LB培养基怎样配制
实验室常用培养基的配制方法
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实验室常用培养基的配制方法在实验室中,培养基是微生物生长和繁殖的重要物质基础,正确配制培养基对于实验结果的准确性和可靠性至关重要。
不同的微生物对营养物质的需求有所不同,因此需要根据实验目的和微生物的特性选择合适的培养基,并掌握正确的配制方法。
接下来,我将为大家详细介绍几种实验室常用培养基的配制方法。
一、LB 培养基(LuriaBertani 培养基)LB 培养基是一种常用于培养细菌的通用培养基,其成分包括胰蛋白胨、酵母提取物和氯化钠。
配制 1L 的 LB 培养基,所需材料如下:胰蛋白胨 10g酵母提取物 5g氯化钠 10g配制步骤:1、称取上述成分,将其放入一个干净的 1L 烧杯中。
2、加入约800ml 的去离子水,用玻璃棒搅拌,直至溶质完全溶解。
3、用去离子水将溶液定容至 1L。
4、调节 pH 值至 70(通常使用 1mol/L 的 NaOH 或 1mol/L 的 HCl 进行调节)。
5、将培养基分装到锥形瓶中,每瓶的装液量不要超过锥形瓶体积的三分之二。
6、盖上瓶塞,用报纸或牛皮纸包扎瓶口。
7、放入高压灭菌锅中,在 121℃下灭菌 20 分钟。
二、牛肉膏蛋白胨培养基牛肉膏蛋白胨培养基是一种常用的细菌培养基,适用于多种细菌的培养。
配制 1L 该培养基,需要准备以下材料:牛肉膏 3g蛋白胨 10g氯化钠 5g具体配制步骤如下:1、称取牛肉膏、蛋白胨和氯化钠,放入干净的烧杯中。
2、加入适量的去离子水,搅拌溶解。
3、定容至 1L,搅拌均匀。
4、用 1mol/L 的 NaOH 或 HCl 调节 pH 至 72 74 之间。
5、分装、包扎、灭菌,方法同上。
三、马铃薯葡萄糖培养基(PDA 培养基)PDA 培养基常用于培养真菌,尤其是霉菌。
配制 1L 的 PDA 培养基,材料如下:马铃薯 200g葡萄糖 20g琼脂 15 20g配制流程:1、将马铃薯去皮,切成小块,称取 200g,放入锅中,加入约1000ml 去离子水,煮沸 20 30 分钟,直到马铃薯块变软。
lb培养基配方
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lb培养基配方LB培养基是由Bertani于1951年开发的一种常用的培养基。
它是一种富含营养物质的培养基,适用于多种细菌的生长和培养。
LB培养基常被用于细菌的培养和研究中,提供了细菌生长所需的营养物质和能量来源。
下面是LB培养基的配方和制备方法。
配方如下:1. 十氯酸钾(KClO₃):0.05 g/L2. 酵母浸粉(Yeast extract):5 g/L3. 蛋白胨(Peptone):10 g/L4. 氯化钠(NaCl):10 g/L5. 水:适量制备方法:1. 将酵母浸粉、蛋白胨和氯化钠加入适量的水中,搅拌溶解。
2. 加入十氯酸钾,继续搅拌混合。
3. 将溶液加热至沸腾,然后冷却至室温。
4. 调整溶液的pH值为7.0(如果需要)。
5. 用适当的容器(如试管或烧杯)装载培养基,然后用自动灭菌器(如高压灭菌器)进行灭菌。
注意事项:1. 在制备培养基时,要注意实验室卫生和操作规范,避免污染和交叉感染。
2. 使用无菌的工具和容器,避免微生物的污染。
3. 制备后的培养基应保持在适当的温度和环境条件下,以确保细菌的生长。
4. 若长时间存储,建议将培养基分装于适当的容器中,并密封保存在低温(如4℃)的冰箱中。
总结:LB培养基是一种简单易制备、适用范围广的细菌培养基,提供了细菌所需的营养物质和环境。
其配方简单,制备方法方便,常被广泛应用于生物学研究和实验室中的细菌培养。
请注意,以上为LB培养基的一般配方和制备方法,具体使用时还需根据实验需要进行调整和优化。
