前列腺癌患者外周血CD4+ CD25+调节性T细胞与Foxp3 mRNA的表达及临床意义
转录因子Foxp3对调节性T细胞CD4+CD25+的作用
转录因子 Foxp3对调节性 T细胞CD4+CD25+的作用摘要：调节性T细胞是机体维持自身耐受性的重要组成部分。
CD4+CD25+调节性T细胞（以下简称CDT细胞）来源于胸腺，是一具有免疫调节或免疫抑制作用的细胞亚群。
它可以通过细胞接触依赖机制和抑制性细胞因子依赖机制来主动抑制自身免疫T细胞的活化，从而维持自身免疫耐受和防止自身免疫疾病的发生。
最近研究发现，转录因子Foxp3对于调节性T细胞的发育是一个关键性的转录因子，并且已作为CD4+CD25+调节性T细胞的特异性标志。
关键词：调节性T细胞，CDT细胞，转录因子Foxp3，免疫耐受，自身耐受，自身免疫疾病，免疫调节调节性T细胞是目前免疫学领域研究的热点。
体内是否存在一群以调节自身T细胞为主要功能的T细胞亚群，一直是个有争议的问题。
调节性T细胞对于维持机体免疫耐受和免疫应答的稳态具有非常重要的作用。
对这一细胞群的生物学作用的揭示及其对其发育和功能机制的深入认识，不但有助于了解错综复杂的免疫系统理论，而且在自身免疫性疾病、肿瘤、感染和艾滋病的治疗以及移植耐受的诱导等方面的研究都具有广泛的应用前景和重要意义。
本文就CD4+CD25+调节性T细胞的产生、成熟及其特性，转录因子Foxp3在CDT细胞的发育和功能发挥中的作用以及其活性调节等方面作一论述。
1．CD4+CD25+调节性T细胞1.1CD4+CD25+调节性T细胞的产生和成熟具有免疫调节或免疫抑制作用的CDT细胞和其他T细胞一样都是在胸腺中分化、成熟的。
因此，有人把胸腺产生调节性CDT细胞作为胸腺除了阳性选择和阴性选择以外的第三种功能。
CDT细胞主要来源于CD4+CD8-胸腺细胞，是在CD4+T细胞的自然选择过程中产生的。
当胸腺产生的CDT细胞进入外周以后，需要多种外周因素的影响才能成为功能性的调节性T细胞，由于胸腺产生的CDT细胞前体在外周分化成为有功能性的调节性T细胞需要依赖于相应外周自身抗原的存在。
FoxP3基因
FoxP3基因FoxP3基因兄弟的课题正涉及到FoxP3基因，有不少感想，也有不少困惑，希望和兄弟们交流。
CD4+CD25-T在外周抗原的刺激下变成CD4+CD25+T需要 FoxP3其作⽤吗？或者反过来说，此基因表达的结果是这种转变马？CD4+CD25-T在外周抗原的刺激活化后就会表达CD25，作为IL2的受体，和FoxP3没什么关系，也不是Treg，当然有其他的情况，在某些细胞因⼦，⽐如IFNgamma，TGF-beta等的存在下，外周的CD4+CD25-T cell可以转化成 CD4+CD25+Treg，伴随着Foxp3的上调。
哦，CD4+CD25-T在外周抗原的刺激活化后就会表达CD25后变成的CD4+CD25+T，与 IFNgamma，TGF-beta等的存在下，外周的CD4+CD25-T cell可以转化成 CD4+CD25+Treg 如何区别？⼆者的表形式⼀样的，⾄于后者的抑制功能⽐胸腺发育⽽来的差不差，好像不同的报道不⼀样。
外周的CD4+CD25-T cell可以转化成 CD4+CD25+Treg 如何区别？差别就是Foxp3的表达，前者就是活化的T细胞，没有Foxp3，没有抑制功能。
后者是Treg，有Foxp3表达，有⼀直功能。
我时常想起⼀个问题：外周的CD4+CD25-T cell转化成的CD4+CD25+Treg ，没有Foxp3，没有抑制功能。
（虽然好想有⼈不这样认为，但就以此观点出发）对于胸腺产⽣的Treg，有Foxp3表达，有抑制功能。
那麽，如果⽤CD25单抗处理掉胸腺产⽣的Treg表⾯的CD25+,虽然它有Foxp3表达，它还会有抑制功能吗？或者说它的抑制功能会受到影响吗？有啥样的影响？有这个问题的⽂章报道吗?(感觉这⾥涉及到⼀个问题，没有表性，就会丧失功能吗？)如果⽤CD25单抗处理掉胸腺产⽣的Treg表⾯的CD25+,虽然它有Foxp3表达，它还会有抑制功能吗会有抑制功能的，⽬前看cd4cd25Treg的抑制作⽤不依赖cd25⽽依赖foxp3，但是cd25作为il2的⾼亲和受体，被block后对treg的⽣长有⼀定的影响呵呵, 发表⼀点⾃⼰的看法,如果不对, 还请各位指点.T细胞活化后表达CD25(IL-2受体), 是其活化形式之⼀. 但体内在稳态下也存在CD4+CD25+细胞, 这就是⽬前⽐较hot 的Treg.研究T调节,⾸先要先排除活化T细胞的影响, ⽐如使⽤4⾊Flow.⾄于Foxp3表达, 其实只是后者的基因array综合分析结果. 到底和Treg的双向调节功能是否就⼀定存在线性关系, 我认为不能过早下结论. 以Foxp3作为窗⼝研究T调节细胞功能,是否⼀定就能得到⼀个令⼈信服的结果?“如果⽤CD25单抗处理掉胸腺产⽣的Treg表⾯的CD25+,虽然它有Foxp3表达，它还会有抑制功能吗会有抑制功能的，⽬前看⽽依赖foxp3，但是cd25作为il2的⾼亲和受体，被block后对treg的⽣长有⼀定的影响 “carrying 兄咋知道 “cd4cd25Treg的抑制作⽤不依赖cd25“ 有直接这⽅⾯的实验证据吗？cd25在其抑制功能中究竟起和作⽤？有这⽅⾯的⽂献吗？研究T调节,⾸先要先排除活化T细胞的影响, ⽐如使⽤4⾊Flow.请sophie兄台详细的讲⼀下如果⽤流式排除活化T细胞的影响的，⽤前后对⽐不就⾏了吗？按照兄台的意思，如何排除，分选吗？⼤家能否都深⼊的讲⼀下呢？替你们顶⼀下！呵呵, 提点⾃⼰的想法, 还望各位兄台指正.1.实验前标记CD25单抗, 作为后续分析中Treg的⼀个指标;2.实验后再次标记CD25单抗, 注意要⽤激发波长不同的颜⾊(克隆号相同, 并且flow的compensation 相同, 以期在Flow中能明显区别), 排除实验中活化的T细胞;3.这样, 在实验中才能⽐较明确得发现原本存在的Treg的变化趋势. 如果想sorting 该群细胞进⾏Foxp3的real-time PCR分析, 也⽐较可靠.4.另外, BD Pharmagin最近新出了Foxp3 的单抗, 刚⽤过, 效果还可以, flow上⽐较好调节, 不需要太强的Compensation , 有兴趣可以试⼀下.实在不忍⼼贴⼦沉了, 还是要说两句:FoxP3基因的功能⽬前其实并不明确, 只是⼀时间众说纷纭. 新近⽂献报道在CD4CD25细胞群中FoxP3已经的表达拷贝数明显增多, 只能说明其表达对该表型细胞有⼀定意义, 但并⼀定和它的免疫调节功能有关.我也说上两句：转录因⼦foxp3是CD4+CD25+ Treg的特异性标志，是发育的关键调节基因。
Foxp3调节性T细胞
FOXP3+调节性T细胞调节性T细胞是一种可以调节其他多种免疫细胞功能的T细胞亚型，其正常生理功能对体内免疫稳态维持必不可少。
调节性T细胞功能失调与人类多种重大疾病，如自身免疫性疾病、感染性疾病、过敏性疾病、恶性肿瘤、移植排斥反应的发生、发展及治疗都密切相关。
调节性T细胞可以分为多种亚型，其中最重要也是目前研究最多的为表达叉头状家族转录因子FOXP3的天然调节性T细胞及诱导调节性T细胞。
FOXP3+调节性T细胞（FOXP3+Tregs）属于T淋巴细胞中表达CD4、CD25及转录因子FOXP3的一类T细胞亚型，其正常功能对于人体免疫稳态的动态调节必不可少。
IL-2IL-2是一种T细胞生长因子，主要由活化状态下的效应T细胞分泌，在Treg的分化、发育过程中发挥着很重要的作用，它通过与IL-2R 结合进行信号传导，从而增加未成熟的Treg表达Foxp3和CD25，并促进其向成熟Treg分化。
