一级菌种制作技术.

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一级菌种制作

一级菌种的制作过程，主要包括下列几个程序：培养基的配制◊培养基的灭菌◊菌种的分离◊纯化（提纯）◊转管扩大◊培养◊一级菌种基本要求营养成分：必须营养全面且易于吸收。

容器：一级菌种培养基通常用玻璃试管作容器，按不同的配方加上琼脂凝固剂，制成琼脂斜面培养基，又叫斜面培养基，简称斜面。

（二）一级菌种培养基常用的材料在配制一级菌种培养基时，选用的原材料要具备以下二个条件：一是要能满足食用菌的营养需要；二是所用原材料来源广，成本低。

琼脂（又称洋菜）是一级菌种培养基常用的凝固剂一级菌种培养基常用的配方1．常用配方PDA培养基PSA培养基马铃薯（去皮）200g 马铃薯（去皮）200g葡萄糖20g 蔗糖20g琼脂18～23g 琼脂18～23g水1000ml 水1000ml一级菌种培养基常用的配方2．一级菌种培养基配方设计组成一级种培养基的材料大致可分为四种：①天然的有机物：应选择新鲜、无霉味、无虫蛀、无变质的优质材料，经热浸提后取滤液入料，为食用菌生长提供全面的营养。

②可溶性的有机营养制剂：主要是为食用菌生长提供优质的碳源和氮源，要求纯度高，保藏良好。

③矿物质：多在改良培养基或综合培养基中作为食用菌对矿物质需求的补充剂，同时对培养基物理性状的改良起重要作用。

其用量为0.01%～0.5%。

④琼脂：是固化培养基最常用的凝固剂，一般用量为2%。

一级菌种培养基的配制一级菌种培养基配方较多，原料较多，但制作方法大致相同。

平板培养基的制作平板培养基常用于单孢分离，测定菌丝生长速度，观察菌落的形态，拮抗实验，测定接种空间杂菌数。

制作方法：①将培养皿洗净、干燥，使各培养皿盖方向一致，用牛皮纸包好，或放入特制铁罐内，注明皿盖的方向。

高压灭菌或干燥灭菌后备用。

②取刚灭菌后尚未凝固的培养基置于无菌箱或超净工作台内，略打开灭菌过的培养皿盖（露一小缝），倒入培养基（厚度为0.5cm），封盖、冷凝，倒置备用。

一级菌种培养基的灭菌1．灭菌设备：手提式高压灭菌锅2．具体灭菌要求：1.1kg/cm2，121℃，保持20~30min。

各级菌种制作方法

各级菌种制作方法文稿归稿存档编号：［KKUY-KKIO69-OTM243-OLUI129-G00I-FDQS58-1,母种:又叫一级种,用直径18-22cm的试管制备.常用配方:去皮马铃薯200克,葡萄糖20克，琼脂10-20克，水1000毫升，先把土豆去皮称重，切成小块煮至熟而不烂，过滤加水至1000毫升，再把琼脂剪成小段，放入锅内，边搅边煮，待琼脂溶化后加入葡萄糖，由于琼脂质量各有不同加入份量要看情况而定，装管前取一小勺浮在凉水中冷却观察其硬度适合然后分袋试管，用棉花塞塞住试管口，放入小高压锅内灭菌,当压力表达到1・5个压力时，再灭菌30分钟取出试管放成斜面，放置2-3天后,无杂菌感染再放入接种箱内接种，接了种的试管放入培养室内进行培养，温度要求25-C 左右，相对湿度75%以下.2,原种:二级种一般釆用原种瓶和罐头瓶.培养料不要装的太满,装至瓶肩•原种的制备多采用谷粒种，锯沫种和棉子壳种.①谷料种:用玉米，小麦为原料，精选后煮沸，使种子变软即成,不要煮的太熟，开花.熟后离火泡5分钟（不开盖而能吸足水份）而后装瓶，用小型或中型高压锅灭菌，放至温度25°C左右接入母种，放培养室内培养.一般25-30天即成.②木屑种:木屑78%,麦鉄20%,石膏1%,糖1%,料:水二］:1. 3,拌匀装瓶，灭菌，接种培养.一般25-30天即成.③棉子皮:因棉子皮各种营养丰富，一般不需要加其它物质，只加1%的糖和石膏，用料1. 3-1. 5倍的水拌匀即可，而后装瓶，灭菌，接种，培养即可.推荐通用配方：木屑（或秸秆粉或棉籽壳）：80斤糠夫：6斤糖：0.5斤菇耳壮:1.6两石膏：1斤3,生产种:三级种可用木屑，玉米，棉籽皮，菌草，麦秸等为原料，根据所栽培的品种，采用不同的配方，用聚乙烯或聚丙烯，直径15-28cm塑料袋装料, 然后用常压灭菌锅灭菌，达到1009后,再维持100-C8-10小时.待袋稍凉后出锅，使栽培袋温度降至259左右再用原种接种,而后放到培养室的培养架上培养.推荐配方：■地栽木耳配方锯沫（或秸秆粉或棉籽壳）：80斤糠夫：5斤豆粉：2斤菇耳壮：1.4两白灰：1斤■平菇猴头香菇金针菇配方锯沫（或秸秆粉或棉籽壳）:80斤菇耳壮：1.4两糠夫：5斤白灰：1斤。

