土壤镉胁迫下菲降解菌的筛选及其降解特性研究
土霉素高效降解菌的筛选及其降解特性研究的开题报告
土霉素高效降解菌的筛选及其降解特性研究的开题报告一、研究背景和意义土霉素（Tetracycline，TC）是一种广泛应用于畜禽养殖、水产养殖和农业生产中的广谱抗生素，在医疗领域也有应用。
然而，TC的慢性排放和滥用过量使用等原因造成了TC在土壤和水环境中的广泛污染，对环境和人类健康产生了极大的威胁。
因此，TC的高效除药过程成为了当今环保领域亟需解决的问题之一。
目前，常规的将TC从土壤中去除方法包括吸附、生物降解、化学降解等。
其中，微生物降解技术因其无二次污染、成本低等特点被广泛应用。
因此，寻找高效降解TC 的微生物具有重要的理论意义和应用价值。
二、研究内容和方案在本研究中，将采用微生物学和分子生物学等技术，从土壤样品中筛选出高效降解土霉素的微生物菌株，并对其降解特性进行研究，主要研究内容如下：1. 采样和微生物菌株的分离与鉴定：选择污染严重的养殖废水处理场和污水处理厂等场所进行采样，分离出具有对TC有效降解能力的菌株，并进行菌株的分离鉴定。
2. 系统评价菌株的TC降解能力：通过在含有不同浓度TC的培养基中培养经筛选出的菌株，测定不同菌株对TC的降解能力，并评价其TC的去除率。
3. 研究菌株的生长条件和生长特性：研究菌株对pH、温度、营养物质等因素的响应关系，建立降解TC的最适生长条件，探究菌株的降解机理和生长特性。
4. 研究菌株的代谢途径和降解产物：通过代谢途径分析和降解产物鉴定，探究菌株对TC的降解途径和降解产物，为进一步研究土霉素的生态毒理学行为，提供重要的数据支持。
三、研究预期成果通过以上研究，本研究将获得以下预期成果：1. 从土壤中筛选出高效降解TC的微生物菌株，并鉴定其分类学和生物学特性。
2. 评价所筛选菌株对TC的去除率和生长条件，并探究其对TC降解的机制和代谢途径。
3. 研究TC降解产物的种类和生成量，为进一步研究土霉素对土壤和水环境的生态毒理学行为提供科学依据。
4. 建立TC微生物降解技术的基础，为TC去除工艺的设计和实施提供重要的理论分析和技术支持。
具有菲降解功能的植物内生细菌筛选及其降解特性的开题报告
具有菲降解功能的植物内生细菌筛选及其降解特性的开题报告一、选题背景及研究意义随着全球化进程的不断加快，塑料制品的使用量越来越大，而这些塑料制品往往难以降解，导致环境的污染和生态平衡的破坏。
因此，寻找一种能够降解塑料的新技术成为了研究热点之一。
菲降解材料的研究得到了广泛的关注，它们可以被微生物降解，从而实现资源利用和环境保护的双重目的。
植物内生细菌具有多种生物降解功能，其菌株来源广泛、筛选方法简便且不会对环境造成二次污染，因此成为菲降解材料研究的重点。
本研究将从植物内生细菌中筛选出具有菲降解能力的菌株，并对其降解特性进行研究，不仅有助于寻找新型的生物降解材料，还将为推广菲降解材料的应用提供参考。
二、研究内容及方案本研究拟从不同的植物根系中分离得到内生细菌，通过对其的菌形态、生理生化特性等进行鉴定和分析，筛选出具有菲降解能力的菌株。
接着，以传统培养方法和基因测序技术相结合，对所获得菌株的菌株种类进行鉴定和分析，了解其系统进化关系和分类。
同时，通过对不同环境因素（如温度、PH值等）的调节，考察分离得到的菌株的菲降解能力及其降解效率。
最后，将优选出的菌株进行放大、优化，通过动态观察其生长、代谢及降解情况，探究其生长条件及菲降解机制，并进行初步的工业应用测试。
三、研究预期成果通过本研究，预期可以获得如下成果：1. 从不同植物根系中分离得到多种内生细菌，并鉴定其菌种类别和基本特性；2. 筛选出具有菲降解能力的菌株，并对其降解效率进行考察；3. 探究菌株的菲降解机制及生长条件，为后续的工业应用提供依据；4. 为推广菲降解材料的应用提供理论和实践支持。
四、研究方法和技术路线1.植物内生细菌的分离和鉴定：采用传统的分离和鉴定方法，通过对菌落形态、生理特性、生化试验等方面进行分析鉴定。
2.细菌种类的鉴定：采用基因测序技术，对筛选所得细菌株进行16S rRNA序列分析，了解其进化关系和分类。
3.菲降解能力的考察：通过调节温度、PH值等多种环境因素，考察所获得菌株的菲降解能力及其降解效率。
一株菲降解菌的筛选及降解动力学分析
关键词
菲
降解
耐受性
指 数 模 型
Ｉ ｓ ｏ ｌ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ ａ ｐ ｈ ｅ ｎ ａ ｎ ｔ ｈ ｒ ｅ ｎ ｅ － ｄ ｅ ｇ ｒ ａ ｄ ｉ ｎ ｇ ｂ ａ ｃ ｔ ｅ ｒ ｉ ａ ａ ｎ ｄ ｐ ｈ ｅ ｎ ａ ｎ ｔ ｈ ｒ ｅ ｎ ｅ ｂ ｉ ｏ ｄ ｅ ｇ ｒ ａ ｄ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｋ ｉ ｎ ｅ ｔ ｉ ｃ ｓ Ｙ ＡＮＧ Ｂｉ ｎ ｙ ｉ ｎ， ＣＨ ＡＯ Ｑｕ ｎ —
