）：是神经系统结构和功能的基本单位。
一般包括胞体、树突、轴突三部分。
根据功能可以分为三大类：感觉神经元、中间神经元、运动神经元【例】人体的神经系统是由几百亿到上千亿个神经细胞（神经元）和数目更多的支持细胞（胶质细胞）构成的。
快速起效抗抑郁药物的研究进展_薛瑞
活性, 且起效时间也明 显缩短。 由此可见 , 兼 具 5-HT1A自 身 受体拮抗及 5-HT 重摄取抑制作用的多靶标抗抑郁药物有望 实现快速起效的目的 。
核 ( dorsa l raphae neu leus, DRN ) 的 5-HT 能 神经 元 胞体 和树
突, 激 活后 可抑制 5-HT 能神经 元的 放电活 动, 从而 减少 5-
HT 的合成和释放; 同时也是突触后受体, 广泛分布于皮层 -
边缘系统, 通过偶联 G i 蛋白, 抑 制腺 苷酸 环化酶 ( A C) 活性 发挥作用。抑郁 症患 者死 后尸 检结 果表 明 [ 3] , 患 者突 触前
# 1558#
中国药理学通报 Chinese Pharmaco log ical Bulletin 2008 D ec; 24( 12) : 1558~ 61
快速起效抗抑郁药物的研究进展
薛 瑞 1, 2, 张有志1, 邹莉波 2
( 1. 军事医学科学院毒物药物研究所, 北京 100850; 2. 沈阳药科大学, 辽宁 沈阳 110016)
关键词: 抗抑郁 药物; 起 效时 间; 5-HT1A受 体 拮抗 剂; 5-HT2A 受体拮抗剂; A2 受体拮抗剂; 双重 /三重摄取抑制剂
抑郁 症 ( depression ) 属于 情 感性 精神 障 碍 ( mood d isorders), 是一种以明显 而持 久的心 境低 落为 主要 特征 的综 合 征, 其高发病率、高复 发率和高 自杀率 对社会 造成 了极大 危 害。世界卫生组织 (WHO )预 计到 2020年, 抑郁 症将 在 / 全 球疾病负担 0排名中居第二位 [ 1] 。
针刺对失眠大鼠血清去甲肾上腺素、多巴胺及5-羟色胺含量的影响
针刺对失眠大鼠血清去甲肾上腺素、多巴胺及5-羟色胺含量的影响郭鑫;岳增辉;谢菊英;吴雪芬;郑雪娜【期刊名称】《中国中医药信息杂志》【年(卷),期】2018(025)004【摘要】目的观察循经选穴针刺对失眠大鼠外周血清单胺类神经递质5-羟色胺(5-HT)、多巴胺(DA)、去甲肾上腺素(NE)含量及腧穴配伍效应的影响,探讨针刺治疗失眠症的作用机制.方法将60只SD大鼠随机分为空白组、模型组、百会+神门组、百会+三阴交组和百会+非经非穴组,每组12只,腹腔注射对氯苯丙氨酸混悬液制作大鼠失眠模型,各针刺组针刺相应腧穴,每次30 min,连续7 d.ELISA 检测大鼠血清NE、DA、5-HT的含量.结果与空白组比较,模型组大鼠血清5-HT、DA、NE 含量明显升高(P<0.01);与模型组比较,各针刺组大鼠血清DA、NE含量明显降低(P<0.05,P<0.01),百会+三阴交组大鼠血清5-HT含量明显降低(P<0.05);各针刺组间比较,百会+神门组总体疗效优于百会+三阴交组及百会+非经非穴组.结论针刺改善大鼠睡眠结构可能与血清单胺类神经递质含量有关,循经选穴针刺可能是影响腧穴配伍效应的因素之一.【总页数】5页(P46-50)【作者】郭鑫;岳增辉;谢菊英;吴雪芬;郑雪娜【作者单位】湖南中医药大学,湖南长沙 410208;湖南中医药大学,湖南长沙410208;湖南中医药大学,湖南长沙 410208;湖南中医药大学,湖南长沙 410208;湖南中医药大学,湖南长沙 410208【正文语种】中文【中图分类】R245【相关文献】1.桂附地黄丸对大鼠肺纤维化形成阶段肺与脑组织中去甲肾上腺素、多巴胺、5-羟色胺的影响 [J], 宋建平;谢忠礼;杨美凤;李伟;李瑞琴;张瑞2.不同产地三叶青提取物解热作用及对大白鼠下丘脑5-羟色胺、去甲肾上腺素、多巴胺含量的影响 [J], 杨雄志;王翰华3.三叶青提取物解热作用及对大白鼠下丘脑5-羟色胺、去甲肾上腺素、多巴胺含量的影响 [J], 杨雄志;王翰华4.丹莪妇康煎膏对愤怒模型大鼠下丘脑多巴胺、去甲肾上腺素及5-羟色胺含量的影响 [J], 余霞;王建5.不同镇痛方法对产痛及血浆5-羟色胺,多巴胺,去甲肾上腺素表达的影响 [J], 尚翠玲;潘莹;熊艳红;时捷;赵敏因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
惊厥大鼠不同脑区突触体内5-HT及MDA含量的测定及其意义
ｔ ｏ ｒ Ｉ ｔ ｅ ｌ ｆ ５ ＨＴ ｃ ｅ ｓ ｄ ｓｇｎ ｆｃ ｎ ｌ Ｐ＜ ０ ５ ｒ Ｐ＜ ０ １）， ｔ ｔ ｅ ｅ ｅ ｓ ｏ ｈｅ ｃ ｎｔ ｏ ， ｈｅ ｌｖｅｓ ｏ － ｄｅ ｒ ａ ｅ ｉ ｉｉａ ｔｙ（ ．０ ｏ ．０ ｂｕ ｈ ｌｖ ｌ ｆ Ｍ ＤＡ ｎｃ ｅ ｓ ｄｓｇ ｆｃ ｎｔｙ ｉ ｉ ｒ ａ ｅ ｉ ｎｉｉａ ｌ ｎ ＰＡＬ， Ｉ ａ Ｈ Ｐ ｎｄ ＳＴＲ ｆｅ ｉｅ ｔｃ ｒ ｔ Ｐ＜ Ｏ． ｒ Ｐ％ ０ ０１ ． ｎ ｏ ｐ ｌ ｐ ｉ ａ ｓ（ ０５ ｏ ． ） Ｃｏ — ｃ ｕ ｉｎ Ｔｈｅ ｌｖｅ ｓｏｆ５ ＨＴ ａ ｆｅ ｔ ｔ ｅ ｓ ｎｓｔｖ ｔ ｅｚ ｒ ．Ｄｅ ｉｉ ｎｃ 一 Ｔ ａ ｅ ｄ ｔ ｌ ｓｏ ｅ ｌ 一 ｃ ｎ ａ ｆ ｃ ｈ ｅ ｉｉ ｉｙ ｏｆ ｓ ｉｕ ｅ ｆｃｅ ｙ ｏｆ５ Ｈ ｃ ｎ ｌａ ｏ Ｉ ｗｅ ｅ ｚ ｅ ｔ ｅ ｈ ｄ ｔ ｎ ｃ ｅ ｚ ｅ ｏ ｒ ｓ ｉｕｒ ｈｒ ｓ ｏｌ ｏ ｉ ｄｕ ｅ ｓ ｉｕｒ ． ＫＥＹ ＯＲＤＳ：ｅ ｉｅ ｓ Ｗ ｐ ｌ ｐ ｙ；ｐ ｌｕ ；ｈｉ ｐ ａ ａｉｍ ｐ ｏｅ ｍｐｕ ｓ；ｓ ｒａ ｕｍ ；５ ＨＴ ；Ｍ ＤＡ ；ａ ｍａ ｓ，ａ ｏｒ ｔ ｒ ｔ ｉｔ － ｎｉ ｌ ｌ ｂ ａ ｏ ｙ；ｒ ｔ ａ
（ ５ｍｇ・ ｇ ）制 作 惊 厥 发 作 模 型 ． 别取 大脑 皮 层 、 马 、 状 体 三 个 脑 区 的脑 组 织 制 备 出 突触 小 体 ， 用 荧 光 １ ｋ ， 分 海 纹 采
分 光 度 计 及 硫 代 巴 比妥 酸 法 测 定 上 述 各 脑 区 组 织 突 触 小 体 不 同 时 点 的 ５ＨＴ及 丙 二 醛 （ Ａ） 含 量 结 果 惊 － ＭＤ 的 厥 发 作 各 组 中 各 脑 区 ５ＨＴ 含 量 均 明 显 低 于 对 照 组 （ 一 Ｐ＜ ０ ０ ． ５或 Ｐ ０ ０ ） 而 ＭＤ 含 量 明 显 高 于 对 照 组 （ ＜ ． １， Ａ Ｐ＜
精神病学-32_真题-无答案
精神病学-32(总分100,考试时间90分钟)A1/A2型题以下每一道题下面有A、B、C、D、E五个备选答案。
