苏教版教学课件DNA的粗提取和鉴定
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DNA的粗提取和鉴定PPT课件
损失，最好使用塑料的烧杯和试管盛放鸡血细胞
液
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讨论：提取鸡血中的DNA时，为什么除去血液 中的上清液？
答：血液分为两部分，一部分是血浆，一部分 是血细胞，离心后除去的上清液是血浆
5、方法步骤
①提取鸡血细胞的细胞核物质
将制备好的鸡血细胞液5 mL～10mL，注入到
50 mL烧杯中。向烧杯中加入蒸馏水20 mL，
3.DNA遇二苯胺（沸水浴）会染成蓝色，因此，二苯 胺可以作为鉴定DNA的试剂
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实验用具：铁架台；铁环；镊子；三角
架；酒精灯；石棉网；载玻片；玻璃棒； 滤纸；滴管；量筒（100ml，一个）；烧 杯；（100ml，一个，50ml、500ml各 二个）；试管（20ml，二个）；漏斗；试 管夹；纱布。
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（四） DNA的析出与鉴定
1、DNA的析出
DNA的析出用的是与滤液体积相等的冷却的酒 精溶液（体积分数为95％），静置2-3min，溶 液中会出现白色丝状物，这就是粗提取DNA。 用玻璃棒沿一个方向搅拌，卷起丝状物，并用 滤纸吸取上面的水
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三、实验案例 （一）案例一：以鸡血为实验材料进行DNA的 粗提取 1、鸡血细胞做实验材料的原因
①鸡血细胞核的DNA含量丰富，材料易得
②用动物肝脏细胞作实验材料常常需要匀浆和 离心，对设备要求较高，操作繁琐，历时较长
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4、课前准备鸡血细胞液
①过程
取质量浓度为0．1g/ml的柠檬酸纳溶液（抗凝
③析出含DNA的粘稠物
高中生物 DNA粗提取与鉴定课件 苏教版选修1
②如何通过控制 NaCl 溶液的浓度使 DNA 在 盐溶液中溶解或析出？
一、提取DNA的原理
2、DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性 ①蛋白酶能水解蛋白质，但是对DNA没 有影响 ②大多数蛋白质不能忍受 60 － 80 度的 高温，而DNA在80度以上才会变性 ③洗涤剂可以瓦解细胞的细胞膜，去 除脂质和蛋白质,但对DNA没有影响
一、提取DNA的原理
1、DNA的溶解性
①DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同
②、DNA在酒精溶液中的溶解性 DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些蛋白质则可以溶于酒精。利用这一原理， 可以将DNA与蛋白质进一步分离
①根据 DNA 在 NaCl 溶液中的溶解度曲线图，
思 考 在 什 么 浓 度 下 ， DNA 的 溶 解 度 最 小 ？ DNA在NaCl溶液中的溶解度是如何变化的？
二、实验设计
讨论：此步骤获得的滤液中可能含有哪些细胞成分？ 可能含有核蛋白、多糖和RNA等杂质 （三）去除滤液中的杂质 ----这是实验成功的关键
（四）DNA析出与鉴定
三、实例：用鸡血细胞液提取DNA并鉴定
1.制备鸡血细胞液：
在鸡血中加入质量浓度为0．1g/mL的柠檬酸钠溶液，离 心或静置处理；除去血浆，留鸡血细胞备用。 思考：加入柠檬酸钠的作用是什么？ 防止血液凝固 2.提取鸡血细胞的细胞核物质： 向鸡血细胞液中加入蒸馏水，用玻璃棒沿一个方向快速搅 拌5min、用3-4层纱布过滤，取其滤液。
