微生物实验报告2012

在芽孢观察实验中，你认为哪些步骤是重要的？还可以需要做哪些改进吗？
2、根据阅读材料，请比较几种芽孢染色制片方法的优缺点？
三、自评表
实验内容
荚膜 的染色 与观察
实验操作
自评分
（5 分）
1、取菌时，是否挑取培养基表面
粘稠的菌落
2、菌落固定是否用火烧
理由
3、染色后菌落是否刮成一薄层
芽孢 的染色 和观察
4、取菌时，是否近火无菌操作）
2．与传统的生理生化应结合，简述分子生物学对于微生物多样性研究的优缺 点？
三、自评表
实验内容

实验操作
评分 理由
（满分５分）
1、是否严格按照步
骤操作
2、提取的基因组大 基因组提取 小是否大于10Kb
凝胶电泳
4、是否可以能独立进行 制胶、点样、电泳的操 作
实验十 细菌 16S rRNA 基因扩增及分类鉴定 一 结果记录
３、环境样品中的微生物检测
环境来源
菌落形态
细菌形态
革兰氏染色结果
二、思考题 1、在使用光学显微镜时，当物镜由低倍转向油镜时，视野的亮度是增加还是
减弱？应如何调节？
2、结合阅读材料，分析影响革兰氏染色结果的因素？并设计最优的染色 条件。
3、你从哪种环境中分离到了微生物，通过染色它是什么形态的？是革兰氏阳 性菌还是革兰氏阴性菌？从这个实验你得到什么启示？
三、 自评表
实验内容
实验操作
评分 理由
（满分５分）
1、涂片厚度是否均匀 革兰氏染色
2、脱色掌握的是否合适
1、取放显微镜是否规范
2、显微镜观察是否双眼睁开
3、从低倍镜到油镜的观察顺 显微镜的使用
序
4、油镜使用完成后镜头的清
理
实验三 细菌特殊结构的观察
一、结果记录 1、绘图并说明钾细菌菌体及荚膜形态特征。
放线菌 的观察
实验操作
自评分
（5 分）
1、线菌载玻片有菌丝的一面是否
朝上放置
2、否在油镜下观察到放线菌菌丝
理由
霉菌 的观察
3、青霉、曲霉菌落的取样点是否 正确
4、青霉、曲霉菌落挑取时操作是 否无菌操作，挑取是否规范
5、根霉观察时是否低倍镜下观察
一、结果记录
实验六 物理、化学因素对微生物的影响
影响因素
1. 你们组所做的凝胶图像记录下来，并分析 PCR 结果。
2. 将你的测序结果记录下来，并通过生物信息学方法确定菌株的分类
二 思考题
1. 细菌利用 16S rRNA 基因进行分子分类的依据是什么,这种分类方式有什么优 缺点?
三、自评表
实验内容
实验操作
评分 理由
（满分５分）
1、是否按照先计算扩增
体系，总体配制，再分
装的顺序进行
PCR 扩增
2、扩增过程是否无菌 3、PCR 扩增中如果不要
老师或同学提醒是否能
想到设置阴性及阳性对
照
菌名： 所观察结构： 放大倍数： 2、 绘图并说明苏云金杆菌的形态特征（包括芽孢形态、着生位置及芽孢囊形态）。
菌名： 所观察结构： 放大倍数： 3、绘出细菌的细胞壁、聚β—羟丁酸、异染粒和细拟胞核简图。
菌名： 所观察结构： 放大倍数：
二、思考题 1、为什么观察芽孢时要加热？为什么不同片子上看到的颜色分布和比例不同？
微生物学实验报告
姓 名： 学 号： 班 级：
实验一 培养基的配制和灭菌
一、思考题 1、固体培养基对菌体的生长有什么优点？
2、高压蒸汽灭菌中需要注意哪些事项？对不同的培养基灭菌方法有什么异同 吗？
3、根据阅读材料，培养基优化时应考虑下哪些因素？
二、自评表
实验内容
培养基 的配制
实验操作
自评分
（5 分）
5、孔雀石绿染色时，是否在水浴 锅上蒸汽加热 6、使用油镜时是否能很快找到视
野
实验四 酵母菌和细菌的大小的测量及计数
一、结果记录
1、记录并计算自己视野中酵母菌的大小。
长度 宽度
1
2
3
4
5
平均
2、计算所使用的啤酒酵母菌悬液中酵母菌的数量，将显微计数结果记录表中
各中格菌数
中格总菌数 稀释倍数 菌数/mL
２、你所选用的抑菌因素是哪一种？效果怎样？请对你的实验结果进行分析。
实验七 环境中细菌的分离与纯化 一、结果记录 １、记录你所分离的微生物的方法及相关培养条件
分离对象 样品来源 分离方法 培养基 培养温度 培养时间
２、记录你所分离到微生物的数量及形态结构 所分离菌株 最 佳 稀 菌 落 每克样品中相应微 菌落形态 染色结果 释梯度 数量 生物的活菌总数的