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1. 下列有关心境障碍的描述错误的是A. 是以情感或心境改变为主要特征的一组精神障碍B. 伴有相应的认知、行为及人际关系等的改变，躯体症状极少见C. 去甲肾上腺素(NE)和5-羟色胺(5-HT)被认为与心境障碍的发生有关D. 睡眠节律改变在心境障碍的发病中具有重要意义E. 多巴胺在心境障碍的发病中可能起重要作用2. 有关心境障碍生化研究的描述，正确的是A. 具有自杀倾向的抑郁症患者脑脊液中5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)含量增高B. 抑郁症患者脑脊液和血浆中γ-氨基丁酸(GABA)含量升高C. β2受体功能下调与临床抗抑郁药的作用有密切关系D. SSRI(选择性5-羟色胺再摄取抑制剂)类药物主要促进去甲肾上腺素(NE)和5-羟色胺(5-HT)的再摄取E. 利血平使5-HT耗竭可以治疗抑郁症3. 有关心境障碍的遗传因素研究的描述，错误的是A. 双相障碍先证者一级亲属中的同病率较正常人的一级亲属高8～18倍B. 抑郁症先证者一级亲属中的同病率较正常人的一级亲属高2～3倍C. 如果双亲中有一位患有双相障碍，其子女发生情感障碍的几率为50%D. 单卵双生子的同病率显著高于双卵双生子E. 寄养子研究提示遗传因素较环境因素的作用明显4. 抑郁症患者的睡眠紊乱以下列哪种最为多见A. 早醒B. 入睡困难C. 醒后不易再睡D. 易醒E. 睡眠过度5. 抑郁发作时的生物学症状群不包括下列哪项A. 睡眠紊乱B. 食欲紊乱C. 性功能减退D. 精力丧失E. 乐趣丧失6. ICD-10诊断标准中，抑郁发作时的核心症状群不包括下列哪项A. 心境或情绪低落B. 兴趣缺乏C. 乐趣丧失D. 早醒E. 快感丧失7. 关于抑郁发作时的精神病性症状的描述，错误的是A. 可出现幻觉与妄想，内容与抑郁心境协调B. 可出现与抑郁状态不协调的妄想，如被害妄想C. 可出现罪恶妄想，无价值妄想或灾难妄想等D. 可出现嘲弄性或谴责性的幻听E. 妄想的内容多荒谬离奇，甚至可出现原发性妄想8. 下列有关躁狂发作的描述不正确的是A. 情感高涨是躁狂状态的主要原发症状B. 思维联想加快，出现音联意联C. 躁狂患者可保持一定自知力D. 躁狂发作时不可能出现意识障碍E. 躁狂发作的同时可伴有抑郁症状9. ICD-10关于抑郁发作的诊断标准对于症状持续时间的要求是A. 至少2周B. 至少3周C. 至少4周D. 至少5周E. 至少1周10. ICD-10关于轻躁狂发作的诊断标准对于症状持续时间的要求是A. 至少2周B. 至少5天C. 至少4天D. 至少3天E. 至少1周11. 抑郁发作最基本的症状是A. 自我感觉差B. 思维迟缓C. 行动迟缓D. 自责自罪E. 抑郁心境12. 典型抑郁发作1天之内情绪波动的规律是A. 晨重晚轻B. 晨轻晚重C. 中午起逐渐加重D. 半夜最重E. 中午最重，以后减轻13. 抑郁症自杀行为的特点A. 常有明显的自杀观念，但极少发生自杀行为B. 常有明显的自杀观念，有时出现冲动性自杀C. 常为有计划的自杀，甚至出现扩大性自杀D. 类似于精神分裂症患者的自杀特点E. 虽然自己想死，但决不会伤害自己的家人14. 关于抑郁症复发，下列描述不正确的是A. 抑郁症的复发率较高，一生中复发的危险度将近50%B. 首次抑郁发作恢复后应维持用药至少6个月C. 第二次发作痊愈后应预防用药2～3年D. 维持治疗应尽量采用半衰期较长服用方便的药物E. 抑郁发作伴有明显的自杀倾向应考虑较长时间的维持治疗15. 抑郁症复发的危险因素不包括下列哪项A. 急性期治疗后仍存在一些残留的抑郁症状B. 双重抑郁C. 有过复发的患者D. 患者抑郁症状缓解后继续生活在应激环境中E. 中年期发病者16. 三环抗抑郁药(TCA)最常见的不良作用A. 锥体外系不良症状B. 过敏反应C. 心律及心电图变化D. 粒细胞减少E. 抗胆碱能不良反应17. 对选择性5-HT再摄取抑制剂(SSRI)的认识，以下不正确的是A. 治疗抑郁症，只需每天服药1次B. 有较高的治疗安全指数C. 治疗抑郁症的疗效与三环类抗抑郁药相当D. 可与单胺氧化酶抑制剂合用E. 可用于预防抑郁症复发的维持治疗18. 关于快速循环型的描述，下列说法错误的是A. 1年内发作4次以上B. 多见于女性和双相Ⅱ型患者C. 使用抗抑郁药可促发或加重发作D. 在抑郁相时应使用抗抑郁剂E. 理想的治疗是单用心境稳定剂长期治疗19. 下列关于双相障碍抑郁发作时抗抑郁剂的治疗原则，错误的是A. 双相障碍抑郁发作时应慎用抗抑郁剂B. SSRI诱发躁狂的可能性较三环类抗抑郁药要小一些C. 选用三环类抗抑郁药更为合适D. 应在充分的心境稳定剂的基础上使用抗抑郁剂E. 抑郁症状缓解后逐渐停用抗抑郁剂20. 关于老年抑郁发作特点的描述，最准确的是A. 常呈典型的抑郁发作特点B. 症状不典型，常有明显的幻觉妄想等症状C. 症状不典型，常有明显的焦虑烦躁及躯体不适主诉D. 症状不典型，常发展为痴呆E. 症状不典型，较少出现自杀行为21. 下列哪种睡眠紊乱对于抑郁症患者最具有特征性A. 早醒B. 入睡困难C. 醒后不易再睡D. 易醒E. 睡眠过度22. 有关环性心境障碍的描述，错误的是A. 是一类以轻躁狂发作和轻性抑郁发作反复交替发作的慢性心境障碍B. 持续性心境不稳，心境高涨和低落多次反复交替出现C. 躁狂症状的数目，严重程度或持续时间都够不上躁狂发作的标准D. 抑郁症状的数目，严重程度和持续时间也够不上重性抑郁发作的标准E. 轻度躁狂和抑郁发作，一般与生活事件有关，而与性格基础无关23. 关于躁狂症的治疗，下述不正确的是A. 碳酸锂的治疗与中毒剂量比较接近B. 对急性兴奋躁动的躁狂患者可用氟哌啶醇或氯丙嗪短期肌内注射C. 碳酸锂对预防躁狂或抑郁症复发有效D. 躁狂症属于心境障碍，所以心理治疗是最重要治疗方法E. 对急性兴奋躁动的躁狂患者可用电抽搐治疗24. 抑郁症与心境恶劣障碍的主要区别在于A. 兴趣下降B. 睡眠障碍C. 记忆力差、精力不足D. 精神运动性抑制E. 悲观厌世25. 有关心境恶劣障碍的描述，错误的是A. 心境恶劣是一种以持久的心境低落为主的轻度抑郁B. 轻度抑郁持续至少2年C. 常伴有焦虑，躯体不适和睡眠障碍等D. 无明显的精神运动性抑制，无精神病性症状，日常生活不受严重影响E. 无求治要求，躁狂发作少见26. 有关心境障碍的混合发作是指A. 抑郁发作和躁狂发作交替出现B. 既往有抑郁发作，本次为躁狂发作C. 既往有躁狂发作，本次为抑郁发作D. 躁狂症状和抑郁症状在一次发作中国时出现E. 抑郁发作和躁狂发作之间的快速转换27. 对心境稳定剂的选择，下列描述错误的是A. 双相Ⅰ型急性躁狂或双相Ⅱ型轻躁狂发作，可首选锂盐B. 既往对锂盐缺乏疗效，则选用丙戊酸盐或卡马西平C. 如不能耐受锂盐，选用丙戊酸盐或卡马西平D. 对快速循环发作或混合性发作应首选丙戊酸盐或卡马西平E. 对双相抑郁障碍患者，必须使用抗抑郁剂28. 碳酸锂的最佳适应证为A. 典型躁狂发作B. 混合性躁狂发作C. 快速循环型D. 发作时间较短的躁狂发作E. 双相障碍29. 有关心境障碍的病程，描述最准确的是A. 多数躁狂发作患者终生仅发作一次，平均自然病程约为3个月B. 多数躁狂发作患者终生可反复发作，平均自然病程约为6个月C. 多数单相抑郁发作患者终生仅发作一次，平均自然病程为6～8个月D. 多数单相抑郁发作患者终生可反复发作，平均自然病程为6～8个月E. 躁狂与抑郁常交替发作，如不经治疗，病情会持久恶化，不会自然恢复30. 患者女，20岁。
