电泳技术习题
第06章 电泳技术和常用电泳仪习题
六章电泳技术和常用电泳仪首页习题习题参考答案习题名词解释选择题简答题一、名词解释1．电泳2．毛细管电泳的电场强度3．蛋白质的等电点4．电泳速度5．迁移率6．毛细管电泳技术7．电泳淌度8．迁移时间9．毛细管电泳电渗流10．焦耳热11．电渗12. 吸附作用二、选择题【A型题】在五个选项中选出一个最符合题意的答案（最佳答案）。
1．瑞典科学家A．Tiselius首先利用U形管建立移界电泳法的时间是（）A．1920年B．1930年C．1937年D．1940年E．1948年2．大多数蛋白质电泳用巴比妥或硼酸缓冲液的pH值是（）A．7.2～7.4B．7.4～7.6C．7.6～8.0D．8.2～8.8E．8.8～9.23．下列有关电泳时溶液的离子强度的描述中，错误的是（）A．溶液的离子强度对带电粒子的泳动有影响B．离子强度越高、电泳速度越快C．离子强度太低，缓冲液的电流下降D．离子强度太低，扩散现象严重，使分辨力明显降低E．离子强度太高，严重时可使琼脂板断裂而导致电泳中断4．电泳时pH值、颗粒所带的电荷和电泳速度的关系，下列描述中正确的是（）A．pH值离等电点越远，颗粒所带的电荷越多，电泳速度也越慢B．pH值离等电点越近，颗粒所带的电荷越多，电泳速度也越快C．pH值离等电点越远，颗粒所带的电荷越少，电泳速度也越快D．pH值离等电点越近，颗粒所带的电荷越少，电泳速度也越快E．pH值离等电点越远，颗粒所带的电荷越多，电泳速度也越快5．一般来说，颗粒带净电荷量、直径和泳动速度的关系是（）A．颗粒带净电荷量越大或其直径越小，在电场中的泳动速度就越快B．颗粒带净电荷量越小或其直径越小，在电场中的泳动速度就越快C．颗粒带净电荷量越大或其直径越大，在电场中的泳动速度就越快D．颗粒带净电荷量越大或其直径越小，在电场中的泳动速度就越慢E．颗粒带净电荷量越小或其直径越大，在电场中的泳动速度就越快6．电泳时对支持物的一般要求除不溶于溶液、结构均一而稳定外，还应具备（）A．导电、不带电荷、没有电渗、热传导度小、B．不导电、不带电荷、没有电渗、热传导度大C．不导电、带电荷、有电渗、热传导度大D．导电、不带电荷、有电渗、热传导度大E．导电、带电荷、有电渗、热传导度小7．醋酸纤维素薄膜电泳的特点是（）A．分离速度慢、电泳时间短、样品用量少B．分离速度快、电泳时间长、样品用量少C．分离速度快、电泳时间短、样品用量少D．分离速度快、电泳时间短、样品用量多E．分离速度慢、电泳时间长、样品用量少8．聚丙烯酰胺凝胶是一种人工合成的凝胶，其优点是（）A．机械强度好、弹性小、无电渗作用、分辨率高B．机械强度好、弹性大、有电渗作用、分辨率高C．机械强度好、弹性大、有电渗作用、分辨率低D．机械强度好、弹性大、无电渗作用、分辨率低E．机械强度好、弹性大、无电渗作用、分辨率高9．20世纪60年代中期问世的等电聚焦电泳，是一种（）A．分离组份与电解质一起向前移动的同时进行分离的电泳技术B．能够连续地在一块胶上分离数千种蛋白质的电泳技术C．利用凝胶物质作支持物进行的电泳技术D．利用有pH值梯度的介质，分离等电点不同的蛋白质的电泳技术E．用滤纸作为支持载体的电泳技术10．毛细管等电聚焦电泳具有极高的分辨率，通常可以分离的两种蛋白质其等电点差异小于（）A．0.01pH单位B．0.05pH单位C．0.10pH单位D．0.15pH单位E．0.20pH单位11．双向凝胶电泳（二维电泳），最多可以分辨出的斑点数量是（）A．500～1000B．1000～2000C．2000～4000D．4000～5000E．5000～1000012．下述免疫电泳优点的描述中，错误的是（）A．加快了沉淀反应的速度B．是将某些蛋白组分根据其带电荷的不同而将其分开，再与抗体起反应C．本法微量化程度高D．多样化程度高E．应用范围小13．毛细管电泳技术最初发展的时期是（）A．20世纪60年代B．20世纪70年代C．20世纪80年代初期D．20世纪80年代中后期E．20世纪90年代初期14．毛细管电泳时进样体积在nL级，样品浓度可低于的数量是（）A．可低于10一2mo1/LB．可低于10一3mo1/LC．可低于10一4mo1/LD．可低于10一5mo1/LE．可低于10一6mo1/L15．毛细管电泳的特点（）A．容易自动化，操作繁杂，环境污染小B．容易自动化，操作简便，环境污染大C．容易自动化，操作繁杂，环境污染大D．不易自动化，操作简便，环境污染小E．容易自动化，操作简便，环境污染小16．毛细管等速电泳常用于分离（）A．小离子、小分子、肽类及蛋白质B．大离子、小分子、肽类及蛋白质C．小离子、大分子、肽类及蛋白质D．小离子、中分子、肽类及蛋白质E．大离子、中分子、肽类及蛋白质17．理想的毛细管柱除应具有一定的柔性、易于弯曲，还应是（）A．化学和电惰性的、紫外光可以透过、耐用又便宜B．化学和电惰性的、红外光可以透过、耐用又便宜C．化学和电惰性的、可见光可以透过、耐用又便宜D．化学和电惰性的、紫外和可见光可以透过、耐用又便宜E．化学和电惰性的、紫外和红外光可以透过、耐用又便宜18．目前所使用的毛细管柱内径是（）A．5μm～25μmB．15μm～35μmC．25μm～75μmD．30μm～80μmE．50μm～100μm19．最初出现的电泳毛细管直径为（）A．1mm～2mmB．1mm～3mmC．2mm～4mmD．3mm～5mmE．3mm～6mm20．毛细管电泳紫外检测器质量检测极限为（）A．10-10～10-12B．10-13～10-16C．10-14～10-17D．10-15～10-18E．10-16～10-1921．毛细管电泳紫外检测器浓度检测极限为（）A．10-1～10-3B．10-2～10-6C．10-5～10-8D．10-7～10-9E．10-10～10-1222．稳压稳流电泳仪属于中压电泳仪。
电泳技术和常用电泳仪习题参考答案
第六章电泳技术和常用电泳仪习题参考答案一、名词解释1．电泳：指带电荷的溶质或粒子在电场中向着与其本身所带电荷相反的电极移动的现象。
2．毛细管电泳的电场强度：在给定长度的毛细管两端施加一个电压后所形成的电效应强度。
3．蛋白质的等电点：当溶液的酸碱度处于某一特定pH值时，它将带有相同数量的正、负电荷（即净电荷为零），致使蛋白质分子在电场中不会移动，称此特定的pH值为该蛋白质的等电点。
4．电泳速度：在单位时间内，带电粒子在毛细管中定向移动的距离。
5．迁移率：带电粒子在单位电场强度下的移动速度，常用μ来表示。
6．毛细管电泳技术：是一类以毛细管为分离通道、以高压直流电场为驱动力，根据样品中各组分之间迁移速度（淌度）和分配行为上的差异而实现分离的一类液相分离技术。
7．电泳淌度：带电粒子在毛细管中定向移动的速度与所在电场强度之比。
8．迁移时间：毛细管中，带电粒子在电场作用下作定向移动的时间。
9．毛细管电泳电渗流：在高电压下，溶液中的正电荷与毛细管壁表面的负电荷之间作用，引起流体朝负极方向运动的现象。
10．焦耳热：在高电场下，毛细管中的电解质会产生自热现象，称该热量为焦耳热。
11．电渗：电场中液体对于固体支持物的相对移动。
12.吸附作用：介质对样品的滞留作用。
二、选择题【A型题】1．C2．D3．B4．E5．A6．B7．C8．E9．D10．A11．E12．E13．D14．C15．E16．A17．D18．C19．E20．B21．C22．D23．E24．B25．D26．E27．D28．B29．C30．A31．B32．D33．C34．D35．B36．C37．D38D【X型题】1．ABCE2．ABCD3．ABCDE4．ABCE5．ABCD6．ABCE7．ABE8．ACE9．ABC10．ACDE11．ABCD12．ABCDE13．ABCE14．ABCD15．BCDE16．ABCDE17．BCDE18．ABCE19．ABDE20．ABCDE21．ABCD22．ABCD23．ABCE24．ABCD25．BCDE26．ABDE三、简答题1．简述电泳、电泳技术的概念。
专题7 “电泳图谱” 分析题型归类(习题精练)(原卷版)
《关于“电泳”结果分析》专题巩固练习1．（2018北京卷·5）用Xho Ⅰ和Sal Ⅰ两种限制性核酸内切酶分别处理同一DNA 片段 ，酶切位点及酶切产物电泳分离结果如图 。
以下叙述不正确的是（ ） A .如图中两种酶识别的核苷酸序列不同 B .如图中酶切产物可用于构建重组 DNAC .泳道①中是用 Sal Ⅰ处理得到的酶切产物D .图中被酶切的 DNA 片段是单链 DNA2.下图1 是某遗传病家系的系谱图，对该家系中1～4 号个体进行基因检测，将含有该遗传病基因或正常基因的相关DNA 片段用电泳法分离。
正常基因显示一个条带，患病基因显示为另一个不同的条带，结果如图2所示。
下列有关分析判断错误的是( )A ．图2 中的编号c 对应系谱图中的4 号个体B ．条带2 的DNA 片段含有该遗传病致病基因C ．8 号个体的基因型与3 号个体的基因型相同的概率为23D ．9 号个体与该遗传病致病基因携带者结婚，孩子患病的概率为183．已知甲、乙两种病均为单基因遗传病，其中一种病为伴性遗传，Ⅱ9性染色体缺失了一条(XO)，现对Ⅰ1、Ⅰ3、Ⅰ4个体的相关基因进行电泳(电泳可将不同类型的基因进行分离)，结果如下图。
下列有关叙述不正确的是( )A ．甲病不可能为伴X 染色体隐性遗传病B ．若Ⅱ9患有乙病，则导致其染色体异常的原因只有可能是Ⅰ3的减数分裂过程发生异常C ．若Ⅱ6与Ⅱ7婚配，则生出患乙病孩子的概率为18D ．若对Ⅱ8进行基因电泳，可得到3条条带4.为了解基因结构，通常选取一特定长度的线性DNA分子，先用一种限制酶切割，通过电泳技术将单酶水解片段分离，计算相对大小；然后再用另一种酶对单酶水解片段进行降解，分析片段大小。