思考：此时加入蒸馏水的目的是什么？ 降低氯化钠溶液的浓度，析出DNA
三、实例：用鸡血细胞液提取DNA并鉴定
5. 滤取含DNA的黏稠物： 用3-4层纱布过滤，取纱布上的黏稠物。 6. 将DNA的黏稠物再溶解： 加入2mol/L的氯化钠溶液，沿一个方向轻轻搅拌，使DNA 呈溶解状态。 7. 过滤含有DNA的氯化钠溶液： 用放有2层纱布的漏斗过滤以上溶液，取其滤液。
苏教版必修二 4.1.2DNA是主要遗传物质、DNA的粗提取和鉴定 课件(37张)
①实验过程
TMV的蛋白质 HRV的RNA
― → 重建病毒― ― ― ― → 烟草― → HRV 的病斑
感染
后代的类型 ― ― ― ― ― ― ― ― ― → HRV 。 TMV的RNA
TMV 。
― → 重建病毒― ― ― ― → 烟草― → TMV 的病斑― ― ― ― ― ― ― ― ― → HRV的蛋白质
是所有生物的遗传物质都是DNA呢？我们又该如何从生物体中提取和
鉴定DNA呢？本节课我们就来解决这两个问题。
内容索引
一、DNA是主要的遗传物质 二、DNA的粗提取和鉴定 当堂检测
一、DNA是主要的遗传物质
1.RNA是遗传物质的证据
知识梳理
(1)烟草花叶病毒(TMV)的实验 ①烟草花叶病毒结构： ②实验过程
答案
(3)溶解DNA：取物质的量浓度为2 mol/L的 氯化钠 溶液40 mL加入滤液中， 用玻璃棒沿一个方向轻轻搅拌。 (4)析出含DNA的丝状物：加入适量 蒸馏水 ，边加边搅拌。 (5)DNA的纯化 ①将粗提取出的DNA黏稠物在 NaCl 溶液中再溶解、再过滤。 ②向滤液中，加入冷却的、体积分数为95%的乙醇 溶液50 mL，并用玻璃 棒搅拌，溶液中会出现丝状物，用玻璃棒将丝状物卷起，并用滤纸吸取 上面的水分，即得到含杂质较少的DNA。
感染烟草 烟草花叶病毒 震荡 RNA ― ― ― ― ― ― → 烟草叶发病 ― ― ― ― → 水、苯酚 感染烟草 分离 蛋白质 ― ― ― ― ― ― →烟草叶不发病
蛋白质 RNA
③结论：控制烟草花叶病毒性状的物质是 RNA 而不是 蛋白质 。
答案
(2)TMV(烟草花叶病毒)与HRV(车前草病毒)的病毒重建实验
课件5：5.1 DNA的粗提取与鉴定
血浆 （55%） 血细胞 （45%）
人体血细胞的组成
人体白细胞有细胞核，能够提取DNA。 人体成熟红细胞无核故无法提取DNA 血小板没有完整的细胞结构无法提取DNA
结论： 从凝血中提取DNA理论上可行 需要灵敏度较高的提取方法
本节课题： 能否利用较为简单的提取方法和设备尝试对细胞中 DNA进行初步的粗提取？
洗涤剂瓦解细胞膜的示意图
洗涤剂的主要成分是具 有去垢作用的表面活性 剂。
这类化学成分可通过破 坏脂双层和膜蛋白使生 物膜瓦解，将DNA从细 胞核内释放出来。
向鸡血中加入一定量的柠檬酸钠以及 蒸馏水，同时用玻璃棒搅拌，使鸡血 细胞吸水涨破。
过滤，并收集滤液
过滤后的滤液中是否即含有较为纯净的DNA？ 否 大部分DNA和蛋白质结合形成染色体
实验材料选取原则： 相对易于获取 DNA含量相对较高
多倍体植物DNA含量更高，有利于提取。
普通洋葱体细胞染色体 四倍体洋葱体细胞染色体
2N=16
4N=32
染色体数目加倍 多倍体草莓
野生草莓
思考： DNA在细胞内的存在部位？ 主要在细胞核 少量位于线粒体及叶绿体
要提取DNA，应当怎样处理细胞？ 破坏细胞结构完整性（破坏细胞膜及核膜）
DNA是极性分子，不溶于酒精等非极性溶剂，但是部分 蛋白质则可溶于酒精。
加入95%冷酒精
1.向溶解有DNA的溶液中 加入等体积的、冷却的 95%酒精溶液，静置。
2.静置后溶液中出现白色 丝状物，即粗提取获得的 DNA。
