环保病理组织固定液

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组织固定液

组织固定液

组织固定液组织固定液北京华越洋生物------------------------------------------------------AAF固定液500ml 固定液40% 室温,避光,12个月组织化学中细胞或组织切片的固定。

主要由乙醇、冰乙酸、甲醛等组成。

常用于快速脱水和固定以及冷冻切片的快速固定。

AAF固定液5L 固定液40% 室温,避光,12个月组织化学中细胞或组织切片的固定。

主要由乙醇、冰乙酸、甲醛等组成。

常用于快速脱水和固定以及冷冻切片的快速固定。

Davidson's fixative 100ml 固定液40% 室温,避光,12个月Davidson's fixative 500ml 固定液40% 室温,避光,12个月Bouin's固定液100ml 固定液40% 室温,避光,6个月活检标本的固定、媒染剂、适用于脂肪较多的组织标本。

主要由PA溶液、甲醛、乙酸组成。

Bouin's固定液500ml 固定液40% 室温,避光,6个月活检标本的固定、媒染剂、适用于脂肪较多的组织标本。

主要由PA溶液、甲醛、乙酸组成。

改良乙醇Bouin固定液100ml 固定液40% 室温,避光,12个月固定肾活检组织,组织学制备固定液,亦可以很好的保存糖原主要由乙醇、甲醛、乙酸乙酯等组成。

改良乙醇Bouin固定液500ml 固定液40% 室温,避光,12个月固定肾活检组织,组织学制备固定液,亦可以很好的保存糖原主要由乙醇、甲醛、乙酸乙酯等组成。

Carnoy固定液100ml 固定液40% 室温,避光,12个月又称卡诺氏固定液,RNA\DNA染色的固定,糖原的固定,能清除血性标本,可以用于细胞学固定Carnoy固定液500ml 固定液40% 室温,避光,12个月又称卡诺氏固定液,RNA\DNA染色的固定,糖原的固定,能清除血性标本,可以用于细胞学固定Carnoy固定液Ⅱ100ml 固定液40% 室温,避光,12个月又称卡诺氏固定液,RNA\DNA染色的固定,糖原的固定,能清除血性标本,可以用于细胞学固定Carnoy固定液Ⅱ500ml 固定液40% 室温,避光,12个月又称卡诺氏固定液,RNA\DNA染色的固定,糖原的固定,能清除血性标本,可以用于细胞学固定BS固定液500ml 固定液40% 室温,6个月细胞核染色固定,尤其适用于DNA染色。

组织固定液的使用

组织固定液的使用

谈谈固定液的使用作者: liza3(站内联系TA)发布: 2013-01-11当前,应用于固定试剂的种类较多,它们对于固定不同的组织成分起着不同的作用,因此我们在使用时应该了解不同固定剂的效能,才能合理的固定组织。