同时,个人在实验室操作时应遵循相关的实验安全规范和操作规程,确保实验的顺利进行。
LB培养基怎样配制精选文档
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L B培养基怎样配制精选文档TTMS system office room 【TTMS16H-TTMS2A-TTMS8Q8-LB培养基怎样配制LB一般被解释为Luria-Bertani,然而根据其发明人贝尔塔尼(Giuseppe Bertani)的说法,这个名字来源于英语lysogeny broth,即溶菌肉汤。
LB培养基是近年来用于培养基因工程受体菌(大肠杆菌)的常用培养基之一。
LB培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基,有时又称普通培养基,含有酵母提取物、胰化蛋白胨和NaCl。
酵母提取物:酵母经破壁后将其中蛋白质、核酸、维生素等抽提,再经生物酶解的富含小分子的氨基酸、肽、核苷酸、维生素等天然活性成分的淡黄色粉末,其中氨基酸含量30%以上,总蛋白50%以上,核苷酸10%以上,广泛用作生物培养基和食品调味品制造原料。
胰化蛋白胨:一种优质蛋白胨,是以新鲜牛肉和牛骨经胰酶消化,浓缩干燥而成的白色粉末,含有丰富的氮源、氨基酸等。
酵母提取物为微生物提供碳源、能源、磷酸盐、生长因子、维生素等;蛋白胨主要提供氮源;NaCl主要提供微生物生长环境(如渗透压),其次是提供无机盐。
在配制固体培养基时还要加入一定量琼脂作凝固剂。
琼脂在常用浓度下96℃时溶化,一般实际应用时在沸水浴中或垫以石棉网直接煮沸溶化。
琼脂在40℃时凝固,通常不被微生物分解利用。
固体培养基中琼脂的含量根据琼脂的质量和气温的不同而有所不同。
由于这种培养基多用于培养细菌,因此,要用稀酸或稀碱将其pH调至中性或微碱性,以利于细菌的生长繁殖。
LB培养基配方(每升)酵母提取物 5g胰化蛋白胨 10g氯化钠 10gNaOH调pH至7.0,121℃、20min高压灭菌。
LB固体培养基LB培养基 1L琼脂粉 15gNaOH调pH至7.0,121℃、20min高压灭菌。
有时需在培养基中添加抗生素,琼脂凝固点为40℃,所以添加抗生素最好在50~55℃。
LB培养基用途:用于一般细菌培养,特别用于分子生物学试验中大肠杆菌的保存和培养。
LB培养基
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LB培养基:10 g牛肉膏蛋白胨,5 g酵母浸膏,2 g氯化钠(NaCl),0.1 g 葡萄糖(C6H12O6),5 g乳酸钠(C3H5NaO3)溶于1 L水,自然pH值;固体培养基中加入2.5%的琼脂。
取制得的土壤样品用于分离筛选重金属抗性菌株,称取10 g晒干的土壤样品于150 ml已灭菌的锥形瓶中,加入10 ml灭菌培养基,于30 ℃培养箱中培养4 d,在火焰旁放入装有100mL无菌水的锥形瓶中,震荡10min,使土样中的菌体、芽孢或孢子均匀分散,制成稀释度为10-1的土壤悬液。
另取6支装有9ml无菌水试管,用特种铅笔编写10-2、10-3、10-4、10-5、10-6,放在试管架上。
让制好的10-1土壤悬液静止0.5min,取1支无菌移液管,从移液管包装纸上半段(近吸管口)撕口,将包装纸分成上下两段,去上段包装纸,左手持锥形瓶底,以右手掌及小指、无名指夹住锥形瓶上棉塞,在火焰旁拔出棉塞(棉塞夹在手上,不得放在桌面上),去下段包装纸,将移液管吸液端伸进锥形瓶内,吸取1ml土壤悬液(常用嘴巴吸取,也可用定量移液器或自动移液器吸取),右手将棉塞插回锥形瓶上,左手放下锥形瓶,换持编号为10-2的无菌水试管,在火焰旁拔出棉塞(试管塞),将移液管伸进无菌水试管内,放入土壤悬液,并在试管内反复吹吸3次,使之充分混匀,制成10-2土壤稀释液,取出移液管,插回棉塞(试管盖)。
