葛根总黄酮提取工艺研究1pdf
葛根总黄酮提取工艺条件的研究
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St udy on Extr act in g Techn ology Con d it ion of Flavon oids f r om Puerar ia
1 实验材料
1 . 1 材料与试剂 野葛根购于合肥市医药公司 ,盐酸 、乙醇 、氯仿、甲醇等均为分析纯 ;D10 1 . 大孔吸附树脂 (天津农药股份有限公司) ; 葛根素对照品来自中国药品生物制品检定所 (批号 :753 - 200007) .
1. 2 仪器 8453 - 紫外可见分光光度计 (美国惠普公司) ; KP - 48 型三用石英紫外线检测仪 (北京科普) .
【关键词】 野葛根 ;葛根总黄酮 ;正交试验 ;提取工艺 【中图分类号】 R282 . 71 【文献标识码】A 【文章编号】1 6732070 4 (20 07) 12200 24203
葛根总黄酮的提取方法很多 ,如醇回流法 、醇渗漉法 、浸渍法 、超声辅助萃取法等 ,各有特点. 醇回流法生
产周期短、成本低 、辅助或无效成分的浸出较多 ,故干浸膏得率高 ,但异黄酮含量低 . 醇渗漉法生产周期长 、溶 剂用量大 ,故干浸膏得率不高 ,但浸膏中的异黄酮含量高 ,操作简便. 浸渍法生产周期长 、溶剂用量较大 ,干浸
图 1 葛根素紫外吸收扫描图谱 Fig. 1 UV - spectrogr am of pue rarin
2. 3. 2 标准曲线的制备 精密称取干燥至恒重的葛根素 20m g ,置 50ml 容量瓶中 ,加 95 %乙醇溶解并稀释 至刻度 (对照液) . 精密吸取 0. 5、1 、1. 5 、2、2. 5、3. 0ml 置于 50ml 容量瓶中 , 分别加入 95 %乙醇 5ml ,摇匀 ,再 加入蒸馏水至刻度. 以 95 %乙醇 1ml 加蒸馏水至 10ml 溶剂作空白对照 ,于 250nm 处测定吸收度 ,以浓度 C
最新 生物酶解破壁提制葛根黄酮的工艺-精品
生物酶解破壁提制葛根黄酮的工艺引言葛根富含葛根淀粉和总黄酮（含量约为1-12%）。
由于我国农作物利用较粗放，葛产业基本上集中在葛根淀粉的提取[1]，淀粉中异黄酮含量仅占葛根总黄酮的2.4％，95％以上尚留在葛根废渣被丢弃，高附加值的天然活性成分浪费严重。
作为和保健食品的原料或添加剂[2]，目前，国际市场葛根黄酮每年需求量约在500－800 吨，在美国，食用酮类食品的人数超过１亿３千多万人；而我国的每年需求量约在150 吨左右。
将生物酶促法应用到葛根黄酮的提取，主要是利用微生物充分破坏植物细胞组织结构，将植物组织分解成小分子物质，减少提取传质阻力，充分释放活性成分，具有提取物稳定、纯度高、能耗低、有机溶剂使用量少等特点[3]；目前，汤海鸥[4]、施英英[5]等采用纤维素酶和木聚糖酶等对提取葛根黄酮进行报道。
随着人们对葛根功能性和营养性研究的深入，采用生物酶化工艺，在减少葛产业集约化发展引起的葛根废渣环境污染的同时，实现葛根废渣的资源化利用提供一条新途径。
1 主要仪器、试剂和测试方法1.1 仪器与试剂仪器：UV-2450 紫外可见光光度计，DELTA 320-5pH 计，RE-2000 旋转蒸发器，126P/166P高效液相色谱仪，SPX-250-Z 振荡培养箱原料：葛废渣取至重庆北碚农村（除去葛根淀粉）试剂：葛根素（标品）；乙醇（分析纯）、正丁醇（分析纯）、硫酸(分析纯)、氢氧化钠(分析纯)、葡萄糖(分析纯)、甲醇(分析纯)1.2 实验1.2.1 菌种培育选用黑曲霉，分别经过斜面培养、种子液体培养后，将培养好的菌种接种装入液量为60 ml250ml 三角瓶中，接入量为5%，29℃，180rpm，混合培养48h。
1.2.2 微生物酶化提取葛根黄酮取烘干、粉碎后过40 目筛的葛渣样品3.5g，加入豆粕1.0g 至250ml 干净的锥形瓶中，加入蒸馏水，接入一定量种子液, 设定pH 值和发酵时间，考察接种量和培养基质及不同工艺参数对葛根黄酮溶出的影响1.2.3 主要控制参数及发酵工艺流程葛根渣与辅料之比为7:2，固液比为1:20，接种量50%，发酵温度为30℃，发酵时间为60h，pH 值为5，豆粕的重量百分量为5%～25%；接种量为40%；pH。
葛根总黄酮提取工艺比较研究
葛根总黄酮提取工艺比较研究杨丽维;陈颖;张峻【摘要】本研究采用乙醇浸提法和超声波辅助乙醇提取法对葛根黄酮进行提取,以期筛选出较佳的提取方法.通过试验对比,确定乙醇浸提法的工艺条件为乙醇浓度40％,固液比1∶20(g/mL),提取温度50℃,提取时间30 min.超声波辅助提取法的工艺条件为超声功率200 W,乙醇浓度40％,固液比1∶20(g/mL),提取温度50 ℃,超声时间20 min.在条件相近的前提下,超声波辅助提取法的葛根黄酮提取率为8.03％,比乙醇浸提法提取率提高了54％.可见,超声波辅助提取法提取效果较好,具有节时、简便、提取率高等优点.【期刊名称】《天津农学院学报》【年(卷),期】2016(023)003【总页数】4页(P27-30)【关键词】葛根;黄酮;乙醇浸提;超声波辅助提取【作者】杨丽维;陈颖;张峻【作者单位】天津市林业果树研究所,天津300384;天津市林业果树研究所,天津300384;天津市林业果树研究所,天津300384【正文语种】中文【中图分类】TS218葛根（Pueraria lobata（Willd.）Ohwi），别名鹿藿、黄斤、鸡齐，为豆科植物野葛的根，是一种常用的传统中药，也是药食两用的天然植物资源[1]。
理化分析表明，葛根中主要有效成分为黄酮类物质以及异黄酮类化合物，其中包括葛根素、大豆甙等。
这些有效成分具有预防心脑血管疾病，舒张平滑肌解痉，抗促癌及诱导癌细胞分化，抗氧化，解酒、解热及增强机体免疫力等功能[2]。
随着医药科学的发展，葛根有效成分的提取及开发利用价值备受研究者的关注。
葛根的主要应用一方面是加工各种淀粉类产品，二是提取葛根黄酮，将其作为食品、生物医药的重要原料[3]。
目前报道从葛根中提取有效成分的方法主要有：加热回流法、渗漉法、碱液法、浸提法（包括水提法、有机溶剂提取）、酶解法和物理强化辅助提取等，但普遍存在能耗大，时间长，效率低等问题[4]。
新鲜葛根中总黄酮和淀粉的提取工艺研究
彼 的状 况 ，仅 限 于对 淀粉 和 黄酮类 化 合 物 中的某
种 成分 的利 用 ， 造成 了资源 的浪费 。 为 充分 发挥 葛 根 的保 健 作用 ，根据 葛 根韧 皮 部和木 质部 中总黄 酮 和淀 粉 的分 布情 况 。研究 从 新 鲜葛 根韧 皮部 、木 质 部 中提取 总 黄酮 及 淀粉 的
议 用 ９ ％乙醇作 葛根 总黄 酮 的浸提溶 剂 。 ５
表 ２ 不 同溶 剂 浸 提 总 黄 酮效 果 比较
Ｔ ｂ ｅ ２ Ｅ ｃ ｆ ｄｆｅｅ ｔ ｓ ｌ ｅ ｔ ｏ ｏ ａ ａ ｏ ｅ ｘ ｒ ｃｉ ｎ ａ ｌ ｅ ｔ ｏ ｉ ｒ ｎ ｏ ｖ ｎ ｎ ｔｔｌ ｆ ｖ ｎ ｓ ｅ ｔ ｔ ｌ ａ ｏ
Ｖ０ ． Ｎｏ ３ １８ ．
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新鲜葛根 中总黄酮和淀粉 的提取 工艺研究
张 雁 池建 伟 张 名位 魏振 承
（－ ｆ 东省 农 业 科 学 院农 业 生 物 技 术 研 究 所 国 家农 业 部 功 能 食 品 重 点 开放 实验 室 广 州 ５ Ｏ ４ ） １６ Ｏ
１ 材 料 和 方 法
１１ 材 料 ．
葛根 ： 鲜 粉 葛分别 产 于广 东省 始兴 县 、 山 新 鹤 县、 高明市 ， 西 区明宁 县 ， 建省 三 明市 。 中用 广 福 其 于提 取研究 的粉葛 产于 广东 省始 兴县 。 葛根 素标 准 品 ：由中 国药 品生 物制 品检 定所
分—— 黄 酮类 化合物 ， 因此具 有 一定保 健 功效 。 在 葛根淀 粉 提取 工艺 中 ，不 仅要 考 虑提 高淀 粉 提取
率 ， 要考 虑总 黄酮 的保 留情况 。 还
