2017-2018学年高中生物第一部分微生物的利用 1.1 大肠杆菌的培养和分离(2)素材浙科

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《步步高》2017-2018学年高二人教版生物选修一课件：专题整合提升：专题2 微生物的培养与应用

高温的物品
例1 下列有关微生物培养与应用的说法，正确的是 A.天然培养基是指直接取自自然界不需加工的培养基 B.接种前需对培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手等
进行严格
的灭菌处理 C.大肠杆菌的纯化培养过程包括培养基的配制和纯化大肠杆菌两个阶段 D. 分离分解尿素的细菌时，尿素是培养基中唯一的氮源和碳源解析天然培养基是成分不明确的培养基，并不是不需加工配
制的培养基；实验操作者的双手需进行消毒处理；分离分解尿
素的细菌时，尿素是唯一氮源但不是唯一的碳源。
解析
答案
例2
微生物培养过程中，要十分重视无菌操作，现代生物学实
验中的许多方面也要进行无菌操作，以防止杂菌污染，请分析下
列操作，错误的是
①煮沸消毒可以杀死微生物的营养细胞和部分芽孢 ②接种操作要在酒精灯火焰附近进行 ③家庭制作葡萄酒时要将容器和葡萄进行灭菌 ④培养基要进行高压蒸汽灭菌 ⑤加入培养基中的指示剂和染料不需要灭菌 A.① B.②③ C.③④ D.③⑤
紫外线消毒法
30 W紫外灯照射 30 min
接种室空间消毒微生物接种工具如接种环、
灼烧灭
菌法
酒精灯火焰灼烧
接种针或其他金属用具等，
接种过程中试管口或锥形瓶口等玻璃器皿(如吸管、培养皿
干热灭干热灭菌箱160～等)、金属用具等凡不适宜菌法高压蒸 170 ℃加热1～2 h 用其他方法灭菌而又能耐
为异养型，所以培养基中加了乳糖等含碳有机物。由于生物的变异具有不定向性，且通过图示可以看出，将A试管中10 mL菌液先均分到50支试管
中再培养24 h以后涂布到50个含噬菌体的平板上，菌落数有了明显差异，
说明抗性发生了差异；B试管中10 mL菌液先一起培养24 h后再均分为50份

2018高中生物浙江专用浙科版选修一课件第一部分微生物的利用1-1

答案 (1)无菌水 10 (2)a.酒精灯火焰 b．平行连续
c.
第一次灼烧
每次划线之前灼烧划线结束时灼烧
目的
杀死接种环上原有的微生物
杀死上次划线后接种环上残留的菌种，使下次划线的菌种直接来源于上次划线的末端，使每次划线后菌种数目减少
杀死接种环上残存的菌种，避免细菌污染环境和
感染操作者
将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而能在培养皿表面形成单个菌落
(2)大肠杆菌的培养和分离应注意的几个问题 ①在倒平板过程中，不能将培养基溅在皿壁与皿盖上，防止杂菌污染。 ②本实验需设置空白培养基在相同条件下一起培养，以确定是否有杂菌污染。 ③培养皿倒置的目的是防止皿盖上的水珠落入培养基中难以形成单菌落。
第1课时大肠杆菌的培养和分离
【学考报告】
知识内容考试属性
考情解读
大肠杆菌的培养和分离
加试
1.进行大肠杆菌的扩增，利用液体培养基进行细菌培养的操作。 2.进行大肠杆菌的分离，用固体平面培养基进行细菌的划线培养。 3.说明大肠杆菌培养的条件和实验原理。
一、微生物培养的微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。 (2)种类
根据微生物的代谢特点，鉴别不同种类的
鉴别培养基在培养基中加入某种指示微生物
剂或化学药品
(3)成分：一般都含有水、碳源、氮源和无机盐等最基本的
物质，有时还需要加入特殊的营养物质。
2．无菌技术 (1)含义：无菌技术不仅能防止实验室的培养物被其他外来微生物污染，保持微生物的纯培养，而且在分离、转接时亦能防止其他微生物污染。 (2)无菌操作 ①对实验空间、操作台可用紫外线或酒精消毒，操作者的手用酒精消毒。 ②实验用的培养器皿和培养基一般用高压蒸汽灭菌法灭菌，接种环用灼烧方法灭菌。 ③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行。 ④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。

