配制固体培养基操作规程
培养基的配制
培养基的配制培养基是指供给微生物、植物或动物（或组织）生长繁殖的，由不同营养物质组合配制而成的营养基质。
一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐（包括微量元素）、维生素和水等几大类物质。
培养基既是提供细胞营养和促使细胞增殖的基础物质，也是细胞生长和繁殖的生存环境。
1. 成分配方转换—在容器中加入少量水(蒸馏水、天然水)—按配方称各种药物(依次添加)—加入足够的水(一药一勺，服完药后立即盖上瓶子)。
2. 解散淀粉溶解:少量的冷水进粘贴琼脂融化温度为95-97℃，加热时需搅拌以防烧焦。
3.调整pH值用1n盐酸或1n氢氧化钠将培养基调至所需值。
4. 过滤滤纸或棉。
(有时可以省略)5. 分装一般在烧瓶或试管中灭菌。
(1)三角瓶静态培养时，100ml培养基/ 250ml烧瓶的最大值不应超过150ml 培养基/ 250ml否则，在灭菌过程中，培养基的煮沸极易污染棉塞，造成细菌污染;如果进行瓶培养，15-20ml培养基/ 250ml三角瓶应通风良好。
(2)试管包装液体培养基通常填充4-5ml，约为试管高度的1 / 4;一般固体斜培养基为3-4ml，约为试管高度的1 / 5。
6. 用绷带包扎包装完毕后，塞好棉塞，用牛皮纸包好棉塞，防止灭菌时湿气进入，弄湿棉塞。
7. 灭菌高压蒸汽灭菌按照配方中要求的温度和压力进行。
如果灭菌温度过高，营养成分就会被破坏培养基中的糖和氨基酸会使培养基的颜色变深。
8. 斜灭菌后，需要倾斜的试管应在加热过程中倾斜放置，使其固化成一个斜坡，约占试管长度的1 / 2。
9. 存储中可以使用不污染被放置在30℃后一天。
通常用牛皮纸包好，置于2-8℃冰箱中保存。
实验一 MS培养基的配制和灭菌
（七）倒出、沥去最后一次清洗用水，开始进行植 物材料的切割及接种。
逐一取出经上述灭菌处理的植物材料，置于 下面垫有经灭菌处理的培养皿（或小白瓷碟）的无 菌纱布或滤纸上，左手拿小镊子，右手拿解剖刀， 切除各切段或切块上被灭菌剂毒坏的部分。如有必 要，也可再行切分。在完成切割后，将解剖刀和小 镊子在95%乙醇中浸蘸一下，在酒精灯焰上灼烧灭 菌之后放回原处，以便待冷却后下一切割再用。
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一、实验目的： 熟悉外植体材料的预处理，掌
握其消毒和接种方法。
二、方法步骤： 预处理 →酒精消毒→消毒剂消毒
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（一）对采来的植物材料进行适当的预处理。除去 不需要的部分，将所需部分切割至适当大小，置自 来水龙头下流水冲洗几分钟至几小时，主要视植物 材料清洁程度而定。这在污染严重时特别有用。
（二）用洗衣粉水（1~2角匙洗衣粉/100 ml水）等 浸洗上述植物材料约5 min，再用自来水冲净洗衣粉 水。这是进一步减少污染的处理。
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（八）接着，左手拿培养瓶，将培养容器口外壁在 靠近酒精灯外焰处转燎数秒，以将其可能带有的微 生物等固定于原处；在酒精灯焰附近处，用右手拇 指与食指配合将瓶塞打开，并将其夹于左手无名指 与最小指之间；再将培养瓶口在酒精灯焰上轻转灼 烧灭菌；以右手拇指与食指配合，用大镊子夹紧一 外植体准确送入培养容器，并将其轻轻地半插入固 体培养基；将大镊子在95%乙醇中浸蘸一下，在酒 精灯焰上灼烧灭菌之后放回原处，以便待冷却后下 一操作再用；将培养瓶口及瓶塞分别在酒精灯焰上 小心地轻转灼燎数秒；盖好瓶塞，旋紧，将其置于 超净工作台的适当位置。
混合：分别加入一定量的贮备液I、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和 生长调节物质及其它特殊补加物，再加蒸馏水直至 需配培养基的终体积。
调pH值：充分混合后，0.1mol/L的NaOH调节培养 基的pH值至5.8。
62-培养基配制标准操作规程文档
废弃处理等。
范围：本规程适用于微生物实验室检验用的所有培养基职责：QC检验员对本标准的实施负责。
内容:1．操作依据：《中国药典》2010年版二部2、培养基（Media）是指人工配制的生物营养物质，即用人工方法将多种物质按各种微生物生长繁殖的需要配成的一种混合营养物。
通常指干粉培养基（Dehydrated Medium）和配制好的琼脂（Agar）、肉汤（Broths）、稀释液（Diluents）等等。
3.程序3.1.购买3.1.1.质量控制部提出采购计划，并填写《采购计划》，注明培养基名称、数量、质量要求、生产厂家等，由相关人员审核，交采购部采购。
