自噬抑制剂3-MA抑制高糖条件下猴脉络膜视网膜血管内皮细胞血管形成

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3-MA抑制自噬在胰腺癌细胞抵抗失巢凋亡中的作用

中山大学硕士学位论文 3-MA抑制自噬在胰腺癌细胞抵抗失巢凋亡中的作用姓名：庄燕妍申请学位级别：硕士专业：内科学指导教师：张世能 20100527
３－ＭＡ抑制自噬在胰腺癌细胞抵抗失巢凋亡中的作用
中山大学附属孙逸仙纪念医院消化内科学位申请人：庄燕妍导师：张世能教授
摘研究背景
要
胰腺癌（ｐａｎｃｒｅａｔｉｃｃａｎｃｅｒ）是一种常见的消化道恶性肿瘤，其恶性程度高，疾病进展快，早期转移率高，中位生存期短，５年生存率不超过５％，死亡率接近发病率，预后恶劣。由于胰腺癌发病的隐蔽性，缺乏早期的临床表现及症状的非特异性，因此确诊时往往已属晚期，丧失根治性手术的机会，即使是早期诊断并行了根治手术的病人，长期生存率仍低于１５％，且存在术后容易复发的问题。大部分临床患者仅能行姑息手术结合术后辅助化疗或者直接放化疗，不幸的是，胰腺癌对放化疗并不敏感。胰腺癌预后差、容易复发的主要原因正是其早期转移率高，因此，防治胰腺癌转移是关键。正常上皮细胞具有黏附依赖性，失去细胞问或细胞与基质接触将导致细胞程序性死亡，即失巢凋ｌ＝（ａｎｏｉｋｉｓ）。失巢凋亡被认为普遍参与机体发生、发育、更新及退化的全过程，例如体内的各种空腔组织如肠管等的形成，此外还可防止脱落的细胞种植并生长于其他不适宜的地方，对于维护组织内环境稳定和结构完整具有重要意义。但当这种生理诱导机制发生异常则会导致疾病病理过程的发生，如目前认为失巢凋亡也参与心血管疾病及某些皮肤疾病的发生。而其在肿瘤侵袭转移过程中的关键作用是目前研究的热点之一。目前认为，肿瘤细胞尤其是恶性程度高的肿瘤细胞具备抵抗失巢凋亡的能力。肿瘤转移是个多阶段的过程，涉及基质降解、肿瘤细胞游走浸润、肿瘤细胞再黏附等过程，当肿瘤细胞由于某个基因缺失、突变或者某个凋亡信号通路的缺陷而具备了抵抗凋亡的能力，则在其脱离原发灶进入血液或淋巴循环系统，失去基质支持，发生侵袭转移时即不发生失巢凋亡，从而实现远处重定植形成转移灶的过程，这个结论在卵巢癌、口腔鳞癌、

缺氧条件下自噬在视网膜血管内皮细胞血管生成中的作用

ＤＯＩ：１０．３７６０／ｃｍａ．ｊ．ｉｓｓｎ．２０９５－０１６０．２０１８．０３．００６
【摘要】目的研究缺氧条件下自噬对体外培养的小鼠视网膜血管内皮细胞（ＲＶＥＣｓ）增生、迁移和管腔形成的影响。方法取清洁级Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ小鼠５０只，采用组织块培养法分离和培养小鼠ＲＶＥＣｓ，采用ＣＤ３４免疫荧光染色法对培养细胞进行鉴定。将生长良好的ＲＶＥＣｓ分为正常对照组、缺氧对照组及缺氧＋３一甲基腺嘌呤（３－ＭＡ）组。正常对照组细胞常规培养，缺氧对照组细胞在氧体积分数１％的环境下培养２４ｈ，缺氧＋３一ＭＡ组细胞先用５ｍｍｏｌ／Ｌ３－ＭＡ预处理４ｈ，然后在上述缺氧环境下培养２４ｈ。采用Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ法检测自噬标志蛋白微管相关蛋白１轻链３（ＬＣ３—１Ｉ／ＬＣ３一Ｉ）比值及细胞中Ｂｅｃｌｉｎ一１的表达；透射电子显微镜下观察细胞内形成的自噬小体的超微结构；分别采用Ｃｌｉｃｋ—ｉＴＥｄＵ试剂盒、细胞划痕法和Ｍａｔｒｉｇｅｌ胶法检测细胞增生率、细胞迁移情况及细胞管腔形成情况。结果原代培养后５—７ｄ培养的细胞呈铺路石样排列生长，ＣＤ３４表达阳性。透射电子显微镜下缺氧对照组细胞自噬小体明显多于正常对照组和缺氧＋３－ＭＡ组。正常对照组、缺氧对照组和缺氧＋３一ＭＡ组细胞中ＬＣ３一Ⅱ／ＬＣ３一Ｉ比值分别为０．２４３±Ｏ．０３０、０．６５８±０．０３２和０．４０５± ０．０９５，Ｂｅｅｌｉｎ一１蛋白相对表达量分别为０．２６０±０．０４０、０．６５０±０．０７１和０．４６１±０．０８９；细胞增生率分别为（４５．９３±６．３９）％、（２２．７４±２．３５）％和（２４．１２±３．５９）％；细胞划痕愈合率分别为（３６．０２±５．８４）％、（５７．２６± １１．９８）％和（１８．１６±９．７３）％；细胞管腔形成数分别为（２９．２０±６．１０）、（４１．４０±４．Ｏ４）和（２２．ＯＯ±２．９２）个；总体比较差异均有统计学意义（Ｆ：３５．８６、２３．５３、３４．２８、２１．１２、２３．２７，均Ｐ＜Ｏ．Ｏ１）。与正常对照组相比，缺氧对照组细胞的ＬＣ３一ＩＩ／ＬＣ３一Ｉ比值、Ｂｅｃｌｉｎ一１蛋白相对表达均明显增加，细胞增生率明显下降，划痕愈合率和管腔形成数明显增加，缺氧＋３一ＭＡ组细胞中ＬＣ３—１Ｉ／Ｉ比值、Ｂｅｃｌｉｎ一１蛋白相对表达量、划痕愈合率和细胞管腔形成数较缺氧对照组明显降低。结论缺氧激活小鼠ＲＶＥＣｓ自噬，进而促进细胞迁移和管腔形成，自噬抑制剂３－ＭＡ可抑制自噬小体活性，并抑制ＲＶＥＣｓ的迁移和管腔形成能力。