淫羊藿激活CREB
实验研究㊀基金项目:辽宁省科技厅自然科学基金(Ｎｏ.２０２１－ＭＳ－２５０)ꎻ辽宁中医药大学中医脏相理论及应用国家教育部重点实验室开放基金(Ｎｏ.ｚｙｚｘ２１０５)ꎻ辽宁中医药大学校内课题(Ｎｏ.２０２１ＬＺＹ０４６)ꎻ∗同为通信作者作者简介:崔琳ꎬ女ꎬ硕士生ꎬ研究方向:药理学研究ꎬＥ－ｍａｉｌ:７３４４５２７９６＠ｑｑ.ｃｏｍ通信作者:肖洪贺ꎬ男ꎬ博士ꎬ实验师ꎬ研究方向:中药药理学研究ꎬＴｅｌ:０４１１－８５８９０１７９ꎬＥ－ｍａｉｌ:ｘｉａｏｈｈ８９＠１６３.ｃｏｍꎻ杨静娴ꎬ女ꎬ博士ꎬ教授ꎬ研究方向:中药药理学研究ꎬＴｅｌ:０４１１－８７５８６００９ꎬＥ－ｍａｉｌ:ｊｉｎｇｘｉａｎｙａｎｇ６３＠１２６.ｃｏｍ淫羊藿激活ＣＲＥＢ/ＢＤＮＦ信号通路改善ＡＰＰ/ＰＳ１双转基因小鼠的认知功能崔琳ꎬ肖洪贺∗ꎬ李贺ꎬ田雨ꎬ田晋明ꎬ赵宇萌ꎬ杨静娴∗(辽宁中医药大学药学院ꎬ辽宁大连１１６０００)摘要:目的㊀研究淫羊藿能否通过调节环磷酸腺苷效应元件结合蛋白(ｃＡＭＰｒｅｓｐｏｎｓｅｅｌｅｍｅｎｔｂｉｎｄｉｎｇｐｒｏｔｅｉｎꎬＣＲＥＢ)/脑源性神经营养因子(ｂｒａｉｎ－ｄｅｒｉｖｅｄｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｃｆａｃｔｏｒꎬＢＤＮＦ)信号通路改善ＡＰＰ/ＰＳ１双转基因小鼠的认知功能ꎮ方法㊀取７月龄雄性ＡＰＰ/ＰＳ１双转基因小鼠３０只ꎬ按体重随机分为模型对照组和淫羊藿组ꎬ每组１５只ꎻ另取１５只同龄的雄性Ｃ５７ＢＬ/６小鼠作为空白对照组ꎮ淫羊藿组灌胃给予３ｇ ｋｇ－１的药物溶液ꎬ空白组和模型组给予等体积０.３％ＣＭＣ－Ｎａꎬ连续灌胃给药２８ｄꎬ每天１次ꎮ筑巢试验检测小鼠日常生活能力ꎻＭｏｒｒｉｓ水迷宫试验检测小鼠的学习和记忆能力ꎻ苏木素－伊红(Ｈ＆Ｅ)和尼氏(Ｎｉｓｓｌ)染色法观察小鼠脑组织病理学变化ꎻ采用ＴＢＡ法㊁羟胺法检测小鼠脑组织中丙二醛(ｍａｌｏｎｄｉａｌｄｅｈｙｄｅꎬＭＤＡ)和超氧化物歧化酶(ｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅｄｉｓｍｕｔａｓｅꎬＳＯＤ)的水平ꎻ免疫荧光化学法检测小鼠脑内β－淀粉样蛋白(ａｍｙｌｏｉｄβ－ｐｒｏｔｅｉｎꎬＡβ)的表达情况ꎻＷｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ法检测环磷酸腺苷效应元件结合蛋白(ｃＡＭＰｒｅｓｐｏｎｓｅｅｌｅｍｅｎｔｂｉｎｄｉｎｇｐｒｏｔｅｉｎꎬＣＲＥＢ)和脑源性神经营养因子(ｂｒａｉｎ－ｄｅｒｉｖｅｄｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｃｆａｃｔｏｒꎬＢＤＮＦ)信号通路相关蛋白的表达情况ꎮ结果㊀与空白组比较ꎬＡＰＰ/ＰＳ１双转基因小鼠的筑巢得分明显降低ꎬ逃避潜伏期和游泳距离明显增加(Ｐ<０.０１)ꎬ目标象限停留时间和穿越平台次数显著减少ꎻ皮层和海马存在明显的神经病理损伤ꎮ此外ꎬＡＰＰ/ＰＳ１双转基因小鼠的皮层和海马区域可观察到大量Ａβ沉积ꎬ并且脑组织中超氧化物歧化酶活性降低ꎬ丙二醛水平升高ꎮＷｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ结果显示ꎬ模型组小鼠脑内环磷酸腺苷效应元件结合蛋白蛋白磷酸化受到抑制ꎬ伴随着脑源性神经营养因子蛋白表达明显降低ꎮ淫羊藿(３ｇ ｋｇ－１)连续灌胃４周ꎬ可明显改善模型小鼠的筑巢能力和认知功能ꎬ减轻神经病理损伤ꎬ抑制Ａβ沉积ꎬ减轻氧化应激ꎬ促进环磷酸腺苷效应元件结合蛋白环磷酸腺苷效应元件结合蛋白磷酸化ꎬ增加脑源性神经营养因子蛋白表达ꎮ结论㊀淫羊藿可明显改善ＡＰＰ/ＰＳ１双转基因小鼠的认知功能和神经病理损伤ꎬ其作用机制可能与激活环磷酸腺苷效应元件结合蛋白/脑源性神经营养因子信号通路有关ꎮ关键词:阿尔茨海默病ꎻ淫羊藿ꎻＡＰＰ/ＰＳ１双转基因小鼠ꎻ环磷酸腺苷效应元件结合蛋白/脑源性神经营养因子信号通路ꎻ认知功能中图分类号:Ｒ２８５㊀文献标志码:Ａ㊀文章编号:２０９５－５３７５(２０２３)０６－０３６１－００６ｄｏｉ:１０.１３５０６/ｊ.ｃｎｋｉ.ｊｐｒ.２０２３.０６.００１ＥｐｉｍｅｄｉｕｍａｃｔｉｖａｔｅｓＣＲＥＢ/ＢＤＮＦｓｉｇｎａｌｉｎｇｐａｔｈｗａｙｔｏｉｍｐｒｏｖｅｃｏｇｎｉｔｉｖｅｆｕｎｃｔｉｏｎｉｎＡＰＰ/ＰＳ１ｄｏｕｂｌｅｔｒａｎｓｇｅｎｉｃｍｉｃｅＣＵＩＬｉｎꎬＸＩＡＯＨｏｎｇｈｅ∗ꎬＬＩＨｅꎬＴＩＡＮＹｕꎬＴＩＡＮＪｉｎｍｉｎｇꎬＺＨＡＯＹｕｍｅｎｇꎬＹＡＮＧＪｉｎｇｘｉａｎ∗(ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＰｈａｒｍａｃｙꎬＬｉａｏｎｉｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅꎬＤａｌｉａｎ１１６０００ꎬＣｈｉｎａ)Ａｂｓｔｒａｃｔ:Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ㊀ＴｏｓｔｕｄｙｗｈｅｔｈｅｒＥｐｉｍｅｄｉｕｍｃａｎｉｍｐｒｏｖｅｔｈｅｃｏｇｎｉｔｉｖｅｆｕｎｃｔｉｏｎｏｆＡＰＰ/ＰＳ１ｄｏｕｂｌｅｔｒａｎｓｇｅｎｉｃｍｉｃｅｂｙｒｅｇｕｌａｔｉｎｇＣＲＥＢ/ＢＤＮＦｓｉｇｎａｌｉｎｇｐａｔｈｗａｙ.Ｍｅｔｈｏｄｓ㊀Ｔｈｉｒｔｙ７－ｍｏｎｔｈ－ｏｌｄｍａｌｅＡＰＰ/ＰＳ１ｄｏｕｂｌｅｔｒａｎｓｇｅｎｉｃｍｉｃｅｗｅｒｅｒａｎｄｏｍｌｙｄｉｖｉｄｅｄｉｎｔｏｍｏｄｅｌｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐａｎｄＥｐｉｍｅｄｉｕｍｇｒｏｕｐａｃｃｏｒｄｉｎｇｔｏｂｏｄｙｗｅｉｇｈｔꎬ１５ｍｉｃｅｉｎｅａｃｈｇｒｏｕｐ.