绣球菌菌种制备技术

绣球菌菌种制备技术绣球菌菌种制作跟其他食用菌一样，包括母种、原种、栽培种三级，下面我们先来看一下母种的制作。

1.母种制备母种是指经规范方法选育后而获得的、具有结性的菌丝体纯培养物及其继代培养物，以玻璃试管为培养容器和使用单位，通常又称为一级种或者试管种。

关于绣球菌原始母种的来源，在有条件的地方可以从子实体上自行提取，但是由于制作过程要求严谨难度较高，所以一般的生产单位都是从国家认可研究单位购买而来的，买回后直接进行母种的扩繁就可以。

首先先来看一下母种培养基的制作。

2.母种培养基制作制作母种培养基时所采用的配方为：复合糖蛋白30克，蛋白1克，大豆粉1克，KH2PO4(磷酸二氢钾)1克，琼脂粉20克，水1000毫升。

上面的料都准备好以后就可以制作了，将准备好的培养基配方依次倒入锅内，琼脂粉先不要放入，边加热边搅拌，等沸腾后再加入琼脂粉，并不断搅拌，直到琼脂粉完全融化，然后再将煮好的培养基倒入塑料杯内，这时需要注意的是，如果体积不足1000毫升还要加水。

3.试管分装整理好以后，要趁热将培养基倒入固定在铁架台上的漏斗内，用量筒量取10毫升的蒸馏水，倒入一支空试管内，做分装试管的对照。

将漏斗软管下的玻璃管插入试管口约3厘米深处，用右手捏紧橡胶软管的止水夹，使培养基缓缓流入空试管内，直到液面与蒸馏水的液面持平为止，然后，松开止水夹让培养基停止流入，并将试管下移离开软管。

接下来，依次重复，直到将培养基全部分装到试管内，分装试管时需要注意的是，动作要迅速连贯，以防止培养基在漏斗内凝固。

分装完成后，每支试管都要用硅胶塞住，接下来还要将试管进行扎捆。

4.试管包扎一般情况下，每7支试管作为一扎，先用橡皮筋将试管下端扎紧，再用牛皮纸将试管口处进行包裹，并用橡皮筋进行困扎。

下面就要进行灭菌的工作了。

5.培养基灭菌将包扎好的培养基试管垂直放入灭菌框内，再将菌框放入灭菌锅内，在120摄氏度的高温下进行灭菌30分钟。

待灭菌锅温度降至60摄氏度左右时，要及时取出试管，并将它们摆放成斜面。

食用菌菌种生产技术

进一步确定菌种，以避免菌种选目的育不当而造成不可估量的损失
形态特征、生理特性、栽培性内容状、经济效益等
六、一级菌种转管及培养
转管扩大繁殖，增加母种数目的量，以满足生产需要
转管过程
注意
取直径3-5mm的母种块移入新斜面中部
种块勿太大原老种块勿再接入
传代次数勿太多
母种培养
条件 25℃左右、干净、干燥、黑暗、通风
用于金属器具，火焰灼烧至红（在火焰2/3处烧）
用于玻璃器皿（培养皿、试管、三角瓶、吸管）等。洗净晾干包装放入干燥箱升温160～ 170℃，保持1～2h 关闭电源，自然降温60℃以下打开干燥箱取出灭菌物品，尽快使用。
湿热灭菌
常压灭菌
间歇灭菌
第一次蒸，100℃保持1 h 28-37℃下培养24 h 第二次蒸，100℃，保持1 h 培养24 h 第三次蒸，100℃，保持1 h。不常用的原因：灭菌一锅需要3～4天时间，且冬天需要保温。
持续灭菌
蒸，100℃保持12～14 h（方法：攻头，控中间，保尾）。普遍采用，特别用于大规模塑料袋制种和塑料栽培筒的灭菌。
注意：常压灭菌锅要设计合理，主要是灭菌彻底与否、燃料费用、周转速度、劳动强度、污染率的高低，直接影响经济效益。
高压灭菌
手提式高压灭菌锅：用于一级菌种培养基灭菌。卧式或立式高压灭菌锅：用于二、三级菌种培养基灭菌。
设备电热恒温培养箱
注意
经常检查，及时剔除污染管
控制菌龄（即将长满斜面）
外观检查：菌丝白、整齐、粗壮、有弹性、萌发快则质量好，否则质量差
七、一级菌种的保藏
（一）保藏目的及原理使菌种不死亡不生长不污染，
保藏目的不降低或不丧失其优良性，以尽量延长使用时间。

香菇的菌种制作

香菇的菌种制作人工栽培食用菌成功的关键是菌种，只有优良的菌种才能达到优质高产。

香菇菌种根据来源和生产目的分为母种(原始种称一级种)、原种(母种繁育而成称二级种)和栽培种(母种繁育用于生产栽培的种，称三级种)。

母种直接用于栽培造价高，自己生产母种需要设备和技术，成本太高。

自己繁育原种和栽培种，可以减少设备投入，降低成本，并能得到优质的菌源。

1 原种制作1.1 培养基的配制选新鲜、干燥、无霉变硬杂木细木屑55%、麦麸20%、棉籽壳20%、玉米面3%、石膏2%、料水比1∶1.1，均匀搅拌，装入15厘米×30厘米聚乙稀原种袋。