使用冷酒精作用： 充分降低分子热运动速率，有利于DNA分子凝集析出。 抑制核酸水解酶的活性，尽可能多的提取DNA。
DNA和蛋白质是染色体的主要成分
分析： 如何将与DNA结合的蛋白质去除就成为粗提取DNA的 关键所在！
人体血细胞的组成
人体白细胞有细胞核，能够提取DNA。 人体成熟红细胞无核故无法提取DNA 血小板没有完整的细胞结构无法提取DNA
结论： 从凝血中提取DNA理论上可行 需要灵敏度较高的提取方法
本节课题： 能否利用较为简单的提取方法和设备尝试对细胞中 DNA进行初步的粗提取？
洗涤剂瓦解细胞膜的示意图
洗涤剂的主要成分是具 有去垢作用的表面活性 剂。
这类化学成分可通过破 坏脂双层和膜蛋白使生 物膜瓦解，将DNA从细 胞核内释放出来。
向鸡血中加入一定量的柠檬酸钠以及 蒸馏水，同时用玻璃棒搅拌，使鸡血 细胞吸水涨破。
过滤，并收集滤液
过滤后的滤液中是否即含有较为纯净的DNA？ 否 大部分DNA和蛋白质结合形成染色体
实验材料选取原则： 相对易于获取 DNA含量相对较高
多倍体植物DNA含量更高，有利于提取。
普通洋葱体细胞染色体 四倍体洋葱体细胞染色体
2N=16
4N=32
染色体数目加倍 多倍体草莓
野生草莓
思考： DNA在细胞内的存在部位？ 主要在细胞核 少量位于线粒体及叶绿体
要提取DNA，应当怎样处理细胞？ 破坏细胞结构完整性（破坏细胞膜及核膜）
DNA是极性分子，不溶于酒精等非极性溶剂，但是部分 蛋白质则可溶于酒精。
加入95%冷酒精
1.向溶解有DNA的溶液中 加入等体积的、冷却的 95%酒精溶液，静置。
2.静置后溶液中出现白色 丝状物，即粗提取获得的 DNA。
使用冷酒精作用： 充分降低分子热运动速率，有利于DNA分子凝集析出。 抑制核酸水解酶的活性，尽可能多的提取DNA。
DNA和蛋白质是染色体的主要成分
分析： 如何将与DNA结合的蛋白质去除就成为粗提取DNA的 关键所在！
《DNA的粗提取与鉴定》课件
在 NaCl 溶 液 浓 度 小 于 0.14 mol/L 时， DNA 的溶 解 度 随 NaCl 溶 液 浓 度 的 增加而逐渐降低；在 0.14 mol/L 时， DNA 溶解 度最小；当溶液浓度继 续增加时， DNA 的溶解度 方法1：根据DNA和蛋白质等其他成分在不同浓 又逐渐增大。 度的NaCl溶液中的溶解度不同，提取DNA 结合图，思考回答课本的问题
一、基础知识
1、DNA在0.14 mol／L NaCl溶液中溶解度最低而蛋白质 此时的溶解度最高的特点，可以使DNA与蛋白质分离， 形成沉淀析出，通过过滤，得到初提取的滤出物DNA。
2、利用DNA不溶于酒精，细胞中的某些蛋白质可溶于酒 精的特点，可以将DNA与蛋白质进一步分离。 3、蛋白酶能水解蛋白质，但是对DNA没有影响
①鸡血细胞核的DNA含量丰富，材料易得 ②鸡血细胞极易吸水胀破，而用动物肝脏细胞作实验 材料常常需要匀浆和离心，对设备要求较高，操作繁 琐，历时较长
（二）破碎细胞，获取含DNA的滤液(DNA释放和溶解） 此步为实验成功以否的关键 1、破碎动物细胞的方法—— 渗透吸水胀破 2、破碎植物细胞的方法—— 洗涤剂+食盐搅拌研磨 ？ ？ 不充分？ （三）去除滤液中的杂质（ DNA的纯化） 洗涤剂——离子去污剂，能溶解细胞膜，利于 DNA释放 蒸馏水对于鸡血细胞来说是一种低渗液体， 阅读课本 55页的三个方案 食 盐—— NaCl，利于 DNA的溶解于研磨液中 水分大量进入血细胞，使血细胞胀裂； 研磨不充分——使细胞核内的DNA释放不完全，提取的DNA 加上搅拌作用，加速鸡血细胞细胞膜、核膜破裂， 下面以鸡血为实验材料粗提取 DNA并鉴定 量变少，导致看不到丝状沉淀物、用二苯胺鉴定不显示蓝 从而释放出 DNA DNA 的实验过程，请观察并总结实验步骤 色等
专题DNA的粗提取与鉴定ppt
刑事侦查
