总糖检测作业指导书
总糖的测定方法
总糖的测定方法（斐林氏溶液快速测定法）一、原理：酶制剂生产中需要测定发酵液中糖质原料的消耗情况，以便掌握发酵过程。
葡糖糖、果糖、麦芽糖等为醛基、酮基或半缩醛基的糖都具有还原性，能使二价铜还原为一价铜，发酵液中的糊精、淀粉经过酸水解也能成为还原糖。
可根据其还原性，用一定量的斐林氏溶液将葡萄糖完全氧化，过量的斐林氏溶液与碘化钾作用而析出碘，然后用硫代硫酸钠来滴定，查表求的发酵液中的糖含量。
二、试剂：1、3N的盐酸溶液：浓硫酸一份加蒸馏水3份。
2、6N的氢氧化钠溶液：称取氢氧化钠240.06克，溶解定容至1000毫升。
3、斐林氏溶液：A液：硫酸铜（五水硫酸铜）24克定容400毫升。
B液：酒石酸钾钠75克、氢氧化钠50克定容400毫升。
C液：碘化钾60克，定容200毫升。
A液、B液、C液混合为1000毫升溶液。
注意：配制时应按顺序配制，分别充分溶解，然后混合（A+B+C)摇匀备用。
4、4N的硫酸溶液：准确吸取化学纯浓硫酸111毫升于1000毫升的容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度。
5、0.05N的硫代硫酸钠溶液：精确称取化学纯的硫代硫酸钠12.41克与碳酸钠0.1克，用新沸初冷蒸馏水溶解定容1000毫升。
（此溶液配置好后需隔一周才能使用，每月需标定一次）。
6、1%的酚酞指示剂：称取酚酞1克，溶于95%的乙醇中，定容至100毫升。
三、操作方法：样品：吸取0.5毫升样品（发酵滤液），放入100毫升的三角瓶中（做两只可对照），加入3N的盐酸10毫升加热3分钟，冷却后滴入酚酞指示剂2滴，用6N的氢氧化钠溶液调至红色，再加入斐林氏溶液10毫升，煮沸3分钟，冷却后加入4N的硫酸10毫升，用0.05N的硫代硫酸钠滴定至奶油色为终点（在接近终点时加1%的指示剂，使之呈紫色）。
空白：在100毫升的三角瓶中加蒸馏水10毫升，然后加入斐林氏溶液10毫升煮沸3分钟，冷却后加入4N的硫酸10毫升，用0.05N的硫代硫酸钠滴定至奶白色。
总糖的测定 6
食品中总糖的测定6.3.1 第一法廉爱农法适用于甜酒和半甜酒。
6.3.1.1 方法提要费林溶液与还原糖共沸，生成氧化亚铜沉淀。
以次甲基蓝为指示液，用试样水解液滴定沸腾状态的费林溶液。
达到终点时，稍微过量的还原糖将次甲基蓝还原成无色为终点，依据试样水解液的消耗体积，计算总糖含量。
6.3.1.2 试剂（a）费林甲液：称取硫酸铜（CuSO4·5H2O）69.28 g，加水溶解并定容至1000 mL。
（b）费林乙液：称取酒石酸钾钠346 g及氢氧化钠100 g，加水溶解并定容至1000 mL，摇匀，过滤，备用。
（c）2.5 g／L 葡萄糖标准溶液：称取经103℃～105℃烘干至恒重的无水葡萄糖 2.500 0 g（精确至0.000 1 g），加水溶解，并加浓盐酸5 mL，再用水定容至1000 mL。
（d）10 g／L次甲基蓝指示液：称取次甲基蓝 1.0 g，加水溶解并定容至100 mL。
（e）6 mol／L盐酸溶液：量取浓盐酸50 mL，加水稀释至100 mL。
（f）1 g／L甲基红指示液：称取甲基红0.10 g，溶于乙醇并稀释至100 mL。
（g）200 g／L氢氧化钠溶液：称取氢氧化钠20 g，用水溶解并稀释至100 mL。
6.3.1.4 分析步骤（a）标定费林溶液的预滴定：准确吸取费林甲、乙液各 5. 00 mL 于250 mL锥形瓶中，加水30 mL，混合后置于电炉上加热至沸腾。
滴入葡萄糖标准溶液，保持沸腾，待试液蓝色即将消失时，加入次甲基蓝指示液2滴，继续用葡萄糖标准溶液滴定至蓝色消失为终点。
记录消耗葡萄糖标准溶液的体积（V）。
（b）费林溶液的标定：准确吸取费林甲、乙液各 5.00 mL于250 mL 锥形瓶中，加水30 mL。
混匀后，加入比预滴定体积（V）少1.00 mL 的葡萄糖标准溶液，置于电炉上加热至沸，加入次甲基蓝指示液2滴，保持沸腾 2 min，继续用葡萄糖标准溶液滴定至蓝色刚好消失为终）。
实验一还原糖和总糖的测定——3,5二硝基水杨酸比色法
《生物化学》实验指导书适用专业：生物科学、食品科学、生物工程、农学、园艺、环境科学孝感学院生命科学与技术学院生物化学实验细则为了保证生物化学实验的顺利进行，培养同学们掌握良好、规范的生物化学基本实验技能，特制定以下实验细则，请同学们严格遵守。
1. 实验前应提前预习实验指导书并复习相关知识。
2. 严格按照生物化学实验分组，分批进入实验室，不得迟到。
非本实验组的同学不准进入实验室。
3. 进入实验室必须穿实验服。
各位同学进入各自实验小组实验台后，保持安静，不得大声喧哗和嬉戏，不得无故离开本实验台随便走动。
绝对禁止用实验仪器或药物嬉耍。
4. 实验中应保持实验台的整洁，废液倒入废液桶中，用过的滤纸放入垃圾桶中，禁止直接倒入水槽中或随地乱丢。
5. 实验中要注意节约药品与试剂，爱护仪器，使用前应了解使用方法，使用时要严格遵守操作规程，不得擅自移动实验仪器。
否则，因非实验性损坏，由损坏者赔还。
6. 使用水、火、电时，要做到人在使用，人走关水、断电、熄火。
7. 做完实验要清洗仪器、器皿，并放回原位，擦净桌面。
8. 实验后，要及时完成实验报告。