下表是某小组进行的相关实验。
已知一线性DNA序列共有5000 bp （bp为碱基对）第一步水解产物（单位bp）第二步水解产物（单位bp）A酶切割2100 将第一步水解产物分离后，分别用B酶切割1900 2001400 800 6001000 1000500 500B酶切割2500 将第一步水解产物分离后，分别用A酶切割1900 6001300 800 5001200 1000 200 经A酶B酶同时切割1900 1000 800 600 500 200（1）由实验可知，在这段已知序列上，A酶与B酶的识别序列分别为____个和_____个。
蛋白质习题2
蛋白质习题2一、选择题1.某蛋白质pI为7.5，在pH6.0的缓冲液中进行自由界面电泳，其泳动方向为：（C）A原点不动B向正极泳动C向负极泳动D向正负极扩散2.形成稳定的肽链空间结构，非常重要的一点是肽链中的四个原子以及相邻的两个α-碳原子处于：（A）A同一平面B不断绕动状态C可以相对自由旋转D随不同外界环境而变化（四川农业大学期末试题）3.下列（D）方法可得到蛋白质的“指纹图谱”。
A、酸水解，然后凝胶过滤B、彻底碱水解并用离子交换层析测定氨基酸组成C、用氨肽酶水解并测定被释放的氨基酸组成D、用胰蛋白酶降解，然后进行纸层析或纸电泳（四川农业大学期末试题）4.下列何种变化不是蛋白质变质引起的：（E）A.氢键断裂B.疏水作用的破坏C.亚基解聚D.生物学性质丧失E.相对分子质量变小（生物化习题集，科学出版社）5.“分子病”首先是蛋白质什么基础层次结构的改变：(A)A．一级B．二级C．三级D．四级（新编生物化学辅导及习题集，机械工业出版社）6.天然蛋白质中不存在的氨基酸是（B）A、半胱氨酸B、瓜氨酸C、丝氨酸D、蛋氨酸7.下列关于蛋白质结构的叙述错误的（D）A.二硫键对稳定蛋白质的构象起重要作用B.球状蛋白质在水溶液中，带电荷的氨基酸侧链趋向于排列在分子的外面C.蛋白质的一级结构决定高级结构D.氨基酸的疏水侧链很少埋在蛋白质分子的内部8.关于蛋白质变性的叙述中正确的是（C）A.蛋白质变性是由于特定的肽键断裂B.变性的蛋白质一定会沉淀C.蛋白质变性是由于非共价键断裂引起的D.沉淀的蛋白质一定会变性(以上均为06-07年试题）9.能使蛋白质从溶液中析出，又不使蛋白质变性的方法是（A）A.加饱和硫酸钠溶液B.加福尔马林C.加75%的酒精D.加氯化钡溶液(复旦医学院tet1）二、判断题1.变性蛋白质的溶解度降低，是由于中和了蛋白质分子表面的电荷及破坏了外层的水膜所引起的。
（）2.天然氨基酸都有一个不对称α-碳原子。
临床生化检验习题
生化检验习题第一章临床生物化学实验室基本技术与管理一、A型选择题1．在荧光定量分析法中,下列哪种不是影响荧光强度的因素A．荧光物质的浓度 B．溶剂的性质C．荧光物质的摩尔吸光系数D．温度E．溶液的pH值2．琼脂糖凝胶电泳用pH8.6的巴比妥缓冲液可以把血清蛋白质分成五条区带,由正极向负极数起它们的顺序是A．白蛋白、β-球蛋白、α1-球蛋白、α2-球蛋白、γ-球蛋白B．白蛋白、α1-球蛋白、α2-球蛋白、β-球蛋白、γ-球蛋白C．白蛋白、α1-球蛋白、α2-球蛋白、γ-球蛋白、β-球蛋白D．α1-球蛋白、α2-球蛋白、β-球蛋白、γ-球蛋白、白蛋白E．白蛋白、β-球蛋白、α1-球蛋白、γ-球蛋白、α2-球蛋白3．在区带电泳中,能产生电荷效应和分子筛效应的固体支持介质有A．醋酸纤维素薄膜、纤维素、淀粉B．纤维素、淀粉、琼脂糖C．硅胶、琼脂糖、聚丙烯酰胺凝胶D．淀粉、琼脂糖、聚丙烯酰胺凝胶E．醋酸纤维素薄膜、硅胶、纤维素4．利用流动相中的离子能与固定相进行可逆的交换性质来分离离子型化合物的方法是A．凝胶层析法B．吸附层析法C．分配层析法D．亲和层析法E．离子交换层析法5．通过在波片或硅片上制作各种微泵、阀、微电泳以及微流路,将生化分析功能浓缩固化在生物芯片上称A．基因芯片B．蛋白质芯片C．细胞芯片D．组织芯片E．芯片实验室6．离心机砖头的旋转速度为20000γ/min的离心为A．低速离心B．平衡离心C．高速离心D．超速离心E．等密度离心7．标本条码下有10个阿拉伯数字,其中第4～5位表示A．标本号B．标本类型C．组合号D．月份E．日期8．由实验室自己配置或为商品,其中有关物质的量由参考方法定值的标准品为A．一级标准品B．二级标准品C．控制物D．参考物E．原级参考物9．经过详细的研究,没有发现产生误差的原因或在某些方面不够明确的方法为A．决定性方法B．推荐方法C．参考方法D．常规方法E．对比方法10．测定恒定误差的试验是A．重复性试验B．回收试验C．线性试验D．干扰试验E．检测能力试验二．X型选择题1．酶免疫分析的基本技术组成为 A B C EA．应有高活性的酶和高质量的酶标抗体B．最佳固相载体和抗体包被技术C．最佳酶作用的底物D．通过电场来精确控制整个分析过程E．检测放大系统及再生技术2．免疫比浊测定应注意的事项为 A B C D EA．抗原或抗体量不能大大过剩 B．应维持反应管中抗体蛋白量始终过剩C．高血脂标本易受干扰D．易受环境温度和pH值的影响E．加入聚合剂可促进免疫复合物的形成3．流式细胞仪接受并分析的信号主要有 A CA．光散射讯号B．光吸收讯号C．荧光讯号D．电流讯号E．生物发光讯号4．鉴定纯酶度的常用方法是 B CA．比活力测定B．电泳分析C．免疫学分析D．活性浓度测定E．Km测定5．影响血标本成份变化的因素有 A B C D EA．生理 B．饮食 C．药物 D．溶血 E．储存6．一级标准品主要用于 A B CA．校正决定性方法 B．评价及校正参考方法 C．为次级标准品定值D．常规方法的标化 E．质量控制7．常规方法的选择在可靠性方面应具有 A B EA．较高的检测精密度 B．较大的检测能力 C．较低的检测费用D．较快的检测速度 E．较好的检测准确度8．方法比较试验测定的是侯选方法的 B C EA．偶然误差 B．比例误差 C．恒定误差 D．总误差 E．系统误差9．临床生化检验方法的性能标准应 C D EA．由临床医学家研究制定 B．由临床化学家研究制定C．由临床医学家和临床化学家共同制定 D．反映临床应用与解释结果的要求E．基本符合实验室所能达到的技能状态10．方法的性能标准也称分析目标,应根据不同的应用目的而异;由下列决定C DA．参考值 B．参考范围 C．医学决定水平 D．允许分析误差E．临床特异度三．名词解释题1．亲和层析法是利用待分离物质和它的特异性配体间具有特异的亲和力,从而达到分离目的的一类特殊层析技术;2．电化学分析法利用物质的电化学性质,测定化学电池的电位、电流或电量的变化进行分析的方法;3．均相EIA 主要通过酶标抗原同抗体结合形成酶标记的免疫复合物,改变了标记酶的活性,通过催化底物呈色反应,测定酶活性变化,即可推算出被测样品中待测抗原含量的方法;4．流式细胞术是综合光学、流体力学、电子计算机技术,利用荧光素产生荧光的特点,快速灵敏的对单个细胞进行多参数定量测定和分选的技术;5．生物芯片是通过微加工技术和微电子技术在固格体芯片表面构建的微型生化分析系统;四．问答题1．所谓光谱分析影响光谱分析的主要因素有哪些利用各种化学物质所具有的发射、吸收或散射光谱谱系的特征,来确定其性质、结构或含量的技术,称为光谱分析技术;光谱分析的基础是被测物质的浓度与吸光度成正比,导致误差的主要原因有①化学因素,是指被测溶液不遵守光吸收定律所引起的误差;②主观因素,是由于操作不当所致;③光学因素,主要是指分析仪器的性能低劣所引起的误差;2．什么叫摩尔吸光系数检测法Beer定律的数学表达式为A=kbc,式中的c为1mol/L,b为1cm时,则系数k称为摩尔吸光系数,以ε表示,A=kbc可写为A=εC;把被测物稀释成适当浓度时测定吸光度,利用被测物的摩尔吸光系数进行运算的方法;许多脱氢酶活性的测定以及用脱氢酶作指示酶的代谢物测定大多采用这种方法;第二章血浆蛋白质以及非蛋白含氮化合物的代谢紊乱一、 A型题1．血浆白蛋白下降见于很多病理情况,但除外A .手术后 B.吸收功能紊乱 C.营养不良 D.肾病综合征 E.急性肝炎早期2．白蛋白作为血浆载体蛋白,以下哪项特性错误A.等电点4.7左右B.带许多负电荷C.能结合Ca2+、Mg+2、Cu2+等正离子D.能运载水溶性好的物质E.能运载胆汁酸、类固醇激素、长链脂肪酸等3． AAT的遗传表型以哪型最多A PiMM B. PiSS C. PiMS D. PiSZ E. PiZZ4．以下哪项不是急性时相反应蛋白A. ALBB. AAGC. HPD. C3E.LDL5．在急性时相反应中,以下哪项蛋白不增高A. HPB. CRPC. AAGD. ALBE. Cp6．在急性时相时升高最早的是哪种蛋白A. CpB. TRFC. AAGD. CRPE. AMG7．哪项蛋白减少与肝功能不全无关A.白蛋白B.转铁蛋白C.前白蛋白D.α2巨球蛋白E.α1酸性糖蛋白8．诊断有无缺铁性贫血可检测以下哪项指标A. AATB. AAGC. TRFD. HPE. AMG9．血管内溶血时浓度下降的是哪项指标A. AATB. AAGC. TRFD. HPE. AMG10．年青肺气肿者,可能为哪项蛋白缺陷A. ALBB. AAGC. HPD. AMGE. AAT二、 X型题1. 以下哪些是血浆蛋白质的功能A 营养作用B 维持血浆胶压C 运输载体D 代谢调控E 免疫防御2. 属于α1 区带的血浆蛋白质有A AAGB AFPC HDLD CpE AAT3. 属于α2区带的血浆蛋白质有A HPB AMGC CpD AFPE TRF4. 