1、 培养基的各成分是否按顺序溶
解完一种再加入第二种
2、 培养基调 pH 时是否进行了回
调
3、 培养基定容时体积变化对 pH
的影响是否很大
培养基 的灭菌
1、灭菌时，是否所有的培养基可 以同时灭菌
2、手动灭菌时，灭菌锅内是否进 行排冷空气
3、灭菌时，温度维持是否完好（
4、灭菌后，是否等压力下降为 0 后打开灭菌锅
菌名： 所观察结构： 放大倍数： 2、绘出所观察到的根霉的假根、匍匐枝、孢子囊柄、孢子囊及孢囊孢子
菌名： 所观察结构： 放大倍数： 3、绘出所观察到的黑曲霉的足细胞、分生孢子梗、顶囊、小梗和分生孢子
菌名： 所观察结构：
放大倍数： 4、绘出所观察到的青霉的分生孢子梗、小梗及分生孢子
菌名： 所观察结构： 放大倍数： 5、绘出所观察到的酵母菌的形态及出芽生殖时的形态
2、混合菌液的稀释是否成
菌落的分离纯化 梯度
3、划线操作是否能划出单
菌落
4、培养基倾 倒 时，温度
微生物的培养
是否合适 5、培养皿在培养箱中是否
倒置培养
理由
实验八 细菌的生理生化反应
一、结果记录
将试验结果填入下表：
大肠杆菌
自分细菌 枯草芽孢杆菌
吲哚反应
甲基红反应
VP 反应
柠檬酸反应
淀粉水解
糖类发酵
菌名： 所观察结构： 放大倍数： 二、思考题 1、用插片法观察放线菌有何优点？你还可以用其他方法对放线菌进行观察吗？
2、你是否可以观察到的放线菌的气生菌丝和基内菌丝？在高倍镜和油镜下二者 有什么区别？
3、你观察到的几种霉菌菌落有什么区别？如何才能在显微镜下观察到他们的完 整的形态结构？
三、自评表
实验内容
1 234 5
第
啤
1
酒
室
酵
第
母
2
室
二、思考题 1、为什么更换不同放大倍数的目镜和物镜时需要用镜台测微尺对目镜进行重新
标定？
2、为什么计数室内不能产生气泡？需要从哪些方面进行注意？
3、现有两份河水样品，请设计实验测定其中的微生物总数？
三、自评表
实验内容
细菌大小 的观察
实验操作
自评分
（5 分）
1、微尺的安装是否有刻度的一面
硫化氢产生实验
明胶水解
硝酸盐还原
对照
二、思考题 １、根据形态、生理生化等特征鉴别一下你自己分离细菌是什么细菌？
２、在细菌生理生化检测中，为何要设置空白对照？这对你在今后的实验设计中 有何启示？
实验九
细菌基因组的提取与检测
一、结果记录 将你们组所做的凝胶图像记录下来，并估算提取的基因组大小。
二、思考题 1．革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌提取基因组DNA的方法有何不同，为什么？
二、思考题 １、在进行划线分离培养时，为什么每次都要将接种环上多余的菌体烧掉？
２、不同的自然环境中生活着不同类型的微生物，如果希望你筛选具有分解油脂 能力的微生物，你会从哪些地方进行采样？并参考文献资料，设计简单的分 离鉴定方法。
三、自评表
实验内容
实验操作
评分 （满分５分）
1、涂布的微生物是否均匀
5、本人认真的参与了本小组的任 务，确认实验结束后离开。
理由
实验二 光学显微镜的使用和细菌形态观察
一、 结果记录
1、细菌简单染色和形态观察
菌名
染液名称
菌体颜色
放大倍数
菌体形态
绘图结果：
细菌名称： 放大倍数： 2、 革兰氏染色结果
细菌名称： 放大倍数：
菌名 大肠杆菌 枯草芽孢杆菌
菌体颜色
G+或 G-
紫外线
0.5
5 氯化钠（％）
10
20
3
5
pH 值
7
9
11
0.1%氯化汞
化学药品
2%新洁尔灭 0.05%结晶紫
5%石炭酸
大肠杆菌
枯草杆菌
自选试剂
“－”表示细菌不生长，“＋”表示生长情况较差，“＋＋”表示生长情况一般，“＋ ＋＋”表示生长情况良好
二、思考题 １、通过你的实验，请举例说明还有哪些人类常用的用于抑制微生物生长的措施， 并说明这些措施的主要原理。
朝下
2、微尺的刻度能否在高倍镜下调
至和目微尺的刻度平行
理由
细菌 的计数
1、能否正确找到血球计数板的技 数区 2、菌液时菌液是否混匀并通过毛
细作用进入计数室 3、样品在进行梯度稀释时，是否
均匀
实验五 放线菌和真菌的形态观察
一、结果记录 1、绘出所观察到的放线菌“5406”的气生菌丝、孢子丝和孢子的形态