根据Bencroft的分类法,将不同的固定剂分为四种类型:Ⅰ类:醛类,甲醛,戊二醛,多聚甲醛,丙烯醛,已二醛,丙二醛等。

Ⅱ类:氧化剂类,四氧化锇(奥酸),高锰酸钾,重铬酸钾等。

Ⅲ类:蛋白变性类,甲醇,乙醇,醋酸等。

Ⅳ类:其他,氯化汞,苦味酸等。

上述四种类型的固定剂,最常使用的是甲醛,其余的也在其它病理技术方面中用到。

下面根据使用的需要,将着重介绍几种常用的固定剂。

(1)甲醛甲醛商品名为福尔马林,一般市售的含甲醛37—40%,由甲醛气体饱和于水而成,比重为1.1 2。

它也可以稳定的固体形式存在,它的成分为高分子量的聚合体,称为多聚甲醛。

甲醛溶液较难纯化,在每批市售商品中,都含有不少的杂质如甲醇,这种在组织化学方法当中,能使酶钝化,影响其反应。

甲酸,它可使固定液变酸,在陈列标本或长时间固定的组织,由于酸的作用,往往细胞核染色欠佳。

甲醛有效固定作用的要点是,在蛋白质末端基团之间形成交联链。

参与甲醛固定蛋白质的基团,主要为氨基,亚氨基及酰氨基,肽,胍基,羟基,SH和芳香环。

甲醛与组织蛋白类的反应是多样和复杂的,因为它能和多种不同的功能基团结合,在多数情况下在其间形成桥键。

甲醛有这种交联的功能,也是它的缺点,在用甲醛固定过的组织中,需要做免疫组化的,往往提倡用酶消化或热抗原修复法来使蛋白与甲醛交联的醛键断裂开,以利于后来的染色。

甲醛可配成简单的或混合的固定液,最简单和最容易掌握的方法,就是取10ml甲醛液,加水9 0ml,这就是10%的福尔马林.当然,现在使用的固定液要求较为严格些,最好是使用缓冲福尔马林固定液,这将有利于后来的免疫组化染色的需要.从组织学的观点来说,甲醛是一种良好的固定剂,它有很多的优点:1. 组织收缩较少,损伤少,保存固有物质好.2. 固定均匀,穿透力强.3. 能使组织硬化,增进组织弹性,有利于切片.4. 能保存脂肪及脂类物质.5. 成本较低.虽然甲醛有上述的优点,但这都是相对而言,任何物质都不可能十全十美的,它也有许多缺点:1. 杂质含量较多,如甲醇,可钝化酶类,影响反应.2. 含有微量甲酸,导致固定液酸变,影响染色.3. 可产生福尔马林色素,影响观察.4. 不能固定尿酸和糖类物质.5. 容易挥发,污染环境,可导致标本干涸.6. 可长期存在于固定过的组织上.有人做过实验,组织用甲醛固定后在流水中冲洗5小时后,仍留有相当多的甲醛与蛋白质相结合,但需要经过长时间的流水冲洗(24天的冲洗)方能除去.可见存在于组织上的甲醛是不可能除去的.因为临床活检不可能有这么长的时间来冲洗组织.因此要特别指出的是,在其后的各种技术操作中,要特别注意到甲醛的存在,必须要想办法除去它,否则将会给各种染色造成影响,甚至导致失败。

环保组织固定液(浓缩型)

环保组织固定液(浓缩型)

北京雷根生物技术有限公司 环保组织固定液(浓缩型)简介:固定的目的在于保存细胞和组织的原有形态结构,固定剂能阻止内源性溶酶体酶对自身组织和细胞的自溶、抑制细菌和霉菌的生长。

固定液分为醛类固定液、汞类固定液、醇类固定液、氧化剂类固定液、苦味酸盐类固定液等,较为常用的是醛类中的福尔马林、醇类中的乙醇。

Leagene 环保组织固定液(浓缩型)主要以植物多糖和聚乙烯醇为主要原料配制,不含甲醛等有害物质,属于无毒环保型固定液,加入3体积95%的乙醇后使用。

对于常规石蜡切片固定后形态结构清晰、背景对比度高。

该固定液适合于绝大多数组织和细胞的固定,是免疫组织化学和培养细胞固定中最常用的固定液之一,它能较好的保护组织和细胞的形态结构以及核酸。

组成:操作步骤(仅供参考):1、 按实验具体要求操作,一般应加入3体积95%的乙醇后使用。

2、 一般标本固定时间控制在1~4h/mm ,大标本应适当延长固定时间。

3、 固定好的组织,可在福尔马林固定液(10%)或70%乙醇中长期保存。

注意事项:1、 一经开启,储存过久固定效果易下降。

2、 避免过度延长固定时间,否则引起生物大分子过度交联。

取材厚度不同,固定时间也不同。

3、 固定液的容量应足够,一般固定液与组织块的体积比率应大于10:1。

4、 温度对固定的影响很明显,提高温度可以加速固定作用,但温度不宜过高。

5、 取出新鲜组织后,应及时固定,无法及时固定时,应保存于生理盐水中及时送检。

相关:编号 名称 DF0106 DF0106 Storage 环保组织固定液(浓缩型) 500ml 5L RT 使用说明书 1份编号 名称 CC0130胰蛋白酶-EDTA 溶液(0.25%:0.02%) PT0013考马斯亮蓝快速染色液 TC0733乳酸检测试剂盒(乳酸脱氢酶比色法) TC1167 尿素(Urea)检测试剂盒(脲酶波氏比色法)。

4%多聚甲醛固定组织的方法

4%多聚甲醛固定组织的方法

聚甲醛(也称为福尔马林)是一种用于固定组织样本的常见方法,以便后续的组织学研究。

以下是一种使用4%多聚甲醛进行组织固定的常规方法:准备4%多聚甲醛溶液:将100 mL的PBS(磷酸缓冲盐溶液)加入4 g多聚甲醛中,并搅拌混合,直到多聚甲醛完全溶解。

获取待固定的组织样本:准备好需要固定的组织样本,例如动物组织或细胞。

固定组织样本:将组织样本置于4%多聚甲醛溶液中,确保样本完全浸泡在溶液中。

通常,至少需要10倍于样本体积的溶液来确保充分固定。

固定时间:根据需要固定的样本的大小和特性,将其浸泡在4%多聚甲醛溶液中的时间可在30分钟至24小时之间。

冲洗样本:固定时间过后,将固定的组织样本取出并用PBS缓冲液进行冲洗,以去除多余的多聚甲醛。

后续处理:完成固定和冲洗后,可以将组织样本进行进一步的处理,如去水化、脱脂、包埋等,以便进行切片和染色等组织学研究。

请注意,这只是一种常用的方法,具体的固定条件可能因实验目的和样本特性而有所不同。

因此,在进行固定实验之前,建议参考相关文献或向专业人士寻求建议,以获得最佳的实验方案。

多聚甲醛固定液的原理

多聚甲醛固定液的原理

多聚甲醛固定液的原理本产品是一种广泛用于免疫组化(ihc)、免疫荧光(if)、免疫细胞化学(ic)、流式分析(facs)等检测时组织、组织切片、细胞等生物样品固定的溶液。

