蛋白肽的测定方法

蛋白肽的测定方法
1、原理
测定样品经三氯醋酸处理后上清液中蛋白质含量,既为样品中大豆蛋白肽的含量,也就是可溶性蛋白质(TCA)的含量。
2、试剂
所用试剂均用不含氨的蒸馏水配制。
2.1 10%三氯醋酸
其它试剂与《食品中蛋白质的测定方法》中2.1—2.6相同
3、仪器
定氮蒸馏装置
4、操作方法
4.1样品处理
4.1.1固体样品:精密称取2g左右固体样品用小烧杯溶解，并用玻璃棒搅拌，定容至100ml容量瓶中，取10ml注入比色管中，再加作入10ml 10%三氯醋酸，静止沉降30分钟后，过滤（或用离心机1万转离5分钟）取滤液（或上清液）5ml注入干燥的凯氏瓶中，加入2g催化剂及25ml混合酸，消化方法同蛋白质的测定方法相同
4.1.2样品：（如发酵液）经离心机1万转离5分钟吸取上清液10ml注入比色管中再加10ml 10%三氯醋酸，静止沉降30分钟后，过滤（或用离心机1万转离5分钟）取滤液（或上清液）5ml注入干燥凯氏瓶中，加2g催化剂及25ml混合酸进行消化。
4.2 蒸馏方法与蛋白质的测定方法相同。
4.3 计算
X=（V1－V2）×N×0.014×6.25×10/m×20/10×1/5×100/10×100
式中：
X—样品中可溶性蛋白质含量，% ；
V1—样品消耗硫酸或盐酸标准溶液体积，ml ；
V2—试剂空白消耗硫酸或盐酸标准溶液体积，ml ；
N—硫酸或盐酸标准溶液当量浓度 ；
0.014—1N硫酸或盐酸标准溶液1ml相当于氮克数 ；
6.25—氮换算为蛋白质的系数。




大豆肽检测办法
1 2007-11-30 11:47:38
对营养性小肽或寡肽产品：
可以通过检测其氮溶解指数来初步判定小肽或寡肽含量。
NSI（％）＝（N1/N0）*100
N0＝总氮
N1＝可溶性氮（用三氯乙酸――可溶性氮测定法）

三氯乙酸（TCA）是一种蛋白质沉淀剂，它可以沉淀蛋白质和较长的肽段。可以被三氯乙酸沉淀的肽段所含的最少氨基酸残基数与底物的种类有关，就特定的底物而言，三氯乙酸氮溶解指数可以定性反映蛋白质的分解情况，溶解指数越高，表明较短肽段含量越高。

三氯乙酸氮溶指数（TCA－NSI）测定方法：
将20ml 10％ 三氯乙酸（TCA）溶液添加到20ml待测混合液（混合液浓度为10％），混合液震荡，静置10分钟，在4000转/分下离心20分钟，取上清液用凯氏氮法测定总氮