3.1.2.培养基买回后，由使用部门填写领料单，由物流部发出。
3.1.3.领回后的干粉培养基，开瓶后应贴上《开启标签》，注明开口日期、有效期至、开口人、贮存条件，并且不得把原标签覆盖。
使用时填写《干粉培养基使用记录》。
3.1.4.检验人员必须依据培养基生产厂家的操作说明进行配制，并填写《培养基配制使用记录》，配制记录上注明所用培养基的批号；盛装配制好的培养基的容器外应贴《培养基标签》，标签应注明：名称、批号、配制人、配制日期、有效期至等信息。
批号定义为：同一批灭菌的培养基为一批，批号编号方式为年XX，月XX，日XX，流水号XX，例如：2010-05-01配制的培养基第一批灭菌的培养基批号为：。
3.1.5.配制好的培养基应在一定时间内，按说明书规定时间进行灭菌，避免微生物滋生。
3.1.6.必要时，灭菌后的培养基在配制后必须进行pH值的测定以确保符合药典及生产厂家的规定。
3.2.培养基质量控制3.2.1.为了保证微生物检验的质量，在使用前，每批配制好的培养基在灭菌后用于供试品检验之前都应进行培养基质量控制检查。
3.2.2.无菌检查用培养基的适用性检查，包括无菌性检查和灵敏度检查；微生物限度检查用培养基的适用性检查指计数培养基适用性检查；控制菌检查用培养基的适用性检查包括促生长能力检查、抑制能力检查和指示能力检查。
培养基的配制
一、实验所需的仪器设备和用具。
二、实验安排与要求：将全班若干小组（6-7人），每小组配制500 mlMS固体培养基，三、边示范边讲解实验方法和步骤1、计算并填写培养基成分单计算公式：∨母液＝∨配制÷母液倍数∨激素＝∨配制×培养基中所要求的激素浓度÷激素母液浓度2. 每组取500ml的烧杯一只，加300ml蒸馏水，用天平称4g琼脂放入蒸馏水中，在电炉上加热溶解。
称15g蔗糖放入溶解的琼脂中。
3. 按配方取出各种母液，放入到溶解后的琼脂和蔗糖溶液中，用玻璃棒搅动混合，并加蒸馏水定容至500ml。
4. 用1mol/L的NaOH或1mol/LHCL将PH值调至5.8，可用PH精密试纸或酸度计测定。
5. 用培养基分装用具将500ml的培养基分注于15个所选用的培养瓶中。
6. 用封口膜、棉塞或其它封口物包扎瓶口，并做好标记。
7. 把分装好的培养基及所需灭菌的各种用具、蒸馏水等，放入高压灭菌锅的消毒桶内，将外层锅内加水至水位线。
盖好锅盖，上好螺丝，接通电源升温。
待锅内温度达100。
C（0.05kgf/cm2或0.005MPa）左右时，打开排气阀排净锅内冷空气，然后关闭排气阀，继续加热至温度达到121。
C（1.05kgf/cm2或0.103MPa）时，维持20~30min即可切断电源，让锅内气压自然下降，当压力降到零点后，打开排气阀，排出剩余蒸汽，再打开锅盖取出培养基及灭菌物品。
8. 培养基及灭菌物品在室温下自然冷却后，存放于阴凉干燥洁净处待用。
四、总结高压蒸汽灭菌的原理和一般操作步骤实验试验一：培养基的配制学号：200730030120 班级专业：07茶学姓名：张晓菊联系电话：136****3981实验目的：1、了解培养基的组成，掌握培养基的配制原理和步骤。
2、了解影响培养基配制的因素。
3、了解灭菌基本操作。
4、为植物的离体培养创造营养条件。
实验原理：培养基的类别，依据培养基中是否加有固化剂可分为固体培养基和液体培养基，前者因加有固化剂如琼脂或卡拉胶而呈固体状态，后者不加固化剂，培养基为液体。
固体培养基的配制及灭菌
实验二固体培养基的配制与灭菌一、目的要求1、通过实验的准备工作，掌握培养皿、三角瓶等器皿的洗涤技能；2、通过固体培养基的配制，掌握配制固体培养基的基本技能；3、掌握培养基的灭菌方法与分装方法。
二、仪器与用具1、仪器：各类天平、电炉、高压灭菌锅；2、用具：烧杯、量筒、玻璃棒、培养皿、三角瓶、标签、pH试纸、报纸或牛皮纸；3、试剂：0. 1 -1N NaOH，0.1-1N HCl，各类培养基母液，琼脂粉，蒸馏水。
三、方法步骤（一）相关器皿的洗涤1、将使用完毕的培养器皿中的培养基残渣清除干净（倒入垃圾桶而非下水道中）2、用洗衣粉或肥皂水浸泡培养器皿后进行清洗3、用清水冲洗培养器皿3遍4、用蒸馏水冲洗1-3遍5、将清洗干净的培养器皿倒扣于铺好报纸的桌面上或试管架上晾干备用。