本产品配制在pbs溶液中,可直接用于组织或细胞的固定,无需稀释。

若需使用低浓度多聚甲醛,可使用pbs按比例稀释。

组织学上,4%的多聚甲醛穿透力强,固定均匀,能使组织硬化,有利于切片。

该固定剂造成的组织收缩少,损伤小,较为温和,能很好的保存固有物质,保持组织的抗原性和细微结构。

此外,多聚甲醛可用于固定并保存脂肪及脂类物质。

本产品固定效果好,应用广泛,适用于各种常见细胞或组织的固定。

对皮肤、肌肉、内脏等有很好的固定作用。

,但主要作用于蛋白质,无法固定尿酸和糖等。

固定液可以使细胞或组织的蛋白质凝固,阻止内源性或外源性的酶反应,防止组织的自溶或异溶,保持原有的结构和形态。

对于免疫组织化学,具有原位保存抗原,避免抗原失活或分散的作用。

固定剂有很多种,如多聚甲醛、甲醛、戊二醛、乙醇、丙酮等。

其固定原理不同,各有利弊。

多聚甲醛目前在科研中应用最广泛,通过形成分子间交联可以固定细胞或组织的三维结构。

多聚甲醛是甲醛的聚合物,性质比甲醛稳定,破坏抗原的能力比甲醛弱。

因此,多聚甲醛常被用作科学研究中的固定剂。

本产品经反复测试,可以很好的适用于ihc、if、ic和facs 等相关检测时样品的固定。

按每个样品需要1ml固定液计算,一包本品可固定100或500个样品。

保存条件:-20℃保存,一年有效。

4℃保存,一个月有效。

注意事项:1.本产品放置过久其中的醛基可能会被氧化为酸,使溶液ph降低,从而影响染色。

2.不同细胞或组织样品所需的固定时间有所不同,应当根据细胞或组织的种类以及组织块的大小来调整固定时间。

3.多聚甲醛虽然作用温和,但能硬化组织,固定时间过久会导致组织变脆,切片时易碎。

因此固定时间通常不宜超过24小时。

4.多聚甲醛可长期存在于固定过的细胞或组织样品中,固定完成后用适当的洗涤液或水冲洗数小时仍会有残留,因此后续实验结果如果受醛基影响,须尽量洗去残留的多聚甲醛。

病理组织的固定

病理组织的固定

病理组织的固定㈠凡需要进行病理组织学检查的标本(器官或组织),于离体(活体或尸体)后,应尽快置放(浸泡)于装有足够量固定液的容器中固定。

固定液量应为被固定标本体积的5~10倍。

置放标本的容器大小视标本和固定液的体积而定,应适当大一些。

临床科室切取的标本置放于容器中固定后,应尽快送交病理科继续固定。

未能及时、充分固定的干涸或腐败标本不能再进行固定和用于制做切片。

㈡常规固定液为4%中性甲醛(10%中性福尔马林),应预先多量配制贮存,以备随时使用。

小标本的固定时间为4~6小时,大标本为18~24小时或更久。

㈢根据病理学特殊检查(特殊染色和组织化学染色、免疫组织化学染色和原位核酸分子杂交染色、电镜观察等)的需要,应选用其他适宜的固定液进行固定[参见后述的“㈦固定液的常用种类和制备”]。

㈣器官、组织固定的基本方法1.食管、胃、肠、胆囊、膀胱等空腔器官:依规范方法剪开后,按其自然状态平铺于硬纸板上(重点暴露黏膜面或内表面的病变处),并用大头针将标本边缘处固定于纸板上,然后放入4%中性甲醛中固定(黏膜面或内表面朝向容器的液面,并覆盖薄层脱脂棉)。

2.肝、脾:由器官背面,沿其长轴每间隔1.5~2.0cm纵向平行剖开,切成数片。

将每片肝或脾轻轻地平放于装有4%中性甲醛的容器中,容器底面衬以脱脂棉。

应避免标本弯曲和相互间的叠压。

3.肺叶:放入固定液中的肺叶漂浮于液面,需在肺表面覆盖薄层脱脂棉。

必要时从支气管注入适量4%中性甲醛。

4.肾:沿肾外缘中线朝肾门方向作一水平切面(深达于肾盏),再行固定。

5.淋巴结:先用4%中性甲醛固定1小时后,再沿其长轴切成数片(厚 2 ~3mm),继续固定。

6.骨组织:先锯成小片(若是长骨应作横向锯片),在4%中性甲醛中固定24小时后,再进行脱钙。

7.微小组织或液体沉淀物:先用拭纸或滤纸妥为包裹(需用大头针扎牢),然后放入专用小盒内进行中性4%甲醛固定,以防检材遗失。

8.凡进入固定程序的标本必须连带其正确无误的病理检验号(病理号)。

组织固定液说明书

组织固定液说明书

组织固定液说明书【产品名称】通用名称:组织固定液商品名称:10%中性缓冲福尔马林固定液-即用型【包装规格】3ml、5ml、10ml、15ml、30ml、50ml、10L、20L【型号】ANBF01【预期用途】用于新鲜组织样本的固定。

