C1005 DAPI染色液

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DAPI染色封片剂

DAPI染色封片剂

北京雷根生物技术有限公司
DAPI 荧光封片剂
简介:
DAPI 荧光封片剂是一种专门用于染色体C 带的DA-DAPI 染色的减缓荧光淬灭的封固剂。

DA 和DAPI 易与A-T 碱基对结合,DAPI 染色可同时检测C 带和G 带,进行DA 对比染色后图像荧光强度减弱,只能特异的C 带呈强荧光染色。

按每个样本需要50~100μl 封片剂计算,5ml 可以用于至少50样本的封片。

组成:
操作步骤(仅供参考):
1、 染色样本用DA 染色液染色,McIlvaine 缓冲液轻轻清洗。

2、 DAPI 染色液染色,McIlvaine 缓冲液轻轻清洗。

3、 滴一滴DAPI 荧光封片剂于载玻片上,盖上贴有细胞的盖玻片,让细胞接触封片液,尽
量避免气泡封片。

4、 用透明黏合剂密封盖玻片。

注意事项:
1、 荧光物质均易发生淬灭,染色后的样品宜避光保存。

2、 在使用DAPI 荧光封片剂的情况下,虽然可减缓淬灭,仍需尽量避光。

3、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

编号 名称 DZ0125 Storage DAPI 荧光封片剂 10ml 4℃ 避光 使用说明书 1份。

dapi染色原理

dapi染色原理

dapi染色原理DAPI染色原理。

DAPI(4',6-diamidino-2-phenylindole)是一种广泛用于细胞核染色的荧光染料,其原理是利用DAPI与DNA结合并发出蓝紫色荧光的特性。

DAPI染色广泛应用于细胞生物学、免疫组织化学、流式细胞术等领域,具有高灵敏度和特异性的特点。

下面我们将详细介绍DAPI染色的原理。

DAPI是一种蓝色荧光染料,其分子结构中含有两个氨基苯基吡啶环,这两个环可以与DNA中的腺嘌呤(A)结合,形成稳定的复合物。

在紫外光激发下,DAPI与DNA结合后会发出蓝紫色的荧光,因此可以用来染色细胞核。

在进行DAPI染色时,首先需要将细胞固定,然后用DAPI溶液浸泡细胞,DAPI会穿透细胞膜进入细胞内部并与DNA结合。

在荧光显微镜下观察,可以清晰地看到细胞核发出蓝紫色的荧光,从而可以观察到细胞核的形态和数量,以及DNA的分布情况。

DAPI染色的原理是基于其与DNA的特异性结合,因此在染色过程中需要注意一些因素。

首先,细胞固定的条件需要严格控制,固定不足会导致DNA释放,固定过度则会影响DAPI与DNA的结合。

其次,DAPI的浓度和染色时间也需要进行优化,以确保获得清晰的染色效果。

另外,DAPI染色需要在紫外光下观察,因此在操作时需要注意保护眼睛,避免紫外光的伤害。

除了在细胞生物学领域的应用外,DAPI染色还可以用于测序实验中。

在测序实验中,DAPI可以用来染色DNA,帮助研究人员观察DNA的纯度和浓度,为后续的实验提供重要信息。

总之,DAPI染色是一种简单、快速、灵敏的细胞核染色方法,其原理是利用DAPI与DNA的特异性结合并发出蓝紫色荧光。

在实际操作中,需要严格控制固定条件、DAPI浓度和染色时间,以确保获得清晰的染色效果。

DAPI染色在细胞生物学、免疫组织化学、流式细胞术等领域有着广泛的应用,为细胞和DNA研究提供了重要的技术支持。

干细胞的DAPI染色

干细胞的DAPI染色
染色:把培养皿中的培养基换一次液,每一个皿中放4-8ml培养基,使用微量加样器加DAPI到培养皿中。浓度 50ug/ml,也就是4ml培养基对0.2ml DAPI工作液,注意避光,无菌操作。移植前使用PBS洗6遍,使用DMEM混悬,每一皿细胞混悬在1mlDMEM中,放在1ml管中,备用。染色可以2小时,或者移植前一天染色,都可以的。
前一段时间做干细胞的DAPI染色,把自己收集的一些相关资料和自己的经验写在这里,希望能够给做DAPI染色的战友一点帮助。
将培养中的细胞进行DAPI染色,标记细胞核。
DAPI保存:解,可以将10mgDAPI溶解在10ml水中,使用冻存管分装,每一管1ml,-20℃冻存。使用的时候,先取一管放在4℃。

