滤纸片干血斑技术.概要

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干血片检测原理-概述说明以及解释

干血片检测原理-概述说明以及解释1.引言1.1 概述概述干血片检测，是一种基于干血片技术的检测方法，广泛应用于医学领域。

它通过快速、准确地分析干血片中的生物标记物，如DNA、RNA、蛋白质等，来评估个体的健康状况、疾病风险以及药物反应等重要信息。

相比传统的血液检测方法，干血片检测具有简便、经济、无需专业技术人员操作等诸多优势，因而备受关注。

干血片检测的原理主要基于血液中生物标记物与相关疾病之间的紧密联系。

在干血片制备过程中，通过简单的刺破皮肤，将足够数量的血液收集于特殊的滤纸片上。

这些血液中的生物标记物会在干燥的过程中被固定，形成干血片，从而保持其完整性和活性。

在干血片制备完成后，接下来就是对干血片的分析。

最常见的方法是利用高分辨率的仪器，如质谱仪、光谱仪等，对干血片中的生物标记物进行定性和定量分析。

这些仪器能够根据生物标记物的特征光谱或质谱图谱，快速识别和测量血液中的不同成分，从而对个体的健康状态作出准确的评估。

从技术上讲，干血片检测的原理是基于生物化学、光谱学、质谱学等学科的知识。

通过对干血片中的生物标记物进行分析，可以获取许多有关患者的关键信息，包括基因型、表达谱、代谢产物等。

这些信息不仅能够帮助医生进行疾病的早期诊断和治疗选择，还可以为个体化医疗和精准医学提供有效的支持。

总之，干血片检测原理是以干血片技术为基础的一种快速、准确地分析血液中生物标记物的方法。

它具有简便、经济、无需专业技术人员操作等特点，将在未来医学领域发挥越来越重要的作用。

随着相关技术的进一步发展，干血片检测有望成为一种常规的、非侵入性的健康监测手段，为人们的健康提供更加全面和个体化的保障。

1.2 文章结构文章结构文章结构主要包括引言、正文和结论三个部分。

1. 引言：引言部分主要概述了干血片检测原理的背景和重要性。

通过介绍干血片检测的基本概念和应用领域，引起读者对这一主题的兴趣。

同时，说明了本文的研究目的和文章结构。

2. 正文：正文是干血片检测原理的核心内容，可以包括多个要点。

干血斑样本的采集、运输和保存

静脉血充分与EDTA混合；
最好采集后立即制备干血斑；血浆与血细胞分层的全血在制备干血斑前，应轻柔地上下颠倒采血管（避免血细胞破裂），使血液混匀后制备；
续：
• 在滤纸片血斑充分干燥后，将滤纸片放入玻璃纸或塑料纸里，避免滤纸之间标本的污染, 可邮寄运输； • 如果无条件立即运输可暂保存－20℃冰柜中，加放干燥剂和湿度指示卡，定期监测湿度变化；
血液充分吸收透过滤纸，填满印圈，不要在一个圈上重复采血，避免触摸或涂抹血斑。
可能的原因： 1. 血液未渗透滤纸或未填满圆圈前将滤纸移走； 2. 用毛细管转移血液; 3. 在取样前或后用戴手套或不戴手套的手触摸滤纸，滤纸上粘有洗手液；
毛细管或其他锐器移取血液
样本在干燥小于4小时前即寄出
1. 吸附血液过多； 2. 双面贴
疏忽未采血；
干血斑样本的采集、运输和保存
张米
2006-10-17
续：
• 不采集第一滴末梢血。 • 将第二滴血滴于滤纸上。滤纸每个印圈约需 100ｕl血液。 • 让血液滤纸片于室温下自然干燥至少4小时（在潮湿气候下至少24小时）。 • 不要加热血片或将他们堆叠在一起，干燥过程中不要与其它界面接触。
EDTA抗凝静脉血制备干血斑注意事项：
1. 用力挤压针刺点周围； 2. 采血前或后滤纸面沾染洗手液、滑石粉、酒精、化学试剂、杀毒剂、水等； 3. 将血斑直接加热；
1. 在针刺之前未将采血处酒精擦干； 2. 滤纸沾染酒精，洗手液； 3. 过分挤压采血处； 4. 不正确同一采血圈多次滴血； 2. 双面贴；