利用DNA粗提取技术，可对犯罪现场遗留的生物检材进行提取和分析，为刑事侦查提供重 要线索。
亲子鉴定
通过DNA粗提取和基因比对，能够准确地判定亲属关系，为家庭纠纷、遗产继承等问题的 解决提供科学依据。
dna粗提取在生物医学研究中的应用前景
01
疾病诊断与预测
通过DNA粗提取技术，可对疾病相关基因进行快速、准确的检测和分
解决方法
控制好温度、酸度以及机械搅拌程度，使用低温乙醇沉淀法等更稳定的提取方法 ，减少DNA降解的发生。
dna出现污染的原因与解决方法
原因
DNA出现污染可能是由于外界物质进入提取液中，如容器不 干净、试剂未纯化等。
解决方法
使用干净的容器和纯度高的试剂，对提取液进行过滤除杂， 减少污染物质对DNA提取的影响。
专题dna的粗提取与鉴定ppt
xx年xx月xx日
目 录
• 引言 • dna粗提取的基本步骤 • dna粗提取的实验操作流程 • dna粗提取过程中的问题与对策 • dna粗提取的优化方案 • dna粗提取的应用前景和发展方向
01
引言
什么是dna粗提取
从细胞或生物体内提取出DNA分子的过程。 不需要知道DNA的具体序列和结构。
dna提取效率低的原因与解决方法
原因
DNA提取效率低可能是由于多种因素导致，如细胞裂解不完全、蛋白去除不 彻底、方法操作不当等。
解决方法
采用更有效的细胞裂解方法、优化洗涤步骤、使用蛋白酶K处理细胞等措施， 提高DNA提取效率。
dna出现降解的原因与解决方法
原因
DNA出现降解可能是由于提取过程中高温、高酸度、过度机械搅拌等不利条件导 致。
析，为疾病的早期诊断和预测提供帮助。
利用DNA粗提取技术，可对犯罪现场遗留的生物检材进行提取和分析，为刑事侦查提供重 要线索。
亲子鉴定
通过DNA粗提取和基因比对，能够准确地判定亲属关系，为家庭纠纷、遗产继承等问题的 解决提供科学依据。
dna粗提取在生物医学研究中的应用前景
01
疾病诊断与预测
通过DNA粗提取技术，可对疾病相关基因进行快速、准确的检测和分
解决方法
控制好温度、酸度以及机械搅拌程度，使用低温乙醇沉淀法等更稳定的提取方法 ，减少DNA降解的发生。
dna出现污染的原因与解决方法
原因
DNA出现污染可能是由于外界物质进入提取液中，如容器不 干净、试剂未纯化等。
解决方法
使用干净的容器和纯度高的试剂，对提取液进行过滤除杂， 减少污染物质对DNA提取的影响。
专题dna的粗提取与鉴定ppt
xx年xx月xx日
目 录
• 引言 • dna粗提取的基本步骤 • dna粗提取的实验操作流程 • dna粗提取过程中的问题与对策 • dna粗提取的优化方案 • dna粗提取的应用前景和发展方向
01
引言
什么是dna粗提取
从细胞或生物体内提取出DNA分子的过程。 不需要知道DNA的具体序列和结构。
dna提取效率低的原因与解决方法
原因
DNA提取效率低可能是由于多种因素导致，如细胞裂解不完全、蛋白去除不 彻底、方法操作不当等。
解决方法
采用更有效的细胞裂解方法、优化洗涤步骤、使用蛋白酶K处理细胞等措施， 提高DNA提取效率。
dna出现降解的原因与解决方法
原因
DNA出现降解可能是由于提取过程中高温、高酸度、过度机械搅拌等不利条件导 致。
析，为疾病的早期诊断和预测提供帮助。
专题DNA的粗提取与鉴定ppt
优劣分析
各种方法均有优缺点，应根据实际 情况选择合适的方法，或结合多种 方法提高鉴定准确性。
04
DNA粗提取实验结果分析与解读
实验结果展示
DNA粗提取结果
通过在显微镜下观察，可以看到细胞中的DNA呈现为细长的丝状，有时甚至可以看到 DNA的螺旋结构。
电泳结果
通过电泳技术，可以看到DNA在凝胶中的迁移情况。纯DNA应该呈现一条明亮的带状， 而杂质则会影响带状的形成。
紫外光谱分析
通过紫外光谱分析，可以确定DNA的纯度和浓度。纯DNA应该在260nm和280nm处有强 烈的吸收峰。