属于β区带的血浆蛋白质有A TRFB LDLC β2mGD C3E C45. 属于γ区带的血浆蛋白质有A IgAB IgGC IgMD CRPE Fg6. 肾病综合征患者血清蛋白各电泳区带常有的变化是A ALB降低B α1降低C α2升高D β升高E γ降低7. 肝硬化患者血清蛋白各电泳区带常有的变化是A ALB降低B α1降低C α2升高D β升高E γ升高8. 浆细胞病患者检测血清蛋白的常有变化是A ALB降低B α1降低C α2升降低D γ升高E 总蛋白升高9. 蛋白质浓度测定可基于下述哪些结构和性质A 重复的肽链结构B 酪氨酸和色氨酸对酚试剂的反应C 与色素结合的能力D 酪氨酸和色氨酸对紫外光的吸收E 沉淀后形成的浊度10．哪个方法测定蛋白质需要较纯的蛋白质样品A 凯氏定氮法B 双缩脲法C 比浊法D 紫外分光光度法E 染料结合法三、名词解释题1．M蛋白为浆细胞病患者异常浆细胞克隆增殖,而产生的大量单一的免疫球蛋白或其轻链或重链片段,病人血清或尿液中的M蛋白在蛋白电泳时呈现一条色泽深染的窄区带;2．C反应蛋白在急性炎症病人血清中出现的可以结合肺炎球菌细胞壁C-多糖的蛋白质,是急性时相反应时极灵敏的指标,升高早且程度高;3．急性时相反应蛋白在炎症性疾病如手术、创伤、心肌梗死、感染、肿瘤等情况下,血浆中一系列浓度发生变化的蛋白质的总称,其中大部分蛋白质如AAT、AAG、Hp、Cp、CRP、C3和C4等浓度升高,PA、ALB和TRF等浓度下降;这些血浆蛋白质统称为急性时相反应蛋白4．血浆运载蛋白在血浆中能结合其他物质并对之起运输载体作用的蛋白质,如ALB、PA、HDL、LDL、TRF等;5．前清蛋白由肝细胞合成、分子量比清蛋白小,电泳位置在清蛋白之前的蛋白质,主要起运输载体和营养蛋白作用;四、问答题1．肝硬化、肾病综合征和M蛋白血症患者血清蛋白电泳有何特征肝硬化：ALB下降,γ带升高,甚至出现β-γ桥;肾病综合征：ALB下降,γ带不变或下降,α2和β带尤其是α2带显着升高;M蛋白血症：ALB下降,出现一个色泽深染的窄区带即M蛋白带,多位于γ带之中,也可出现在α或β带;2．请述人体蛋白质及血浆蛋白质的功能,缺乏蛋白质对机体可产生哪些影响人体蛋白质几乎在所有的生理过程中都起着关键作用,包括肌肉收缩蛋白的作用,载体蛋白对血浆和细胞内外物质的转运,酶催化作用,众多多肽和蛋白质激素的代谢调节,抗体、补体等免疫防御,凝血因子的血液凝固,等等;血浆蛋白质作用为营养修补、维持胶压、运输载体、缓冲pH、抑制蛋白酶、酶催化、代谢调控、参与凝血纤溶和免疫防疫等;机体若缺乏蛋白质,会发生一系列生化改变、病理改变和临床表现：肠粘膜和消化腺较早累及,肝脏不能维持正常结构和功能而出现脂肪浸润,血浆蛋白合成发生障碍,酶活性降低,肌肉萎缩,抗体合成减少对传染病抵抗力下降,肾上腺皮质功能减退而难以克服应激状态,胶原合成障碍使伤口不易愈合,儿童骨骼生长缓慢、智力发育障碍等;3．血清蛋白醋纤膜电泳的五个蛋白区带各含哪些主要蛋白质4．血清白蛋白有哪些功能,测定血清白蛋白有哪些临床意义5．请述测定总蛋白六种方法的方法性能特点及其适用范围;第三章糖代谢紊乱一、A型题：1. 胰岛素由何种细胞分泌A. 胰岛α细胞B. 胰岛β细胞C. 胰腺δ细胞D. 胰岛α细胞和β细胞E. 皆不是2. 胰岛素的化学本质是A. 蛋白质B. 类固醇C. 氨基酸衍生物D. 脂肪酸衍生物E. 核苷酸3. 胰岛素在体内的生物半寿期为A. 5～10秒钟B. 5～10分钟C. 5～10小时D. 5～10天E. 5～10月4. 胰岛素样生长因子IGF的化学本质是A. 多肽B. 脂肪酸衍生物C. 氨基酸衍生物D. 儿茶酚胺E. 类固醇5. 有关1型糖尿病的叙述错误的是A. 胰岛β细胞的破坏B. 胰岛素绝对不足C. 常见于青少年D. 常检出自身抗体E. 胰岛素抵抗6. 有关2型糖尿病的叙述错误的是A. 胰岛β细胞的功能减退B. 胰岛素相对不足C. 常见于肥胖的中老年成人D. 常检出自身抗体E. 胰岛素抵抗7. 有关果糖胺的叙述错误的是A. 主要是测定糖化清蛋白B. 所有糖化血清蛋白都是果糖胺C. 反映过去2～3周的平均血糖水平D. 可替代糖化血红蛋白E. 是糖尿病近期控制水平的监测指标8. 当血糖超过肾糖阈值时,可出现A. 生理性血糖升高B. 病理性血糖升高C. 生理性血糖降低D. 病理性血糖降低E. 尿糖9. 测定血糖的标本最常采用的抗凝剂和防腐剂组合是A. 碘乙酸钠-EDTA.Na2B. 叠氮钠-肝素锂C. 氟化钠-草酸钾D. 氟化钠-肝素钠E. 冰醋酸-肝素10. 随机血糖的参考值范围为A. 2.8～7.8mmol/LB. 3.89～6.11mmol/LC. 4.5～5.9mmol/LD. 7.0～11.1mmol/LE. ＜11.1mmol/L二、B型题：A. 己糖激酶法B. 葡萄糖氧化酶法C. Follin-Wu法D. 邻甲苯胺法E. 同位素稀释－质谱分析法1. 血糖测定的常规方法是 B2. 血糖测定的参考方法是 AA. 尿硝酸盐B. 血浆白蛋白C. 尿酮体D. 全血乳酸E. 胰岛素抗体3. 怀疑糖尿病酮症酸中毒时需检测 C4. 1型糖尿病常伴有哪一指标阳性 E5. 怀疑糖尿病乳酸酸中毒时需检测 D三、X型题：1. 影响糖代谢的激素有 ABCDEFGA. 胰岛素B. 胰高血糖素C. 肾上腺素D. 生长激素E. 皮质醇F. 甲状腺激素G. 生长抑素2. 升高血糖的激素有 .BCDEA. 胰岛素B. 胰高血糖素C. 肾上腺素D. 生长激素E. 皮质醇F. 甲状腺激素G. 生长抑素3. 胰高血糖素的生理作用有 ABCDA. 促进肝糖原分解B. 促进糖异生C. 促进脂肪动员D. 促进肝脏生成酮体E. 抑制胰岛素释放4. 最新的按病因将糖尿病分为以下几类 .CDEFA.Ⅰ型糖尿病B.Ⅱ型糖尿病C. 1型糖尿病D. 2型糖尿病E. 特殊类型的糖尿病F. 妊娠期糖尿病G. 糖耐量异常5. 有关糖化血红蛋白的叙述正确的是 ABCDA. 包括HbA1和HbA0B. 糖化血红蛋白的形成是不可逆的C. 反映过去6～8周的平均血糖水平D. 用胰岛素治疗的糖尿病人,应将糖化血红蛋白作为常规检测指标E. 是最长期的糖尿病控制指标6. 先天性缺乏哪些酶可引起糖代谢的先天性异常 ABCA. 1-磷酸半乳糖苷转移酶B. 果糖激酶C. 葡萄糖6-磷酸酶D. 肌酸激酶E. LDH7. 胰岛素对糖代谢调节的主要作用有 ABCDEA. 促进肌肉、脂肪细胞摄取葡萄糖B. 促进糖原合成,减少糖原分解C. 促进糖氧化分解,加速糖的利用D．促进糖转变为脂肪,减少脂肪分解E. 抑制糖异生作用8. 具有促进糖异生作用的激素有 BCDEA. 胰岛素B. 胰高血糖素C. 肾上腺素D. 糖皮质激素E. 生长激素四、名词解释：1糖尿病是一组由于胰岛素分泌不足或和胰岛素作用低下而引起的代谢性疾病,高血糖是其特征;长期高血糖将导致多种器官的损害、功能紊乱和衰竭,尤其是眼、肾、神经、心脏和血管系统;两种病理过程参与糖尿病的发病机制：胰腺细胞的自身免疫性损伤及机体对胰岛素的作用产生抵抗;2.妊娠期糖尿病指在妊娠期间任何程度的糖耐量减退或糖尿病发作;3. 低血糖指血糖浓度低于空腹参考水平下限;低血糖由多种原因引起,其症状主要是由交感神经兴奋和脑缺血所致,临床分为空腹性低血糖和反应性低血糖;其诊断主要依据多次连续测定空腹血浆葡萄糖浓度或在发作时测定血糖和OGTT、胰岛素和C肽等其他相关指标;4.反应性低血糖一种临床疾病,病人在日常生活中有餐后症状,毛细血管血或动脉血浆葡萄糖浓度低于2.5～2.8mmol/L;五、问答题：1. 简述2001年颁布的糖尿病诊断标准;1出现糖尿病症状加上随机静脉血浆葡萄糖浓度≥11.1mmol/L;2空腹至少8h内无含热量食物的摄入静脉血浆葡萄糖浓度≥7.0mmol/L;3OGTT中2h静脉血浆葡萄糖浓度≥11.1mmol/L;其中任何一项阳性时,随后再复查三项中任一项阳性可确诊;2. 简述在糖尿病的临床诊断上检测C肽比胰岛素好的理论依据胰岛素原被分解为胰岛素与31个氨基酸的C肽,二者以等摩尔数分泌入血,C肽虽然没有生物学活性但对于保证胰岛素的正常结构是必需的;C肽的半寿期约35min,比胰岛素更长,且其降解不在肝脏而在肾脏,肝脏的代谢可以忽略,所以与外周血胰岛素浓度相比,可更好地反映胰岛β细胞功能;而且C肽不受外源性胰岛素干扰,也不与胰岛素抗体反应;第四章血浆脂蛋白及其代谢紊乱一、Ａ型选择题1. 下列各种脂蛋白中,脂质含量最多的脂蛋白是A CMB VLDLC LDLD HDL2. 下列各种脂蛋白中,蛋白质含量最多的脂蛋白是A CMB β-脂蛋白C 前β-脂蛋白D α-脂蛋白3. 下列各种脂蛋白中,能够抑制纤溶酶活性的脂蛋白是A VLDLB LDLC HDLD Lpa4. HDL中存在的主要载脂蛋白是A ApoAB ApoB100C ApoCD ApoE5. LDL中存在的主要载脂蛋白是A ApoAB ApoB100C ApoCD ApoE6. 下列哪一项是肝脏清除胆固醇的主要方式A 转变成类固醇B 转变成维生素DC 在肝细胞内转变成胆汁酸D 合成低密度脂蛋白7. 下列关于Lpa叙述错误的是A Lpa是动脉粥样硬化性疾病的独立危险因子B Lpa在脂蛋白电泳时属于β-脂蛋白部分C Apo a与纤溶酶原具有高度同源性D Apo a可从Lpa上脱落下来,剩下不含Apoa仅含ApoB100的颗粒称LDL8. 下列哪种脂蛋白可以将肝脏合成的内源性胆固醇运转至肝外组织A CMB VLDLC LDLD HDL9. 下列哪种脂蛋白参与胆固醇的逆向转运A CMB VLDLC LDLD HDL10. 