dapi染色原理

dapi染色原理

dapi染色原理Dapi染色原理。

Dapi(4',6-diamidino-2-phenylindole)是一种广泛应用于细胞和组织染色的荧光染料。

它的荧光特性使得它成为生物学研究中常用的标记物之一。

那么,Dapi是如何实现对细胞和组织的染色的呢?接下来,我们将详细介绍Dapi染色的原理。

Dapi染色的原理主要基于其与DNA结合的特性。

DNA分子中含有丰富的腺嘌呤(A)和胸腺嘧啶(T)碱基,而Dapi分子则具有亲和力,能够与这些碱基发生氢键结合。

当Dapi染料与DNA结合时,会发生荧光激发和发射,从而使得DNA在荧光显微镜下呈现出蓝色荧光。

在进行Dapi染色时,通常需要将细胞或组织固定后,用含有Dapi染料的缓冲液进行染色处理。

Dapi分子会穿透细胞膜,进入细胞内部,并与DNA结合。

随后,通过荧光显微镜观察,可以清晰地看到细胞核内DNA的分布情况,从而对细胞核的形态和数量进行分析。

Dapi染色具有高度的选择性和灵敏度,能够清晰地显示DNA的分布情况。

同时,Dapi染色还可以与其他荧光染料进行共染色,如荧光素二异氰酸酯(FITC)等,从而实现多色荧光染色,用于同时观察多种细胞结构和功能。

除了在细胞生物学研究中的应用,Dapi染色还被广泛运用于组织学和病理学领域。

通过Dapi染色,可以清晰地显示组织中细胞核的形态和数量,为病理诊断提供重要的依据。

总之,Dapi染色是一种简单而有效的细胞和组织染色方法,其原理基于Dapi与DNA的结合特性,能够清晰地显示DNA的分布情况。

在生物学研究和临床诊断中具有重要的应用价值,为科学研究和医学诊断提供了有力的技术支持。

dapi染色方法

dapi染色方法

dapi染色方法
DAPI染色方法是一种常用的细胞核染色方法,它可以用于检测DNA含量、核型分析、染色体计数和核型鉴定等方面。

DAPI染色方法的原理是利用DAPI(4',6-diamidino-2-phenylindole)这种荧光染料,它可以与DNA结合,使DNA发出蓝色荧光,从而实现对细胞核的染色。

DAPI染色方法的步骤如下:
1.将细胞固定在载玻片上,可以使用甲醛、乙醛、乙醇等固定剂进行固定。

2.用PBS(磷酸盐缓冲液)或者其他缓冲液进行洗涤,去除细胞表面的蛋白质和其他杂质。

3.将DAPI染料加入到载玻片上,使其与细胞核中的DNA结合。

4.在黑暗中孵育10-15分钟,使DAPI染料充分结合到DNA上。

5.用PBS或其他缓冲液进行洗涤,去除未结合的DAPI染料。

6.在显微镜下观察细胞核的荧光信号,可以使用荧光显微镜或者激光共聚焦显微镜进行观察。

DAPI染色方法的优点是可以快速、简单地染色,同时可以同时检测多个样本。

此外,DAPI染色方法还可以与其他荧光染料结合使用,
如FITC、TRITC等,从而实现多重染色,提高检测的准确性和灵敏度。

但是,DAPI染色方法也存在一些缺点,如DAPI染料对细胞有毒性,需要控制染色时间和浓度,避免对细胞造成伤害。

此外,DAPI染色方法只能检测DNA含量和核型分析等方面,不能检测其他细胞器和分子的信息。

DAPI染色方法是一种常用的细胞核染色方法,具有快速、简单、灵敏等优点,可以用于多种细胞学研究和临床检测中。

DAPI染色

DAPI染色

DAPI即4',6-二脒基-2-苯基吲哚(4',6-diamidino-2-phenylindole),是一种能够与DNA强力结合的荧光染料,常用与荧光显微镜观测1。