装袋松紧适宜，松装料少，紧装不透气，均影响质量和产量。

1.2 常压蒸汽灭菌条件具备用高压锅灭菌(在0.015兆帕压力下保持2小时)。

一般采用常压高温灭菌，少量可采用农村大锅蒸，要求升温快，升到100 ℃时保持12小时，闷锅8小时。

假如效果不好，可换间歇式灭菌法，将料袋在蒸锅内100 ℃条件下蒸3次，每次2小时，每次之间间歇24小时，虽耗时、麻烦，但效果好。

工厂化生产，采用常压蒸汽罩灭菌。

选耐高温、寿命长的塑料膜两层和一层花格布，组成一个密封的大空间，空间内摆放料袋，一次放4 500个，罩外用重物压严，以免漏气，在蒸汽罩底部放置排气管，管上用砖盖平，以免通气不匀造成死角，放气管与锅炉相连，温度上升至100 ℃时，蒸24小时，焖12小时。

然后将灭菌后的料袋运至灭过菌的房间，以备接种。

1.3 接种选通风良好的房间，将接种钩、铲、试管架放入接种箱，用必洁士或克霉灵烟雾剂对房间和接种箱消毒灭菌，经12小时烟雾自然散尽后，再开窗通风以备接种。

接种前用75%酒精浸泡的毛巾或棉球擦拭手，接种工具，点燃酒精灯使火焰周围为无菌区，并将接种铲、钩和母种的试管口经火焰烧灼，待凉后立即将试管中母种切成三块，将原种料袋口解开，放入一块菌种，立即系好袋口，动作要快，接种完毕后贴上标签，将接过种的袋移至消过毒的地方。

一般食用菌母种(一级种)制作

一般食用菌母种(一级种)制作母种制作的基本工艺流程为母种(由科研单位、大专院校、菌种保藏专门机构引进)一培养基制备一接种一培养检查一成品。

(一)常用培养基及配方培养基是食用菌菌种生长所需营养的基质。

培养基要具备四个条件，第一，要含有所培养的菌株生长所需要的各种营养物质，如糖类、有机氮、矿物质等。

第二，所含养分浓度和状态要利于食用菌的吸收和利用。

如食用菌母种培养基使用葡萄糖的浓度多在2％左右，过高和过低都不利于菌丝的生长；食用菌对氮素的吸收优先吸收有机氮，因此，原种和栽培种的培养基中应添加有机氮源，如麦麸、米糠等。

第三，要有适宜的酸碱度(pH)，食用菌多数喜偏酸性，pH5.0～6.5。

第四，经过严格灭菌，保持无菌状态。

这最后一点是要通过灭菌才能达到的，然而，灭菌的高温能破坏培养基中的许多化学成分，并能降低pH。

这一点必须在配制时就考虑到。

这就要求从使用的营养型药品试剂上，要尽量选用热稳定性好的种类，配制时，灭菌前的pH要略高于使用时所需的适宜酸碱度。

一般高压蒸汽灭菌0．1～0．12兆帕30分钟，培养基的pH下降0．1～0．3。

高压灭菌切勿压力过高，时间过长，以利培养基保持良好的营养和适宜的pH。

目前食用菌母种生产上使用的都是固体培养基，以琼脂(洋菜)为凝固剂，琼脂的用量从10～24克不等，这依琼脂的质量而定，使用时用量要参考产品使用说明书。

此外，当制作相同培养基时，高温季节要较常量多用些，以利凝固，低温季节可按常量使用；较酸的培养基也要较pH较高的培养基琼脂用量多些。

1．通用培养基通用培养基有多种配方，几乎通用于各类食用菌，常用的配方如下：(1)PDA培养基(马铃薯葡萄糖琼脂培养基) 马铃薯(去皮)200克，葡萄糖20克，琼脂10或20克，水1升。