２ ｏ ｆ ｙ － ８ ｔ ｏ ｐ ｈ ｅ ｎ ａ ｎ ｔ ｈ ｒ ｅ ｎ ｅ ｓ ｏ ｌ ｕ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ １ ０ ０ ｍｇ ／ Ｌ，９ ３ ． ７ ｏ ｆ ｐ ｈ ｅ ｎ ａ ｎ ｔ ｈ ｒ ｅ ｎ ｅ ｗａ ｓ ｄ ｅ ｇ ｒ ａ ｄ ｅ ｄ ｉ ｎ ７ ２ ｈ ｕ ｎ ｄ ｅ ｒ ｔ ｈ ｅ ｃ ｕ ｌ ｔ ｕ ｒ ｅ ｃ ｏ ｎ ｄ ｉ ｔ ｉ ｏ ｎ ｓ ｏ ｆ ３ Ｏ℃ ， ｐ Ｈ ７ ． ０ ａ ｎ ｄ ｓ ｈ ａ ｋ ｉ ｎ ｇ ｓ ｐ ｅ ｅ ｄ １ ４ ０ ｒ ／ ｍｉ ｎ ．Ｔｈ ｅ ｓ ｔ ｒ ａ ｉ ｎ ｅ ｘ ｈ ｉ ｂ ｉ ｔ ｅ ｄ ｇ ｏ ｏ ｄ ｔ ｏ ｌ ｅ ｒ ａ ｎ ｃ ｅ ｔ Ｏ ｐ ｈ ｅ ｎ ａ ｎ ｔ ｈ ｒ ｅ ｎ ｅ（ ３ ０ ０ ０ ｍｇ ／ Ｌ） ．Ｔｈ ｅ ｋ ｉ ｎ ｅ ｔ ｉ ｃ ｓ ｏ ｆ ｐ ｈ ｅ ｎ ａ ｎ ｔ ｈ ｒ ｅ ｎ ｅ ｂ ｉ ｏ ｄ ｅ ｇ ｒ ａ ｄ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｗａ ｓ ａ ｎ ａ ｌ ｙ ｚ ｅ ｄ ，ｂ ａ ｓ ｅ Ｏ ｎ ｗｈ ｉ ｃ ｈ，ｔ ｈ ｅ ｅ ｘ ｐ ｏ ｎ ｅ ｎ ｔ ｉ Ｍ ｍｏ ｄ ｅ ｌ ｗａ ｓ ｅ ｓ ｔ ａ ｂ —
一株菲降解细菌的分离、鉴定及其降解特性研究
南 京麦迪 森 仪器有 限公 司 。
１ ２ 实 验 方 法 ．
ａＸ ． ｌ １８对齐后 ， 使用 ＭＥ ４ ０进行序列 同源性分 ＧＡ ． 析并制作 系统 发育数 ， 算法为 Ｎｅ ｈ ｏ－ｏ ｉｇ ｉ ｂｒ ｉｎ 。 ｇ Ｊｎ
Ａｂ ｔａ ｔ Ｓ ｖ ｒ ｌＰＡ Ｈ ｓ ｄ ｇ ａ ｉ ｂ ｃ ｅ ｉ ｅ ｅ ｉｏ ａ ｅ ｒ ｍ ｈｅ ｏ ｌｐｏ ｌ ｅ ｂｙ ｏ ｌ ｓｒ ｃ ： ｅ ｅ ａ — ｅ ｒ ｄ ｎｇ ａ ｔ ｒａ ｗ ｒ ｓ ｌ ｔ ｄ ｆ ｏ ｔ ｓ ｉ ｌｕｔ ｄ ｉ ｎ ａ Ｓｈｅ ｇ ｉ ｉ ｉｌ ｗｉｈ ｅｅ ｔｖ ｍ ｅ ｉ ｍ ｕ ｉ ｐ ｎ ｎ ｈｒ ｎｅ ｓ ｈｅ ｏ ｅ ａ ｂｏ ｅｒ ｎｌ Ｏ ｌ ｅｄ ｆ ｔ ｓ ｌ ｃ ｉ ｅ ｄｕ ｓｎｇ ｈｅ ａ ｔ ｅ ａ ｔ ｓ ｌ ｃ ｒ ｎ
始每 隔 ６ｈ整 瓶 提取 培 养 液 ， 文 献 ［ １ 方法 测 按 １］
定培 养液 中菲 浓度 ， 释 平 板 涂 布法 测 定 培养 液 稀 中的活菌数 量ｌ １ 。
１ ２ ８ 菌 株 鉴 定 ． ．
本研 究 中的样 品均 采 自胜 利 油 田， 别 在盐 分 碱地 和受 石油 污染 的土壤 等 ４ 不 同地点 采样 。 个 Ｐ Ｒ试 剂盒 采用 Ｇｅ Ｓ ａ Ｃ Ｃ ｎ ｔｒＰ Ｒ套 盒 ， 润生 康
条件 下，８℃振 荡培养 ９ ， ２ ６ｈ 对菲 的降解率达到 ９．３ ０在菲浓度 为 ２０ｍ Ｌ １ 培养 ３７Ｋ； ０ ｇ・ ＿ 时，
９ ６ ｈ后的菲降解率为 ９． ６ 。同时发现菲的降解程度与细菌数量 的增长呈正相关关系。 ８３
菲降解菌株的筛选及特性研究
1 材料与方法
111 材 料 111. 1 样品来源 土壤样品来源于西安焦化厂排 污口 。 1. 1. 2 试剂和仪器 MgSO4 ·7H2O, CaCl2 , KH2 PO4 , K2 HPO4 ,NH4NO3 , FeCl3 ,乙醇 ,环己烷均为分析纯 ;菲 为化学纯 (军事医学科学院药材供应站 ) ; 琼脂粉 (WOLSEN ) 。
含菲的无机盐 (MM )固体培养基 :无机盐 (MM ) 液体培养基中加入 0%琼脂粉 , 灭菌后倒平板 。 在 MM 平板上 ,涂布菲的乙醇溶液 ,在超净台中等乙 醇充分挥发后待用 。 112 方 法 11211 菲降解菌株的筛选和纯化 用去离子水将 从焦化厂排污口取回的土壤样品浸泡 ,用单层纱布 过滤 ,除去大的杂质颗粒 ,静置后取上清液 ,梯度稀 释 ,各取 200μL 分别涂布在含有 015 g /L , 110 g /L , 115 g /L 菲的 MM 固体培养基上 ,置于 37℃恒温培 养箱中培养 。当平板上有菌落出现时 ,挑取单菌落 至新的含菲的 MM 固体培养基上 ,反复划线 3次 ,同 时不断提高菲浓度 ,获得的单克隆在 MM 固体培养 基培养后 ,保存牛奶管备用 [ 8 ] 。 11212 16S rDNA 测序和序列比对 以筛选出的菲 降解菌株为模板 ,用 16S rDNA 通用引物 D88F (AGA
多环芳烃—菲、萘降解菌株的分离、降解特性及降解机制研究的开题报告
多环芳烃—菲、萘降解菌株的分离、降解特性及降解机制研究的开题报告一、选题背景随着化工行业和交通运输业的发展，大量有机污染物排放对环境造成了很大影响。
多环芳烃（PAHs）是一类常见的有机污染物，具有较强的毒性和致癌性，在环境保护和人类健康方面受到广泛关注。