（二）培养基的配制1、将培养基母液按照以下次序摆放于试验台上：大量、微量、铁盐、有机、生长调节物质2、取适量蒸馏水放入容器3、按需要量依次取母液（若使用移液管，需专管专用，不可混用；若用量筒，已取出的多余母液严禁倒回原试剂瓶中）4、加入蔗糖（30g/L）溶解5、加入蒸馏水，使溶液体积比最终体积略少6、调节PH值（pH=5.8）7、加入琼脂（6-10g/L）8、定容至终体积（三）培养基的分装与灭菌1、用三角瓶培养（1）将上述培养基煮开2-3min，使琼脂溶化均匀（2）趁热将培养基分装入洗净晾干的三角瓶中（3）扎好瓶口（4）高压灭菌（5）将灭菌后的培养基摆放于平面上，待凝固后存放于20℃以下的洁净橱柜中，并贴好标签备用2、用培养皿培养（1）将培养基进行高压灭菌后趁热取出（2）趁培养基凝固之前，在超净工作台上将灭菌后的培养基分装至无菌培养皿中（3）将分装好的培养皿平置于超净工作台上，待其凝固，并吹干培养皿盖上的水汽（4）将凝固吹干后的培养基用干净的保鲜膜包好，存放于20℃以下的洁净橱柜中，并贴好标签备用。
（四）高压灭菌方法1、用牛皮纸或报纸等将玻璃器皿和金属器械包扎好2、在高压灭菌锅内装一定量的蒸馏水，水必须淹没电热丝，严禁干烧3、把分装好培养基的培养瓶、包扎好的玻璃器皿和金属器械、装有蒸馏水的玻璃瓶等物品放入高压灭菌锅内（注意带盖的密封试剂瓶不要拧太紧，要留有一定的缝隙防止因热胀冷缩而造成的瓶体破裂或变形），盖好高压锅盖，成对拧好锅盖上的螺帽，打开排气阀，开启电源（严禁对易燃易爆易挥发的物品进行高温高压灭菌）4、当排气阀开始放气时计时3-5分钟，待排出的气体呈持续均匀的白色蒸汽时关闭排气阀（关闭排气阀时注意防止蒸汽烫伤）5、当高压灭菌锅显示锅内温度达到121℃时开始计时，使温度稳定在121℃以上（锅内压力严禁超过0.165 M Pa），保持15-20min6、切断电源，让高压灭菌锅自然冷却，必须等压力降到0.05 M Pa以下时打开排气阀（无论何种情况下，严禁在压力超过0.05 M Pa时开排气阀），待压力指针降到零，锅内外压力一致后方可打开锅盖，取出锅内物品（永远记得要先开排气阀，再开高压灭菌锅锅盖）。
培养基配制标准操作规程
培养基配制标准操作规程一、目的：规范培养基配制操作流程，确保培养基的质量符合要求。
二、适用范围：本规程适用于实验室培养基配制操作。
三、岗位责任（1）实验员：根据实验需要，按照配方准确称量试剂，按照标准操作流程进行配制，保证培养基的质量。
（2）实验室主任：对实验员所配制的培养基进行审核，对质量不符合要求的培养基要求实验员进行整改，并记录在实验室日志中。
四、基础设施和基本设备实验室应配备足够的天平、电子计时器、玻璃棒、玻璃瓶、蒸馏水机、高压灭菌器等基础设备及设施。
五、培养基配制操作流程（1）准备试剂应先仔细阅读所选培养基的配方，根据试剂名称和精确剂量，准备称量瓶、试剂架、天平等计量仪器。
配制时应避免手触、相沾等操作，避免交叉污染。
（2）称量试剂初次粗择试剂后，建议先将试剂转移到称量室中，配合现代科技的天平，便可精确计算配比比例。
所有试剂称重时必须使用内配计量，不能使用外配以避免误差增大影响试剂配比。
（3）配制溶液将所需试剂依照标准配比和数量先加入容器，再用分度水小心勾兑均匀，用方法如下：先将容器中整量标容量的水加入到标记线以下。
然后倒入试剂，如对称量试剂的总质量要求是1000 ml，而已注入200 ml水时，即将剩余的实验试剂灌入到950毫升，再次将液面加到1000毫升，如此反复操作完整。
（4）用自来水采样，并抽真空去泡水样的采集，我们应该在步入实验室后在首先采用自来水进行放置，保留水样大概20分钟后，用玻璃棒试管器分别进行抽取。
培养基液体所产生的泡沫和气泡需要用抽真空的方式去除，以确保培养基的质量。
（5）实验室水龙头口淋洗容器本次所述的辛勤劳累的操作一旦完成，容器内部的物质已经被彻底摧毁，真正变成了医学科学上可行的培养基，此时我们应该用干净的管子将洗涤水彻底排完，真正保障实验室完全无菌的标准。
（6）高压灭菌用高压灭菌锅进行消毒，根据不同的材质和设备使用说明，对耐高温不锈钢的容器用121度高压灭菌20分钟，可以保证彻底去除培养基中的细菌。
培养基配制和灭菌方法验证
培养基配制和灭菌方法验证一、培养基配制培养基是一种供养菌落生长的基础物质，可以提供细菌所需的营养物质和环境条件。
培养基的配制是非常关键的步骤，如果配制不当会影响到培养菌落的生长和观察结果的准确性。
1.1固体培养基的配制固体培养基是通过在液体培养基中加入凝固剂（如琼脂）使其凝固，形成固体的培养基。
固体培养基可以用来分离纯菌、观察菌落特征以及保存菌种。
配制固体培养基的主要步骤如下：步骤一：准备配方根据不同的菌种需要，选择适当的培养基配方。
常见的培养基如营养琼脂(NA)、大肠杆菌琼脂(MacConkey)、血琼脂(Blood Agar)等。
步骤二：计量和溶解根据配方，按照适当的比例称量需要的成分，并加入适量的蒸馏水。
然后，将成分加热溶解，直至成分完全溶解。
步骤三：凝固将已溶解的培养基液倒入培养皿或试管中，装入适量的培养基液。
温度下降至约50℃时，可以添加相应的抗生素(如青霉素)等，促进无菌条件的保持。
待培养基液凝固后，即可进行灭菌处理。