2018版高考生物大一轮复习教师用书：选修①专题1第02讲微生物的培养与利用

第02讲微生物的培养与利用考点一微生物的实验室培养知｜识|链|接1．培养基(1)概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质.（2)营养组成:一般都含有水、碳源、氮源和无机盐。

此外，还需要满足微生物生长对pH、氧气以及特殊营养物质的要求.2．无菌技术(1)关键:防止外来杂菌的入侵。

(2）不同对象的无菌操作方法（连线）3．大肠杆菌的纯化培养(1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基计算→称量→错误!→灭菌→倒平板(2)纯化大肠杆菌的方法①纯化培养原理：想方设法在培养基上得到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的菌落,即可获得较纯的菌种.②纯化大肠杆菌的关键步骤：接种。

③常用的微生物接种方法有两种a．平板划线法：是通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面.b．稀释涂布平板法：是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。

（3）菌种的保存方法①对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法。

②对于需要长期保存的菌种，可以采用甘油管藏的方法。

题｜组｜微|练1．微生物培养过程中，要十分重视无菌操作，现代生物学实验中的许多方面也要进行无菌操作，防止杂菌污染，请分析下列操作中错误的是( )①煮沸消毒可以杀死微生物的营养细胞和部分芽孢②接种操作要在酒精灯火焰附近进行③无菌繁殖脱毒苗时，植物的外植体要进行消毒④家庭制作葡萄酒时要将容器和葡萄进行灭菌⑤培养基要进行高压蒸汽灭菌⑥加入培养基中的指示剂和染料不需要灭菌A．①③ B．②④C．③⑤ D．④⑥解析无菌操作包括消毒和灭菌.需进行消毒处理的有植物的外植体及操作人员的双手等，需进行灭菌的有器皿、培养基、添加剂（指示剂和染色剂)等。

煮沸可以杀死微生物的营养细胞和一部分芽孢，属于消毒；为防止空气中杂菌污染,接种时要在酒精灯火焰附近进行；家庭制作葡萄酒时所利用的微生物是葡萄表面的酵母菌，故不能灭菌；培养基常进行高压蒸汽灭菌.故④⑥操作错误。

高中生物浙科版配套课件：选修1 第一部分微生物的利用

有LB培养基和尿素培养基的培养皿中，并用
玻
培养:倒置培养皿，在37 ℃恒温箱中培养24 h～48 h。
观察:培养基中菌落数量。
3. 实验分析
(1)样品稀释: ①稀释原因:样品的稀释程度直接影响平板上生长的菌落数目。当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。因此，恰当的稀释度是成功地统计菌落数目的关键。 ②稀释标准:选用一定稀释范围的样品液进行培养，保证
【高考警示】不同器具选用的灭菌方法不同 (1)接种环、接种针、试管口等使用灼烧灭菌法。
(2)培养基、无菌水、玻璃器皿等使用高压蒸汽灭菌法，
所用器械是高压蒸汽灭菌锅。 (3)表面灭菌和空气灭菌等使用紫外线灭菌法，所用器械是紫外灯。
考点二
大肠杆菌的培养和分离
1. 培养和分离实验步骤
步骤
具体操作将50 mL LB液体培养基、50 mL LB固体培养基和培养皿进行高压蒸汽灭菌在酒精灯火焰旁将固体培养基倒入4个灭菌的培养皿中，并水平放置使之形成平面
操作
第一次灼烧避免接种环上
划线结束后灼烧杀死接种环上
目的
可能存在的微
生物污染培养
残留的菌种，
避免污染环境
基
和感染操作者
(2)灼烧接种环后，需要等接种环冷却才能伸入菌液，以
免温度太高杀死菌种。
考点三
分离以尿素为氮源的微生物 1. 实验原理
(1)以尿素为唯一氮源的培养基培养细菌时，只有含有脲
酶的细菌能够正常生长，据此可分离出以尿素为氮源的微
生物。 (2)细菌合成的脲酶能将尿素分解成NH3，使pH升高，使酚红指示剂变红。
2. 实验步骤