自噬抑制剂3-MA对缺氧诱导的人视网膜色素上皮细胞表达TNF-α的抑制作用

ＬＣ３ＢＩＩ／ＬＣ３ＢＩ
Ｂｅｃｌｉｎ１
３ＭＡ＋
缺氧组，差异均有统计学意义（Fra bibliotekＰ＜０），０５３ＭＡ＋缺氧组的ＬＣ３ＢＩＩ／ＬＣ３ＢＩ值和Ｂｅｃｌｉｎ１值均高于对照组，差异
均有统计学意义（均Ｐ＜００５）。缺氧组细胞中ｐ６２值明显低于对照组和３ＭＡ＋缺氧组，差异均有统计学意义（均
００１）。②对照组、缺氧组、３ＭＡ＋缺氧组细胞中的ＬＣ３ＢＩＩ／ＬＣ３ＢＩ值、Ｂｅｃｌｉｎ１值及ｐ６２值分别为（０２０ ± ０、０３
和）、（、和）和（、和０５８ ± ００７０４０ ± ００９０３２ ± ００４０９７ ± ００５０７８ ± ００６１０３ ± ００２０３２ ± ０１００７８ ±
临床眼科杂志年第卷第期，，， · ·
２０１８２６５ＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｌｉｎｉｃａｌＯｐｈｔｈａｌｍｏｌｏｇｙ２０１８Ｖｏｌ２６Ｎｏ５４５５
·实验研究·
自噬抑制剂３ＭＡ对缺氧诱导的人视网膜色素上皮
细胞表达ＴＮＦα 的抑制作用
９４％ｂｌｏｔ
法Ｎ２检）中测进各行组培细养胞，的３自Ｍ噬Ａ相＋缺关氧蛋组白先微在管培相养关基蛋
白１轻链３Ｂ（）、ＬＣ３ＢＢｅｃｌｉｎ１及ｐ６２的表达；采用ＥＬＩＳＡ法检测各组细胞上清液中ＴＮＦα 的浓度。结果 ①对
照组、缺氧组、缺氧组细胞的浓度分别为（）、（）和（３ＭＡ＋
【】ＡｂｓｔｒａｃｔＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆａｕｔｏｐｈａｇｙｉｎｈｉｂｉｔｏｒ３ＭＡｏｎｈｙｐｏｘｉａｉｎｄｕｃｅｄｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆ（），，ＴＮＦα ｂｙｈｕｍａｎｒｅｔｉｎａｌｐｉｇｍｅｎｔｅｐｉｔｈｅｌｉｕｍＲＰＥｃｅｌｌｓ．ＭｅｔｈｏｄｓＡＲＰＥ１９ａｈｕｍａｎＲＰＥｃｅｌｌｌｉｎｅｗａｓｄｉｖｉｄｅｄｒａｎ，（）ｄｏｍｌｙｔｏｔｈｅｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐｈｙｐｏｘｉａｇｒｏｕｐａｎｄ３ｍｅｔｈｙｌａｄｅｎｉｎｅ３ＭＡ＋ｈｙｐｏｘｉａｇｒｏｕｐ．Ｃｅｌｌｓｋｅｐｔｉｎａｎｏｒｍｏｘｉｃｉｎｃｕｂａ，ｔｏｒｗｅｒｅｓｅｔａｓｔｈｅｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐａｎｄｔｈａｔｉｎｃｕｂａｔｅｄｉｎａｈｙｐｏｘｉｃｉｎｃｕｂａｔｏｒｗｉｔｈ１％Ｏ２／５％ＣＯ２／９４％Ｎ２ａｓｔｈｅｈｙｐｏｘｉａ，ｇｒｏｕｐ．Ｆｏｒｔｈｅ３ＭＡ＋ｈｙｐｏｘｉａｇｒｏｕｐｃｅｌｌｓｗｅｒｅｔｒｅａｔｅｄｗｉｔｈ１０ｍＭ３ＭＡｉｎｔｈｅｈｙｐｏｘｉｃｉｎｃｕｂａｔｏｒ．Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｗａｓａｐ，ｐｌｉｅｄｔｏｄｅｔｅｃｔｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆａｕｔｏｐｈａｇｙａｓｓｏｃｉａｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎｓｉｎｄｉｆｆｅｒｅｎｔｇｒｏｕｐｓｉｎｃｌｕｄｉｎｇｍｉｃｒｏｔｕｂｕｌｅａｓｓｏｃｉａｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎ（），１ｌｉｇｈｔｃｈａｉｎ３ＢＬＣ３ＢＢｅｃｌｉｎ１ａｎｄｐ６２．ＴｈｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓｏｆＴＮＦα ｉｎｔｈｅｃｕｌｔｕｒｅｓｕｐｅｒｎａｔａｎｔｏｆＡＲＰＥ１９ｉｎｄｉｆ，ｆｅｒｅｎｔｇｒｏｕｐｓｗｅｒｅｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｂｙＥＬＩＳＡ．Ｒｅｓｕｌｔｓ ①ＴｈｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｆＴＮＦα ｉｎｔｈｅｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐｈｙｐｏｘｉａｇｒｏｕｐａｎｄ（），（）（），３ＭＡ＋ｈｙｐｏｘｉａｇｒｏｕｐｗａｓ５９４６ ± ５２２ｐｇ／ｍｌ１３５８０ ± １１３０ｐｇ／ｍｌａｎｄ１０５８８ ± １０４２ｐｇ／ｍｌｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅ，（，）ｌｙｗｉｔｈｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓａｍｏｎｇｔｈｅｇｒｏｕｐｓＦ＝５０５３Ｐ＝００００．Ｉｔｗａｓｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｈｉｇｈｅｒｉｎｔｈｅｈｙｐｏｘｉａ（），ｇｒｏｕｐｔｈａｎｔｈｅｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐａｎｄ３ＭＡ＋ｈｙｐｏｘｉａｇｒｏｕｐａｌｌａｔＰ＜００１．Ｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｔｈｅｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐｉｔｗａｓｓｉｇｎｉｆｉ

自噬及其抑制剂的研究进展

自噬是把双刃剑．一方面能维持机体内环境稳态，另一方面却与某些
疾病的发生发展相关。近年来关于自
噬的研究层出不穷．还有许多未解的谜团．仍然需要更进一步的研究。目
前．小分子自噬抑制剂已应用到某些
疾病的研究当中，其确切机制还有待探究，但这也给自噬相关疾病的防治
塞旦医堂苤查垫！！至箜垫鲞笠！！塑
自噬及其抑制剂的研究Байду номын сангаас展
·综述·
喻琴琴杨俊李馨欣
自噬是指细胞内的长寿命蛋白质以及受损的细胞器经溶酶体途径被降解的过程，是真核细胞所特有的现象。自噬包括巨自噬（ｍａｃｒｏａｕｌｏｐｈａｇｙ）、分子伴侣介导的自噬（ｃｈａｐｅｍｎｅ—ｍｅｄｉａｔｅｄａｕｌｏｐｈａｇ）ｒ）、微自噬（ｍｉｃｒｏａｕｌｏｐｈａｇｙ）这３种主要方式，其中，巨自噬就是通常所说的自噬。高温、缺氧、饥饿等应激时产生自噬能帮助细胞抵御这些不利因素，发挥细胞保护作用。但是．自噬过度激活或不适时则会导致细胞死亡，即自噬性细胞死亡（ａｕｔｏｐｈａｇｉｃｃｅｌｌｄｅａｔｈ）…。已有研究表明白噬的失调与肿瘤、神经退行性疾病、心血管疾病以及感染等疾病密切相关。目前，小分子的自噬抑制剂已广泛地应用到上述疾病的研究当中，为探明白噬与相关疾病的关系提供了新的思路，因此。本文就近年来关于小分子自噬抑制剂的研究进展作一综述。ｌ自噬信号转导途径
３ＫＣ３）的抑制剂。通过抑制Ｂｅｃｌｉｎ．１一ＰｔｄＩｎｓ３ＫＣ３复合物形成来抑制胞浆可溶性形式ＬＣ３Ｉ向自噬体膜结合形式ＬＣ３Ⅱ转化，使Ｌｃ３Ⅱ／Ｌｃ３Ｉ的比值下降，该比值的下降意味着自噬体的形成受到抑制。目前，３一ＭＡ、Ｗｏｒｔｍａｎｎｉｎ和ＬＹ２９４００２作为自噬的抑制剂已得到广泛应用。２．２氯喹（ｃｈＩｏｍｑｕｉｎｅ）氯喹除了作为一种抗炎药广泛应用于治疗疟疾、风湿性关节炎等疾病．越来越多的研究发现其与化疗药物联合应用可治疗肿瘤，其机制是环磷酰胺、紫杉醇等化

细胞自噬在心血管应激和心脏疾病中的作用

１自噬概述
自噬是细胞维持自稳、保证生存的重要生理过程之一，不适当的自噬激活可能导致细胞死亡，称为 Ⅱ 型程序性死亡。目前自噬可分为巨自噬（ｍａｃｒｏａｕｔｏｐｈａｇｙ）、微自噬（ｍｉ— ｃｒｏ噬（ｃｈａｐｅｒｏｎｅ—ｍｅｄｉａｔｅｄａｕｔｏｐｈａｇｙ）… 。自噬的信号调控非常复杂，目前比较明确的途径主要有两条：ｍＴＯＲ（ｍａｍａｌｉａｕｔａｒｇｅｔｒａｐａｍｙｃｉｎ）途径和ＣｌａｓｓｍＰＩ３Ｋ／ＰＫＢ途径。ＴＯＲ激酶作为氨基酸、ＡＴＰ、激素的感受器，是自噬的负调控分子，在自噬过程中发挥 “门卫 ” 作用［２ｊ。ＣｌａｓｓＨＩＰＩ３Ｋ可磷酸化磷脂酰肌醇（Ｐｔｄｌｎｓ）生成３磷酸磷脂酰肌醇（Ｐｔｄｌｎｓ３Ｐ），ＰｔｄＩｎｓ３Ｐ募集胞浆中含特定基序的蛋白质，形成自噬体膜。另外，ＣｌａｓｓｍＰＩ３Ｋ还可与Ｂｅｃｌｉｎ一１形成复合物参与自噬体形成，自噬抑制剂３一甲基腺嘌呤（３一ＭＡ）就是通过这条途径干扰或阻断自噬体形
３自噬在心脏疾病中的作用
３．１自噬与溶酶体储积症（Ｄａｎｎｏｎｄｉｓｅａｓｅ）溶酶体储积症是一种特殊的心肌病，研究发现是心肌细胞在发育过程中由于溶酶体相关膜蛋白２（１ｙｓｏｓｏｍａｌ—ａｓｓｏｃｉａｔｅｄｍｅｍｂｒａｎｅｐｒｏｔｅｉｎ２）缺乏导致自噬溶酶体途径缺陷，致使自噬过程不能正常进行导致的心肌疾病。３．２自噬与心肌病有研究报道称扩张型心肌病也与自噬有关，因为在扩张型心肌病患者心脏中可观察到萎缩的心肌组织中溶酶体相关膜蛋白１和组织蛋白酶Ｄ（ｃａｔｈｅｐｓｉｎＤ）表达增加并伴随自噬增强［２３ｊ。另外，自噬与肥厚型心肌病也有密切联系，但是关于自噬与心肌肥厚的关系还没有定论。有研究称抑制细胞自噬在某种情况下可导致心肌细胞肥大，但有时却无影响甚至可以防止心肌细胞肥大。例如在新生乳鼠心肌细胞中用ｓｉＲＮＡ沉默自噬相关基因Ａ１：ｇ７后自噬减弱，心肌细胞明显肥大；在体实验也得出相似结论，给予新生大鼠Ａｔｇ７一ＲＮＡｉ抑制自噬后，大鼠心脏出现明显的心肌肥厚特征；与之相反，有研究表明在生长因子缺乏和营养受限时均可诱导细胞发生自噬，抑制生长因子和营养信号可以抑制一些大分子物质的合成而导致细胞萎缩，因此，有人推断细胞自噬可以导致细胞萎缩抑制细胞增大。３．３自噬与心肌梗死有研究报道称，在结扎大鼠左冠状动脉所致的心肌梗死模型中自噬体标记物ＬＣ一３、Ｐ６２组织蛋白酶Ｄ均上调，在梗死边缘区３周后形成大量自噬体。另外，也有研究表明心肌细胞缺血缺氧时，通过激活ＡＭＰＫ和上调Ｂｅｄｉｍ表达诱导自噬增强发挥心肌保护作用Ｊ。还有研究指出，在心肌梗死模型中自噬还可以增加内质网应激、恢复细胞内营养供应减少梗死范围１９］。这些结果都表明自噬在急性心肌梗死中具有重要的保护作用。３．４自噬与心力衰竭近年来研究发现自噬伴随着心力衰竭的发生发展，衰竭的心脏中发现过度自噬现象，推测可能是通过自噬性死亡造成心肌细胞大量丢失促进心力衰竭。另外还有研究发现在心力衰竭模型中可观察到泛素化蛋白聚集，异常的泛素化蛋白积聚可诱导自噬增强，促进心力衰竭Ｌ２６Ｊ。总之，心力衰竭状态下的自噬是一种不适当的反应，

