自噬基因Beclin1在细针穿刺_省略_及其与Bcl_2和p53的相关性_杜芸 (1)

细胞 自噬 (au t oph a g y )是 不 同于 凋 亡 的 1 型程 序化死 亡 , 是将细 胞 内受 损 !变性或 衰老 的蛋 白质 以 及 细胞 器运输 到溶 酶体进 行 消化降 解 的细胞 自我消 化 过程 , 以双层膜 结构 包 裹 部 分胞 质 和 细胞 器 的 自
关川 "B e c i n l l 是 新 的候选 抑癌 基 因 , 亦 是 哺乳 动 物 调节 自噬 的关键基 因 , 其 通 过 调 节 自噬 活性 参 与肿
分 析 "用 下列 公式表 示 :m R N A 的相 对表 达 量 = 目
岁( 3 2一7 1 岁) " 乳腺 良性病变 2 ) 例 (包括乳腺腺 (
病 9 例 , 纤 维腺瘤 4 例 , 腺病 伴腺瘤 样增 生 7 例 ) , 平
均年 龄为 4 3 岁 (2 6 ~ 5 7 岁) "
1.1.2
免疫组织化学标本来源及处理
rel ati o n ship w ith B c l 一 2 and p53 , to d i seuss th e ro l e of au top hag y re l ated gen e - B e el in l in b reast ean eer deve l o pm en t. M eth创如 RTe sP C R and i n r un oh i stoeh em i stry w ere used to d eteet th e n1 R NA an d p r o tei n
组 织学诊 断相 对 照 , 以组织 学 诊 断 为标 准 "其 中经 组织 病理 确诊 为 乳 腺 癌 患 者 4 3 例, 平均年龄为 5 2
一步法提取组织总 R N A , 实验步骤严格按试剂说 明 书进 行 , 于 2 % 琼脂 糖凝 胶 电泳 上行 总 R N A 完 整性
检测后 , 反转录合成 cD N A "按 2 5 川 反应体系行
P C R 扩增 , 反应 条 件 为 94 e 预 变 性 1 ) m i ( n ,9 4 e 1 m in , 退 火 4 5 5 (退 火 温 度 B eelin z : 56 .g o C ; p 53 :
56.4o C ;B el 一 2:52.6o C ) , 72o C 延伸 1 m i n , 3( )个循环; 72o C 延伸 1( )m i n 结束反应 "取 5 拼 1p CR 产物加入
D U Y L,n , 1 1 Y ing j u an , W U Ji an i ng , W A N G H eng
D ePart,, : 扩 , ,t of 伪 t oPalholog y , T h e F o ur t h H osP i rul of H el e i 八 7 4七 dieal U n i* r si t夕, S l i ji azhu a ng
表达 " B e c i n l l 蛋 白与 B c 卜 2! 5 3 蛋 白在乳腺 癌组织 中的表 达存在 负相关 " P
关键 词 :乳 腺 癌 泊 噬 ;凋 亡 ;B e eli n l ;p 53 ;B C I 一 2
中图分 类号 :R 737.9
文献标识码 :A
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引言
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
噬体 为特 征仁 .8" 近年 来 自噬 与肿 瘤 发生 ! 发展及治 疗 的关 系越 来越受 到人 们 的关 注 " 目前认 为 自噬对 于肿瘤 细胞 存在 双 向效 应 , 与肿瘤 发展 不 同阶段 ! 不 同组织 类 型 ! 细胞 分化 状态 ! 周 围环 境等 多种 因素有
腺 细针 穿刺 的患 者 6 3 例 , 均 为女性 , 均 未接受 放疗 !