1.2液体培养基的配制液体培养基主要用于培养大量的菌落或进行革兰氏染色等实验。
液体培养基的配制步骤与固体培养基配制类似，只是不需要加入凝固剂。
为了确保培养基无菌，常常需要进行灭菌处理。
2.1常见的灭菌方法常见的灭菌方法主要包括以下几种：1)高压灭菌法：利用高温高压的环境，将培养基中的微生物逐一被杀死。
常用的高压灭菌法是使用高压蒸汽灭菌器进行处理。
2)紫外线灭菌法：使用紫外线灭菌器，将细菌暴露在紫外线下，排除细菌生长的可能性。
3)化学灭菌法：使用化学物质，如乙醛、次氯酸钠等，浸泡培养基或在培养基上喷雾，杀灭细菌。
2.2检验培养基灭菌效果的验证方法验证培养基灭菌效果的方法主要有两种：物理指标法和培养法。
1)物理指标法：即通过检测物理指标，如温度、压力等，来验证灭菌效果。
例如，在培养基中放置一个温度计，通过测量温度变化来判断灭菌的有效性。
2)培养法：即将培养基在灭菌前后进行对照培养，观察菌落的生长情况，或通过采样培养基，进行菌种分离和鉴定。
培养基配制标准规程
目的：建立培养基的配制方法，保证培养基质量稳定可靠，使检验结果准确可信。
适用范围：公司所有培养基责任人：质量管理部主任、检验员内容：1、培养基管理员应具有一定的微生物专业知识并经过培训合格。
2、培养基制备前的准备工作。
2.1、制备培养基所用的玻璃器皿，如吸管、试管、三角瓶和平皿等。
新的玻璃器皿（首次使用）和再次使用的分别按各自批准的规程洗涤、干燥。
2.2、干燥后器皿按规定程序进行灭菌。
2.3、已灭菌的器皿按规定要求保存，并在规定期限内用完。
2.4、用前检查质量（颜色、结块等），变质不符合要求的不得使用。
3、培养基的制备3.1、按处方生产的符合规定的脱水培养基3.2、配制：所用溶剂为纯化水。
脱水培养基应完全溶解于水中，再行分装与灭菌。
配制时若需加热助溶。
应注意不要过度加热，避免培养基颜色变深。
所用器具应用纯化水充分冲洗，以消除清洁剂和外来物质的残留。
3.3、灭菌：培养基配制后应在2小时内灭菌，避免细菌繁殖。
应按生产商提供的或验证的参数进行湿热灭菌，pH值范围3.4、认真填写配制记录，内容有：名称、配制批号、操作方法中重要参数（时间、压力、温度）、配制日期、配制者、使用期限。
3.5、在每个已灭菌的培养基容器外标明名称、配制批号、配制日期、使用期限。
4、培养基的质量检查：对初次使用或新购进的培养基均要进行适用性检查，并做好适用性记录，记录内容：名称、配制日期、接种菌名称、接种菌培养（阳性检查）结果、未接种菌培养（阴性检查）结果、结论、检查日期、检查者。
5、经检查验证合格的培养基方可准许使用，否则不准使用。
6、培养基的保存6.1、琼脂培养基不得在0℃或0℃以下存放，以防破坏凝胶特性。
6.2、配制好的培养基应保存在2-25℃，避光的环境，若保存于非密闭容器，一般不超过3周。
6.3、融化的培养基应置于45-50℃的水浴中。
6.4、倾注培养基时应擦干容器外表面的水分，以免容器外壁的水滴进入培养皿造成污染。
培养基的配制标准操作规程
培养基的配制标准操作规程1.目的选取天然或纯化的营养物质及其相应的渗透压、酸碱度等理化条件，经过加工，制成不同的营养基质，藉以在人工条件下培养供检验用的微生物。
2.适用范围适用于培养基的配制操作。
3.责任者操作员。
4.仪器硅胶塞、试管、平皿、吸管、漏斗、高压锅、三角瓶、天平。
5. 内容5.1 准备5.1.1 玻璃器皿洗涤5.1.1.1 制备培养基所用吸管、试管，三角瓶和平皿等新玻璃器皿，因有灰尘和游离碱性物质，先用水冲洗干净。
然后置3％的盐酸中浸泡约12H。
取出后，用清水冲洗干净，再用纯化水冲洗1～2次，晾干后备用。
5.1.1.2 凡各种装量大而又不宜高压的含糖培养基，所用的玻璃器皿应事先灭菌，以免因一次性低压灭菌不彻底而染菌。
5.1.2 用具包装与灭菌5.1.2.1 硅胶塞：应用水冲洗干净，再以纯化水冲洗1～2次，烘干备用。
5.1.2.2 试管：各种试管最好先配上合适的硅胶塞，待高压灭菌后再分装培养基，可防止污染。
5.1.2.3 平皿：取洗净晾干的平皿，每7 套作一个包装，121℃ 30分钟灭菌后烘干备用；也可用160℃ 2小时干热灭菌后备用。
5.1.2.4 吸管：供染菌限度检验用的吸管，应防止堵塞，故选用红刻度粗下口的。
用前洗净烘干，上口塞进少许普通棉花，松紧适度，以防污染。
然后按其容量大小，分别放在用双层牛皮纸做成的纸袋或者金属盒内，包严经121℃ 30分钟灭菌后烘干备用。
5.2 操作5.2.1 根据用途选择培养基，按其用法进行准确称量和加纯化水，并填写配制记录如名称、配制量、配比、配制日期、配制者。
5.2.2 培养基完全溶解后，进行过滤和分装，液体培养基一般应澄清无沉淀，否则影响观察细菌生长结果。
过滤时可用滤纸或脱脂棉。