人群中ApoE可有几种不同的表型A 3种B 4种C 5种D 6种二、Ｘ型选择题1. 正常人空腹12小时后抽血做血清脂蛋白电泳,会出现哪几条电泳谱带BCDA CMB β-脂蛋白C 前β-脂蛋白D α-脂蛋白2. 下列哪几项是载脂蛋白的功能ABCDA 构成并稳定脂蛋白的结构B 修饰并影响与脂蛋白代谢有关的酶的活性C 作为脂蛋白受体的配体D 参与脂蛋白代谢过程3. ApoE具有基因多态性,常见的异构体有BCDA E1B E2C E3D E44. 下列哪几项是ApoE的生理功能 ABCA 是LDL受体的配体和肝细胞CM残粒受体的配体B 具有基因多态性,与个体血脂水平及动脉粥样硬化发生发展密切相关C 参与激活水解脂肪的酶类,参与免疫调节及神经组织的再生D 参与胆固醇的逆向转运5. 目前研究得最详尽的脂蛋白受体有ABDA LDL受体B VLDL受体C HDL受体D 清道夫受体6. LDL受体的配体是BDA 含ApoA的脂蛋白B 含ApoB100的脂蛋白C 含ApoC的脂蛋白D 含ApoE的脂蛋白7. 下列哪些是清道夫受体的配体ABCDA 修饰的LDLB 某些磷脂C 细菌脂多糖D 多聚次黄嘌呤核苷酸8. 下列哪些酶是HDL代谢中的关键酶,对HDL的产生与转化有重要的作用ABDA LPLB HLC ALPD LCAT9. 根据1970年世界卫生组织对高脂蛋白血症的分型方案,对脂代谢紊乱患者血清标本需进行哪些检测,才能确定其分型 ABCDA 测定血清胆固醇浓度B 测定血清甘油三酯浓度C 血清脂蛋白电泳图谱分析D 血清置于4℃过夜后,观察血清混浊程度10. 某实验室收到一个血标本,经离心后上层血清呈云雾状浑浊,其原因是可能由于 BCA 胆固醇增高B 甘油三酯增高C 乳糜微粒存在D 磷脂增高三、名词解释1. 血脂血浆脂类简称血脂,包括游离胆固醇、胆固醇酯、磷脂、甘油三酯、糖酯、游离脂肪酸等,无论是外源性或内源性脂类均以脂蛋白复合体形式在血液循环中运输;2. 载脂蛋白脂蛋白中的蛋白部分称为载脂蛋白;它构成并稳定脂蛋白的结构,修饰并影响与脂蛋白代谢有关的酶的活性,还可以作为脂蛋白受体的配体,参与脂蛋白与细胞表面脂蛋白受体的结合及其代谢过程;3. LDL受体途径LDL或其他含ApoB100、E的脂蛋白如VLDL、β-VLDL均可与LDL受体结合,内吞入细胞使其获得脂类,主要是胆固醇,这种代谢过程称为LDL受体途径;该途径依赖于LDL受体介导的细胞膜吞饮作用完成;4. SRCR清道夫受体富含半胱氨酸域;是I型清道夫受体C-端侧特异域肽段,该段富含半胱氨酸;清道夫受体的8个半胱氨酸有6个在此范围,半胱氨酸的二硫键交联而成的区域非常紧密、牢固,形成球状,足以经受细胞外环境的影响,属于细胞外区域;5. 胆固醇的逆转运周围组织细胞膜的游离胆固醇与HDL结合后,被LCAT酯化成胆固醇酯,移入HDL核心,并通过CETP转移给VLDL、LDL,再被肝脏LDL及VLDL受体摄取入肝细胞,以完成胆固醇从周围末梢组织细胞经HDL转运到肝细胞的过程,称之为胆固醇的逆转运;四、问答题1. 试用超速离心技术对血浆脂蛋白进行分类;答：超速离心法是根据各种脂蛋白在一定密度的介质中进行离心时,因漂浮速率不同而进行分离的方法;脂蛋白中有多种比重不同的蛋白质和脂质,蛋白质含量高者,比重大,相反脂类含量高者,比重小;从低到高调整介质密度后超速离心,可依次将不同密度的脂蛋白分开;通常可将血浆脂蛋白分为乳糜微粒CM、极低密度脂蛋白VLDL、低密度脂蛋白LDL和高密度脂蛋白HDL等四大类;2. 试用电泳技术对血浆脂蛋白进行分类;答：由于血浆脂蛋白表面电荷量大小不同,在电场中,其迁移速率也不同,从而可用电泳方法将血浆脂蛋白分为乳糜微粒、β-脂蛋白、前β-脂蛋白和α-脂蛋白等四种;α-脂蛋白中蛋白质含量最高,在电场作用下,电荷量大,分子量小,电泳速度最快；CM的蛋白质含量很少,98％是不带电荷的脂类,特别是甘油三酯含量最高,在电场中几乎不移动,所以停留在原点,正常人空腹血清在一般电泳谱带上无乳糜微粒;第五章诊断酶学一、A型题1.转氨酶的作用需下列哪一种维生素A.烟酸B.泛酸C.硫胺素D.磷酸吡哆醛E.四氢叶酸2.酶促反应进程曲线通常可用于确定A.酶反应线性范围B.适宜的pHC.适宜的酶量范围D.反应线性的时间范围E.底物的浓度3. SI制中酶活性单位为A.U/LB.KatalC.g/LD.ml/LE.pmol4.下列哪一种辅因子的生成可通过测定340nm处吸光度的降低数来表示A.FADH2B.NAD+C.NADH+D.FMNE.NADPH5.人体含ALT最丰富的组织是A.肝细胞B.心肌C.骨骼肌D.红细胞E.肾脏6.用ACP诊断前列腺疾病时,为防止红细胞干扰,应加入何种抑制剂A.苯丙氨酸B.L-酒石酸C.尿酸D.EDTAE.L-半胱氨酸7.为保证酶动力学分析,要求底物浓度必须是A.>Km值10倍以上B.与Km值相同C.等于1/2Km值D.<1/2Km值E.<1/10Km值8.LD测定的全部方法中,所必需的物质是A.丙酮酸B.2,4-二硝基苯肼C.乳酸D.NAD+或NADHE.氢氧化钠9.急性心肌梗死时,最先恢复正常的酶是A.ALTB.LDC.CKD.ASTE.ALP10.血清肌酸激酶比色法,即利用磷酸肌酸+ADP→肌酸+ATP反应测定肌酸生成量,在试剂中加入半胱氨酸,其目的是A.激活剂B.调整缓冲液的pHC.维持缓冲液的pH稳定D.提供-SHE.提供高能磷酸基团二、B型题A.ASTB.LDC. α-HBDD.CKE.ACP1.急性心肌梗死时,最先恢复正常的血清酶是 D2.对前列腺癌诊断价值最大的血清酶是 EA.LD2>LD1>LD3>LD4>LD5B.LD5>LD1>LD2>LD3>LD4C.LD3>LD1>LD2>LD4>LD5D.LD1>LD2>LD3>LD4>LD5E.LD4>LD1>LD2>LD3>LD53.正常成人血清LD同工酶电泳结果为 A4.急性心肌梗死发作后9h后血清LD同工酶电泳结果为 DA. ALT和ASTB. ALP和CKC. AMY和LPSD. AST和AMYE. CK和CK-MB5.多用于急性心肌梗死诊断的酶是 E6.多用于肝脏疾患诊断的酶是 A7.多用于骨疾患诊断的酶是 B8.多用于胰腺炎诊断的酶是 CA. Ca2+B. Fe2+C. Cl-D. Zn2+ E .Mg2+9.激酶参与的酶促反应需要哪种离子参加 E10.碱性磷酸酶和羧基肽酶A整体结构中含 D11.能加速淀粉酶反应的离子为 C三、X型题1.ACP与ALP的区别在于 ABDEA.最适pH不同B.组织来源不同C.所作用的底物种类相近D.缓冲液种类不同E.稳定性不同2.标本溶血对下列哪些酶测定结果有影响 ABCDA. CKB. LDC. ALTD. ASTE. GGT3.下列哪些组织器官在病理情况下血清及尿液中淀粉酶可增高 BDA.肾脏B.胰腺C.肺脏D.唾液腺4.下列哪项是CK的变异体 .ADA.巨CK1B.CK-MBC.CK-MMD.巨CK2E.CK-BB5.下列酶中具有酶原形式的酶有 ABEA.胃蛋白酶B.胰蛋白酶C.ALTD. ALPE.糜蛋白酶6.连续监测法进行酶学测定中常见的干扰因素有 ABCDEA.样本本身含有其它酶和物质干扰B.工具酶中混有其它酶的污染C.非酶反应的干扰D.分析容器的污染E.沉淀形成7. 影响血清酶的生理变异的因素有 ABCDEA.性别B.年龄C.进食D.运动E.妊娠与分娩四、名词解释1.米氏常数Km Km是酶反应速度为最大速度一半时的底物浓度;一般在10-6~10-2mol/L之间;Km是酶的特征性常数之一,只与酶的性质有关,而与酶浓度无关;2."酶胆分离"现象重症肝炎时血中ALT常逐渐下降,而胆红素却进行性升高,出现所谓"酶胆分离"现象,是肝坏死的前兆;3.同工酶同工酶是同一种属中由不同基因或等位基因所编码的多肽链单体、纯聚体或杂化体,具有相同的催化功能,但其分子组成、空间构象、理化性质、生物学性质以及器官分布和细胞内定位不同的一类酶;4.同工酶亚型某些酶或同工酶从组织进入体液后,可进一步变化为数个不同类型即所谓"亚型isoform"; 即指基因在编码过程中由于翻译后修饰的差异所形成的多种形式的一类酶;亚型往往在基因编码产物从细胞内释入血浆时因肽酶作用降解而形成;5.零级反应期在酶反应的最初阶段,底物常处于过量状态,产物的增加与时间成正比,而与底物浓度无关的这段时间;五、问答题1.根据米-曼式方程计算,当S=3Km时,其反应速度V为多大V=VmS/Km+S=Vm3Km/Km+3Km=3/4Vm=0.75Vm,即V/Vm=0.75 ;。
实验三__DNA的琼脂糖凝胶电泳1
1
2
3
4
5
6
四 实验结果
4 泳道 maker
1 泳道 质粒DNA
2、3、5、6泳道 酶切产物
质粒
酶切 片段
五 注意事项
EB是一种诱变剂，操作时必须戴塑料或乳胶手套!!!
六习 题
1. 琼脂糖凝胶电泳的适用范围？
2. 2.影响琼脂糖凝胶电泳的因素有哪些？
10
标准 DNA/E Co130I
13929
50 000~1 000
20 000~1 000 6 000~300 1 000~100 500~25 50~1
5
琼脂糖凝胶分辨DNA片段的范围为0.2~50kb之间
DNA分子的大小、琼脂糖凝胶的浓度、DNA的构象、所加电压、电场方向、嵌 入染料的存在、电泳缓冲液的组成。
6
EB(溴化乙锭) 能插入DNA分子碱基对之间，导 致 EB 与 DNA 结合。 DNA 吸收的 260nm 的紫外光 传递给EB，或者结合的EB本身在300和360吸收的 射线，均可在可见光区以 590波长发射出来，呈橙
在紫外线的照射下结合溴化
乙锭的DNA分子发出荧光
红色。电泳时所需DNA样品量仅0.5～1μ g.