目录实验一还原糖和总糖的测定——3,5-二硝基水杨酸比色法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．１实验二油脂酸价的测定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．５实验三蛋白质的提取及浓度测定¬(紫外吸收法)．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．７实验四淀粉酶活力的测定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．９实验五酶的激活和抑制作用．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．１３实验六氨基酸的分离鉴定――纸层析法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．１４实验七基因组DNA的快速提取---碘化钾法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．１６实验八琼脂糖凝胶电泳技术――DNA样品检测．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．１８实验一还原糖和总糖的测定——3,5-二硝基水杨酸比色法一、目的与要求掌握还原糖和总糖测定的基本原理，学习比色法测定还原糖的操作方法和分光光度计的使用。
实验二 还原糖及总糖的测定
实验二还原糖及总糖的测定（3、5——二硝水杨酸比色法）目的和要求：1．掌握3、5-二硝基水杨酸比色法测定糖量的原理及方法。
2．熟悉722分光光度计基本工作原理和操作方法。
原理：各种单糖和麦芽糖是还原糖，蔗糖和淀粉是非还原糖。
利用溶解度不同，可将植物样品中的单糖、双糖和多糖分别提取出来，再用酸水解法使没有还原性的双糖和多糖彻底水解成有还原性的单糖。
在碱性条件下，还原糖与3、5—二硝基水杨酸共热，3、5—二硝基水杨酸被还原为3-氨基-5-硝基水杨酸（棕红色物质），还原糖则被氧化成糖酸及其它物质。
在一定范围内，还原糖的量与棕红色物质颜色深浅的程度成一定的比例关系，可在分光光度计540nm波长测定棕红色物质的吸光值。
查标准曲线计算，便可分别求出样品中还原糖和总糖的含量。
多糖水解时，在单糖残基上加了一分子水，因而在计算中须扣除已加入的水量，测得所得到的总糖量乘以0.9即为实际的总糖量。
该方法是半微量定糖法，操作简便，快速，杂质干扰较少。
试剂和材料：1．试剂（1）1mg/ml葡萄糖标准液：准确称取100ml分析纯葡萄糖（预先在105℃烘至恒重），置于小烧杯中，用少量蒸馏水溶解后，定量转移到100ml容量瓶中，以蒸馏水定容到刻度，摇匀，冰箱中保存备用。
（2）3、5—二硝基水杨酸试剂（又称DNS试剂）甲液——溶解6.9g结晶酚（苯酚）于15.2ml 10%NaOH中，并稀释至69ml，在此溶液中加入6.9g亚硫酸氢钠。
乙液——称取22.5g酒石酸钾钠，加到300ml 10% NaOH中，再加入880ml 1%的3、5—二硝基水杨酸溶液。
将甲液和乙液相混合即得黄色试剂，贮于棕色试剂瓶中，放置7—10天使用。
（3）碘—碘化钾溶液（碘试剂）：称取5g碘和10g碘化钾，研匀后溶于100ml蒸馏水中。
（4）酚酞指示剂：称取0.1g酚酞溶于70%乙醇中。
（5）6 mol·L-1 HCl（6）6 mol·L-1NaOH（7）面粉2．器材比色管、离心管、量筒、三角瓶、容量瓶、刻度吸管、玻璃漏斗、滤纸、白瓷板、电热恒温水浴槽、离心机、天平、分光光度计。
实验一 总糖的测定
实验一 总糖的测定──3,5－二硝基水杨酸法目的要求：掌握总糖的测定原理，学习用比色法测定总糖的方法。
实验原理:在NaOH 和丙三醇存在下，3,5－二硝基水杨酸（DNS ）与还原糖共热后被还原生成氨基化合物。
在过量的NaOH 碱性溶液中此化合物呈桔红色，在540nm 波长处有最大吸收，在一定的浓度范围内，还原糖的量与光吸收值呈线性关系，利用比色法可测定样品中的含糖量。
HOOCNO OH NO 22+ 还原糖 NO OH NH 22(DNS)（3－氨基－5－硝基水杨酸）?HOOC黄色 桔红色试剂和器材：一、试剂1.3,5－二硝基水杨酸（DNS ）试剂：称取6.5g DNS 溶于少量热蒸馏水中，溶解后移入1000ml 容量瓶中，加入2mol/L 氢氧化钠溶液325ml ，再加入45g 丙三醇，摇匀，冷却后定容至1000ml 。
2.葡萄糖标准溶液：准确称取干燥恒重的葡萄糖200mg ，加少量蒸馏水溶解后，以蒸馏水定容至100ml ，即含葡萄糖为2.0mg/ml 。
3.6mol/L HCl ：取125ml 浓HCl （35%～38%）用蒸馏水稀释到250ml 。
4.碘－碘化钾溶液：称取5g 碘，10g 碘化钾溶于100ml 蒸馏水中。
5.6mol/L NaOH ：称取60g NaOH 溶于250ml 蒸馏水中。
6.0.1% 酚酞指示剂(用95%乙醇配制)。
二、材料小麦淀粉或玉米淀粉。
三、器材721型分光光度计，天平，水浴锅，电炉，试管若干等。
操作方法：一、葡萄糖标准曲线制作 取6支15mm×150mm 试管，按下表加入2.0mg/ml 葡萄糖标准液和蒸馏水。