5.3 分装5.3.1 各种液体培养基分装试管时，每支应按试管大小及用途不同定量分装，可用吸管或注射器分装，也可用漏斗分装。
一般漏斗下口连接一段橡胶管，管口插一小段玻璃管，再加上一个弹簧夹控制流量，分装时将漏斗放在支架上，内装培养基，然后将下口插入试管中即可按量将培养基逐管分装，注意，不同品种的培养基用过漏斗，应充分洗净后再用，以防两种培养基互相混淆，影响使用效果。
培养基配制操作规程
1．目的：本规程规范了微生物实验室培养基的配制操作。
2．范围：适用于微生物检测使用的各类培养基配制。
3．职责：微生物检验员对本规程的实施负责。
质量部负责人负责监督。
4．内容4.1 培养基定义指人工配制的生物营养物质，即用人工方法将多种物质按各种微生物生长繁殖的需要配成的一种混合营养物。
通常指干粉培养基和配制好的琼脂、肉汤、稀释液等。
4.2 培养基制备前准备工作4.2.1 准备配制培养基用的天平、三角瓶、量筒、称量纸、小勺、电阻炉和所需的纯化水等，新的玻璃器皿（首次使用）和再次使用的玻璃器皿分别按各自批准的规程洗涤、干燥。
4.2.2 按照所检项目微生物限度的种类，准备相应的培养基。
4.3 培养基的制备4.3.1溶解：根据培养基瓶上标签说明和所需配制量称取干燥培养基，置烧杯中，加入适量纯化水，放到电炉上加热，使溶解。
如有沉淀，应于溶化后趁热过滤。
4.3.2 校正酸碱度：根据培养基瓶上标签说明，用1mol/L盐酸或1mol/L氢氧化钠调节pH值达到规定的要求。
如与所需pH不符，可用酸或碱液加以校正，试剂规格应为化学纯以上。
4.3.3 培养基分装：培养基一般在高压灭菌前分装，将配制好的培养基分装到若干个三角形瓶或试管中，分装量不宜超过该容器的2/3，以免灭菌时外溢。
瓶口塞好塞子，盖上牛皮纸并用绳子捆扎好。
硫乙醇酸盐流体培养基，分装至适宜的容器中，其装量与容器高度的比例应符合培养结束后培养基的氧化层（粉红色）不超过培养基深度的1/2。
4.3.4 培养基的灭菌：配制好的培养基依据说明书规定时间、方法进行灭菌，配制后宜在2小时内灭菌，避免微生物滋生避免细菌繁殖。
培养基应只能进行一次蒸汽灭菌处理。
4.3.5 培养基的使用尽量做到现配现用。
4.4 培养基的保存和使用。
4.4.1 灭菌后的培养基应保存在2～25℃（一般放入冰箱中保存），防止被污染，可在三周内用毕。
临用时，取出，用水浴加热使溶化。
已溶化的培养基应一次用完。
固体培养基配制操作流程
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固体培养基的配制方法
固体培养基的配制方法1.准备培养基成分：-碳源：葡萄糖、果糖或琼脂等。
-氮源：氨基酸、蛋白胨或硝酸盐等。
-矿物质源：磷酸盐、硫酸盐或硫酸镁等。
-维生素：硫胺素、核黄素或生物素等。
2.配制培养基溶液：将固体培养基所需的成分逐一称量，并加入适量的蒸馏水中。
搅拌均匀直至完全溶解。
注意避免气泡的产生。
3.调节pH值：使用pH计测量培养基溶液的pH值，并根据需要进行调节。
通常，微生物培养的pH范围在6.5-7.5之间较为常见。
4.煮沸和灭菌：将配制好的培养基溶液倒入适当的容器中，如培养皿或试管。
接下来，将容器加盖，并使用自动压力灭菌锅进行煮沸处理。
5.添加琼脂：煮沸后的培养基溶液可添加琼脂作为凝固剂，以将其转变为固态。
通常，将琼脂加入培养基溶液时保持温度在50-60°C之间，并充分搅拌以确保均匀分散。
6.培养基保存：完成配制后，将固体培养基培养器皿密封好，并在室温下保存。
避免阳光直射和潮湿环境。
7.使用固体培养基：可以在固体培养基上直接接种微生物或细胞。
接种时，使用无菌的技术并避免对培养基表面造成污染。
稍微倾斜培养器皿，使培养基均匀覆盖。
需要注意的是，在无菌条件下进行固体培养基的配制和使用是非常重要的，以防止细菌、真菌或其他外源微生物的污染。
在配制固体培养基之前，所有容器、仪器和试剂都必须经过适当的清洁和消毒处理。
如果配制过程中发现任何异常如颜色变化、异味或异物，应立即停止使用。
同时，配制和接种过程中要确保使用洁净的技术和正确的操作步骤，以保证培养基的高质量和微生物或细胞的生长成功。
总结起来，固体培养基的配制方法包括准备培养基成分、配制培养基溶液、调节pH值、煮沸和灭菌、添加琼脂、培养基保存和使用固体培养基。
这些步骤能够在无菌条件下制备高质量的固体培养基，并为微生物或细胞的生长提供一个适宜的环境。
固体培养基的配制方法
固体培养基的配制方法步骤一：准备所需材料首先，我们要准备所需的材料。
这些材料包括培养基成分、琼脂和适当的容器。
步骤二：选择培养基成分培养基成分的选择取决于所要培养的微生物类型和研究目的。
常见的培养基成分包括碳源、氮源、无机盐等。
可以参考专业文献或根据已有的培养基配方进行选择。