接着换一支无菌移液管,按照前面的方法从编号为10-2的试管中吸取1mL稀释液,加入编号为10-3的无菌水试管中,混匀后制成10-3土壤稀释液。
继续上述操作,一次制成10-4、10-5、10-6土壤稀释液。
本次实验共取样6份,随机抽取两份土样,按照上述方法制备土壤稀释液Ⅰ组和Ⅱ组,待下面实验备用。
用移液枪从第Ⅰ组和第Ⅱ组的10-4、10-5和10-6稀释液中分别取0.1 ml 接种于含有重金属的LB固体培养基上(0,0.005,0.01,0.02,0.05,0.1g/L),编号分别为A、B、C、D、E、F,轻轻转动平板,将菌液用三角棒涂布于培养基上,将平板倒置于30℃培养箱中培养5 d,观察菌落的形态,采用常规平板划线法分离纯化,并用相机拍照。
LB培养基怎样配制
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LB培养基怎样配制之马矢奏春创作LB一般被解释为Luria-Bertani, 然而根据其发明人贝尔塔尼(Giuseppe Bertani)的说法, 这个名字来源于英语lysogeny broth, 即溶菌肉汤.LB培养基是近年来用于培养基因工程受体菌(年夜肠杆菌)的经常使用培养基之一.LB培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基, 有时又称普通培养基, 含有酵母提取物、胰化卵白胨和NaCl.酵母提取物:酵母经破壁后将其中卵白质、核酸、维生素等抽提, 再经生物酶解的富含小分子的氨基酸、肽、核苷酸、维生素等天然活性成份的淡黄色粉末, 其中氨基酸含量30%以上, 总卵白50%以上, 核苷酸10%以上, 广泛用作生物培养基和食品调味品制造原料.胰化卵白胨:一种优质卵白胨, 是以新鲜牛肉和牛骨经胰酶消化, 浓缩干燥而成的白色粉末, 含有丰富的氮源、氨基酸等.酵母提取物为微生物提供碳源、能源、磷酸盐、生长因子、维生素等;卵白胨主要提供氮源;NaCl主要提供微生物生长环境(如渗透压), 其次是提供无机盐.在配制固体培养基时还要加入一定量琼脂作凝固剂.琼脂在经常使用浓度下96℃时溶化, 一般实际应用时在沸水浴中或垫以石棉网直接煮沸溶化.琼脂在40℃时凝固, 通常不被微生物分解利用.固体培养基中琼脂的含量根据琼脂的质量和气温的分歧而有所分歧.由于这种培养基多用于培养细菌, 因此, 要用稀酸或稀碱将其pH调至中性或微碱性, 以利于细菌的生长繁殖.LB培养基配方(每升)酵母提取物 5g胰化卵白胨 10g氯化钠 10gNaOH调pH至7.0, 121℃、20min高压灭菌.LB固体培养基LB培养基 1L琼脂粉 15gNaOH调pH至7.0, 121℃、20min高压灭菌.有时需在培养基中添加抗生素, 琼脂凝固点为40℃, 所以添加抗生素最好在50~55℃.LB培养基用途:用于一般细菌培养, 特别用于分子生物学试验中年夜肠杆菌的保管和培养.LB培养基使用原理:卵白胨、酵母膏粉提供氮源、维生素和生长因子;氯化钠维持均衡的渗透压;葡萄糖提供碳源;琼脂是培养基的凝固剂.LB培养基配制方法配制每升培养基, 应该在950 ml去液态lb培养基离子水中加入:胰化卵白胨10g 酵母提取物5g NaCl 10g 摇动容器直至溶质溶解.用5mol/LNaOH调pH至7.0.用去离子水定容至1L.在15psi高压下蒸汽灭菌20min.2.抗生素的加入:高压灭菌后, 将融化的LB固体培养基置与55℃的水浴中, 待培养基温度降到55℃时(手可触摸)加入抗生素, 以免温渡过高招致抗生素失效, 并充沛摇匀.3.倒板:一般10ml倒1个板子.培养基倒入培养皿后, 翻开盖子, 在紫外下照10-15分钟.4.保管:用封口胶封边, 并颠倒放于4℃保管, 一个月内使用. 配400ml的话成份按比例减少就行了, pH还是要按规定的.。
LB培养基怎样配制