化疗和内分泌治疗 "所有标本均留取两张细胞学涂 片用于常规诊 断 , 余下 标本立 即放人 盛有无 液氮 R N A 保存液的 EP 管(D E PC 水浸泡及高压灭菌处 理后 )中 , 一 0 e 冷冻保存备用 "所有针吸诊断均与 2
摘
要 :目的 检 测细胞 自噬基因 B e c i n l l 在细针 穿刺乳腺 良恶性病 变中的表达及 其与 B C 卜 2 !P 5 3 的关
采 用 R 下PC R 和免疫组 织化 学检 测乳腺 良恶
系, 探讨其在乳腺癌发生发展 中的作用及其机 制 " 方 法
性病 变中 B e c i n l l !B C I 一 2! p5 3 n识N A 及蛋 白表达水平 " 结果
2 % 琼脂 糖 凝 胶 中 , 以 12 1 ) v/ em 电压 电 泳 3 0 m in , 电泳结果 在 紫外线 下 采 像 , 并 应 用 凝 胶 电泳 成 像 分 析 系统分 析 , 测 定 其 灰 度 值 , 以 内 参 照 G A P D H 的 1 刃 值 标化 目的基 因 的 (2 D 值 , 得 到 相 对 含 量进 行
收集河北
医科大 学 第 四 医 院 癌检 中心 2( 1 1 年 1 ) ) 月 一2 0 12 ( 年 1 月 行乳腺 细 针穿 刺 的患 者 5 ) 例 , 均 为女性 , 未 (
的基因 O D 值 /G A P D H 的 O D 值 " 1.2 .2 免疫组织 化学 染 色 结 果判 定 采用 SP 法 ,
() 5( ) 川 1 , ( 讥i, z u
Ab t ract:o b s j橄i ve
To E冲[ o re th e " 却 ressi o n of B e el! nl i n fi ne n e ed le asP i rati o n breast lesi o n s , an d
i ts
( ) .( 5 );玫l一 ) 2 !p5 3 蛋白在乳腺癌 中的阳性表达率明显 高于在 乳腺 良性病 变中的 阳性表 达率 (尸< 0.( 5 ); )
在乳腺 癌中 B e c i n l l 蛋 白表达与 B c l 一 2 和 p5 3 蛋 白表达之 间存在 负相关(P < " .咤 ) 5 );而 B c l 一 2 和 p5 3 蛋白 的表 达无相关性 (尸 > ( ).( ) 5) " 结论 e c B i n l l 在乳腺癌组织 中表达下调 , 而 B C I 一 2! pS 3 在乳腺癌 中均有高
瘤 的发 生发 展闭 "但 其作 用机 制及 其与凋 亡的 关 系 尚不十 分清楚 "本 研究 通过 检测 细针穿 刺乳腺 增生 性病 变 和乳腺 癌 中 B e c li n l m R N A 和蛋 白的表 达及 其与 Bd 一 2 和 p5 3 的相 关 性 , 探讨 自噬基 因 B e c!in l
exp ress一 on of B e eli nl, B c l 一 2 , P 53 i n breast lesion s. R e s ult s
T h e exp ressi on of B e eli n l n飞 RN A i n b reast
ea neers w as l ow er than th ose i n ben i g n b reast l esi o ns ( P < () .( ) 5 ) ;th e ex Pressi o ns o f 玫 l 一 2 and p 53 n飞 RNA i n b reasr ea neers w ere high er th an th ose i n b en i gn b rea !t l esi o ns (P < ( ) .( ) 5 ). T h e po siti v e ex P ress i on ra r e o f B eel in l i n b reast ean eers w as l o w e r than th at i n b en i g n brea st l esi on s(P < () .() 5 ) ;th e p o si ti v e express一 () n rates of B C I 一 2 a nd P53 i n breast eaneers w ere h i g her than tho se in ben i g n b reast l esi o ns ( P < ( ) .5 ) 5 ) ; th ere w ere n eg ati ve c o rrel ati o ns betw e n B e el 王 n l an d fo un d betw een p5 3 a nd B c l 一 2 (P > ( ) .( ) 5 ). C on clu s i n o p53 , B C L Z (P < ( ).( ) 5 ); n o eo rrelati on w as
e c B i n l l n1R N A 在乳腺 癌 中的表达 明显低
于在乳腺 良性病 变中的表达(尸 < ( ) .( 5 ),B ) c l 一 2 !p5 3 n改N A 在乳腺癌 中的表达高 于在乳 腺 良性病 变 中的 表达 (尸 < ( ) .( ) 5) " B e c i n l l 蛋 白在乳腺癌 中的 阳性表达率明显低 于在乳腺 良性病 变中的 阳性表达率(尸<
T h e low ex p ressi on of B e eli n l and the h i gh ex -
p ressi o n of p5 3 , B C I 一 2 1 5 i n den ti fi ed in b reast ean eers.T here a re nega ti ve eo rrel a ti o n s b etw een B e el in l and p 53 , B el 一 2 i n breast ean ee rs. K ey w o池 :B reast ean eer;A utop h ag y ;A po pto si s;B e eli n l ;p53 ;B C I 一 2