【作用原理】固定是将组织浸入化学溶剂,使细胞内的物质尽量保持其生活状态时的结构和位置,并尽量保存组织中的抗原,使其不被破坏或扩散。

醛类固定液是一种交联性组织固定剂,主要通过使蛋白质分子发生交联而产生固定作用,中性福尔马林固定液采用磷酸氢二钠、磷酸二氢钠调节其pH值至中性,能最大限度地保护组织抗原,固定效果及对组织抗原性的保存均优于一般的甲醛溶液,是生物组织最常用的固定液。

【主要组成成分】主要由甲醛、磷酸氢二钠,磷酸二氢钾组成。

【储存条件及有效期】室温、防潮、防晒、阴凉处密封保存,储存条件下有效期24个月。

【适用仪器】染色结果适用于光学显微镜观察【样本要求】本试剂盒适用于新鲜生物组织。

【检验方法】1、将组织标本固定液编号、写上姓名等;2、组织标本的体积与组织固定液体积的比例为1:4,将离体组织及时浸入组织固定液中,一般不超过5分钟,固定时间为2至12小时。

【检验方法的局限性】1、含有微量甲酸,导致固定液酸变,影响染色。

2、不能固定尿酸和糖类物质。

3、容易挥发,污染环境,可导致标本干涸。

【产品性能指标】1、PH值:6.8~7.5,且瓶间差异不大于0.2,批间差异不大于0.2。

2、甲醛含量:4%~4.2%。

3、常温下,经固定液固定3h后的组织,经切片后在显微镜下观察,应细胞核清晰,无收缩现象。

【注意事项】1、注意使用时通风;2、忌新旧液混合使用;3、避免使用时接触皮肤、粘膜;4、本品仅用于体外诊断。

环保组织标本固定液详细说明

环保组织标本固定液详细说明

环保组织标本固定液特点:
1、绿色环保无毒无害,全面替代甲醛。

2、彻底解决了甲醛对病理工作者的伤害。

长期接触甲醛的人群如医院病理科、外科工作人员等经常吸入少量甲醛能引起慢性中毒,记忆力衰退,体内白细胞数明显下降。

【固定原理】
固定任何蛋白质,防止组织和细胞的自溶。

Cannice环保组织标本固定液(即用型)的优越性
1、淡黄色液体、气味清香,绿色环保、无毒、无害,彻底解决了甲醛对病理工作者的危害。

2、适用于病理组织标本、常规染色、组织化学染色、免疫组化染色
等,全面替代甲醛。

3、迅速渗入组织而固定原生态,使短期解剖的组织细胞形态不至于有变化。

4、固定液有相当的渗透力,可使组织内外完全固定,且无损伤。

5、缩短脱水、脱脂时间。

固定的同时,发生脱水、脱脂作用,缩短了病理切片制作过程中的脱水、透明时间。

6、增加细胞内含物质的折光度,易于鉴别,增加媒染作用和染色作用。

7、蛋白间不发生交联反应,免疫组化效果大大优于甲醛。

操作步骤与注意事项
【操作步骤】
1、将组织标本固定液编号、写上姓名等;
2、将离体组织及时浸入组织标本固定液中,一般不超过5分钟,组织标本的体积与液体的比例为1:4,固定时间为2至12小时。