此外，IL-2还可以通过STA T5信号传导途径，下调多种Th17细胞分化相关基因的表达，抑制Th17细胞的分化18 Bayer AL，Y uA，MalekTR．Functionof theIL-2Rforthymicand peripheral CD4+CD25+Foxp3+Tregulatorycells［J］．JImmun，2007;178( 7) :4062-4071．7 ZhengSG，WangJ，WangPet al．IL-2is essential for TGF- to convert naiveCD4+CD25cells toCD25+Foxp3+regulatoryTcells andforexpansionof thesecells［J］．JImmun，2007;178( 4) :2018-2027．8 LaurenceA，TatoCM，DavidsonTSet al．Interleukin-2signaling viaSTA T5 constrains Thelper 17 cell generation［J］．Immunity，2007;26( 3) :371-381。
胃癌患者外周血及癌组织中CD4+CD25+调节性T细胞、转录因子Foxp3的表达及临床意义
胃癌患者外周血及癌组织中CD4+CD25+调节性T细胞、转录因子Foxp3的表达及临床意义陆威;李永翔;张尚鑫;闫强【摘要】目的探讨胃癌患者外周血及胃癌组织中CD4+CD25+调节性T细胞(Tregs)和转录因子Foxp3表达及临床意义.方法收集38例胃癌患者术前血液样本和20例健康体检者血液样本进行流式细胞仪检测,同时胃癌组中留取胃癌组织和癌旁组织(距肿瘤边缘>5 cm)进行免疫组化染色,检测CD4+CD25+Foxp3+Tregs表达,并与胃癌的TNM分期、肿瘤分化程度、淋巴转移、肿瘤所在部位、肿瘤直径等相关参数进行分析.结果胃癌组外周血中CD4+CD25+Foxp3+Tregs的表达水平与对照组相比差异有统计学意义(P＜0.01),且在胃癌TNM分期、淋巴转移组内比较差异有统计学意义(P＜0.01).胃癌组织中Foxp3+Tregs的表达水平与癌旁组织相比,差异有统计学意义(P＜0.01),且在胃癌TNM分期、分化程度、淋巴转移组内比较差异有统计学意义(P＜0.01,P＜0.05).外周血中CD4+CD25+Foxp3+Tregs与胃癌组织中Foxp3+Tregs的表达水平呈显著正相关(r=0.786,P<0.01).结论外周血中CD4+CD25+ Foxp3+Tregs和组织中Foxp3+Tregs在胃癌患者中明显增加,且与胃癌发生、发展关系密切,可为胃癌的早期诊断和免疫治疗提供理论基础.%Objective To investigate the expression and clinical signification of CD4 + CD25 + regulatory T cells ( Tregs ), Foxp3 in peripheral blood and cancerous tissue of gastric cancer. Methods Preoperative blood sample of 38 patients with gastric cancer and 20 cases of healthy control group were subjected to flow cytometry. Gastric cancer tissue and para-tumorous tissue ( from the tumor edge > 5 cm ) from gastric cancer were subjected to immunohis-tochemistry to detect CD4 +CD25 + Foxp3 + Tregs expression, and the correlation analysis with some clinical related parameters was made. Results The percentages of CD4 + CD25 + Foxp3 + Tregs in peripheral blood of gastric cancer group were significantly higher than those from healthy control group( P <0. 01 ),and were highly correlated to TNM stage, lymph node metastases( P <0. 01 ). The percentages of Foxp3 + Tregs in gastric cancer tissue were significantly higher than those from para-tumorous tissue( P <0. 01 ),and were highly correlated to TNM stage,tumor differentiation,lymph node metastases( P < 0. 01 , P < 0. 05 ). The percentages of CD4 + CD25 + Foxp3 + Tregs in peripheral blood was positively correlated to Foxp3 + Tregs in gastric cancer tissue( r - 0. 786, P < 0. 01 ). Conclusion The proportion of CD4 + CD25 + Foxp3 + Tregs in Peripheral blood and Foxp3 + Tregs in gastric cancer tissue is significantly elevated in human gastric cancer, and correlated with the genesis and development of gastric cancer, which can provide the theory basis for the early diagnosis and immunotherapy of gastric cancer.【期刊名称】《安徽医科大学学报》【年(卷),期】2013(048)007【总页数】4页(P790-793)【关键词】胃癌;CD4+CD25+调节性T细胞;Foxp3;流式细胞术;免疫组化【作者】陆威;李永翔;张尚鑫;闫强【作者单位】安徽医科大学第一附属医院普通外科,合肥230022;安徽医科大学第一附属医院普通外科,合肥230022;安徽医科大学第一附属医院普通外科,合肥230022;安徽医科大学第一附属医院普通外科,合肥230022【正文语种】中文【中图分类】R735.2胃癌是最常见的消化道恶性肿瘤之一，据Jemal et al［1］统计:估计2011 年将有近46 万4 千男性、27万3千女性死于胃癌，且在全球范围内胃癌导致的死亡居癌症死亡率之首。
Foxp3基因转染对人CD4_CD25_T细胞表型和功能的影响
论著文章编号:100025404(2008)0320186203 Foxp3基因转染对人CD4+CD25-T细胞表型和功能的影响吴 奎1,2,毕玉田1,2,王耀丽1,2,王长征1 (第三军医大学:1新桥医院全军呼吸内科研究所,全军呼吸病研究重点实验室,重庆400037,2大坪医院野战外科研究所呼吸内科,重庆400042) 摘 要:目的 探讨体外Foxp3基因表达对CD4+CD25-T细胞功能的影响。
方法 将编码人Foxp3基因全长的逆转录病毒表达载体,转染人外周血CD4+CD25-T细胞。
以流式细胞仪方法检测转染后C D4+C D25-T细胞表面C D25、CD127分子及CT LA4分子的表达变化,以流式细胞仪及RT2PCR检测Foxp3基因在转染细胞中的表达。