滤纸干血斑制备疟原虫DNA模板的方法评价

· ３０１６ ·
· 论著 ·
国际检验医学杂志２０１５年１Ｏ月第３６卷第２Ｏ期ＩｎｔＪＬａｂＭｅｄ，Ｏｃｔｏｂｅｒ２０１５，ＶｏＩ＿３６，Ｎｏ．２０
滤纸干血斑制备疟原虫ＤＮＡ模板的方法评价
朱红娥，田斌 △ （１．安乡县疾病预防控制中心，湖南安乡４１５６００；２．长沙市疾病预防控制中心，湖南长沙４１０００１；
Ｋａｐｐａ一０．４９２，与全血标本ＰＣＲ检测结果比较Ｋａｐｐａ一０．６８６；分别以厚薄血片镜检和全血标本进行的ＰＣＲ检测为金标准，滤
纸干血斑采集血样进行ＰＣＲ检测的灵敏度分别为７５．０和７１．４，特异度分别为７８．９和１００．０。结论滤纸干血斑采集
血液标本进行ＰＣＲ检测尚不能取得良好的效果，仍需进一步研究。
关键词：疟原虫；ＤＮＡ；聚合酶链反应；干血斑
ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７３—４１３Ｏ．２Ｏ１５．２Ｏ．０４０
文献标识码：Ａ
文章编号：ｌ６７３—４１３０（２０１５）２０—３０１６Ｏ３
ＭｅｔｈｏｄｓＣｏｌｌｅｃｔｅｄａｎｄｔｅｓｔｅｄ４７ｂｌｏｏｄｓａｍｐｌｅｓｏｆｓｕｓｐｅｃｔｅｄｉｍｐｏｒｔｅｄｍａｌａｒｉａｐａｔｉｅｎｔｓ，ｔｈｅＤＮＡｗａｓｅｘｔｒａｃｔｅｄａｎｄｔｅｓｔｅｄｂｙｕｓｉｎｇｃｏｎｖｅｎｔｉｏｎａｌｐｒｏｃｅｄｕｒｅｓａｎｄＰＣＲ，ｔｈｅｎｃｏｕｎｔａｎｄａｎａｌｙｚｅｔｅｓｔｒｅｓｕｌｔｓｏｆｍａｔｃｈｅｄｄｅｓｉｇｎ．ＲｅｓｕｌｔｓＴｈｅＫａｐｐａｖａｌｕｅｗａｓ０．４９２ｗｈｅｎｃｏｍｐａｒｅｄｆｉｌｔｅｒｐａｐｅｒｄｒｉｅｄｂｌｏｏｄｓｐｏｔｓｗｉｔｈｔｈｉｃｋａｎｄｔｈｉｎｂｌｏｏｄｓｍｅａｒｔｅｓｔｒｅｓｕｌｔｓ，ａｎｄｔｈｅＫａｐｐａｖａｌｕｅｗａｓ０．６８６ｗｈｅｎｃｏｍ — ｐａｒｅｄｗｉｔｈｗｈｏｌｅｂｌｏｏｄｓａｍｐｌｅ．ＵｓｉｎｇｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｏｆｔｈｉｃｋａｎｄｔｈｉｎｂｌｏｏｄｓｍｅａｒａｎｄｗｈｏｌｅｂｌｏｏｄｓａｍｐｌｅｓａｓｔｈｅｇｏｌｄｓｔａｎｄａｒｄｔＯｅ— ｖａｌｕａｔｅｔｈｅｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙａｎｄｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙｏｆｆｉｌｔｅｒｐａｐｅｒｄｒｉｅｄｂｌｏｏｄｓｐｏｔｍｅｔｈｏｄｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ，ｔｈｅｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙｗａｓ７５．０，７１．４ａｎｄｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙｗａｓ７８．９，１００．０．ＣｏｎｃｌｕｓｉｏｎＣｏｌｌｅｃｔｅｄｂｌｏｏｄｓａｍｐｌｅｓｕｓｉｎｇｆｉｌｔｅｒｐａｐｅｒｃａｎｔｇｅｔｇｏｏｄｒｅｓｕｌｔｓｉｎＰＣＲｔｅｓｔ，ｓｔｉｌｌｎｅｅｄｓｆｕｒｔｈｅｒｒｅｓｅａｒｃｈ．