因为DAPI可以透过完整的细胞膜,它可以用于活细胞和固定细胞的染色。

DAPI - 染色机理DAPI 为一种荧光染料,可以穿透细胞膜与细胞核中的双链DNA结合而发挥标记的作用,可以产生比DAPI自身强20多倍的荧光,和EB相比,对双链DNA的染色灵敏度要高很多倍。

显微镜下可以看到显蓝色荧光的细胞,荧光显微镜观察细胞标记的效率高(几乎为100 %) ,且对活细胞无毒副作用。

DAPI染色常用于细胞凋亡检测,染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。

DAPI也常用于普通的细胞核染色以及某些特定情况下的双链DNA染色。

细胞经热激处理后用DAPI染色3分钟,在荧光显微镜下可以看到到细胞核的形态变化。

a、正常的烟草细胞核:核形完整,染色质均匀。

b、染色质固缩,向外周聚集,形成周边化。

c、染色质进一步固缩,形成很多颗粒物质。

d、细胞核破裂形成碎片,核解体。

DAPI的发散光为蓝色,且DAPI和绿色荧光蛋白(Green fluorescent protein, GFP)或Texas Red染剂(红色荧光染剂)的发散波长,仅有少部分重叠,研究员可以善用这项特性在单一的样品上进行多重荧光染色。

DAPI能快速进入活细胞中与DNA结合,因此DAPI对生物体而言,也被视为一种毒性物质与致癌物。

使用过程中应注意操作与抛弃的处理程序。

在细胞移植前,将DAPI 以一定的浓度加入培养基中,与细胞共同孵育过夜,用PBS 缓冲液漂洗至少6 次以洗掉未结合的DAPI,在用酶消化后离心收集细胞,加入DMEM培养基制成细胞悬液以备用。

储存条件-20℃避光保存1、DAPI强烈致癌,操作时要戴上手套。

2、贮存液用70%酒精配制,浓度100 µg/ml,可用黑纸包住,长期冻存。

DAPI碧云天使用说明

DAPI碧云天使用说明

DAPI产品编号产品名称包装(5mg/ml) 0.2ml C1002 DAPI产品简介:DAPI,即2-(4-Amidinophenyl)-6-indolecarbamidine dihydrochloride,也称DAPI dihydrochloride,分子式为C16H15N5 · 2HCl,分子量为350.25,CAS Number 28718-90-3。