被破 坏 ， 解成 对 羟基 苯 甲酸 和苯 二酚 ， 分 因此在 碱 液浸 泡工 艺 中 ，Ｈ值 应控 制在 适 当的范 围 内 ｐ 以 淀 粉 提取 率 和 总 黄 酮 保 留情 况 为 指 标 ． 采 用 Ｌ （ 正交 试 验设 计 考 核 葛根 淀粉 提 取 的 碱液 ９３） 浸 泡工 艺 ， 结果见 表 ４和 表 ５
葛根总黄酮提取工艺研究
葛根总黄酮提取工艺研究张喜梅，李琳，陈玲，苗晓杰（华南理工大学轻工与食品学院，广东 广州 510640）摘要：本论文采用传统浸提法，以乙醇为溶剂，考察溶剂体积分数、提取时间、固液比、提取温度和葛根粉粒度对葛根总黄酮提取率的影响，并在单因素实验的基础上，通过正交试验，确定了葛根总黄酮的提取工艺。
结果表明，提取温度、提取时间、固液比、乙醇体积分数以及粒度对葛根总黄酮的提取率均有影响，优化的葛根总黄酮的提取工艺为：提取温度为80 ℃，提取时间为120 min，乙醇体积分数为70%，固液比为1:12，粒度为80目。
关键词：葛根；总黄酮；提取中图分类号：TS201.2；文献标识码：A；文章篇号:1673-9078(2008)01-0042-04Study on the Extaction of Total Flavones from Pueraria Lobata OhwiZHANG Xi-mei, Li Lin, CHEN Ling, MIAO Xiao-jie(College of Light Industry and Food Science, South China University of Technology, Guangzhou 510640) Abstract: The total flavones were extracted with alcohol as the solvent from Pueraria Lobata Ohwi. The effects of the extraction conditions such as the concentration of ethanol, the extraction time, the ratio of Puerariae to solution of ethanol, extraction temperature and the size of Pueraria Lobata Ohwi were studied. The proper condition was determined by orthogonal experiment. The results were as following: The extraction temperature was 80 ℃, the extraction time was 120 min, the concentration of ethanol was 70%, the ratio of Puerariae to solution of ethanol was 1:12, and the size of Pueraria Lobata Ohwi was 80.Key words: Pueraria Lobata Ohwi; total flavones; extraction黄酮类化合物是植物的次级代谢产物，在自然界中分布广泛，普遍存在于植物的叶子和果实中。
葛根总黄酮的提取及抗氧化特性研究
2.2 乙醇提取法提取条件优化
表1 正交试验提取结果及极差分析表
序 A乙醇浓度 B体积倍数
号
/%
S:l
C提取时 间 /min
葛根素得 率 /%
1
1(30)
2
1
3
1
4
2(60)
5
2
6
2
7
3(90)
8
3
9
3
K1
12.953
K2
10.669
K3Leabharlann 8.934R4.019
1(1：6) 2(1：8) 3(1:10)
邻苯三酚溶液、浓度梯度为2.0 g/L，1.5 g/L，1.0 g/
32对乙醇回流提取法的提取条件进行了摸索在在乙醇浓度为30料液比为11080下回流提取9033对葛根总黄酮乙醇提取物纯化后进行了颜色反应和薄层色谱等定性表征结果表明葛根总黄酮粗提物中含有葛根素粗提物中含有黄酮类化合34以新鲜豆油初始po葛根总黄酮的添加量为004利用80烘箱加速试验对葛根总黄酮的康油脂氧化的活性考察葛根总黄酮比空白样的油脂氧化诱导期延长60左右
powder iron[J], J. Food Sci.，1990，55(3):869-871. [6] 邓舜扬.食品保鲜技术.[M].北京：中国轻工业出版 社,2006,295-303. [7] 张志健，李新生.食品防腐保鲜技术.[M].北京：科学 技术文献出版社，2006，194-207. [8] 周霞凤.一种保鲜剂的研制及名优绿茶贮藏条件的研 究[D].华中农业大学园艺园林学院,2007. [9] 王钦德，杨坚.食品试验设计与统计分析[M].北京： 中国农业大学出版社，2003，331-351. [10] 林灿煌，张灿河.正交试验设计优化脱氧剂配方亚硫 酸盐系脱氧剂的研究 [J].福建化工，2003（4）：1-4. [11] 陈红兵，高金燕.D-饱和试验设计优化脱氧剂配方I.铁 系脱氧剂的研究[J].中国食品添加剂，1996，（3）：1-5.
葛根总黄酮提取新工艺的研究
收稿日期:2006-01-06作者简介:白兰莉(1974-),女,硕士研究生1文章编号:1006-0456(2006)03-0227-04葛根总黄酮提取新工艺的研究白兰莉,蒋柏泉,黄庆荣,肖正强,邱宝玉(南昌大学环境科学与工程学院,江西南昌330029)摘要:采用微波辅助浸取新工艺从葛根中提取总黄酮.通过单因素和正交实验相结合的方法,研究了新工艺的实验条件.结果表明:在常压下,当微波功率为700W,葛根粒度为80目,预泡1h ,固液比为1z 25,乙醇溶剂浓度为60%,微波辐射40s ,间歇辐射3次,可得到最佳提取率83.92%,比传统回流浸取和超声浸取葛根总黄酮工艺具有快速、节能和浸取率高等优点.关键词:微波;浸取;葛根;总黄酮中图分类号:TS201.1 文献标识码:A葛根是一种药食两用的山地植物,其含有的总黄酮不仅应用于医药工业,还广泛应用于食品工业、日用化工等领域[1-6].在国内生产中,提取葛根总黄酮主要采用传统的醇提、浸提和铅盐沉淀等工艺,能耗大,时间长,效率低.而微波浸取技术是一种利用微波能与传统有机溶剂浸取相结合的新的浸取技术.与传统技术相比,因其具有浸取效率高、选择性强、节省时间、节省溶剂、节能、污染小等许多优点,应用范围已从最初的环境分析样品制备迅速扩展到食品、化工和农业、天然产物等领域[7].当前,微波技术已可用于包括黄酮等几大类天然化合物的提取,引起了科技工作者们的广泛关注[8].微波技术用于葛根总黄酮的提取目前在国内也有少量研究,有的采用改进的微波装置,也有的用不同的实验设计方法来考察微波提取葛根总黄酮的最佳工艺条件[9-11].而本实验采用普通微波炉装置,通过单因素和正交实验相结合的方法,考察了在常压下,微波功率、乙醇浓度、固液比、辐射时间等主要因素对微波辅助浸取葛根总黄酮效果的影响,以确定在此新条件下的最优微波浸取条件,探索一条简便易行的微波浸取新工艺.并与传统回流浸取和超声浸取等工艺进行了比较.1 材料、试剂与仪器1.1 材料与试剂葛根片,江西横峰皇同有机葛开发有限公司提供;葛根素对照品,购自中国药品生物制品检定所;试剂均为分析纯.1.2 实验仪器WD700(MG-5062S1)型微波炉(LG 电子天津电器有限公司),53W UV /V I S 紫外分光光度计(上海光学仪器厂),KQ 3200超声波清洗器(江苏昆山定山湖检测仪器厂).2 实验方法2.1 总黄酮的含量测定葛根总黄酮的含量测定采用以葛根素为对照品的紫外分光光度法.2.1.1 标准曲线的建立准确称取葛根素对照品5m g ,置于25mL 容量瓶中,加入95%乙醇溶解并稀释至刻度,摇匀,分别精确吸取0.1,0.2,0.3,0.4,0.5,0.6,0.7,0.8,0.9,1.0mL 于10mL 容量瓶中,并各加95%乙醇1.0mL ,再加蒸馏水稀释至刻度,摇匀.另取95%乙醇1.0mL 置10m L 容量瓶中,加蒸馏水至刻度,作空白对照.在250nm 波长处测定吸光度.