EB染料优点：染色操作简便，快速，室温下1520min ；不会使核酸断裂；灵敏度高， 10ng或更 少的DNA即可检出；可以加到样品中或胶中。 EB是诱变剂，使用时一定要戴手套。 EB废液要 经过处理才能丢弃。
7743 6223 3472 2690 1882
酶切片段
4ul
2ul
11
上的重复性质，相同数量的双链DNA几乎具有等量的净电荷，因此它们能以同样的
速度向正电极方向迁移。在一定的电场强度下，DNA分子的这种迁移速度，亦即电 泳的迁移率，取决于核酸分子本身的大小和构型。DNA分子的迁移速度与相对分子
仪器复习题答案）
仪器复习题答案）复习题答案1．分子光谱:由分子的吸收或发光所形成的光谱称为分子光谱（molecular spectrum），分子光谱是带状光谱。
2．分子荧光分析:某些物质被紫外光照射激发到单重激发态后，在回到基态的过程中发射出比原激发波长更长的荧光，通过测量荧光强度进行定量分析的方法。
3．气相干扰：是指干扰发生在气相过程中（如电离干扰、激发干扰）以气相化学反应引起的干扰。
4．标记PCR(LP-PCR)：利用同位素、荧光素等对ＰＣＲ引物进行标记，用以直观地检测目的基因。
5．毛细管电泳:是指离子或带电粒子以毛细管为分离室,以高压直流电场为驱动力,依据样品中各组分之间淌度和分配行为上的差异而实现分离的液相分离分析技术。
6．红外吸收光谱：又称为分子振动—转动光谱。
当样品受到频率连续变化的红外光照射时，分子吸收了某些频率的辐射，并由其振动或转动运动引起偶极矩的净变化，产生分子振动和转动能级从基态到激发态的跃迁，使相应于这些吸收区域的透射光强度减弱。
7．Fermi共振：当一振动的倍频与另一振动的基频接近时，由于发生相互作用而产生很强的吸收峰或发生裂分。
8．荧光发射：电子由第一激发单重态的最低振动能级→基态（多为S1→S0跃迁），发射波长为‘2的荧光；10-7～10 -9 s 。
9．原子光谱:原子的电子运动状态发生变化时发射或吸收的有特定频率的电磁频谱.原子光谱是一些线状光谱,发射谱是一些明亮的细线,吸收谱是一些暗线.10．分子吸收光谱:分子对辐射选择性吸收使基态分子跃迁至更高能级的激发态而发出的特征光谱为分子吸收光谱.11．内转化：处于相同的重态的两个离子间的非辐射跃迁.12．宽带吸收：是用紫外可见分光光度法测量溶液中分子或离子的吸收，吸收宽带宽从几纳米到几十纳米，是用的是连续光源，这种测量方法叫13．塔板理论：在每一块踏板上，被分离柱分在气液两相间瞬时达到一次分配平衡，然后随载气从一块踏板以脉动式迁移，经过多次分配平衡后，分配系数小的组分先离开精馏塔，分配系数大的后离开，从而使分配系数不同的组分分离。
生化实验习题
生化实验技术一、选择题1、某蛋白质pI为7.5，在pH6.0的缓冲液中进行自由界面电泳，其泳动方向为（）A、向负极移动B、向正极移动C、不运动D、同时向正极和负极移动2、进行酶活力测定时：（）A、底物浓度必须极大于酶浓度B、酶浓度必须极大于底物浓度，D、酶能提高反应的平衡点 C、与底物浓度无关3、不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳比一般电泳的分辨率高，是因为具有下列哪种效应？（）A、浓缩效应B、电荷效应C、分子筛效应D、粘度效应4、分离鉴定氨基酸的纸层析属于（）A、亲和层析B、吸附层析C、离子交换层析D、分配层析二、是非题（在题后括号内打√或×）1、蛋白质在小于等电点的pH溶液中，向阳极移动，而在大于等电点的pH溶液中，将向阴极移动。
（）2、酶的比活力可表示酶纯度，因此比活力可用每克酶制剂或每ml酶制剂含有多少活力单位表示。
（）3、提纯酶时，只需求其总活力，就可以知其纯度是否提高了。
（）三、问答题：1、盐析法沉淀蛋白质时，往往需要将pH调到蛋白质等电点附近，为什么？2、试分别阐述分配层析和吸附层析法分离鉴定氨基酸的原理和操作步骤。
3、什么是同工酶？说明用电泳法分离同工酶的原理。
4、电泳现象的产生与蛋白质的分子结构有何关系？5、在pH6.5的谷氨酸和丙酮酸混合液中，加入适量的新鲜猪肝匀浆后于37℃水浴中保温30分钟，煮沸后蛋白质沉淀，将上清液点在层析滤纸上，用酚水饱和液进行层析，层析结束后用茚三酮显色出现两条带，这两条带各是什么物质：说明原因？6、测定酶活力时，应注意哪些事项？为什么？7、聚丙烯酰胺凝胶电泳有什么特点？试述聚丙烯酰胺凝胶电泳分离血清蛋白质的基本原理和主要操作步骤。
8、以DNA的分离纯化为例，阐述生物大分子分离纯化的基本原则原理和注意事项。
四、名词解释吸附层析分配层析分子筛层析离子交换层析亲和层析浓缩效应 PAGE 盐析透析。
临床生化检验习题3
生化检验习题第一章临床生物化学实验室基本技术与管理一、A型选择题1．在荧光定量分析法中，下列哪种不是影响荧光强度的因素（）A．荧光物质的浓度B．溶剂的性质C．荧光物质的摩尔吸光系数D．温度E．溶液的pH值2．琼脂糖凝胶电泳用pH8.6的巴比妥缓冲液可以把血清蛋白质分成五条区带，由正极向负极数起它们的顺序是（）A．白蛋白、β-球蛋白、α1-球蛋白、α2-球蛋白、γ-球蛋白B．白蛋白、α1-球蛋白、α2-球蛋白、β-球蛋白、γ-球蛋白C．白蛋白、α1-球蛋白、α2-球蛋白、γ-球蛋白、β-球蛋白D．α1-球蛋白、α2-球蛋白、β-球蛋白、γ-球蛋白、白蛋白E．白蛋白、β-球蛋白、α1-球蛋白、γ-球蛋白、α2-球蛋白3．在区带电泳中，能产生电荷效应和分子筛效应的固体支持介质有（）A．醋酸纤维素薄膜、纤维素、淀粉B．纤维素、淀粉、琼脂糖C．硅胶、琼脂糖、聚丙烯酰胺凝胶D．淀粉、琼脂糖、聚丙烯酰胺凝胶E．醋酸纤维素薄膜、硅胶、纤维素4．利用流动相中的离子能与固定相进行可逆的交换性质来分离离子型化合物的方法是（）A．凝胶层析法B．吸附层析法C．分配层析法D．亲和层析法E．离子交换层析法5．通过在波片或硅片上制作各种微泵、阀、微电泳以及微流路，将生化分析功能浓缩固化在生物芯片上称（）A．基因芯片B．蛋白质芯片C．细胞芯片D．组织芯片E．芯片实验室6．离心机砖头的旋转速度为20000γ/min的离心为（）A．低速离心B．平衡离心C．高速离心D．超速离心E．等密度离心7．标本条码下有10个阿拉伯数字，其中第4～5位表示（）A．标本号B．标本类型C．组合号D．月份E．日期8．由实验室自己配置或为商品，其中有关物质的量由参考方法定值的标准品为（）A．一级标准品B．二级标准品C．控制物D．参考物E．原级参考物9．经过详细的研究，没有发现产生误差的原因或在某些方面不够明确的方法为（）A．决定性方法B．推荐方法C．参考方法D．常规方法E．对比方法10．测定恒定误差的试验是（）A．重复性试验B．回收试验C．线性试验D．干扰试验E．检测能力试验二．X型选择题1．酶免疫分析的基本技术组成为（A B C E ）A．应有高活性的酶和高质量的酶标抗体B．最佳固相载体和抗体包被技术C．最佳酶作用的底物D．通过电场来精确控制整个分析过程E．检测放大系统及再生技术2．免疫比浊测定应注意的事项为（A B C D E ）A．抗原或抗体量不能大大过剩B．应维持反应管中抗体蛋白量始终过剩C．高血脂标本易受干扰D．易受环境温度和pH值的影响E．加入聚合剂可促进免疫复合物的形成3．流式细胞仪接受并分析的信号主要有（A C ）A．光散射讯号B．光吸收讯号C．荧光讯号D．电流讯号E．生物发光讯号4．鉴定纯酶度的常用方法是（ B C ）A．比活力测定B．电泳分析C．免疫学分析D．活性浓度测定E．Km测定5．影响血标本成份变化的因素有（A B C D E ）A．生理B．饮食C．药物D．溶血E．储存6．一级标准品主要用于（A B C ）A．校正决定性方法B．评价及校正参考方法C．为次级标准品定值D．常规方法的标化E．质量控制7．常规方法的选择在可靠性方面应具有（A B E ）A．较高的检测精密度B．较大的检测能力C．较低的检测费用D．较快的检测速度E．较好的检测准确度8．方法比较试验测定的是侯选方法的（B C E ）A．偶然误差B．比例误差C．恒定误差D．总误差E．系统误差9．临床生化检验方法的性能标准应（C D E ）A．由临床医学家研究制定B．由临床化学家研究制定C．由临床医学家和临床化学家共同制定D．反映临床应用与解释结果的要求E．基本符合实验室所能达到的技能状态10．方法的性能标准也称分析目标，应根据不同的应用目的而异。
色谱课习题作业
31．以正丁烷-丁二烯为基准，在氧二丙腈和角鲨烷上测得的相对保留值分别为 6.24 和 0.95，
试求正丁烷-丁二烯相对保留值为 1 时，固定液的极性 p。
(2.7)
答：
P
100
100
q1 q1
qx q2
100
100
lg 6.24 lg 6.24
lg1 lg 0.95
2.7
32．醋酸甲酯，丙酸甲酯，n-丁酸甲酯在邻苯二甲酸二癸酯上的保留时间分别为 2.12min、 4.23min 和 8.63min，试指出它们在阿皮松上分离时，保留时间是增长还是缩短？为什么？ 答：缩短，阿皮松是弱极性的固定液，而醋酸甲酯，丙酸甲酯，n-丁酸甲酯与邻苯二甲酸二 癸酯都是中等极性的酯类化合物，相似相溶的原理，所以这三种样品在邻苯二甲酸二癸酯上 的保留时间比在阿皮松上的保留时间应更长一些。
标准偏差 ：0.607 倍峰高处色谱峰宽度的一半
半峰宽：为 峰底宽度:
1W/2bh
初的4峰宽。W1/2=2.354
8. 色谱图上的色谱峰流出曲线可说明什么问题？
答：可以说明色谱柱出口各种组分的浓度变化
9．已知某组分峰的峰底宽为 40s，保留时间为 400s，
（1）计算此色谱柱的理论塔板数； （1600 块） （ 2 ） 若 柱 长 为 1.00m, 求 此 理 论 塔 板 高 度 （0.625mm）
（0.414）
（2）假定调整保留时间不变，当使分辨率达到 1.00 时，所需的塔板数为多少？ (46022 块)
（3）假定调整保留时间不变，当使分辨率为 1.5 时，所需的塔板数为多少？ (103548 块)
答：（1）a=815/800=1.01875
R 1 N k a 1 4 k 1 a
生化练习题