【注意事项】
1、小块组织标本(小于1.2CM*1.2CM*0.6CM)及各种活检组织标本,固定2至12小时即可,直接进行脱水、浸蜡、切片、染色等。

2、大块的组织标本需固定在12小时以上;或将大块的组织标本固定2小时后,取材,再固定2小时即可。

大体标本常用的固定液

大体标本常用的固定液

大体标本常用的固定液
固定液是生物组织或细胞学研究中不可或缺的一部分,它可以帮助保存和稳定组织和细胞,使它们能够在后续的样品处理和分析中保持完整。

一般来说,固定液包括多种化学成分,不同的固定液适用于不同的组织和细胞类型。

以下是最常用的固定液:
1. 10% 福尔马林(Formaldehyde)
福尔马林是最常用的固定液之一,它可以作为一种信标分子,标记细胞蛋白。

福尔马林具有良好的渗透性,能够迅速渗透到组织中,提供良好的固定效果。

2. 十二烷基硫酸钠-10%EDTA浸液(SDS-EDTA Buffer)
SDS-EDTA浸液是常用的细胞质微管结构和线粒体固定液。

该固定液是一种离子池化学固定液,能够特异性地固定蛋白质,适用于研究细胞骨架和线粒体。

3. Bouin液
Bouin液是一种精细的组织学固定液,不过使用比较少。

该固定液包括福尔马林、酯化醛和乙酸,可以用于特异性地固定肝脏和其他含脂肪的组织。

4. Carnoy液
Carnoy液是一种比较强的组织学固定液,由95%的乙醇、氯仿和冰醋酸组成。

该固定液可以用于稳定核质和细胞膜,适用于肝脏和小肠等组织。

5. 4%多聚甲醛(Paraformaldehyde)
4%多聚甲醛是一种可以在室温下固定细胞和组织的固定液,可以优先固定蛋白质和核酸。

多聚甲醛很便宜,但其固定效果不及福尔马林。

需要注意的是,不同的固定液会对研究结果产生不同的影响。

因此,选择固定液前需考虑组织或细胞类型、后续的实验目的和预期结果等因素,才能选择最合适的固定液。

同时,固定液使用时需要注意安全,防止吸入和接触固定液。

病理组织常用固定液的配制

病理组织常用固定液的配制

病理组织常用固定液的配制(免疫组化)一、常规固定液的配制(1)10%甲醛液浓甲醛 10ml蒸馏水 90ml(2 ) 缓冲中性甲醛液浓甲醛10mlPBS缓冲液(Ph7.2)90ml(3 ) 10%中性甲醛液浓甲醛10ml蒸馏水90ml碳酸钙加至饱和(4 ) Bouin氏固定液苦味酸饱和水溶液75 ml甲醛2 ml冰醋酸5 ml该固定液中的冰醋酸,对胶原纤维等组织有膨胀作用,而甲醛对组织有收缩作用,两种试剂的混合使用,用以抵消彼此间的副作用,使组织固定达到优良的固定水平。

(5)醛糖钙固定液甲醛100ml蔗糖300ml乙酸钙20g蒸镏水90ml先将蔗糖和乙酸钙溶于蒸镏水,后加入甲醛。

该固定液对于做酶的组织化学的研究效果较好,组织固定后,做冰冻切片,再给予显示。

当前国内外基本上都还是要用甲醛来固定组织。

从免疫组织化学的角度来说,甲醛固定的组织大部分都可以用免疫组化的手段来检测,据多人认为,它对lgA ,lgM,J链,K 链和λ链的标记效果较好,且背景清晰。

但美中不足的是:经它固定的组织,可与蛋白形成醛交联蛋白,这种醛键可封闭抗原。

固此,在免疫组化实际检测中,应根据不同的要求和需要,采用酶消化或者其它抗原修复如微波、高压等的方法,以便破坏醛键重新暴露抗原。

(6)Zenker氏固定液:重铬酸钾25g升汞50g蒸馏水1000ml冰醋酸50ml先将重铬酸钾和升汞溶于水中,尢其是重铬酸钾,应用热水或加温的方法将其溶解,然后过滤贮存于带盖的玻璃瓶中,如暴露于空气中,该溶液将会被慢慢氧化而便颜色加深,导致失效。

临用时,取贮存液950ml,加入50ml的冰醋酸,即可使用。

应用该固定液固定的组织,一般不要超过24h,取出组织,流水冲冼12小时以上,然后保存于75%-80%的酒精中,在切片染色前,必须用碘除去汞盐的沉着。

应用该固定液的组织,细胞核及细胞浆染色十分清晰,特别是要显示骨骼肌的横纹时,应用本液可获得满意的结果,但由于其含有醋酸,故不能用于保存细胞颗粒,红细胞及含铁血黄素。

病理制片中固定液的选择

病理制片中固定液的选择

病理制片中固定液的选择在病理组织诊断中制片过程尤为重要,而在病理制片的过程中组织的固定更为关键,故而对于石蜡切片,组织的固定则是必不可少的重要步骤。

在多年的临床经验中,笔者对AF、AAF及甲醛一生理盐水三种混合固定液的优劣进行仔细分析、对比,从而认为混合固定液与其他固定剂固定效果相比之下较为优越。

标签:病理;固定液;甲醛;乙醇由于病理学诊断是诊断的金标准,是辅助临床诊断的主要把关口,也是最后的宣判性诊断。

做好病理诊断,层层步骤就显得尤为重要,包括组织的取材,固定,脱水,浸蜡,包埋及染色。

组织的固定是一个关键的过程,因为没有好的固定就没有好的制片,没有好的制片就不会有好的成品,一张好的切片与固定有着密切的关系。

1固定的目的固定的概念是将采取的活体组织置于化学性溶媒(固定液)中,使其不发生自溶与腐败,保持被采取时的形态。

固定的目的是在于尽量使组织和细胞保持与生活时相仿的成分和形态,迅速防止组织、细胞的死后变化,防止自溶与腐败,使细胞内的蛋白质、脂肪、糖、酶等各种成分转变成不溶性物质,使组织中的各种物质沉淀和凝固起来,而产生不同的折射率,造成光学上的差异,以便染色后易于鉴别和观察。