自噬抑制剂3-MA对乳胞素抑制胃癌BGC-823细胞增殖的影响及其机制

1 材料与方法 1. 1 材料和试剂噻唑蓝( MTT) 购自美国 Sigma 公司; 胎牛血清( BSA) 、IMEM 培养基购自美国 Gibco 公司; 十二烷基硫酸钠( SDS) 、四甲基乙二胺( TEMED) 、丙烯酰胺、N，N －二甲基双丙烯酰胺、过氧化物酶标记二抗购自北京鼎国生物技术有限公司; β-肌动蛋白( β-actin) 、细胞色素 C( Cytochrome C) 、半胱氨酸蛋白酶-4( caspase-4) 抗体购自美国 SANTA CRUZ 公司。 1. 2 实验分组分为对照组、3-MA 5 mmol / L 组、LAC
〔关键词〕胃癌; 3-甲基腺嘌呤; 乳胞素〔中图分类号〕 R737. 11 〔文献标识码〕 A 〔文章编号〕 1005-9202( 2012) 05-0177-02; doi: 10. 3969 / j. issn. 1005-9202. 2012. 05. 041
细胞内存在两种主要的蛋白质降解途径，泛素-蛋白酶体途径和自噬途径，自噬途径主要降解长寿命蛋白，而泛素-蛋白酶体途径则主要降解短寿命蛋白，这些蛋白包括一些细胞周期蛋白、转录因子、抗肿瘤蛋白和促凋亡蛋白。蛋白酶体广泛存在于真核细胞中，泛素-蛋白酶体系统是生物体内进行蛋白质选择性降解的重要途径之一，泛素-蛋白酶体系统的异常可以导致多种疾病的发生，其中在肿瘤发展中的作用越来越受到人们的重视。乳胞素( Lactacystin，LAC) 是链霉菌属的代谢产物，可以通过细胞膜，引起不可逆的蛋白酶体抑制〔1〕，被广泛应用于蛋白酶体的研究中〔2 ～ 4〕。本研究通过体外培养 BGC-823，观察自噬抑制剂 3-MA 对蛋白酶体抑制剂 LAC 抑制 BGC-823 细胞增殖的影响。

自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)对A2E诱导视网膜色素上皮细胞自噬的调节以及相关细胞因子表达的影

欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁氉氉氉氉引文格式：陈莉，张晶晶，陈云珍，黄旅珍．自噬抑制剂３甲基腺嘌呤（３ＭＡ）对Ａ２Ｅ诱导视网膜色素上皮细胞自噬的调节以及相关细胞因子表达的影响［Ｊ］．眼科新进展，２０２２，４２（３）：１７９１８３．ｄｏｉ：１０．１３３８９／ｊ．ｃｎｋｉ．ｒａｏ．２０２２．００３６【实验研究】自噬抑制剂３甲基腺嘌呤（３ＭＡ）对Ａ２Ｅ诱导视网膜色素上皮细胞自噬的调节以及相关细胞因子表达的影响△陈　莉　张晶晶　陈云珍　黄旅珍欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁氉氉氉氉作者简介：陈莉（ＯＲＣＩＤ：０００００００２６５９５０５５５），女，１９７８年２月出生，陕西汉中人，博士，副主任医师。

主要研究方向：眼底病。

Ｅｍａｉｌ：ｃｈｅｎｌｉ＿ｄｏｃｔｏｒ＠１６３．ｃｏｍ收稿日期：２０２１０９３０修回日期：２０２２０１０５本文编辑：董建军△基金项目：国家自然科学基金资助项目（编号：８１４７０６９４，８１６７０８７０）作者单位：１０００２０　北京市，首都医科大学附属北京朝阳医院眼科（陈莉）；１０２６００　北京市，首都医科大学大兴教学医院眼科（张晶晶，陈云珍）；１０００４４　北京市，北京大学人民医院（黄旅珍）【摘要】　目的　探讨自噬抑制剂３甲基腺嘌呤（３ＭＡ）对Ｎ亚视黄基Ｎ视黄基乙醇胺（Ａ２Ｅ）诱导视网膜色素上皮（ＲＰＥ）细胞自噬的调节以及相关细胞因子表达的影响。

方法　取人ＲＰＥ细胞（ＡＲＰＥ１９细胞系）进行培养。

将细胞分为４组。

对照组：仅使用正常ＤＭＥＭＦ１２完全培养基孵育ＡＲＰＥ１９细胞；Ａ２Ｅ组：将ＡＲＰＥ１９细胞置于含２０μｍｏｌ·Ｌ－１Ａ２Ｅ的ＤＭＥＭＦ１２完全培养基中孵育１２ｈ；３ＭＡ组：使用含１０ｍｍｏｌ·Ｌ－１３ＭＡ（美国ＳｉｇｍａＡｌｄｒｉｃｈ公司）的ＤＭＥＭＦ１２完全培养基预处理细胞１ｈ后，再用正常ＤＭＥＭＦ１２完全培养基孵育细胞１２ｈ；３ＭＡ联合Ａ２Ｅ组：先使用１０ｍｍｏｌ·Ｌ－１３ＭＡ预处理细胞１ｈ，再将细胞放入含２０μｍｏｌ·Ｌ－１Ａ２Ｅ的ＤＭＥＭＦ１２完全培养基孵育１２ｈ。

3-Methyladenine

生物活性推荐的实验操作(此推荐来自于公开的文献所以Selleck并不保证其有效性)激酶实验: [4]细胞试验: [2]动物实验: [5]不同实验动物依据体表面积的等效剂量转换表（数据来源于FDA指南）动物A (mg/kg) = 动物B (mg/kg) ×动物B的K m系数动物A的K m系数例如，依据体表面积折算法，将白藜芦醇用于小鼠的剂量22.4 mg/kg 换算成大鼠的剂量，需要将22.4 mg/kg 乘以小鼠的K m系数（3），再除以大鼠的K m系数（6），得到白藜芦醇用于大鼠的等效剂量为11.2 mg/kg。

大鼠剂量(mg/kg) = 小鼠剂量(22.4 mg/kg) ×小鼠的K m系数(3)= 11.2 mg/kg 大鼠的K m系数(6)1参考文献[1] Miller S, et al. Autophagy. 2010, 6(6), 805-807.[2] Hou H, et al. PLoS One. 2012, 7(4), e35665.view more化学数据点击下载3-Methyladenine (3-MA) (SDF格式文件)分子量149.15化学式C6H7N5CAS号5142-23-4稳定性3年-20℃粉状6个月-80℃溶于溶剂别名NSC 66389制备储备液客户使用Selleck 产品的实验数据(1)点击放大Be(2)-C human neuroblastoma cells were treated for 6, 24 and 48 h with 40 μM sulforaphane (SFN) and/or 10 mM3-methyladenine (3MA). 评级数据来源于方法细胞系浓度处理时间结果客户使用Selleck产品发表的文献(2)Dramatic antitumor effects of the dual mTORC1 and mTORC2 inhibitor AZD2014 in hepatocellular carcinoma.[ Liao H, et al. Am J Cancer Res 2015 ; 5(1):125-139 ]∙Autophagosome-Mediated EGFR Down-Regulation Induced by the CK2 Inhibitor Enhances the Efficacy ofEGFR-TKI on EGFR-Mutant Lung Cancer Cells with Resistance by T790M. [ So KS, et al. PLoS One 2014 ;9(12):e114000 ]∙3-Methyladenine (3-MA)（NSC 66389）, >99%【同义名】：(3-MA)（NSC 66389）【中文名】：3-甲基腺嘌呤订购信息：（原装进口，常备现货）产品描述：3-Methyladenine (3-MA, NSC 66389)是一种广泛应用的细胞自噬抑制剂，可以抑制PI3K活性，具有限制性抑制作用，对PI3K Vps34的抑制作用强于PI3Kγ，IC50分别为25 μM，60 μM[1]。

线粒体自噬与疾病

线粒体自噬与疾病王培;付宇【期刊名称】《河北医科大学学报》【年(卷),期】2018(039)007【总页数】5页(P853-857)【关键词】自噬;线粒体;疾病【作者】王培;付宇【作者单位】华北理工大学医学实验研究中心,河北唐山 063210;华北理工大学医学实验研究中心,河北唐山 063210【正文语种】中文【中图分类】R329.25线粒体是哺乳动物细胞内重要的“发动机”，由4种蛋白酶复合体组成的氧化呼吸链是生物转化和能量供应过程中重要的细胞器。