Ａｎ￣ｏｔｈｅｒ１５ｍａｌｅＣ５７ＢＬ/６ｍｉｃｅｏｆｔｈｅｓａｍｅａｇｅｗｅｒｅｔａｋｅｎａｓｔｈｅｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ.ＴｈｅａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎｇｒｏｕｐｗａｓｇｉｖｅｎＥｐｉｍｅｄｉ￣ｕｍ３ｇ ｋｇ－１ｂｙｇａｖａｇｅꎻＢｌａｎｋｇｒｏｕｐａｎｄｍｏｄｅｌｇｒｏｕｐｗｅｒｅｇｉｖｅｎｅｑｕａｌｖｏｌｕｍｅｏｆ０.３％ＣＭＣ－Ｎａｂｙｇａｖａｇｅｆｏｒ２８ｄａｙｓꎬｏｎｃｅａｄａｙ.ＭｏｒｒｉｓｗａｔｅｒｍａｚｅｔｅｓｔｗａｓｕｓｅｄｔｏｄｅｔｅｃｔｔｈｅｌｅａｒｎｉｎｇａｎｄｍｅｍｏｒｙａｂｉｌｉｔｙｏｆｍｉｃｅꎻＰａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌｃｈａｎｇｅｓｏｆｂｒａｉｎｔｉｓｓｕｅｉｎｍｉｃｅｏｂｓｅｒｖｅｄｂｙＨ＆ＥａｎｄＮｉｓｓｌｓｔａｉｎｉｎｇꎻＤｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆｍａｌｏｎｄｉａｌｄｅｈｙｄｅ(ＭＤＡ)ａｎｄｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅｄｉｓｍｕｔａｓｅ(ＳＯＤ)ｉｎｂｒａｉｎｔｉｓｓｕｅｏｆｍｉｃｅꎻＤｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆａｍｙｌｏｉｄβ－ｐｒｏｔｅｉｎ(Ａβ)ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｉｎｍｏｕｓｅｂｒａｉｎｂｙｉｍｍｕｎｏｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅꎻＴｈｅｅｘｐｒｅｓ￣ｓｉｏｎｓｏｆＣＲＥＢａｎｄＢＤＮＦｓｉｇｎａｌｉｎｇｐａｔｈｗａｙｒｅｌａｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎｓｗｅｒｅｄｅｔｅｃｔｅｄｂｙＷｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ.Ｒｅｓｕｌｔｓ㊀ＣｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｔｈｅｂｌａｎｋｇｒｏｕｐꎬｔｈｅｎｅｓｔｉｎｇｓｃｏｒｅｏｆＡＰＰ/ＰＳ１ｄｏｕｂｌｅｔｒａｎｓｇｅｎｉｃｍｉｃｅｗａｓｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｄｅｃｒｅａｓｅｄꎬａｎｄｔｈｅｅｓｃａｐｅｌａｔｅｎｃｙａｎｄｓｗｉｍｍｉｎｇｄｉｓｔａｎｃｅｗｅｒｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｉｎｃｒｅａｓｅｄ(Ｐ<０.０１).Ｔｈｅｔａｒｇｅｔｑｕａｄｒａｎｔｒｅｓｉｄｅｎｃｅｔｉｍｅａｎｄｔｈｅｎｕｍｂｅｒｏｆｃｒｏｓｓｉｎｇｐｌａｔｆｏｒｍｓａｒｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｒｅｄｕｃｅｄ.Ｔｈｅｒｅｗｅｒｅｏｂｖｉｏｕｓｎｅｕｒｏｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌｄａｍａｇｅｓｉｎｃｏｒｔｅｘａｎｄｈｉｐｐｏｃａｍｐｕｓ.ＩｎａｄｄｉｔｉｏｎꎬａｌａｒｇｅａｍｏｕｎｔｏｆＡβｄｅｐｏｓｉｔｉｏｎｗａｓｏｂｓｅｒｖｅｄｉｎｔｈｅｃｏｒｔｅｘａｎｄｈｉｐｐｏｃａｍｐｕｓｏｆＡＰＰ/ＰＳ１ｄｏｕｂｌｅｔｒａｎｓｇｅｎｉｃｍｉｃｅꎬａｎｄｔｈｅａｃ￣ｔｉｖｉｔｙｏｆＳＯＤｉｎｂｒａｉｎｔｉｓｓｕｅｄｅｃｒｅａｓｅｄａｎｄｔｈｅｌｅｖｅｌｏｆＭＤＡｉｎｃｒｅａｓｅｄ.ＷｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌａｔｉｏｎｏｆＣＲＥＢｐｒｏｔｅｉｎｉｎｔｈｅｂｒａｉｎｏｆｔｈｅｍｏｄｅｌｇｒｏｕｐｗａｓｉｎｈｉｂｉｔｅｄꎬａｃｃｏｍｐａｎｉｅｄｂｙａｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｅｃｒｅａｓｅｉｎＢＤＮＦｐｒｏｔｅｉｎｅｘ￣ｐｒｅｓｓｉｏｎ.Ｅｐｉｍｅｄｉｕｍ(３ｇ ｋｇ－１)ｆｏｒ４ｗｅｅｋｓｃａｎｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｉｍｐｒｏｖｅｔｈｅｎｅｓｔｉｎｇａｂｉｌｉｔｙａｎｄｃｏｇｎｉｔｉｖｅｆｕｎｃｔｉｏｎｏｆｍｏｄｅｌｍｉｃｅꎬｒｅｄｕｃｅｎｅｕｒｏｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌｄａｍａｇｅꎬｉｎｈｉｂｉｔＡβｄｅｐｏｓｉｔｉｏｎꎬｒｅｄｕｃｅｏｘｉｄａｔｉｖｅｓｔｒｅｓｓꎬｐｒｏｍｏｔｅＣＲＥＢｐｒｏｔｅｉｎｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌａ￣ｔｉｏｎꎬａｎｄｉｎｃｒｅａｓｅＢＤＮＦｐｒｏｔｅｉｎｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ.Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ㊀ＥｐｉｍｅｄｉｕｍｉｍｐｒｏｖｅｓｔｈｅｃｏｇｎｉｔｉｖｅｆｕｎｃｔｉｏｎｏｆＡＰＰ/ＰＳ１ｄｏｕｂｌｅｔｒａｎｓｇｅｎｉｃｍｉｃｅꎬｗｈｉｃｈｍａｙｂｅｒｅｌａｔｅｄｔｏｔｈｅａｃｔｉｖａｔｉｏｎｏｆＣＲＥＢ/ＢＤＮＦｓｉｇｎａｌｉｎｇｐａｔｈｗａｙ.Ｋｅｙｗｏｒｄｓ:ＡｌｚｈｅｉｍｅｒᶄｓｄｉｓｅａｓｅꎻＥｐｉｍｅｄｉｕｍｂｒｅｖｉｃｏｒｎｕＭａｘｉｍ.ꎻＡＰＰ/ＰＳ１ｄｏｕｂｌｅｔｒａｎｓｇｅｎｉｃｍｉｃｅꎻＣＲＥＢ/ＢＤＮＦｓｉｇ￣ｎａｌｉｎｇｐａｔｈｗａｙꎻＣｏｇｎｉｔｉｖｅｆｕｎｃｔｉｏｎ㊀㊀阿尔茨海默病(ＡｌｚｈｅｉｍｅｒᶄｓｄｉｓｅａｓｅꎬＡＤ)是一种由多因素引起的ꎬ最常见的中枢神经退行性疾病ꎬ以记忆力减退和认知障碍为主要表现ꎮ随着当今社会人口结构的不断变化ꎬ老龄化人口不断增加ꎬ该病的发病率逐年增加ꎬ给人类带来了沉重的经济及社会负担[１－２]ꎮ迄今为止ꎬ该病的发病机制并不十分明确ꎬ普遍认为ｔｕａ蛋白过度磷酸化形成神经纤维缠结(ＮＦＴ)㊁β－淀粉样蛋白沉积形成老年斑和突触丢失是其主要病理特征ꎮ目前ꎬ国内外现有药物只能部分缓解ＡＤ早期症状ꎬ无法阻止或逆转ＡＤ病情进展ꎮ因此ꎬ我们需要在更广阔的领域寻找并开发能够修复㊁替代受损神经元的药物ꎬ对治疗ＡＤ等神经退变性疾病具有重要的社会意义和经济价值[３－４]ꎮ淫羊藿(ＥｐｉｍｅｄｉｕｍｂｒｅｖｉｃｏｒｎｕＭａｘｉｍ.)