以吸光度A 值与浓度C 值线性回归,得标准曲线方程为:A =0.02566+62.57379C,r =0.99992.1.2 样品溶液中总黄酮含量的测定精确吸取一定量的葛根提取液置于10m L 容量瓶中,加入95%乙醇1.0mL,用蒸馏水稀释至刻度,按上述操作方法,在250n m 波长处测定吸光度,根据标准曲线方程计算样品溶液中总黄酮的含量.2.1.3 葛根原料中总黄酮含量的测定准确称取粉碎干燥过80目筛的葛根药材粉末0.5g ,加30%乙醇50mL ,加热回流30m in ,滤过,第28卷第3期2006年9月南昌大学学报#工科版Journal o fN anchang U n i versity(Eng i neering &T echno l ogy)V o.l 28N o .3Sept .2006精确吸取滤液适量,按样品溶液测定方法测定葛根原料中的总黄酮含量.浸取率=浸取液中葛根总黄酮量葛根原料中总黄酮量@100%2.2 微波浸取的实验方法准确称取粉碎干燥的葛根粉2g 于250mL 锥形瓶中,加入一定浓度体积的乙醇作溶剂,预泡一段时间后,在设定的微波功率下辐射几十秒,取出冷却、过滤,得到浸取的样品溶液,测定浸取液吸光度,并计算黄酮浸取率.按照此法首先对影响黄酮浸取率的主要因素,即微波功率、辐射时间、乙醇浓度、固液比等,分别进行单因素实验考察;再在单因素实验的基础上,优化组合进行正交试验,确定最佳浸取条件.3 结果与分析3.1 微波浸取的单因素实验3.1.1 微波功率对黄酮浸取率的影响称取每份2g 过80目筛的葛根粉于锥形瓶中,按固液比1z 25(1g z 25mL)均加入60%乙醇溶液50mL ,预浸泡1h ,分别在微波功率为700W 、560W 、420W 、280W 、140W 下辐射60s(此微波炉最大输出功率为700W,实际作用功率按微波火力百分数折算计),测温,并测定各次吸光度,计算浸取率.实验可知,开始微波功率增大时,温度也随之升高,当达到420W 以上后,溶液开始沸腾,温度达78.5e ,且恒定不再升高.由图1可看出,随着微波功率增大,黄酮浸取率也随之增大,在功率最大为700W 时,浸取率最大.图1 微波功率对黄酮浸取率的影响F ig .1 E ffect of m icrowave po w er on extracting rate of total isoflavones3.1.2 辐射时间及次数对黄酮浸取率的影响1)称取每份2g 过80目筛的葛根粉于锥形瓶中,按固液比1z 25均加入60%乙醇溶液50mL,预浸泡1h,设定微波功率为700W,分别辐射30s 、40s 、50s 、60s 、70s ,测温,并测定各次吸光度,计算浸取率.由图2可看出,随辐射时间的延长,总黄酮浸取率也逐渐增加,到60s 时浸取率最高,然后下降.实验可知,微波辐射至20s 时,观察到溶液即开始沸腾,推断由于乙醇水溶液为共沸混合物,因此在常压下,测得以上各次末温均为78.5e ,考虑连续辐射时间长易暴沸,且溶剂挥发较多,辐射时间取40s 较适宜.图2 微波辐射时间对黄酮浸取率的影响Fig .2E ffec t of m i cro w ave radiation ti m e on extrac ti ng rate of total isof l avone s2)称取2g 过80目筛的葛根粉于锥形瓶中,按固液比1z 25加入60%乙醇溶液50mL,预浸泡1h ,设定微波功率为700W,第一次辐射40s 后,取出冷却,测定吸光度;然后再次辐射40s ,取出冷却,测定吸光度;如此间歇重复5次,计算各次浸取率.由图3可看出,随辐射次数的增加,总黄酮浸取率也逐渐增加,3次以后增加较缓,考虑到节省时间,以辐射3次较适宜.图3 微波次数对黄酮浸取率的影响F ig .3 E ffect of m icrowave treat men t ti m es onextrac ti ng rate of total isof l avone s#228#南昌大学学报#工科版2006年3.1.3 乙醇浓度对黄酮浸取率的影响称取每份2g 过80目筛的葛根粉于锥形瓶中,按固液比1z 25分别加入50%、60%、70%、80%、90%乙醇溶液50mL,预浸泡1h ,设定微波功率为700W,均辐射40s ,测定各次吸光度,并计算浸取率.由图4可看出,乙醇浓度对黄酮浸取率影响较大,乙醇浓度为60%时,黄酮浸取率最高,浓度再增加,浸取率反而下降.因此,乙醇浓度取60%较适合.图4 乙醇浓度对黄酮浸取率的影响F ig .4 E ffect of alcohol concen tration onextracting rate of total isoflavones3.1.4 固液比对黄酮浸取率的影响称取每份2g 过80目筛的葛根粉于锥形瓶中,按固液比分别为1z 15、1z 20、1z 25、1z 30、1z 40分别加入相应体积的乙醇溶液,预浸泡1h ,设定微波功率为700W,均辐射40s ,测定各次吸光度,并计算浸取率.由图5可看出,在固液比为1z 20时,辐射40s ,黄酮浸取率最高.图5 固液比对黄酮浸取率的影响F i g .5 E ffec t of ra ti o of solid to li qu i d on extracti ngrate of total isof l avone s3.2 微波浸取的正交实验在单因素实验的基础上,对提取葛根总黄酮的主要因素:微波功率、乙醇浓度、固液比、辐射时间按表1进行L(34)正交实验设计,由表2中的实验结果和极差分析可知,各因素影响的主次为:B >C >A>D,即乙醇浓度、固液比、微波功率、辐射时间;最佳条件为B1C3A3D2,即正交实验的最佳工艺条件为:微波功率为700W,溶剂乙醇浓度为60%,固液比为1g z 25mL,辐射时间为40s ,间歇处理3次.其中固液比对葛根总黄酮浸取率的影响结果与单因素实验的结果有差异,经重复实验验证,其它条件同上,分别取固液比为1g z 20mL 和固液比为1g z 25mL ,辐射时间为40s ,间歇处理3次,比较发现固液比为1g z 20mL 时总黄酮浸取率为83.53%,固液比为1g z 25mL 时总黄酮浸取率为83.92%左右,说明正交实验所得工艺条件最佳.这可能是按正交实验设计,微波辐射次数增加为3次,有部分溶剂挥发,对固液比不同的体系,其总黄酮浸取率的影响不同,以及多因素作用时各因素之间存在交互作用的结果.表1 因素与水平Tab .1Factors and leve ls因素水平A 微波功率/WB 乙醇浓度/%C 固液比/(g #mL -1)D 辐射时间/s 1420601z 1530(3次)2560701z 2040(3次)3700801z 2550(3次)表2 正交实验数据与结果Tab .2 O rthogonal exper i m en tal datas and result序号A 微波功率/W B 乙醇浓度/%C 固液比/(g #mL -1)D 辐射时间/s 浸取率/%1420601z 1530(3次)76.292420701z 2040(3次)74.863420801z 2550(3次)71.274560601z 2050(3次)78.405560701z 2530(3次)80.426560801z 1540(3次)69.097700601z 2540(3次)83.928700701z 1550(3次)75.089700801z 2030(3次)69.84均值K 174.1379.5473.4975.52均值K 275.9776.7874.3775.96均值K 376.2870.0778.5474.92R2.159.475.051.044 结论1)在本实验条件下,葛根黄酮浸取率均随微波功率和辐射时间增加而增加,但随乙醇浓度和固液比增加而存在一最佳值.本实验微波辅助浸取葛根总黄酮的最优工艺条件为:在常压下,当葛根粒度为#229#第3期 白兰莉等:葛根总黄酮提取新工艺的研究80目,预浸泡1h ,微波功率为700W,固液比为1g z 25m L ,乙醇溶剂浓度为60%,微波辐射40s ,间歇处理3次,总黄酮提取率达83.92%.2)本实验还做了传统回流浸取和超声浸取工艺提取葛根总黄酮的研究.