线粒体自噬在细胞生长发育中具有重要作用，线粒体自噬基因缺失[1]、溶酶体功能破坏[2]、活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)[3]和线粒体通透性转换孔(mitochondrial permeability transition pore,mPTP)[4]等均参与线粒体自噬过程。

线粒体自噬发生异常与人类各种疾病有直接或间接联系。

1 自噬的分类自噬是一种高度保守的自我消化降解过程，能够维持细胞内环境的稳定，是细胞生存的重要生理过程，广泛存在于真核细胞内[5]。

研究表明，在心肌缺血过程中，自噬水平明显升高[6]，内质网膜包裹异常的蛋白质及细胞器等融合为自噬体，与溶酶体结合形成自噬溶酶体，降解其内容物，维持心肌细胞内环境稳态。

由内质网膜包裹变性坏死的细胞质和可溶性蛋白等待降解的物质形成自噬体，进而与溶酶体融合并降解其内容物的过程称为巨自噬。

微自噬是指细胞内的液泡内膜或溶酶体以内陷、分隔和突出等方式降解底物的过程。

分子伴侣介导的自噬不需底物自噬体的形成且具有高度的选择性，在其介导下，底物转移到溶酶体腔内进行降解。

分子伴侣介导的自噬只能清除可溶性蛋白，能使未折叠蛋白直接跨膜易位而不涉及膜重排。

研究表明，自噬参与细胞氧化应激和缺血/再灌注等过程[7]。

2 线粒体自噬损伤线粒体利用自噬机制选择性清除受损的蛋白质和细胞器，维持细胞内环境稳定，该过程被称为线粒体自噬。

自噬抑制剂3-MA在神经系统疾病中的作用的研究进展

2019年8月第29卷㊀第8期中国比较医学杂志CHINESE JOURNAL OF COMPARATIVE MEDICINEAugust,2019Vol.29㊀No.8封秀梅,许明敏,黄辰,等.自噬抑制剂3-MA 在神经系统疾病中的作用的研究进展[J].中国比较医学杂志,2019,29(8):129-134.Feng XM,Xu MM,Huang C,et al.Research progress on the role of autophagy inhibitor,3-methyladenine,in nervous system diseases [J].Chin J Comp Med,2019,29(8):129-134.doi:10.3969/j.issn.1671-7856.2019.08.021[基金项目]国家自然科学基金(81603706);成都中医药大学科技发展基金(50837)㊂[作者简介]封秀梅(1994-),女,硕士生,研究方向:针刺促进面神经损伤修复的机制研究㊂E-mail:fengxiumei@㊂[通信作者]张微(1985 ),女,高级实验师,博士生,研究方向:针灸促进面神经损伤修复的作用机制研究㊂E-mail:zhangwei@cdutcm.自噬抑制剂3-MA 在神经系统疾病中的作用的研究进展封秀梅,许明敏,黄㊀辰,李㊀瑛,张㊀微∗(成都中医药大学针灸推拿学院,成都㊀610075)㊀㊀ʌ摘要ɔ㊀3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3-MA)是经典的自噬抑制剂,主要在自噬小体的形成和发展过程中起到抑制作用㊂在神经系统中,从中枢神经系统疾病到周围神经系统疾病,从神经创伤到神经退行性疾病,3-MA都发挥着重要作用㊂但目前3-MA 在神经系统疾病中的确切作用一直颇具争议,且其使用缺乏系统性论述㊂本文就3-MA 在神经系统疾病中的作用及其研究概况进行综述,以期为进一步研究提供新思路㊂ʌ关键词ɔ㊀3-MA;自噬;神经系统疾病;研究进展ʌ中图分类号ɔR -33㊀㊀ʌ文献标识码ɔA㊀㊀ʌ文章编号ɔ1671-7856(2019)08-0129-06Research progress on the role of autophagy inhibitor ,3-methyladenine ,in nervous system diseasesFENG Xiumei,XU Mingmin,HUANG Chen,LI Ying,ZHANG Wei ∗(College of Acupuncture-Moxibustion and Massage,Chengdu University of Traditional Chinese Medicine,Chengdu 610075,China)㊀㊀ʌAbstract ɔ㊀3-methyladenine (3-MA)is a classic autophagy inhibitor that mainly inhibits autophagosome formation and development.In the nervous system,3-MA plays an important role in central nervous system diseases,peripheral nervous system diseases,nerve injuries,and neurodegenerative diseases.However,the exact effect of 3-MA in nervous system diseases is controversial,and its application lacks systematic discussion.This paper reviews both the role of 3-MA innervous system diseases and the relevant research on this role,and to provide new ideas for further research.ʌKeywords ɔ㊀3-methyladenine;autophagy;nervous system diseases;research progress㊀㊀自噬(autophagy)是广泛存在于真核细胞内的一种溶酶体依赖性的细胞降解途径,是机体内存在的一种自我修复和维持生命的过程[1]㊂近年来,自噬作用正逐渐成为神经系统疾病研究中的热点,学者们发现自噬与神经系统疾病的发病机制密切相关[2-4],而自噬抑制剂又被认为是探究疾病与自噬相关性以及开拓疾病新的治疗措施的关键点㊂1892年Seglen 等[5]用饥饿Wistar 大鼠分离的肝细胞筛选嘌呤相关物质,首次发现了3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3-MA)可作为自噬抑制剂,自此以后3-MA被普遍应用于自噬的机制研究,在神经系统疾病的研究中应用尤为广泛㊂文章综述了3-MA在神经系统疾病自噬研究中的作用及其应用概况,以期为疾病的预防和临床治疗提供一定的参考和指导㊂1㊀3-MA与中枢神经系统疾病1.1㊀3-MA与脑缺血再灌注损伤脑缺血再灌注损伤(cerebral ischemia reperfusion injury)是因各种原因造成脑组织缺血,经再灌注恢复供血后,机体损伤症状未得到改善反而加重的现象,是缺血性卒中主要的病理生理机制[6]㊂1995年Nitatori等[7]采用透射电子显微镜首次发现了脑缺血后神经细胞中存在自噬现象㊂近年来学者们也从生物化学和形态学等方面,先后证实了在脑缺血不同阶段皆存在自噬激活现象,但3-MA在脑缺血中的确切作用一直存在着很大争议㊂Puyal等[8]发现缺血区的微管相关蛋白LC3-II在缺血再灌注早期的数小时内开始升高,而使用3-MA 则可显著下调LC3-II的表达,同时减轻脑损伤,减小脑梗死病变区域㊂Wang等[9]于脑缺血再灌注后2h经侧脑室分别注射促黑激素(intermedin,IMD)和3-MA进行治疗,24h后发现IMD组和3-MA组自噬相关蛋白Beclin-1和LC3-Ⅱ/LC3-I表达均较模型组明显降低,提示IMD与3-MA具有相似的作用,均可改善病理性神经元损伤㊂Wen等[10]也揭示了3-MA可显著减小脑梗死体积,降低脑水肿及运动缺失表现㊂相反地,Carloni等[11]发现脑缺血后皮质及海马区的Beclin-1在短时间内显著上调,且只在发生缺血缺氧损伤的神经元中表达,应用3-MA 可加重脑损伤,明显增多坏死细胞数量,提示3-MA 在缺血缺氧早期对神经元具有损伤作用㊂Sheng 等[12]同样证实了3-MA可有效阻断自噬的活性,降低缺血预处理对缺血再灌注损伤脑组织的保护作用,加剧神经细胞的坏死㊂关于3-MA在脑缺血再灌注损伤中呈现出如此不同的作用,初步猜测主要是因为在脑缺血的不同阶段自噬被激活的程度不一致㊂Shi等[13]在实验中观察到了3-MA在复氧不同阶段的双重作用,在24 h前再灌注,3-MA引发神经元死亡率高,而48~72 h再灌注,3-MA具有明显保护神经元的作用,延长再灌注会引发过度的自噬,3-MA的作用也发生相应转变㊂Zhang等[14]发现造模方式会影响3-MA的作用,在永久性脑缺血模型小鼠中,通过3-MA预处理可减小梗死面积,而在短暂性脑缺血模型小鼠中,再灌注开始后立即进行3-MA治疗反而增加了梗死面积㊂此外,缺血程度㊁缺血区域㊁3-MA注射时间和注射周期㊁实验动物及实验环境等也可能是相关影响因素㊂因此,3-MA在脑缺血再灌注损伤中是加重还是减轻脑损伤不可一概而论,需考虑诸多可能的影响因素,进一步深入研究,若能正确引导自噬使其适时地在脑缺血的防治中发挥积极作用,这将为其治疗开启新纪元㊂1.2㊀3-MA与脊髓损伤脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)是一种严重的创伤性疾病,可导致神经功能缺损和运动功能障碍[15]㊂越来越多的研究发现3-MA在脊髓损伤中的作用值得深究㊂Zhang等[16]为研究自噬在脊髓损伤中的作用以及锂的神经保护作用,在脊髓损伤6h后对锂组大鼠腹腔注射1ml锂(30mg/kg),而3-MA组在注射锂的同时还于损伤前2h腹腔注射1 