属小檗科草本植物ꎬ又名仙灵脾ꎬ始载于«神农本草经»ꎬ性温ꎬ味辛㊁甘ꎬ归肝㊁肾经ꎬ具有神经保护㊁补肾壮阳㊁祛风除湿㊁强筋骨等功效[５－６]ꎮ近年研究发现ꎬ传统医学中补肾益精的中药如淫羊藿㊁人参㊁独活等ꎬ能够抑制Ａβ沉积ꎬ促进神经再生ꎬ发挥神经保护作用[７－９]ꎮ大量研究证实ꎬ淫羊藿及其活性成分具有广泛的神经保护作用[１０]ꎬ但是否能通过激活环磷酸腺苷效应元件结合蛋白/脑源性神经营养因子(ＣＲＥＢ/ＢＤＮＦ)信号通路来改善ＡＰＰ/ＰＳ１双转基因小鼠的认知功能尚未见报道ꎮ本研究拟采用筑巢试验和Ｍｏｒｒｉｓ水迷宫试验探究淫羊藿能否改善ＡＰＰ/ＰＳ１双转基因小鼠的认知功能ꎬ然后采用Ｈ＆Ｅ染色㊁Ｎｉｓｓｌ染色㊁免疫荧光等方法评价其作用途径ꎬ最后采用Ｗｅｓｔｅｒｎｂｏｔ方法检测ＣＲＥＢ/ＢＤＮＦ信号通路关键蛋白表达情况ꎬ明确淫羊藿的作用机制ꎬ以期为淫羊藿用于治疗ＡＤ提供进一步的科学依据ꎮ１㊀材料１.１㊀主要仪器㊀ＭＳ－１型水迷宫分析系统(成都仪器厂)ꎻＴｉ－Ｓ型荧光倒置显微镜(日本Ｎｉｋｏｎ公司)ꎻＨＭ５２５ＮＸ型冷冻切片机(赛默飞世尔仪器有限公司)ꎻＤＷ－８６Ｌ３８６型超低温冰箱(青岛海尔公司)ꎻＰｏｗｅｒＰａｃＵｎｉｖｅｒｓａｌＰｏｗｅｒＳｕｐｐｌｙ型通用电泳仪(美国Ｂｉｏ－Ｒａｄ公司)ꎻＴｒａｎｓ－ＢｌｏｔＳＤ型半干式蛋白转膜仪(美国Ｂｉｏ－Ｒａｄ公司)ꎻＴａｎｏｎ－５２００Ｍｕｌｔｉ凝胶成像系统(上海天能科技有限公司)ꎮ１.２㊀主要药品与试剂㊀淫羊藿(阳光大药房)ꎻＮｉｓｓｌ染色试剂盒㊁苏木素伊红染色试剂盒(碧云天生物技术有限公司ꎬ批号分别为Ｃ０１１７㊁Ｃ０１０５Ｓ)ꎻ兔抗Ａβ多克隆抗体(ＳｉｇｎａｌｗａｙＡｎｔｉｂｏｄｙꎬ批号:＃４０５８７)ꎻ兔抗ＢＤＮＦ多克隆抗体㊁兔抗ＧＡＰＤＨ多克隆抗体(万类生物科技有限公司ꎬ批号分别为ＷＬ０９９９㊁ＷＬ０１１１４)ꎻＦＩＴＣ标记山羊抗兔ＩｇＧ㊁兔抗ＣＲＥＢ多克隆抗体㊁兔抗磷酸化ＣＲＥＢ(ｐ－ＣＲＥＢ)多克隆抗体(北京博奥森生物技术有限公司ꎬ批号分别为ｂｓ－０２９５Ｇ㊁ｂｓ－００３５Ｒ㊁ｂｓ－００３６Ｒ)ꎻ辣根过氧化物酶标记的山羊抗兔ＩｇＧ二抗(武汉赛维尔生物科技有限公司ꎬ批号:ＧＢ２３３０３)ꎮ１.３㊀动物㊀３月龄ＳＰＦ级ＡＰＰ/ＰＳ１小鼠(雄性)[合格证号:ＳＣＸＫ(苏)２０２０－０００９ꎬ江苏华创信诺医药科技有限公司]ꎻＳＰＦ级Ｃ５７ＢＬ/６小鼠[雌性ꎬ合格证号:ＳＣＸＫ(辽)２０１７－０００１ꎬ辽宁长生生物有限公司]ꎮ饲养于温度２０~２５ħꎬ相对湿度４０％~６０％环境中ꎬ每天１２ｈ光照维持ꎬ昼夜循环ꎬ自由摄食㊁饮水ꎮ雄性ＡＰＰ/ＰＳ１小鼠和雌性Ｃ５７ＢＬ/６小鼠合笼繁殖ꎬ鉴定ＡＰＰ/ＰＳ１阳性小鼠ꎬ饲养至７月龄用于试验ꎬ同窝出生的阴性Ｃ５７ＢＬ/６小鼠作为空白对照组ꎮ本研究已通过辽宁中医药大学动物伦理审查ꎬ批号:２１００００４２０２１１３３ꎮ２ 方法２.１㊀动物分组与给药㊀取７月龄雄性ＡＰＰ/ＰＳ１双转基因小鼠３０只ꎬ按体重随机分为模型对照组和淫羊藿组ꎬ每组１５只ꎻ另取１５只同龄的雄性Ｃ５７ＢＬ/６小鼠作为空白对照组ꎮ淫羊藿组灌胃给予３ｇ ｋｇ－１的药物溶液ꎬ每天１次ꎬ连续２８ｄꎻ空白组和模型组给予等体积０.３％ＣＭＣ－Ｎａꎮ２.２㊀筑巢试验㊀淫羊藿给药第１７天后ꎬ将小鼠按不同组别进行单笼饲养ꎬ垫料换为玉米芯ꎬ适应２ｄ后ꎬ试验当天下午更换新的玉米芯垫料ꎬ并在投料口处放置两叠卫生纸片(５ｃｍˑ５ｃｍ)ꎬ每叠１０张ꎮ观察各小鼠筑巢ꎬ参照５分法进行评分ꎬ连续观察３ｄꎬ并拍照记录ꎮ评分标准为:纸片没有明显触碰和撕咬(１分):部分纸片被撕碎(２分):大部分纸片被撕成碎片ꎬ但没有形成明显的巢状(３分)ꎻ纸巾被撕成碎片ꎬ并聚集形成一个比较成扁平的巢状结构(４分)ꎻ纸片被撕成碎片ꎬ并聚集形成一个完整或接近完整的巢状结构(５分)ꎮ２.３㊀Ｍｏｒｒｉｓ水迷宫试验㊀Ｍｏｒｒｉｓ水迷宫(ＭｏｒｒｉｓｗａｔｅｒｍａｚｅꎬＭＷＭ)装置由一个黑色内壁的圆桶(直径１２０ｃｍˑ高６０ｃｍ)㊁摄像头及自动图像采集分析系统组成ꎮ将桶内分成东㊁西㊁南㊁北４个象限ꎬ将逃生平台(直径１０ｃｍ)置于其中一个象限内ꎬ水面没过平台０.５ｃｍꎬ温度控制在(２０ʃ１)ħꎮ给药第２２天后采用水迷宫试验检测小鼠学习和记忆能力ꎮＭＷＭ试验历时６ｄꎬ试验前５ｄ进行定位航行实验ꎬ第６天进行空间探索实验ꎮ①定位航行实验:训练时将小鼠从任一象限１/２弧度处面朝池壁㊁沿池壁边缘轻放于水中ꎬ如果小鼠在６０ｓ内未找到平台ꎬ则引至平台停留２０ｓꎬ每天４个象限各训练一次ꎮ连续训练５ｄꎬ每只小鼠的学习能力等相关数据经拍摄系统采集㊁分析ꎬ以每天小鼠的平均逃避潜伏期来评估小鼠的学习能力ꎮ②空间探索实验:第６天ꎬ撤去平台ꎬ将小鼠由原平台所在的对侧象限面朝池壁放入水中ꎬ根据小鼠在６０ｓ内的穿越原平台次数㊁平台所在象限停留时间百分比和第１次穿越平台前的游泳距离ꎬ评估小鼠的空间记忆能力ꎮ２.４㊀取材㊀行为学实验结束后ꎬ各组小鼠腹腔注射４％水合氯醛深度麻醉小鼠并处死ꎬ取脑组织ꎬ部分置于预冷的磷酸盐缓冲液中暂时保存ꎬ备用ꎮ另一部分置于３０％蔗糖溶液ꎬ４ħ沉降过夜ꎮ次日ꎬ冰冻包埋剂包埋ꎬ－８０ħ放置过夜ꎬ采用冰冻切片机对脑组织进行连续冠状切片(厚度为１０μｍ)ꎬ－２０ħ冻存ꎬ备用ꎮ２.５㊀Ｈ＆Ｅ染色㊀取 ２.４ 项下脑组织冰冻切片ꎬ室温平衡５ｍｉｎ后ꎬ用４％多聚甲醛固定１５ｍｉｎꎬｄｄＨ２Ｏ润洗３次ꎬ置于５０ħ的苏木素染液中染色５ｍｉｎꎬｄｄＨ２Ｏ润洗３次ꎻ置于１％盐酸－乙醇分化液中分化１０~１５ｓꎬｄｄＨ２Ｏ润洗３次ꎬ置于０.５％氨水反蓝液中１０ｓꎬｄｄＨ２Ｏ润洗ꎻ依次经７０％㊁８０％㊁９５％乙醇脱水ꎬ二甲苯透化５ｍｉｎꎬ中性树脂胶封片ꎬ在显微镜下观察皮层和海马组织形态变化情况ꎮ２.６㊀Ｎｉｓｓｌ染色㊀取 ２.４ 项下脑组织冰冻切片ꎬ室温平衡５ｍｉｎ后ꎬ用４％多聚甲醛固定１５ｍｉｎꎻｄｄＨ２Ｏ润洗３次ꎬ放入Ｎｉｓｓｌ染液中ꎬ待尼氏体清晰后终止反应ꎬｄｄＨ２Ｏ洗涤３次ꎻ快速在７０％㊁１００％乙醇中脱水５ｓꎬ二甲苯透化５ｍｉｎꎬ中性树胶进行封片ꎮ显微镜下观察皮层㊁海马ＣＡ３和海马ＤＧ区尼氏体数量ꎮ２.７㊀小鼠脑组织中氧化应激指标水平的检测㊀取 ２.４ 项下各组小鼠的脑组织ꎬ去除嗅球㊁小脑和脑干部分ꎬ保留大脑皮层和海马组织ꎬ合并后制成组织匀浆液ꎬ再根据试剂盒说明书方法操作ꎬ检测小鼠脑组织中ＳＯＤ㊁ＭＤＡ水平ꎮ２.８㊀免疫荧光化学法检测β－淀粉样蛋白的表达㊀取脑组织冰冻切片ꎬ室温平衡５ｍｉｎ后ꎬ用４％多聚甲醛固定３０ｍｉｎꎻＰＢＳ清洗３次ꎻ０.