体外刺激、观察转染后的Foxp3细胞的增殖反应,以及重组细胞对CD4+C D25-T细胞增殖反应和细胞因子分泌的作用。
结果 转染后Foxp3基因在C D4+CD25-T细胞中呈高水平表达。
转染细胞表面C D25、CT LA4分子均呈高水平表达,而CD127分子表达水平下降,且I L22并不能诱导其增殖。
转染细胞与C D4+C D25-T细胞共同培养可有效抑制CD4+C D25-T细胞的增殖反应及细胞因子I L24、I L25和I F N2γ的分泌。
结论 Foxp3基因转染可有效诱导CD25及CT LA4分子表达,并使转染细胞具有调节性T细胞的功能。
关键词:Foxp3;调节性T细胞;逆转录病毒 中图法分类号:R392233;R392.12;R392.13 文献标识码:AChanges of phenotype and functi on of hu man CD4+CD25-T cells i n duced after Foxp3tran sfecti onWU Kui1,2,B I Yu2tian1,2,WANG Yao2li1,2,WANG Chang2zheng1(1I nstitute of Res p irat ory D isease,Xinqiao Hos p ital, Chongqing400037,2Depart m ent of Res p irat ory D isease,I nstitute of Surgery Research,Dap ing Hos p ital,Third M ilitaryMedical University, Chongqing400042,China) Abstract:O b j ec ti ve T o exp l ore the effects of Fox p3gene transfecti on on the phenotype and functi on of CD4+CD25-T cells.M e tho d s The pMSCV2Foxp3retr oviral vect or encoding Foxp3gene was transfected int o PT67packaging cell line.V irus2containing supernatant was app lied t o differentiated CD4+CD25-T cells,then the cells were s orted with fl ow cyt ometry.The exp ressi ons of CD25,CD127,CT LA4and p r oliferati on of trans2 fected CD4+CD25-T cells were exa m ined.The effect of transfected CD4+CD25-T cells on the p r oliferati on and cyt okine p r oducti on of CD4+CD25-T cells were exa m ined.R e su lts Foxp3gene transfected CD4+ CD25-T cells could exp ress Fox p3.Transfecti on of Foxp3gene up regulated the ex p ressi ons of CD25and CT LA24,but down2regulated CD127exp ressi on.After transfecti on,the p r oliferati on of CD4+CD25-T cells was eli m inated.I L22could not induce the p r oliferati on of transfected T cells.Transfected T cells inhibited the p r oliferati on of CD4+CD25-T cells after coculture.Co nc l u s i o n CD4+CD25-T cells acquired a regulat ory phenotype and functi on after transfected with Foxp3gene,indicating a key r ole of Foxp3in the generati on of CD4+CD25+regulat ory T cells. Key words:Foxp3;regulat ory T cell;retr ovirus 基金项目:国家自然科学基金(30470772) Supported by the Nati onal Natural Science Foundati on of China(30470772) 作者简介:吴 奎,男,江苏省沛县人,博士,主治医师,讲师,主要从事支气管哮喘发病机制与治疗方面的研究,发表论文7篇。
流式细胞术不同设门方法对调节性T细胞的检测方法比较
（批号：Ｅ０３０８８２）均由美国ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｅｅ公司提供。 １．１．３研究对象完全随机法选择３３例本院健康 体检者，其中男１９例，女１４例，平均年龄（３５．４＋８．３） 岁。 １．２方法 １．２．１ ＣＤ４＋ＣＤ２５＋ＦｏｘＰ３＋设门方法对Ｔｒｅｇ细胞检测 标本的处理所有受试者均于清晨空腹抽取肝素 抗凝外周静脉血５ ＩＩｌｌ，混匀，用Ｆｉｃｏｌｌ分离外周血单 个核细胞，用ＰＢＳ洗涤、重悬。取上述细胞１００斗Ｉ， 加入ＣＤ４一ＰｅＣｙ５、ＣＤ２５．ＰＥ各５“ｌ（同型对照加入 ｌｇＧｌ．ＰＥ １０斗１），混匀，室温避光２０ ｍｉｎ。加入冰染 色Ｂｕｆｆｅｒ １ ｌＩｌｌ，离心（１０００ ｒ／ｍｉｎ，离心半径ｒ＝２０ ｃｍ） ５ ｒａｉｎ弃上清。加入新制备的固定／破膜工作液１ ｍｌ，４℃避光３０ ｒａｉｎ。加２ ｍｌ稀释破膜Ｂｕｆｆｅｒ洗涤２
ＣＤ２５＋调节性Ｔ细胞（Ｔｒｅｇ细胞）的界定效果。方法完全随机法选择３３例本院健康体检者。分别采用 ＣＤ４＋ＣＤ２５ｈｉ．ＣＤ４＋ＣＤ２５＋ＦｏｘＰ３＋和ＣＤ４＋ＣＤ２５＋ＣＤｌ２７－＇ｈ设门的方法进行检测。结果（１）ＣＤ４＋ＣＤ２５ｋ、
ＣＤ４＋ＣＤ２５＋ＦｏｘＰ３＋设门方法对ＣＤ４＋ＣＤ２５＋Ｔｒｅｇ细胞的检测结果差异无统计学意义［（６．８５±２．７２）％，
相关性分析显示，３者呈明显正相关，其中ＣＤ４＋ ＣＤ２５ｈｉ设门与ＣＤ４＋ＣＤ２５＋ＦＯＸＰ３＋的相关系数芦 ０．８６６。Ｐ＜０．００１；ＣＤ４＋ＣＤ２５ｋ设门与ＣＤ４＋ＣＤ２５＋ ＣＤｌ２７－ａｏ”的相关系数ｒ＝０．６１５，Ｐ＜Ｏ．００１；ＣＤ４＋ＣＤ２５＋ ＦＯＸＰ３＋设门与ＣＤ４＋ＣＤ２５＋ＣＤｌ２７√ｈ的相关系数为
ＣＤ４＋ＣＤ２５ｈｉ设门、ＣＤ４＋ＣＤ２５＋ＦｏｘＰ３＋设门方法比较 差异无统计学意义（￡＝０．２７０，Ｐ＝０．７８８）。ＣＤ４＋ＣＤ２５＋ ＣＤｌ２７－ｎｏｗ设门方法的检测结果高于ＣＤ４＋ＣＤ２５Ｋ和 ＣＤ４＋ＣＤ２５＋ＦｏｘＰ３＋设门方法（ｔ＝２．０５５，Ｐ＝Ｏ．０４３；扭 ２．３２５，Ｐ＝０．０２２）。 ２．２ ３种设门方法对ＣＤ４＋ＣＤ２５２）％ａｃｃｏｕｎｔｉｎｇ ｆｏｒ（５４．４±９．Ｏ）％ｏｆａｌｌ ｔｈｅ ＦｏｘＰ３＋ｃｅＵｓ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ ＣＤ４＋ＣＤ２５１‘ｉ ｇａｔｉｎｇ
CD4+CD25+FoxP3+调节性T细胞在肺癌患者体内检测及其意义
ＤＯＩ：１０．３７６０／ｃｍａ．ｊ．ｉｓｓｎ．１６７４—４７５６．２００９．０８．００２ 作者单位：４５００５２郑州大学第一附属医院肿瘤科（刘俊才，王丽萍，王 玉萍，李明君），病理科（张岚） 通信作者：王丽萍