在固液比为1z 25、乙醇浓度为70%和回流浸取时间为3h 的实验条件下,传统回流浸取工艺的浸取率为82.38%;在固液比为1z 15、乙醇浓度为60%和超声浸取时间为30m in(2次)的实验条件下,超声浸取工艺的浸取率为82.48%.可见,与传统回流浸取和超声浸取工艺相比,微波浸取新工艺具有节时、节能和浸取率高等优点.3)为充分利用葛根资源,在后续实验中,将从本实验过滤所得滤渣中回收葛根淀粉,对提取的黄酮液将进一步分离纯化,得到高质量的葛根黄酮.参考文献:[1] H ao Jing Rong ,H an F .D e i nze reta l Identifica ti on of Isfla -vones i n t he Roo ts of Puerar i a loba ta[J].P lant M edica ,1998,64:620-627.[2] 郭建平,孙其荣,周全.葛根药理作用研究进展[J].中草药,1995,26(3):163-165.[3] 邓晓娟,刘晓龙,吴秀清,等.葛根资源的研究与开发利用[J].基层中药杂志,2002,16(2):48-49.[4] 詹永,杨勇.葛根异黄酮的提取方法与应用[J].广州食品工业科技,2004,20(2):169.[5] K ennedy John F ,L in Y u-T ien .A dvance i n f ood andnutriti on resea rch [D ].N e w Y o rk :A cade m ic P ress Inc ,1997,35:111-113.[6] 徐进,张卫明,马世宏,等.葛根在化妆品中的应用初探[J].中国野生植物资源,2000,19(3):11-13.[7] 张成,贾绍义.微波萃取技术及其应用[J].化学工业与工程,2004,12(6):444-448.[8] Pan X ue j u ,N i u Guoguang ,L i u Hu iz hou .M i cro w ave-as -sisted ex tracti on of tansh i nones from sa l v ia m ilti o rrh i za Bunge w ith ana l ysis by h i gh-per f o r m ance li qu i d ch ro m a -tography[J].Ch ro m a t og raphy A ,2001,922:371-375.[9] 王娟,沈永嘉,王娟,等.微波辅助萃取葛根中有效成份的研究[J].中国药科大学学报,2002,33(5):379-382.[10] 马海乐,王超,刘伟民.葛根总黄酮微波辅助萃取技术[J].江苏大学学报,2005,26(2):98-101.[11] 国振双,李梅,冯云生.微波法提取葛根黄酮的研究[J].齐齐哈尔大学学报,2003,19(4):14-15.St udy on Ne w Techni que of Total Isoflavones Extractionfro m Pueraria LobataBA I Lan -l,i JI A NG Bo -quan ,HUANG Q i ng -rong ,X I AO Zheng -q i ang ,Q I U Bao -yu(S chool of Environ m ental Science and E ngineer i ng,N anchang Universit y,N anchang 330029,Ch i na)Abst ract :The ne w technique ofM icro w ave-assisted leach i n g w as used to separate the tota l isoflavones fro mpueraria lobata .The experi m en tal conditions of the ne w technique w ere st u died by si n g le factor and ort h ogonal ex -peri m ents .The results sho w ed that t h e opti m um leaching y ield o f 83.92%cou l d be ob tained when m icro w ave po w -er w as 700W,grinding degree 80m esh ,pre-leaching ti m e 1h,ratio of so lid to li q u i d 1z 25,a lcohol concentra -ti o n 60%,three ti m es of rad i a ti o n and 40s for each ti m e at nor m a l pressure .The ne w techn i q ue has the advantages of faster leach i n g ,lo w er energy consumpti o n and higher leachi n g effic iency co m pared w it h no r m a l re fl u x and ultra -sonic l e aching m ethods .K ey W ords :m icro w ave ;l e aching ;puerar i a l o bata ;to tal iso flavones#230#南昌大学学报#工科版2006年。
葛根总黄酮的提取方法研究
分的异同,进行了HPLC 多成分分析比较,结果发现:在此分析范围内,SBE 液及WE 液的色谱峰数及峰位基本一致,两者对应色谱峰的积分值除1个峰外SBE 液均大于WE 液。
说明2种提取液的成分没有质的改变,但SBE 液成分的含量显著大于WE 液。
参考文献:[1] 张兆旺,孙秀梅.试论/半仿生提取法0制备中药口服制剂[J].中国中药杂志,1995,20(11):670-673.[2] Zhang zhaow ang,Sun xiumei.Oral Preparations of Chinese mate -ria medica by sem-i bi onic extraction [J ].Chemical Abstracts,1996,Vol 124.[3] 张瑞亭,张兆旺,孙秀梅.思维方式的转换与中药/半仿生提取法0[J].中国中药杂志,1997,22(9):542-544.[4] 张兆旺,孙秀梅./半仿生提取法0是中药药剂现代化的科学途径[J].中国中医药报,2000年5月8日,第4版.[5] 张兆旺,孙秀梅./半仿生提取法0的特点与应用[J ].世界科学技术-中药现代化,2000,2(1):35-38.[6] 张兆旺,孙秀梅.中药方剂药效物质提取新技术-/半仿生提取模式0的初探[J ].世界科学技术-中药现代化,2000,2(5):5-10.葛根总黄酮的提取方法研究赵浩如1, 郜凤香2(1.中国药科大学,江苏南京210038;2.河南省医药学校,河南开封475001)摘要:目的:选择提取葛根总黄酮的最佳方法,研究了用渗鹿法、浸渍法、煎煮法、回流法提取葛根总黄酮。
方法:采用紫外分光光度法测定提取液中的总黄酮含量。
结果:用回流法得率最高,其次为渗漉法,用煎煮法提取得率最低;在渗漉法中以乙醇为溶剂,速度为2ml/kg #min 的渗漉法提取的总黄酮得率最高。
结论:渗漉法是合适的提取方法。