(2)综合马铃薯培养基马铃薯(去皮)200克，葡萄糖20克，磷酸二氢钾2克，硫酸镁0．5克，琼脂10或20克，水1升。

(3)马铃薯麦麸综合培养基马铃薯200克，麦麸100克，葡萄糖20克，磷酸二氢钾2克，硫酸镁0．5克，琼脂10或20克，水1升。

A05菌种制作技术

孢子分离法
2）多孢子分离法：许多孢子接种于同一培养基上，使它们萌发自由交配来获得纯菌种的方法。如：香菇、平菇、金针菇、毛木耳等。（多个孢子→萌发→菌丝体→纯种）
多个孢子萌发后自由交配获得纯菌种的方法整菇插种法孢钩悬法多孢分离子孢子印法分平板稀释法离单孢分离连续稀释法法毛细血管法
(二) 母种生产技术
⑦苹果汁培养基苹果100g、蛋白胨2g、蔗糖20g、琼脂20g、H2O 1000mL；主要用于草菇培养
（配制方法同PDA）
特性
条状
属天然植物多糖融点96℃以上凝点40 ℃以下冷水中不溶透明度好、粘着力强不被微生物分解利用
粉状
3.一级菌种培养基(PDA)的配制过程
适用于一般食用菌母种分离与培养，但草菇、猴头菌等在此培养基上生长不良。
(二) 母种生产技术
②综合马铃薯培养基马铃薯 200g 、葡萄糖（或蔗糖） 20g 、 KH2PO4 2g、MgSO4 0.5g、维生素B1 10mg、琼脂20g、H2O 1000mL、pH自然。适合培养草菇、猴头菌、灵芝及各种食用菌菌种分离、保藏。
概念
孢子分离法
利用子实体产生的成熟有性孢子分离培养获得纯菌种的方法属于有性繁殖，后代易发生变异，可用此法培育新品种分离过程较复杂，适用于胶质菌类和小型伞菌
特点
操作孢子的采集→孢子的分离→孢过程子的萌发
⑴孢子分离法
利用孢子在适宜培养基上形成菌丝来获得纯菌种的方法。
1）单孢子分离法：培养基上只接种1个担孢子，使它萌发成菌丝体而获得纯菌种的方法。如：双孢蘑菇、草菇单个孢子分离得到菌丝便能结实。（一个孢子→萌发→菌丝体→纯种）

各级菌种制作方法

1,母种:又叫一级种,用直径18-22cm的试管制备.常用配方:去皮马铃薯200克,葡萄糖20克,琼脂10-20克,水1000毫升,先把土豆去皮称重,切成小块煮至熟而不烂,过滤加水至1000毫升,再把琼脂剪成小段,放入锅内,边搅边煮,待琼脂溶化后加入葡萄糖,由于琼脂质量各有不同加入份量要看情况而定，装管前取一小勺浮在凉水中冷却观察其硬度适合然后分袋试管,用棉花塞塞住试管口,放入小高压锅内灭菌,当压力表达到个压力时,再灭菌30分钟,取出试管放成斜面,放置2-3 天后,无杂菌感染再放入接种箱内接种,接了种的试管放入培养室内进行培养,温度要求25℃左右,相对湿度75%以下.2,原种:二级种,一般采用原种瓶和罐头瓶.培养料不要装的太满,装至瓶肩.原种的制备多采用谷粒种,锯沫种和棉子壳种.①谷料种:用玉米,小麦为原料,精选后煮沸,使种子变软即成,不要煮的太熟,开花.熟后离火泡5分钟（不开盖而能吸足水份）而后装瓶,用小型或中型高压锅灭菌,放至温度25℃左右接入母种,放培养室内培养.一般25-30天即成.②木屑种:木屑78%,麦麸20%,石膏1%,糖1%,料:水=1:,拌匀装瓶,灭菌,接种培养.一般25-30天即成.③棉子皮:因棉子皮各种营养丰富,一般不需要加其它物质,只加1%的糖和石膏,用料倍的水拌匀即可,而后装瓶,灭菌,接种,培养即可.推荐通用配方：木屑（或秸秆粉或棉籽壳）：80斤糠夫：6斤糖：斤菇耳壮：两石膏：1斤3,生产种:三级种可用木屑,玉米,棉籽皮,菌草,麦秸等为原料,根据所栽培的品种,采用不同的配方,用聚乙烯或聚丙烯,直径15-28cm塑料袋装料,然后用常压灭菌锅灭菌,达到100℃后,再维持100℃8-10小时.待袋稍凉后出锅,使栽培袋温度降至25℃左右再用原种接种,而后放到培养室的培养架上培养.推荐配方：■地栽木耳配方锯沫（或秸秆粉或棉籽壳）：80斤糠夫：5斤豆粉：2斤菇耳壮：两白灰：1斤■平菇猴头香菇金针菇配方锯沫（或秸秆粉或棉籽壳）：80斤菇耳壮：两糠夫：5斤白灰：1斤。

食用菌母种、原种、栽培种制作步骤

食用菌母种、原种、栽培种制作步骤食用菌菌种的质量对食用菌生产至关重要。

菌种的好坏，菌种的保存直接影响到食用菌的产品质量和产量、效益和成败，所以我们要制作优良的食用菌菌种，更要有优良的菌种保存方法，以保存菌种的生活力和优良性状，确保菌种纯种、无污染。

一、菌种制作食用菌菌种分三种即母种（一级种）、原种（二级种）、栽培种（三级种）1.制作母种（一级种）1.1菌种采集选择健壮无病虫害的食用菌子实体。

经表面消毒后，放在无菌的厚纸上，使子实体菌褶向下，在通风条件下经过12--24h，等子实体放出孢子后，将纸折叠起来风干，放入塑料袋中，里面放几粒干硅胶，封好口，放入2--4℃冰箱中，可保存起来长期备用。

1.2母种培养基制作配方：马铃薯200g、琼脂20g、葡萄糖20g、纯净水1000ml。

先把马铃薯切成大约1cm大的小方块，放入1000ml 纯净水中煮30min，过滤后加入琼脂、0.2-0.3%的磷酸二氢钾、再加入20g葡萄糖，溶解后分别装入试管，每个试管装量1/5-1/4，用棉塞封好试管口，外加塑料膜扎紧，放入压力灭菌锅1.3㎏/cm灭菌30min，待温度降至60℃将试管摆成30-35度倾斜面，冷却后观察几天，无受到杂菌污染即可接种，孢子液用灭菌的自来水将孢子稀释，在无菌操作环境下将孢子悬浮液移到试管琼脂斜面上，在25℃下培养，很容易萌发生长成菌丝，然后用石蜡封口置于4-5℃恒温箱中可保存6个月。