结果差异分析
01
DNA纯度差异
不同样品间的DNA纯度存在差异。有些样品的DNA纯度较高，而有
些则较低。这可能与样品的来源、提取方法等因素有关。
02 03
DNA浓度差异
不同样品间的DNA浓度也存在差异。有些样品的DNA浓度较高，而 有些则较低。这可能与样品中细胞的数目、细胞中DNA的含量等因素 有关。
。通过OD260/OD280 的比值来判断DNA的纯 度。
3. 将DNA溶液进行凝胶 电泳检测，观察DNA条 带的亮度、完整度和分 子量大小来判断DNA的 质量。
03
DNA粗提取中的关键步骤及注意事 项
细胞破碎方法的选择与优化
物理破碎
使用研磨杵、珠磨机、匀浆器等方 法破碎细胞。
化学破碎
使用溶菌酶、EDTA、SDS、Triton X-100等化学物质溶解细胞壁。
THANKS
谢谢您的观看
DNA粗提取涉及从生物样品中分离出细胞，破碎细胞并释放 出其中的DNA，接着通过一系列的洗涤和沉淀步骤将DNA分 子纯化出来。
DNA粗提取的重要性
课件1：3.1.2 DNA的粗提取与鉴定
（五）方法步骤：
4.DNA的鉴定 取两支20mL的试淀物溶于其中一支试管的 NaCI溶液中。
向两支试管中各加入4mL的二苯胺试剂。混合均 匀后，将试管置于沸水中加热5min。
待试管冷却后，比较两支试管中溶液颜色的变化。
（五）方法步骤：
4.DNA的鉴定
3
冷却的95%的酒精溶液中
搅拌后过滤 搅拌后过滤
滤液 F 滤液 G
THANKS
1、实验材料的选取
不同生物的组织中DNA含量不同。在选取材料时，应本着DNA含量高、材料 易得、便于提取的原则。你认为如下提供的材料中哪些不适合提取DNA？为什么？
供选材料：（括号内为染色体条数） 新鲜洋葱（16）、香蕉、菠菜（12）、菜花、、猕猴桃（58）； 猪肝（38）、鱼卵、鸡血（78）、哺乳动物的成熟红细胞； 在液体培养基中培养的大肠杆菌（1）
原则上，凡是含有DNA的生物材料都可以考虑选用DNA含量相对较高的生物组织， 成功的可能性更大。
（四）材料用具
2、实验用具
烧杯、量筒、玻璃棒、 研钵、纱布、漏斗、 试管、试管架、试管夹、 酒精灯、石棉网、三脚架、火柴、 刀片和天平等。
（五）方法步骤：
1.研磨洋葱 2.过滤获取含DNA的上清液 3.冷却酒精析出DNA 4.DNA的鉴定
课堂检测 2.如图为“DNA的粗提取与鉴定”实验的相关操作。
课堂篇探究学习
(3)在“DNA的粗提取与鉴定”实验中，将含有一定杂质的DNA丝状物分别
放入体积为2mL的3种溶液中，经搅拌后过滤，获得如表所示的3种滤液，含
DNA最少的是滤液__G___。 1
B液中
搅拌研磨后过滤 滤液 E
2
2mol/L的NaCl溶液
DNA的粗提取与鉴定(优秀课件)
【实验总结】
此实验过程中有几次使用蒸馏水？几次过滤？ 几次析出？几次搅拌？分别在哪一步？ 两次蒸馏水： 三次过滤： 答：整个实验共 两次析出： 六次搅拌： 两次蒸馏水： 第1次： 步骤1.细胞吸水胀破 第2次： 步骤3.使 DNA黏稠物析出
三次过滤：
第1次：步骤1. DNA存在于滤液里 第2次：步骤4. DNA被留在纱布上 第3次：步骤6. DNA存在于滤液里
讨论： （1）比较两个试管中溶液的颜色有什么不同？ 答：有丝状物的试管变成蓝色，另一试管还是 原来颜色 （2）这一鉴定结果说明什么问题？
答：提取出的丝状物是DNA
（3） DNA的直径约为20×10-10 m，实验中出 现的丝状物的粗细是否表示1个DNA分子直径的 大小？
答： DNA分子直径只有2 nm。丝状物是多 个DNA子聚在一起形成的
讨论：加入蒸馏水的目的？ 降低NaCl溶液浓度到使DNA溶解度最低点，使 DNA从NaCl溶液中析出 注意事项： 将溶液中的DNA与其他杂质分离，这一步骤是 实验成败的关键。实验中应该缓慢贴壁加入蒸 馏水，并轻轻地沿一个方向不停地均匀搅拌， 以利于DNA分子的附着和缠绕