关键词:葛根;黄酮;提取中图分类号:R284.2 文献标识码:A 文章编号:1001-1528(2000)11-0756-03Study on Methods of Extraction of Flavonoids in Radix PuerariaeZHAO Hao -ru 1, GAO Feng -x iang21.China Pharmaceutical Univ ersity ,Nanj ing 210038,China;2.H enan S chool of M e d icine and Pharmacy,K aif eng 475001,China)Abstract :Objective :In order to select the best process of extraction of the flavonoids in Radix puerariae.Meth -ods:Percolation,maceration,decoction and reflux w ere adopted,and the flavonoids in Radix puerariae was de -termined by UV spectrophotometry.Results:T he yield order is reflux,percolation,maceration,and decoction;the percolation w ith alcohol and a flow rate of 2m l/kg #min is the most effective in the percolation methods.C onclusion:It indicates that the percolation is the most suitable to extraction of the flavonoids.Key words :Radix Pueraria;flavonoid;extraction 收稿日期:2000-03-04作者简介:赵浩如(1950~),男,江苏南京市人,副教授,理学硕士,主要研究方向:中药新制剂和新剂型。
葛根总黄酮提取新工艺的研究.
Ａ值与浓度 ｃ值线性 回归 ， 得标准曲线方程为：
Ａ ＝０ ０ ５ ６ ＋６ ． ７ ９ ｒ ． ９ ． ２ ６ ２ ５ ３ ７ Ｃ． ＝０ ９ ９ ９
２ １２ 样品 溶液 中总黄 酮含量 的测定 ．． 精 确 吸取一定 量 的葛根提 取液 置于 １ Ｌ容 量 ０ｍ
瓶中， 加入 ９ ％ 乙醇 １０ｍ 用 蒸馏水 稀 释至刻 度 ， ５ ． Ｌ，
维普资讯
第２ ８卷第 ３期 ２０ ０ ６年 ９月
南昌大学学报 ・ 工科版
Ｊｕ ａ ｏ Ｎ ｎｈｎ ｎ ｅｓｙ Ｅ ｇ ｅｒ ｇ＆ Ｔｃ ｎｌ ｙ ｏｒ ｌ ｆ ａｃａ ｇＵ ｉ ｒ ｔ（ ｎｉ ｅ ｎ ｎ ｖ ｉ ｎ ｉ ｅｈ ｏ ｇ ） ｏ
为 ６ ％ ， 波辐射 ４ ， ０ 微 ０ｓ 间歇辐射 ３次 ， 可得到最佳提取率 ８ ．２ ， ３９ ％ 比传统 回流浸取和超声浸取葛根总黄酮工艺具 有快速 、 节能和浸取 率高等优点． 关键词 ： 波 ； 微 浸取 ； 葛根 ； 总黄酮 中图分类号 ：Ｓ０ ． Ｔ ２１１ 文献标 识码 ： Ａ
葛根是一种药食两用的山地植物 ， 其含有 的总
黄酮不 仅应用 于 医药工 业 ， 广泛 应用 于食 品工业 、 还
日用化 工等 领域 ¨ Ｊ ．
１ ２ 实验仪器 ．
ＷＤ ０ （ ７０ ＭＧ一 ０ ２ １ 型微 波 炉 （ Ｇ电子 天 津 ５６ Ｓ ） Ｌ 电器有 限公 司 ） ５Ｗ Ｖ Ｖ Ｓ紫 外 分 光光 度 计 （ ，３ Ｕ ／ Ｉ 上 海 光学 仪器 厂 ） Ｋ ３０ ， Ｑ ２０超 声 波 清 洗 器 （ 苏 昆 山 江 定 山湖 检测 仪器厂 ） ．
在 国 内生 产 中 ， 提取 葛 根 总 黄酮 主要 采 用传 统 的醇提 、 浸提 和铅 盐沉 淀等工 艺 ， 能耗大 ， 间长 ， 时 效
葛根总黄酮提取工艺
其他试剂 均为分析纯H
J%C型紫外分光光度计 上海分析仪器厂)
FGK 工艺流程和工艺条件
FGKGF 醇提法
鲜葛根L 清洗L 干燥L 破碎L 醇回流L
过滤
L
M 滤液"去合并液
M L 脱铅 L
过滤
L 沉 淀 于 $&&<5U%P乙 醇 中 回 流
M 滤 液 "去 合 并 液
C9L 过滤 L 滤 液 合 并 L 合并液离心 L 滤液减压浓缩至干
dYZefg/hYei/fjjj
工艺条件!鲜葛根 "##$%醇用量 以鲜 葛 根 重倍 数
表 4 不同提取工艺的效果
计 %减 压 浓 缩 控 制 温 度 & ’#( ) *+, 葛根总黄酮含量的测定 *+,+* 标准曲线的制备 精密称取干燥至恒重的葛 根 素 -.$/于 0-.1容 量 瓶 中/加 2-3乙 醇 溶 解 并 稀 释至 刻 度/摇 匀) 精 密 吸 取 #+4/#+0/#+"/#+5/#+-/ #+6/#+7/4+#.1分 别置于 4#.1容量 瓶中/用 4#+#.1 2-3乙 醇 精 密 加 水 至 4##.1的 溶 液 稀 释 至 刻 度/摇 匀) 以 上 述 溶 剂 做 空 白 对 照/在 0-#8. 处 测 定 吸 收 度 /回 归 方 程 为 !9: #+4520; #+#"2</=: #+222’) *+,+> 葛根提取物总黄酮含量的测定 精密称取各 法 提 取 物 4-#.$/相 当 于 葛 根 黄 酮 约 -#.$/分 别 置 于 0-#.1容量瓶中/加 2-3乙醇溶解并稀释至刻 度/ 摇 匀)精 密吸取 #+-.1分 别置于 4#.1容量 瓶 中/用 4#+#.12-3乙醇精密加水至 4##.1的溶液稀释至刻 度/摇匀)以上述溶剂做空白对照/在 0-#8. 处测 定 吸 收 度 /从 标 准 曲 线 上 换 算 出 葛 根 黄 酮 的 含 量 ) *+? 葛根提取物的薄层层析
葛根总黄酮提取工艺研究
黄酮类化合物是植物 的次级代谢产物 ，在 自然 界
中分布 广泛 ，普遍存在于植物 的叶子和果实 中。葛根
厂。
紫外 分光光度 计（ Ｖ ２ ０ Ｐ ） Ｕ －１２ Ｃ ：上海尤 尼柯仪器
有 限公司 。
既是 中药材，又 是营养丰富的食用原料 。其被 《 农 神 本 草经 》列为中品 ，并为 中国药典所收载［２ １］ －。
摘要：本论文采用传统浸提 法，以乙醇为溶剂， 考察溶剂体积分数、提取 时间、固液比、提取温度和 葛 根粉粒度对葛根总黄酮
提取率的影响 ， 并在单 因素 实验的基础上，通过正 交试验 ， 确定 了葛根 总黄酮的提取工艺。结果表 明，提取温度 、 提取时间、固液比、
乙 醇体积分数以及粒度对葛根总黄酮的 提取率均有影响，优化的葛 根总黄酮的提取工艺为： 取温度为 ８ ℃， 提 Ｏ 提取时间为 １０ ｉ， ２ ｍｎ
Ａｂ ｔ ａ ｔ ｈ ｏａ ａ ｏ ｅ ｒ ｘ ｒｃｅ ｔ ｌｏ ｏ ｓ ｔ ｅ ｓ ｌｅ ｔｆｏ Ｐ ｅ ａ ｉ ｏ ａａ Ｏｈ ． ｅ ｅ ｅ ｔ ｆｔ ｅ ｅ ｔ ｃ ｏ ｓｒ ｃ ：Ｔ ｅ ｔ ｔｌｆ ｖ ｎ ｓ ｗｅ ｅ ｅ ｔ ｔｄ ｗｉ ａ ｃ ｈ ｌａ ｈ ｏ ｖ ｎ ｒ ｍ ｕ ｒ ｒ Ｌ ｂ ｔ ｗｉ Ｔｈ ｆ ｃｓ ｏ ｈ ｘ ｒ ｔ ｎ ｌ ａ ｈ ａ ａｉ ｃ ｎ ｉ ｏ ｓｓ ｃ ｓｔ ｅｃ ｎ ｅ ｔ ｔ ｎ ｏ ｅ ａ ｏ ， ｅｅ ｔ ｃ ｏ ｍｅ ｔ ｅｒ ｔ ｆ ｕ ｒｒ ｅｔ ｏｕ ｉｎ ｏ ｅ ａ ｏ ， ｘ ｒ ｃｉｎ ｔｍｐ ｒｔ ｒ ｎ ｅ ｏ ｄｔ ｎ ｕ ｈａ ｏ ｃ ｎｒ ｉ ｆ ｔ ｎ ｌｔ ｘ ｒ ｔ ｎ ｔ ， ｉ ｏ Ｐ ｅ ａｉ ｓ ｌ ｔ ｆ ｔ ｎ ｌ ｅ ｔａ ｔ ｉ ｈ ａｏ ｈ ｈ ａｉ ｉ ｈ ａｏ ａ ｏ ｏ ｈ ｏ ｅ ｅａ ｕ ｅａ ｄ ｔ ｈ ｓ ｅｏ Ｐ ｅ ａ ｉ ｂ ｔ ｗｉ ｒ ｔ ｄｅ ． ｅｐ ｏ ｅ ｏ ｄ ｔ ｎｗａ ｅｅ ｍｉｅ ｙｏ ｔ ｏ ｏ ａ ｘ ｅ ｉ ｎ ． ｅｒ ｓ ｌ ｒ ｌ ｗｉｇ Ｔ ｅ ｉ ｆ ｕ ｒ ｒ Ｌｏ ａ ａＯｈ ｅｓ ｉｄ Ｔ ｒ ｐ ｒ ｎ ｉ ｏ ｓ ｔｒ ｎ ｄｂ ｒ ｇ ｎ ｌ ｐ ｒ ｚ ａ ｗｅ ｕ ｈ ｃ ｉ ｄ ｈ ｅ ｍｅ ｔ Ｔ ｕ ｔ ｗｅｅａ ｆ ｌ ｎ ： ｈ ｅ ｓ ｓ ｏｏ ｈ
葛根中总黄酮提取工艺
葛根中总黄酮提取工艺研究摘要葛根中总黄酮含量相对同类产品较高，其利用价值也较高。
总黄酮具有治疗心脑血管疾病、抗癌、舒张平滑肌、改善血液流变学指标、解酒及低毒性等药理作用本文通过对葛根中总黄酮几种提取方法（超声辅助提取法、醇提取法、铅盐提取法和水提取法）的研究和比较，从而确定出一种较好的提取方法——醇提取法。
为提高原材料利用率，增加经济效益提供有用的数据。