新生儿疾病筛查血片采集技术规范

采血部位：婴儿足跟外侧缘、内侧缘（距足跟0.6-0.7c处），不得在婴儿足跟中间针刺，以免损伤婴儿神经、肌腱和骨骼。
不能采血的部位
足跟后缘和中心部足弓：容易伤及神经、肌健、韧带和软骨肿胀或水肿部位手指：易导致局部感染、指骨坏死。
改善局部血运
足部是否温暖？新生儿吃奶后半小时到2小时之内采血热敷：可用40-42℃毛巾热敷15-30分钟或
黄平县人民医院
蒙秀建
主要内容
概念干血片标本采集的重要性采血空白滤纸片的保存采血时间、采血部位采血步骤血片采集后的保存、登记
新生儿疾病筛查？
指医疗保健机构在新生儿群体中，用快速、简便、敏感的检测方法，对一些危害儿童生成发育、导致儿童智能障碍的一些先天性疾病、遗传性疾病进行群体筛检，从而使在临床上尚未出现疾病表现，而在其体内生化、代谢或者功能已有变化时就做出早期诊断，并且结合有效治疗，避免患儿重要脏器出现不可逆性的损害，保障儿童正常的体格发育智能发育。
注意事项
消毒酒精未干不宜进针采血同一滤纸部位不得重复滴血和两面滴血凝固的血样不能用于制备血斑标本避免晾置过久、日晒、紫外线照射、福尔马林气
味熏染、接触异物污染等，以及油漆气味的影响避免血斑标本之间交叉污染污染，未干的血片不
能重叠放避免在新生儿饥饿状态下取血新生儿末梢循环差，一定要等足部足够温暖柔软
各区县妇幼保健院每周收ห้องสมุดไป่ตู้标本后先质控，并填写区县递送血片记录单，合格标本及时送或寄往新生儿疾病筛查筛查中心。
血片采集重要性
血片采集并及时送检是整个新生儿疾病筛查技术流程中最重要的环节。采血质量直接影响实验室检测结果，假阳性引来新生儿家长不必要的紧张，假阴性造成患儿的漏筛，使患儿失去最佳治疗时机。因此必须按规范要求完成血片采集工作。

新生儿代谢病筛查滤纸干血斑标本采集技术和传递常规

新生儿代谢病筛查滤纸干血斑标本采集技术和传递常规梅州市新生儿疾病筛查中心一、滤纸干血斑标本滤纸干血斑标本（dried blood spots （DBS）on filter paper）是将采集的新生儿血样滴在筛查专用滤纸上而制成的圆形均匀斑状血样，一般用于新生儿疾病筛查实验检测。

新生儿干血斑标本采集是新生儿疾病筛查整个过程中最首要、并且是十分关键的环节，滤纸血斑标本质量直接影响实验室检测结果，由于标本质量问题导致的假阴性可引起筛查漏诊，或假阳性过高也给新生儿及其监护人造成不必要的复查和精神负担。