１．２主要试剂：胶原酶Ⅳ、透明质酸酶、ＤＮＡ酶（均购
万方数据
・４・
自Ｓｉｇｍａ公司），ＲＰＭｌｌ６４０培养基（购自Ｈｙｃｌｏｎｅ公 司），特级胎牛血清（购自杭州四季青公司），ＰＥ标记 的鼠抗人ＣＩＭ抗体、ＦＩＴＣ标记的鼠抗人ＣＤ２５、ＦｏｘＰ３ 抗体（购自ＢＤ Ｂｉｏｓｉｅｅｎｃｅｓ公司）。所有抗体和试剂均 按说明书要求保存和使用。 １．３试验方法：
４－
ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ Ｔ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ ｉｎ ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ ｂｌｏｏｄ ａｎｄ ｔｈｅ ｎｏｒｍａｌ ｔｉｓｓｕｅｓ ｗｅｒｅ（５．２ ４－２．１）％ａｎｄ（３．６ １．２）％ｉｎ ｔｈｅ ２８ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｌｕｎｇ
ｃａｎｃｅｒ．Ｔｈｅ
ｐｅｒｃｅｎｔ ｏｆ ｔｈｅ
１５ ｈｅａｌｔｈｙ ｃｏｎｔｒｏｌｓ ｗａｓ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ｂｙ ｆｌｏｗ ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ．Ｒｅｓｕｌｔｓ
ｔｏｒｙ Ｔ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ＣＤ４＋Ｔ ｃｅｌｌｓ
ｗａｓ（１０．５ ４－１．１）％ｉｎ
ｔｈｅ ｔｕｍｏｒ ｔｉｓｓｕｅｓ；ｔｈｅ ｐｅｒｃｅｎｔ ｏｆ ＣＩＭ＋ＣＤ２５＋ＦｏｘＰ３＋
ＣＤ４＋ＣＤ２５＋ＦｏｘＰ３＋ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ
Ｔ ｌｙｍｐｈｏ—
ｃｙｔｅｓ ｉｎ ｔｈｅ ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ ｂｌｏｏｄ ｏｆ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｌｕｎｇ ｏｆ
ｃａｎｃｅｒ（５．２ ４－２．１）％ｗａｓ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ
ｔｈｅ ｆｕｒｔｈｅｒ ｄｅｔｅｒｉｏｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｔｕｍｏｒｓ． ｃｅｌｌ；Ｃｌｉｎｉｃａｌ ｓｔａｇｅ
CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞与自身免疫性疾病
CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞与自身免疫性疾病王露，张政（审校）（四川省乐山市人民医院皮肤科，614000）摘要：自身免疫性疾病系由于机体免疫系统失衡，产生针对自身组织的免疫应答并导致自身组织、器官损害的一类疾病。
调节性T淋巴细胞（regulatory T cell，Treg）具有免疫应答低下和免疫抑制特性，在维持机体免疫耐受和免疫应答稳态方面具有非常重要的作用，Treg的异常与多种自身免疫性疾病有关［1］。
Foxp3特异性表达于CD4+CD25+Treg细胞，与其发育、成熟以及抑制功能关系密切。
但是目前关于该转录因子的表达调控机制却不清楚。
本文拟就CD4+CD25+Foxp3Treg 细胞的研究进展及与多种自身免疫性疾病的关系作一综述。
关键词：Foxp3；自身免疫性疾病；调节性T淋巴细胞中图分类号：R392.8文献标识码：A文章编号：1006－9534（2012）02－0010－03Expression and function of CD4+CD25+Foxp3+in autoimmune diseases．WANG Lu，ZHANG Zheng．（Institute of Der-matology，Department of Dermatology，Leshan People's Hospital，Sichuan614000China）Abstract：Autoimmune Diseases are disorders caused by immune reactions against self－organs，as results of pathological imbal-ance of the immune system．New evidences indicates that regulatory T cells（Treg），characterized by immune annergy and immune suppression，have play critical roles in containing immune tolerance，immune response，and homeostasis．The expression of Foxp3，mainly in Treg cells，is thought to be the major factors determining the immune regulative function of Treg．However，FOXP3regula-tion is poorly understood．In this article，we reviewed the recent progresses in researches of CD4+CD25+Foxp3+Treg and its role in some autoimmune disease．Key words：CD4+CD25+Foxp3+Treg；Regulatory T cell；Autoimmune diseaseFox转录因子家族是一个以具有叉头螺旋结构（forkhead /winged helix，FKH）为特征，功能各异的转录因子大家族，这个家族成员在细胞发育的各个进程中起着不同的作用。
胃肠道癌肿患者外周血CD4+CD25+FOXP3+调节性T细胞表达及临床意义
胃肠道癌肿患者外周血ＣＤ４＋ＣＤ２５＋ＦＯＸＰ３＋调节性Ｔ细胞的表达及临床意义【摘要】目的:研究胃肠道癌肿患者外周血cd4+cd25+foxp3+调节性t(treg)细胞的表达,并探讨其临床意义。
方法:通过免疫荧光术及流式细胞仪检测20例胃癌患者及20例结肠癌患者外周血cd4+cd25+foxp3+treg细胞、cd4+cd25+high treg细胞、cd4+t 细胞及cd4+ctla-4+t细胞。
结果:胃癌组、结肠癌组与健康献血者比较外周血cd4+cd25+foxp3+treg细胞、cd4+cd25+high treg细胞及cd4+ctla-4+t细胞显著增多,cd4+t细胞显著减少;胃癌、结肠癌患者之间其外周血中cd4+cd25+foxp3+treg细胞、cd4+cd25+high treg细胞、cd4+t细胞及cd4+ctla-4+t细胞无显著差异。
结论:胃肠道癌肿患者外周血cd4+cd25+foxp3+treg细胞显著高于健康献血者,这可能与胃肠道癌肿患者的免疫抑制和肿瘤的进展相关。