关键词总黄酮；超声辅助提取法；醇提取法葛根为豆科多年生落叶藤本植物葛的干燥根[1] , 属于卫生部公布的既是食品又是药品的物品[2] ,其主要有效成分为葛根素、大豆素、大豆苷等异黄酮类化合物, 具有治疗心脑血管疾病、抗癌、舒张平滑肌、改善血液流变学指标、解酒及低毒性等药理作用[3 ～5 ]。
总黄酮是指黄酮类化合物，是一大类天然产物，广泛存在于植物界，是许多中草药的有效成分。
在自然界中最常见的是黄酮和黄酮醇，其它包括双氢黄（醇）、异黄酮、双黄酮、黄烷醇、查尔酮、橙酮、花色苷及新黄酮类等。
黄酮参与了磷酸与花生四烯酸的代谢、蛋白质的磷酸化、钙离子的转移、自由基的清除、抗氧化活力的增强、氧化还原作用、螯合作用和基因的表达。
它们对健康的好处有：抗炎症、抗过敏、抑制细菌、抑制寄生虫、抑制病毒、防治肝病、防治血管疾病、防治血管栓塞、防治心与脑血管疾病、抗肿瘤、抗化学毒物等。
天然来源的生物黄酮分子量小，能被人体迅速吸收，能通过血脑屏障，能时入脂肪组织，进而体现出如下功能：消除疲劳、保护血管、防动脉硬化、扩张毛细血管、疏通微循环、活化大脑及其他脏器细胞的功能、抗脂肪氧化、抗衰老。
葛根总黄酮提取法有醇回流法、醇渗漉法、浸渍法、超声辅助萃取法等,但利用超声辅助提取中药有效成分具有生产周期短、效率高、设备简单、成本低的优点[6 ,7]。
本文主要介绍了超声提取法、醇提取法、铅盐提取法和水提取法，并对葛根中总黄酮的开发利用前景作出了一些说明。
1.超声辅助提取法1.1工艺流程[8]葛根→破碎→超声提取→过滤→减压浓缩→过柱→水洗脱→乙醇洗脱→减压浓缩→真空干燥→总黄酮提取物。
葛根总黄酮的提取及其抗氧化性能研究
周率， 周武， 张彬 ， 黎新江， 欧阳辉 （昌 学 品 学 技 国 重 实 室江 南 ３ｏ） 桂 南 大 食 科 与 术 家 点 验 ，西 昌３４ ｏ７
摘要 【 目的１ 提取 葛根 总 黄酮 的最佳 工 艺条件 ， 究其抗 氧化 性能 。 法１ 乙醇提 取 葛根 总黄 酮 ， 过 正 交试验 ， 究影 响 葛根 优化 研 『 方 用 通 研 总 黄酮提 取 率的 因素 ， 定最佳 提 取 工 艺参数 ； 胶 柱 层析 法纯 化 葛根 总 黄 酮提 取 物 ， 用 Ｂ Ｃ 确 用硅 采 Ｐ Ｌ法 测 定 葛根 总黄 酮 的抗氧 化 性 能 。 果】 交 实验 表 明 ， 响葛根 总黄 酮提取 率 的 ４ 因素 的强 弱顺 序为 ： ＞ ［ 结 正 影 个 温度 乙醇 浓度＞ 固液 比＞ 取 次数 。 取 葛根 总黄 酮 的最 提 提 佳 工 艺条件 为 ： 乙醇 浓度 ７ ％， Ｏ 固液 比为 １ ， ： 提取 次 数 ３次 ， 次 ３ｈ 温度 ８ ８ 每 ， Ｏ℃， 葛根 总 黄 酮的提取 率为 ２ ． 样 品 纯度 为 ｌ． ２ ％， ９ ５ ％。 ５ ｆ 用Ｂｃ 结论 Ｐ Ｌ法测定 葛根 总黄酮对超 氧 自由基 （ ２ ） 羟基 自由基 （Ｏ 的抑 制率 ， 果证 明葛根 总黄酮具 有一定 的抗氧 化作 用。 ０＿ 和 ・ ・Ｈ） 结
20130118葛根中黄酮类化合物总含量的测定报告(1)
葛根中黄酮类化合物总含量的测定结果1葛根样品来源样品来源：武冈市和鑫农产品有限责任公司。
样品编号名称原材料状态F 粉葛片状（测定黄酮含量前粉碎处理）H 黄金葛片状（测定黄酮含量前粉碎处理，粉碎后纤维残留很明显）CW超微粉碎（大编织袋装）超微粉碎CZ 商品包装粉末状2葛根黄酮含量测定的方法及步骤采用传统浸提法，以乙醇为提取溶剂。
在参考文献资料的基础上，确定简要的步骤为：提取温度60℃，提取时间为120 min，乙醇的提取浓度为70%，固液比为1:20。
每个样品重复三次。
3标准曲线黄酮类化合物在碱性介质中与硝酸铝作用后，生成黄酮的铝盐络离子（低浓度为浅红色），呈黄色，可通过紫外-可见分光光度法定量测定黄酮类物质的含量。
4结果与分析4.1最大吸收波峰的确定4.2标准曲线的绘制表1 芦丁标准曲线的绘制试管编号 1 2 3 4 5 6 样品100微克/mL芦丁标准样品(mL) 0 1 2 3 4 5 3 95% 乙醇mL 5 4 3 2 1 0 25% NaNO2 (mL) 110% Al(NO3)3 (mL) 1-（摇匀后放置6 min）4% NaOH (mL) 4-（摇匀放置15~20 min）吸光度（Abs）=502 nm 0 0.071 0.161 0.238 0.316 0.411从上图可以看出回归方程的决定系数r2=0.9982，求其平方根得到相关系数r=0.99909。
查找相关系数临界值表，α=0.05时，r0.05(n-2)=r0.05(4)=0.811；α=0.01时，r0.01(n-2)=r0.01(4)=0.917。
由于r> r0.01(4)，说明x与y极显著相关，即标准配制过程无问题或比色操作规范，上述标准曲线可以用于葛根黄酮类物质总含量的测定。
4.2样品中黄酮类化合物总含量的测定结果表2 不同葛根样品中黄酮类化合物的总含量粉葛黄金葛超微粉碎成真试管编号F1 F2 F3 H1 H2 H3 CW1 CW2 CW3 CZ1 CZ2 CZ3 吸光度Abs 0.213 0.259 0.224 0.249 0.251 0.224 0.400 0.415 0.434 0.315 0.298 0.293 黄酮含量（μg/mL）25.4 30.8 26.7 29.6 29.9 26.7 47.6 49.4 51.7 37.5 35.5 34.9黄酮含量平均值（μg/mL）27.628.749.636.0总黄酮得率1933.32011.13469.42516.7（μg/g)或（mg/kg）超微粉碎>成真>黄金葛>粉葛4.3分析由于粉葛及黄金葛的原料都是块状的，实验室的普通粉碎机粉碎后的粉末颗粒较大，特别是黄金葛粉碎后还残留大量的纤维状物质，这些都会影响总黄酮类物质的提取效果。
葛根黄酮的提取
4 展 望
葛根，历来有“千年人参”之美称，可 用于新型中药和功能性保健品的研究和开 发。因此，合理开发利用葛根资源是十分 迫切的和需要的。而传统的提取工艺却不 同程度的存在提取效率低、生产周期长、 对环境污染严重等缺点，不能满足现代化 市场的要求。因此采用微波辅助提取葛根 总黄酮有着显著地潜在优势。
致谢
请各位老师批评指正！
2.5 超声波辅助法
该法是通过超声空化、物质中的微气核振动、 生长和崩溃等过程来完成的。此外，超声波的搅 拌、粉碎等特殊作用，能够破坏植物药材的细胞 壁，从而使溶剂更快的渗透到药材细胞中去，从 而加快原材料中有效成分的溶出。 张尊听等采用超声提取法提取葛根中异黄酮， 并用定性和定量分析方法测定葛根提取物种异黄 酮的有效成分及其质量分数。实验结果显示，较 好的超声提取工艺以甲醇为溶剂，超声30min， 此时总黄酮的提取率为20.6%，产物中总黄酮 的质量分数为50.03%。
2.2 仿生提取法
仿生提取法的原理源于仿生学，以人的胃肠为 基础，模拟口服药经过胃肠道的运转而设计。此 法的目的是尽可能的保留原药材中的有效成分， 符合中药多种有效成分复合作用的特点。 杨欣欣等以葛根素和干膏收率的综合评分为指 标，设计正交实验，考察了搅拌次数、转数、时 间等因素对提取效果的影响。最终得知影响提取 效果的因素依次是搅拌的次数、转数、时间及固 液比。该法提取最佳工艺为固液比1:6，转数为 150r/min,搅拌2次，每次15min,此工艺条件 下，所得产品的葛根素纯度为2.5%。
2.6 微波辅助提取法
微波辅助提取就是利用微波对细胞的辐射 作用和对药材的加热作用，从而加快有效成分 的溶出。 马海乐等以葛根渣为原料，采用微波萃取技 术提取葛根黄酮，实验考察了固液比、乙醇体 积分数、微波功率和作用时间对提取效果的影 响。
葛根黄酮的提取.
班级：12级药学班 答辩者：冯丹华
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论文提纲
第一部分 第二部分 第三部分 第四部分 第五部分
前言 葛根有效成分 葛根总黄酮提取方法 总结 展望
0 前言
葛根（Lobed Kudzuvine Root）为豆科植物野（Puerar Lobalel（willd）.Ohwi）的块根，茎被稀疏的棕色长硬 毛，是中国南方一些省区的一种常食蔬菜，其味甘、辛、 性平，既是中药材又是营养丰富的食用原料。葛根供药用， 具有解表退热、生津止渴、升阳止泻的功能，且能改善血 流指标、解酒及低毒性等药理作用。为进一步提高葛根的 临床药用效果，选用合适的提取工艺显得非常重要，国内 外对葛根总黄酮的研究早有报道，其中对葛根中有效成分 提取的报道也已经很多，本文将对葛根黄酮的提取技术进 行简单综述。