一、选择题1. 测定100克生物样品中氮含量是2克，该样品中蛋白质含量约为：A. 6.25％B．12.5％C．1％D．2％2. 已知某混合物存在A、B两种分子量相等的蛋白质，A的等电点为6.8，B的等电点为7.8，用电泳法分离，如果电泳液的pH值为8.6，则：A．蛋白质A向正极移动，B向负极移动B．蛋白质A向负极移动，B向正极移动C．蛋白质A和B都向负极移动，A移动速度快D．蛋白质A和B都向正极移动，A移动速度快3. DNA和RNA共有的成分是：A. β-D-核糖B. β-D-2-脱氧核糖C. 腺嘌呤D. 尿嘧啶4. 双链DNA有较高的解链温度是由于它含有较多的:A. A和UB. A和CC. A和TD. C和G5. DNA变性的原因是:A. 互补碱基之间的氢键断裂B.磷酸二酯键断裂C.多核苷酸链解聚D.碱基的甲基化修饰6. 关于温度对酶活性的影响，以下哪项不对：A．酶都有一个最适温度，是酶的特征性常数之一B．在一定范围内温度可加速酶促反应C．酶的最适温度随着反应时间的延长而降低D．温度降低，酶促反应减慢7.关于蛋白质二级结构叙述错误的是A 蛋白质某一段肽链局部的有规则的空间构象B α螺旋属于蛋白质二级结构的一种C 无规卷曲也属二级结构范畴D 整条多肽链中全部原子的空间位置8. 关于蛋白质三级结构叙述错误的是A 具有三级结构的多肽链都有生物活性B 三级结构是整条肽链所有原子在三维空间的排布位置C 三级结构的稳定主要靠非共价键D 具有三级结构的多肽链不一定具备生物活性9. 蛋白质的最大吸收峰波长是A 260nmB 280nmC 560nmD 450nm10. 赖氨酸的等电点为9.74，当溶液的p H=7时，它A 以负离子形式存在，在电场中向正极移动B 以正离子形式存在，在电场中向负极移动11. 蛋白质变性不包括：A 氢键断裂B 肽键断裂C 疏水键断裂D 盐键断裂12. 一个酶作用于多种底物时，其天然底物的K m值应该是A 最大B 最小C 居中 D与其他底物相同13. 肝脏不能利用的物质是A 酮体B 葡萄糖C 脂肪D 蛋白质14. 尿素生成是通过哪条途径:A 蛋氨酸循环B 乳酸循环C 鸟氨酸循环D 嘌呤核苷酸循环15. 成熟红细胞的能量来源主要是A 糖的有氧氧化B 糖酵解C 脂肪酸氧化D 磷酸戊糖途径16. 下列关于酶特性的叙述哪个是错误的：A. 催化效率高B. 专一性强C. 作用条件温和D. 都有辅因子参与催化反应17. 在胞液中进行与能量生成有关的过程是：A．三羧酸循环B．糖酵解C．脂肪酸的β氧化D．α-酮酸的氧化18. 磷酸戊糖途径的生理意义在于产生核糖和：A．NADPH B．NADH C．ADP D．CoASH 19 下列哪个组织细胞完全依靠糖酵解供能？A．肌肉B．肺C．肝D．成熟红细胞20. 生理情况下糖异生的主要器官是A 肝B 肾C 肌肉D 肠21. 下列哪种物质不属于类脂A 甘油三酯B 磷脂C 胆固醇酯D 胆固醇22. 血浆中脂类物质的运输形式是A 脂蛋白B 球蛋白C 糖蛋白D 血红蛋白23. 参与脂肪酸合成的乙酰CoA主要来自A 胆固醇B 葡萄糖C 丙氨酸D 酮体12.24. 血清蛋白(PI为4.7)在下列哪种PH值溶液中带正电荷?A.PH4.0B.PH5.0C.PH6.0D.PH7.025. 酶促反应中，决定反应特异性的是A 酶蛋白B 辅酶C 金属离子D 辅基26.关于同工酶叙述正确的是A 催化相同的化学反应B 分子结构相同C 理化性质相同D 电泳方向相同27. 1分子葡萄糖酵解时净生成多少个ATPA 1B 2C 3D 428. 长期饥饿时尿中含量增高的是A 葡萄糖B 丙酮酸C 胆红素D 酮体29. 脂肪酸合成中的供氢体是A. FADH2B. NADH + H+C. NADPH + H+D. FMNH230.脂肪的主要生理功能是（）。
华中师范大学等六校合编《分析化学》(下册)笔记和课后习题(含考研真题)(毛细管电泳和其他分离技术)
第十八章毛细管电泳和其他分离技术18.1 复习笔记一、电泳基本原理1．粒子的电泳迁移（1）电泳淌度①外电场作用下，离子的迁移速率为v i＝μi E②电泳淌度式中，η为溶剂黏度，r为离子的有效半径。
（2）电渗流①Zeta电位的产生毛细管内壁充入pH≥3的电介质，管壁表面硅羟基解离而带负电荷，与之接触的缓冲液形成双电层，水相与石英毛细管相接触的表面带一层正电荷，于是产生了电位差。
②电渗现象电渗现象是指在高电压作用下，双电层中的水合阳离子层引起溶液在毛细管内整体向负极方向移动的现象。
③电渗流电渗流是指电渗力驱动下的毛细管中整体液体的流动。
式中，ε为介电常数，ξ为Zeta电位。
④塞式流图18－1 电渗流（a）和高效液相色谱（b）的流型及相应的样品区带（3）表观淌度和出峰顺序①离子在电场中的实际迁移速率v＝（μEOF＋μi）E②出峰顺序a．带正电荷的粒子所受电场力与电渗流方向一致，其迁移速率为移v EOF＋v i，先流出毛细管。
b．中性粒子不受电场作用，其迁移速率等于v EOF，随电渗流一起流出。
c．带负电荷的粒子所受电场力与电渗流方向相反，迁移速率等于v EOF－v i，后流出。
2．影响峰宽的因素（1）理论塔板数式中，l为溶质的迁移距离，即毛细管的有效长度，σT是各种引起区带展宽因素的总和。
（2）电泳峰的标准偏差（或方差）式中，为扩散因素，为进样因素，为吸附因素，为检测器因素为温度因素为电分散因素。
①扩散纵向扩散决定分离的理论极限效率。
②进样进样体积大于扩散控制的区带宽度，分离就会变差；进样量太小，对检测器的要求就高。
③吸附吸附作用可能引起电泳峰拖尾，甚至引起不可逆吸附。
④温度焦耳热可导致毛细管内部的温度梯度不均匀和局部黏度的变化，从而引起区带展宽。
⑤电分散电分散使试样峰变形，从而影响分离效率。
3．毛细管电泳的分离效率（1）色谱理论的纵向扩散项式中，D为组分的扩散系数，t为组分在毛细管中的迁移时间，L为毛细管的总长度，l为毛细管的有效长度，U为加在毛细管两端的电压。
蛋白质习题
一、是非题1．所有蛋白质分子中N元素的含量都是16％。
2．蛋白质是由20种L-型氨基酸组成，因此所有蛋白质的分子量都一样。
3．蛋白质构象的改变是由于分子内共价键的断裂所致。
4．氨基酸是生物体内唯一含有氮元素的物质。
5．组成蛋白质的20种氨基酸分子中都含有不对称的α-碳原子。
6．酸和酶水解蛋白质得到的氨基酸不产生消旋作用。
7．用层析技术分离氨基酸是根据各种氨基酸的极性不同。
8．用凝胶电泳技术分离蛋白质是根据各种蛋白质的分子大小和电荷不同。
9．从细胞内提取出某种物质，凡是用羧肽酶A水解不产生游离氨基酸的，可肯定地判断它是非肽物质。
10．蛋白质构象的变化伴随自由能的变化，最稳定的构象自由能最低。
11．刚性平面结构的肽单位是蛋白质主链骨架的重复单位。
12．蛋白质分子的亚基就是蛋白质的结构域。
13．同一种氨基酸的对映体旋光度相等但方向相反。
14．烷基化和烃基化都是与氨基酸的氨基发生的反应。
15．在酸性条件下茚三酮与20种氨基酸部能生成紫色物质。
16．蛋白质变性是其构象发生变化的结果。
17．脯氨酸不能维持α-螺旋，凡有脯氨酸的部位肽链都发生弯转。
18．从原子组成上可以把肽键看作是一种酰胺键．但两者并不完全相同。
肽键的实际结构是一个共振杂化体，6个原子位于同一个面上。
19．甘氨酸与D-甘油醛的构型相同。
20．氨基酸自动分析仪可以鉴定除色氨酸以外的所有氨基酸。
2I．蛋日质的空间结构在很大程度上是由该蛋白质的一级结构决定的。
22．胶原蛋白在水中煮沸转变为明胶，是各种氨基酸的水溶液。
23．蛋白质和酶原的激活过程说明蛋白顺的一级结构变化与蛋白质的功能无关。
24．肌红蛋白和血红蛋白的α和β链有共同的三级结构。
25．利用盐浓度的不同可以提高或降低蛋白质的溶解度。
26．有机溶剂引起蛋白质变性的主要原因之一是降低介质的介电常数。
27．免疫球蛋白是一类血浆糖蛋白。
28．蛋白质的磷酸化和去磷酸化作用是由同一种酶催化的可逆反应。
武工大生化作业解答
P77~78习题参考答案3 Fischer式 Haworth式构象式β-D-脱氧核糖CCH2CCCH2OHHOH OHHOHO OHHCH2OHHHHOHHOHCH2OHOHHHHHOα-D-半乳糖CCCCCCH2OHOHHOH OHHHOHHOHOCH2OHHHOHHHHOHHOOCH2OHHOHHHHOHOHHβ-L-山梨糖CCCCCH2OHOHHOH2COHO HOHHHOOHHOH2CHHOOHHCH2OHHO OHHHHHOH2CCH2OHOHFischer式 Haworth式构象式β-D-N-乙酰神经氨酸（唾液酸）CH3-HOH2CH32OHCOO-CCH2CCCCCOHOHOHOHHAcNHOCH2OHOHHHH20三糖β-半乳糖苷酶半乳糖+D-葡萄糖其中的糖苷键均为β型糖之间的连接为半乳糖-半乳糖-葡萄糖CH2OAcHCCHCHHC2OCH3OCH3CH3OCH3OOAc2，3，4，6-四甲基-1，5-二乙酰基-半乳糖醇CH2OAcHCCHCHHC2OAcOCH3CH3OCH3OOAc2，3，4-三甲基-1，5，6-三乙酰基-半乳糖醇CH2OCH3CHCHHCCH2OCH3CH3OCH3OOCH3AcO1，2，3，5，6-五甲基-4-乙酰基-三梨醇NaBH4还原再乙酰化3CH2OCH3CHCHHCCH2OCH3CH3OCH3OOCH3HO3332OCH32OHP121习题解答10：疏水部分亲水部分COOCH2R1R2COOCHCH2O POO-O CH2CH2NH3+a疏水部分亲水部分bCNH CHCH2CH OHCH2O PO-O XOCH3（CH2）12CHR1O疏水部分亲水部分cCNH CHCH2CH OHCH2CH3（CH2）12CHO GalOR疏水部分亲水部分d寡糖链（含唾液酸）CNH CHCH2CH OHCH2CH3（CH2）12CHOORHO疏水部分亲水部分eDAG +PC鞘磷脂磷脂酶C×磷酸胆碱（油溶）（水溶）15：P155作业订正H 3N +（CH 2）4CHCOOH3+2N （CH 2）4CHCOO -23N +（CH 2）4CHCOO -3+3N +（CH 2）4CHCOO NH2pK COOHpK α-NH 3+pK ε-NH 3+000.80.2平衡时R -R 0R +R 2+pH=pK ε-NH 3+ + lgR -R0=10.53+lg0.2/0.8=9.92pK COOH平衡时R 0R +Me 2CHCH 2CHCOOHNH 3+Me 2CHCH 2CHCOO -NH 3++ H +0.3-xxxx 20.3-x=10-2.36xpH=- lg[H +]=-lgx=1.464a：4b ：平衡时R -R 0Me 2CHCH 2CHCOO-3+Me 2CHCH 2CHCOO -NH20.3-xxx+ H +x 20.3-x = 10-9.6xpH=- lg[H +]=-lgx=11.5H 3N +CH 2COO -H 3N +CH 2COOHH ++初始 0 1 0平衡 0.3 0.7 ？