【关键词】胃癌结肠癌;cd4+cd25+foxp3+treg;cd4+;cd25+high treg cd4+t;cd4+ctla-4+tperipheral regulatory cd4+cd25+foxp3+ t cells in patients with gastrointestinal m alignancieschou jun-lan,zhang hui,zhao feng-lin,cao fei,wuhuilian ,feng lin(municipal hospital, suzhou, jiangsu, suzhou,215000) 【abstract】 objects: to demonstrate the possible involvement of cd4+cd25+foxp3+ regulatory t(treg)cells inimmune system impairment in patients with gastrotestinal m alignancies. methods: the cd4+cd25+foxp3+treg cells、cd4+cd25+high treg cells、cd4+tcells and cd4+ctla-4+t cellswere analyzed in peripheral blood in 20 patients with gastric cancer,20 patients with colon cancer by flow and immunofluorescence. results: compared with healthy controls, patients with gastric cancer and colon cancer had higherpercentage of cd4+cd25+foxp3+treg cells、cd4+cd25+hightreg cells and cd4+ctla-4+t cells,had lower percentage of cd4+tcells.there were no significant differences between healthy volunteers and patients with gastric cancer or colon cancer. conclusions: the increased percent ofcd4+cd25+foxp3+treg cells may be related to immunosuppression and tumor progression in patients with gastrointestinal m alignancies.【keywords】cd4+;cd25+high treg cd4+t;cd4+ctla-4+t在我国,相对身体其它系统而言,消化道癌肿的发病率居于首位。
转录因子T-bet、GATA-3、RORgammat及FOXP3在肝癌患者外周血中表达情况的研究
转录因子T-bet、GATA-3、RORgammat及FOXP3在肝癌患者外周血中表达情况的研究硕士研究生：吴立旋1导师：刘晓平2 教授1、汕头大学医学院2006级临床硕士研究生汕头 5150312、深圳市北京大学深圳医院深圳 518036中文摘要目的：一、了解肝癌患者外周血中是否存在Treg优势化现象。
二、研究肝癌患者外周血中Th1、Th2、Th17及Treg各自的主要转录因子T-bet、GATA-3、RORgammat及FOXP3的表达情况。
材料与方法：抽取实验组20例肝癌患者与对照组20例健康志愿者的外周静脉血，采用流式细胞术检测外周静脉血单个核细胞中CD4+CD25+T细胞占CD4+细胞比例；采用荧光定量PCR法检测外周静脉血单个核细胞中Th1、Th2、Th17及Treg各自的主要特异转录因子T-bet、GATA-3、RORgammat及FOXP3的mRNA表达情况。
结果：原发性肝癌组外周血单个核细胞中CD4+CD25+Treg占CD4+T细胞比例要显著高于对照组（17.72±4.97 VS 9.22±2.68, P<0.01），Treg的特异转录因子FOXP3 mRNA的表达肝癌组明显高于对照组（3.17±1.59 VS 1.39±1.13,P<0.01），斯皮尔曼相关性分析显示FOXP3 mRNA表达与CD4+CD25+Treg细胞量呈正相关（肝癌组r=0.761, P<0.01）。
Th1的特异转录因子T-bet mRNA的表达肝癌组显著低于对照组（52.34±34.07 VS 104.±56.00, P<0.01），而Th2的特异转录因子GATA-3 mRNA的表达则高于对照组（1.38±1.15 VS 0.58±0.65, P<0.05），T-bet mRNA/GATA-3 mRNA比值明显减小（86.01±116.71 VS 461.88±708.81, P<0.05）。
CD4+CD25+Treg细胞的分选＼表型鉴定及Foxp3表达鉴定
CD4+CD25+Treg细胞的分选＼表型鉴定及Foxp3表达鉴定目的为验证从C57BL/6小鼠脾脏中分离出高纯度CD4+CD25+Treg细胞及证实CD4+CD25+Treg细胞中Foxp3基因的表达。
方法使用免疫磁珠分选出CD4+CD25+Treg细胞,流式细胞仪检测纯度;使用TRIZOL抽提Foxp3基因mRNA,使用RT-PCR方法逆转录出Foxp3基因的cDNA。
结果从C57BL/6小鼠脾脏中分离出了纯度达到90%CD4+CD25+Treg。
进一步应用RT-PCR技术克隆出Foxp3的cDNA,通过凝胶电泳证实了克隆出了Foxp3的cDNA。
结论使用免疫磁珠方法能够分离出C57BL/6小鼠CD4+CD25+Treg细胞,并进行了Foxp3基因表达的鉴定。
【Abstract】Objective To confirm high purity CD4+CD25+Treg cells can be separated from the spleen of C57BL/6 mice and Foxp3 gene can be express in CD4+CD25+Treg cells.Methods CD4+CD25+Treg cells are separated with immunomagnetic beads,and purity is detected by flow cytometry.Foxp3 gene mRNA is extracted using TRIZOL.Foxp3 gene cDNA is reverse transcription using RT-PCR technology.Results This study separated CD4+CD25+Treg cell of 90%purity from the spleen of C57BL/6 mice,to advance used technology of RT-PCR to make the clone of Foxp3 gene cDNA,and confirmed it is the cDNA of foxp3.Conclusion This study CD4+CD25+Treg cell can be separated from the spleen of C57BL/6 mice with immunomagnetic beads,and identified foxp3 gene expression.【Key words】Immunomagnetic beads;CD4+CD25+Treg cells;Foxp3 gene肿瘤患者体内的免疫耐受是影响免疫治疗效果的重要原因,肿瘤免疫耐受的产生可能有两方面的原因:①肿瘤本身所产生的IL-10、TGF-β等免疫抑制性细胞因子;②机体自身的免疫抑制状态。
外周血淋巴细胞亚群和调节性T细胞检测对评估特发性血小板减少性