为了减少PAHs对环境的污染和保障人类健康，需要开发和应用高效的PAHs生物降解技术。
二、研究目的本研究旨在从土壤、污泥等环境中分离PAHs生物降解菌株，研究这些菌株的降解特性和降解机制。
具体目标包括：（1）筛选多环芳烃生物降解菌株；（2）研究菌株对菲、萘等PAHs的降解能力和降解速度；（3）研究PAHs降解代谢途径和降解产物。
三、研究内容和方法1.样品采集：从土壤、污泥等环境中采集样品，用于分离PAHs生物降解菌株。
2.菌株分离：采用传统的分离培养方法和分子生物学技术，通过细菌纯化和16S rDNA序列分析筛选PAHs生物降解菌株。
3.PAHs降解实验：研究菌株对菲、萘等PAHs的降解能力和降解速度。
采用高效液相色谱、气相色谱等技术分析降解率和产物。
4.降解代谢途径和产物分析：通过微生物学、生物化学和分析化学等研究方法，探讨PAHs降解代谢途径和转化产物。
四、预期结果本研究将分离出多种高效的PAHs生物降解菌株，研究其降解能力和降解机制，并推断出PAHs的降解代谢途径和转化产物，为开发和应用PAHs生物降解技术提供理论依据和技术支持。
五、研究意义PAHs是一类具有潜在危害性的污染物，在环境保护和人类健康方面受到广泛关注。
本研究通过分离PAHs生物降解菌株，研究降解能力和降解机制，推断PAHs的降解代谢途径和转化产物，将为开发和应用高效的PAHs生物降解技术提供理论基础和技术支持，对环境保护和生态安全具有重要的意义。
菲和镉复合污染对土壤微生物的生态毒理效应
第24卷 第6期2005年 11月环 境 化 学E NV I RONMENTAL C H E M I STRYV o.l 24,N o .6N ovember 2005*国家973项目(2004CB41850)、国家自然科学基金项目(20337010)和上海市基础研究重点项目(04J C14051)资助.**通讯联系人E-m ai:l ytl u @s j tu edu cn菲和镉复合污染对土壤微生物的生态毒理效应*沈国清 陆贻通**洪静波 程国华(上海交通大学资源环境科学系,上海,201101)摘 要 以土壤酶活性和微生物数量作为生态毒理指标,通过模拟试验,比较分析多环芳烃菲和重金属镉单一与复合污染对土壤微生物的生态毒理效应.结果表明,菲和镉复合污染对土壤蔗糖酶、脲酶和脱氢酶均具有协同抑制作用;而对磷酸酶和微生物的数量具有拮抗抑制作用.菲和镉复合污染及菲单一污染对土壤微生物的活性抑制率从大到小依次为:放线菌>真菌>细菌;镉单一污染则为:真菌>细菌>放线菌.关键词 菲,镉,复合污染,土壤微生物,生态毒理效应.重金属和多环芳烃是土壤环境中两类重要污染物,往往同时或先后进入土壤环境形成复合污染,长期以来,国内外对重金属和多环芳烃的单独污染以及不同重金属之间复合污染的微生物生态毒理效应进行了较多的研究\[1~5\],但对二者复合污染研究报道较少.本研究以多环芳烃菲和重金属镉为目标污染物,通过室内模拟试验,探讨了两者复合污染对土壤生态毒理学指标 土壤酶活性和微生物数量的影响,以期为我国土壤复合污染环境毒理学及其生态环境风险评价提供理论依据.1 材料与方法1 1 供试土壤土壤取自上海交通大学七宝校区实验农场,属我国南方水稻土,采样深度为0 20c m,土壤主要理化性状列于表1.表1 供试土壤理化性状T ab le 1 P hysica l and chem i ca l properties of the tested so il spH 有机质(g kg -1)全氮(g kg -1)全磷(g kg -1)CEC (c mo l kg -1)机械组成/%砂粒粉粒粘粒8 1816 171 141 3615 6051 4928 3720 14将土样过2mm 筛,分为四个处理组,每个处理重复3次:1号处理组:无污染空白对照;2号处理组:向土壤中投加菲的二氯甲烷溶液,使菲的终浓度为50m g kg -1;3号处理组:向土壤中投加醋酸镉,使镉离子的终浓度为10m g kg -1;4号处理组:向土壤中依次投加菲的二氯甲烷和醋酸镉溶液,使菲和镉离子的终浓度分别达到50m g kg -1和10m g kg -1.将各处理组的土样充分混匀,分装于土壤培养罐中(每罐800g )室温培养.整个试验过程中使土壤湿度保持在最大持水量的60%左右.于培养的第7,14,21,28,35,49天分别测定土壤的各项生态毒理学指标,并与对照组相比,计算其抑制率(%).1 2 测定方法土壤蔗糖酶活性:3,5-二硝基水杨酸法;土壤脲酶活性:苯酸钠比色法;土壤脱氢酶活性:三苯基四唑氮氯化物法;土壤磷酸酶活性:对硝基酚比色法;土壤微生物数量:平板稀释计数法. 采用Ex cel 2000对试验数据进行统计分析.6期沈国清等:菲和镉复合污染对土壤微生物的生态毒理效应663 2 结果与讨论2 1 菲-镉复合污染对土壤酶活性的影响图1显示了镉和菲复合污染对土壤蔗糖酶、脲酶、脱氢酶和磷酸酶活性的影响.