[配套K12]2017-2018年高中生物第1部分微生物的利用实验1 大肠杆菌的培养和分离学案

实验1 大肠杆菌的培养和分离一、大肠杆菌 1．大肠杆菌是革兰氏阴性、兼性厌氧的肠道杆菌。

2．在肠道中，大肠杆菌一般对人无害，但也有一些菌株可以侵袭肠黏膜并产生毒素，任何大肠杆菌如果进入人的泌尿系统，都会对人体产生危害。

3．大肠杆菌是基因工程技术中被广泛采用的工具。

二、实验内容1．本实验的内容是将大肠杆菌扩大培养和划线分离。

分离后，一个菌体便会形成一个菌落，这是消除污染杂菌的通用方法，也是用于筛选高表达量菌株的最简便方法之一。

2．本实验用LB 液体培养基(通用的细菌培养基)扩大培养大肠杆菌。

培养后再在LB 固体平面培养基上划线进行分离，随后培养基上便会形成一个个单独的菌落。

三、细菌的培养和分离1．细菌以分裂的方式繁殖，分裂速度很快，约20分钟分裂一次。

人们在培养细菌时，一般用接种环转移带菌的培养物。

接种时，先将接种环在明火上烧红后冷却，再操作。

2．细菌的分离(1)划线分离法：在液体培养基中，只要接种后培养8 h ，每毫升培养基中就有几亿个细菌。

可用接种环蘸菌液在含有固体培养基的培养皿平板上划线，在划线过程中接种环上的菌液逐渐减少，因此，划线到最后，可使细菌间的距离加大。

在固体培养基培养10～20 h 后，可由一个细菌产生单菌落，菌落不会重叠。

如果再将每个菌落分别接种至含有固体培养基的试管斜面上，在斜面上划线，则每个斜面的菌群就是由一个细菌产生的后代。

这种方法也可用于分离细菌，将污染的杂菌除去。

接种环在取菌种前和划线前都要灼烧、而后都要冷却、操作完毕后又要灼烧的原因是什么？【提示】取菌种前灼烧接种环的目的是消灭接种环上的微生物；除第一次划线外，其余划线前都要灼烧接种环的目的是消灭接种环上残留菌种；取菌种和划线前都要求接种环冷却后进行，目的是防止高温杀死菌种；最后灼烧接种环的目的是防止细菌污染环境和操作者。

(2)涂布分离法：先将培养的菌液稀释，通常稀释10－5～10－7倍，然后取0.1 mL不同稀释度的稀释菌液加在培养皿的固体培养基上，用玻璃刮刀涂布在培养基平面上进行培养，在适当的稀释度下，可产生相互分开的菌落。

20162017版高中生物第1部分微生物的利用综合测评浙科版选修1

综合测评(一)实验室守则生物技术概述第一部分微生物的利用(时间：60分钟，满分：100分)一、选择题(每小题3分，共51分)1．根据实验室守则，下列做法错误的是( )A．用试管加热任何东西时，试管口不能朝向任何人B．微生物实验必须严格进行无菌操作C．若有细菌培养物泼洒出来，应迅速擦拭D．用过的培养物都必须经过高压灭菌后再作处理【解析】若有细菌培养物泼洒出来，不能随意擦拭，应该先用纸巾盖起，再用漂白粉溶液使纸巾湿透，放置15～20 min，然后用适当的方法清除。