外周血淋巴细胞亚群和调节性T细胞检测对评估特发性血小板减少性紫癜发病过程相关研究发表时间：2016-02-24T14:18:05.833Z 来源：《中国综合临床》2015年9月供稿作者：杨庆文[导读] 深圳市宝安区中医院(检验科) 广东深圳５１８１３３特发性血小板减少性紫癜(ITP),也称为免疫性血小板减少性紫癜,是由机体产生的抗血小板自身抗体所致的获得性自身免疫性出血性疾病,杨庆文深圳市宝安区中医院(检验科) 广东深圳５１８１３３【摘要】目的检测特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者不同时段外周血淋巴细胞亚群与调节性T 细胞水平的变化,探讨其在ITP免疫发病机制中的作用及临床意义.方法选取２０１３年１月－２０１５年６月在我院住院治疗的１００例ITP患者作为研究对象,另选同期健康体检者１００例作为对照组.采用流式细胞仪直接免疫荧光法检测外周血淋巴细胞亚群和调节性T 细胞水平的变化.结果治疗前ITP组的CD３＋、CD４＋ T 淋巴细胞及CD１６＋/５６＋ NK 细胞水平、CD４＋/CD８＋比值及CD４＋CD２５＋Foxp３＋T细胞占CD４＋Foxp３＋T的百分比明显低于对照组(P＜０．０５),治疗后均明显恢复(P＜０．０５),且与治疗时间呈正相关. 治疗前ITP组的CD８＋T、CD １９＋B淋巴细胞百分比、CD４＋CD２５＋T细胞占CD４＋T 细胞的百分比明显高于对照组,治疗后明显降低,且与治疗时间呈负相关. 结论ITP患者血淋巴细胞亚群及调节性T细胞水平发生异常,可能与ITP的发生发展有关.检测外周血淋巴细胞亚群及调节性T 细胞水平检测对评估ITP 的发病、疗效及预后方面具有较高的临床价值. 【关键词】外周血淋巴细胞亚群; 调节性T细胞; 特发性血小板减少性紫癜【中图分类号】R５４１．４【文献标识码】B 【文章编号】１００８－６３１５(２０１５)１０－０１１４－０１特发性血小板减少性紫癜(ITP),也称为免疫性血小板减少性紫癜,是由机体产生的抗血小板自身抗体所致的获得性自身免疫性出血性疾病,以血小板减少为特征,其发病原因及机制尚不完全清楚[１].研究表明,ITP患者既存在体液免疫异常,也存在细胞免疫异常,这间接反映出其发病可能与机体的淋巴细胞亚群和细胞因子的表达及调节性T细胞功能的改变有关[２].本研究旨在检测ITP患者外周血淋巴细胞亚群和调节性T 细胞的变化,评估其在ITP 发病机制中的作用[３]. １资料与方法１．１实验材料美国BDBiosciences公司:MultiTESTIMK四色、免洗淋巴细胞亚群分析试剂盒;上海碧云天生物技术有限公司:红细胞裂解液;美国BDBiosciences公司:人调节性T 细胞检测试剂盒;美国Beckman－Coulter公司:BeckmanCoulterEPICSXL型流式细胞仪. １．２临床资料选取我院２０１３年１月－２０１５年６月入院治疗的１００例特发性血小板减少性紫癜患者作为ITP组,其中男女分别为４８例和５２例,年龄为１８－５８岁, 平均年龄为３８．９±６．２岁.另选同期１００例体检健康者作为对照组,外周血细胞计数正常,肝肾和免疫功能正常,男女分别为４５例和５５例,年龄为１８－５９岁,平均年龄为３９．１±５．９岁.研究组和对照组受试者在年龄、性别等一般资料上的差异无明显差异(P＞０．０５),能进行比较. １．３纳入与排除标准纳入标准:(１)与?血液病诊断及疗效标准?中关于ITP的诊断标准相符, 且无其他免疫性疾病;(２)首次发病,未使用激素和其他免疫抑制剂治疗者;(３)无心脑血管疾病史、糖尿病史者;(４)未参加其他研究者;(５)签署知情同意书者.排除标准:(１)排除患有其他免疫性疾病者;(２)排除既往使用过激素或其他免疫抑制剂等治疗者;(３)排除特殊人群如孕妇、未成年人、癌症晚期等者;(５)排除患有严重心脑血管疾病、糖尿病史、肝肾功能异常者.１．４治疗方法所有ITP患者均接受剂量为１mg/(kg/d)口服泼尼松治疗,维持治疗１个月以上,分别于治疗前、治疗后１０天和治疗后３０天的早晨空腹取外周血２ml, 加入EDTA 抗凝后用于检测淋巴细胞亚群和调节性T细胞水平.１．４．１外周血淋巴细胞亚群的检测将所取的外周血平均分装于２支专用试管,各加入５０μL溶血素裂解红细胞分离单个核细胞,并用２０％ FBS细胞培养液将细胞浓度调整为１×１０９/L.一支试管中加入２０μLCD３/CD８/CD４５/CD４抗体,另一支试管中加入２０μLCD３/CD１６＋５６/CD４５/CD１９抗体,充分混匀,室温下,避光静置１５－２０min.其后２支试管分别加入４５０μL溶血素,混匀器中充分混匀,室温避光静置１５min.在２４h之内,放入流式细胞仪检测淋巴细胞亚群水平.１．４．２CD４＋CD２５＋调节性T 细胞检测使用调节性T 细胞检测试剂盒检测CD４＋CD ２５＋调节性T细胞水平,严格遵守试剂盒说明书操作.流式细胞仪的检测分析软件为CellQuest软件,检测CD２５和Foxp３的表达,检测结果以CD４＋CD２５＋/CD４＋ T、CD４＋ CD２５＋high/CD４＋ T 及CD４＋ CD２５＋ Foxp３＋ T/CD４＋T表示[４]. １．５观察指标与诊断标准观察２组人群外周血淋巴细胞亚群和CD４＋CD２５＋调节性T 细胞水平的变化. １．６统计学方法使用SPSS１９．０统计软件对实验数据进行分析与处理,以X±s表示计量资料,两组间比较采用t检验,多组间比较采用方差分析的F检验,P＜０．０５为差异有统计学意义. ２结果２．１淋巴细胞亚群检测结果表１受试者外周血淋巴细胞亚群测定结果(X±s,n＝１００)注:与对照组相比较,?P＜０．０５;与治疗前相比较,＃P＜０．０５. ３讨论CD４被视作为T辅助/诱导细胞(Th/Ti)的表面标志,CD４T 能够辅助T 细胞和B细胞转化成效应细胞[５],并参与机体免疫调节.CD８为抑制/细胞毒性细胞(Ts/Tc)的表面标志,能对T 细胞和B细胞的活化、抗体生成产生抑制作用,从而抑制细胞和体液免疫.CD１６＋/５６＋是NK 细胞的特异性标志,而NK细胞能抑制B细胞的分化,对细胞的吞噬和抗体的生成具有调节作用.研究表明,Th是细胞免疫与体液免疫平衡调节的中心细胞,Th/Ts比值的升高或降低在一定程度上能反映机体免疫功能情况,也势必会引起B细胞的改变. 本研究结果显示,与健康者相比较,ITP患者的CD３＋ T 细胞、CD４＋ T 细胞及NK细胞水平和CD ４＋/CD８＋比值均显著降低,治疗后这些淋巴细胞亚群水平则明显恢复,且与治疗的时间存在一定的关系.研究认为,CD４＋CD２５＋T细胞数量减少会降低有效免疫抑制作用的细胞数,导致分泌的细胞因子含量也降低,进而减弱细胞免疫的抑制功能,打破机体免疫耐受的平衡,最终导致机体将大量的自身反应性T 细胞激活,参与血小板的损伤.转录因子Foxp３被认为是调节CD４＋CD２５＋T细胞的主要基因,目前临床上普遍认为其为CD４＋ CD２５＋ T 细胞的特异性标志,能够精确地反映ITP患者Treg细胞数量的变化.本研究结果显示,ITP 患者外周血CD４＋CD２５＋T/CD４＋T明显比健康者增多,治疗后则明显下降,且与治疗时间呈负相关;而ITP患者的CD４＋CD２５＋Foxp３＋T/CD４＋Foxp３＋T 明显降低,治疗后明显恢复,且与治疗时间呈正相关,这些结果与前人的结果基本一致,共同说明了ITP患者外周血调节性T细胞比例明显降低,促使机体细胞免疫抑制功能发生障碍,从而活化自身反应性T 细胞并辅助B细胞产生抗体,从而参与ITP的发生发展. 综上所述,在ITP发病的过程中,淋巴细胞免疫功能普遍发生异常,对淋巴细胞亚群水平及Treg细胞的联合检测能评估ITP 发病、治疗具有较好的指导价值.参考文献[１] 马静瑶,陈振萍,吴润晖．血小板特异性抗体与ITP发病、临床特点、治疗及预后效果的关系[J]．中国实验血液学杂志,２０１４,２２(０６):１７７１－１７７４． [２] 陈叶龙,寿黎红．儿童特发性血小板减少性紫癜患者外周血T 淋巴细胞亚群变化[J]．中国现代医生,２０１２,５０(３５):７７－７８． [３] 肖惠煊,周建中,莫焕桐,等．特发性血小板减少性紫癜患者外周血T 淋巴细胞亚群变化及临床意义[J]．中国医药科学,２０１３,３(０９):１２４－１２５． [４] 黄枝宁．特发性血小板减少性紫癜患者外周血淋巴细胞亚群的变化及其临床意义[J]．广西医学,２０１３,３５(０８):１０２１－１０２２． [５] 李彦格,毛彦娜,李慧霞,等．儿童特发性血小板减少性紫癜患者NK 细胞及T淋巴细胞亚群变化及意义[J]．医药论坛杂志,２０１１(１９):２４－２５．。