mL3-MA(3mg/kg),结果发现锂能促进神经功能恢复和神经细胞存活,而3-MA下调了锂诱导的自噬,抑制了其产生的神经保护作用㊂Li等[17]也在实验中发现,于造模前20min采用3-MA干预,能降低Beclin-1的表达,且抵消了雷帕霉素(rapamycin)产生的神经保护作用,加剧了神经元胞体的凋亡㊂相反地,有研究者[18]在实验中自第十胸椎脊髓背侧缓慢注射3-MA(200nmol/L),然后进行造模,结果发现3-MA对大鼠脊髓损伤具有保护作用㊂Lei等[19]的研究结果也支持3-MA在脊髓损伤中的积极作用㊂Zhang等[16]与杨德刚等[18]的实验中3-MA发挥着相反的作用,注射部位可能是关键,尚待验证㊂在脊髓损伤后,自噬的水平将明显上升,神经元的自噬水平与脊髓神经功能的恢复密切相关,正如Hou等[20]的实验结果㊂Fang等[21]亦发现在脊髓缺血再灌注早期3-MA加重了再灌注产生的损伤,而在损伤72h后,3-MA则减少了神经元的丢失,具有保护神经元的作用㊂也有研究[22]间接证明3-MA 在体外可通过调节炎症反应来调控脊髓损伤的修复进程㊂因此,深入了解3-MA在脊髓损伤中的作用机制,对神经损伤的恢复具有重要的临床指导意义㊂1.3㊀3-MA与帕金森病帕金森病(Parkinson s disease,PD)是以多巴胺能(dopaminergic,DA)神经元的进行性㊁广泛性丢失及其胞内不溶性α突触核蛋白(α-synuclein,α-Syn)形成路易小体聚集为标志的中枢神经退行性疾病[23]㊂研究发现细胞自噬功能障碍可致α-Syn清除受损,而α-Syn的增多又可造成自噬功能受损,最终导致蛋白质异常聚集㊁线粒体功能障碍及神经细胞毒性等[24-25]㊂此外,包括PARK7基因[26]㊁PINK1基因[27]㊁PARK8基因[28]等与PD相关的基因都在一定程度上参与了自噬的过程,而近年来对此病的干预也主要集中在对其自噬水平的调节研究上㊂Jin等[29]在实验中同时应用雷帕霉素和3-MA,结果显示3-MA可增强肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)激发的小胶质细胞的神经毒性作用,造成更多DA神经元的丢失㊂Han等[30]在培养基中加入5mM3-MA,发现PLIN4沉默导致的神经保护被3-MA抑制㊂然而,有研究者[31]使用自噬抑制剂3-MA证实肉桂醛在PD模型中具有神经保护作用,提示抑制自噬可能是今后治疗PD的新方向㊂从当前的证据来看,3-MA在PD中发挥着双重作用,一方面,3-MA阻碍自噬清除错误折叠的蛋白,从而导致PD的发生,而另一方面,3-MA可抑制过度激活的自噬,延缓PD的发展甚至避免PD的发生,再次验证了自噬是一个动态变化的过程,不足或过度的自噬水平对神经细胞的损伤修复都是不利的㊂因此,进一步研究3-MA在PD中的调节机制,探讨药物治疗的起效途径,可为其治疗提供新策略㊂1.4㊀3-MA与其他中枢神经系统疾病3-MA在其他中枢神经系统疾病中也有运用,如蛛网膜下腔出血(subarachnoid hemorrhage, SAH)㊁创伤性脑损伤(traumatic brain injury,TBI)及阿尔茨海默症(Alzheimer s disease,AD)等㊂Guo 等[32]经脑室注射3-MA,发现3-MA可抑制白藜芦醇激活的自噬,减缓神经功能的恢复㊂有研究[33]表明在小鼠TBI模型中,3-MA经侧脑室预给药后, LC3-Ⅱ和Beclin-1的表达水平明显降低,减少了神经细胞死亡,减小了脑损伤面积,并能改善运动功能障碍,加速学习与记忆能力的恢复㊂有学者[34]发现电针能有效降低神经元凋亡,改善AD大鼠学习记忆能力,而在针刺前30min经腹腔注射3-MA (0.5mg/kg)后针刺的治疗效应被阻断㊂此外,在血管性痴呆[35]及癫痫[36]模型中,3-MA也被证实有助于神经的损伤修复㊂2㊀3-MA与周围神经系统疾病周围神经损伤后,神经轴突出现脱髓鞘病变㊁断裂变性和神经水肿等,损害的远端出现瓦勒氏变性等一系列的病理性改变[37],而自噬能清除雪旺细胞内崩溃的髓鞘碎片和受损细胞器,促进损伤神经的修复[38]㊂Lu等[39]研究发现,大鼠再生的坐骨神经主要通过细胞自噬来维持正常形态,而[40]3-MA 恰恰通过抑制自噬起相反的作用,使轴突和髓鞘再生受到抑制㊂还有学者[41]通过结扎坐骨神经建立神经性疼痛模型,于术后1h经腹腔注射3-MA(10 mg/kg),证实了3-MA能抑制自噬,明显恶化神经病变状况㊂相同的,Chen等[42]也证实了周围神经损伤激活了自噬,自噬参与了损伤的周围神经的更新和再生,使用3-MA则阻碍神经的再生㊂可见,在周围神经系统疾病中3-MA不利于神经修复及再生㊂但目前3-MA在周围神经系统疾病中的研究局限于坐骨神经损伤,尚缺乏对其他病种的研究㊂故笔者通过文献研究认为,扩展病种,探索自噬在周围神经损伤修复及再生中的具体作用及其可能机制具有重要的价值,这或许是今后研究的突破点㊂3㊀3-MA在神经系统疾病中的使用3-MA的注射频次有单次注射[18]和多次注射[34,41],可于造模前[16,35]或造模后[18,36]注射,主要根据实验的目的灵活选择㊂由于3-MA作为自噬抑制剂对Ⅲ型磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)的作用是短暂的[43],而自噬又是一个动态变化的过程,故若想观察疾病不同时间点的自噬水平,最好每日注射㊂3-MA在实验中常选择的注射部位为腹腔[16-17]或脑室[11,32],也可经尾静脉[44]或者脊髓注射[18]㊂不同部位的起效方式不同,腹腔注射主要通过体液循环最终作用于病所,可调整全身的自噬水平,但靶向性不强;而脑室注射直接作用于特定脑区,针对性强,但对动物的损伤较大,死亡率较高㊂在今后的研究中我们可多加论证其他部位注射的可行性,并进一步摸索其起效量及产生的一系列副作用㊂3-MA在培养基中常选用的浓度为5mmol/L[5,30],活体实验中的使用浓度范围在0.5~30mg/kg[16,34,41],这主要跟注射频次及注射部位存在一定相关性㊂对于其配制方法,目前多用二甲基亚砜(dimethyl sulfone,DMSO)㊁磷酸缓冲盐溶液(phosphate buffer saline,PBS)㊁生理盐水等溶解,也可以先用DMSO配制后再用PBS缓冲液缓冲至所需浓度㊂4㊀3-MA作为自噬抑制剂的优缺点3-MA作为自噬抑制剂,其优势为对细胞的损害较小,且能够特异性地抑制PI3K㊂PI3K是自噬激活的必要条件[45],其主要有3种类型,分别是Ⅰ型㊁Ⅱ型和Ⅲ型PI3K㊂研究已证实了3-MA主要抑制Ⅲ型PI3K[46],通过抑制Beclin-1-PtdIns3KC3复合物的形成来抑制胞浆可溶性形式LC3-I向自噬体膜结合形式LC3-Ⅱ转化㊂最近的研究[43]表明3-MA 在培养基中具有双重作用,在营养缺乏培养基中抑制自噬,而在营养丰富的条件经过长时间的治疗可促进自噬㊂关于3-MA促进自噬的研究目前较少, Wu等[43]证实了3-MA能持续阻断Ⅰ型PI3K,其可能是通过抑制Ⅰ型PI3K下游的信号分子蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)在Thr308和Ser473处的磷酸化来激活自噬[47],有待验证㊂此外,3-MA在室温下溶解性差,一般在使用前需在60ħ~70ħ的水浴中加热促溶[48],且仅在高浓度下有效㊂所以,开发可溶性高㊁特异性强的自噬抑制剂对神经系统疾病的研究是至关重要的㊂有研究[49]通过化学修饰3-MA,合成得到了三个3-MA的衍生物,它们表现出更高的可溶性和更强的特异性,且仅抑制Ⅲ型PI3K 而不抑制Ⅰ型PI3K,不足的是对细胞存在一定毒性作用,可见利用化学修饰可能是优化3-MA性能的一种行之有效的方法㊂自噬的机制十分复杂,3-MA不能完全抑制所有的自噬途径,还有许多不受3-MA调控的信号通路㊂单纯自噬体的减少不能准确判定自噬被抑制,有可能是自噬体与溶酶体的融合受阻,所以还需结合使用自噬体与溶酶体融合的抑制剂氯喹㊁巴佛洛霉素A1或敲除溶酶体关联膜蛋白2来观察自噬流的变化,进一步评判是否成功抑制自噬,以得到可靠的实验结果㊂有研究显示[5]5mmol/L3-MA对于自身自噬的阻断可达到60%㊂然而,在研究电针对自噬水平影响的实验中,3-MA似乎完全抵消了针刺的保护效应[35],最可能的解释是3-MA可抑制通过针刺预处理诱导的大部分自噬㊂郭科等[36]在造模后固定于每日上午8点注射3-MA,故3-MA的起效机制是否受昼夜节律影响有待验证㊂5㊀结语综上,自噬抑制剂3-MA被多方证实参与了神经细胞的损伤修复及再生过程,与大部分神经系统疾病的关系也已被广泛研究并迅速成为神经科学领域的研究热点,但在其中的具体作用受诸多因素影响㊂此外,缺乏高效的自噬抑制剂依旧是理解自噬在神经系统疾病中的生理病理作用的障碍所在,3-MA作为相对成熟的自噬抑制剂,在神经系统疾病研究中应用较为灵活,但仍存在诸多不足之处㊂因此,探索3-MA的更多特性,明确其在疾病不同状态下的作用是当下需重点突破的难题,也将是今后神经系统疾病研究的关键所在㊂参考文献:[1]㊀Lim Y,Cho H,Kim EK.Brain metabolism as a modulator ofautophagy in neurodegeneration[J].Brain Res,2016,1649(PtB):158-165.[2]㊀Suresh SN,Chavalmane AK,Malini P,et al.Modulation ofautophagy by a small molecule inverse agonist of ERRαisneuroprotective[J].Front Mol Neurosci,2018,11:109. 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自噬在膀胱癌治疗中的研究进展