新生儿查筛滤纸干血斑标本一般由产科医院婴儿室的医务人员负责，采血人员必须经过专项技术培训后上岗，严格按照采血常规和管理规范进行采血，保证质量。

二、采血时间新生儿干血斑标本的采集时间一般依据筛查指标的体内变化规律而决定。

我国目前新生儿疾病筛查项目为先天性甲状腺功能低下（CH）和苯丙酮尿症（PKU）；广东省增加G6PD缺乏症，三个项目的筛查指标分别为促甲状腺素（TSH）水平，苯丙氨酸（Phe）浓度和G6PD活性。

胎儿体内Phe通过自身肝细胞和母体肝细胞Phe羟化酶的作用而正常代谢，保持血Phe浓度于正常水平，故PKU胎儿体内Phe浓度亦能保持正常水平。

PKU 患儿出生后经过哺乳摄入蛋白质，由于新生儿肝细胞Phe羟化酶缺陷而Phe不能正常代谢，血Phe浓度将逐渐升高。

新生儿出生后由于寒冷刺激及环境的改变，体内TSH呈生理性反应性增高，一般于48小时后回落至与机体病理生理状况一致的真值（true value）水平。

G6PD活性一般不受生后日龄等因素的影响。

由此可见，新生儿干血斑标本应于新生儿充分哺乳和出生48小时后采集，最佳采血时间为出生72小时（或生后3天），喂奶8次以上。

在某些情况下，新生儿可能不能按时采到血样，如①新生儿生后出院过早；②新生儿因特殊病情需转院诊治；③新生儿因出生体重过低、病重、输血或血浆等未符合采血条件者。

新生儿疾病筛查血片采集技术规范

附件1：新生儿疾病筛查血片采集技术规范血片采集是新生儿疾病筛查技术流程中最重要的环节。

采血质量直接影响实验室检测结果，因此必须按规范要求完成血片采集工作。

一、采血机构及人员要求（一）采血机构：取得《医疗机构执业许可证》并设有产科或儿科的医疗保健机构。

（二）采血人员：1、具有中专以上学历，从事临床工作2年以上。

2、接受过新生儿疾病筛查相关知识和技能的培训，包括：新生儿疾病筛查的目的、原则、方法及网络运行；滤纸干血片采集、保存、递送的相关知识；新生儿疾病筛查有关信息、结果登记和档案管理。

二、采血机构和人员职责1、采血人员在实施血片采集前，应将新生儿疾病筛查的项目、条件、方式、费用等情况如实告知新生儿的监护人，并应遵循知情选择的原则。

2、认真填写采血卡片，做到字迹清楚、登记完整。

卡片内容包括：采血单位、母亲姓名、住院号、居住地址、联系电话、新生儿性别、孕周、出生体重、出生日期及采血日期等。

3、严格按照新生儿疾病筛查采血技术程序，采集足跟血，制成滤纸干血片，并递送至筛查检测机构。

4、因特殊情况未按期采血者，应及时预约或追踪采集血片。

5、对可疑阳性病例应协助追访机构，及时通知复查，以便确诊或采取干预措施。

6、做好资料登记和存档保管工作，包括掌握活产数、筛查数、新生儿采血登记信息、反馈的检测结果及确诊病例等资料，保存时间至少10年，以备查。

三、血片采集步骤1、采血人员清洗双手并佩带手套；2、按摩或热敷新生儿足跟，并用75%酒精消毒皮肤；3、使用一次性采血针刺足跟内或外侧，深度小于3毫米，用干棉球拭去第一滴血，取第二滴血；4、将滤纸片接触血滴，切勿触及足跟皮肤，使血自然渗透至滤纸背面，至少采集三个血斑；5、手持消毒棉轻压取血部位使其止血；6、将血片臵于清洁空气中，避免阳光直射，自然晾干呈深褐色，并登记造册；7、将检查合格的滤纸干血片，臵于塑料袋内，保存在2-8℃冰箱中；8、在规定时间内将滤纸干血片递送至新生儿疾病筛查实验室检测机构。