CD4+CD25+调节性T细胞免疫抑制及其在疫苗免疫保护中作用的研究进展
CD4+CD25+调节性T细胞免疫抑制及其在疫苗免疫保护中作用的研究进展王娜【摘要】调节性T细胞(Treg)通过高表达CD25分子在免疫应答过程中发挥免疫抑制功能,其功能是通过下调自身免疫应答诱导自身免疫耐受和自身免疫性疾病的发生.正常情况下Treg与辅助性T细胞17互相拮抗,保持机体平衡.在感染性疾病和自身免疫性疾病中,通过增加Treg可减缓病情.通过去除Treg联合疫苗免疫的策略,有助于提高抗感染和抗肿瘤的疗效.因此,在疫苗免疫保护中,对Treg免疫抑制功能的研究能够为研制新型疫苗奠定理论基础.%Through constitutive expressionr of the CD25 on their surface Treg cells play an impoitant role in the immunosuppression. It functions by down-regulating their autoimmunity response to induce autoimmune toleance and inhibit autmmmunr disease.Normally Treg Th17 are antagomstfi to each other,keeping the body in balance.In infectious diseases and autinmmunr diseases, increasing the Tirg cells could relieve the disease. The strategy of depleting Treg joint vacine immune helps improve resistanre to infection and anti-cancer efficacy. In the vaceine immunr protection, research Treg immunopuppression provides the theoieti-eal basis for developig new vaccines.【期刊名称】《医学综述》【年(卷),期】2012(018)022【总页数】3页(P3740-3742)【关键词】调节性T细胞;免疫抑制;疫苗【作者】王娜【作者单位】福建省肿瘤医院输血科,福州,350014【正文语种】中文【中图分类】R392免疫应答过程有赖于体内多系统、多细胞和多分子间的相互协同，共同调节其发生、发展和转归，并控制其质和量，以维持正常机体的免疫稳定。
CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞在血液系统疾病中的进展
广东医学院学报
Vol. 30 No. 2
2012 年 4 月
JOURNAL OF GUANGDONG MEDICAL COLLEGE
Apr. 2012
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可先对患者行跟骨牵引维持胫骨长度，并同时加强抗感染治 疗，待伤口稳定后再行闭合复位交锁髓内钉治疗。另外，我 们认为，对于年龄较大且基础病多而不能耐受股骨头置换的
1.3 Tregs细胞的功能特征
Tregs具有免疫无能和免疫抑制两大特征：(1) Tregs的免
疫无能性：在抗原刺激下Tregs很难扩增和繁殖，高浓度IL-2
刺激、固相包被、抗CD3单抗与抗CD28单抗的作用均不能使
其产生应答；(2) 免疫抑制功能：通过细胞接触依赖性方式
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广东医学院学报
2012 年 第 30 卷
群，在维持自身内环境稳定、防治自身免疫性疾病、抑制移
[1]
植排斥反应、抗肿瘤免疫、抗感染免疫中发挥重要作用 。
Tregs在血液系统中的研究是最近几年才开始的，它的数量与
疾病的类型、发展程度和预后密切相关。本文就其在血液系
统疾病中的研究进展作一综述。
1 Treg细胞的概述
1.1 Tregs的来源 Tregs按其来源分为天然发生的nTreg(natural Treg)和外周
1.2 Treg细胞与Foxp3的关系
Foxp3(forhead/winged helix transcription factor)即 叉 状 头
/翅膀状螺旋转录因子，是Tregs胞的一个特异性标志，是其
[4]
分化发育和功能维持的重要调控基因 。表达Foxp3的T细胞
具有活性，非调节性T细胞经转基因后表达Foxp3可获得Treg
转录因子T-bet、GATA-3、RORgammat及FOXP3在肝癌患者外周血中表达情况的研究
转录因子T-bet、GATA-3、RORgammat及FOXP3在肝癌患者外周血中表达情况的研究硕士研究生：吴立旋1导师：刘晓平2 教授1、汕头大学医学院2006级临床硕士研究生汕头 5150312、深圳市北京大学深圳医院深圳 518036中文摘要目的：一、了解肝癌患者外周血中是否存在Treg优势化现象。
二、研究肝癌患者外周血中Th1、Th2、Th17及Treg各自的主要转录因子T-bet、GATA-3、RORgammat及FOXP3的表达情况。
材料与方法：抽取实验组20例肝癌患者与对照组20例健康志愿者的外周静脉血，采用流式细胞术检测外周静脉血单个核细胞中CD4+CD25+T细胞占CD4+细胞比例；采用荧光定量PCR法检测外周静脉血单个核细胞中Th1、Th2、Th17及Treg各自的主要特异转录因子T-bet、GATA-3、RORgammat及FOXP3的mRNA表达情况。
结果：原发性肝癌组外周血单个核细胞中CD4+CD25+Treg占CD4+T细胞比例要显著高于对照组（17.72±4.97 VS 9.22±2.68, P<0.01），Treg的特异转录因子FOXP3 mRNA的表达肝癌组明显高于对照组（3.17±1.59 VS 1.39±1.13,P<0.01），斯皮尔曼相关性分析显示FOXP3 mRNA表达与CD4+CD25+Treg细胞量呈正相关（肝癌组r=0.761, P<0.01）。
Th1的特异转录因子T-bet mRNA的表达肝癌组显著低于对照组（52.34±34.07 VS 104.±56.00, P<0.01），而Th2的特异转录因子GATA-3 mRNA的表达则高于对照组（1.38±1.15 VS 0.58±0.65, P<0.05），T-bet mRNA/GATA-3 mRNA比值明显减小（86.01±116.71 VS 461.88±708.81, P<0.05）。
调节性T细胞(Treg)的类型
调节性T细胞（Treg）的类型调节性T细胞又叫抑制性T细胞，是一类控制体内自身免疫反应性的T细胞亚群。
Tregs主要分成三类：一个是源自胸腺的自然调节性T细胞（nTreg），代表为CD4+CD25+Treg，他们占CD4+T细胞种群的5%-15%，CD4+CD25+Treg激活后，抑制T细胞的增殖，细胞因子的分泌和APC的功能，这类Treg会表达转录因子FoxP3，并且能通过TGF-β诱导形成。