DAPI是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料。

和双链DNA结合后可以产生比DAPI自身强20多倍的荧光。

和EB(ethidium bromide)相比,对双链DNA的染色灵敏度要高很多倍。

DAPI染色常用于细胞凋亡检测,染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。

DAPI也常用于普通的细胞核染色以及某些特定情况下的双链DNA染色。

DAPI的最大激发波长为340nm,最大发射波长为488nm;DAPI和双链DNA结合后,最大激发波长为364nm,最大发射波长为454nm。

本DAPI溶液用水配制。

用于细胞核染色时,推荐的DAPI工作浓度为0.5-10μg/ml。

包装清单:产品编号产品名称包装(5mg/ml) 0.2mlC1002 DAPI—说明书1份保存条件:-20℃避光保存,一年有效。

注意事项:DAPI对人体有一定刺激性,请注意适当防护。

荧光染料都存在淬灭的问题,建议染色后尽量当天完成检测。

为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。

抗荧光淬灭封片液(P0126)可以向碧云天订购。

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用本产品的文献:1. Zhou H, Qian J, Wang J, Yao W, Liu C, Chen J, Cao X.Enhanced bioactivity of bone morphogenetic protein-2 with low dose of 2-N, 6-O-sulfated chitosan in vitro and in vivo.Biomaterials. 2009 Mar;30(9):1715-24. Epub 2009 Jan 7.2. Gong Y, Wu J, Huang Y, Shen S, Han X.Nonylphenol induces apoptosis in rat testicular Sertoli cells via endoplasmic reticulum stress.Toxicol Lett. 2009 Apr 25;186(2):84-95. Epub 2009 Jan 17.3. Dong HS, Li L, Song ZH, Tang J, Xu B, Zhai XW, Sun LL, Zhang P, Li ZB, Pan QJ, Shi QH, Shen W.Premeiotic fetal murine germ cells cultured in vitro form typical oocyte-like cells but do not progress through meiosis.Theriogenology. 2009 Jul 15;72(2):219-31. Epub 2009 Apr 9.4. Chen K, Zhang Q, Wang J, Liu F, Mi M, Xu H, Chen F, Zeng K.Taurine protects transformed rat retinal ganglion cells from hypoxia-induced apoptosis by preventing mitochondrial dysfunction.Brain Res. 2009 Jul 7;1279:131-8. Epub 2009 May 7.5. Xin HY, Cheng AC, Wang MS, Jia RY, Shen CJ, Chang H.Identification and characterization of a duck enteritis virus US3-like gene.Avian Dis. 2009 Sep;53(3):363-9.6. Ding W, Ju S, Jiang S, Zhu L, Wang Y, Wang H.Reduced APRIL expression induces cellular senescence via a HSPG-dependent pathway.Pathol Oncol Res. 2009 Dec;15(4):693-701. Epub 2009 May 26.7.Gong Y, Wu J, Huang Y, Shen S, Han X.Nonylphenol induces apoptosis in rat testicular Sertoli cells via endoplasmic reticulum stress.Toxicol Lett. 2009;186(2):84-95. Epub 2009 Jan 17.8. Xie W, Cheng A, Wang M, Chang H, Zhu D, Luo Q.Molecular cloning and characterization of the UL31 gene from duck enteritis virus.Mol Biol Rep. 2010 Mar;37(3):1495-503. Epub 2009 May 23.9. Xu H, Wang P, Fu Y, Zheng Y, Tang Q, Si L, You J, Zhang Z, Zhu Y, Zhou L, Wei Z, Lin B, Hu L, Kong X.Length of the ORF, position of the first AUG and the Kozak motif are important factors in potential dual-coding transcripts. Cell Res. 2010;20(4):445-57. Epub 2010 Feb 16.10. Zhang Y, Zhou L, Bao YL, Wu Y, Yu CL, Huang YX, Sun Y, Zheng LH, Li YX.Butyrate induces cell apoptosis through activation of JNK MAP kinase pathway in human colon cancer RKO cells.Chem Biol Interact. 2010;185(3):174-81. Epub 2010 Mar 25.。

DAPI染色

DAPI染色

在荧光显微镜观察下,DAPI染剂是利用紫外光波长的光线激发。

当DAPI 与双股DNA结合时,最大吸收波长为358nm,最大发射波长为461nm,其发散光的波长范围含盖了蓝色至青绿色。

DAPI也可以和RNA结合,但产生的荧光强度不及与DNA结合的结果,其发散光的波长范围约在400nm左右。

DAPI的发散光为蓝色,且DAPI和绿色荧光蛋白(Green fluorescent protein, GFP)或Texas Red染剂(红色荧光染剂)的发散波长,仅有少部分重叠,研究员可以善用这项特性在单一的样品上进行多重荧光染色。

DAPI能快速进入活细胞中与DNA结合,因此DAPI对生物体而言,也被视为一种毒性物质与致癌物。

使用过程中应注意操作与抛弃的处理程序。

DAPI中文名:4,6-联脒-2-苯基吲哚(?)英文名:4',6-diamidino-2-phenylindole,2-(4-amidinophenyl)-1H -indole-6-carboxamidine,DAPI dihydrochloride分子式:C16H15N5分子量:277.324CAS number:28718-90-3光谱性质:与双链DNA结合时最大吸收/最大发射为358 nm/461 nm;与RNA结合时,最大发射移动到400 nm左右。

编辑本段DAPI染色原理染色原理:DAPI 为一种荧光染料,可以穿透细胞膜与细胞核中的双链DNA结合而发挥标记的作用,可以产生比DAPI自身强20多倍的荧光,和EB相比,对双链DNA的染色灵敏度要高很多倍。