pH=pKa 1+lg =2.34+lg =2.71（加0.3MHCl ）R 0R +0.70.3H ++H 3N +CH 2COO -H 2NCH 2COO -初始 1 0 0平衡 0.7 0.3 ？pH=pKa 2+lg = 9.6+ lg =9.23（加0.3MNaOH ）R 0R -0.70.36His 2++-pK 1=1.82pK R =6.0pK 2=9.178pH=pK 1+lg[His +]/[His 2+] 即 6.4=1.82+lg[His +]/[His 2+]pH=pK R +lg[His]/[His +] 即 6.4=6.0+lg[His]/[His +]pH=pK 2+lg[His -]/[His]即 6.4=9.17+lg[His -]/[His][His 2+]+[His +]+[His]=0.25Asp Gly Thr Leu LyspI 2.98 5.97 6.53 5.98 9.74pI-pH 0 2.97 3.53 2.98 6.74pH3.0带电荷0 + ++ + +++淋洗顺序: Asp ＞Thr ＞Gly ＞Leu ＞Lys(Thr 含侧链-OH,Leu 含大的疏水残基)15补充1：指出用电泳技术分离下列物质，pH 是多少最适合，并说明理由？（6分）。
第十三章表面物理化学练习题及答案
第十三章表面物理化学练习题一、选择题1．在电泳实验中，观察到分散相向阳极移动，表明:(A) 胶粒带正电(B) 胶粒带负电(C) 电动电位相对于溶液本体为正(D) Stern 面处电位相对溶液本体为正2．通常称为表面活性物质的就是指当其加入于液体中后：(A) 能降低液体表面张力(B) 能增大液体表面张力(C) 不影响液体表面张力(D) 能显著降低液体表面张力3．实验测得O2在金表面上的吸附热Q与吸附量无关，这种吸附满足以下哪种吸附规律？(A)L angmuir等温式(B) Freundlich等温式(C) TëMKuH等温式(D) 以上三种皆可以4．对于有过量KI 存在的AgI 溶液，电解质聚沉能力最强的是：(A) K3[Fe(CN)6] (B) MgSO4(C) FeCl3(D) NaCl5．多孔硅胶的强烈吸水性能说明硅胶吸附水后，表面自由能将(A) 变高(B) 变低(C) 不变(D) 不能比较6．为直接获得个别的胶体粒子的大小和形状，必须借助于：(A) 普通显微镜(B) 丁铎尔效应(C) 电子显微镜(D) 超显微镜7．由0.01 dm3 0.05 mol·kg-1的KCl 和0.1 dm3 0.002 mol·kg-1的AgNO3溶液混合生成AgCl 溶胶，为使其聚沉，所用下列电解质的聚沉值由小到大的顺序为：(A) AlCl3＜ZnSO4＜KCl (B) KCl ＜ZnSO4＜AlCl3(C) ZnSO4＜KCl ＜AlCl3(D) KCl ＜AlCl3＜ZnSO4 8．将一毛细管端插入水中，毛细管中水面上升5 cm，若将毛细管向下移动，留了 3 cm 在水面，试问水在毛细管上端的行为是：(A) 水从毛细管上端溢出(B) 毛细管上端水面呈凸形弯月面(C) 毛细管上端水面呈凹形弯月面(D) 毛细管上端水面呈水平面9．明矾净水的主要原理是：(A) 电解质对溶胶的聚沉作用(B) 溶胶的相互聚沉作用(C) 电解质的敏化作用(D) 电解质的对抗作用10．在pH ＜7 的Al(OH)3溶胶中，使用下列电解质使其聚沉：(1)KNO3(2) NaCl (3) Na2SO4(4) K3Fe(CN)6在相同温度、相同时间内，聚沉能力大小为：(A) (1) ＞(4) ＞(2) ＞(3) (B) (1) ＜(4) ＜(2) ＜(3)(C) (4) ＞(3) ＞(2) ＞(1) (D) (4) ＜(3) ＜(2) ＜(1) 11．兰缪尔的吸附等温式为Γ = Γ∞bp/(1+bp)，其中Γ∞为饱和吸附量，b为吸附系数。
生物化学技术 习题册答案
上海交通大学网络教育学院医学院分院生物化学技术课程习题册答案专业：检验技术层次:专升本绪论一、名词解释1.生物化学技术:是研究生物体的化学组成、结构、功能以及在生命活动中化学物质的代谢、调节控制等的实验方法。
2.盐溶：蛋白质、酶及其它们与其它物质的复合体在离子强度低的盐溶液中，其溶解度随着盐溶液浓度的升高而增加,此现象称为“盐溶”。
3.盐析:当溶液中盐浓度不断上升,达到一定程度，蛋白质等的溶解度反而逐渐减小,并先后从溶液中析出，称为“盐析"。
4.透析:利用溶液组分能否通过半透膜并由引起膜两边溶液的化学势能不同,而达到去除溶液中的小分子物质。
5.超滤（反向渗透）：利用压力或离心力，迫使水和其他小的溶质分子通过半透膜，而蛋白质不能透过半透膜仍留在膜上。
6.凝胶层析法(Gel Chromatography)：利用各种物质分子大小不同,在固定相上受到阻滞程度不同而达到分离的一种层析方法。
二、单选题1。
凝胶层析不可应用于：（ B ）A。
脱盐 B. 一步分离纯化生物大分子物质 C。
高分子溶液的浓缩D。
测定高分子物质的分子量 E．分离分子大小不同的物质2。
核酸在紫外区有强吸收，其最大吸收值是在波长：（ C )A．206nm B．240nm C．260nm D．280nm E．304nm3.对260nm波长的紫外有强吸收主要是因为（ E )A．核糖的环式结构 B。
脱氧核糖的环式结构C．嘌呤的双环结构 D.嘧啶的单环结构 E. 嘌呤和嘧啶环中的共轭双键4。
蛋白质在紫外区有强吸收，其最大吸收值是在波长：( D ）A．206nm B．240nm C．260nm D．280nm E．304nm5.用紫外分光光度法测定蛋白质,因为蛋白质在紫外区有个最大吸收峰，其峰值波长是：D A．220nm B．245nm C．260nm D．280nm E．340nm6。
用吸收光谱法测量双链DNA的含量为：（ A ）A.C（ug/ml）=A260×50×稀释倍数B.C（ug/ml）=A260×40×稀释倍数C.C（ug/ml）=A260×30×稀释倍数D.C(ug/ml）=A260×20×稀释倍数E.C(ug/ml）=A260×10×稀释倍数7。
生物化学综合实验习题解答
生物化学综合实验习题解答综合实验一蛋白质的浓度测定―Bradford法1．制作标准曲线及测定样品时，为什么要将各试管中溶液纵向倒转混合？答：(1)由于蛋白与考马斯亮蓝G-250染料的结合能力不同，纵向倒转混合，充分反应。
(2)标准蛋白加入的量与考马斯亮蓝G-250的体积相差悬殊，纵向倒转混合，充分反应。
2．查阅相关资料、文献，举例说明测定蛋白质的浓度的方法有哪几种，并说明各自的优缺点。
答：主要的以下几种：（1）微量凯氏（Kjeldahl）定氮法，优点是测定准确率高，可测定不同形态的样品。
缺点是测定过程繁琐。
（2）双缩脲法（Biuret法）优点是较快速，不同的蛋白质产生颜色的深浅相近，以及干扰物质少。
主要的缺点是灵敏度差。
因此双缩脲法常用于需要快速，但并不需要十分精确的蛋白质测定。
（３）Folin―酚试剂法（Lowry法）此法的显色原理与双缩脲方法是相同的，即Folin―酚试剂，以增加显色量，从而提高了检测蛋白质的灵敏度。
这两种显色反应产生深蓝色的原因是在碱性条件下，蛋白质中的肽键与铜结合生成复合物。
Folin―酚试剂中的磷钼酸盐―磷钨酸盐被蛋白质中的酪氨酸和苯丙氨酸残基还原，产生深蓝色（钼兰和钨兰的混合物）。
在一定的条件下，兰色深度与蛋白的量成正比。
(４）考马斯亮兰法（Bradford法）考马斯亮兰G-250染料，在酸性溶液中与蛋白质结合，溶液的颜色也由棕黑色变为蓝色。
染料主要是与蛋白质中的碱性氨基酸（特别是精氨酸）和芳香族氨基酸残基相结合。
在波长为595nm下测定的吸光度值A595，与蛋白质浓度成正比。
优点：a. 灵敏度高。
b 测定快速、简便，只需加一种试剂。
c. 干扰物质少。
缺点： a 由于各种蛋白质中的精氨酸和芳香族氨基酸的含量不同，因此Bradford法用于不同蛋白质测定时有较大的偏差，在制作标准曲线时通常选用g-球蛋白为标准蛋白质，以减少这方面的偏差。
b.物质干扰此法的测定，主要的干扰物质有：去污剂、 Triton X-100、十二烷基硫酸钠（SDS）和0.1N的NaOH。
电泳技术相关习题
电泳技术相关习题一、名词解释1．电泳：指带电荷的溶质或粒子在电场中向着与其本身所带电荷相反的电极移动的现象。
2．蛋白质的等电点：当溶液的酸碱度处于某一特定pH值时，它将带有相同数量的正、负电荷（即净电荷为零），致使蛋白质分子在电场中不会移动，称此特定的pH值为该蛋白质的等电点。
3．电泳速度：在单位时间内，带电粒子在毛细管中定向移动的距离。
4．迁移率：带电粒子在单位电场强度下的移动速度，常用μ来表示。
5．迁移时间：毛细管中，带电粒子在电场作用下作定向移动的时间。