【答案】 C2．下列关于基因工程的叙述，正确的是( )A．基因工程经常以抗生素抗性基因为目的基因B．细菌质粒是基因工程常用的载体C．通常用一种限制酶处理含目的基因的DNA，用另一种限制酶处理载体DNAD．连接酶的主要功能是将黏性末端碱基之间的氢键连接起来【解析】培育的转基因生物不同，选用的目的基因就不同，不一定以抗生素抗性基因为目的基因。

只有用同一种限制酶分别处理含目的基因的DNA和载体，才能切割出互补的黏性末端，才可以用DNA连接酶将目的基因与载体连接起来。

连接酶连接的是磷酸二酯键，不能用于连接氢键。

【答案】 B3．下列与生物技术发展历史过程或应用相关的叙述不正确的是( )A．4世纪葛洪所著《抱朴子》一书中记有“海藻酒疗瘿”，是利用了海藻中的“碘”治疗甲状腺肿大B．7世纪的孙思邈用猪肝治疗雀目，现在看来就是用猪肝中储存的维生素A治疗色盲症C．以原核细胞或真核细胞为生物工厂生产产品如人的白细胞介素等，应属现代生物技术D．用传统生物技术也可生产出无菌产品如抗体、疫苗、酶等【解析】用猪肝治疗雀目，实际是利用了猪肝中含量较丰富的维生素A治疗维生素A 缺乏症——“夜盲症”，而不是“色盲症”。

【答案】 B4．获得纯净培养物的关键是( )A．将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌B．接种纯种细菌C．适宜条件下培养D．防止外来杂菌的入侵【解析】进行微生物培养，获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵，为此需做到无菌操作。

高二生物 1.1《微生物的利用》学案(浙科版选修1)

第一部分微生物的利用（是重点）一、课标内容：进行微生物的分离和培养二、教学要求：三、知识要点：1，微生物是指结构简单、形体微小的单细胞、多细胞或没有细胞结构的低等生物，包括病毒、原核生物、原生生物和某些真菌。

细菌是单细胞的原核生物，有细胞壁（肽聚糖）、细胞膜、细胞质，无成型的细胞核，只有一环状DNA分子（拟核）。

以分裂（二分裂）的方式繁殖，分裂速度很快。

用革兰氏染色法将细菌分为革兰氏阳性菌（革兰氏染液染色后，再脱色处理，细菌仍保留染色液的颜色）和革兰氏阴性菌两大类，区别在细胞壁的成分不同。

大肠杆菌是革兰氏阴性（细胞壁薄，有荚膜）、兼性厌氧的肠道杆菌。

*2，细菌的分离方法有两种：划线分离法和涂布分离法。

是消除污染杂菌的通用方法，也是用于筛选高表达量菌株的最简便方法之一。

划线分离就是用接种环蘸菌液后在含有固体培养基的培养皿平板上划线，在划线的过程中菌液逐渐减少，细菌也逐渐减少，。

划线最后，可使细菌间的距离加大。

将接种后的固体培养基培养10～20小时后，一个细菌细胞就会繁殖成许多细菌细胞，形成菌落，不会重叠。

在斜面上划线，则每个斜面的菌群就是有一个细菌产生的后代。

用于基因工程的大肠杆菌的工程菌，可以用划线分离法获得产物表达能力高的菌株由于工程菌的质粒中通常有抗性基因（如抗氨苄青霉素基因），如在培养基中加入一定量的氨苄青霉素，由于非工程菌的其他杂菌都没有抗性基因，所以在划线后只有存在抗性基因的工程菌能生存下来。

涂布分离时，需要先将培养的菌液稀释，通常稀释到10-5～10-7之间，然后去0.1ml不同稀释度的稀释菌液放在培养皿的固体培养基上，用玻璃刮刀涂布在培养基平面上进行培养，在适当的稀释度下，可产生相互分开的菌落。