因此,固定的组织愈新鲜愈好,固定组织时,应使用足量的固定液。

其固定液的量一般小于组织块总体积的4倍以上。

2固定液的选择固定液必需要有較强的渗透能力,能迅速地渗入组织内部,不会使组织过度收缩或膨胀,并且能使组织内易观察的成分可以凝固为不溶性物质,能使组织达到一定的硬度,获得较佳的折光率和对染料具有较强的亲和力。

组织细胞中不至于因固定引起人为的改变,因为在凝固原生质以后,增加了细胞对于各种穿透的抵抗力,不至于因以后的处理而使固定后的原生质变形,并尽可能地避免使组织膨胀或收缩,使细胞内的成分(蛋白质)凝固沉淀下来,由正常的半液体状(胶体)变为半固体状(凝胶),增加媒染作用和染色能力,使组织能够得到充分的固定,便于以后的蜡块保存。

固定液的种类很多,分为单纯固定液和混合固定液,其中混合固定液比较常用。

常用的组织固定液

常用的组织固定液

常用的组织固定液1.单纯固定液(1)4%中性甲醛固定液:最常用的固定液,能满足常规HE及免疫组化、PCR等工作。

一般无特殊要求的病理标本均适用。

尤其值得注意的是,中性甲醛是以 pH 7.2~7.4的磷酸缓冲液为溶剂配制的,其固定效果及对组织抗原性的保存均优于一般的4%甲醛固定液。

此固定液配制后应密封并保存在阴凉处,保存时间不超过一个月。

甲醛(40%) 100 ml无水磷酸氢二钠 6.5 g磷酸二氢钠 4.0g蒸馏水900 ml(2)乙醇固定液:使用时以80%~95%的浓度为宜,具有硬化、固定、脱水等作用,对组织渗透力较弱,因此很少单独使用,但其保存组织中的核酸强于中性甲醛,故常用于有核酸操作的实验或检查,如果用于证明尿酸结晶和保存糖原,可用100%乙醇固定组织。

(3)4%的多聚甲醛:主要用于培养细胞的固定。

2.混合固定液(1)乙醇一甲醛(乙醇-福尔马林,AF)固定液:适用于皮下组织中肥大细胞的固定。

该固定液有固定兼脱水作用,固定后的标本可直接入95%乙醇脱水。

甲醛(40%) 100 ml95%乙醇900 ml(2)B5(醋酸钠一升汞一甲醛)固定液:多用于固定淋巴组织。

染色前应进行脱汞沉淀处理。

无水醋酸钠 1.25 g升汞 6.0 g蒸馏水90 ml使用前加入甲醛10 ml(3)Bouin固定液:特别适用于睾丸活检组织的固定。

Bouin液对组织固定较均匀,收缩很少,不会使组织变硬变脆。

需现配现用。

饱和苦味酸水溶液(约1.22%) 75 ml甲醛25 ml冰醋酸 5 ml(4)Carnoy固定液:穿透能力强,可很好的固定细胞质和细胞核,特别适合于固定外膜致密的组织,亦适用于糖原及尼氏小体的固定。