显微镜下可以看到显蓝色荧光的细胞,荧光显微镜观察细胞标记的效率高(几乎为100 %) ,且对活细胞无毒副作用。

DAPI染色常用于细胞凋亡检测,染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。

DAPI也常用于普通的细胞核染色以及某些特定情况下的双链DNA 染色。

细胞经热激处理后用DAPI染色3分钟,在荧光显微镜下可以看到到细胞核的形态变化。

DAPI染液使用说明书

DAPI染液使用说明书

杭州昊鑫生物科技股份有限公司htpp://DAPI染液DAPI蓝色荧光DAPI常用于细胞核染色,优先与双链DNA结合,可与小沟中的AT结合。

DAPI与双链DNA结合后,由于DAPI和小沟中的水分子被置换,可产生20倍的荧光强度。

DAPI亦可与RNA结合,但结合的模式不同。

DAPI/RNA复合体与DAPI/DNA复合体相比,发射波长较长(前者约500nm,后者约460nm)。

在多色荧光染色技术中,DAPI也是较常用的核复染剂。

其蓝色荧光可与绿色、黄色或红色荧光形成鲜明的对比。

DAPI可特异性的染核,几乎不标记细胞质。

DAPI染色实验流程1 贴壁细胞的复染1.1样品准备1.1.1使用恰当的固定剂固定样品。

一般情况下,最后用DAPI对细胞进行染色。

1.2复染流程1.2.1 用PBS短暂平衡样品;1.2.2 加入适量的DAPI染液,保证所有细胞均被覆盖,孵育3~5min;1.2.3用PBS漂洗样品数次,用吸水纸将多余的液体吸干;1.2.4用配有恰当滤片的荧光显微镜观察样品。

2 悬浮细胞的复染2.1样品准备2.2.1 收集悬浮细胞2×105~1×106 个细胞,通过离心,使细胞沉淀,弃上清;2.2.2 轻弹试管,使沉淀在剩余的液体中重悬,在加入1mL PBS;2.2.3 将细胞悬液缓慢的加入4mL乙醇中,同时以最大的速度涡旋。

将含有细胞的乙醇在-20℃放置5~15min;2.2.4 通过离心,使细胞沉淀,弃上清;2.2.5 轻弹试管,使沉淀松散,在加入5ml PBS。

2.2复染流程2.2.1 离心使细胞沉淀,弃上清,轻弹试管,使沉淀松散,加入2~3mL DAPI染液;2.2.2 室温下孵育15min;2.2.3如果使用荧光显微镜观察细胞,将样品离心后,弃上清,用新鲜的缓冲液重悬沉淀。