二、单项选择题1 ．瑞典科学家A ．Tiselius 首先利用U 形管建立移界电泳法的时间是（）A ．1920 年B ．1930 年C ．1937 年D ．1940 年2 ．大多数蛋白质电泳用巴比妥或硼酸缓冲液的pH 值是（）A ．7.2 ～7.4B ．7.4 ～7.6C ．7.6 ～8.0D ．8.2 ～8.83 ．下列有关电泳时溶液的离子强度的描述中，错误的是（）A ．溶液的离子强度对带电粒子的泳动有影响B ．离子强度越高、电泳速度越快C ．离子强度太低，缓冲液的电流下降D ．离子强度太低，扩散现象严重，使分辨力明显降低4 ．电泳时pH 值、颗粒所带的电荷和电泳速度的关系，下列描述中正确的是（）A ．pH 值离等电点越远，颗粒所带的电荷越多，电泳速度也越慢B ．pH 值离等电点越近，颗粒所带的电荷越多，电泳速度也越快C ．pH 值离等电点越远，颗粒所带的电荷越少，电泳速度也越快D ．pH 值离等电点越远，颗粒所带的电荷越多，电泳速度也越快5 ．一般来说，颗粒带净电荷量、直径和泳动速度的关系是（）A ．颗粒带净电荷量越大或其直径越小，在电场中的泳动速度就越快B ．颗粒带净电荷量越小或其直径越小，在电场中的泳动速度就越快C ．颗粒带净电荷量越大或其直径越大，在电场中的泳动速度就越快D ．颗粒带净电荷量越大或其直径越小，在电场中的泳动速度就越慢6 ．电泳时对支持物的一般要求除不溶于溶液、结构均一而稳定外，还应具备（）A ．导电、不带电荷、没有电渗、热传导度小、B ．不导电、不带电荷、没有电渗、热传导度大C ．不导电、带电荷、有电渗、热传导度大D ．导电、不带电荷、有电渗、热传导度大7 ．醋酸纤维素薄膜电泳的特点是（）A ．分离速度慢、电泳时间短、样品用量少B ．分离速度快、电泳时间长、样品用量少C ．分离速度快、电泳时间短、样品用量少D ．分离速度快、电泳时间短、样品用量多8 ．聚丙烯酰胺凝胶是一种人工合成的凝胶，其优点是（）A ．机械强度好、弹性小、无电渗作用、分辨率高B ．机械强度好、弹性大、有电渗作用、分辨率高C ．机械强度好、弹性大、有电渗作用、分辨率低D ．机械强度好、弹性大、无电渗作用、分辨率高9 ．20 世纪60 年代中期问世的等电聚焦电泳，是一种（）A ．分离组份与电解质一起向前移动的同时进行分离的电泳技术B ．能够连续地在一块胶上分离数千种蛋白质的电泳技术C ．利用凝胶物质作支持物进行的电泳技术D ．利用有pH 值梯度的介质，分离等电点不同的蛋白质的电泳技术10 ．毛细管等电聚焦电泳具有极高的分辨率，通常可以分离的两种蛋白质其等电点差异小于（）A ．0.01pH 单位B ．0.05pH 单位C ．0.10pH 单位D ．0.15pH 单位11 ．下述免疫电泳优点的描述中，错误的是（）A ．加快了沉淀反应的速度B ．是将某些蛋白组分根据其带电荷的不同而将其分开，再与抗体起反应C ．本法微量化程度高D ．应用范围小12 ．毛细管电泳的特点是（）A ．容易自动化，操作繁杂，环境污染小B ．容易自动化，操作简便，环境污染大C ．容易自动化，操作繁杂，环境污染大D ．容易自动化，操作简便，环境污染小13 ．毛细管等速电泳常用于分离（）A ．小离子、小分子、肽类及蛋白质B ．大离子、小分子、肽类及蛋白质C ．小离子、大分子、肽类及蛋白质D ．小离子、中分子、肽类及蛋白质14 ．下述有关毛细管区带电泳的叙述中，不正确的是（）A ．也称为毛细管自由溶液区带电泳B ．是毛细管电泳中使用最少的一种技术C ．根据组分的迁移时间进行定性D ．根据电泳峰的峰面积或峰高进行定量分析15．下述对毛细管凝胶电泳原理的叙述中，不正确的是（）A ．是将板上的凝胶移到毛细管中作支持物进行的电泳B ．凝胶具有多孔性C ．能根据待测组分的离子强度不同而进行分离D ．起类似分子筛的作用1、C2、D3、B4、D5、A6、B7、C8、D9、D 10、A 11、D 12、D 13、A 14、B 15、C三、判断题1、电泳分离技术适用于分离各种离子和非离子的混合物（）错2、高压电泳是指电场强度>20伏/cm，常用于高分子离子的分离（）错3、电场引力F的大小取决于粒子荷电量Q及电场强度E（）对4、在非分子筛的连续电泳系统中，不同种类的带电物质其电泳动率取决于Q/r比值（）对5、电泳缓冲液常用离子强度为0.2~2.0 mol/L之间（）错6、SDS-PAGE主要用于分离分子量不同的蛋白质混合物（）对7、蛋白质在小于等电点的pH溶液中向阳极移动，而在大于等电点的pH溶液中向阴极移动（）错8、电泳缓冲液离子强度越高，电泳泳动率越快（）错四、简答1、溶液的Ph值对电泳速度有何影响？答：溶液的pH值决定了带电质点的解离程度，也决定了物质所带电荷的多少。
等电聚焦电泳练习题
等电聚焦电泳练习题1.等电聚焦电泳是（)。
A.在均一的缓冲液系统中，待分离物质中不同的成分被分离成独立的区带B.电泳时最前面和最后面的部分是纯的离子，其他部分则为各种离子成分互相重叠C.采用不连续的电解质溶液，样品组分夹在前导和尾随电解质之间，根据有效迁移率的不同而分离，当电泳达到平衡后，各组分的区带相随，形成清晰的界面，并以等速向前移动D.将多种两性电解质载体形成pH梯度，被分离组分移动聚集到其pI处形成很窄的区带，利用被分离组分pI的不同分离物质E.以琼脂糖凝胶为支持介质与免疫扩散相结合的一种技术第1题2.等电聚焦电泳是基于蛋白质的()。
A.亲水性质B.疏水性质3.等电聚焦电泳需要用无盐溶液。
()此题为判断题(对，错)第3题4.PFGE是（）A. 琼脂糖电泳B. 聚丙烯酰胺凝胶电泳第4题5.IFE是指()。
A、脉冲场凝胶电泳B、聚丙烯酰胺凝胶电泳[单选] 正常人血清进行琼脂糖凝胶蛋白电泳后，区带6.按泳动速度快慢依次为（）A．清蛋白，α1-球蛋白，β-球蛋白，γ-球蛋白，α2-球蛋白B．清蛋白，α1-球蛋白，β-球蛋白，γ-球蛋白，α2-球蛋白C．清蛋白，α1-球蛋白，α2-球蛋白，γ-球蛋白，β-球蛋白D．清蛋白，α1-球蛋白，α2-球蛋白，β-球蛋白，γ-球蛋白E．清蛋白，α1-球蛋白，γ-球蛋白，α2-球蛋白，β-球蛋白7.等速电泳是（)。
A.在均一的缓冲液系统中，待分离物质中不同的成分被分离成独立的区带B.电泳时最前面和最后面的部分是纯的离子，其他部分则为各种离子成分互相重叠C.采用不连续的电解质溶液，样品组分夹在前导和尾随电解质之间，根据有效迁移率的不同而分离，当电泳达到平衡后，各组分的区带相随，形成清晰的界面，并以等速向前移动D.将多种两性电解质载体形成pH梯度，被分离组分移动聚集到其pI处形成很窄的区带，利用被分离组分pI的不同分离物质E.以琼脂糖凝胶为支持介质与免疫扩散相结合的一种技术Bactec9000系列8.自动血培养系统的检测手段为（)。
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电泳技术习题
生化实验技术（电泳）习题
一、是非题（对的打“√”，错的打“×”）
1.电泳分离技术适用于分离各种离子和非离子混合物。
（）
2.高压电泳是指电场强度>20伏/cm，常用于高分子离子的分离。
（）
3.电场引力F的大小取决于粒子荷电量Q及电场强度E。
（）
4.在非分子筛的连续电泳系统中，不同种类的带电物质其泳动率取决于Q/r比
值。
（）
5.电泳缓冲液常用离子强度为0.2～2.0之间。
（）
6.SDS-PAGE主要用于分离分子量不同的蛋白质混合物。
（）
7.电泳时由于电极反应，使阴极产碱，阳极产酸，故通常电极液要用缓冲溶液。
（）
8.蛋白质在小于等电点的pH溶液中，向阳极移动，而在大于等电点的pH溶液中，将向阴极移动。
（）
9.电泳缓冲液离子强度越高，电泳泳动率越快。
（）
二、名词解释
1.电泳迁移率
2.电场强度
3.电渗现象
三、简述题
1.简述不连续PAGE分离血清蛋白质的基本原理。
2.试列举出三种电泳方法，比较其优缺点和应用范围。
3.简述等电聚焦电泳分离蛋白质的的基本原理。
四、选择题(只有一个正确答案)
1.电泳系统中热效应取决于下列哪项因素―――――－―――――――――――――（）
A.电流强度
B.支持物的电渗作用
C.颗粒所带净电荷数及其大小，形状
D.溶液的pH值
E.溶液的离子强度
2..进行DNA的琼脂糖凝胶电泳时，下列哪步操作是错误的：――――――――――――（）
A.称取琼脂糖配制一定浓度的琼脂糖溶液
B.将样品放置于电泳槽阳极侧然后加入溶化的琼脂糖凝胶
C.胶凝后，加入电泳缓冲液，拔出样品梳
D.样品液与溴酚蓝缓冲液混合，再加入样品孔中
E.电泳结束后以溴化乙锭染色，紫外光下观察区带
3..电泳系统电场引力F的大小取决于：―――――――――――――――――――（）
A.粒子荷电量Q
B.电场强度E
C.粒子荷电量Q及电场强度E
D.粒子半径
4.在非分子筛的连续电泳系统中，不同种类的带电物质其泳动率取决于：―――――（）
A.Q/r比值。
B.电场强度
C.颗粒所带净电荷数
D.颗粒大小，形状
5.高压电泳是指:―――――――――――――――――――――――――――――（）
A.电场强度>20伏/cm，总电压>500伏
B.电场强度>500伏/cm
C.总电压>100伏
D.总电压>200伏
6.电泳缓冲液常用离子强度为:―――――――――――――――――――――――（）
A.0.2～2.0之间
B.0.02～2.0之间
C.0.1~1.0之间
D..0.02～0.2之间
7.电泳分离技术适用于分离下列哪种类型的混合物―――――――――――――――（）
A.各种离子和非离子混合物
B.非离子混合物
C.离子混合物
D.有机混合物
8.电泳时的电极反应，下列哪项描述是正确的―――――――――――――――――（）
A.阴极产酸,阳极产碱B阴极产碱.阳极产酸
C.阴极产O2
D.阳极产H2
9.某蛋白质pI为7.5，在pH6.0的缓冲液中进行自由界面电泳，其泳动方向为――――（）
A、向负极移动
B、向正极移动
C、不运动
D、同时向正极和负极移动
10.不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳比一般电泳的分辨率高，是因为具有下列哪种效应？―――（）
A、浓缩效应
B、电荷效应
C、分子筛效应
D、粘度效应
五、填空题
1.聚丙烯酰胺凝胶是由____________和____________聚合而成的大分子。
不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳具有_________效应，__________效应和__________效应，可提高电泳分辨率。
2.聚丙烯酰胺凝胶电泳中，___________________________称为凝胶浓度（T%），计算公式
为_______________________；
__________________称为交联度（C%），计算公式为_______________________。
3．带电粒子在电场中的泳动速度用_____________来表示。