无水乙醇60 ml氯仿30 ml冰醋酸10 ml(5)Zenker固定液:经此液固定的标本,细胞核和细胞质染色颇为清晰,但成本较昂贵且需特殊处理汞。

该固定液要避免接触阳光,以免引起化学变化而失效。

升汞 5.0 g重铬酸钾 2.5 g硫酸钠 1.0g蒸馏水(加至) 100 ml。

组织固定液的类型

组织固定液的类型

组织固定液的类型
组织固定液的类型有很多,主要包括以下几种:
1.福尔马林固定液:福尔马林是一种广泛使用的固定剂,可以固定细胞和组织的结构,同时起到杀菌的作用。

2.酒精固定液:酒精固定液是一种常用的组织固定液。

酒精具有良好的杀菌作用,可以使组织保持良好的形态结构。

3.缓冲福尔马林固定液:缓冲福尔马林固定液是在福尔马林固定液中添加缓冲剂,使其pH值接近细胞内液,更适合某些特定的实验和研究。

4.寡聚肽固定液:寡聚肽固定液是一种对蛋白质固定效果较好的固定液,可以保持细胞和组织的蛋白质结构。

5.甲醛固定液:甲醛是一种常用的固定剂,可以使细胞和组织固定并保持其形态结构。

它有很好的杀菌作用,并且可以使细胞和组织保持较好的染色性能。

以上是几种常见的组织固定液类型,不同类型的固定液具有不同的特点和适用范围,根据不同的实验目的和要求选择合适的固定液非常重要。

10%标本福尔马林固定液成分

10%标本福尔马林固定液成分

10%标本福尔马林固定液成分
摘要:
一、福尔马林固定液的作用
二、福尔马林固定液的成分
三、福尔马林固定液在标本制作中的应用
四、福尔马林固定液的注意事项
正文:
福尔马林固定液是一种广泛应用于医学、生物学等领域的固定剂,它能够有效地杀死细菌、真菌等微生物,固定细胞、组织等生物材料,使其保持原有的形态和结构,便于后续的观察和研究。

福尔马林固定液的主要成分是福尔马林,其化学名为甲醛,通常浓度为30%~50%。

福尔马林固定液的成分除了福尔马林外,还包含一些辅助成分,如甲醇、乙醇、丙酮等,这些辅助成分可以增强福尔马林的固定效果,提高固定液的稳定性和溶解力。

在实际应用中,福尔马林固定液的配方会根据不同的固定对象和用途进行调整。

福尔马林固定液在标本制作中的应用非常广泛,如在病理学中,福尔马林固定液常用于固定组织和细胞切片,以便于光学显微镜下的观察;在细胞生物学中,福尔马林固定液可用于固定细胞,以便于荧光显微镜下的观察;在遗传学中,福尔马林固定液可用于固定染色体,以便于显微镜下的观察。