在显微镜载片上滴加一滴细胞悬液,加盖片后观察。

温馨提示为了您的自身安全,使用试剂前,请做好防护,如穿实验服,戴手套等。

dapi染色原理

dapi染色原理

dapi染色原理DAPI染色原理。

DAPI(4',6-diamidino-2-phenylindole)是一种广泛应用于细胞生物学和生物医学研究中的荧光染色剂,主要用于DNA的染色。

DAPI染色原理基于其与DNA结合的特性,使得DNA在荧光显微镜下呈现出蓝色荧光。

下面将详细介绍DAPI染色的原理及其在实验中的应用。

DAPI是一种紫外光激发的荧光染色剂,其最大激发波长为358纳米,最大发射波长为461纳米。

在细胞实验中,DAPI通常与细胞固定剂一起使用,如乙醇或甲醛,以固定并渗透细胞膜,使得DAPI能够进入细胞内部并结合DNA。

DAPI与DNA结合后,由于其特异性和高亲和力,能够发出强烈的蓝色荧光,从而使得细胞核在荧光显微镜下清晰可见。

DAPI染色的原理主要基于其与DNA的结合。

DAPI是一种双腺嘌呤类似物,其分子结构中含有两个氨基苯基吲哚环,这些结构使得DAPI能够通过π-π堆积和氢键相互作用与DNA中的腺嘌呤和胞嘧啶结合。

在细胞实验中,DAPI能够与DNA的碱基对结合,形成稳定的DAPI-DNA复合物,从而实现对DNA的高度选择性染色。

由于DAPI与DNA的特异性结合,因此在细胞实验中被广泛应用于DNA染色和细胞核标记。

在免疫荧光染色实验中,DAPI通常与抗体共染色,用于观察细胞核的位置和形态。

此外,DAPI还可用于细胞凋亡的检测,因为在凋亡过程中,细胞核会出现形态上的改变,DAPI染色能够清晰地显示这些变化。

在细胞遗传学研究中,DAPI也被用于观察染色体的数量和形态。

总之,DAPI染色原理是基于其与DNA的特异性结合,使得DNA在荧光显微镜下呈现出蓝色荧光。

由于其高度选择性和特异性,DAPI在细胞生物学和生物医学研究中得到了广泛的应用,成为了观察DNA和细胞核的重要工具。

希望本文对DAPI染色原理有所帮助,谢谢阅读!。

DAPI染色

DAPI染色

DAPI即4',6-二脒基-2-苯基吲哚(4',6-diamidino-2-phenylindole),是一种能够与DNA强力结合的荧光染料,常用与荧光显微镜观测1。

因为DAPI可以透过完整的细胞膜,它可以用于活细胞和固定细胞的染色。

DAPI - 染色机理DAPI 为一种荧光染料,可以穿透细胞膜与细胞核中的双链DNA结合而发挥标记的作用,可以产生比DAPI自身强20多倍的荧光,和EB相比,对双链DNA的染色灵敏度要高很多倍。

显微镜下可以看到显蓝色荧光的细胞,荧光显微镜观察细胞标记的效率高(几乎为100 %) ,且对活细胞无毒副作用。

DAPI染色常用于细胞凋亡检测,染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。

DAPI也常用于普通的细胞核染色以及某些特定情况下的双链DNA染色。

细胞经热激处理后用DAPI染色3分钟,在荧光显微镜下可以看到到细胞核的形态变化。

a、正常的烟草细胞核:核形完整,染色质均匀。

b、染色质固缩,向外周聚集,形成周边化。

c、染色质进一步固缩,形成很多颗粒物质。

d、细胞核破裂形成碎片,核解体。

DAPI的发散光为蓝色,且DAPI和绿色荧光蛋白(Green fluorescent protein, GFP)或Texas Red染剂(红色荧光染剂)的发散波长,仅有少部分重叠,研究员可以善用这项特性在单一的样品上进行多重荧光染色。

DAPI能快速进入活细胞中与DNA结合,因此DAPI对生物体而言,也被视为一种毒性物质与致癌物。

使用过程中应注意操作与抛弃的处理程序。

在细胞移植前,将DAPI 以一定的浓度加入培养基中,与细胞共同孵育过夜,用PBS 缓冲液漂洗至少6 次以洗掉未结合的DAPI,在用酶消化后离心收集细胞,加入DMEM培养基制成细胞悬液以备用。

储存条件-20℃避光保存1、DAPI强烈致癌,操作时要戴上手套。

2、贮存液用70%酒精配制,浓度100 µg/ml,可用黑纸包住,长期冻存。

甲醛固定细胞的dapi染色流程

甲醛固定细胞的dapi染色流程

甲醛固定细胞的dapi染色流程甲醛固定后的细胞需用PBS洗涤三次,每次五分钟。

Cells fixed with formaldehyde need to be washed with PBS three times, each time for five minutes.接着,将细胞用PBS溶液浸泡十分钟。

Then, immerse the cells in PBS solution for ten minutes.将PBS溶液倒掉后,用70%乙醇冲洗细胞,每次五分钟。

After discarding the PBS solution, rinse the cells with 70% ethanol, each time for five minutes.继续用PBS溶液洗涤细胞三次,每次五分钟。

Continue to wash the cells with PBS solution three times, each time for five minutes.将PBS倒掉后,用3.7%甲醛固定细胞十分钟。

After discarding the PBS, fix the cells with 3.7% formaldehyde for ten minutes.再次用PBS溶液洗涤细胞三次,每次五分钟。

Wash the cells with PBS solution three times again, each time for five minutes.接着,用0.1% Triton X-100在PBS中渗透细胞膜,持续十五分钟。

Next, permeabilize the cell membrane with 0.1% Triton X-100 in PBS for fifteen minutes.用5%牛血清蛋白封闭细胞孔,持续三十分钟。

Block the cells with 5% bovine serum albumin for thirty minutes.接下来,将DAPI染料添加到细胞上,孵育二十分钟。