５％ＴｒｉｔｏｎＸ－１００透化３０ｍｉｎꎻＰＢＳ清洗３次ꎻ５％ＢＳＡ溶液室温封闭１ｈꎬ加入兔抗Ａβ１－４２一抗稀释液(１ʒ３００)ꎬ４ħ避光孵育过夜ꎬＰＢＳ清洗３次ꎬ然后加ＦＩＴＣ标记的山羊抗兔二抗稀释液(１ʒ３００)ꎬ室温避光孵育１~２ｈꎬＤＡＰＩ染细胞核３ｍｉｎꎬＰＢＳ清洗３次ꎬ滴加抗荧光淬灭剂ꎬ封片ꎬ倒置显微镜下观察并拍照ꎮ２.９㊀Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ法检测ＣＲＥＢ㊁ＢＤＮＦ通路相关蛋白表达情况㊀取小鼠脑组织ꎬ剥离海马组织ꎬ加入ＲＩＰＡ裂解液㊁１％ＰＭＳＦ和５０ˑ蛋白酶－磷酸酶抑制剂提取总蛋白ꎬＢＣＡ法检测蛋白浓度ꎮ蛋白样品按４ʒ１体积比加入５ˑＬｏａｄｉｎｇｂｕｆｆｅｒꎬ煮沸５ｍｉｎꎬ进行凝胶电泳ꎬ２ｈ后转膜ꎬ室温条件下５％脱脂奶粉封闭２ｈꎬＰＢＳＴ缓冲液清洗３次ꎬ分别加入兔抗ＣＲＥＢ㊁ｐ－ＣＲＥＢ㊁ＢＤＮＦ一抗稀释液(１ʒ３００)ꎬ和兔抗ＧＡＰＤＨ一抗稀释液(１ʒ５００)ꎬ４ħ孵育过夜ꎬ次日加入辣根过氧化物酶标记的山羊抗兔ＩｇＧ二抗(１ʒ５００)ꎬ室温孵育２ｈꎻ滴加ＥＣＬ工作液ꎬ并以凝胶成像系统成像ꎮ采用ＩｍａｇｅＪ软件分析灰度值ꎮ３ 结果３.１㊀筑巢试验检测ＡＰＰ/ＰＳ１双转基因小鼠的生活能力㊀如图１所示ꎬ空白对照组小鼠在投放纸片的２４ｈ内即出现筑巢行为ꎬ在７２ｈ之内纸片被撕成小碎片ꎬ并筑成完整的巢状结构(见图１Ａ)ꎬ而模型组ＡＰＰ/ＰＳ１双转基因小鼠没有将纸片撕成碎片ꎬ在７２ｈ内纸片散落在鼠笼里ꎬ没有筑成完整的巢状结构(见图１Ａ)ꎬ筑巢评分明显低于空白对照组(见图１ＢꎬＰ<０.０１)ꎻ淫羊藿组小鼠在２４ｈ内出现筑巢行为ꎬ７２ｈ内大部分纸片被撕成碎片ꎬ形成较为完整的巢状结构(见图１Ａ)ꎬ筑巢评分与模型组比较明显提高(见图１ＢꎬＰ<０.０１)ꎮ以上结果表明ꎬ淫羊藿能够明显改善ＡＰＰ/ＰＳ１双转基因小鼠生活能力ꎮ３.２㊀淫羊藿对ＡＰＰ/ＰＳ１双转基因小鼠学习记忆能力影响㊀如图２所示ꎬ从训练的第３天开始ꎬ与空白组比较ꎬＡＰＰ/ＰＳ１双转基因小鼠的逃避潜伏期明显增加(见图２Ｂꎬ第５天时Ｐ<０.０１)ꎬ目标象限停留时间减少(见图２Ｆꎬ第５天时Ｐ<０.０１)ꎬ游泳距离增加(见图２Ｄꎬ第５天时Ｐ<０.０１)ꎬ而穿越平台次数显著降低(见图２Ｅꎬ第５天时Ｐ<０.０１)ꎮ与模型组比较ꎬ淫羊藿组逃避潜伏期和游泳距离显著缩短ꎬ目标象限停留时间百分比和穿越平台次数显著增加ꎮ各组小鼠的游泳速度无明显差异(见图２ＣꎬＰ<０.０１)ꎬ说明以上指标的改变并不是游泳速度不同导致的ꎮ以上结果提示ꎬ淫羊藿能够改变ＡＰＰ/ＰＳ１双转基因小鼠学习和记忆能力ꎮＡ.筑巢行为经典图ꎻＢ.筑巢评分统计图图１㊀筑巢试验检测淫羊藿对ＡＰＰ/ＰＳ１双转基因小鼠生活能力的影响(ｎ＝１０)㊀注:与空白组比较ꎬ＃＃Ｐ<０.０１ꎻ与模型组比较ꎬ∗∗Ｐ<０.０１Ａ.定位航行轨迹图ꎻＢ.逃避潜伏期ꎻＣ.游泳速度ꎻＤ.游泳距离ꎻＥ.穿越平台次数ꎻＦ.第三象限停留时间百分比图２㊀Ｍｏｒｒｉｓ水迷宫试验检测淫羊藿对ＡＰＰ/ＰＳ１双转基因小鼠学习记忆能力的影响(ｎ＝１０)㊀注:与空白组比较ꎬ＃Ｐ<０.０５ꎬ＃＃Ｐ<０.０１ꎻ与模型组比较ꎬ∗Ｐ<０.０５ꎬ∗∗Ｐ<０.０１３.３㊀淫羊藿对ＡＰＰ/ＰＳ１双转基因小鼠脑组织病理损伤的影响㊀如图３Ａ所示ꎬ空白组小鼠皮层㊁海马ＣＡ３区和ＤＧ区的神经细胞数量多ꎬ层次清晰ꎬ胞质丰富ꎬ细胞核大而圆ꎬ胞浆㊁胞核染色均匀ꎬ组织形态结构正常ꎻ模型组小鼠皮层㊁海马ＣＡ３区和ＤＧ区的神经细胞数目明显减少ꎬ且排列松散ꎬ形态不规则ꎬ细胞核深染㊁固缩ꎬ神经细胞空泡化明显ꎬ说明模型组小鼠脑组织明显受损ꎻ经淫羊藿治疗后ꎬ神经细胞数目较模型组明显增多ꎬ层次较为清晰ꎬ胞浆㊁胞核染色均匀ꎬ细胞核固缩明显减轻ꎬ说明淫羊藿可减轻ＡＰＰ/ＰＳ１双转基因小鼠脑组织损伤ꎮ如图３Ｂ所示ꎬ与空白组比较ꎬ模型组小鼠皮层㊁海马ＣＡ３区和ＤＧ区的尼氏体模糊不清ꎬ排列疏松ꎬ数量明显减少(图３Ｃ~Ｅꎬ皮层:Ｐ<０.０１ꎬ海马ＣＡ３区:Ｐ<０.０１ꎬ海马ＤＧ区:Ｐ<０.０１)ꎻ经淫羊藿治疗后小鼠皮层㊁海马ＣＡ３区和ＤＧ区的尼氏体颜色加深ꎬ排列紧密ꎬ数量明显增多(图３Ｃ~Ｅꎬ皮层:Ｐ<０.０１ꎬ海马ＣＡ３区:Ｐ<０.０１ꎬ海马ＤＧ区:Ｐ<０.０５)ꎮ以上结果表明ꎬ淫羊藿能够明显改善ＡＰＰ/ＰＳ１双转基因小鼠脑组织结构损伤ꎮＡ.Ｈ＆Ｅ染色ꎻＢ.Ｎｉｓｓｌ染色ꎻＣ~Ｅ.尼氏体数量统计图图３㊀淫羊藿对ＡＰＰ/ＰＳ１双转基因小鼠脑组织结构的影响(ｎ＝３)㊀注:与空白组比较ꎬ＃Ｐ<０.０５ꎬ＃＃Ｐ<０.０１ꎻ与模型组比较ꎬ∗Ｐ<０.０５ꎬ∗∗Ｐ<０.０１３.４㊀淫羊藿对ＡＰＰ/ＰＳ１双转基因小鼠脑组织中氧化应激指标水平的影响㊀如图４所示ꎬ与空白组比较ꎬ模型组小鼠脑组织中ＭＤＡ水平显著升高(Ｐ<０.０１)ꎬＳＯＤ水平显著降低(Ｐ<０.０１)ꎻ与模型组比较ꎬ淫羊藿组小鼠脑组织中上述指标水平均显著逆转(Ｐ<０.０１)ꎮ３.５㊀淫羊藿对ＡＰＰ/ＰＳ１小鼠脑内β－淀粉样蛋白沉积的影响㊀如图５所示ꎬ与空白组比较ꎬ模型组小鼠脑内β－淀粉样蛋白沉积明显增多ꎬ而经淫羊藿治疗后ꎬ小鼠脑内斑块数量明显减少ꎮ以上结果表明ꎬ淫羊藿能够减少小鼠脑内β－淀粉样蛋白沉积ꎮ图４㊀淫羊藿对ＡＰＰ/ＰＳ１双转基因小鼠脑组织中ＭＤＡ和ＳＯＤ水平的影响(ｎ＝８)㊀注:与空白组比较ꎬ＃＃Ｐ<０.０１ꎻ与模型组比较ꎬ∗∗Ｐ<０.０１图５㊀淫羊藿对ＡＰＰ/ＰＳ１小鼠脑内β－淀粉样蛋白沉积的影响㊀注:绿色代表Ａβ斑块ꎻＤＧ:Ｄｅｎｔａｔｅｇｙｒｕｓꎬ海马齿状回ꎻＣｏｒｔｅｘ:大脑皮层３.６㊀淫羊藿对ＣＲＥＢ㊁ＢＤＮＦ通路相关蛋白表达的影响㊀如图６所示ꎬ与空白组比较ꎬ模型组小鼠脑组织中ＣＲＥＢ蛋白磷酸化水平和ＢＤＮＦ蛋白表达水平均显著下调(Ｐ<０.０１)ꎻ与模型组相比ꎬ淫羊藿组小鼠脑组织中ＣＲＥＢ蛋白磷酸化水平和ＢＤＮＦ蛋白表达水平均显著逆转(Ｐ<０.０１)ꎮ以上结果表明ꎬ淫羊藿通过激活ＣＲＥＢ/ＢＤＮＦ信号通路改善ＡＰＰ/ＰＳ１双转基因小鼠的认知功能ꎮ图６㊀淫羊藿对ＡＰＰ/ＰＳ１双转基因小鼠ＣＲＥＢ/ＢＤＮＦ信号通路相关蛋白表达的影响(ｘʃｓꎬｎ＝３)㊀注:与空白组比较ꎬ＃＃Ｐ<０.０１ꎻ与模型组比较ꎬ∗∗Ｐ<０.