管号 葡萄糖标准液 蒸馏水 葡萄糖含量 OD 540/ml/ml /mg 0 10.2 10.8 0 0.4 20.40.60.83 0.6 0.4 1.24 0.8 0.2 1.65 1 0 2在上述试管中分别加入DNS试剂2.0ml，于沸水浴中加热2min进行显色，取出后用流动水迅速冷却，各加入蒸馏水9.0ml，摇匀，在540nm波长处测定光吸收值。
总糖含量的测定
总糖含量的测定
总糖含量的测定是指测定样品中所有可溶性糖的含量，用于分析食品、饮料、蔬菜等样品中糖的含量。
通常使用能够分解样品中所有糖类物质的酸性氧化液来测定样品中总糖含量。
具体步骤如下：
1.将样品研磨成细粉状，并加入足量的热水，搅拌均匀；
2.将混合液置入电子天平中，记录样品质量，将质量称量的样品移入微量烧瓶中；
3.向样品中加入足量的酸性氧化液，搅拌均匀，使糖类物质完全被氧化，然后加入足量的还原剂，搅拌均匀；
4.将混合液加热，完全分解出所有糖类物质，再将混合液放入离心机中离心分离，将上清液收集；
5.将收集的上清液加入足量的高纯度固体糖类物质，加热溶解，然后将混合液加入蒸馏水中，使其完全溶解；
6.将溶液中的糖类物质浓度测定，并计算样品中总糖含量。
总糖的测定
总糖的测定直接滴定法1、主要试剂;(1)、6mol/L盐酸溶液。
(2)、0.1%甲基红乙醇溶液称取0.1g甲基红，用60%乙醇溶解并定容到100ml.(3)、20%氢氧化钠溶液(4)、0.1%转化糖标准溶液准确称取105℃烘干至恒重纯蔗糖1.9000g，加水溶解并移入1000ml容量瓶中，定容，混匀。
取出50ml于100ml容量瓶中，加入6ml/L盐酸5ml溶液,在68—70℃水浴中加热15min,取出迅速冷却至室温，加2滴0.1%甲基红乙醇溶液，用20%氢氧化钠溶液中和至中性，加水至刻度，混匀。
此溶液每毫升含转化糖1mg.2、实验仪器100ml容量瓶、干燥滤纸、150ml锥形瓶、玻璃珠、加热器2、操作方法：（1）取一定量样品，称取2.5—5.0g固体样品，用50ml水分次溶解样品并吸入250ml容量瓶中，摇匀后慢慢注入5ml 硫酸铜和氢氧化钠溶液（不确定，书本66页），加水至刻度，摇匀，静置30min,用干燥滤纸过滤，弃初滤液，滤液备用。
吸取处理后的样液50ml，放置100ml容量瓶中，加入5ml6ml/L盐酸溶液，68—70℃水浴中加热15min,取出迅速冷却至室温，加入2滴0.1%甲基红乙醇溶液，用20%氢氧化钠溶液中和至中性，加水至刻度，混匀，（2）样品溶液预测：吸取碱性酒石酸铜甲液和乙液各5ml,置于150ml锥形瓶中，加水10ml,加玻璃珠3粒，加热使其在2min内沸腾，准确沸腾30s，趁沸以先快后慢的速度从滴定管中滴加样品试液，并保持沸腾状态。
待溶液颜色变浅时，以每2s 1滴的速度继续滴加样品溶液，直至溶液的蓝色刚好褪去为终点，记录消耗样品溶液的体积。
（3）样品溶液测定吸取碱性酒石酸铜甲液和乙液各5ml,置于150ml锥形瓶中，加水10ml,加玻璃珠3粒，从滴定管加入比预测时样品溶液消耗总体积少1ml的样品溶液，加热使其在2min内沸腾，准确沸腾30s，趁沸以每2s 1滴的速度继续滴加样品溶液，直至溶液的蓝色刚好褪去为终点，记录消耗样品溶液的总体积，平行操作三次，取其平均值。
食品中总糖的测定
食品中总糖的测定是衡量食品中糖分含量的一种方法，可以通过化学分析的方法来进行测定。
下面是总糖的测定步骤：
样品制备
将待测样品称取适量，加入适量的蒸馏水或磷酸盐缓冲液中，搅拌均匀后过滤，得到过滤液备用。
硫酸酚试剂法
将10 mL过滤液加入试管中，加入1 mL硫酸酚试剂，搅拌均匀后加入10 mL硫酸试剂，再次搅拌均匀。
将试管放入沸水中加热5分钟，冷却至室温后，加入50 mL蒸馏水，用0.1mol/L 氢氧化钠溶液滴定至橙黄色，记录用量V1。
硝酸汞法
将10 mL过滤液加入试管中，加入3 mL硝酸汞试剂，加热至沸腾，持续加热5分钟，冷却后加入50 mL蒸馏水，用0.1mol/L氢氧化钠溶液滴定至橙黄色，记录用量V2。
计算
总糖的含量C（%）=（V1-V2）×0.1×1000/样品质量（g）。
总糖含量的计算中，V1为硫酸酚试剂法所用氢氧化钠溶液的用量，V2为硝酸汞试剂法所用氢氧化钠溶液的用量，0.1为氢氧化钠溶液的摩尔浓度，1000为单位转换系数。
总糖的测定可以通过硫酸酚试剂法和硝酸汞法两种方法进行，其中硝酸汞法的测定结果更加准确。
总糖的测定对于衡量食品中糖分含量，评估食品的营养价值和安全性具有重要意义。
(推荐)总糖的测定
（推荐）总糖的测定一、糕点、糖果中还原糖的测定1、直接滴定法1）原理：样品经除去蛋白质后，在加热条件下，直接滴定经标定的碱性酒石酸铜溶液，还原糖将二价铜还原为氧化亚铜。
以亚甲基蓝为指示剂，在终点稍过量的还原糖将蓝色的氧化型亚甲基蓝还原为无色的还原型亚甲基蓝，根据试样所消耗的体积计算还原糖的含量。
直接滴定法已经过多次改进，只要严格遵守实验条件，分析结果的准确度和重现性是能够满足定量分析的要求。
2）试剂①费林氏剂甲液：称取15g硫酸铜（CuSO4·5H2O）及0.05g四甲基蓝，溶于水中并稀释至1000ml。
②费林氏剂乙液：称取50g酒石酸钾钠及75gNaOH，溶于水中，再加入4g亚铁氰化钾，完全溶解后，用水稀释至1000ml，贮存于橡胶塞玻璃瓶内。
③乙酸锌溶液：称取乙酸锌结晶21.9g，加3ml冰醋酸，加水溶解至100ml。
④106g/l亚铁氰化钾溶液。
⑤葡萄糖标准溶液：准确称取1.0000g经过96±2℃干燥2h的纯葡萄糖，加水溶解后加入5mlHCl,并以水稀释至1000ml。