由图1可见,菲和镉复合污染对蔗糖酶表现出明显的抑制效应.整个培养期间,菲和镉复合污染处理的土壤中,蔗糖酶活性一直处于抑制状态,平均抑制率为53 57%,而菲、镉单一污染对蔗糖酶活性的平均抑制率分别为3%和6 57%,复合污染表现为协同抑制作用.其中培养第14天和第35天最为明显.培养14d 时,菲、镉单一污染对蔗糖酶均表现为激活作用,酶活性分别为对照的145%和127%,而在复合污染条件下,则表现出强烈的抑制效应,酶活性仅为对照的25%.培养到第35天时,菲、镉单一污染下蔗糖酶活性分别为对照的142%和172%,而两者复合污染条件下,蔗糖酶活性为对照的72%,表现出明显的协同抑制作用.菲和镉复合污染土壤中的脲酶活性相对于单一污染表现出同样的协同抑制作用,其变化趋势与两者单一污染一致.整个培养期间,菲、镉单一污染对脲酶的平均抑制率分别为-2 57%和6 43%.复合污染平均抑制率达16 57%,大于两者单一污染之和.菲和镉复合污染对脱氢酶活性的研究结果表明,随着处理时间的变化,脱氢酶先后呈现出激活和抑制效应.培养到第14天,复合污染对脱氢酶表现为激活作用,其活性为对照的230%,随后活性逐渐降低直至试验结束,最大抑制率为76%(49d).与单一污染相比,菲和镉复合污染在第28天时表现为显著的协同抑制效应,其中,菲单一污染条件下酶活性为对照的270%,镉单一污染下为180%,均为激活作用,而两者复合污染则表现为强烈的抑制效应,抑制率达20%.在整个试验过程中,菲和镉复合污染及单一污染对磷酸酶活性均表现为抑制效应,并且复合污染抑制效应的持续时间比单一污染长.第28天时,菲和镉复合污染与镉单一污染条件下磷酸酶的活性均达到最低点,分别为对照的53%和32%.到第35天时,菲单一污染条件下磷酸酶的活性达到对照的48%,为整个试验过程中酶活性最低点.此后菲、镉单一污染下磷酸酶的活性仍表现为抑制作用,但这种抑制作用渐渐减弱,酶活性开始回升,然而菲磷酸酶镉复合污染下的活性一直徘徊在对照的60%上下,未见回升,可见,菲和镉复合污染比单一污染的对磷酸酶的抑制效应时间更长.664环 境 化 学24卷2 2 菲和镉复合污染对土壤微生物种群的影响菲和镉复合污染对土壤中细菌、放线菌和真菌数量的变化动态见图2.由图2可见,菲、镉单一污染与复合污染对土壤细菌、放线菌和真菌生长的影响随培养时间的不同呈现不同的规律.菲单一污染的土壤中,培养14d,细菌和放线菌的数量分别增长到对照的148%和117%,随后逐渐下降,而真菌数量在28d内一直处于抑制状态,以后逐渐增加.整个培养期间细菌、放线菌和真菌的平均抑制率分别为18 14%,40 43%和20 43%,由此可见,菲单一污染对土壤微生物数量的抑制率从大到小依次为放线菌>真菌>细菌.镉污染土壤中,细菌和真菌的数量在整个培养期间一直处于抑制状态,而放线菌的数量除了第14天有所增加外,其余时间亦处于抑制状态,镉单一污染对细菌、放线菌和真菌的平均抑制率分别为25 43%、17 86%和50 86%,因此,镉对土壤微生物数量抑制率从大到小依次为:真菌>细菌>放线菌.菲和镉复合污染对三种微生物数量(第42天除外)均表现出明显的抑制作用,平均抑制率分别为:细菌41 71%、放线菌49 29%、真菌44 86%,抑制率大小依次为:放线菌>真菌>细菌.2 3 菲和镉复合污染对土壤酶活性及其微生物种群的交互作用表2列出了试验过程中菲、镉单一污染和复合污染的平均抑制率及其交互作用类型.由表2可见,菲和镉复合污染对土壤生态毒理学指标的抑制率从大到小依次为:蔗糖酶>放线菌>真菌>细菌>磷酸酶>脲酶>脱氢酶.通过比较复合污染抑制率的实测值和理论值(二者单一污染抑制率之和),菲和镉复合污染对土壤蔗糖酶、脲酶和脱氢酶交互作用的类型表现为协同抑制作用(实测值大于理论值),其中以蔗糖酶和脱氢酶尤为显著.对这种现象S i k ke m a等\[6\]提出了毒作用麻醉(nar co tic m ode o f tox i c acti o n)假设,认为多环芳烃等一些脂溶性化合物可以同微生物细胞膜上的脂溶性分子结合,从而影响了细胞膜的结构和穿透性.Gogo lev\[7\]等采用琼脂平板技术,研究了Zn,Cd, Cu和荧蒽对土壤微生物的相互作用,认为荧蒽可以改变细胞膜的通透性,提高重金属对微生物的毒性.即使是低剂量的荧蒽和重金属,当它们单一污染时,对微生物无影响,而复合污染时,则毒性明显增加.因此,受P AH s污染的土壤,重金属很容易进入微生物细胞,从而,影响和干扰其正常的功能\[7,8\].