2.制作原种（二级种）将木屑78%、麦麸20%、糖1%、石膏1%加入水拌匀（100kg料加125kg水），培养基原料拌匀后拿试纸测ph 值，ph值在6-7为宜，然后装入大口的罐头瓶至瓶肩部，将培养料压平压紧，抹干净瓶的培养料，拿完好无破损的塑料薄膜扎紧瓶口，放入压力灭菌锅1.4-1.5㎏/cm灭菌1.5-2h，冷却至25℃即可进行无菌接种，用接种针从母种试管斜面上挑取少量菌丝体接入瓶中，接种后在25℃恒温箱中培养30d菌丝可长满，即可作为原种（二级种）。

蘑菇菌种的配制方法

蘑菇菌种的配制方法1、母种制作技术，一般处于保存期的大球盖菇菌种的菌丝处在缓慢生长或停止生产状态，所以在制作生产用的母种前，必须对保存的菌种进行复壮，以便将处于旺盛生长状态的菌种接入母种或原种培养基上，促进菌丝快速生长，获得菌丝粗壮、浓白、生长势旺的菌种。

（1）培养基配方：I号：PDA(马铃薯200g、葡萄糖18g、琼脂18g、水1000m1)。

Ⅱ号：PDA+硫酸镁1．5g+磷酸二氢钾3g+蛋白胨2g、水1000ml。

Ⅲ号：马铃薯100g、干杂木屑100g、葡萄糖20g、琼脂20g、水1000ml。

上述配方的培养基经高压20分钟灭菌消毒后制成试管斜面，3天内用完。

（2）制作方法：通过组织分离技术，将选取的大球盖菇组织块接入I号培养基上(或接入需复壮的保存种)。

在24到28℃条件下经10至15天培养，菌丝长至试管1：3--1：4时，挑取菌丝扩展前端浓密、粗壮的部分转入Ⅱ号或Ⅲ号培养基上，采用两点接种法，以使菌丝迅速长满培养基表面(一般15到20天)提高菌丝的质量。

经Ⅱ号、Ⅲ号复壮培养基培养的菌丝表现为浓白、粗壮、生命力强，以利原种菌丝的生长，缩短原种培养时间，提高成品率。

2、原种及生产种制作（1）配方：I号：小麦或大麦88％、米糠或麦麸10％、石膏或碳酸钙1％、石灰0．5％、含水量65％(加入米糠或麸皮主要是使培养基疏松，增加透气性，菌丝走向好)。

Ⅱ号：小麦25％、稻草64％、麦麸10％、石膏粉1％、含水量65％--70％。

Ⅲ号：杂木屑42％、杂刨木花42％、米糠或麦麸15％、硫酸镁0．2％、石膏或碳酸钙1％、含水量70％。

以上配方在1．3--1．5kg／平方米压力下，消毒2--2．5小时，3天内用完。

（2）原料选择和配制：实践证明：制作大球盖菇原种和生产种的培养基主原料以麦粒最好，木屑、刨木花次之，稻草最差。

（3）麦粒的选择：应选深黄或暗红色皮韧性大、浸泡时不易破皮的麦粒为好，从吸水率来看大麦优于小麦。

食用菌的菌种制作

食用菌的菌种制作食用菌的菌种制作是食用菌栽培前提，纯度高，生命力强的菌种是食用菌栽培取得丰产优质的先决条件，菌种质量的好坏，不仅关系到一个菌种生产单位的信誉和经济效益，而且更关系到广大菇农的栽培效益。

生产优质的菌种首先依靠优质的当家菌株和优良的设备条件，培养条件，此外更需要依靠具有水平的食用菌遗传育种知识，生理知识的制种技术人员。

并且这些人员在工作中要具有严谨的工作态度和认真细致的工作作风，并就菌种生产计划，操作标准化，菌种检验和质量标准作业具体规定。

为此根据食用菌菌种管理条例生产1-2级菌种生产单位必须经农业主管部门批准，3级(栽培种)菌种生产单位必须经县级以上农业主管部门批准方可。

1.菌种级别和种型：(1)菌种分级：原种，是指用于繁殖培养食用菌出发菌株。

作为生产上使用的发出菌株，不管是何种来源都要经过严格的栽培试验，掌握菌株的基本生物特性方可投入大面积使用，原种常用玻璃试管斜面培养，这种培养方法具有观察方便，容易鉴别和易于保存的优点。

二级种：由原种扩大培养而成的菌种，这一级菌种是为了加快食用菌繁育进度，满足大面积时生产栽培种的需要，在培养时应当认真检查菌丝的纯培养程度和菌丝长势，保持纯种培养，制作所用的容器要求使用透有度好的玻璃瓶。