此溶液每1ml相当于1.0mg葡萄糖。
3）操作方法①样品处理：准确称取样品（粉碎后的）2.5~5.0g置于250ml 容量瓶中，加水50ml，摇匀后慢慢加入5ml乙酸锌溶液，混匀后再慢慢加入5ml亚铁氰化钾溶液，振摇，加水定容并摇匀后静置30min，用干滤纸过滤，弃去初始滤液，过滤液备用。
②标定碱性酒石酸铜溶液：吸取5.00ml碱性酒石酸铜甲液及5.00ml碱性酒石酸铜乙液，置于250ml锥形瓶中，加水10ml，加入玻璃珠3粒，从滴定管加约9ml标准葡萄糖液，使其在2min内加热至沸。
趁热以0.5滴/s的速度继续滴加糖液，直至溶液颜色刚好褪去为终点，记录消耗葡萄糖液的体积。
平行操作3次，得m平均消耗葡萄糖液的体积。
计算每10ml(甲、乙各5ml)碱性酒石酸铜溶液相当于葡萄糖的质量（mg），即m＝v×c式中m——10ml碱性酒石酸铜溶液相当于葡萄糖的质量（mg）v——标定时消耗葡萄糖标准溶液的总体积c——葡萄糖标准溶液的浓度（mg/ml）③样品溶液的预测定：吸取费林氏甲、乙液各5ml，置于150ml 三角瓶中，加水10ml、玻璃珠2粒，控制在2min内加热至沸，趁沸以先快后慢的速度，从滴定管中加样液，趁沸以0.5滴/s的速度继续滴定至蓝色刚好褪去为终点，记录消耗样液的体积。
食品检验中总糖量测定
总糖量测定1.检验项目糕点中总糖量的测定2.检验目的：碳水化合物，亦称糖类或糖，是由碳、氢、氧三种元素组成一亦大类有机化合物，是人体必需的重要营养之一，食品中的糖除具有还原性的单糖、双糖外，所采用的糖一般都是优质蔗糖，属非还原糖，在生产过程中蔗糖被水解后部分生成还原糖。
因此，在食品的生产，常规分析及成品质量中，通常都有“总糖”这一指标，即测定食品中还原糖分与蔗糖分的总量。
还原糖与蔗糖分总量俗称总糖量，蔗糖经水解生成等量葡萄糖的混合物，俗称转化糖。
3.检验原理样品经除去蛋白质后，其中蔗糖经酸水解转化为还原糖。
在加热条件下，直接滴定标定过的碱性酒石酸铜液，还原糖将二甲酮还原为氧化亚铜。
以次甲基蓝为指示剂，当达到终点时，稍过量的还原糖立即把蓝色的氧化型次甲基蓝还原为无色的还原型次甲基蓝，根据样品液的消耗的体积，计算还原糖含量。
4.检验依据乳及乳制品P252-255 GB/5009.8-20035.检验条件室温下进行。
1.碱性酒石酸铜甲液：称取15g硫酸铜（CuSO4.5H2O）及0.05g次甲基蓝，溶于水并定容至1000ml。
2.碱性酒石酸铜乙液：称取50g酒石酸钾钠及75gNaOH，溶于水，再加入4g亚铁氰化钾，完全溶解后，用水稀释至1000ml，储存于橡胶塞玻璃瓶中。
3.乙酸锌溶液:称取21.9g乙酸锌，加3ml冰乙酸，加入溶解并稀释至100ml。
4.亚铁氰化钾（10.6%）：称取10.6g亚铁氰化钾，加水溶解并稀释至100ml。
5.盐酸（1:1）。
6.甲基红乙醇溶液（1g/L）。
7.NaOH（200g/L）。
8.葡萄糖标准溶液：准确称取1.0000g。
9.盐酸。
10.经98℃-100℃干燥至恒重的葡萄糖，加水溶解后，加入5ml盐酸，并以水并稀释至1000ml，此溶液1ml相当于1mg葡萄糖。
11.仪器：锥型瓶150ml 3只容量瓶250ml 1只容量瓶100ml 1只胖度吸管5ml 2支刻度吸管5ml 4支电炉500w 1台水浴锅1台6.操作步骤1.样品的处理：称取2.5-5.0g以粉粹的样品，置于250ml容量瓶中，加50ml水，摇匀后慢慢加入5ml 乙酸锌溶液及5ml亚铁氰化钾（10.6%），加水至刻度，混匀，静止30min,用干燥滤纸过滤，滤液备用。
实验一总糖的测定
实验一总糖的测定—斐林试剂比色法摘要斐林试剂比色法是热滴定的一个改进前言：斐林试剂是由甲、乙二种溶液混合而成，甲溶液含有硫酸铜，乙液含有氢氧化钠和酒石酸钾钠。
硫酸铜与氢氧化钠作用生成天蓝色的氢氧化铜沉淀（CuSO4 + 2NaOH→Cu(OH)2+Na2SO4）而酒石钾钠在碱性溶液中使氢氧化铜溶解生成复杂的化合物（一种络合物）。
其反应如下：CuSO4 + 2NaOH→Na2SO4 + Cu(OH)2 （天蓝色）醛基式酮基，在碱性条件下煮沸后，Cu2+→Cu2O使斐林试剂褪色从复杂的化合物具有与普通铜盐略有不同的天蓝色，但仍有铜盐所有的普通反应单糖和多糖的水解物都含有醛基或是酮基，在碱性条件下煮沸能使斐林试剂中的二价铜离子还原为一价的氧化亚铜，而使蓝色的斐林试剂脱色，脱色的程度与溶液中含糖量成正比。
此法的优点是操作简便，斐林试剂可不作定量配制测定误差在±0.02%，但须经常作标准曲线校正。
本法的测定范围在0.1～0.5毫克/毫升还原糖，如果含糖量超过本范围，误差显著增大。
试剂和器材1、斐林试剂甲40克硫酸铜（CuSO2．5H2O）溶解于蒸馏水并定容至1升2、斐林试剂乙：200克酒石酸钾钠（C4H4O6KNa.4H2O）与150克氢氧化钠溶于蒸馏水并定容至1升。
注：在使用前取20毫升甲液，加入等体积的乙液混匀。
3、0.1%葡萄糖标准液：取105℃干燥2小时的恒重葡萄糖0.1克，加蒸馏水溶解并定容至100毫升。
4、可见分光光度计方法与步骤：标准曲线制作：在各试管中分别加入0.1%葡萄糖标准液0，0.5,1,1.5,2.0,2.5,3.0毫升，每管各含葡萄糖各为0,0.5,1.0,1.5,2.0,2.5,3.0毫克，分别在各管中各加入2毫升斐林试剂，其他按下表操作，混和后，在试管口用玻璃球盖好，放入沸水浴加热15分钟，取出后在流水中冷却，再经1500转/分离心5分钟，取上清液在590毫微米波长处进行比色测定，蒸馏水作比色时的对照，读取不同浓度的糖的各管的光密度值和空管的光密度值。