表2 菲和镉复合污染对土壤微生物的交互作用T ab l e2 Inte raction bet ween phenanthrene and Cd on so ilm i crobe土壤酶活性抑制率/%土壤微生物数量抑制率%污染物蔗糖酶脲酶脱氢酶磷酸酶细菌放线菌真菌菲-3-2 57-69 5716 7118 1440 4320 43镉6 576 4322 1430 2925 4317 8650 86菲+镉(理论)3 573 86-47 4347 0043 5758 2971 29菲+镉(实测)53 5716 57-5 2933 7141 7149 2944 86交互作用类型协同协同协同拮抗拮抗拮抗拮抗6期沈国清等:菲和镉复合污染对土壤微生物的生态毒理效应665本试验结果显示,对胞外分泌蔗糖酶、脲酶和脱氢酶的土壤微生物而言,菲会增强镉的毒性,一个可能的原因是在菲的作用下,镉离子更容易从有关微生物细胞膜空隙渗透入细胞,从而产生毒害作用.与此相反,菲和镉复合污染对土壤微生物数量和磷酸酶却表现为拮抗作用(复合污染抑制率实测值<理论值).有关重金属和多环芳烃复合污染产生拮抗作用的机理还有待于进一步研究.3 结论(1)菲和镉复合污染土壤中蔗糖酶和脲酶均表现出明显的毒性效应,且复合污染对两种酶产生协同抑制作用;而对脱氢酶先后表现出激活和毒性效应,污染物交互作用类型亦为协同抑制作用;菲和镉复合污染及单一污染对磷酸酶活性都表现为毒性效应,但复合污染毒性效应的持续时间比单一污染更长,污染物交互作用类型为拮抗抑制作用。
一株菲降解菌的分离鉴定及其降解条件研究
的降解率高达９．％。该菌对 高质量浓度菲有较好的耐受性 ，其最高耐受质量浓度可达２ ０ ｇＬ 。 ４ ２ ０ｍ ・～ ０ 关键词 ：菲 ；降解菌 ；１Ｓ ＤＮ ６ Ａ；降解条件 ｒ
生态环境学报 ２ １， ９１）２ ５ ．６ ６ ０ ０ １（１： ６２２ ５
Ｅ ｏ ｇ ｎ ｎ ｉ ｎ —ａ Ｓ ｉ ｃｓ ｃｌ ｚａｄＥ ｖｒ ｍｅｔ ｃ ｎ ｅ ｏ ｏ ｎｌ ｅ —
ｈｔ：ｗ ｗ．ｅｃ． ｍ ｔ ／ ｗ ｊ ｓｉ ｏ ｐ／ ｅ ｔ
Ｅ— ｉ ｅ ｉ ｒ ｅ ｓ ｉ ｏ ｍａｌ ｄｔ ＠ｉｅｃ． ｍ ： ｏ ｔ
１２ 实验方法 ．
解者 ， 中许多类群（ 其 包括细菌 、 真菌 、 藻类） Ａ ｓ 对Ｐ Ｈ 具有较 强 的分解代谢 能 力【 刚 ８ 。笔者利 用选 择性 富 集培 养 技术 及 平 板 升华 法 从 克拉 玛依 稠油 污 染 土 壤中筛选分离获得了１ 株可降解菲的菌株 ，并通过 形态 观 察 、生 理 生化 指 标 测 定及 分 子 生 物学 分 析 （６ ＮＡ 等方法 对该菌株 进行 了鉴定 ，同 时研究 １Ｓｒ Ｄ ） 了降解 时间 、温度 、ｐ Ｈ、污染物 质量浓度 等常规 因 素对该 菌株降解 菲的影 响 ，以期 为克拉 玛依稠 油污 染土壤 的微生物修 复提供依 据 。
生化指标及１ Ｓ Ｄ 序列分析对该菌株进行了鉴定 。 ６ ＮＡ ｒ 该株菌的１Ｓｒ Ｎ ６ Ａ序列与Ｐ ｅ ｄ ｍ ｎ ｓ Ｄ ｓｕ ｏ ｏ ａ属的相似性达９％， ９ 结合分离菌
株的形态 、生理生化特征和 １Ｓｒ Ｎ ６ Ａ基因序列 的分析结果 ，初步鉴定该菌株为恶臭假单胞菌（ｓｕ ｏ ｎ ｓ ｕｉａ） Ｄ Ｐ ｅｄ ｍｏ ａ ｐ ｔ ． ｄ 。对其降
赣南某矿区土壤中抗镉菌株的分离筛选及对镉的吸附特性
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电子垃圾拆解区土壤中镉耐受菌的筛选与鉴定
项目（zlgc201838） 作者简介：刘沙沙（1986-），女，山东潍坊人，肇庆学院环境与化学工程学院讲师，博士. 通信作者：袁国栋（1963-），男，浙江嵊州人，肇庆学院环境与化学工程学院教授，博士.
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肇庆学院学报
第 41 卷
深度范围的土壤放入密封袋，带回实验室放置-20 ℃冰箱中保存. 1.2 培养基和溶液的配制
筛选细菌、真菌和放线菌分别采用营养肉汤培养基（18g）、马铃薯培养基（18g）和放线菌培养基（18g）， 加琼脂粉 18 g，蒸馏水 1L，灭菌后倒入培养皿中，待凝固后使用.
菌株的生长情况测定在液体培养基中进行，营养肉汤、马铃薯和放线菌培养基的添加浓度为 5 g/L，灭 菌备用[9].
Cd2+储备液：称取 Cd(NO3)2溶解于去离子水中，配制成浓度为 1g/L 的 Cd2+储备液. 1.3 镉耐受菌的驯化、筛选和分离
近年来，研究者已经分离出一些重金属镉耐性菌种，并初步研究了其生物学特性和应用效果.然而，大 部分菌体的生长和繁殖容易受气候和土壤环境变化的影响，修复效率较低，还不能满足不同区域镉污染修 复的需要.不同的微生物对重金属的耐性和解毒机制存在差异，土著微生物的生长繁殖能力明显优于外来 菌种.事实上，在电子垃圾拆解区受污染土壤中的微生物仍然保持了较高的群落多样性[7]，长期生存在高浓 度镉污染土壤中使这些微生物具备了较强的耐性.研究在广东清远电子垃圾拆解区周边污染土壤中筛选出 几株耐受镉的菌种，通过分析不同镉浓度胁迫下菌株生长情况的影响，选择出对镉耐受性最高的菌株，采 用 16SrDNA 序列分析技术对其进行分子生物学鉴定，并对其生物学特征进行初步研究，以期为重金属污染 环境修复工作提供菌种资源和理论依据.