④滤取含DNA的粘稠物
用放有多层纱布的漏斗，过滤步骤3中的溶液 至 500mL的烧杯中，含 DNA的粘稠物被留在 纱布上 ⑤将DNA的粘稠物再溶解 取 1个 50 mL烧杯，向烧杯内注入氯化钠的物 质的量浓度为 2 mol／L的溶液 20mL。用钝头 镊子将纱布上的粘稠物夹至氯化钠溶液中，用玻 璃择不停地搅拌，使粘稠物尽可能多地溶解于溶 液中
A.随着NaCl溶液浓度的增大，DNA在NaCl溶液中的 溶解度也增大 B.随着NaCl溶液浓度的减小，DNA在NaCl溶液中的 溶解度也减小 C.DNA在NaCl溶液中的溶解度与NaCl溶液的浓度无 关 D.当NaCl溶液的浓度为0.14M时，DNA的溶解度最低
DNA粗提取与鉴定教学课件
实实验验原步理骤——鸡血
鸡血
DNA粗提取与鉴定ppt
DNA粗提取与鉴定p………加柠檬酸钠，防止血液凝固
↓ 破碎细胞，释放DNA… 加蒸馏水，使细胞吸水涨破
↓→破坏细胞膜、核膜等。
去除杂质……… ①加入2mol/L NaCl，溶解DNA，过滤
鸡血
② 加蒸馏水稀释NaCl 浓度为0.14mol/L，析出DNA。
实验课原堂理练习
√ 1.（2018北京理综，4B）鉴定DNA时，将粗提产物与二苯胺 混合后进行沸水浴 2.（2018江苏单科，17C）提取DNA时，在切碎的洋葱中加入
× 适量洗涤剂和食盐，充分研磨，过滤并弃去滤液
3.（2018江苏单科，17D）将DNA粗提物溶解在2mol/Nacl溶
√ 液中，加入二苯胺试剂，沸水浴后液体由无色变成蓝色
当NaCl浓度为0.14mol/L
时，DNA的溶解度最小，
浓度为2mol/L时，DNA
的溶解度最大。 利用这一原理，可以使 DNA与其他物质分开。
DNA的特性
⑵ DNA不溶于酒精溶液
DNA不溶于酒精 将DNA与蛋白质进 细胞中某些蛋白质溶于酒精 一步分离
DNA粗提取与鉴定ppt
DNA的特性
（3） DNA的鉴定
2020高考生物一轮复习
DNA的粗提取与鉴定
基本思路
提取生物大分子的基本思路是选用一定的物理或化学方法 分离具有不同物理或化学性质的生物大分子。对于DNA 的 粗提取而言，就是要利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在物 理和化学性质方面的差异，提取DNA，去除其它成分。
DNA的特性
⑴ DNA的溶解性 2mol/L
DNA粗提取与鉴定ppt
DNA粗提取与鉴定ppt
鸡血
DNA粗提取与鉴定ppt
DNA粗提取与鉴定p………加柠檬酸钠，防止血液凝固
↓ 破碎细胞，释放DNA… 加蒸馏水，使细胞吸水涨破
↓→破坏细胞膜、核膜等。
去除杂质……… ①加入2mol/L NaCl，溶解DNA，过滤
鸡血
② 加蒸馏水稀释NaCl 浓度为0.14mol/L，析出DNA。
实验课原堂理练习
√ 1.（2018北京理综，4B）鉴定DNA时，将粗提产物与二苯胺 混合后进行沸水浴 2.（2018江苏单科，17C）提取DNA时，在切碎的洋葱中加入
× 适量洗涤剂和食盐，充分研磨，过滤并弃去滤液
3.（2018江苏单科，17D）将DNA粗提物溶解在2mol/Nacl溶
√ 液中，加入二苯胺试剂，沸水浴后液体由无色变成蓝色
当NaCl浓度为0.14mol/L
时，DNA的溶解度最小，
浓度为2mol/L时，DNA
的溶解度最大。 利用这一原理，可以使 DNA与其他物质分开。
DNA的特性
⑵ DNA不溶于酒精溶液
DNA不溶于酒精 将DNA与蛋白质进 细胞中某些蛋白质溶于酒精 一步分离
DNA粗提取与鉴定ppt
DNA的特性
（3） DNA的鉴定
2020高考生物一轮复习
DNA的粗提取与鉴定
基本思路