通常每个培养皿中有20个以内的单菌落为最合适。

将每个菌落分别接种在斜面上扩增培养后，再做功能性实验。

划线分离法，方法简单；涂布分离法，单菌落更易分开，但操作复杂。

3，在培养微生物时，必须进行无菌操作。

高中生物第一部分《实验一大肠杆菌的培养和分离》课件13 浙科版选修1

• 1.分类(按物理形态分) • (1)液体培养基 • (2)固体培养基
①常用的固体培养基:
琼脂固体培养基. ②微生物在固体培养基
表面生长,可以形成
肉眼可见的菌落.
第七页，共38页。
2.培养基内所含的基本物质
• (1)水 • (2)碳源
• (3)氮源
• (4)无机盐
第八页，共38页。
3.培养基内所需的其他条件 • (1)pH值 • 如:培养霉菌需酸性、培养细菌需中性或微碱
α-固定化酶的使用 α-固定化酶条件和效果
枯草杆菌
果酒和果醋的制作果酒:酵母菌+天然干酵母果醋:醋化醋杆菌菌种或醋曲
泡菜的腌制和亚硝假丝酵母、乳酸菌天然微生物酸的测定
植物组织培养
菊花
第二页，共38页。
实验1 大肠杆菌的培养和分离
• 实验目的： • 1.进行大肠杆菌的扩增，利用液体培养基进
的铅笔上，冷却后使培养基形成斜面。
第二十页，共38页。
步骤:
１、配制培养基; 培养基灭菌、器具灭菌
2、冷却，倒平板 (编号,无菌环境操无菌环境操作)
４、划线分离、恒温培养箱培养12~24h
(无菌环境操作)
５、接种斜面,4℃冰箱保存(目的:为了保存菌种)
6、实验完成后，接触过细菌的器皿均应灭菌处理后丢失。
4℃冰箱保存。
视频
6.实验完成后，接触过细菌的器皿均应灭菌处理后丢弃。目的：为了防止实验菌残留于接种环而污染环境和感染实验人员。
第三十一页，共38页。
1为了获得纯净的培养物，其关键是防止外来杂菌的入侵污染： 1）培养皿； 2）培养基； 3）接种过程是无菌的 2请思考：培养基、培养皿、手、接种环分别如何消毒或灭菌？

20172018年高中生物第1部分微生物的利用阶段整合提升浙科选修

阶段整合提高网络建立一、微生物培育基的配方1．基本成分固然各样培育基的详细配方不一样，但一般都含有水、碳源(供给碳元素的物质)、氮源、无机盐，原由是：微生物的化学构成与其余生物大概同样，也是主要由C、H、O、N、P、S 等元素构成，这些元素最后来自外界环境中的各样无机化合物和有机化合物，概括为碳源、氮源、无机盐、水四大类营养。

2．培育基配方中四种营养成分比较营养物质定义作用主要根源合成微生物的细胞物质和一些代谢产无机化合物：CO2、NaHCO3；有凡能供给所需碳元碳源物，有些是异养微机化合物：糖类、脂肪酸、花生素的物质生物的主要能源物粉饼、石油等质合成蛋白质、核酸无机化合物：N2、NH3、铵盐、凡能供给所需氮元氮源以及含氮的代谢产硝酸盐；有机化合物：尿素、牛素的物质物肉膏、蛋白胨等水在生物体内含量很不单是优秀的溶剂——高，在低等生物体并且可保持生物大内含量更高分子构造的稳固为微生物供给除细胞内的构成成碳、氮之外的各样分，生理调理物质，无机盐——重要元素，包含大某些化能自养菌的量元素能源，酶的激活剂注：自养型微生物的碳源是无机碳，异养型微生物的碳源是有机碳。

因而可知，培育不一样种类的微生物，培育基的构成不一样，但一般都含有水、碳源、氮源和无机盐四种基本物质。

二、实验注意事项在大肠杆菌的培育和分别的实验中，要特别重申无菌操作，这是进行微生物实验中必备的操作要求，也是本模块多半实验的基本要求，应当形成无菌操作的行为习惯。