土壤镉胁迫下菲降解菌的筛选、特性及对微生物群落影响的研究
上海交通大学硕士学位论文土壤镉胁迫下菲降解菌的筛选、特性及对微生物群落影响的研究姓名：降巍申请学位级别：硕士专业：农药学指导教师：***20081201土壤镉胁迫下菲降解菌的筛选、特性及对微生物群落影响的研究摘要土壤是环境的重要组成部分，承担着环境中来自各方面的污染物质。
随着经济迅速发展，越来越多的污染物进入土壤环境造成污染，多环芳烃（polycyclic aromatic hydrocarbon , PAHs）与重金属是土壤环境中重要的污染物，开展两者复合污染的研究对生态环境保护和治理有重要的意义。
本文以多环芳烃菲和重金属镉为目标污染物，采用生物富集法，从重金属－多环芳烃复合污染土壤中筛选耐受镉的菲降解菌，并对其降解、生长特性进行研究，从微生物群落功能性的角度评价降解菌对土壤的生物修复和生存能力，以期为复合污染土壤中多环芳烃生物修复提供科学依据。
主要研究结果如下：以菲为唯一碳源并在镉胁迫情况下，通过富集培养，从多环芳烃－重金属土壤中，分离纯化得到一株菲的优势降解菌。
经16S rDNA 和系统进化分析，优势菌株鉴定为产碱杆菌属（Alcaligenes），命名为W.J。
对获得的降解菌生长特性进行研究发现，在重金属镉的胁迫下，菌株仍然能较好的生长，对数生长期为20 h。
用高效液相（HPLC）仪测定降解菌的降解率，结果表明，W.J菌株对菲有较高的降解率，在培养5 d后，W.J能在30mg/L镉胁迫下对菲的降解率达到45％.用BIOLOG 生态板测试土壤微生物群落代谢功能，发现添加菲的处理组的样品，颜色变化率（AWCD）显著低于对照组，表明在菲单独或者与镉同时作用下，土壤微生物利用碳源的能力降低，菲显著影响土壤微生物群落代谢功能多样性；添加降解菌的处理组的土壤微生物群落代谢功能多样性和丰富度与对照组没有明显的差距。
通过对土壤微生物群落对各种碳源的代谢强度方差分析得出：菲能影响土壤微生物对22（共31）种碳源的利用，加入降解菌后，土壤微生物仅对4种碳源的利用能力有所下降，这表明降解菌能够明显的改善土壤中微生物群落代谢的功能多样性。
降解多环芳烃和异丙威的耐镉菌种筛选及其特性研究
引用格式：吴民熙，王 震，曹如亮，等. 降解多环芳烃和异丙威的耐镉菌种筛选及其特性研究[J]. 湖南农业科学，2023（7）：11-19. DOI:DOI:10.16498/ki.hnnykx.2023.007.002由于农田施用的农药通过地表径流、污水排放扩散，以及石油、燃料油、煤不完全燃烧产生的废气随大气颗粒的沉降扩散，导致过量有机农药和多环芳烃（Polycyclic aromatic hydrocarbons ，P AHs ）扩散到环境中形成有机污染。
异丙威（Isoprocarb ） 是一种具有触杀、胃毒和熏蒸作用，对刺吸式害虫稻飞降解多环芳烃和异丙威的耐镉菌种筛选及其特性研究吴民熙1，王 震1，曹如亮2，方雅瑜3，黄 庆4，刘惠琼4，尹红梅1，杜东霞1，高帅帅1，许丽娟1（1. 湖南省微生物研究院，湖南 长沙 410009； 2. 益阳市赫山区农业农村局，湖南 益阳413000 ； 3. 湖南恒凯环保科技投资有限公司，湖南 长沙 410221；4. 中南水务科技有限公司，湖南 长沙 410009）摘 要：为获得既耐受重金属镉又能高效降解多环芳烃（菲、芘）、异丙威的菌种，利用选择培养基从染土壤中分离高效降解微生物，并进行菌种分类和降解特性分析。
共筛选获得2个耐镉并降解多环芳烃、异丙威的菌种，其中WLX8D 对芘降解效率最高；S-200培养15 d 内对菲和异丙威的最高降解效率分别为53.6%和 66.7%，结合形态学特征和16S rDNA 序列分析，初步鉴定结果，WLX8D 为意大利农霉菌（Agromyces italicus ），S-200为硫酸盐还原菌（Salfate reducing bacteria ）。
WLX8D 、S-200对芘、菲的作用浓度和耐镉浓度范围广，WLX8D 可降解25~100 mg/L 浓度范围的芘，S-200可以高效降解菲和异丙威（降解率50%~60%），2菌株在镉浓度25~200 mg/L 的培养基中生长良好。
一株高效菲降解菌的筛选及降解条件研究
一株高效菲降解菌的筛选及降解条件研究
一株高效菲降解菌的筛选及降解条件研究
从南京某石化厂排污口附近采集土样,以菲为碳源的选择性培养基分离筛选到一株菲高效降解菌F10a,根据形态和生理生化特性初步鉴定为芽孢杆菌属,并对其降解菲的特性及各种影响因素进行了研究.结果表明,F10a在50 mg·L-1的条件下,28 ℃振荡培养27 h,菲的降解率达到98.12%;静置培养84 h,菲的降解率达到98.47%.pH值分别为4、6、8时,F10a对菲具有良好的降解效能;pH值为10时F10a不生长.Zn2+与Pb2+的存在不影响F10a的降解效能,Cu2+可以延缓菲的降解,Cr2+对F10a有毒性.F10a在菲浓度为200 mg·L-1时,28 ℃振荡培养84 h,降解率为99.6%.菲的降解程度与细菌数量的增长呈正相关关系.