步骤三：配制培养基液首先，根据选择的培养基成分，按照相应的质量比例将培养基成分溶解在适量的蒸馏水中。
将培养基成分充分搅拌溶解，直到没有明显的悬浮物。
步骤四：加入琼脂将配制好的培养基液倒入烧杯中，在搅拌的同时，逐渐加入适量的琼脂。
加入琼脂的同时，要保持持续搅拌，以充分溶解琼脂并避免结块。
步骤五：灭菌将配制好的培养基液倒入适当容器中，如培养皿、烧瓶等，并用锡纸包裹好。
将装有培养基的容器放入高压灭菌锅中，按照标准的灭菌程序进行灭菌。
步骤六：倾倒培养基灭菌后，将容器从高压灭菌锅中取出，用无菌条件下的实验室操作台或无菌工作台，将培养基液倒入培养皿或其他容器中。
注意，倒入培养基液的过程要尽量避免将外界的空气接触到培养基中。
步骤七：固化培养基待培养基液的温度降至适宜微生物生长的范围内后，培养基会逐渐凝固成固体。
这个过程一般需要在室温下进行，时间根据琼脂的类型和浓度而有所不同。
一般来说，时间范围在30分钟至1小时之间。
步骤八：贮存培养基固化后的培养基可以在4℃的冰箱内存放，或用琼脂袋密封保存。
注意，要避免培养基遭受直接阳光照射或高温条件。
以上为固体培养基的配制方法。
需要注意的是，不同微生物对培养基成分的需求不同，因此在配制固体培养基之前，需要了解目标微生物的生长条件和要求，以及相关的文献资料。
希望这份指南对您有帮助！。
固体培养基的制备步骤
固体培养基的制备步骤固体培养基是一种广泛应用于微生物学、细胞生物学和组织培养等领域的培养基。
它由营养物质、水和固体物质（如琼脂）组成。
固体培养基的制备步骤如下：一、准备材料1. 称量琼脂粉：根据所需制备的培养基体积，称取适量的琼脂粉。
一般情况下，琼脂粉的用量为培养基体积的1.5%-2%。
2. 称量营养物质：根据培养基配方，称取适量的营养物质，如葡萄糖、氨基酸、维生素、无机盐等。
3. 准备蒸馏水：将蒸馏水加热至沸腾，以备溶解琼脂和营养物质。
二、溶解琼脂和营养物质1. 将称取的琼脂粉倒入蒸馏水中，用玻璃棒搅拌，直至琼脂粉完全溶解。
2. 加入称取的营养物质，继续搅拌，直至营养物质完全溶解。
3. 保持培养基液温度在50-60℃，避免温度过高导致营养物质破坏。
三、调pH值1. 使用pH计或精密pH试纸测量培养基液的pH值。
2. 根据实验需求，将培养基液的pH值调整至适宜范围。
一般情况下，细菌培养基的pH值为7.0-7.4，真菌培养基的pH值为5.0-6.0。
3. 调整pH值后，再次测量以确保准确。
四、灭菌1. 将溶解好的培养基液倒入无菌玻璃瓶或培养皿中，注意不要产生气泡。
2. 用无菌铝箔或无菌瓶盖封口，避免污染。
3. 将装有培养基的玻璃瓶或培养皿放入高压蒸汽灭菌锅中，按照以下条件进行灭菌：温度：121℃时间：15-20分钟压力：1.05 kg/cm²4. 灭菌结束后，让培养基自然冷却至室温。
五、倒平板1. 将灭菌后的培养基倒入无菌培养皿中，每皿倒入约15-20 mL。
2. 待培养基凝固后，将培养皿倒置，放入培养箱中备用。
六、保存1. 将制备好的固体培养基放入4℃冰箱保存，避免光照和高温。
2. 标记培养基名称、制备日期和失效日期，以便于管理和使用。
七、注意事项1. 制备固体培养基时，要严格遵守无菌操作规程，避免污染。
2. 灭菌过程中，要确保高压蒸汽灭菌锅的温度、时间和压力达到要求，以确保培养基无菌。
固体培养基的配制过程
固体培养基的配制过程1.准备固体载体：根据所需的固体载体类型（琼脂或洋菜粉），按照说明书指示或自行调配所需分量。
一般情况下，会在适当的量的蒸馏水中按照配方比例逐渐加入固体载体，搅拌混合直至完全溶解，然后加热使之完全溶解。
2.配制培养基：在制备固体培养基时，根据需要选择适当的培养基配方。
培养基的组成主要包括有机营养物、无机盐、维生素和其他添加剂。
根据所需的浓度和量，将适量的有机营养物（如蛋白胨、葡萄糖等）和无机盐（如硫酸镁、磷酸二氢钾等）溶解在蒸馏水中。
3.消毒和灭菌：在配制完毕的培养基中加入碘酸钾或其他合适的消毒剂，将其搅拌均匀。
然后利用高压灭菌器将培养基进行灭菌处理。
灭菌过程中一般需要调节合适的温度和压力，并根据不同的菌株和实验需求选择不同的时间（通常为15-30分钟）。
4.倒注和固化：灭菌的培养基可以通过两种方法倒注到培养容器中，即倒口法和滴管法。
对于较大的容器，比如培养皿，通常使用倒口法；对于培养管或其他小型容器，则可以使用滴管法。
倒注过程需要确保操作环境的清洁，并尽量避免空气和其他微生物的污染。
倒注完毕后，待其自然凝固（固化）即可。
5.贮存：固化后的固体培养基可以在室温下存放，不需特殊条件。
为了防止固体培养基的变质，需要严格控制存放容器的密封性和干燥度。
固体培养基的保质期一般为1-6个月，具体的保质期则根据培养基的成分、pH值以及其他物质的稳定性来决定。