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LB培养基如何配制之杨若古兰创作LB普通被解释为Luria-Bertani,然而根据其发明人贝尔塔尼(Giuseppe Bertani)的说法,这个名字来源于英语lysogeny broth,即溶菌肉汤.LB培养基是近年来用于培养基因工程受体菌(大肠杆菌)的经常使用培养基之一.LB培养基是一种利用最广泛和最普通的细菌基础培养基,有时又称普通培养基,含有酵母提取物、胰化蛋白胨和NaCl.酵母提取物:酵母经破壁后将其中蛋白质、核酸、维生素等抽提,再经生物酶解的富含小分子的氨基酸、肽、核苷酸、维生素等天然活性成分的淡黄色粉末,其中氨基酸含量30%以上,总蛋白50%以上,核苷酸10%以上,广泛用作生物培养基和食品调味品制作原料.胰化蛋白胨:一种优良蛋白胨,是以新颖牛肉和牛骨经胰酶消化,浓缩干燥而成的白色粉末,含有丰富的氮源、氨基酸等.酵母提取物为微生物提供碳源、能源、磷酸盐、生长因子、维生素等;蛋白胨次要提供氮源;NaCl次要提供微生物生长环境(如渗透压),其次是提供无机盐.在配制固体培养基时还要加入必定量琼脂作凝固剂.琼脂在经常使用浓度下96℃时溶化,普通实际利用时在沸水浴中或垫以石棉网直接煮沸溶化.琼脂在40℃时凝固,通常不被微生物分解利用.固体培养基中琼脂的含量根据琼脂的质量和气温的分歧而有所分歧.因为这类培养基多用于培养细菌,是以,要用稀酸或稀碱将其pH调至中性或微碱性,以利于细菌的生长繁殖.LB培养基配方(每升)酵母提取物 5g胰化蛋白胨 10g氯化钠 10gNaOH调pH至7.0,121℃、20min高压灭菌.LB固体培养基LB培养基 1L琼脂粉 15gNaOH调pH至7.0,121℃、20min高压灭菌.有时需在培养基中添加抗生素,琼脂凝固点为40℃,所以添加抗生素最好在50~55℃.LB培养基用处:用于普通细菌培养,特别用于分子生物学试验中大肠杆菌的保管和培养.LB培养基使用道理:蛋白胨、酵母膏粉提供氮源、维生素和生长因子;氯化钠保持均衡的渗透压;葡萄糖提供碳源;琼脂是培养基的凝固剂.LB培养基配制方法配制每升培养基,应当在950 ml去液态lb培养基离子水中加入:胰化蛋白胨10g 酵母提取物5g NaCl 10g 动摇容器直至溶质溶解.用5mol/LNaOH调pH至7.0.用去离子水定容至1L.在15psi高压下蒸汽灭菌20min.2.抗生素的加入:高压灭菌后,将融化的LB固体培养基置与55℃的水浴中,待培养基温度降到55℃时(手可触摸)加入抗生素,以避免温度过高导致抗生素失效,并充分摇匀.3.倒板:普通10ml倒1个板子.培养基倒入培养皿后,打开盖子,在紫外下照10-15分钟.4.保管:用封口胶封边,并倒置放于4℃保管,一个月内使用. 配400ml的话成分按比例减少就行了,pH还是要按规定的.。
LB培养基
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一、基本原理:LB培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基,有时又称为普通培养基。
它含有酵母提取物、蛋白胨和NaCl。
碳源和能源:酵母提取物,氮源:磷酸盐、蛋白胨,无机盐:NaCl。
在配制固体培养基时还要加入一定量琼脂作凝固剂。
琼脂在常用浓度下96℃时溶化,一般实际应用时在沸水浴中或下面垫以石棉网煮沸溶化,以免琼脂烧焦。
琼脂在40℃时凝固,通常不被微生物分解利用。
由于这种培养基多用于培养细菌,因此,要用稀酸或稀碱将其pH调至中性或微碱性,以利于细菌的生长繁殖。
LB培养基的配方如下:酵母提取物5g、蛋白胨10g、NaCl 5g、琼脂15~20g、水1000mL、pH 7.4~7.6二、实验用品试剂:酵母提取物,蛋白胨,NaCl,琼脂,1mol/L NaOH,1mol/L HCl;仪器:试管,三角烧瓶,烧杯,量筒,玻棒,牛角匙,pH试纸(pH 5.5~9.0),培养基分装器,天平,高压蒸汽灭菌锅,棉花,牛皮纸,记号笔,麻绳,纱布等。