糕点中总糖的测定
清洗器材及整理桌面
报告单
糕点中总糖的测定
第三组
实验原理及试剂
1. 方法原理 试样用沉淀剂除去蛋白质后，加酸将可溶性糖类转化成 还原糖，在加热条件下，以亚甲基兰作指示剂，滴定标定过的碱性 酒石酸铜溶液，根据消耗试样转化液的体积，计算总糖的含量。
2. 试剂 盐酸（1+1）、氢氧化钠（200g/L）、甲基红指示剂（ 0.1%） 、费林溶液甲、乙液）、乙酸锌溶液、亚铁氰化钾溶液、葡 萄糖标准溶液（1.0 mg/mL）
吸取50.00mL滤液于100.0mL容量瓶中，加入5mL盐酸（1+1）于68 ～70℃水浴锅中水解15 min，立即取出迅速冷却至室温。加两滴甲 基红指示剂，用200g/L氢氧化钠溶液中和后定容，混匀。
四、实验步骤
2.操作方法
准确称取样品1.500～2.500g,放入 100mL烧杯中，用50mL蒸馏水浸泡 30min（浸泡时多次搅拌）。转入离 心管，用20mL蒸馏水冲洗烧杯，洗液 一并转入离心试管中。置离心机上以 3000r/min，上层清夜经快速滤纸入 250mL三角烧瓶，用30mL蒸馏水分 2～3次冲洗原烧杯，再转入离心管搅 拌清洗再以3000r/min离心10min上清 液经滤纸滤入250mL三角烧瓶。浸泡 后的试样溶液也可直接用快速滤纸过 滤。在滤液中加6mol/L盐酸10mL，置 70℃水浴中水解10min。取出迅速冷 却后加酚酞指示剂1滴，用20%NaOH 溶液中和至微红色，转入250mL容量 瓶中，加水至刻度摇匀备用。
用标定菲林溶液甲、乙液的方法， 测定样品中总糖。
滴定
（பைடு நூலகம்）预滴定
准确吸取菲林溶液甲液、 乙液各5mL与150mL锥形 瓶，加入20mL蒸馏水， 置电路上快速加热至沸 腾，在保持微沸状态下， 用配好的C6H12O6溶液滴 定至溶液变红色时，加 入1滴次甲基蓝指示剂， 继续滴定至蓝色消失呈 鲜红色即为终点。
总糖的测定
出现粉红色(或浅黄色)终点，记录消耗样液的总
体积。同法平行操作2~3份，得出平均消耗体积。
3. 计算
X m V M 500 100
式中ห้องสมุดไป่ตู้
X — 样品中还原糖的含量（以葡萄糖计），%； m — 10mL斐林试剂相当于还原糖（以葡萄糖计）
的质量，g；
V — 测定时平均消耗样品溶液的体积，mL；
M — 样品质量，g。
2.3.2 样品溶液正式测定：吸取5.0mL斐林氏甲
液 及 5.0mL 乙 液 ( 先 加 乙 液 再 加 甲 液 ) ， 置 于
150mL锥形瓶中，加蒸馏水25mL，从滴定管中
滴加比预测体积少1~2mL的样品溶液，加入玻
璃珠3~5粒，控制在2min内加热至沸，然后趁沸
继续以每2秒1滴的速度滴定，直至溶液蓝色褪去，
迅速冷却至室温。用20%NaOH溶液中和（加入酚酞指示剂
1~2滴），样液至微红色为止，加蒸馏水至刻度，摇匀，注入 滴定管中。
2.3
样液测定
2.3.1 样品溶液预测：吸取5.0mL斐林氏甲液及
5.0mL乙液（先加乙液再加甲液），置于三角瓶中， 加蒸馏水25mL，加入玻璃珠3~5粒，控制在2min 内加热至沸，趁沸以先快后慢的速度，从滴定管 中滴加样品溶液，并保持溶液沸腾状态，待溶液 颜色变浅时，以每秒1滴的速度滴定，直至溶液蓝 色褪去，出现粉红色(或浅黄色)为终点。
2. 操作方法
2.1 样品处理：将样品在组织捣碎机中捣成匀浆，称取约10--
-20g样品，溶解后置于250mL容量瓶中，加蒸馏水至刻度，
混匀，静置,过滤60-70mL。 2.2 样品转化：吸取处理好的样液50mL于100mL容量瓶中， 加盐酸5mL，摇匀。置水浴中加热，使溶液在2~2.5min内升 温至70℃，保持7.5~8min，使全部加热时间为10min。取出
糕点中总糖的检测
糕点中总糖的检测（GB/T23780-2009）1、试样液的制备：准确称取处理好的试样（粉碎）1.5-2.5g置于烧杯中，加50ml水浸泡捣碎，摇匀后，先加5ml乙酸铅溶液混匀，再加5ml草酸钾-磷酸氢二钠溶液，混合后，全部过滤到250ml容量瓶。
2、转化在250ml的容量瓶中，加6mol/L 10ml盐酸，置于68-700C水浴中加热10min。
取出，用流水冷却至室温，加酚酞指示剂1滴，再用20%氢氧化钠中和至溶液呈微红色，加水至刻度，摇匀，注入滴定管中备用。
3、滴定（1）预测：准确吸取费林氏甲、乙液各2.50ml于150ml三角瓶中，加水20ml ，玻璃珠数粒，置于电炉上，控制2mim内加热至沸，保持沸腾状态下，从滴定管中滴入转化好的试料液至溶液变红色时，加入次甲基蓝指示剂1滴，继续滴定至蓝色蓝色消失显鲜红色为终点。
记下滴定所耗试料液的体积。
（2）正式测定：用移液管吸取费林氏甲、乙液各2.50ml于150ml三角瓶中，加水20ml，玻璃珠数粒，先加入比预备试验少0.5-1ml试料液，记下所耗试料液的体积。
（平行操作两份）从滴定管滴加比预测体积少1m l试样转化液至锥形瓶，置于电炉上煮沸2mim。
加入次甲基蓝指示剂1滴，继续用试样转化液滴定至终点，记录试样转化液消耗体积，同法平行操作两份，取其平均值。