总的来说，固体培养基的配制过程包括准备固体载体、配制培养基、消毒和灭菌、倒注和固化以及贮存。
这些步骤的细节会根据不同的实验需求、培养基配方和仪器设备等而有所区别。
在操作过程中需要特别注意操作环境的清洁和消毒，以及防止培养基的污染和变质。
培养基配制及适用性检查标准操作规程【范本模板】
目的：建立培养基配制及适用性检查的标准操作规程，规范实验人员的操作流程.范围：适用于微生物检验人员对培养基的规范管理.依据:《药品生产质量管理规范(2010年修订)》、《中华人民共和国药典》2015年版第四部职责：1.微生物检验员：负责实验室所需求的培养基管理工作,使日常检验可以顺利进行.2。
微生物检验主管：负责对日常配制培养基的规范操作进行监督.内容1 培养基的申购根据检验项目、工作量和工作进度的需求，提前一个月进行所需的培养基申购。
申购时需指定培养基供应商,必要时进行供应商审计。
2 培养基的验收2.1 培养基到货后，微生物室检验员应进行验收。
验收内容包括核对品名、数量、规格、生产厂商，应与申购单一致；检查培养基包装有无破损、包装是否完整、产品是否在有效期内。
2.2 验收合格后，登记于《培养基领用台账》（附记录文件编号：SMP—10—QC—009—02（00））。
3 培养基的贮藏3。
1未开封的脱水培养基贮存于阴凉室,使培养基处于低温、干燥、和避光条件下。
已开封的脱水培养基应盖紧，贮存于阴凉库.3.2灭菌好的培养基应进行预培养72h检查无菌后，置4～8℃冷藏保存待用。
灭菌后培养基储存期为7天。
4 培养基的配制4。
1培养基的配制和使用应填写《培养基配制及使用记录》（附记录文件编号：SMP-10—QC-009-02（00)）.4。
2培养基配制批号原则：原材料批号—配制日期:比如2011年1月1日配制的培养基，培养基干粉批号000000,配制批号为：000000—110101。
配制好的培养基贴《培养基标签》（附记录文件编号：R-SMP—10—QC-009-03).（注:同一天同一培养基配置多次的,在原批号后加“-”加“数字”表示，如000000—110101-01）4。
3培养基配制方法4。
3。
1 使用商品化脱水合成培养基时，应严格按照厂商提供的使用说明配制，如重量/体积、pH、灭菌条件和操作步骤等。
实验室使用各种基础成分制备培养基时，应按照配方准确配制，并记录相关信息如：培养基名称和类型及试剂级别，每个成分物质含量、制造商、批号，pH值，培养基体积/分装体积，灭菌条件（灭菌方式、温度及时间)，配制日期、人员等，以便溯源.4.3.2 水、容器具要求：培养基配制均采用纯化水，特殊说明时采用去离子水和蒸馏水。
固体培养基配制实验
固体培养基配制实验试剂、试剂盒琼脂、胰化蛋⽩胨、NaCl、NaOH、四环素仪器、耗材玻璃瓶、烧瓶实验步骤⼀、极限培养基平板800 ml⽔加⼊15 g琼脂，⾼压灭菌15 min。
然后加⼈200 ml⽆菌的5 X 极限培养液和碳源。
待冷却⾄50°C，加⼈补充成分。
每个10 cm平板倒⼊32~40 ml 培养基（每升培养基可制作25?30个平板）。
于室温⼲燥2?3天，或将平板的上盖稍微打开，于37°C或在层流通风橱⼲燥30 min，将晾⼲的平板包裹好储存于4°C。
⼆、丰富培养基平板将⽔加⼈以下所列出的培养基配⽅的成分中，定容⾄1L，⾼压灭菌25 mm。
待冷却⾄50°C，加⼈补充成分。
每个LB或H培养基平板倒⼈32~40 ml培养基（每升培养基可制作25?30个平板），每个λ⾁汤培养基平板倒⼈约45 ml培养基（每升培养基可制作20个平板）。
平板的⼲燥和保存如上所述。
1. H 平板，每升10 g 胰化蛋⽩胨8 g NaCl15 g 琼脂2. λ⾁汤平板，每升10 g 胰化蛋⽩胨2.5 g NaCl10 g 琼脂3. LB平板，每升10 g 胰化蛋⽩胨5 g 酵母提取物5 g NaCl1 ml 1 mol/L NaOH15 g 琼脂或者琼脂糖三、添加物其他的抗⽣素和半乳糖苷1. 抗⽣素（如果需要）：氨苄青霉素 50 µg/ml四环素12 µg/ml2. 半乳糖苷（如果需要）：X-gal终浓度为 20 µg/mlIPTG终浓度为0. I mmol/L四、顶层琼脂培养基顶层琼脂培养基常⽤于将噬菌体或细胞在平板的表⾯均匀分布成⼀薄层。
以1 L的批量配制顶层培养基，⾼压灭菌15 min使之熔化，冷却⾄50°C，轻轻旋转晃动使其混合均匀，分装⾄100 ml瓶中。
再次⾼压灭菌，冷却，拧紧盖⼦，于室温保存。
使⽤前，⽤⽔浴或者微波炉熔化顶层琼脂，冷却⾄45?50°C并维持在该温度。
固体培养基的生产工艺流程
固体培养基的生产工艺流程固体培养基是一种常用的微生物培养基，其制备工艺流程包括原料准备、配制、固化和灭菌等步骤。
下面将详细介绍固体培养基的生产工艺流程。