滤纸片干血斑技术ppt课件

静脉采血法
2014年3月20日
11
样品采集
温育采血部位：不超过41℃， 3~5分钟。
酒精消毒，用无菌纱布垫擦干。
针刺，无菌纱布垫擦去第一滴血。
用滤纸蘸取单个血滴，让血滴充分浸润采血圈。至少采集3个采血圈。
12
2014年3月20日
样品采集

血样采集完毕后，将制成的滤纸片干血斑采集卡在干燥、清洁、平整、无吸水性的桌面放置3~4小时风干。或将采集卡放置于专业纸质干燥架上自然风干。不要放在太阳下晾晒或用任何人工方法（如烘干机）加速干燥。静脉采血：用移液器移取80μL全血，对准采样圈中心缓慢将血液滴加在滤纸上，避免气泡产生。
• 无粉手套 • 干燥架 • 药棉或棉签和纱布 • 采血针 • 滤纸采血片、信息卡 • 污物桶
2014年3月20日
10
样品采集

填写滤纸卡：信息完整，以免混淆样品。确定采血部位：
脚后跟采血法： 6周~4月或小于5kg的婴儿
脚大拇指采血法： 4~10月或5~10kg 的婴儿手指尖采血法：大于10月或大于10kg 的婴儿
HIV相关临床表
●临床怀疑HIV感染的儿童

儿童HIV/AIDS的诊断
>18M的儿童先用ELISA初筛，再用WB确诊 <18M婴儿检测HIVRAN前DNA或HIV抗原（P24）或病毒培养
4

2014年3月20日
HIV阳性母亲所生、未受感染的婴儿
VL 母亲抗体抗体阳性率 %
婴儿月龄
2014年3月20日
13
2014年3月20日
DBS有效性的判断

3.干血斑样本的采集

3. 选定抽血部位,并请母亲为婴儿把选定部位捂热 • 其他必要文件
• 婴儿6周-4个月大: 脚后跟
• 婴儿4-10个月大:脚趾大拇指
4. 工作人员清洁准备 • 洗手擦干后,戴上手套; • 如果手套上有粉, 请用清水洗干净,擦
干之后再进行下一步。 • 填好采集卡上的资料。
• 婴儿大于10个月或超过10公斤重: 手指尖
早期婴儿诊断技术利用 DNA PCR 的方法进行检测，可以了解出生后6周及以上的婴儿的感染状况，为及时治疗争取了时间。
3
为什么要进行早期婴儿诊断（EID）？
尽早发现感染婴幼儿，为其提供相应的治疗关怀抗病毒治疗可母乳喂养，为婴儿提供更好的营养
尽早排除未感染婴儿减轻不必要的家庭压力停止复方新诺明预防性用药
DNA PCR 阳性
阴性
DNA PCR 阳性
阴性
尽快采集第三个样本，制备滤纸片来自血斑DNA PCR 阳性
阴性
报告检测到HIV1
报告检测到HIV1
报告未检测到 HIV-1
报告未检测到 HIV-1
转诊到艾滋病治疗关怀机构，尽快开始抗病毒治疗
临床随访，如婴儿母乳喂养，在停母乳 6周后按上述流程检测
• 一.基本信息 • 母亲姓名 _________________ • 儿童姓名 _________________ 性别男/ 女 • 出生日期年月日 • 现住址(详填)________乡(镇,街道)________村___(门牌号) • 联系电话 ________________ • 二.临床信息 • 1. 母亲抗病毒药物应用情况：用药/ 未用药 • 如用药，原因为抗病毒治疗/ 母婴阻断用药 • 开始用药时间孕周产时产后 • 孕期：用药 / 未用药 • 如用药，方案为 + + • 产时：用药 / 未用药 • 如用药，方案为 + + • 产后：用药 / 未用药 • 如用药，方案为+ + • 停止用药时间孕周/ 产时/ 产后周 • 2. 新生儿抗病毒药物应用情况：用药/ 未用药 • 开始用药时间年月日 • （或出生后周） • 停止用药时间年月日 • （或出生后周） • 用药方案 + + • 3. 儿童应用复方新诺明预防耶氏肺孢子菌肺炎 (PCP)情况： • 已用药/ 今天开始用药/ 未用药 • 如已用药，开始时间年月日 • 4. 喂养方式： • 目前为人工喂养/ 纯母乳喂养/ 混合喂养 • 是否曾母乳喂养是/ 否/ 不知道 • 如曾母乳喂养，停止母乳喂养的时间为： • 年月日 • 5. 儿童出现HIV 感染疑似症状：是/ 否，请说明为何 • 种机会性感染_______________________________________ • 三.样本信息 • 1. 取样日期年月日 • 2. 这是第次送检干血斑样本,此次送检原因: • 做第1 次检测 • 做第2 次检测 • 做第3 次检测,前2 次检测结果不确定 • 停止母乳喂养6 周以上 • 儿童出现HIV 感染疑似症状 • 其它,请描述________________________