三、实验步骤1.称量按培养基配方比例依次准确地称取酵母提取物、蛋白胨、NaCl放入烧杯中。
蛋白胨很易吸潮,在称取时动作要迅速。
另外,称药品时严防药品混杂,一把牛角匙用于一种药品,或称取一种药品后,洗净、擦干,再称取另一药品,瓶盖也不要盖错。
2.溶化在上述烧杯中可先加入少于所需要的水量,用玻棒搅匀,然后,在石棉网上加热使其溶解。
待药品完全溶解后,补充水分到所需的总体积。
如果配制固体培养基,将称好的琼脂放入已溶化的药品中,再加热溶化,在琼脂溶化的过程中,需不断搅拌,以防琼脂糊底使烧杯破裂。
最后补足所失的水分。
3.调pH在未调pH前,先用精密pH试纸测量培养基的原始pH值,如果pH偏酸,用滴管向培养基中逐滴加入1mol/L NaOH,边加边搅拌,并随时用pH试纸测其pH值,直至pH 达7.6。
反之,则用1mol/L HCl进行调节。
注意pH值不要调过头,以避免回调,否则,将会影响培养基内各离子的浓度。
LB培养基的制备

LB培养基是一种近年来用于培养基因工程受体菌(大肠杆菌)的常用培养基。
LB一般被解释为Luria-Bertani培养基,然而根据其发明人贝尔塔尼(Giuseppe Bertani)的说法,这个名字来源於英语的lysogeny broth,即溶菌肉汤。
LB培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基,有时又称为普通培养基。
它含有酵母提取物、蛋白胨和NaCl。
其中酵母提取物为微生物提供碳源和能源,磷酸盐、蛋白胨主要提供氮源,而NaCl提供无机盐。
在配制固体培养基时还要加入一定量琼脂作凝固剂。
琼脂在常用浓度下96℃时溶化,一般实际应用时在沸水浴中或下面垫以石棉网煮沸溶化,以免琼脂烧焦。
琼脂在40℃时凝固,通常不被微生物分解利用。
固体培养基中琼脂的含量根据琼脂的质量和气温的不同而有所不同。
由于这种培养基多用于培养细菌,因此,要用稀酸或稀碱将其pH调至中性或微碱性,以利于细菌的生长繁殖。
LB培养基的配方如下:酵母提取物 5g蛋白胨 10gNaCl 5g琼脂 15~20g水 1000mLpH 7.4~7.6三、器材酵母提取物,蛋白胨, NaCl,琼脂;1mol/L NaOH, 1mol/L HCl;试管,三角烧瓶,烧杯,量筒,玻棒,培养基分装器,天平,牛角匙,高压蒸汽灭菌锅,pH试纸(pH 5.5~9.0),棉花,牛皮纸,记号笔,麻绳,纱布等。
四、操作步骤1.称量按培养基配方比例依次准确地称取酵母提取物、蛋白胨、NaCl放入烧杯中。
蛋白胨很易吸潮,在称取时动作要迅速。
另外,称药品时严防药品混杂,一把牛角匙用于一种药品,或称取一种药品后,洗净、擦干,再称取另一药品,瓶盖也不要盖错。
2.溶化在上述烧杯中可先加入少于所需要的水量,用玻棒搅匀,然后,在石棉网上加热使其溶解。
待药品完全溶解后,补充水分到所需的总体积。
如果配制固体培养基,将称好的琼脂放入已溶化的药品中,再加热溶化,在琼脂溶化的过程中,需不断搅拌,以防琼脂糊底使烧杯破裂。
LB培养基怎样配制
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LB培养基怎样配制LB一般被解释为Luria-Bertani,然而根据其发明人贝尔塔尼(Giusepp eBertani)的说法,这个名字来源于英语lysogeny broth,即溶菌肉汤。
LB培养基是近年来用于培养基因工程受体菌(大肠杆菌)的常用培养基之一。
LB培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基,有时又称普通培养基,含有酵母提取物、胰化蛋白胨和NaCl。
