微生物的利用PPT教学课件

人工合成培养基只能维持细胞生存，要想使细胞生长和 繁殖，还需补充一定量的天然培养基（如血清）。
血清中含有： ①多种蛋白质（白蛋白、球蛋白、 铁蛋白等） ②多种金属离子； ③激素； ④促贴附物质，如纤粘蛋白、冷析 球蛋白、胶原等。 ⑤各种生长因子 ⑥转移蛋白 ⑦不明成分
液体培养基：
表面生长
均匀混浊生长
2.消毒与灭菌的概念及两者的区别
（１）消毒定义： 利用化学或物理方法，杀死大部份致
病微生物的过程。区分为高程度消毒 （High-level Disinfection）、中程度消 毒（Intermediate-level Disinfection）、 低程度消毒（Low-level Disinfection） 三种方式。
沉淀生长
固体培养基：菌落，菌苔
半固体培养基：
无动力
有动力(弥散)
(是否运动)
2.不同的微生物往往需要采用不同的培养 基配方 (参考教材附录内容)
3.不管哪种培养基，一般都含有水、碳源、 和氮源、 无机盐、等营养物质，
另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营 养物质,例如:生长因子(即细菌生长必需，而 自身不能合成的化合物,如维生素、某些氨基 酸、嘌呤、嘧啶)以及氧气、二氧化碳、渗透 压等的要求。
选择培养基
加入青霉素的培养基: 分离酵母菌、霉菌等真菌
加入高浓度食盐的培养基: 分离金黄色葡萄球菌
不加氮源的无氮培养基: 分离固氮菌
不加含碳有机物的无碳培养基: 分离自养型微生物
加入青霉素等抗生素的培养基: 分离导入了目的基因的受体细胞
加入氨基喋呤、次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷的 培养基:
分离杂交瘤细胞
合成培养基:
根据细胞生存所需物质的 种类和数量，用人工方法模 拟合成的。
合成培养基主要成分是 氨基酸、维生素、碳水化合 物、无机盐和其它一些辅助 物质。
优点：标准化生产，组分 和含量相对固定;成本低
缺点： 缺少某些成分，不 能完全满足体外细胞生长需 要。
天然培养基：
天然培养基有血清、 血浆、和组织提取液 （如鸡胚和牛胚浸 液）。 优点：营养成分丰富， 培养效果好 缺点：来源受限;成分 复杂，影响对某些实 验产物的提取和实验 结果的分析;易发生支 原体污染;
(2)灭菌的方法：
1、灼烧灭菌
2、干热灭菌： 160-170 ℃下加 热1-2h。
3、高压蒸气灭菌： 100kPa、121 ℃ 下维持15-30min.
最常用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌，它可以杀 灭所有的生物，包括最耐热的某些微生物的休眠体 ，同时可以基本保持培养基的营养成分不被破坏。
一、基础知识：
（二）培养基 培养基（培养液）是由人工方法配制而成
的，专供微生物生长繁殖使用的混合营养液。
1.培养基的类型和用途
（1）按物理状态分：固体培养基和液体培养 基、半固体培养基。其中固体培养基用于菌种 保存及分离、鉴定菌落、活菌计数等，半固体 培养基可观察微生物的运动，液体培养基常用 于发酵工业。 （2）按功能分：选择培养基和鉴别培养基。 （3）按成分分：天然培养基和合成培养基。
真菌
原生动物
病毒界 原核生物界
真菌界 原生生物界
特点：结构简单,形体微小.通常要用光学显微镜或 电子显微镜才能看到，有的甚至没有细胞结构.且 体内一般不含有叶绿素.不能进行光合作用.
细菌的外形与大小
细菌：单细胞不分枝的原核微生物。
细菌细胞微小而透明，通常用适当染料染 色后显微镜观察
细菌的构造
细菌细胞由外向里 依次有鞭毛、菌 （纤）毛、荚膜、 细胞壁、细胞膜、 细胞质，细胞质 中又有液泡、储 存性颗粒、核质 等。
化能自养型:硝化细菌,铁细菌,硫细菌
• 异养菌:
• 腐生菌 • 寄生菌
大部分病原菌
放线菌
1、结构： ➢单细胞原核 ➢分支状的菌丝（基内菌丝、气生菌丝）
应用:
链霉素、土霉素、四环素、 氯霉素、红霉素、庆大霉素
微生物中发现了几千种抗生素，其中2/3是 由放线菌产生的
病毒的结构
2、病毒的增殖：
真菌
图1-3 细菌的结构
*细胞壁
• 结构特点：坚韧且有弹性
伤
• 细胞壁有哪些功能？
寒
• ①固定细胞外形；
杆 菌
③阻拦大分子物质进人细胞；
细
④使细胞具有致病性及对噬
胞
壁
菌体的敏感性。
中
含
②保护细胞免受外力的损伤；
毒
素
有些细菌在一定的条件下，细胞里面形成一个椭圆形的休眠 体，叫做芽孢。芽孢的壁很厚，对干旱、低温、高温等恶劣的环 境有很强的抵抗力。例如，有的细菌的芽孢，煮沸3小时以后才 死亡。芽孢又小又轻，可以随风飘散。当环境适宜（如温度、水 分适宜）的时候，芽孢又可以萌发，形成一个细菌.
一、课题目标： 了解有关微生物及培养基的基础知识，
进行无菌技术的操作，进行微生物的培养。
二、课题重点和难点：
无菌技术的操作。
三、技能目标：
掌握培养基的制备、高压蒸气灭菌和平 板划线法等基本操作技术，熟练、规范地 进行无菌操作，成功地培养微生物。
一、基础知识： (一)微生物
病毒 细菌
微生物包括哪五类： 放线菌
菌落：
• 单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖 时，就会形成一个肉眼可见的，具有一定 形态结构的子细胞群体，叫做菌落。
• 菌落是鉴定菌种的重要依据。
菌落
细菌的菌落特征 因种而异
细菌的营养类型
• 根据细菌所利用的能源和碳源的不同， 将细菌分为两大营养类型。
• 自养菌:分类,举：增菌 固体培养基：纯化，增菌 半固体培养基：动力检测，保种
二、无菌技术
1.无菌技术的概念
无菌操作泛指在培养微生物的操作中， 所有防止杂菌污染的方法。无论是随后将要 学到的倒平板、平板划线操作，还是平板稀 释涂布法，其操作中的每一步都需要做到 “无菌”，即防止杂菌污染。只有熟练、规 范地进行无菌操作，才可能成功地培养微生 物。
（2）灭菌的定义：
以化学剂或物理方法消灭所有微生 物，包括所有细菌的繁殖体、芽孢、霉 菌及病毒，而达到完全无菌之过程。
灭菌消毒技术是微生物有关工作中最 普通也是最重要的技术。
3.常用的消毒与灭菌的方法
(1)消毒的方法：
1、煮沸消毒法:100℃煮沸5-6min 2、巴氏消毒法：70-75 ℃下煮30min或 80 ℃ 下煮15min 3、化学药剂消毒法:用75%酒精、新洁尔 灭等进行皮肤消毒;氯气消毒水源 4、紫外线消毒 ……