2.3 煎煮法
赵 浩 如 等 用 35mL 水 为 溶 剂 浸 泡 4.5g 药 材 ， 浸 泡 30min ， 煎 煮 25min。过滤，合并滤液，滤液用正 丁醇萃取，减压回收正丁醇后将浸膏 真空干燥即得产品。实验结果表明产 品得率低，而且煎煮过程中会破坏葛 根中的有效成分，可见该法不如上述 两种提取方法好。
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3 总结
比较上述几种提取方法，就提取效率高低而 言依次是微波辅助法85.7%、超声波辅助法 20.6%、超临界流体萃取技术18.5%、回流提 取法9%以上；就产物中总黄酮的质量分数而言 ，超声波辅助法为50.03%，略高于微波辅助法 。但超声波辅助提取过程中会产生噪音，污染环 境，不适合大批量生产，且提取效率明显低于微 波辅助法。综合考虑得出结论：微波辅助提取法 具有高效、节能、操作简单等优点，更适合用于 葛根总黄酮的提取。
葛根总黄酮提取工艺优化及其抑菌与抗氧化活性研究
收稿日期：2022-09-27基金项目：湖北省农业科技创新中心2020年度重大科技研发项目（2020-620-000-002-04）；湖北省现代农业产业技术体系（HBHZD-ZB-2020-005）；恩施州科技计划项目（D2*******；D202100018）作者简介：郑敏（1996-），女，重庆巴南人，在读硕士研究生，研究方向为农产品加工及贮藏，（电话）134****2924（电子信箱）*****************；通信作者，何美军（1979-），男，副研究员，主要从事药用植物天然产物开发及应用，（电子信箱）****************；罗凯（1979-），男，副教授，主要从事食品化学及营养学研究，（电子信箱）***************。
郑敏，苏福联，袁名远，等.葛根总黄酮提取工艺优化及其抑菌与抗氧化活性研究［J ］.湖北农业科学，2023，62（11）：65-72．葛根总黄酮提取工艺优化及其抑菌与抗氧化活性研究郑敏1，2，苏福联1，2，袁名远1，2，刘玉1，2，黄东海1，张巍3，李宇1，廖璐婧1，罗凯2，何美军1（1.湖北省农业科学院中药材研究所/农业农村部中药材生物学与栽培重点实验室/湖北省中药材研发中心，湖北恩施445000；2.湖北民族大学生物与食品工程学院，湖北恩施445000；3.湖北省农业科学院畜牧兽医研究所，武汉430064）摘要：对葛根［Pueraria montana （Loureiro ）Merrill ］总黄酮的抑菌和抗氧化活性进行研究。
采用单因素试验结合响应面法优化葛根的水提工艺，利用紫外分光光度法和高效液相色谱法对葛根总黄酮进行表征，并运用琼脂扩散法和以DPPH ·、ABTS +·和总还原能力为指标评价葛根总黄酮的生物活性。
结果表明，优化后的葛根总黄酮提取工艺为料液比（m ∶V ，g ∶mL ）1∶16，提取时间69min ，提取3次，总黄酮得率为7.690%。
葛根总黄酮含量的方法学研究(1)
葛 根 性 凉、 气 平、 味 甘, 归 脾、 胃 经, 为 豆 科 植 物 野 葛 Pu eraria lobata (W illd . ) Ohw i的干燥根, 其主要活性成分为异黄酮类 化合物, 如葛根素、 大豆 素、 大豆苷、 葛根素 - 7、 木糖甙等。传统中医认为葛 根具有解肌退热, 生津, 透 疹, 升阳止泻的作用; 一般用于治疗外感发热头痛、 项背强痛, 口渴, 消 渴, 麻疹 不透, 热痢, 泄泻等。现代医学研究也表明葛根中的异 黄酮类化合物葛 根素和 大豆苷对 高血压、 高血脂、 高血糖和心脑 血管疾病有一定 疗效, 在医药食 品行 业有着广泛的应用
有手术包等物品归介入医学科统一管理, 合理安排使用并专人 负责维护保养; 所有与造影有关的物品, 介入手术耗材及造影剂等均由介入医 学科负责领取、 记录, 并按产品的厂家型号分类管理。 3. 4 介入科 DSA 室的要求。为保证操作间无菌及环境安静, 对进入 DSA 室的工作人员加以严格管理, 与工作无关 的人严谨入内。 进入 DSA 室的人员 应遵守本市各项规章制度, 服从 DSA 室 的安排, 不 得将 DSA 室的衣 物带出室 外。术后应有病房主管医师跟随护理人员送病人返回病房, 保证病人的安全。 介入医学作为现代临床治 疗学中的 第三大诊 疗体系, 正 以其集影 像诊断 与微创治疗为一体的鲜明学 科特点迅 速发展, 而 随着介入 医学诊疗 技术的不 断发展, 建立独立 的介入医学科, 加强放射医师临 床知识及技能 的培训, 势在 必行, 只有这样 介入 医 学的 地位 才 会不 断 巩固, 介 入医 学 的 发展 才 会 更具 后劲。
葛根总黄酮含量的方法学研究
王 靖
201703
上海中医药大学教学实验中心, 上海
摘要 目的: 研究 中国药典 收载的葛根药材中总黄酮的测定方法。方法: 利用紫外分光光度法测定葛根中总黄酮的含量。结果: 几个不同批次的葛根药 材中总黄酮含量的含量存在较明显的差异。结论: 本文的研究为 中国药典 的进一步修订提供了一定的实验参考依据。 关键词 葛根总黄酮; 紫外分光光度 do: i 10. 3969 /.j issn . 1006- 1959 . 2010 . 07. 255 文章编号: 1006- 1959( 2010) - 07 - 1902- 02 2. 2 标准曲线的绘制: 2. 2 . 1 标准溶液的配制: 精密称取 5m g 葛根素对照品置 10m l容量瓶中, 以 30 % 乙醇溶解定容。以此为母液, 精密吸取 1m l置 25m l容 量瓶中, 以 30 % 乙醇定容。从中分 别 移取 1m l 、 2m 、 l 3m l 、 4m 、 l 5m l溶 液, 以 30 % 乙 醇定 容于 10m l容量瓶中, 配成一系列浓度梯度的对照品溶液。 2. 2 . 2 标准曲线 的绘制: 上述对 照品溶 液, 以 30 % 乙 醇为 参比 溶液, 于 250nm 处测定吸光度值。以吸光度值为纵坐标 y, 葛根素对照品浓度为横坐标 x( mg /m l), 绘制标准曲线, 计算得回归方 程 y= 78 . 9x+ 0. 0286 , r= 0 . 9998 ,线 性范围: 0 . 002mg /m l~ 0 . 010m g /m 。 l 对照品浓度 ( mg /m l) 吸光度 ( A) 2. 3 次, 结果 RSD= 0. 052 %。 试验号 1 2 3 4 5 6 吸光度 (A ) 0 . 323 0 . 322 0 . 322 0 . 323 0 . 323 0 . 323 RSD(% ) 0. 052 0 . 002 0 . 253 0 . 004 0 . 401 0 . 006 0 . 569 0. 008 0. 729 0. 010 0. 878
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ｉ
见 表 １ ２ ３ ， ，。
表１
１ 悬浮干 ７ 的乙醇 中． ０ 加浓 Ｈ （ｔ ｐ ４ ｓ）调 Ｈ ， ！ 脱钙
沉淀 水平
１
因 素水 平表
溶 媒
（ Ａ）
提取时 间
（ Ｂ）
溶 媒量
（ Ｃ）
提取 次数
（ Ｄ）
１
加 ｔ 倍量的乙 ０ 醇回流 ２ 垃滤 ｈ
刻度 ， 摇匀 。吸取 上述 溶液 １ 置 １ｍ 容量 ０ｌ 瓶 中 ， 甲醇稀释 至刻度 。 用 ３ ２ 标准 曲线 的绘制 ： ． ］吸取 上述 标准溶液
０ ０ ２ ０ ４ ０ ６ ０ ８ １０ ］ 别 置 于 １ｍ］ ， ． ，． ， ． ， ． ，． ｍ 分 ０ 量 瓶 中各 加 甲醇至 １０ ， 加蒸馏 水 稀释 ．ｍｌ再
ｍ 版杜 Ｉ ？，
。
、 板 蓝 根 制 剂 提 取 工 艺 及 检 测 方 法研 究 概 况 Ｍ 川 Ｉ １ …
广东新 兴 中药学校（ ２４ ０ 温博 栋 ５７０ ）