自噬在膀胱癌治疗中的研究进展林方优;程帆【摘要】自噬的研究是目前生物医学领域的热点之一,其广泛参与机体各种生理和病理过程,自噬相关基因在膀胱癌的发生、发展过程中发挥重要作用,与膀胱癌抗肿瘤药物治疗不敏感及耐药密切相关.药物治疗是预防膀胱癌术后复发的重要方式,也是晚期膀胱癌的主要治疗方式之一,而自噬与膀胱癌药物治疗的耐药性密切相关,因此调控自噬可能有助于增强现有的治疗方法的疗效,并有助于开发新的治疗方法.目前,对许多膀胱癌化疗药物的作用机制及其产生耐药性的原因仍缺乏系统认识,自噬的相关研究将给膀胱癌的防治提供新颖、可行的思路及科学有效的依据.%The research of autophagy is one of the hotspots in the field of biomedicine,which is widely involved in various physiological and pathological processes,and the autophagy-related genes play an important role in the pathogenesis of bladder cancer.Medication is an important way to prevent the recurrence of bladder cancer,and it is also one of the main treatments for advanced bladder cancer.And autophagy is closely related to the drug resistance of bladder cancer,so the reg-ulation of autophagy may help to enhance the therapeutic effect of existing therapies and develop new therapies.At present, there is still no systematic understanding on the mechanisms of many bladder cancer chemotherapeutic drugs and the causes of drug resistance,and the related research on autophagy will provide new and feasible research ideas and effective scien -tific basis for the prevention and treatment of bladder cancer.【期刊名称】《医学综述》【年(卷),期】2017(023)020【总页数】5页(P4023-4027)【关键词】膀胱癌;自噬;自噬相关基因;化疗药物;耐药性【作者】林方优;程帆【作者单位】武汉大学人民医院泌尿外科,武汉430060;武汉大学人民医院泌尿外科,武汉430060【正文语种】中文【中图分类】R737.14从1963年De Duve和Wattiaux首次提出自噬的概念[1]到2016年大隅良典因阐明细胞自噬作用的原理及生理意义摘得诺贝尔生理或医学奖，人类对自噬的研究已有半个多世纪[2]。

自噬抑制剂3-MA对重度急性胰腺炎大鼠肠道黏膜屏障作用的实验研究

-478 -Chia J GasWoexWol, 2020, VoU 25 , No. 8自噬抑制剂3-MA 对重度急性胰腺炎大鼠肠道黏膜屏障作用的实验研究*DOI ： 5. 3969/j. issd. 508 A125. 2020.08. 006*基金项目：泸州市科技创新苗子培育计划项目［205胆A0(21/22).# Email : luoxpjua/@ foxmaib com罗旭娟1彭燕2陈霞2石蕾2川北医学院附属医院消化内科1( 637000)西南医科大学附属医院消化内科2背景:肠道黏膜屏障功能与重度急性胰腺炎(SAP)患者病情转归有密切关系，保护肠道黏膜屏障功能已成为 SAP 治疗的关键环节。

目的:探索自噬与SAP 肠道黏膜屏障功能的关系以及自噬抑制剂3-MA 对SAP 肠道黏膜屏障功能的影响。

方法:将SD 大鼠分为假手术组(SO 组)、急性坏死性胰腺炎组(ANP 组)、3-MA 组，并进一步分为术后3 h 、6 h 、12 h 三个亚组。

采用HE 染色观察胰腺组织、肠道组织病理变化，检测血淀粉酶,ELISA 法检测血清内毒素、肠型脂肪酸结合蛋白((AABP )水平，蛋白质印迹法检测BeclinA 蛋白表达。

结果:与SO 组相比,ANP 组各时间点胰腺和末端回肠组织病理学评分、血淀粉酶、内毒素、、异ABP 明显升高(P <4. 45), BeclinA 蛋白表达显著降低(P<9.47),且均呈时间依赖性(P <4. 45)；给予3-MA 后，上述各指标均明显改善(P < 4. 95)。

结论:在SAP 中，肠道自噬随病情进展逐渐增加，以3-MA 干预后，肠道自噬有所减少，且肠道黏膜屏障功能损伤减轻。

提示肠道自噬与SAP 肠道黏膜屏障功能损伤有关,3-MA 对其有一定抑制作用。

关键词胰腺炎，急性坏死性；肠黏膜屏障；自噬Effeh of Artophagy Inhibitor 3-MA on Intestinal Mrcusal Barrier Frnction C Rat: With Experimeetal SevereAcute Pancreytitie LUO Xujur “ , PENG Yau , CHEE Xia 2 , SHI LeP . 1Departmeni op Gastroenterolopy , AfiCatePHospital op NorO SicCuat MePical Collepc , NancCong , SicCuaa Province ( 637000) ；；Departmeui ep Gastroenterolopy , OieAfiCateP Hospita, ep Soahwesi MePical 口“^何^, Luzhop , SicCuaa ProvinceBackgrernd : Intestinai mucosal barrier functiou is closely related to the prognosis of paOents with severe aertepancoatiks (SAP). Potecting intestinal mucosal barrier functiou has become the Sep of toatmen- of SAP. Aims ： Tv explore the oUtiouship between aytopha/y and intestinal mucosal barrier functiou in SAP and the effeo- of aytopha/yindibitor 3-MA. Methods ： SD rats were randomly divided into sham ogeratiou (SO) /o/p , aerte necrotizing pancoatiks (ANP) /o/p and 3-MA /o/p. Each /o/p was further divided into 3 suP/o/ps : 3, 6 and 12 hours after suraeoc HE staining was used to o/seoe the pathologicai changes of pancreatic and intestinal tissue. BUoh amylase was detected ;serum endotoxin and intestinal fatty acid-bi —Og protein (I-FABP) were determined by ELISA ； protein expossiou ofBeckn-1 was examined b y Western bUttin/ Compared with SO /o/p , pathologicai score of pancreatic andintestinal tissue, bloop amylase , endotoxin and I-FABP were significa —y increased at each tioe points in ANP /o/p (P <4. 45) , while protein expossiou of Beckn-1 was significa —y decreased (P <4. 45) , and aO aPove-mentioued indices were500-26X6x 06x 1 ( P <4.45). After 5x 156X1 with 3-MA , aPove-mentioued indices were significa —y ameliorated ( P < 4. 45) 9 Conhrsions ： In SAP, Otestincl autopha/y /ra/uaOy increases with the progress of disease. After inteoentiou with3-MA , intestinai aptogha/y decreases and dama/e of intestinai mucoscl barrier functiou is alleviated , sug/estin/ that OtestOcI aptogha/y is related to the dama/e of intestinai mucoscl barrier functiou of SAP, and 3-MA has an Ohibitoo eiect.Key wonts Pancoatiks, A cu W Necrotizing ； Intestinai Mucosal Barrier ; Autogha/y重度急性胰腺炎(severe pcu -c yaycreatitis ,SAP)是临床上常见急腹症之一，其发病迅速，病情进展快，病死率高，已成为临床治疗难点之一 7]OSAP 早期即合并多器官功能障碍，而肠道是最早出现障碍的器官之一。