无菌操作，既包含各样器皿一定是无菌的，也包含各样培育基也一定是无菌的，同时还要求在接种时，不可以带有其余杂菌，所以在实验过程中，应时辰保持这类无菌意识。

辨识菌落和菌各种类时，要能大概划分细菌、放线菌与酵母菌菌落，有些用肉眼不可以判断的菌落也可借助显微镜进行察看判断。

三、平板划线(划线分别)法和稀释涂布平板(涂布分别)法比较比较平板划线法稀释涂布平板法特色操作简单，可是单菌落不易分别操作复杂，可是单菌落易分别连续划线。

2018高中生物浙科版浙江参考课件：29 微生物的利用、

-12考点一考点二考点三考点四自主梳理核心突破典例精析
划线分倒置培养皿,放在 37 ℃恒温培养箱培养 12~24 h 后,可看离到划线末端出现不连续的单菌落培养观察
在无菌条件下将单菌落用接种环取出,再用划线法接种在斜面上,37 ℃培养 24 h 后,置于 4 ℃冰箱保存
菌种保存
-11考点一考点二考点三考点四自主梳理核心突破典例精析
4.大肠杆菌的培养与分离 (1)扩大培养用LB液体培养基,划线分离和涂布分离用固体培养基。 (2)实验步骤
培养基对 LB 液体培养基和 LB 固体培养基及培养皿用高压蒸灭菌汽灭菌在酒精灯火焰旁将三角瓶中培养基分别倒入 4 个灭菌培倒平板养皿中,水平放置 ,制成平面培养基将大肠杆菌用灼烧冷却后接种环在无菌条件下接种至三角瓶中 LB 培养基中,37 ℃摇床振荡培养 12 h 接种用接种环在有大肠杆菌的三角瓶中蘸菌液一次,在固体平面培养基上连续划线
仅杀死物体表面或内部一部分微生物 (不包括芽孢和孢子) 杀死物体内外所有的微生物, 包括芽孢和孢子
强烈的灭理化菌因素
-10考点一考点二考点三考点四自主梳理核心突破典例精析
(4)无菌操作要求 ①各种器皿必须是无菌的。 ②各种培养基必须是无菌的。 ③菌转移操作的过程必须是无菌的。
-7考点一考点二考点三考点四自主梳理核心突破典例精析
1.大肠杆菌革兰氏阴性、兼性厌氧的肠道杆菌,属原核生物,能以二分裂方式快速繁殖,是基因工程中被广泛采用的工具。 2.培养基 (1)成分:碳源、氮源、水、无机盐和生长因子。还需满足不同微生物生长对pH、特殊营养物质及氧气的要求。 (2)类型 ①按照物理性质分:固体培养基、半固体培养基和液体培养基。区别在于是否加琼脂和加入琼脂的多少。 ②按照目的用途分:选择培养基、鉴别培养基。 (3)制作牛肉膏蛋白胨固体培养基。制作牛肉膏蛋白胨固体培养基的方法步骤:计算→称量→溶化、调pH→灭菌→倒平板。

2018高中生物第一部分微生物的利用11大肠杆菌的培养和分离(1)素材浙科版1

生物技术实践第一部分微生物的利用一、课标内容：进行微生物的分离和培养二、教学要求本部分“实验2：分离以尿素为氮源的微生物”与“实验3：观察土壤中能水解纤维素的微生物”不作要求，只要求学生做1个实验，即“实验1：大肠杆菌的培养和分离”。

实验1 大肠杆菌的培养和分离三、教学建议1.课时建议（共计9课时）2.实验建议在大肠杆菌的培养和分离的实验中，要特别强调无菌操作，这是进行微生物实验中必备的操作要求，也是本模块多数实验的基本要求，应该让学生形成无菌操作的行为习惯。