病理固定液速记总结

病理固定液速记总结

病理固定液速记总结甲醛:能固定类脂和脂类,但必须冷冻切。

也可固定高尔基体、线粒。

是糖的保护剂。

体除去甲醛色素的方法:乙醇配氨水。

重铬酸钾:高尔基体和线粒体固定,组织几乎不收缩,染色质保存差。

苦味酸:易燃易爆,强酸,糖类;可以软化皮肤,易于切片。

不宜用火棉胶包埋。

70%乙醇中加浓氨水去除固定产生的黄色。

三氯醋酸:SU S a液的主要成分,使蛋白沉淀,良好的脱钙剂。

升汞:针状结晶,组织收缩明显。

不能固定类脂和糖类。

可固定蛋白,固定后需用碘液脱汞乙醇:固定兼有脱水作用,糖原的固定,纤维蛋白和弹性纤维固定。

浓度80-95%。

醋酸:固定染色体,清楚的显示细胞核,但组织膨胀明显,尤其对于胶原纤维和纤维蛋白。

铬酸:核蛋白固定良好,可固定高尔基体和线粒体,宜避光保存。

不能固定脂肪。

固定后流水冲洗大于24h。

饿酸:脂肪和内脂,线粒体和内质网的固定,电镜研究的必须固定剂。

临用前几天配制。

延长固定时间,脆性增加,对染色不力。

1%高锰酸钾脱碘,固定后流水冲洗12-24h。

丙酮:酶组织化学。

丙酮对组织块的收缩作用强于乙醇,对糖原无固定作用。

异丙醇:是乙醇良好的替代品,组织收缩小,硬化作用较弱;不能再用于火棉胶的包埋。

叔丁醇:脱水后可不经透明,直接浸蜡。

电镜标本中常用作中间脱水剂。

环氧己烷:不引起组织收缩和硬化,常用于植物标本制作,价格贵。

四氢呋喃:既是脱水剂,又可以作为封片溶媒。

环己酮:代替乙醇作脱水剂和随后的浸蜡和包埋。

固定液总结

固定液总结

固定液总结什么是固定液?固定液是一种化学试剂,主要用于固定组织或细胞以保持其形态和结构。

固定液可以阻止生物材料的腐败和变性,防止其在处理和染色过程中失去结构和功能。

固定液在组织学、细胞学和病理学等领域中广泛应用,有助于观察和研究生物组织和细胞的形态、结构和功能。

常见的固定液福尔马林(Formalin)福尔马林是一种常见的固定液,广泛用于组织学研究和病理学诊断中。

它是一种含有37%甲醛的溶液,能够固定组织并保持其形态和结构。

福尔马林固定的组织可用于组织切片制备、免疫组化染色等进一步的实验。

福尔马林固定组织的优点是固定效果好、保存时间长,能够保存大部分的组织结构和抗原表达情况。

然而,福尔马林固定液会对细胞核和某些蛋白质产生交联作用,可能导致染色效果差,同时还有潜在的致癌风险,因此在使用福尔马林固定液时需要注意安全操作和废液处理。

乙醛(Glutaraldehyde)乙醛是一种常用的电子显微镜固定液,主要用于固定细胞和亚细胞结构以进行电子显微镜观察。

与福尔马林不同,乙醛固定液能够更好地保持细胞和细胞器的形态和结构,有利于观察细胞内部的细节。

乙醛固定液的使用需要注意浓度和固定时间的控制,过高的浓度和过长的固定时间可能会导致组织和细胞的变性和损伤。

此外,乙醛固定液对某些酶和蛋白质具有灭活作用,因此在使用乙醛固定液时需要根据实验需要选择合适的条件。

缓冲盐水(Buffered Saline)缓冲盐水是一种用于固定组织和细胞的温和固定液。

它通常由含有适当浓度的盐水和缓冲剂混合而成,能够保持组织和细胞的形态和结构,并且对某些抗原和酶具有较好的保存效果。

缓冲盐水固定液的优点是温和、安全、易于制备和使用,适用于一些对固定条件要求较宽松的实验。

然而,由于其固定效果不如福尔马林和乙醛固定液,保存时间较短,因此在实验设计时需要根据实验目的和需求来选择合适的固定液。

固定液的使用注意事项使用固定液需要注意以下几个方面:1.安全操作:固定液常常含有有害化学物质,使用时需要佩戴防护手套、口罩等个人防护装备,避免直接接触和吸入液体或气体,注意实验室通风。

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环保病理组织固定液
组织固定是生物学与医学研究中不可或缺的手段,传统的以甲醛为主体配方的固定液在让我们窥见生物体秘密的同时,却让研究者饱受了甲醛毒性给我们的灾难。

尤其在大量使用甲醛作为组织标本固定液的病理科,取材室内空气中弥散的甲醛浓度高出安全浓度数百至数千倍!
在追求和谐生活的今天,我们该换换空气了
甲醛是健康的一大杀手,是被世界卫生组织确认为对人体有毒害、致癌、致畸形的化学物质,是公认的变态反应源,在我国有毒化学品控制名单上位居前列。

甲醛对人体的危害有三种:
刺激作用:甲醛对皮肤和黏膜有很强的刺激作用,可使人眼部干涩、流泪、视力模糊、鼻黏膜水肿、咽喉不适、皮肤瘙痒。

毒性作用:可引起头晕、失眠、疲倦、注意力不集中、记忆力下降等神经系统损害,腹痛、恶心、呕吐、全身无力等消化系统损害,咳嗽、胸闷、气喘等呼吸系统损害。

还可导致免疫力下降、月经紊乱、不孕症、新生儿畸形等,儿童和孕妇对其尤为敏感。

致癌作用:动物实验证明甲醛既是致癌剂又是促癌剂,有可能导致鼻咽癌、肺癌、皮肤癌、白血病、结肠癌等。

10克甲醛可使人致死。

甲醛一直是污染病理科及周边环境的有害物质,病理科工作人员因此患化学性鼻炎的几率几乎是100%,在英国一份对病理工作人员的疾病调查报告中指出,病理工作人员患恶性淋巴瘤的概率远高于其它医疗部门人员。

组织固定液是以乙醇、多元醇、食品添加剂为主体的新一代复合组织固定液,不含甲醛、甲醇,是无毒无害的水性溶液,完全符合环保要求,克服了福尔马林(甲醛溶液)对环境的污染和对人体健康的危害,是福尔马林的更新换代产品。

使用说明:
组织标本固定液与采用富尔马林的使用方法没有差别,适于HE组化和免疫组化染色,使用前无需稀释。

固定液渗透力与富尔马林相近;经固定的标本组织弹性好,便于切片;固定效果良好,细胞结构清晰;染色鲜艳,背景对比度强。

1 使用时,先往容器中注入固定液,然后再放入标本,固定液的体积为标本体积的5-10倍。

2 标本固定前应按规范切开。

3 新鲜标本应及时固定,以避免造成人工假象。

4 用后的固定液按医疗废物处理。

组织标本固定液安全性
1.物理化学性质
性状:无色透明液体
气味:淡醇香味
溶解性:可溶于水
氧化性:无
2.组成成份
主要成分为水溶性多元醇。

3.作用机制
本品固定属于自然沉淀模式,经固定的组织呈灰褐色,但仍然保持良好的组织弹性,组织固定良好,与福尔马林无明显区别。

4.安全性
根据国际权威专业文献报道,主要成份的毒性和刺激性都非常小,迄今尚未发现受害者,
其安全性是甲醛的400-600倍,所以本品的安全性非常高。

本品符合欧洲2001/59/CE管理条例的无毒产品标准。

5.稳定性和反应性
稳定性:在正常使用或保存条件下十分稳定。

聚合现象:不发生。

6.对生态环境影响的分析
自然条件下容易进行生物降解;生物体内无蓄积作用;在土壤中极易降解;使用后用常规方法处理不会对环境产生危害。

7.储存和废液处理
储存:拧紧桶盖,远离火源。

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