一、原料准备固体培养基的制备需要准备以下原料：琼脂、蔗糖、肉汤粉、氯化钠、琼脂葡萄糖梅花培养基等。
这些原料可在实验室常用的试剂商店购买得到。
二、配制1. 取适量的琼脂粉加入蒸馏水中，搅拌均匀，形成琼脂溶液。
2. 在琼脂溶液中加入适量的肉汤粉、蔗糖、氯化钠等，搅拌均匀，使各种成分充分溶解。
3. 调整溶液的pH值，通常在7.0左右。
4. 将配制好的溶液倒入培养瓶或培养皿中，每瓶或每皿的容量根据需要确定。
三、固化1. 将配制好的培养基装入培养瓶或培养皿中，每个容器装满的高度一般为1/3至1/2。
2. 用锡纸或塑料膜将容器盖好，避免水分的蒸发。
3. 将装有培养基的容器放入高压灭菌锅中，进行高温高压灭菌处理。
灭菌温度和时间要根据不同的微生物要求进行调整。
四、灭菌1. 将装有培养基的容器放入高压灭菌锅中，进行高温高压灭菌处理。
灭菌温度和时间要根据不同的微生物要求进行调整。
2. 灭菌结束后，取出容器，待其冷却至室温。
以上就是固体培养基的生产工艺流程。
固体培养基制备的关键点在于原料的准备和配制过程。
在原料准备时，需要确保原料的质量和纯度，以保证培养基的质量。
在配制过程中，要注意各种成分的溶解均匀和pH值的调整，以及培养基的装瓶和灭菌处理。
固体培养基在微生物实验和研究中起着重要的作用。
通过固体培养基，可以培养出微生物的单体菌落，并进行纯培养、菌株筛选和菌落形态观察等实验。
固体培养基的生产工艺流程对于确保微生物实验的可重复性和准确性具有重要意义。
需要注意的是，在固体培养基的生产过程中，要严格遵守实验室的操作规范和安全要求，使用消毒液对工作台、仪器和容器等进行消毒处理，以防止微生物的交叉污染。
此外，在使用固体培养基时，要注意避免外界杂菌的污染，保持培养基的无菌状态。
固体培养基的生产工艺流程包括原料准备、配制、固化和灭菌等步骤。
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操作顺序
操作内容
操作要求
1
填写培养基成分单
按所用培养基配方及其配制量，准确计算出各种成分母液及琼脂、蔗糖的用量，并按大、微、铁、有、调、琼、糖、pH的顺序，填写在“配制培养基成分单”上。
2
水锅加热
在做培养基专用的不锈钢锅内，加进约为欲配培养基量的70-80%的蒸馏水或软化水（澄清后的凉开水），放在电炉上加热。
19
高压锅排水
打开排水阀，放尽锅内存水，以减少积垢。
说明
一、制定本操作规程的目的是：（1）防止发生差错，提高培养基质量；（2）使配制过程井然有序，省时、省力、节省能源，提高工作效率。
二、制定本操作规程所依据的条件是：（1）一人操作，一次配制8升培养基；（2）用2000W的电炉为水锅加热；（3）所用高压锅是“立式电热压力消毒器”（工作压力：137Kpa），并配有3-6KV的稳压电源控制器，因此，当上述条件有变化时，就应对相关操作顺序和操作要求作必要的调整或变动。
3
高压锅加水
关闭高压锅排水阀，加软化水至安全水位线。
4
称取琼脂、蔗糖
称取前，剪碎干胶条状琼脂，破碎蔗糖结块，须按1%以上的精度准确称量。
5
摆放培养瓶
按预定分装瓶数，将洗净、晾（烘）干的培养瓶，在桌上摆放整齐。
6
量取和混溶母液
把贮存各种所需母液的试剂瓶，按培养基成分单所列顺序摆放整齐，再按配方用量顺序量取各成分母液，并混溶于烧杯中。
12
分装培养基
按不同组培目的所需的每瓶培养基用量，将培养基均匀分装于摆好的培养瓶内。然后在瓶口盖上消毒好的棉塞或封口膜。
13
高压锅加热
关闭进水口及放气阀，打开排气阀，通电加热。
14
培养基（瓶）封口
棉塞上加盖牛皮纸（或直接用封口膜），并用棉线扎紧封口。
15
培养基（瓶）装锅
瓶口向上，略向中心倾斜，瓶口不可贴于锅壁（防止冷凝水进入瓶内）。码放均匀，上方加盖三层牛皮纸吸湿，装锅不可过满，以加盖后不堵塞安全阀和放气阀的孔口为度。
7
加琼脂
当水锅温度达90℃左右时，加进称量好的琼脂，继续加热，不断匀速搅拌，严防糊锅。
8
加蔗糖
待琼脂完全溶化后，撒入蔗糖，不停地搅拌。
9
加母液混溶液
蔗糖溶化后，断电停止加热，边搅拌、边徐徐倒入母液混溶液。
10
加水定容
加蒸馏水（或软化水）至标示欲配培养基量的锅壁记号。
11
调pH值
用精密pH试纸，与比色卡比较：偏酸，滴入1mol/L的NaOH液；偏碱，滴入1mol/L的HCl液，少量多次进行调节，直至合乎
封盖时应按顺时针顺序拧紧固定螺栓。在高压灭菌锅控制面板上选择温度121℃，时间为20分钟，按确认键开始灭菌。
17
培养基（瓶）出锅
当灭菌结束后，高压灭菌锅自动断电，打开锅盖，取出培养基（瓶）。
18
培养基（瓶）存放
将出锅的培养基（瓶）整齐平放于接种室的存放架上，并明确标示其培养对象（种类、品种）、培养目的（诱导、继代、生根）或其它特定用途以及配制日期。