提取生物大分子的基本思路是选用一定的物理或化学方法 分离具有不同物理或化学性质的生物大分子。对于DNA 的 粗提取而言，就是要利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在物 理和化学性质方面的差异，提取DNA，去除其它成分。
DNA的特性
⑴ DNA的溶解性 2mol/L
DNA粗提取与鉴定ppt
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相关主题
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①根据DNA在NaCl溶液中的溶 ②如何通过控制NaCl溶液的浓 解度曲线图，思考在什么浓 度使DNA在盐溶液中溶解或析 度 下 ， DNA 的 溶 解 度 最 小 ？ 出？ DNA在NaCl溶液中的溶解度是 如何变化的？
6、DNA在酒精溶液中的溶解性
DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些物质则可以 溶于酒精。利用这一原理，可以将DNA与蛋白质进一 步分离
为了纯化提取的DNA需要 将滤液作进一步处理
讨论：此步骤获得的滤液中可 能含有哪些细胞成分？
答：可能含有核蛋 白 、 多 糖 和 RNA 等 杂质
为什么反复地 溶解与析出DNA， 能够去除杂质
（四） DNA的析出与鉴定
1、以血液为实验材料时，每100ml血 液中需要加入3g柠檬酸钠，防止血液 凝固。 2、加入洗涤剂后，动作要轻缓、柔和， 否则容易产生大量的泡沫，不利于后 续步骤的操作。加入酒精和玻璃棒搅 拌时，动作要轻缓，以免加剧DNA分 子的断裂，导致DNA分子不能形成絮 状沉淀。 3、二苯胺试剂要现配现用，否则会影 响鉴定的效果。
利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的
差异，提取DNA，去除其他成分
在 NaCl 溶 液 4、DNA的溶解性 浓 度 低 于 0.14 当氯化钠的物质的量浓度为
2 mol/L 时 ， DNA 的 溶 解 度 随 mol／L时，DNA的溶解度最大， DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不 NaCl溶液浓度的增加而逐渐 浓度为 0．14 mol／L时，DNA 降 低 ； 在 0.14 mol/L 时 ， 的溶解度最低。利用这一原理， 同，利用这一特点，选择适当的盐浓度就能使DNA充分溶解， DNA溶解度最小；当NaCl溶 可以使DNA在盐溶液中溶解或 液浓度继续增加时，DNA的 析出 而使杂质沉淀，或者相反 溶解度又逐渐增大。
7、DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性
①蛋白酶能水解蛋白质， 但是对DNA没有影响 ②大多数蛋白质不能忍受 60 －80°C 的 高 温 ， 而 DNA 在80°C以上才会变性 ③洗涤剂可以溶解细胞的 细胞膜，去除脂质和蛋白 质,但对DNA没有影响
（一）实验材料的选取
（二）破碎细胞，获取含DNA的滤液
主讲人：朱广喜
讨论1：构成生物体的遗 传物质是什么？
讨论2：如何证明 他们是遗传物质？
讨论3：怎样才能将细胞内的这 些物质分离出来？
提取DNA的方法 1、提取生物大分子的基本思路
选用一定子
主 要 指 蛋白 质 、 酶和核酸
不同物理或化学性质的生物大分子
3、提取DNA的基本思路
讨论：为什么加 入蒸馏水能使鸡 血细胞破裂？
2、植物细胞 ①植物细胞需要先 用一定的洗涤剂和 食盐溶解细胞膜
②实例：提取洋葱 DNA 时 ， 在 切 碎 的 洋 葱中加入一定的洗涤 剂和食盐，进行从分 的搅拌和研磨，过滤 后收集研磨液
讨论：如果研磨不充分，会 对实验结果产生怎样的影响？
（三）去除滤液中的杂质