《 本草 纲 目》 载 ： 蓝根 主 治“ 气头 记 板 时 痛， 火热 口疮 、 病发 斑 、 热 热毒 下痢 、 喉痹 、 丹 毒、 疸、 黄 痄腮 … …。 现代药 理 实验 证 明 ： ” 板 蓝根 具有抗 菌 ， 抗病毒 ， 热 ， 炎和增 强 免 解 抗 疫等作用 。板蓝根 和以板 蓝根为主的复方制 剂有 ： 浸膏 溶液 、 浆剂 、 糖 片荆 、 注射 剂 ， 眼 滴 剂、 合剂、 冲剂 、 滴鼻剂 、 袋泡荆等 ［。为促进 １ 一 板蓝根 制剂 质量的 提高 ， 现将近 年来板 蓝根 制 剂提 取工艺 及 含量检 测方法 的研 究 概况 ，
方 法 和 结 果
『 药材量的 ３１ 的碱式酷酸铅 ， 加原 ／０ 搅拌， 静
ｆ 过滤 置，
】 一 Ｊ ●
滤 液
沉淀
ｌ 悬浮于 ７ 乙醇中， ｏ 加＾原药材量的 ９ ／ ｌ 的 Ｎ ２ 搅拌 ． ， ２ ５ ａｓ 静置 脱铅
ｌ —
Ｊ
沉淀
Ｉ
１ 提取 工艺 １１ ． 水提法 ：
Ｉｏ ８ ９１ ．ｏ １ ６７ ４５ ３． ３ ８ ８４ ｏ ７ ．４ ９８
１．２ ２ ２ ５９ １ ２ ０７ ３． ３ １ ００ ８ ． ４ ｏ． ２ ６ １５
２．７ ０ ８ ４０
Ｒ—ｌ ｊ １ ｊ ＰⅡ Ｓ 一 Ｒｊ８ ／
１ ． ９１ ６２ ４
２０ ４ ． ３５
吼 ４ ９７ ６
表５
Ａ
Ｂ
方差 分析表
直至 ！堕
２．０ ４ ３６ ｏ ６７ ．４ ９ ｏ １ ．４ ７１ ｏ． ９ ３ ７ ４６ ７ ． ０
５８ ．ｍｇ于 ５ ｌ 瓶中 ， ｍ量 加甲醇溶 解并 稀释至
显要丝
２ ０ ６ ６ ０ 极 显著 ． ３ ４１ ． ３
ｏ． ７ ３． ８ ４ｉ １ ２ ｏ ２４５ １ ９ ７ ．３ ｏ ２６ １ ８ １ Ｏ． ９ ３ ７ ４７ ｇ ． ８ ｎ １ ５６ １ ２ ｎ １ ７１ ２
铅 ３ 的 性 酸 比 理 ，率 ２ ： 药杂，３（２ 和 ｏ 碱 醋 铅 较 想得 较 呈 学志９２） ｌ，５ ９８１
在实验过 程 中 ， 们发 现有些 酚类物 质 我
／ ＼ 不被 乙酸铅沉淀 ， 并且脱 铅后形成 的铅盐 有
４ 冀春 等． 药 实验技 实验， 南科 术 茹． 中 化学 术与 河 学技
高。
较 高 的吸附性 ， 为此我 们还进 行了聚 乙烯 吡 咯烷酮 作沉 淀剂 ， 初步效果 比较 理想 有关参 数 尚需进 ～步研 究 。 参 考 文 献 成都中 医学院 编， 药鉴定 上海科 技术出 杜 主 中 学， 学 版
３ 中国医学院药学研究所， 医药研究通讯， ７ ２： １ ２ ）４ ９ １
维普资讯
葛根 总黄酮提取 工 艺研 究 卜
陕西 中医学院 （１ ０ ３ 王 昌利 薛 ７２８ ） 罗宏锁
提要 通过两水平 四因素的正交试验优选出了葛根总黄酮提取的最佳工艺， 即加原药材 ８ 倍 量的 ７ 的 乙醇 ， ０ 幔泡 １ ｈ提 取 ３ ， 次 ２ 。 工艺 省时 ， ２， 次 每 ｈ 该 且得 率较 高 。 对葛根 总黄酮 的 并
３ 含量 测定
表４
３１ 标准品的配制： 啬称 ． 精 取葛 根素标准品 表４ 。
正 交试 验 各 次提 取物 的含 量
４ 薄 层分 析 以含 量测 定样 品作为薄 层分 析 试样 ， 于硅胶板 （ 点 硅胶 Ｇ 加 ０２ ＭＣ ． ￣Ｃ － Ｎａ 铺制 ） ， 上 以标准 品葛 根索作 为对照进 行
～
量， 浓缩过程 损失率 最高达 ９ ． 。将 药液 ２４ 制成 浸 膏 ， 移率 仅为 ３ ３ ～ｌ ， 失率 转 ． ３ 损 最高达 ９ ． 。数据 表 明 ： 醇法 的醇沉 杂 ６７ 水
质 中还含有大量 的靛玉红 ， 煎煮 、 且 浓缩受热 环节 多 ， 效成 分损失量大 ， 有 有必要寻求 另外 的提 取工 艺［ 。 ４ Ｊ １ ｚ 渗 漉法 和水 醇法的 比较 ．
醇浓 度作渗漉溶 媒 ： 用梯度 为 １ 的 乙醇溶 Ｏ 液 作溶媒 。分别 用渗漉法提取板蓝根综合有 效成分 当乙醇浓度为 ７ 时 ， Ｏ 氨基酸 和靛 玉红均有最 高提 取率 口 。与水醇法 中最佳 乙 ］ 醇浓 度为 ７ 相一致 进 一步做板蓝根有效 Ｏ 成分提 取对 比试 验 ： １ ｚ １ 渗 漉法 ： 板 蓝根 粗粉 １ ０ ， ．． 取 Ｏｇ ６倍量
根据 统计 正交试验 方差 分析 ， 选表 中 求 Ｓ Ｓ位 置 最 小的 ０ １８ ．２ ５和 ０ １５ ． ２ ６为误 差 的 近 似估 计 ， ｓ 即 ＝０ ２ ４ ， 表 知 ： （ ， ． ５１查 Ｆ １
２ 一８ ５ 。 ） ． ３
０ ７ ９ ０ ９ １ 以吸收 度对 浓度作 标 准 曲线 。 ． ８ ，． ６ ， 用最小二乘 法经线性 回归 ， 其方程 为 ：
水 液 回收醇
娜原药材一半量的中性醋酸铅 ． 搅拌 ， 静置， 过滤
沉 淀 滤液
葛根 （ 自省药材公 司 ， 购 经生药教研室鉴 定 为豆科植物野 葛 Ｐ ｅａ ａＬ ｂ ｔ ｗｉｄ ｕｒＨ ａａａ（ ｌ ） ｌ
Ｏ ｗ 的干燥 根 ）对照 品 ： ｈｉ ； 葛根素 （ 西安市药 品检验所提供 ）７ １ 型分光光度计 （ ；５Ｇ 上海第 三 分析仪器 厂 ）层析 用硅胶 Ｇ（ 岛海 洋化 ； 青 工 厂）其它试剂均为分析纯 。 ；
薄 层分 析 ， 氯仿一 甲醇一 水 （ ２ ５： ． ５ ７： ． ０ ２ ）
察荧光 ， 品与标准 品在相 同的位置 上 且均 样 呈 黄绿 色荧光 。 喷显色剂 ： 三氯化铁 —铁氰化 钾 液 ， 品与标准 品均显蓝色斑点 且同位置 。 样
结论与讨论 通 过 正 交 试 验， 出最 佳 工 艺 为： 选
含量 进行 了｛ 。 鲥定
关蝴
塑
墼
合并 液
葛根 为豆科 植 物 野 葛 Ｐ ｅａ ａ ｕ ｒＨ 缸 （ ｉ ｄ Ｏ ｗ 的根 ， 中医 常用 的祛风解表 ｗｌ ） ｈ ｉ ｌ 是 药 ： 葛根 味甘辛 ， 。 性平 ， 具有 降低血管阻力 ， 改善脑及冠 脉循 环 ， 降低 心肌耗 氧 量等药理 作用 。 近年来 ， 采用葛根 乙醇浸 膏片和葛根 总黄酮注射 液治疗 伴有颈 项强痛 和头 痛 ， 头 晕 的高血压病 ， 心胶 痛和 突发性 耳聋 等均有 显著 良效 。我们对葛根 中的总黄酮提取工 艺进 行 了系统的研 究 ， 提 出了一 条模拟大 并 生产 的最佳工艺及参数 。
选择 最佳 乙
法（ 以下简称水醇法 ） 提取综合 有效成分。也 有少 量制剂采用水煎水沉 法、 渗漉法 一些 生 产冲剂的厂 家为解 决水 溶性 问题 ， 水醇 法 在 的基础上再增加一 次水 沉 因此 ， 察不 同 ］ 考 提取 工艺对板 蓝 根制 剂有效 成分的 影响 ， 从
而选 择最佳提取 工艺则 成为研究的方向 。
Ａ × Ｂ
Ｃ
Ａ ×Ｃ
ｏ ２４ ７ ． ５
ｏ 船５ ．１ ｏ． ９ ４７ Ｂ ｏ． ２ ６ １ ５ ｏ ５１ ．２ ４
Ｂ×Ｃ
Ｄ
误差 ｅ
至刻度 ， 匀 。以 ０ 摇 号作空 白对 照 ， ２ ０ ｍ 在 ５ａ
处测 吸收 度 。结果 为 ０ ２ ８ ０ ３ ２ ０ ５ ２ ．０ ，． ９ ，． ９，
１ ． ０７ ４６ １ ３ ７５ ． ７６
１ ． ６ ４ ３９ ５ ｉｉ ０ ０１ ．６ ３３ ４ ． ３６ ｏ ４１ ． ７１
１ ７１ １ ｏ６ １３ ６ ６０ ．７ １ ６４ ９ ５ ｏ． ４ ７ ２５
１．４４ ３２２ １ ２１ ２ ０ ４ １ ０ ８２ ．２ 吼 １ ８５ ２
ｙ＝ ０ ０ ７ ＋ ８ ． ￣ ８ ２ ７ 一 ０ ９ ９ 。 ． １５ ２ ０ ５ ６０ ｘ ． ９ ７
通 过 上 述 可 得 出 最 佳 工 艺 参 数 为 Ｂ 。 即用原药材 ８ 倍量的 ７ 乙醇 浸 ０ 泡 １ｈ后 ， 取 ３次 ． 次 ２ ， 得 率 为 ２ 提 每 ｈ其
玲水 浸泡 １ ｈ水煎煮 ２．
藤１ ｆ 唐
ｌ
溶液
１— Ｉ
１Ⅱ ０ 力 ７ ％乙醇热 回流 ２ ， ｈ过滤
Ｉ
球液 沉淀
合并液 ｌ 减压浓缩
浓 缩液
醇液 （ 回收 ）
Ｊ ５ 己 重｝ 过 ％ 醇 ９ 昂， 滤
沉 淀 总黄酮 ）
２ 提取工艺条件优选 滤霰
实 验 材 料
．
ｊ 一
Ｉ 加氪水调 ｐ ７静置， Ｈ， 过滤
流涟
溶液 ｆ 藏压浓缩 浓 缩液 ，５ ９ 乙醇重结晶， 过滤
醇疲 弼 ——■ 韵 １２ 醇 提 法 ： ．