4、结果计算A总糖（以葡萄糖计%）= ———————×100m×V / 250式中：A-----5ml费林溶液（甲液、乙液各2.5ml）相当于葡萄糖的质量（g）；V-----滴定时消耗试样转化液的体积（mL）；m------试样质量（g）；5、精密度平行测定两个结果间的差值不得大于0.4%。
冷饮中总糖的检测（GB/T10009-2008）1、沉淀：称取处理好的试样（溶化后）2.5-5g（精确至0.001g），置于250ml容量瓶中，加入150ml水稀释，混匀。
实验二 总糖和还原糖的测定(DNS)
实验二总糖和还原糖的测定──3,5－二硝基水杨酸比色法一、目的要求：掌握还原糖和总糖的测定原理，学习用比色法测定还原糖的方法。
二、实验原理:在NaOH和丙三醇存在下，3,5－二硝基水杨酸（DNS）与还原糖共热后被还原生成氨基化合物。
在过量的NaOH碱性溶液中此化合物呈桔红色，在540nm波长处有最大吸收，在一定的浓度范围内，还原糖的量与光吸收值呈线性关系，利用比色法可测定样品中的含糖量。
三、试剂和器材1、试剂3,5－二硝基水杨酸（DNS）试剂：称取5.0g DNS溶于200ml 2mol/L NaOH溶液中（不适宜用高温促溶），接着加入到酒石酸甲钠的热溶液中（192g就是酸甲钠溶于500ml水中），再加入5g结晶酚和5g亚硫酸钠，摇匀溶解后，冷却定容至1000ml，暗处保存备用。
葡萄糖标准溶液：准确称取在105℃的温度下烘干至恒重的葡萄糖0.5g，加少量蒸馏水溶解后，以蒸馏水定容至1000ml。
6mol/L HCl：取250ml浓HCl（35%～38%）用蒸馏水稀释到500ml。
碘－碘化钾溶液：称取5g碘，10g碘化钾溶于100ml蒸馏水中。
6N NaOH：称取120g NaOH溶于500ml蒸馏水中。
0.1% 酚酞指示剂：0.1g酚酞溶于100ml无水乙醇中。
1％淀粉2、材料淀粉。
3、器材WFJ UV－2000型分光光度计，水浴锅，电炉，10ml比色管。
四、操作方法1、葡萄糖标准曲线制作取6支10ml 比色管并编号，按下表顺序加入各种试剂。
（表1）混匀后置沸水浴上加热5min 进行显色，取出后用流动水迅速冷却，各加入蒸馏水4.0ml ，摇匀，在540nm 波长下，用0号管调零，分别读取各管的吸光度值A 540。
以葡萄糖含量（mg ）为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
2、淀粉水解及还原糖的提取取1％淀粉25ml ，放在100ml 烧杯中，加入6mol/L HCl 10ml ，然后加入蒸馏水15ml ，混匀，于沸水浴中保温30min ，取出1～2滴置于白瓷板上，加1滴I 2-KI 溶液检查水解是否完全。
滴定法测量总糖
总糖的测定（直接滴定法）滴定, 蒸馏水, 葡萄糖, 酒石酸, 试剂1 原理样品中原有的还原糖和水解后转化的还原糖，在加热条件下，直接滴定标定过的碱性酒石酸铜溶液，根据消耗样液量计算总糖。
2 仪器实验室一般常用仪器。
3 试剂3．1 浓盐酸（比重1.18）。
3．2 30%氢氧化钠。
3．3 0.1%甲基红指示剂。
3．4 葡萄糖标准溶液：精确称取1.000g经过105℃烘干至恒重的葡萄糖，加水溶解后加入5mL盐酸，并用水稀释至1000mL的容量瓶中，摇匀，备用。
3．5 斐林氏试剂甲液：称取15g硫酸铜（CuSO4·5H2O）及0.05g次甲基兰，用蒸馏水溶解。
移入1000mL 棕色容量瓶中，用蒸馏水定容。
乙液：称取50g酒石酸钾钠，75g氢氧化钠及4g亚铁氰化钾，用蒸馏水溶解，移入1000mL 容量瓶中，用蒸馏水定容。
斐林氏溶液的标定：吸取斐林氏甲液和乙液各5mL于150mL三角瓶中加水10ml，从滴定管中滴加约9.5mL葡萄糖标准溶液（3.5.3.4）控制在2min内加热至沸，趁沸以1滴/2s的速度滴加葡萄糖标准溶液（3.5.3.4）。
滴定至蓝色退尽为终点。
记录消耗葡萄糖标准溶液的总体积。
同时平行操作三份，取其平均值计算第10mL（甲乙液各5mL）碱性酒石酸铜溶液相当于葡萄糖的质量（mg）。
A=W*V/1000式中：A——10ml斐林氏甲乙液，相当于葡萄糖克数，g；W——称取葡萄糖克数，g；V——滴定时所消耗葡萄糖的毫升数，mL；1000——葡萄糖的稀释倍数。
4 测定步骤4．1 称取适量匀样（根据含糖量而定，要求滴定消耗样品液体积约在10mL左右。
）于250mL 容量瓶中，加水100mL，加入盐酸5mL摇匀，将容量瓶置于温度为68~70℃恒温水中转化，转化10min，取出置流动水中迅速冷却至室温，加1%甲基红指示剂2滴，用30%氢氧化钠中和至中性，用水稀释至刻度，摇匀，注入滴定管中备用。
4．2 预滴定：吸取斐林氏甲、乙液各5mL，放入150mL三角瓶中，再加入10mL水，在电炉上加热至沸，从滴定管中滴入转化好的糖液（3.5.4.1）至蓝色退尽即为终点。
饮料中总糖的测定
饮料中总糖的测定总糖的测定一、实验原理样品经处置除去蛋白质等杂质后，重新加入盐酸，在冷却条件下让蔗糖水解为还原性单糖以轻易滴定法测量水解后样品中的还原成糖总量。
二、试剂6mol/lhcl、20%naoh、甲基白指示剂（称取0.1g甲基白，用60%乙醇溶液熔化定容至100ml。
）、碱性酒石酸铜甲液（称取15g硫酸铜及0.05g次甲基蓝，溶水中并吸收至1000ml）、碱性酒石酸铜乙液（称取50g酒石酸钾钠及75gnaoh，溶水中再提4g亚铁氰化钾，全然熔化后，用水吸收至1000ml，储存与橡皮塞玻璃瓶中。