０１４ 讨论中医将ＡＤ归属于 呆病 痴呆 等范畴ꎬ其病位在脑ꎬ与肾密切相关ꎮ«灵枢 海论»曰: 脑为髓之海 髓海有余ꎬ则轻劲多力ꎬ自过其度 髓海不足ꎬ则脑转耳鸣ꎬ胫酸眩冒ꎬ目无所见ꎬ懈怠安卧 ꎮ髓海不足则出现痴呆[１１－１２]ꎮ因此中医认为治疗ＡＤ应注重补肾填精㊁益髓养脑ꎮ淫羊藿是临床上常用的补肾填精药ꎬ«本草备要»载其 补命门ꎬ益精气ꎬ坚筋骨 ꎬ可用于肾阳虚衰ꎬ阳痿遗精ꎬ风湿痹痛ꎬ筋骨痿软[１３]ꎮ本研究发现ꎬ给予模型动物淫羊藿治疗后ꎬ小鼠逃避潜伏期减少和穿越平台次数增加ꎬ这说明淫羊藿可改善ＡＰＰ/ＰＳ１双转基因小鼠的学习和记忆能力ꎮＣＲＥＢ－ＢＤＮＦ信号通路在神经细胞修复和神经功能的恢复中具有重要作用ꎮＣＲＥＢ是神经系统中重要的核转录因子ꎬ在基因转录㊁促进神经元再生与保护㊁突触形成㊁学习记忆及生活能力等方面发挥重要调节作用ꎬ可通过促进下游ＢＤＮＦ的分泌ꎬ发挥神经细胞的修复及保护作用ꎮ上述内容的发挥主要依赖于其磷酸化产物ｐ－ＣＲＥＢꎬ当转录因子ＣＲＥＢ的Ｓｅｒ１３３位点被磷酸化后ꎬ与靶基因ＣＲＥ答应元件(ｃＡＭＰｒｅｓｐｏｎｓｅｅｌｅｍｅｎｔꎬＣＲＥ)结合ꎬ随后ｐ－ＣＲＥＢ与ＢＤＮＦ启动子区域的ｃＡＭＰ反应元件结合ꎬ调节ＢＤＮＦ的转录[１４－１５]ꎮ研究发现ꎬ随着ＡＤ患者脑内Ａβ神经毒性的释放ꎬＣＲＥＢ－ＢＤＮＦ信号转导通路减弱ꎬ从而导致其下游信号分子ｐ－ＣＲＥＢ和ＢＤＮＦ表达降低ꎮＢＤＮＦ的低表达难以抵抗应激下神经元的损伤ꎬ这可导致记忆功能的缺陷ꎬ甚至海马体积的缩小[１６]ꎮ此外ꎬ有研究显示ꎬＢＤＮＦ可抑制Ｈ２Ｏ２诱导的ＰＣ１２细胞凋亡[１７]ꎬ脑室注射ＢＤＮＦ可减轻脑缺血再灌注引起的大鼠脑内氧化应激和神经细胞凋亡ꎬ过表达ＣＲＥＢ可以减轻高浓度Ｈ２Ｏ２所致的内皮细胞氧化损伤[１８]ꎬ这说明ＣＲＥＢ/ＢＤＮＦ信号通路可能与氧化应激存在某种内在联系ꎮ本实验为探究淫羊藿的神经保护作用是否与ＣＲＥＢ/ＢＤＮＦ信号通路有关ꎬ分别检测了各组小鼠海马组织中ＣＲＥＢ和ＢＤＮＦ信号通路相关蛋白的表达ꎮ结果发现ꎬ与空白组比较ꎬ模型组小鼠海马组织中ＣＲＥＢ蛋白磷酸化水平和ＢＤＮＦ蛋白表达水平均显著降低ꎻ给予淫羊藿治疗后ꎬ小鼠海马组织中上述指标均显著逆转ꎬ说明淫羊藿改善ＡＰＰ/ＰＳ１双转基因小鼠的认知功能ꎬ减轻小鼠脑组织病理损伤和氧化应激ꎬ其抗ＡＤ作用的潜在机制可能与激活ＣＲＥＢ/ＢＤＮＦ信号通路有关ꎮ参考文献:[１]㊀张誉丹ꎬ袁德培ꎬ毛剑琴.基于ＢＤＮＦ/ＴｒｋＢ/ＣＲＥＢ途径探讨固本健脑液改善ＡＤ大鼠海马区神经元损伤的内在机制[Ｊ].中药材ꎬ２０２０ꎬ４３(９):２２３２－２２３７. [２]王超楠ꎬ赵大庆ꎬ严铭铭ꎬ等.人参治疗阿尔茨海默病药理作用及机制研究进展[Ｊ].中华中医药学刊ꎬ２０２３ꎬ４２(３):１１６－１２２.[３]ＢＩＡＮＨꎬＢＩＡＮＷꎬＬＩＮＸꎬｅｔａｌ.ＲＮＡＩｎｔｅｒｆｅｒｅｎｃｅＳｉｌｅｎｃｉｎｇｏｆＧｌｙｃｏｇｅｎＳｙｎｔｈａｓｅＫｉｎａｓｅ３βＩｎｈｉｂｉｔｅｓＴａｕＰｈｏｓｐｈｏｒｙｌａｔｉｏｎｉｎＭｉｃｅｗｉｔｈＡｌｚｈｅｉｍｅｒＤｉｓｅａｓｅ[Ｊ].Ｎｅｕ￣ｒｏｃｈｅｍＲｅｓꎬ２０１６ꎬ４１(９):２４７０－２４８０.[４]ＤＥＬＡＣＯＵＲＴＥＡꎬＤＥＦＯＳＳＥＺＡ.Ａｌｚｈｅｉｍｅｒᶄｓｄｉｓｅａｓｅ:ｔａｕｐｒｏ－ｔｅｉｎｓꎬｔｈｅｐｒｏｍｏｔｉｎｇｆａｃｔｏｒｓｏｆｍｉｃｒｏｔｕｂｕｌｅａｓｓｅｍｂｌｙꎬａｒｅｍａｊｏｒｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓｏｆｐａｉｒｅｄｈｅｌｉｃａｌｆｉｌａｍｅｎｔｓ[Ｊ].ＪＮｅｕｒｏｌＳｃｉꎬ１９８６ꎬ７６(２/３):１７３－１８６.[５]ＺＨＯＵＭꎬＺＨＥＮＧＷꎬＳＵＮＸꎬｅｔａｌ.ＣｏｍｐａｒａｔｉｖｅａｎａｌｙｓｉｓｏｆｃｈｅｍｉｃａｌｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓｉｎｄｉｆｆｅｒｅｎｔｐａｒｔｓｏｆＥｐｉｍｅｄｉｕｍＨｅｒｂ[Ｊ].ＪＰｈａｒｍＢｉｏｍｅｄＡｎａｌꎬ２０２１ꎬ１９８(１０):１１３－９８４. [６]ＫＩＭＤＲꎬＬＥＥＪＥꎬＳＨＩＭＫＪꎬｅｔａｌ.ＥｆｆｅｃｔｓｏｆｈｅｒｂａｌＥｐｉ￣ｍｅｄｉｕｍｏｎｔｈｅｉｍｐｒｏｖｅｍｅｎｔｏｆｂｏｎｅｍｅｔａｂｏｌｉｃｄｉｓｏｒｄｅｒｔｈｒｏｕｇｈｔｈｅｉｎｄｕｃｔｉｏｎｏｆｏｓｔｅｏｇｅｎｉｃｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎｆｒｏｍｂｏｎｅｍａｒｒｏｗ－ｄｅｒｉｖｅｄｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌｓｔｅｍｃｅｌｌｓ[Ｊ].ＭｏｌＭｅｄＲｅｐꎬ２０１７ꎬ１５(１):１２５－１３０.[７]宋宜祥ꎬ黎巍威ꎬ王学美.淫羊藿苷神经保护作用机制研究进展[Ｊ].环球中医药ꎬ２０１４ꎬ７(４):３００－３０４. [８]计竹娃.人参多糖的提取及其对帕金森病小鼠的神经保护作用的研究[Ｄ].杭州:浙江大学ꎬ２０２０. 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5羟色胺检测定量
5羟色胺（5-hydroxytryptamine，5-HT）最早在血清中发现的，又名血清素(serotonin)，是一
种吲哚衍生物，普遍存在于动植物组织中。
5羟色胺（5-HT）作为神经递质，主要分布于松果体和下丘脑。
检查5羟色胺（5-HT）对各
种神经元的作用时发现，5羟色胺（5-HT）可使大多数交感节前神经元兴奋，而使付交感节
前神经元抑制。
损毁动物的中缝核或用药物阻断5-HT合成，都可使脑内5-HT含量明显降低，并引起动物，降低。
同时，的作用也减弱或消失。
如果电刺激大鼠的中缝核，可影响其升高；另一方面，也观察到室温升高时大鼠脑内5-HT更新加速。
这些现象揭示脑内5-HT与睡眠、
镇痛、体温调节都有关系，5-HT含量及功能异常可能与精神病和偏头痛等多种疾病的发病有关。
5羟色胺（5-HT）检测方法
色谱技术发明以来，被广泛用于生物样品中药物及其代谢产物的检测与定量。
迪信泰检测平
台采用高效液相色谱以及高效液相色谱和质谱联用的方法来检测5羟色胺，具有简单、快速、灵敏、准确等特点。
5羟色胺（5-HT）检测案例
收到客户提供的中缝核组织样品，使用Agilent 1260 Infinity型高效液相色谱仪，配备DAD
紫外检测器。
色谱柱为Agilent Zorbax Extend-C18 (250 mm*4.6 mm 5μm)。
标准品的色谱图如下：
样品中的色谱图如下：。
多巴胺的测定.doc
荧光法测定大鼠脑组织和血液中单胺类物质的方法探讨：1、主要仪器：荧光分光光度计（日本产，SHIMADZU RF-5301 PC）；组织高速分散器（上海产，XHF-1）；冷冻离心机（上海产，TGL-16G）；恒温水浴箱；旋涡混合器等。
2、试剂：剂来源除标明外均为国产分析纯级，试剂配制使用双蒸水。
（1）标准品：重酒石酸去甲肾上腺素；盐酸多巴胺；5-羟色胺硫酸肌酐；5-羟吲哚乙酸为瑞士Fluka产品。
（2）混合标准储存液的配制：分别精确称取上述标准品各 50mg，用 0.01N 盐酸配制成 100 ml 混合标准储存液（500ug/ml），置4℃冰箱保存，临用前稀释成1.25ug/ml应用液。
（3）酸性正丁醇：每升正丁醇加入浓盐酸0.85ml，混匀。
（4）正庚烷。