DAPI荧光对比染色

DAPI荧光对比染色

DAPI 的配制与染色
DAPI对比染色液:
DAPI是一种流行的核对比染色试剂用于多色荧光技术。

DAPI的蓝色荧光与其他绿色,黄色或红色探针结构形成明显的对比。

DAPI染细胞核特别清楚,带有一点或没有胞浆标记,下面是用于组织切片或细胞培养样品染色的步骤。

DAPI储存液(5mg/ml或14.3 mM):
DAPI(分子探针,(Ca# D-1306) 10mg
二甲基甲酰胺(DMF)2ml
混合溶解,完全溶解后,分装并贮存于-20℃。

DAPI工作液(100ng/ml or 300nm in PBS)
DAPI储存液2µl
PBS 100ml
液体装入棕色瓶里4℃保存或用铝箔包好避光(为达到较强的染色,使用4µl储存液或PBS用量减少50ml)。

室温下,暗处孵育切片30分钟。

染色类型
核被染成鲜艳的蓝色。

建议使用
荧光剂标记绿色(FITC)或红色(Texas red)时用DAPI核对比染色。

DAPI溶液使用说明

DAPI溶液使用说明

DAPI溶液使用说明1.储存条件:-DAPI溶液应储存在避光、冷藏条件下,温度一般保持在2-8摄氏度。

-避免与有机物接触,因为DAPI易溶于有机溶剂。

-需要在不透光的瓶子中存放。

2.DAPI溶液的制备:-从供应商处购买DAPI分装液或粉末。

-如果购买的是DAPI分装液,可直接使用。

-如果购买的是DAPI粉末,根据实验需要,将DAPI粉末溶解在较暗的条件下,使用适当的溶液将其稀释到所需浓度。

3.溶液配制:-通常使用的DAPI浓度在0.5-5微克/毫升之间。

-使用磷酸盐缓冲液、PBS等适当的缓冲液来配制DAPI溶液。

-使用去离子水来稀释DAPI粉末。

4.样本处理:-取出需要检测的细胞或组织样本。

-对于细胞样本,将其培养在培养皿中并进行固定。

-对于组织样本,进行常规的石蜡切片或冰冻切片处理。

5.DAPI染色:-取出制备好的DAPI溶液。

-将样本浸没在DAPI溶液中,室温静置10-20分钟。

注意,时间不宜过长,以避免核酸溶解。

-可根据需要进行洗涤步骤,使用适当的缓冲液洗去多余的DAPI染料。

-最后,用显微镜观察样本。

6.显微镜观察:-使用荧光显微镜观察DAPI染色的样本。

-设置合适的荧光通道选择DAPI的特定波长范围来观察细胞的核酸。

-使用适当的增强滤光镜来增强DAPI染料的亮度和对比度。

-观察和记录细胞核的DAPI染色图像。

7.注意事项:-DAPI是一种有毒物质,需要避免与皮肤和眼睛接触。

实验人员需要佩戴适当的防护手套和眼镜。

-在DAPI处理样本时,避免直接照射荧光显微镜的激发光源到眼睛。

-避免长时间曝光在DAPI的荧光光源下,以免损伤细胞样本。

-在DAPI染色后,不宜长时间存放,最好在染色后立即观察。

总结:DAPI溶液是一种核酸染料,用于荧光显微镜下观察细胞和组织的DNA。

通过适当的配制和处理,可以在细胞的核区域获得高亮度和高对比度的DAPI染色图像。

使用时需要注意安全,并在短时间内观察样本,以获得最佳的结果。

dapi染色方法

dapi染色方法

dapi染色方法
dapi染色方法是一种用于标记细胞核DNA的荧光染色方法。

该方法使用一种叫做4',6-二氨基-2-苯基吡啶-3,5-二唑(DAPI)的染料。

DAPI是一种紫色荧光染料,可以结合到双链DNA的AT区域上,形成荧光染色复合物。

利用DAPI染色,可以在细胞中清晰地观察到细胞核的位置、数量、形态和大小等特征。

DAPI染色方法广泛应用于细胞生物学、遗传学、病理学等领域。

通常,DAPI染色可以在固定和未固定的细胞样本中进行,也可以与其他染色方法结合使用,如抗体染色、荧光原位杂交等。

在实验室中,DAPI染色还可以作为评估细胞凋亡和细胞周期的重要工具。

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使用说明:
1. 对于细胞或组织样品,固定后,适当洗涤去除固定剂。随后如果需要进行免疫荧光染色,则先进行免疫荧光染色,染色 完毕后再按后续步骤进行DAPI染色。如果不需要进行其它染色,则直接进行后续的DAPI染色。
2. 对于贴壁细胞或组织切片,加入少量DAPI染色液,覆盖住样品即可。对于悬浮细胞,至少加入待染色样品体积3倍的染 色液,混匀。
5. Ding W, Ju S, Jiang S, Zhu L, Wang Y, Wang H. Reduced APRIL expression induces cellular senescence via a HSPG-dependent pathway. Pathol Oncol Res. 2009 Dec;15(4):693-701. Epub 2009 May 26.
DAPI 染色液