干血斑的DNA分析用于新生儿筛查

干血斑的DNA分析用于新生儿筛查聊城市妇幼保健院山东聊城 252000【摘要】新生儿足跟血干血斑制备简便、安全、稳定，在DNA分析中对干血斑进行筛选是非常可行的。

随着筛查技术的发展，可筛查疾病的数量不断增加，有效地提高了新生儿筛查的有效性。

这篇文章分析了新生儿干血斑的DNA筛查。

【关键词】干血斑；DNA分析；新生儿筛查前言：在20多个国家为新生儿筛查几种可治疗的遗传疾病对患有这些疾病的新生儿的健康具有重大影响。

新生儿筛查通常会在滤纸收集血液样本分析，分析血液疾病相关基因产物或异常血清代谢物水平，证实该方法是一种提供一个稳定可靠的生物材料进行分析的方法，由于滤纸是便于携带，为筛查大的或区域性隔离的人群提供了方便。

含有D N A分析的遗传筛选方案受到技术困难的阻碍，尽管有大量关于与许多遗传缺陷相关的D N A主要结构序列变化的数据。

这些困难包括：使标准技术适应在遗传筛选方案中收集的大量样本；需要用放射性探针进行常规分析。

而且很难从干燥的斑块中分离出足够的D N A。

1 干血斑用于新生儿筛查的分析前程序及注意事项干血斑指将采集的新生患儿足跟血血样滴在专用滤纸上制成的圆形、均匀斑状血样。

所使用的滤纸大多为Schleicher&Scheull 903滤纸或Whatman gradel/3滤纸，其物理特性符合美国测试和材料协会的标准，滤纸是FDA批准装载干血斑的Ⅱ类医疗设备。

血液样本中颗粒的厚度（决定其承载能力和扩散能力）、均匀性、孔隙大小、保留和吸收能力等特征因批次而异，在临床使用过程中，滤纸的质量必须严格控制，在新生儿疾病筛查实验中，滤纸的质量由新生儿疾病筛查质量控制方案进行规范。

其主要目的是确保上述各项指标在不同批次的滤纸上的一致性。

新生儿筛查的正常采血期为出生后72小时、出生后7天内和完全母乳喂养后。

干血斑滤纸符合下列四项条件：（1）不少于三个直径超过8mm的血斑。

（2）血滴自然渗出，滤纸两侧的血斑一致。

滤纸片干血斑技术

12
2014年3月20日
样品采集

血样采集完毕后，将制成的滤纸片干血斑采集卡在干燥、清洁、平整、无吸水性的桌面放置3~4小时风干。或将采集卡放置于专业纸质干燥架上自然风干。不要放在太阳下晾晒或用任何人工方法（如烘干机）加速干燥。静脉采血：用移液器移取80μL全血，对准采样圈中心缓慢将血液滴加在滤纸上，避免气泡产生。
2014年3月20日
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DBS在HIV检测中的应用