作者：周乐盛下放张士晋刘静ZHOU Le SHENG Xiafang ZHANG Shijin LIU Jing 作者单位：南京农业大学生命科学学院,农业部农业环境微生物工程重点开放实验室,南京,210095 刊名：应用生态学报ISTIC PKU英文刊名：CHINESE JOURNAL OF APPLIED ECOLOGY 年，卷(期)：2005 16(12) 分类号：Q93 X172 关键词：降解菲多环芳烃芽孢杆菌。
一株菲降解菌筛选鉴定及降解性能研究
一株菲降解菌筛选鉴定及降解性能研究侯宁;李春艳;成小松;李大鹏;史妍【期刊名称】《东北农业大学学报》【年(卷),期】2013(044)008【摘要】采用菲降解菌筛选方法从大庆油田受石油污染土壤中分离得到1株对菲具有较好降解效果的菌株,命名为H3.通过形态观察、生理生化鉴定及16S rDNA 序列分析发现,该株菌为寡养单胞菌属Stenotrophomonas sp.,研究其降解条件.结果表明,在30℃,接种量10％条件下,菲菌株对初始质量浓度为100 mg· L-1在12d 内降解率高达98.6％.研究发现,H3菌对高质量浓度菲有较好的耐受性,其最高耐受质量浓度可达1000 mg· L-1,且菌H3具有较广泛pH耐受性,其可适应pH范围是6.5～9.0.【总页数】5页(P48-52)【作者】侯宁;李春艳;成小松;李大鹏;史妍【作者单位】东北农业大学资源与环境学院,哈尔滨150030;东北农业大学资源与环境学院,哈尔滨150030;哈尔滨医科大学第一临床医学院,哈尔滨150001;东北农业大学资源与环境学院,哈尔滨150030;东北农业大学资源与环境学院,哈尔滨150030【正文语种】中文【中图分类】S767.5;X172【相关文献】1.丙烯酸废水降解菌的筛选鉴定及降解性能研究 [J], 郭迎庆;唐帆;钱晓荣;杜尔登;褚腾飞2.一株烟碱降解菌的筛选鉴定与降解特性研究 [J], 方超;阮爱东3.丙烯酸废水降解菌的筛选鉴定及降解性能研究 [J], 郭迎庆;唐帆;钱晓荣;杜尔登;褚腾飞;4.一株氨氮降解菌的筛选鉴定及其降解特性研究 [J], 张超;尚润东;王嘉晖;欧阳选进;李晨晨;张晶;靳永胜5.一株磺化沥青降解菌的筛选鉴定及降解特性研究 [J], 幸晶晶;马立安;余维初因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
一株耐碱性芘降解菌的筛选及特性研究
一株耐碱性芘降解菌的筛选及特性研究
李哲斐;孙然;简利茹;韦革宏
【期刊名称】《西北农业学报》
【年(卷),期】2011(020)012
【摘要】以长庆油田油井口附近的土壤为材料,芘为唯一碳源和能源的BH培养基中分离到一株高效芘降解菌株b2,经形态学观察和16S rDNA测定,将其鉴定为分枝杆菌属(Mycobacterium sp.).研究发现,在培养温度为37℃、转速为175 r/min,培养起始pH 10,接种量为2.0％时菌体生长较快.最佳培养条件下,在芘质量浓度为250 mg/L的BH培养基中,经菌株b2降解4d后质量浓度下降76％.说明培养条件对菌株的生长和芘降解速度有明显的影响.
【总页数】5页(P140-144)
【作者】李哲斐;孙然;简利茹;韦革宏
【作者单位】西北农林科技大学生命科学学院,陕西杨凌 712100;西北农林科技大学生命科学学院,陕西杨凌 712100;陕西省农业分子生物学重点实验室,陕西杨凌712100;西北农林科技大学生命科学学院,陕西杨凌 712100
【正文语种】中文
【中图分类】Q938.1
【相关文献】
1.一株芘降解菌的培养条件优化及特性研究 [J], 马英杰;钟鸣
2.低温耐盐芘降解菌的筛选鉴定及降解特性研究 [J], 刁硕;王红旗;许洁;赵一村
3.一株多环芳烃芘降解菌的鉴定及其降解特性研究 [J], 卢仕严;曹永军;招嘉佩;何红;孙省利
4.苯并[α]芘降解菌群BaP-1的富集筛选与降解特性研究 [J], 季宇琪;王慧;梁承月;何加林
5.一株芘好氧降解菌的筛选鉴定及共代谢特性研究 [J], 冯清敏;王子豪;唐家璇;林军章;谭晓明;汪卫东;黄婷婷;田泊凝;肖盟
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东南景天根际土壤锌镉抗性细菌的分离与特征研究的开题报告
东南景天根际土壤锌镉抗性细菌的分离与特征研究的开题
报告
一、研究背景和意义
随着工业和人类活动的增加，土壤重金属污染问题也日益严重，其中锌和镉是较为常见的重金属污染物之一。
在东南亚地区，由于土壤锌镉含量较高，使得植物生长受到严重影响。
而细菌是一种广泛存在于自然环境中，并具有降解和吸附重金属的能力的微生物，因此研究土壤中锌镉抗性细菌对于解决土壤污染问题具有重要意义。
二、研究目的
本研究旨在从东南景天的根际土壤中分离锌镉抗性细菌，并对其进行特征研究，以期找到具有较强锌镉抗性的微生物菌株，为实际生产中的土壤修复提供理论依据，并为后续进一步研究提供参考。
三、研究方法
1. 样品收集：从东南景天根际土壤中取样，分离细菌。
2. 分离鉴定：采用无菌技术将样品分别接种在富含锌镉的马铃薯葡萄糖琼脂培养基和不含锌镉的培养基上，分离筛选出菌落清晰、形态规则、生长快的细菌，并进行鉴定。