三级种(栽培种)：是直接用于生产栽培的菌种，由二级种扩大培养而成，常以菌瓶或菌袋作为容器。

(2)菌种的种型木屑种：以适宜某种食用菌生长的木悄作为培养基主要原料生产的菌种。

木生食用菌的栽培种常用这种种型生产，如香菇、木耳用阔叶树木屑。

粪草种：以适宜食用菌生长的粪草经过发酵或不发酵作为培养基的主要原料生产的菌种，如双孢蘑菇栽培种用麦杆或稻草加牛粪发酵后为培养基；草菇稻草为培养基。

麦粒种：以大、小麦作为培养基生产的菌种，由于大、小麦营养较为丰富，容易污染杂菌。

因此这种种型菌种的制作过程要求麦粒的含水量适度，灭菌要彻底，接种环境无菌条件严格，麦粒种生命率强，播种速度快等优点，但易发生鼠害。

菌种配方和制作过程

菌种配方和制作过程一、引言菌种配方和制作过程是指在菌种培养过程中，选择合适的菌种组合和制作方法，以获得高效、规模化的菌种生产。

本文将介绍菌种配方的基本原则和制作过程，旨在为读者提供一份详尽的指南。

二、菌种配方的基本原则1. 菌种选择：根据所需的菌株特性，选择具有良好生长特性和产量的菌株。

考虑到不同菌株的适应性和生长条件，可以选择单一菌株或多菌株混合培养。

2. 培养基成分：根据菌株的营养需求和生长特点，确定培养基的配方。

培养基通常包括碳源、氮源、矿质盐和其他辅助物质。

不同菌株对培养基成分的需求有所不同，因此需要根据具体情况调整配方。

3. pH值控制：菌株的生长受pH值的影响较大，因此在制作菌种培养基时，要控制好pH值。

一般来说，大多数菌株的适宜pH范围在6-8之间，可以通过添加缓冲剂或调节培养基成分来控制pH值。

4. 温度和气氛：菌株的生长需要适宜的温度和气氛条件。

一般来说，常温下培养的菌株适宜的温度范围在25-30摄氏度之间。

气氛方面，一些菌株需要氧气，而另一些则需要厌氧条件，因此需要根据菌株的需求提供适宜的气氛条件。

三、菌种制作过程1. 培养基配制：按照菌种配方的要求，将所需的培养基成分按比例配制好。

首先将所需的矿质盐和其他辅助物质溶解在适量的蒸馏水中，然后加入适量的碳源和氮源，最后用蒸馏水调节到所需的体积。

搅拌均匀后，用高温高压灭菌器进行灭菌处理。

2. 菌种接种：将选好的菌株接种到配制好的培养基中。

接种时要注意无菌操作，避免外界微生物的污染。

可以通过无菌的吸管或注射器将菌株接种到培养基中，并轻轻摇晃培养瓶使菌株均匀分布。

3. 培养条件控制：将接种好的培养基置于恰当的温度和气氛条件下进行培养。

根据菌株的需要，可以选择静态培养或摇床培养。

在培养过程中，要定期观察菌株的生长情况，并根据需要调整培养条件，如温度、气氛和培养时间等。

4. 菌种分离和保存：菌株生长到一定程度后，可以进行分离和保存。

通过无菌操作，将菌株分离到新的培养基中，并进行单菌株的鉴定和筛选。

菌种制作基础：平菇一级菌种培养基制备方法

菌种制作基础：平菇⼀级菌种培养基制备⽅法培养基虽然种类繁多，配⽅各异，但配制⽅法基本相同，都要经过营养物质的选择、称量调配、调节pH、分装和灭菌等步骤。

（1）营养物质的选择：平菇⼀级种培养基的选择是根据⼀级种的⽤途和当时材料获得的难易决定的。

如配制⽣产⽤的⼀级种培养基，就可选择上述配⽅中的任何⼀种，⽽配制菌种保藏⽤的培养基就必须⽤配⽅（8）。

平菇⼀级种培养基使⽤的材料中，有些材料的种类、浓度、化学成分相对稳定，如磷酸⼆氢钾、硫酸镁等，有些天然植物体或动植物提取的成分相对不甚稳定，要⼗分注意，如马铃薯、蛋⽩胨、麦麸等。