（5）0.1% OPT-10N 盐酸溶液：邻苯二甲醛为瑞士 Fluka 产品，临用前用 10N 盐酸稀释成0.001% OPT-10N盐酸溶液。
（6）0.25%半胱氨酸溶液：用0.1N盐酸新鲜配制。
（7）碘试剂：配制0.02N碘液和5%碘化钠（以70%乙醇溶解），临用前以1∶1体积比混合。
（8） 1/15 M ，PH=7.2的磷酸盐缓冲液。
（9） 0.33M碳酸氢钠溶液。
（10）碱性亚硫酸钠溶液：25%亚硫酸钠与5N氢氧化钠在临用前以1∶9体积比混合。
（11）0.1M EDTA 试剂：用1M醋酸钠溶液配制，以10N氢氧化钠调节pH至7.0。
3、实验方法：⑴标本处理：大鼠断头处死，立即取血及脑组织。
脑组织用冰生理盐水冲洗，去除血膜、嗅球和小脑，沿脑中线剖开，取一半脑组织吸干水分称重，加入10倍体积的冰酸性正丁醇，用组织分散器匀浆备用。
血液静置凝固后用冷冻离心机分离血清，立即加入10倍体积冰酸性正丁醇摇匀。
⑵提取过程：同时制备标准管和空白管，与血、脑标本在相同条件下按下图流程进行提取，获得水相A和水相B。
⑶NE、DA的测定步骤：各管取水相A 0.5ml，按下列流程进行操作：①水相A 0.5ml＋1/15M 磷酸盐缓冲液 1.5ml＋0.1M EDTA 0.4ml＋碘液0.2ml②混匀、静置 3min＋碱性磷酸钠（新配）0.4ml③混匀、静置 3min+5N 醋酸 0.4ml④混匀，80℃水浴，冷却⑤测NE荧光测度，激发波长为 382/488⑥继续沸水浴 20min，冷却⑦测DA荧光测度，激发波长 325/385。
小鼠5羟色胺(5-HT)说明书
小鼠5羟色胺(5-HT)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。
检测范围：96T8pg/ml-240pg/ml使用目的：本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样本中5羟色胺(5-HT)含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠5羟色胺(5-HT)水平。
用纯化的小鼠5羟色胺(5-HT)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入5羟色胺(5-HT)，再与HRP标记的5羟色胺(5-HT)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的5羟色胺(5-HT)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中小鼠5羟色胺(5-HT)浓度。
试剂盒组成1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。
加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7.温育：操作同3。
8.洗涤：操作同5。
9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
大鼠神经递质检测报告
大鼠神经递质检测报告
高端科技已经深入到了医疗检测领域，使得大家能够更加深入的了解人类生理和病理的本质。
针对于大鼠神经递质检测，在我们的实验室中已经有了一个完整和专业的流程。
以下是我们的报告，供您作为参考。
检测目的：
本次检测旨在分析大鼠神经递质有无异常，以及与神经元突触的互动情况。
我们使用了先进的技术设备对大鼠的脑组织进行样本提取，通过化学分析技术来测定特定的神经递质。
检测样本：
大鼠脑组织，在检测前经过了一定的处理和制备，以便于后续的实验操作。
样本经过严格的隔离和检测，确保了单一的样本来源，能够有效降低测量误差。
检测项目：
1. 测定多巴胺浓度
2. 测定去甲肾上腺素浓度
3. 测定5-羟色胺浓度
检测结果：
检测项目 | 单位 | 值
多巴胺 ng/g 68.21
去甲肾上腺素 ng/g 23.45
5-羟色胺 ng/g 10.31
从检测结果中可以看出，多巴胺的值相对较高，而5-羟色胺的
值相对较低，结合实验负责人的解释，说明神经元之间存在有序
的调节，而且这种状态处于一种积极和正常的状态。
这样的结果
为神经科学的研究提供了可靠和有力的数据。
结论：
本次检测分析了大鼠神经递质的相关数据，样本来自于严格的
筛选和准备。
基于现有的测量数据，我们得到了可靠有力的结论，把这份报告作为一个参考，以便于更好地启发神经科学的研究和
对疾病的理解，为提高医疗水平和生命科学领域的技术开发做出
新的努力。
神经递质检测
神经递质检测神经递质是通过动作电位作用于神经终端选择性的释放出的化学物质，能与邻近结构内特定的受体起相互作用，达到一定量后能够引起一系列生理反应。
神经递质可大致分为四类，即生物胺类、氨基酸类、肽类、其它类。
迪信泰检测平台采用液相质谱联用(LC-MS)的方法，使用Thermo Scientific的U3000快速液相色谱对样品进行分离，Thermo Scientific™ Q Exactive™对样品进行鉴定，可高效、精准的检测样本中神经递质的含量变化。
此外，我们还可采用高效液相色谱（HPLC）的方法对神经递质进行测定，以满足您的不同需求。
迪信泰检测平台可检测神经递质项目乙酰胆碱含量检测乙酰胆碱(Acetylcholine, Ach)是一种广泛存在于植物、动物和某些微生物体内的兴奋性神经递质，通过特异性地与各种受体结合，在神经细胞之间或神经细胞与效应器之间传递信息。
乙酰胆碱含量的测定有助于慢性支气管炎、阿尔茨海默病、湿疹等多种疾病的研究。
乙酰胆碱分子结构式血清素/5-羟色胺含量检测5-羟色胺(5-hydroxy tryptamine)，又称血清素，是一种普遍存在于动物、植物及某些菌类中的生物原胺类神经递质，具有改善睡眠、稳定情绪、控制胃肠蠕动等作用。
五羟色胺分子结构式γ-氨基丁酸含量检测γ-氨基丁酸(γ－aminobutyric acid, GABA)是一种广泛存在于生物体内的抑制性神经递质，也是一种天然氨基酸，具有多种生理功能，如降血压、增强记忆力、治疗癫痫、抗热应激作用等。
γ-氨基丁酸分子结构式组胺含量检测组胺(Histamine, His)属于生物胺之一，也是中枢神经系统中的一种胺类神经递质，参与调控前庭功能以及介导多种疾病的病理生理过程，在临床上具有很好的应用前景。
组胺分子结构式神经递质检测服务列表乙酰胆碱(Acetylcholine)血清素/5-羟色胺γ-氨基丁酸(GABA)组胺(Histamine)肾上腺素LC-MS测定神经递质样本要求：1. 请确保样本量大于0.2g或者0.2mL，测定样品不返还，请您保留备份。