二是在外周中的Treg，被称为诱导型调节性T细胞(iTreg)。
这类细胞可以在外周通过TGF-β或IFN-γ单独诱导初始T细胞产生，称为适应性调节T细胞(aTreg)，主要产生IL-10和TGF-β。
而一般在外周因抗原刺激而产生，可以从自然调节性T细胞分化而来，也可以来源于其他初始T细胞，典型的有两种类型：Tr1和Th3细胞，它们不表达CD25和FoxP3分子。
Tr1细胞可以在IL-10、不成熟DC反复刺激或抗CD3和CD46单抗联合刺激等条件下产生，可以高表达IL-10和TGF-β，并且通过IL-10来发挥负调节作用。
研究表明，在老鼠和人中，不管是体外还是体内，Tr1细胞都能抑制T细胞反应，可以抑制炎症性自身免疫反应和Th1主导的淋巴细胞增殖以及诱导移植耐受，同时能下调单核细胞和DC抗原呈递功能。
Th3是由自然的CD4+T细胞在抗原和TGF-β刺激下分化而来，同时Th3分泌TGF-β去抑制免疫反应，在诱导外周耐受和黏膜免疫中发挥作用。
除了这些常见的，还有Th1和Th2亚群，两个细胞亚群分泌不同的细胞因子，Th1分泌IFN-γ，Th2分泌IL-4，两个细胞因子功能上相互拮抗，两类细胞各自以对方为调节对象相互抑制。
三是其他调节性T细胞，比如CD8+CD28-T细胞，是抗原特异性的抑制性T 细胞，并且通过直接接触而调控DC表达共刺激分子和自身分泌细胞因子IFN-γ、IL-6和IL-10等发挥抑制作用，可以抑制自身反应性CD4T细胞活性和移植排斥。
CD4+CD25+调节性T细胞的生物学特性及功能
CD4+CD25+调节性T细胞的生物学特性及功能陈巧英 李大金 (复旦大学附属妇产科研究所生殖免疫室,上海200011) 中国图书分类号 R392 文献标识码 A 文章编号 10002484X(2007)0120089204 对自身抗原产生免疫耐受是防止发生自身免疫病的关键。
自1995年日本学者Sakaguchi等首次报道CD4+CD25+调节性T(Treg)细胞以来,越来越多的研究证明这群T细胞在自身耐受的维持中发挥着重要的作用。
CD4+CD25+调节性T细胞具有以下特点:①自身免疫防御作用;②自然条件下是处于无能(Anergy)状态;③抑制其他CD4+T细胞和CD8+T细胞的生物活性;④抑制活性是抗原非特异性的;⑤抑制方法可能通过细胞与细胞间直接接触,或经分泌抑制性细胞因子发挥免疫抑制效应;⑥抑制作用与细胞表面CT LA24和糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子家族相关基因(Glucocorticoid2induced tu mor necr osis fact or recept or fa m ily2related gene GI T R)的表达密切相关[1,2]。
然而CD4+CD25+调节性T 细胞的产生、分化发育以及其作用的确切机制还在进一步发掘之中。
1 CD4+CD25+Treg细胞的发育机制和特性CD4+CD25+Treg的分子标志近年来已逐渐被识别。
与CD4+CD25-T细胞相比,CD4+CD25+ Treg组成性表达I L22αR(CD25)、I L22βR(CD122)、CT LA4(CD152)、GI T R及高水平的CD44和中/低水平的CD45RB,50%表达HLA2DR、80%表达CD45,经TCR激活后CT LA24表达增加[3]。
正常外周血中,CD4+CD25+Treg占总CD4+T细胞的5%～10%。
CD25既是CD4+CD25+Treg的特征性标志,又是T细胞激活的标志,因此,不能仅借助CD25将两者鉴别开来。
CD4+CD25+调节性T细胞结构、功能及其与结核病关系研究进展论文
CD4+CD25+调节性T细胞的结构、功能及其与结核病关系的研究进展【摘要】 cd4+cd25+调节性t细胞是一类增殖能力低、具有免疫抑制功能的细胞，其特异性地表达转录因子foxp3。
cd4+cd25+调节性t细胞能够以依赖细胞接触的方式抑制cd4+、cd8+t细胞的增殖、活化，也可通过分泌il-10及tgf-β等细胞因子发挥其免疫抑制功能。
作为一种专职的抑制性t细胞亚群，其与结核病，肿瘤的发生、发展及多种自身免疫性疾病有着密切的联系。
【关键词】结核病；cd4+cd25+调节性t细胞；foxp3cd4+cd25+调节性t细胞是一类增殖能力低、具有免疫抑制功能的细胞，在人类外周血中占cd4+t细胞的5%-15%，该种细胞的缺失或功能缺陷会引起一系列的自身免疫功能紊乱[1]。
cd4+cd25+调节性t细胞的表型是在1995年由sakakuchi等[2]通过一系列实验首次确定的，其后又发现其特异性的表达转录因子foxp3。
此外，这群细胞也表达cd45rblow、cd62l、cd103、细胞毒性t淋巴细胞抗原4（ctla-4）、糖皮质激素诱导的tnf受体（gitr）等。
cd4+cd25+调节性t细胞可通过细胞接触和分泌细胞因子等多种方式抑制t、b 细胞等的增殖、活化及功能发挥。
1 转录因子foxp31.1 转录因子foxp3特异性地表达于cd4+cd25+调节性t细胞，作为一个特征性标志在其发育和功能维持中发挥重要的作用。
foxp3是由brunkow等于2001年首次报道，其属于转录因子forkhead /winged helix家族，该基因家族均通过forkhead结构域与dna上的特定位点结合，从而参与对目的基因的调控。
foxp3基因特异性的表达于cd4+cd25+调节性t细胞，而在其他淋巴细胞如cd8+t细胞、b细胞和其他组织细胞中极少表达。
另一方面，cd4+cd25+调节性t细胞的其他表面分子如cd25、ctla-4、gitl等在活化的t细胞上也表达，因此认为foxp3可能是调节性t细胞特异性的标志。
关于CD4调节性T细胞的表面分子标记物和作用机制初探
关于CD4+调节性T细胞的表面分子标记物和作用机制初探【摘要】胸腺来源的CD4+CD25+调节性T细胞在外周免疫耐受机制中发挥着重要作用。
其表面表达多种分子标志，包括CD25(IL-2受体α链)、细胞毒T细胞相关抗原-4(CTLA-4)、肿瘤坏死因子受体家族相关基因(GITR)和程序性死亡1(PD-1)、叉头翼螺旋转录因子(Foxp3)等膜分子。
然而这些细胞表面分子均非调节性T 细胞的特征性标志，不能据以区分调节性T细胞与活化的T细胞。
寻找合适的表面分子标记物将是对调节性T细胞进行深入研究的关键步骤。
本文就近年来关于CD4+调节性T细胞的分子标记物及作用机理的研究做一综述。
【关键词】 CD4+调节性T细胞;分子标记物;Foxp3调节性T细胞(regulatory T cell，Tr)能够阻止针对自身抗原的炎症反应，并能限制自身免疫病的发展。
这些具有免疫调节作用的细胞以两种形式存在，一种是体内自然存在的细胞，另一种是经诱导后产生的细胞。
本文就近年来关于CD4+调节性T细胞的分子标记物及作用机理的研究做一综述。
1 CD4+调节性T细胞的起源CD4+ CD25+ Tr细胞是目前研究较多的亚型，其他还有Th3和Tr1[1]。
CD4+ CD25+ Tr细胞在自身免疫耐受中起重要作用，它来源于胸腺的CD4+CD25-T 细胞。
在胸腺的自然选择过程中，T淋巴细胞受体(TCR)与低密度的MHC-lI类肽复合物或胸腺内皮细胞递呈的外周自身肽间高亲和力的反应介导CD4+CD25+Tr细胞的分化发育。
此外，最近发现当未成熟淋巴细胞在胸腺中经历选择时，对自身MHC/抗原肽分子亲和力较高的一群CD4+T细胞被“部分活化”，并获得其他一些特性，发育成为具有免疫抑制功能的CD4+CD25+Tr细胞，这种选择途径被称为“另类阴性选择”。
Tr1与 Th3是另外两类比较常见的调节性T细胞。
Tr1的主要特征是：分泌高水平的IL-10，低水平的IL-2，中度水平的TGF-β、IFN和IL-5。