发芽的马铃薯不能直接使⽤。

使⽤时要将刚刚出现的萌芽深深挖掉，否则芽眼处的龙葵碱，对平菇菌丝⽣长有毒害作⽤。

出芽较⼤的马铃薯不能使⽤。

⽊屑、麦麸、⽟⽶粉、棉籽壳等农副产品，使⽤前要认真检查，⽣⾍、发霉和不新鲜的不能使⽤，昆⾍的代谢物和霉菌产⽣的毒素都对平菇菌丝有毒害作⽤。

不够洁净的琼脂要事先浸泡冲洗去杂。

（2）称量：培养基配⽅中标出的⽔1000ml，实际上是将各种营养物质都容于⽔后的营养液的容量，⽽不完全是⽔。

配制好后，最后总容量达到1000ml。

（3）调配：植物体材料煮沸⽤其汁，⼀般煮沸20~30min，⽤2~4层纱布过滤。

如马铃薯、⽟⽶粉、⽊屑、麦麸等。

难溶解的物质先溶解，如蛋⽩胨，然后再加⼊易溶解的物质。

化学试剂后加⼊，不断搅拌使其均匀，⽽不与植物体材料⼀起煮沸。

如葡萄糖、磷酸⼆氢钾、硫酸镁等。

在⽔煮取汁的过程中，⽔不⾜时可加⽔⾄⾜量，调配到最后，容量不⾜时可加⽔补⾜⾄1000ml。

（4）调节pH：不同平菇品种⽣长发育最适pH不同，不同地区，不同⽔源的pH也不同。

因此，需要调节。

通常先⽤pH试纸测定已调配好的培养基，然后再⽤稀酸或稀碱溶液调节。

平菇⼀级种的pH调节常⽤的酸性溶液是柠檬酸和⼄酸溶液，常⽤的稀碱溶液是碳酸氢钠和碳酸钠液。

（5）分装：培养基调配好后，调节好pH即可分装。

菌种配方和制作过程

菌种配方和制作过程菌种配方和制作过程是指在生物技术领域中，为了培养特定的菌种并获得所需的产品或产物，科研人员需要按照一定的比例和步骤配制菌种培养基，并进行相应的培养过程。

本文将介绍菌种配方和制作过程的基本步骤和注意事项。

一、菌种配方菌种配方是指根据所培养的菌种的需求，选择合适的培养基成分和比例，以提供菌种所需的营养物质和环境条件。

一般来说，菌种培养基包括碳源、氮源、无机盐和其他辅助成分。

1. 碳源：提供能量和碳原子，常用的碳源有葡萄糖、麦芽糖等。

2. 氮源：提供合成蛋白质所需的氮原子，常用的氮源有氨基酸、尿素等。

3. 无机盐：提供生长所需的微量元素和离子，如磷、钾、钙等。

4. 辅助成分：如维生素、酶等，根据具体菌种的需求进行添加。

在配制菌种培养基时，需要根据菌种的特性和需求，选择合适的成分和比例，确保菌种能够正常生长和繁殖。

二、菌种制作过程菌种制作过程是指根据菌种的特性和需求，按照一定的步骤进行培养和繁殖。

一般来说，菌种制作过程包括以下几个步骤：1. 菌种接种：将菌种接种到含有适当培养基的培养皿或培养液中。

接种前需要进行无菌操作，确保接种的菌种没有被其他微生物污染。

2. 培养过程：根据菌种的特性和需求，选择合适的培养条件，如温度、pH值、培养基的透气性等。

将接种好的培养皿或培养液放入培养箱或摇床中进行培养。

培养过程中需要定期观察菌种的生长情况，如菌落的形态、颜色等。

3. 菌种繁殖：菌种在适当的培养条件下会进行繁殖。

繁殖的方式有两种，一种是无性繁殖，即菌落的扩大和分散；另一种是有性繁殖，即通过生殖细胞的结合和交换基因进行繁殖。

4. 菌种保存：在菌种繁殖过程中，可以选择保存一部分菌种作为备份。

常见的保存方式有冷冻保存和冷冻干燥保存。

在菌种制作过程中，需要注意以下几点：1. 严格控制无菌操作，避免菌种被其他微生物污染。

2. 确保培养条件的合适性，如温度、pH值等。

3. 定期观察菌种的生长情况，及时调整培养条件。

菌种配方和制作过程

菌种配方和制作过程菌种配方是指在菌种培养的过程中所使用的菌株以及其所需的营养成分的配比。

正确的菌种配方能够提高菌株的生长速度和产量，从而提高生产效益。

本文将介绍一种常用的菌种配方和制作过程。

我们需要准备的菌株是一种常见的真菌，名为白蚁菌。

白蚁菌可以有效地防治白蚁，是农业生产中常用的生物防治菌株。

菌种配方的制作过程如下：1. 首先，准备培养基。

培养基是菌株生长所需的营养物质的混合物。

制作培养基的原料包括蔗糖、蛋白胨、酵母粉、矿盐等。

将这些原料按照一定比例混合，加入适量的蒸馏水，搅拌均匀。

2. 将制作好的培养基倒入培养瓶中，每瓶装入适量的培养基。

3. 对培养瓶进行高温高压灭菌处理，以杀死培养基中的其他微生物。

4. 灭菌后，将培养瓶放置在无菌工作台上，待其冷却至室温。

5. 在培养瓶中接种白蚁菌菌株。

接种时需要注意无菌操作，避免外界的微生物污染。

6. 将接种好的培养瓶放入恒温培养箱中，设置适宜的温度和湿度条件，促进白蚁菌的生长。

7. 定期观察培养瓶中的菌株生长情况，包括菌丝的颜色、形态和生长速度等。

8. 当菌株生长到一定程度时，可以进行菌株的分离和纯化，以获得纯种的白蚁菌。

以上就是一种常用的菌种配方和制作过程。

当然，不同的菌株可能需要不同的配方和制作方法。

在实际应用中，根据具体的菌株特性和生长要求，可以进行相应的调整和优化。

菌种配方和制作过程的关键在于科学合理的配比和无菌操作。

通过合理配方，可以提供菌株所需的各种营养物质，促进其生长和繁殖；通过无菌操作，可以避免外界微生物的污染，保证菌株的纯度和质量。

菌种配方和制作过程的成功与否直接影响着菌株的生长和产量。

因此，在实际操作中，需要严格按照配方和制作步骤进行操作，确保每个环节的准确无误。

只有如此，才能获得高质量的菌种，为农业生产和生物防治提供有效的支持。

通过本文的介绍，希望读者能够了解到菌种配方和制作过程的重要性，并在实际操作中加以应用。

菌种配方和制作过程虽然看似简单，但其中蕴含着科学和技术的含量。

菌种生产中的注意事项及常见问题的解决方法

菌种生产中的注意事项及常见问题的解决方法菌种生产中的注意事项及常见问题的解决方法一、一级种制作过程中的注意事项（1）制作或盛装培养基的器皿，不能使用铁锅或铜锅，以免铁锈或铜锈混入培养基中，使铁或铜含量过高。