无菌操作，既包括各种器皿必须是无菌的，也包括各种培养基也必须是无菌的，同时还要求在接种时，不能带有其它杂菌，所以在实验过程中，应时刻让学生保持这种无菌意识。

在菌落和菌种种类的辩认时，要教会学生能大致区分细菌、放线菌与酵母菌菌落，有些用肉眼不能判断的菌落也可借助显微镜进行观察推断。

第二部分酶的应用一、课标内容1.研究酶的存在和简单制作方法2.尝试利用酶活力测定的一般原理和方法。

3.探讨酶在食品制造和洗涤等方面的应用。

4.尝试制备和应用固相化酶二、教学要求实验5 加酶洗衣粉的使用条件和效果三、教学建议2.实验建议（1）在“果汁中的果胶和果胶酶”实验中，教材所用的果实是苹果或山楂，教师也可根据当地情况及时令选择适宜的水果，如葡萄、杨梅或樱桃等，最好能与当时、当地的丰产水果吻合。

（2）在“加酶洗衣粉的使用条件和效果”实验中，由于市售的加酶洗衣粉品牌不同，厂家不同，所含酶的种类与含量也不同，教师选购时，可选多种品牌，让学生在实验前先分析洗衣粉袋上的说明再决定使用的类型。

也可让学生结合一些洗衣粉的电视广告，通过实验验证，培养学生的鉴别与批判能力。

棉布上的污渍必须要放置1天以上。

污渍的类型如果由学生自己制作与确定，更好。

（3）在“α－淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测”实验中，“酶的固定化”最好不要由教师代做，应让学生自己制作，让学生直接观察与感受固定前后石英砂的变化。

2017-2018学年高中生物第1章微生物技术第3课时微生物数量的测定同步备课教学案北师大版选修1

第3课时微生物数量的测定[学习导航] 1.阅读教材P17内容，概述测定某种微生物数量的方法和步骤。

2.结合教材P15～17“测定土壤中微生物的数量”实验，掌握使用平板菌落计数法测定土壤中微生物的数量。

[重难点击] 1.掌握测定某种微生物数量的方法和步骤。

2.学会使用平板菌落计数法测定土壤中微生物的数量。

一、微生物数量测定的方法和原理微生物数量的测定也是重要的微生物技术之一，平板菌落计数法是一种应用广泛的微生物数量测定方法。

1.平板菌落计数法的原理：根据微生物在高度稀释的条件下，固体培养基上所形成的单个菌落，是由一个单细胞繁殖而成的，即一个菌落代表一个单细胞。

2.计算方法：从平板上的菌落数推测出每克样品中的菌落数的计算方法是：同一稀释度的菌落平均数÷0.2÷稀释度×10。

3.优缺点(1)优点：能测出样品的活菌数，可用于微生物的选种与育种、分离纯化及其他方面的测定。

(2)缺点：操作烦琐、时间较长、测定值常受各种因素的影响。

4.该方法统计的菌落数比活菌的实际数目低，这是因为当两个或多个细胞在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。

1.为什么分离不同的微生物要采用不同的稀释度？答案土壤中各种微生物的数量是不同的，为获得不同类型的微生物，就需要按不同的稀释度进行分离。

2.平板菌落计数法(1)平板菌落计数法根据操作步骤的不同可分为哪两种？答案①涂布平板法：用灭过菌的涂布器将一定量(一般为0.1 mL)的适当稀释过的菌液涂布在琼脂培养基的表面，然后保温培养直到菌落的出现。

记录菌落的数目并换算成每毫升样品中的活细胞的数量。

②倒平板法：将已知体积(0.1～1 mL)的适当稀释过的菌液加到灭过菌的培养皿内，然后倒入溶化后冷却至45 ℃的琼脂培养基，水平晃动混匀，待凝固后保温培养到出现菌落，然后与涂布平板法同样计数。

(2)平板菌落计数法中换算样品的含菌数依据什么数据换算？答案依据稀释倍数、取样接种量和菌落数。