以下数据引自中国CDC性艾中心网页。
1、HIV抗体检测 2、HIV-1前病毒DNA检测， 3、HIV-1基因序列测定和亚型分析

HIV抗体检测：
• 相同血样的滤纸片干血斑样本与血浆样本用EIA法检测，符合率为 100%，相关性为0.919。
• 两种样本经WB确认，条带完全一致的占总数的42.85%,其中主要条带（至少有2条env带出现，或至少1条env和p24带同时出现）的符合率为100%
艾滋病阳性产妇分娩婴幼儿早诊标本的采集
滤纸片干血斑技术
罗玉珍桂林市妇女儿童医院检验科
2014年3月20日 1
概述

滤纸片是血液标本采集和运输的极好载体。全血滴在滤纸片上制成滤纸片干血斑（Dried blood spots，DBS），有很好的生物稳定性和安全性，便于储存和运输。特别适用于发展中国家边远地区的样本采集、贮存与运输。 1973年，国外就开始研究用滤纸收集血样用于疾病的研究。
17

2014年3月20日
DBS的质量控制

合格血斑的六条标准是
①每个血斑直径要达到10mm；
③血液必须完全渗透到滤纸背面； ⑤无污染；

我国婴儿艾滋病早期诊断工作研究进展

我国婴儿艾滋病早期诊断工作研究进展作者：张华等来源：《现代养生·下半月版》 2019年第11期张华丘小霞广西壮族自治区妇幼保健院广西壮族自治区南宁市 530001【摘要】艾滋病母婴传播是儿童感染HIV的主要途径。

普通人群HIV抗体检测存在3个月的“窗口期”，而母体的HIV-1抗体可通过胎盘进入婴儿体内，并可持续到18个月龄后才逐渐消失，因此，未满18月龄的儿童应用HIV抗体检测就不能准确确定婴儿是否感染了HIV病毒[1]。

婴儿艾滋病早期诊断（以下简称：EID）检测工作将确定婴儿是否感染HIV的时间提前到6月龄，是促进HIV暴露儿童早发现，早治疗，降低HIV感染儿童死亡的有效措施[2]，对HIV 预防、治疗和控制具有重要意义。

本文对EID工作做一综述，以期促进艾滋病母婴阻断工作的推进，从而实现儿童“0”艾滋的目标。

【关键词】艾滋病；早期诊断；检测；母婴阻断艾滋病全称为获得性免疫缺陷综合症（acquired immundeficiency syndrome,AIDS），主要有三大传播途径，即性传播，血液传播和母婴传播。

艾滋病母婴传播是15岁以下婴幼儿感染艾滋病病毒(HIV)的主要途径[3]，感染HIV的婴儿疾病进展非常迅速，如不接受任何抗病毒治疗，50%以上会在2岁前死亡[4]。

尽早明确艾滋病感染孕产妇所生婴儿（以下称HIV暴露儿童）的艾滋病感染状态，是对其进行治疗和干预的前提。

婴儿艾滋病早期诊断（EID）工作是预防母婴传播（prevention of mother-to-child transmission，PMTCT）工作的一个重要环节，是艾滋病防治工作的一个重要组成部分。

1 婴儿艾滋病早期诊断工作的开展传统HIV暴露儿童艾滋病诊断方法是HIV抗体检测，由于HIV感染母亲的HIV抗体可在其所生婴幼儿体内持续存在时间达18个月，甚至更长时间，所以，以往诊断HIV暴露儿童是否感染HIV需满18个月，从而导致HIV感染儿童没有得到及时诊断和救治。