一般使用搪瓷缸或铝锅。

（2）制成的培养基，在使用前应做无菌检查，方法是将其置于27°左右的恒温箱内培养24小时，证明无菌后方可使用。

（3）制备好的培养基，应及时用完，不宜久存，以免降低其营养价值或成分上发生变化。

（4）制备过程中，一定要严格遵守无菌操作规程，并标好标签，注明菌种名称。

接种日期和转管次数，尤其在同一时间几种不同的菌种接种时，一定要严防混杂。

（5）一级种转管的次数不能过多，一般以5-6次为好，不能超过10次，否则，由于移植时所造成的机械损失，以及培养条件的变化，会削弱菌丝活力，导致遗传性状变异，降低出菇率。

因此，引进或育成的菌种在第一次转管时，可较多数量扩转，并以不同方法保藏，按计划使用。

（6）切勿使用无标记或判断不准的菌种，以免使用后造成损失。

（7）不要使用培养基已干缩或老化的一级种，以免影响菌种成活率或导致生产性状的退化。

长期保藏的菌种，用前应放在恒温箱中活化培养，并逐步提高培养温度，活化培养时间一般为1-3天。

如在冰箱中保存时间超过3个月，最好转管培养一次再用，以提高接种成功率和萌发速度。

（8）启用保藏的一级种，应认真检查是否有污染现象。

如试管斜面上呈现明显的黑色、绿色、黄色等菌落，则説明已遭受霉菌的污染；将试管迎亮光观察，如果在气生菌丝下面有黄褐色圆点或不规则斑块，説明已遭细菌污染；被污染的菌种绝对不能用于扩大生长。

（9）接种块不萌发或不吃料的原因：菌种在0°甚至以下温度保藏，菌丝已冻死或失去活力；菌龄过老，生活力衰弱；接种操作时，母种块被接种铲或酒精灯火焰烫死；母种块没有贴紧原种培养基；菌种萌发后缺乏营养死亡；接种块太薄太小干燥而死；母种培养基过干，菌丝无法活化或原种培养料偏干，菌丝无法吃料生长；培养料配比不当，或菌袋内有氨气或其它不良气体，致使酸碱度不宜；菌袋接种前冷却不彻底，或培养温度过高等。

菌种配方和制作过程

菌种配方和制作过程引言菌种配方和制作过程是指在实验室中培养和繁殖有用的微生物菌种的方法和步骤。

菌种的配方和制作过程是微生物学研究中非常重要的一环，它直接关系到实验结果的准确性和重复性。

本文将详细介绍菌种配方和制作过程的几个关键步骤，包括菌种的选择、培养基的配制、菌种的传代和保存等内容。

菌种选择菌种的选择是进行菌种配方和制作过程的第一步。

在选择菌种时，需要考虑以下几个因素：•研究目的：根据研究的目的选择相关的菌种，比如病原菌、发酵菌等；•已有菌种库：如果已有菌种库，可以从中选择相应的菌种；•文献调研：通过查阅相关的文献了解已有的菌种，并选择合适的菌种进行研究。

菌种的选择是进行菌种配方和制作过程的基础，选择合适的菌种可提高实验的成功率和可重复性。

培养基的配制培养基是菌种生长和繁殖所必需的营养物质的来源。

不同的菌种适宜生长于不同的培养基中，因此在进行菌种配方和制作过程时，需要根据选择的菌种来配制相应的培养基。

培养基的基本成分包括：1.碳源：提供菌种生长所需的碳源，常用的碳源有葡萄糖、淀粉等；2.氮源：提供菌种生长所需的氮源，常用的氮源有氨基酸、蛋白胨等；3.矿物质：提供菌种生长所需的微量元素和无机盐，常用的矿物质有硫酸镁、磷酸盐等；4.生长因子：某些菌种对于特定的生长因子有依赖性，如维生素等。

在配制培养基时，需要根据菌种的生长特性和需求来选择合适的成分和比例。

配制过程中需要注意消毒操作，以保证培养基的无菌状态。

菌种的传代和保存菌种的传代是指将已培养好的菌种传递到下一代的过程。

菌种的传代有助于保持菌种的活力和稳定性。

一般情况下，菌种的传代需要遵循以下几个步骤：1.选择菌落：从培养基上选择健康的、单个菌落的菌落，避免杂交菌的传代；2.悬浮培养：将菌落悬浮于适当的液体培养基中，并进行预培养；3.传代分装：将预培养的菌液分装到适当的容器中，比如试管、培养瓶等；4.菌种保存：传代后的菌种可以进行冷冻保存、干燥保存或低温保存等方式，以备日后使用。