）、0.1%葡萄糖标液（高精度称取1.000g经过99℃±1℃潮湿至恒重的分析氢铵葡萄糖，搅拌熔化后迁入1000ml容量瓶中，重新加入5mlhcl，用水吸收至1000ml。
）三、实验步骤1、标定碱性酒石酸溶液⒈预测精确汲取碱性酒石酸铜甲液和乙液各5ml与锥形瓶中，搅拌10ml和玻璃珠两粒，从滴定管碱液约9ml葡萄糖标液，冷却并使其在两分钟内融化，保持融化两分钟，趁着融化以以先快后快的速度碱液样品溶液，测量时始终保持融化，等待溶液蓝色变淡，以0.5几滴/min的速度稳步碱液葡萄糖标液，直到溶液蓝色消退为终点。
⒉高精度电解准去吸取碱性酒石酸铜甲液和乙液各5ml与锥形瓶中，加水10ml和玻璃珠两粒，从滴定管滴加葡萄糖标液，其用量比预测定少约0.5~1ml，加热使其在两分钟内沸腾，维持沸腾两分钟，趁沸腾逐滴加入葡萄糖标液，直至溶液蓝色退去为终点。
2、测定果珍中总糖⒈样品预处理汲取饮料5ml，后转至250ml容量瓶，向其中重新加入5ml6mol/lhcl，放进70℃水浴中水解15min，抽出用20%的naoh调节ph至中性，用甲基白搞指示剂（颜色由白至黄），定容水泵，测量时根据浓度搞适度吸收。
⒉测量①预测准去吸取碱性酒石酸铜甲液和乙液各5ml与锥形瓶中，加水10ml和玻璃珠两粒，从滴定管滴加约5ml上述转化液，加热使其在两分钟内沸腾，，维持沸腾两分钟，趁沸腾以以先快后慢的速度滴加样品溶液，测定时始终保持沸腾，待溶液蓝色变浅，以0.5滴/min的速度继续滴加转化液，直至溶液蓝色退去为终点。
总糖含量的测定
实验二总糖含量的测定一、目的：1. 掌握蒽酮法测定可溶性糖含量的原理和方法。
2. 学习植物可溶性糖的一种提取方法。
二、原理：糖类在较高温度下可被浓硫酸作用而脱水生成糠醛或羟甲基糖醛后，与蒽酮(C14H0O)脱水缩合，形成糠醛的衍生物，呈蓝绿色。
该物质在620 nm处有最大吸收，在150 pg/ml范围内，其颜色的深浅与可溶性糖含量成正比。
这一方法有很高的灵敏度，糖含量在30⑥左右就能进行测定，所以可做为微量测糖之用。
一般样品少的情况下，采用这一方法比较合适。
三、仪器、试剂和材料1. 仪器：电热恒温水浴锅，分光光度计，电子天平，容量瓶，刻度吸管等2. 试剂：(1) 葡萄糖标准液：100 Q/ml(2) 浓硫酸(3) 蒽酮试剂：0.2 g蒽酮溶于100 ml浓H2SQ中。
当日配制使用。
3. 材料：淀粉四、操作步骤1. 葡萄糖标准曲线的制作取7支试管，按下表数据配制一系列不同浓度的葡萄糖溶液：在每支试管中立即加入蒽酮试剂 4.0m1,迅速浸于冰水浴中冷却，各管加完后一起浸于沸水浴中，管口加盖，以防蒸发。
自水浴重新煮沸起，准确煮沸10 min 取出，用冰浴冷却至室温，在620 nm波长下以第一管为空白，迅速测其余各管吸光值。
以标准葡萄糖含量（pg）为横坐标，以吸光值为纵坐标，作出标准曲线。
2. 植物样品中总糖的提取：精确称取0.5g，置于50 ml三角瓶中，加水15 ml,盐酸10ml,沸水浴20min, 定容至100ml，得提取液。
取10ml滤液定容至100ml3. 测定吸取1 ml已稀释的提取液于试管中，加入 4.0 ml蒽酮试剂，平行三份；空白管以等量蒸馏水取代提取液。
以下操作同标准曲线制作。
根据A?。
平均值在标准曲线上查出葡萄糖的含量（p g）。
五、结果处理C X V 总X D样品含糖量（%）= --------------------------------- 0W X V 测X 106其中：C——在标准曲线上查出的糖含量（⑷），V总——提取液总体积（ml ），V测——测定时取用体积（ml ），D -- 稀释倍数，W样品重量（g ），106——样品重量单位由g 换算成p g 的倍数六、注意事项：该法的特点是几乎可测定所有的碳水化合物，不但可测定戊糖与已糖，且可测所有寡糖类和多糖类，包括淀粉、纤维素等（因为反应液中的浓硫酸可把多糖水解成单糖而发生反应），所以用蒽酮法测出的碳水化合物含量，实际上是溶液中全部可溶性碳水化合物总量。
实验五.总糖的测定doc
实验五、总糖和还原糖的测定费林试剂比色法一、实验意义掌握还原糖和总糖的测定原理，学习用直接滴定法测定还原糖的方法。
二、实验原理将一定量的碱性酒石酸铜甲液和乙液等体积混合时，硫酸铜与氢氧化钠反应，生成氢氧化铜沉淀：2NaOH + CuSO4 = Cu(OH)2↓+ Na2SO4所生成的氢氧化铜沉淀与酒石酸钠反应，生成可溶性的酒石酸钾钠铜：在加热条件下，用样液滴定，样液中的还原糖与酒石酸钾钠铜反应，酒石酸钾钠铜被还原糖还原，产生红色氧化亚铜沉淀，还原糖则被氧化和降解，其反应如下：反应生成的氧化亚铜沉淀与费林试剂中的亚铁氰化钾（黄血盐）反应生成可溶性复盐，便于观察滴定终点。
Cu2O + K4Fe(CN)6 + H2O →K2Cu2Fe(CN)6 + 2KOH（氧化亚铜）（淡黄色）滴定时以亚甲基蓝为氧化－还原指示剂。
因为亚甲基蓝氧化能力比二价铜弱，待二价铜离子全部被还原后，稍过量的还原糖可使蓝色的氧化型亚甲基蓝还原为无色的还原型的亚甲基蓝，即达滴定终点。
根据样液量可计算出还原糖含量。
三、试剂和器材1、试剂①碱性酒石酸铜甲液：称取15g硫酸铜（CuSO4·5H2O）及0.05g亚甲基蓝，溶于蒸馏水中并稀释到1000ml。