3. 土壤含量分析：采用原子吸收光谱仪或电感耦合等离子体质谱法等分析仪器，测定土壤中锌镉含量。
4. 细菌特性研究：对锌镉抗性较强的细菌菌株进行形态特性、抗性特性、生理生化特性等方面的研究。
四、研究预期结果
本研究将从东南景天根际土壤中分离到具有锌镉抗性的细菌，并对其进行特征研究。
通过对其形态特性、抗性特性、生理生化特性等方面的研究，可以探讨锌镉抗性微生物的生态适应机制，为后续的土壤修复研究提供有力支撑。
同时，针对不同的锌镉抗性微生物菌株的特征，选择适合的微生物修复菌株，可以更有效地实现土壤重金属的修复。
一株协助寄主植物缓解镉胁迫的芽孢杆菌筛选及其耐镉机制
一株协助寄主植物缓解镉胁迫的芽孢杆菌筛选及其耐镉机制杨威;闫海霞;汪家璐;纪丽莲;王新风【期刊名称】《江苏农业学报》【年(卷),期】2015(000)004【摘要】为研究植物内生细菌在缓解寄主植物镉污染中的作用,通过离体条件下耐镉活性鉴定,筛选了5株根围细菌和内生细菌,其中内生细菌菌株1JN2在以辣椒和黄瓜作为寄主进行的盆栽试验中能够增强寄主植物对镉的耐受性,与空白对照(不接种菌株、硫酸镉溶液培养)相比,黄瓜和辣椒叶绿素含量分别增加10.85%、20.14%,根系活力分别增加363.32%、525.51%,组织中镉离子浓度分别降低23.34%、40.39%,在5株细菌中对镉胁迫植物综合保护效果最佳。
该菌株经形态学和分子学鉴定为枯草芽孢杆菌。
扫描电镜检查发现,1JN2在镉离子处理后24 h开始进行菌体自我复原,在48 h出现胞外多糖固化现象。
【总页数】5页(P806-810)【作者】杨威;闫海霞;汪家璐;纪丽莲;王新风【作者单位】淮阴师范学院生命科学学院/江苏省环洪泽湖生态农业生物技术重点实验室，江苏淮安 223300;淮安市农业技术推广中心，江苏淮安 223300;淮阴师范学院生命科学学院/江苏省环洪泽湖生态农业生物技术重点实验室，江苏淮安223300;淮阴师范学院生命科学学院/江苏省环洪泽湖生态农业生物技术重点实验室，江苏淮安 223300;淮阴师范学院生命科学学院/江苏省环洪泽湖生态农业生物技术重点实验室，江苏淮安 223300【正文语种】中文【中图分类】S423.4【相关文献】1.一株拮抗海鱼干优势耐盐真菌芽孢杆菌HY-5筛选及其抗菌成分鉴定 [J], 杨秀文;邓旗;陶森;孙力军;王雅玲;廖建萌;刘颖;房志家;徐德峰2.一株耐铀镉真菌菌株的筛选及其耐铀镉特性的研究 [J], 胡南;陈思羽;胡劲松;沙银花;朱若南;李广悦;丁德馨3.一株耐镉促生菌的筛选、鉴定及对番茄幼苗生长与镉累积的影响 [J], 魏婷;孙燕妮;李鲜4.一株耐镉促生菌的筛选、鉴定及对番茄幼苗生长与镉累积的影响 [J], 魏婷;孙燕妮;李鲜5.耐镉阿氏芽孢杆菌缓解水稻受镉胁迫的研究 [J], 范美玉;黎妮;贾雨田;张超;王伟平;杨志伟因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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环 境 污 染 与 防治 第 ３ Ｏ卷
第 ｌ ０期
２０ ０ ８年 １ ０月
土壤镉胁迫下菲降解菌的筛选及其降解特性研究 ＊
降 巍 侯 峰 陆 贻 通
（ 海交通大学农业与生物学院 ， 海 ２０４） 上 上 ０ ２ ０
摘 要 以菲 和 镉 为 供 试 物 ， 对沈 抚 灌 区土 壤 中 土 著 菌 进行 筛 选 试 验 ， 选 出一 株 菲 降 解 菌 ， 名 为 ｗ． ， 时 测 定 在 不 同浓 度 筛 命 Ｊ同 镉 胁 迫下 ， 为 单 一 碳 源 时 Ｗ． 的生 长 情 况 。 结果 表 明 ， 镉 胁 迫 下 Ｗ．对 菲 具 有 一 定 的 降 解 能力 ， ３ ／ 时 ，０ｈ时 菲 降 解 率 菲 Ｊ 在 Ｊ 镉 ０ｍｇ Ｌ ６ 在 ６ 以上 。１ ｓｒ ＮＡ 测 序 比对 发 现 ， ．与 Ａｌａｉｅｅ（ ５ ６ Ｄ Ｗ Ｊ ｃ ｌ ｎｓ产碱 杆 菌 属 ） 源 性 最 高 ， ９ 。 通 过 对 Ｗ ．生 长 曲线 的 测 定 ， 现 ｇ 同 为 ９ Ｊ 发 其 对 数生 长 期 为 ｏ ２ ， 为ｗ ．菌 株保 存 提供 了一 定 的前 提 条 件 。 高浓 度 镉 在 ｗ ．的 生 长 后期 对 其 有 明 显 的 毒理 效 应 。 ～ ０ｈ 这 Ｊ Ｊ
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Hale Waihona Puke 关 键 词 菲 镉 １ ｓｒ ＮＡ ６ Ｄ
降 解 率
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多环芳 烃 （ ＡＨｓ 是 指 一 大类 两 个及 以上 苯 环 Ｐ ）
（ 括 三 环 ） ＡＨｓ 包 Ｐ 的微 生 物 降解 进 行 了大 量 、 深入
地 研究 。 目前普 遍 认 为其 降解 实 质是 ： 污染 物进 入 细 胞 后通 过 双加 氧 酶形 成顺 式 结 构 产物 ， 而后 转化