高糖环境对视网膜血管内皮细胞自噬的影响及机制

高糖环境对视网膜血管内皮细胞自噬的影响及机制姚国敏;李蓉;姚杨;杜军辉;王小娣;邓颖【摘要】目的研究高糖培养环境对恒河猴脉络膜视网膜血管内皮细胞(RF/6A)自噬的影响及机制.方法将体外培养的RF/6A细胞随机分为对照组、高糖组和3-甲基腺嘌呤(3-MA)+高糖组,对照组细胞在无糖培养基中培养,高糖组细胞在培养基中加入25mM D-glucose进行培养,3-MA+高糖组用5 mg/ml 3-MA预处理1.5 h,然后置于含25 mM D-glucose的培养基中继续培养.培养48 h后,采用Western blot法检测各组细胞的自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3β(LC3B)、Atg5及关键信号通路蛋白PI3K、AKT、mTOR的表达,采用可表达mCherry-GFP-LC3B融合蛋白的腺病毒感染细胞,激光共聚焦显微镜下观察细胞内自噬的变化.结果①对照组、高糖组、3-MA+高糖组细胞中的LC3B-II/LC3B-I值、Atg5值分别为(0.19±0.02、0.58±0.06和0.43±0.04)和(0.35±0.05、0.96±0.06和0.83±0.06),组间总体比较差异均有统计学意义(LC3B-II/LC3B-I:F=55.58,P=0.000;Atg5:F=100.35,P=0.000).高糖组细胞中LC3B-II/LC3B-I值和Atg5值均明显高于对照组和3-MA+高糖组,差异均有统计学意义(均P<0.05),3-MA+高糖组的LC3B-II/LC3B-I值和Atg5值均高于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05).②对照组、高糖组、3-MA+高糖组细胞中的PI3K值、AKT 值和mTOR值分别为(0.93±0.06、0.94±0.07和0.89±0.07)、(0.95±0.05、0.94±0.04和0.90±0.02)和(0.81±0.04、0.82±0.04和0.80±0.02),组间总体比较差异均无统计学意义(均P>0.05);三组磷酸化蛋白p-PI3K值、p-AKT值和p-mTOR值分别为(0.74±0.02、0.40±0.02和0.70±0.02)、(0.87±0.02、0.47±0.02和0.77±0.06)和(0.76±0.03、0.38±0.02和0.70±0.02),组间总体比较差异均有统计学意义(p-PI3K:F=249.92,P=0.000;p-AKT:F=100.94,P=0.000;p-mTOR:F=218.21,P=0.000).高糖组细胞中p-PI3K、p-AKT和p-mTOR值均明显低于对照组和3-MA+高糖组,差异均有统计学意义(均P<0.05),3-MA+高糖组的p-PI3K、p-AKT和p-mTOR值均低于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05).③对照组细胞浆中出现较弱的GFP(绿点)和mCherry(红点)荧光信号,高糖组黄点(红绿荧光融合)和红点明显多于对照组,自噬增强;3-MA+高糖组黄点和红点较高糖组减少,自噬减弱.结论高糖环境通过抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路激活RF/6A细胞自噬.【期刊名称】《临床眼科杂志》【年(卷),期】2019(027)004【总页数】6页(P361-366)【关键词】自噬;高糖;RF/6A;PI3K/AKT/mTOR【作者】姚国敏;李蓉;姚杨;杜军辉;王小娣;邓颖【作者单位】710077西安,西安医学院第一附属医院眼科;710077西安,西安医学院第一附属医院眼科;710077西安,西安医学院第一附属医院中心实验室;710054 西安,西安交通大学附属西安市第九医院眼科;710077西安,西安医学院第一附属医院眼科;710077西安,西安医学院第一附属医院眼科【正文语种】中文在全球范围内，糖尿病的患病率正不断上升，糖尿病性视网膜病变(DR)等并发症也随之逐年增长。

自噬抑制剂3-MA对机械性神经元损伤后神经元凋亡的影响

自噬抑制剂3-MA对机械性神经元损伤后神经元凋亡的影响赵明明;罗鹏;赵永博;尹丰;费舟【摘要】目的研究自噬抑制剂6-氨基-3-甲基嘌呤(3-MA)对机械性损伤后神经元凋亡的影响.方法小鼠皮层神经元原代培养2w后,采用机械性神经元损伤模型,通过蛋白印迹法(Western blot)定量分析损伤后不同时间点自噬相关分子微管相关蛋白轻链3(LC3)Ⅰ/Ⅱ的表达情况;通过免疫荧光染色分析机械性损伤后24h神经元自噬相关分子LC3的表达情况;小鼠皮层神经元原代培养2w后,用自噬抑制剂3-MA 预处理1h,采用机械性神经元损伤模型,通过乳酸脱氢酶(LDH)活性测定及碘化丙啶(PI)/Hoechst 33342双染测定神经元损伤程度以及3-MA的保护作用,并通过Western blot研究凋亡相关指标caspase-3和自噬相关指标微管相关蛋白轻链3(LC3)和Beclin-1的表达变化.结果 Western blot方法和免疫荧光组化同时证明机械性神经元损伤后24 h LC3Ⅱ表达明显增加;LDH活性测定表明3-MA能抑制机械性损伤造成的LDH活性的增高;PI/Hoechst 33342双染表明3-MA可以明显减少机械性损伤后神经元的凋亡;通过Western blot法证明3-MA抑制LC3Ⅱ,并导致cleaved caspse-3表达明显降低.结论自噬抑制剂3-MA可能通过抑制自噬而减少机械性神经元损伤后神经元凋亡,进而对机械性损伤后神经元起保护性作用.【期刊名称】《中华神经外科疾病研究杂志》【年(卷),期】2016(015)003【总页数】5页(P196-200)【关键词】机械性神经元损伤;凋亡;自噬【作者】赵明明;罗鹏;赵永博;尹丰;费舟【作者单位】海军总医院神经外科,北京100048;第四军医大学西京医院神经外科,陕西西安710032;解放军第323医院神经外科,陕西西安710054;海军总医院神经外科,北京100048;第四军医大学西京医院神经外科,陕西西安710032【正文语种】中文【中图分类】R322创伤性脑损伤(traumatic brain injury, TBI)是临床上常见的高致残、致死性疾病，分为原发性脑损伤和继发性脑损伤，根据GCS评分又分为轻度、中度和重度[1,2]。

血管内皮细胞生长因子抑制剂对视网膜血管内皮细胞自噬的促进作用

血管内皮细胞生长因子抑制剂对视网膜血管内皮细胞自噬的促进作用李蓉;杜军辉;姚杨;李晓艳【期刊名称】《眼科新进展》【年(卷),期】2018(038)010【摘要】目的观察血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)抑制剂对小鼠视网膜血管内皮细胞(retinal vascular endothelial cells,RVECs)自噬水平的影响.方法将RVECs随机分为五组:正常对照组、缺氧对照组、自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3-MA)组、VEGF抑制剂(anti-VEGF)组和3-MA+anti-VEGF组.采用Western blot法检测RVECs中两种自噬标志蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3)及Bec-lin-1的表达;计算绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)阳性斑点细胞占比;透射电子显微镜下观察细胞内形成的自噬体的超微结构.结果正常对照组、缺氧对照组、3-MA组、anti-VEGF及3-MA+anti-VEGF组的LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ分别为0.182±0.125、0.587±0.101、0.309±0.151、0.914±0.037及0.585±0.098;Beclin-1分别为0.205±0.035、0.590±0.120、0.425±0.082、0.842±0.087及0.607±0.022;GFP阳性斑点细胞比例分别为17.107％±3.521％、90.278％±2.684％、82.591％±4.490％、94.798％±1.760％及89.472％±3.764％.与正常对照组相比,缺氧对照组LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ和Beclin-1蛋白表达增高,GFP阳性斑点细胞的比例增加(均为P<0.05),同时自噬体增多.与缺氧对照组相比,3-MA组的LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、Beclin-1蛋白表达水平及GFP阳性斑点细胞比率降低(均为P<0.05),同时自噬体减少;anti-VEGF 组的LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、Beclin-1蛋白表达水平及GFP阳性斑点细胞比率升高(均为P<0.05),同时自噬体增多.与anti-VEGF组相比,3-MA+anti-VEGF组的LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、Beclin-1蛋白表达水平及GFP阳性斑点细胞比率降低(均为P<0.05),同时自噬体减少.结论 VEGF抑制剂对缺氧状态下视网膜血管内皮细胞的自噬水平有促进作用.【总页数】5页(P935-939)【作者】李蓉;杜军辉;姚杨;李晓艳【作者单位】710077 陕西省西安市,西安医学院第一附属医院眼科,西安医学院全科医学院五官科教研室,西安医学院医院管理研究所;710054 陕西省西安市,西安交通大学附属西安市第九医院眼科;西安医学院第一附属医院中心实验室;710077 陕西省西安市,西安医学院第一附属医院眼科,西安医学院全科医学院五官科教研室,西安医学院医院管理研究所【正文语种】中文【中图分类】R774.1【相关文献】1.血管内皮细胞生长因子反义寡聚脱氧核苷酸对视网膜新生血管的影响 [J], 吴丹巍;邓德勇;韩丽荣;郑军;竺月妹;夏风华2.内皮抑素对视网膜新生血管中血管内皮细胞生长因子表达的影响 [J], 吴静;张美霞;张军军;严密3.自噬抑制联合抗-VEGF对视网膜血管内皮细胞血管生成的作用 [J], 陈萌;李蓉;姚杨;蔡天志;于照祥;林小波4.组织蛋白酶B抑制剂对视网膜血管内皮细胞系生物学行为的影响 [J], 周国宏;黎晓新5.高糖环境对视网膜血管内皮细胞自噬的影响及机制 [J], 姚国敏;李蓉;姚杨;杜军辉;王小娣;邓颖因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