②碱性酒石酸铜乙液：称取50g酒石酸钾钠及75g NaOH，溶于蒸馏水中，再加入4g亚铁氰化钾［K4Fe（CN）6］，完全溶解后，用蒸馏水稀释到1000ml，贮存于具橡皮塞玻璃瓶中。
③0.1％葡萄糖标准溶液：准确称取1.000g经98～100℃干燥至恒重的无水葡萄糖，加蒸馏水溶解后移入1000ml容量瓶中，加入5ml浓HCl（防止微生物生长），用蒸馏水稀释到1000ml。
④6mol/LHCl：取250ml浓HCl（35%～38%）用蒸馏水稀释到500ml。
⑤碘－碘化钾溶液：称取5g碘，10g碘化钾溶于100ml蒸馏水中。
⑥6N NaOH：称取120gNaOH溶于500ml蒸馏水中。
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总糖检测作业指导书
1.目的
食品中总糖含量的检测
2.范围
适用于本公司原辅料、中间品、成品中总糖的检测
3.职责
品质部实验室负责总糖的检测
4.内容
4.1实验试剂
纯水
盐酸：37%左右
氢氧化钠：AR
甘露聚糖对照品：Sigma产品，货号M7504
6moL/L盐酸溶液
甲基红指示液：0.2%乙醇溶液。
费林甲液：称取15g五水硫酸铜，及0.05g次甲基蓝，溶于水中并稀释至1L
费林乙液：称取50g酒石酸钾钠与75g氢氧化钠，溶于水中，再加入4g亚铁氰化钾，完全溶解后，用水稀释至500mL，储存于橡胶塞玻璃瓶内。
葡萄糖标准溶液：精密称取1.000g经过80℃干燥至恒重的葡萄糖（纯度在99%以上），加水溶解后加入5mL盐酸，并以水稀释至1L。
此溶液相当于1mg/mL葡萄糖。
（注：加盐酸的目的是防腐）
4.2实验仪器
水浴锅、漩涡混合器、电炉、压力蒸汽灭菌锅、分光光度计。
4.3实验步骤
准确称取0.4g（精确至0.0001g）样品放入一个20mL的耐热玻璃制的带螺帽的小试管中，加入6.0mL盐酸（37%），小心的将小瓶盖紧后用漩涡混合器混合，得到均一的悬浮液。
将小瓶放入30℃水浴中处理45min，每15min用漩涡混合器振荡混合一次。
然后将悬浮物定量的转移到200mL大小的耐酸碱蓝盖瓶中，用约100mL-120mL的水，分几次洗涤小试管，洗涤液并入蓝盖瓶中。
将蓝盖瓶放入高压灭菌锅，121℃下处理60min。
取出后冷却，用氢氧化钠溶液将溶液PH调到6-7，然后定容至200mL。
使用0.45微米孔径的过滤头过滤备用。
同时准确称取甘露聚糖对照品0.2g，按样品处理方法进行同样的处理。
4.4样品及对照品的测定
4.4.1标定费林氏液溶液：吸取
5.0mL费林甲液及5.0mL乙液，置于150mL锥形瓶中
（注意：甲液与乙液混合可生成氧化亚铜沉淀，应将甲液加入乙液，使开始生
成的氧化亚铜沉淀重溶），加水10mL，加入玻璃珠2粒，从滴定管滴加约9mL
葡萄糖标准溶液，控制在2min内加热至沸腾，趁沸以每两秒1滴的速度继续
滴加葡萄糖标准溶液，直至溶液蓝色刚好褪去并出现淡黄色为终点，记录消耗
的葡萄糖标准溶液总体积，平行操作三份，取其平均值，计算每10mL（甲、
乙液各5mL）碱性酒石酸铜溶液相当于葡萄糖的质量（mg）。
（注意：还原的次
甲基蓝易被空气中的氧气氧化，恢复成原来的蓝色，所以滴定过程中必须保持溶液成沸腾状态，并且避免滴定时间过长）
4.4.2样品溶液预测：吸取
5.0mL 费林氏甲液及5.0mL 乙液，置于150mL 锥形瓶中，
加水10mL ，加入玻璃珠2粒，控制在2min 内加热至沸腾，趁沸以先快后慢的速度，从滴定管中滴加样品溶液，并保持溶液沸腾状态，待溶液颜色变浅时，以每秒1滴的速度滴定，直至溶液蓝色褪去，出现亮黄色为终点。
如果样品液颜色较深，滴定终点则为蓝色褪去出现明亮颜色（如亮红），记录消耗样液的总体积。
（注意：如果滴定液的颜色变浅后复又变深，说明滴定过量，需重新滴定。
）
4.4.3样品溶液测定：吸取
5.0mL 碱性酒石酸铜甲液及5.0mL 乙液，置于150mL 锥
形瓶中，加水10mL ，加入玻璃珠2粒，在2min 内加热至沸腾，快速从滴定管中滴加比预测体积少1mL 的样品溶液，然后趁沸继续以每秒1滴的速度滴定直至终点。
记录消耗样液的总体积，同法平行操作两至三份，得出平均消耗体积。
4.4.4甘露聚糖对照品水解液的测定：使用甘露聚糖水解液，重复上述4.4.2和4.4.3
的步骤。
4.1.4 结果计算：
X=
1000211⨯⨯⨯⨯V M V V C ×100×0.9×F F=9.01001000
321⨯⨯⨯⨯⨯⨯V M V V C P
X-------试样中总糖的含量，单位为克每百克（g/100g ）;
C -------葡萄糖标准溶液的浓度，mg/mL
V1------滴定10mL 费林氏溶液（甲、乙液各5mL ）消耗葡萄糖标准溶液的体积，
mL
V2------测定时平均消耗样品溶液的体积，mL
V3------测定时平均消耗甘露聚糖对照品水解溶液的体积，mL
V--------样品定容体积，mL
M1------样品质量，g
M2------甘露聚糖对照品的质量，g
0.9-------还原糖（以葡萄糖计）换算成多糖的换算系数；
F---------样品酸水解中甘露糖被破坏造成结果偏低的经验补偿系数；
P---------甘露聚糖对照品的纯度（依据试剂厂家提供的检测报告）
注：在同一个实验室内，一般没12个月检测F 值即可。
F 值在1.25左右，实验室定期对F 值进行修
正。