产品编号 C1005
产品名称 DAPI染色液
包装 10ml
产品简介:
¾ DAPI染色液(DAPI Staining Solution)是经过精心优化几乎适用于所有常见细胞和组织细胞核染色的染色液。 ¾ DAPI , 即 2-(4-Amidinophenyl)-6-indolecarbamidine dihydrochloride , 也 称 DAPI dihydrochloride , 分 子 式 为
C16H15N5 · 2HCl ,分子量为350.25 ,CAS Number 28718-90-3。 ¾ DAPI是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料。和双链DNA结合后可以产生比DAPI自身强20多倍的荧光。和EB(ethidium
bromide)相比,对双链DNA的染色灵敏度要高很多倍。 ¾ DAPI染色常用于细胞凋亡检测,染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。DAPI也常用于普通的细胞核染色以及某些
3. 室温放置3-5分钟。 4. 吸除DAPI染色液,用TBST、PBS或生理盐水洗涤2-3次,每次3-5分钟。 5. 直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。细胞发生凋亡时,会看到凋亡细胞的细胞核呈致密浓染,或呈碎
块状致密浓染。
使用本产品的文献:
1. Zhou H, Qian J, Wang J, Yao W, Liu C, Chen J, Cao X. Enhanced bioactivity of bone morphogenetic protein-2 with low dose of 2-N, 6-O-sulfated chitosan in vitro and in vivo. Biomaterials. 2009 Mar;30(9):1715-24. Epub 2009 Jan 7.
4. Chen K, Zhang Q, Wang J, Liu F, Mi M, Xu H, Chen F, Zeng K. Taurine protects transformed rat retinal ganglion cells from hypoxia-induced apoptosis by preventing mitochondrial dysfunction. Brain Res. 2009 Jul 7;1279:131-8. Epub 2009 May 7.
2. Gong Y, Wu J, Huang Y, Shen S, Han X. Nonylphenol induces apoptosis in rat testicular Sertoli cells via endoplasmic reticulum stress. Toxicol Lett. 2009 Apr 25;186(2):84-95. Epub 2009 Jan 17.
3. Dong HS, Li L, Song ZH, Tang J, Xu B, Zhai XW, Sun LL, Zhang P, Li ZB, Pan QJ, Shi QH, Shen W. Premeiotic fetal murine germ cells cultured in vitro form typical oocyte-like cells but do not progress through meiosis. Theriogenology. 2009 Jul 15;72(2):219-31. Epub 2009 Apr 9.
特定情况下的双链DNA染色。 ¾ DAPI的最大激发波长为340nm,最大发射波长为488nm;DAPI和双链DNA结合后,最大激发波长为364nm,最大发射胞核染色。
包装清单:
产品编号
C1005 —
产品名称 DAPI 染色液
说明书
包装
10ml 1份
保存条件:
-20℃避光保存,一年有效。
注意事项:
¾ 本DAPI 染色液的浓度经过碧云天的优化,确保可以满足各种常规染色的需要。如需使用特定浓度的DAPI,请选购碧云 天的DAPI(C1002)。
¾ 荧光染料都存在淬灭的问题,建议染色后尽量当天完成检测。 ¾ 为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。抗荧光淬灭封片液(P0126)可以向碧云天订购。 ¾ DAPI对人体有一定刺激性,请注意适当防护。 ¾ 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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