自噬抑制联合抗-VEGF对视网膜血管内皮细胞血管生成的作用

自噬抑制联合抗-VEGF对视网膜血管内皮细胞血管生成的作用陈萌;李蓉;姚杨;蔡天志;于照祥;林小波【期刊名称】《实用医学杂志》【年(卷),期】2017(33)24【摘要】Objective In this study,we explored the role of combination of autophagy inhibition and anti-VEGF in proliferation,migration and tube formation of mouse retinal vascular endothelial cells(RVECs). Methods Well cultured mouse RVECs were randomly divided into four groups:autophagy inhibition group(add-ing autophagy inhibitor 3-MA),anti-VEGFgroup(adding anti-VEGF-A neutralized antibody),autophagy inhibi-tion+anti-VEGF group(adding the two reagents)and the control group.All cells were then cultured in the hypoxic condition. The cell proliferation,migration and tube formation were detected by EdU,transwell and matrigel as-say,respectively. Results The cell proliferation rate,number of migrated cells and number of tube formation of the other three groups decreased when compared with the control group.These data above in autophagy inhibition+anti-VEGF group were all significantly less than 3-MA group and anti-VEGF group. Conclusion Combination of autophagy inhibition and anti-VEGF may be more effective than simple anti-VEGF in inhibition of retinal neovascu-larization.%目的观察自噬抑制联合抗-血管内皮生长因子(VEGF)对小鼠视网膜血管内皮细胞(RVECs)的增殖、迁移和管腔形成的作用.方法将RVECs随机分为4组:自噬抑制组、抗-VEGF组、自噬抑制+抗-VEGF 联合组和对照组,4组细胞均在低氧条件下继续培养.分别采用EdU法、Transwell 法及Matrigel胶法检测细胞增殖、迁移和管腔形成.结果与对照组相比,其他3组的细胞增殖率、迁移细胞数和管腔形成数有不同程度的减少,且3-MA+抗-VEGF 组的上述指标均明显小于3-MA组和抗-VEGF组.结论自噬抑制联合抗-VEGF在抑制视网膜新生血管中可能比单纯抗-VEGF发挥更好的作用.【总页数】5页(P4048-4052)【作者】陈萌;李蓉;姚杨;蔡天志;于照祥;林小波【作者单位】723000 陕西省汉中市,西安交通大学附属三二〇一医院眼科;710077 西安医学院第一附属医院眼科;710077 西安医学院第一附属医院实验室;710077 西安医学院第一附属医院心血管内科;710077 西安医学院第一附属医院普外科;710077 西安医学院第一附属医院普外科【正文语种】中文【相关文献】1.血管内皮细胞生长因子抑制剂对视网膜血管内皮细胞自噬的促进作用 [J], 李蓉;杜军辉;姚杨;李晓艳2.缺氧条件下自噬在视网膜血管内皮细胞血管生成中的作用 [J], 李蓉;杜军辉;姚杨;于照祥;樊卓;常伟平3.多聚嘧啶序列结合蛋白相关剪接因子对视网膜血管内皮细胞IGF-1/VEGF信号通路的抑制作用 [J], 田芳;东莉洁;吉洁;周玉;李文博;白伶伶;王飞;漆晨;苏畅4.多聚嘧啶序列结合蛋白相关剪接因子对视网膜血管内皮细胞IGF-1／VEGF信号通路的抑制作用 [J], 田芳;东莉洁;吉洁;周玉;李文博;白伶伶;王飞;漆晨;苏畅;张晓敏;李筱荣;5.αA晶体蛋白在缺氧状态下对视网膜的血管内皮细胞血管生成作用 [J], 郑嘉琳;吴绵绵;张琰;张红;孙靖;石怡因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

自噬在熊果酸诱导的人脐静脉内皮细胞损伤中的作用

自噬在熊果酸诱导的人脐静脉内皮细胞损伤中的作用毕娟娟;何林;余音;郭倩;叶秀峰【摘要】目的:研究自噬在熊果酸诱导的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)损伤中的作用.方法:体外培养HUVECs,运用不同浓度的熊果酸处理36 h,采用MTT法检测HUVECs增殖率的变化;透射电镜观察细胞超微结构的改变;单丹磺酰尸胺(MDC)荧光染色观察熊果酸对HUVECs自噬表达水平的影响;Western blotting检测微管相关蛋白轻链3(microtubule-associated protein light chain 3,LC3)及自噬相关蛋白Beclin-1的变化;RT-PCR检测LC3及Beclin-1 mRNA的变化;流式细胞术检测自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3-MA)抑制自噬前后经熊果酸处理的HUVECs凋亡率的变化.结果:熊果酸抑制HUVECs增殖并呈剂量依赖性;熊果酸可诱导HUVECs产生自噬:透射电镜和MDC染色均显示HUVECs经熊果酸处理后自噬囊泡明显增加且自噬在基因及蛋白水平的表达均增加;3-MA与熊果酸联合作用于HUVECs时抑制了熊果酸诱导的HUVECs自噬空泡的积聚并且可明显促进HUVECs凋亡.结论:熊果酸抑制HUVECs增殖,并诱导其发生自噬,自噬在此过程中对HUVECs起保护作用.自噬抑制剂3-MA能够增强熊果酸诱导的HUVECs的增殖抑制作用并且促进HUVECs 发生凋亡.%AIM: To investigate the role of autophagy in the injury of human umbilical vein endothelial cells (HUVECs) induced by ursolic acid (UA). METHODS; HUVECs were cultured in vitro with UA at various concentrations for 36 h and the proliferation inhibitory rate of HUVECs was determined by MTT method . The change of ultrastructure was observed under transmission electronic microscope (TEM). The autophagy was observed using fluorescent microscope by monodansylcadaverin (MDC)staining. The protein level and mRNA expression of microtubule - associated protein light chain 3 (LC3) and Beclin - 1 were detected by Western blotting and RT - PCR, respectively. Cell apoptotic rate was meas-ured by flow cytometry analysis. RESULTS: UA at various concentrations showed significantly dose - dependent inhibitory effect on the proliferation of HUVECs. Autophagy was induced in HUVECs treated with UA as detected by MDC staining and TEM. The protein level and mRNA expression of LC 3 and Beclin - 1 in HUVECs were significantly increased following the treatment with UA , which was also in a time - dependent manner. Compared with UA group , addition of 3 - methylade-nine (3 - MA) inhibited the increase in autophagic vacuoles and exacerbated the apoptosis . CONCLUSION: Autophagy shows protective effect on the proliferation inhibition of HUVECs induced by UA and the proliferation inhibition can be en -hanced by the autophagy inhibitor 3 - MA. 3 - MA may enhance the apoptotic rate of HUVECs induced by UA .【期刊名称】《中国病理生理杂志》【年(卷),期】2012(028)004【总页数】7页(P601-607)【关键词】熊果酸;内皮细胞;自吞噬作用;细胞凋亡【作者】毕娟娟;何林;余音;郭倩;叶秀峰【作者单位】重庆医科大学神经科学研究中心,重庆,400016;重庆医科大学神经科学研究中心,重庆,400016;重庆医科大学神经科学研究中心,重庆,400016;重庆医科大学神经科学研究中心,重庆,400016;重庆医科大学神经科学研究中心,重庆,400016;重庆医科大学病理教研室,重庆,400016【正文语种】中文【中图分类】R363△通讯作者 Tel：************；E-mail:***************病理性血管生成具有持续性、无控性，其在肿瘤的演化过程中起着重要的作用。

细胞自噬与心肌肥厚

细胞自噬与心肌肥厚宋洁;李乐【期刊名称】《中国医药生物技术》【年(卷),期】2017(012)005【总页数】4页(P441-444)【作者】宋洁;李乐【作者单位】310014杭州,浙江工业大学药学院;310014杭州,浙江工业大学药学院【正文语种】中文自噬是真核细胞内特有的一种进化上高度保守的代谢过程，通过降解功能异常或错误折叠的蛋白质以及受损或老化的细胞器来维持细胞能量的提供、物质的循环以及细胞的自我更新。

研究发现自噬与多种心血管疾病关系密切，而在心肌肥厚中也发现有自噬的发生。

Nakai 等[1]观察到小鼠敲除Atg5 基因后抑制自噬，导致心肌肥厚，并且有多项研究表明，自噬减弱可促进心脏肥厚反应，但两者关系的具体机制尚未阐明。

本文对近期关于自噬与心肌肥厚的关系研究作一综述。

目前自噬可以分为巨自噬（macroautophagy）、微自噬（microautophagy）和分子伴侣介导的自噬（chaperone-mediated autophagy），其中巨自噬研究最为成熟。

巨自噬是底物蛋白被一种双层膜结构包裹形成自噬小泡，自噬小泡的外膜与溶酶体膜或者液泡膜融合，释放包裹底物蛋白的泡状结构到溶酶体或液泡中，并最终在一系列水解酶的作用下将其降解的过程，用以维持内环境能量的平衡以及高分子的合成。

在微自噬中，底物蛋白通过溶酶体膜或者液泡内膜的内陷进行包裹并降解。

分子伴侣介导的自噬特点是选择性地降解细胞内蛋白质的氨基酸序列KFERQ。

分子伴侣鉴别出该序列后溶酶体相关性膜蛋白（lysosome-associated membrane protein，LAMP）2A促进蛋白将其运输到溶酶体中进行降解。

目前微自噬和分子伴侣介导的自噬在心血管疾病中的意义并未具体阐明[2]。

细胞自噬过程中有多种相关蛋白参与，如促凋亡蛋白 B 淋巴细胞瘤 2 家族的成员Bcl2/腺病毒 E1B 相互作用蛋白 3（BNIP3）、酵母自噬基因 Atg6 的同系物Beclin-1、腺苷酸活化蛋白激酶（adenosine 5'-monophosphate activated protein kinase，AMPK）及哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin，mTOR）、叉头蛋白 O（forkhead box O，FOXO）、溶酶体相关膜蛋白-2（LAMP-2）等[3]。