儿疾病筛查血片采集技术规范

不合格标本的种类
卡片填写不完整缺项
采血时间不足72小时或未填
血斑污染或浸水
血斑过小、过少、血斑未浸透两面、重复滴血
采后血在外放置过久，超过了5小时
未及时寄送，标本失效
血斑未洗脱（保存不当造成）
血源性疾病的预防
母亲患有肝炎、梅毒、爱滋病者，血斑标本应单独晾干、用红色笔墨醒目标记疾病名称、单独塑料袋密封包装
合格的滤纸干血片
采血卡片填写清晰不缺项
采血时间大于72小时
每个血斑直径大于8毫米，共3-5个
血滴自然渗透，滤纸正反面血斑一致
采血后3-4小时内将血片放2-8℃冰箱保存
血斑无污染、血斑能完全洗脱
01
03
02
04
05
06
将检查合格的滤纸干血片，置于塑料袋内，保存在2-8℃冰箱中。血片保存不当会造成血片不能洗脱，使筛查实验结果出现假阴性在规定时间内将滤纸干血片送到妇幼保健站滤纸干血片应在采集后5个工作日内递送，3天内必须到达筛查检测机构。递送过程中应减少在室温下放置时间，避免血样过热过冷，避免血样潮湿与污染，防止标本失活。有完整的采血卡片及结果登记册
将新生儿足部抬高，高于身体水平，然后用消毒棉轻压针眼使其止血。
晾干
2
3
1
4
5
绝对不能放在抽屉或柜子内、新装修的房间内
避免热烤、日晒、紫外线照射、福尔马林或其他有机溶剂熏染、液体污染等
阴凉处清洁空气中
血斑悬空、水平摆放在桌面或操作台面上自然晾干
室温放置3-4小时（放置太短或过久都要影响检测结果）
消毒酒精未干不宜进针采血同一滤纸部位不得重复滴血和两面滴血凝固的血样不能用于制备血斑标本避免晾置过久、日晒、紫外线照射、福尔马林气味熏染、接触异物污染等，以及油漆气味的影响避免血斑标本之间交叉污染污染，未干的血片不能重叠放避免在新生儿饥饿状态下取血新生儿末梢循环差，一定要等足部足够温暖柔软才能采血

血片制作及染色概述

2021/3/27
4
采血时间
取血时机现症病人一般可随时取血，疟疾普查时可不考虑取血时机。但在诊断或需要某期疟原虫作标本时，则应掌握适宜的取血时机。
间日疟在寒热发作时，外周血液中主要可见环状体期；发作后数小时，环状体发育到滋养体期，疟色素形成，形态较易辩认，为诊断疟疾的有利时机；36~48小时，可检出裂殖体；发作一、二次后，配子体出现较多。
2021/3/27
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制作血膜的注意事项
3. 血膜让其自然干燥，切忌用太阳晒或火烤，干透后才能用甲醇固定薄血膜。夏天标本尽可能24~48小时内固定染色；冬天也不能超过 72小时。放置时间越久，厚血膜越不易溶血，染色效果也差。若不能及时染色，薄血膜宜先用甲醇固定（1~3分钟）然后用过滤清水或自来水对厚血膜溶血，晾干后包好置干燥器于冰箱内保存，用时将干燥器置室温中1~2小时后取出染色。
恶性疟较理想的取血时间是在发作后至20小时内取血，初发患者退热后常查不到疟原虫。
2021/3/27
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涂制血膜规则
用于检查疟原虫的血涂片有两种：一种是将血液涂呈薄膜状，称薄血膜；一种是血液涂成圆盘状，称厚血膜。
薄血膜上的血细胞要求平辅在玻片上面。涂片顺序，先厚后薄；位置分配，血片自左向右：薄厚-标签；推薄片用玻片短边。
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制作血膜的注意事项
1. 玻片清洗时，避免玻片碰撞、磨损。制作血膜的载玻片必须完全清洁而毫无油渍或污垢。制片时，手指只能持载片的边缘，不能接触玻片表面，以免油污使薄血膜产生空白区以及厚血膜脱落。作为推片的玻片边缘一定要平滑，才能使推出的血膜均匀一致。
2021/3/27
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