酵母提取物:酵母经破壁后将其中蛋白质、核酸、维生素等抽提,再经生物酶解的富含小分子的氨基酸、肽、核苷酸、维生素等天然活性成分的淡黄色粉末,其中氨基酸含量30%以上,总蛋白50%以上,核苷酸10%以上,广泛用作生物培养基和食品调味品制造原料。
胰化蛋白胨:一种优质蛋白胨,是以新鲜牛肉和牛骨经胰酶消化,浓缩干燥而成的白色粉末,含有丰富的氮源、氨基酸等。
酵母提取物为微生物提供碳源、能源、磷酸盐、生长因子、维生素等;蛋白胨主要提供氮源;NaCl主要提供微生物生长环境(如渗透压),其次是提供无机盐.在配制固体培养基时还要加入一定量琼脂作凝固剂。
琼脂在常用浓度下96℃时溶化,一般实际应用时在沸水浴中或垫以石棉网直接煮沸溶化.琼脂在40℃时凝固,通常不被微生物分解利用。
固体培养基中琼脂的含量根据琼脂的质量和气温的不同而有所不同。
由于这种培养基多用于培养细菌,因此,要用稀酸或稀碱将其pH调至中性或微碱性,以利于细菌的生长繁殖。
LB培养基配方(每升)酵母提取物 5g胰化蛋白胨 10g氯化钠10gNaOH调pH至7。
0,121℃、20min高压灭菌。
LB固体培养基LB培养基 1L琼脂粉 15gNaOH调pH至7.0,121℃、20min高压灭菌。
有时需在培养基中添加抗生素,琼脂凝固点为40℃,所以添加抗生素最好在50~55℃。
LB培养基用途:用于一般细菌培养,特别用于分子生物学试验中大肠杆菌的保存和培养。
LB培养基使用原理:蛋白胨、酵母膏粉提供氮源、维生素和生长因子;氯化钠维持均衡的渗透压;葡萄糖提供碳源;琼脂是培养基的凝固剂。
LB培养基
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一、基本原理:LB培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基,有时又称为普通培养基。
它含有酵母提取物、蛋白胨和NaCl。
碳源和能源:酵母提取物,氮源:磷酸盐、蛋白胨,无机盐:NaCl。
在配制固体培养基时还要加入一定量琼脂作凝固剂。
琼脂在常用浓度下96℃时溶化,一般实际应用时在沸水浴中或下面垫以石棉网煮沸溶化,以免琼脂烧焦。
琼脂在40℃时凝固,通常不被微生物分解利用。
由于这种培养基多用于培养细菌,因此,要用稀酸或稀碱将其pH调至中性或微碱性,以利于细菌的生长繁殖。
LB培养基的配方如下:酵母提取物5g、蛋白胨10g、NaCl 5g、琼脂15~20g、水1000mL、pH 7.4~7.6二、实验用品试剂:酵母提取物,蛋白胨,NaCl,琼脂,1mol/L NaOH,1mol/L HCl;仪器:试管,三角烧瓶,烧杯,量筒,玻棒,牛角匙,pH试纸(pH 5.5~9.0),培养基分装器,天平,高压蒸汽灭菌锅,棉花,牛皮纸,记号笔,麻绳,纱布等。
三、实验步骤1.称量按培养基配方比例依次准确地称取酵母提取物、蛋白胨、NaCl放入烧杯中。
蛋白胨很易吸潮,在称取时动作要迅速。
另外,称药品时严防药品混杂,一把牛角匙用于一种药品,或称取一种药品后,洗净、擦干,再称取另一药品,瓶盖也不要盖错。
2.溶化在上述烧杯中可先加入少于所需要的水量,用玻棒搅匀,然后,在石棉网上加热使其溶解。
待药品完全溶解后,补充水分到所需的总体积。
如果配制固体培养基,将称好的琼脂放入已溶化的药品中,再加热溶化,在琼脂溶化的过程中,需不断搅拌,以防琼脂糊底使烧杯破裂。
最后补足所失的水分。
3.调pH在未调pH前,先用精密pH试纸测量培养基的原始pH值,如果pH偏酸,用滴管向培养基中逐滴加入1mol/L NaOH,边加边搅拌,并随时用pH试纸测其pH值,直至pH达7.6。
反之,则用1mol/L HCl进行调节。
注意pH值不要调过头,以避免回调,否则,将会影响培养基内各离子的浓度。
LB培养基

LB培养基LB培养基是一种培养基的名称,生化分子实验中一般用该培养基来预培养菌种,使菌种成倍扩增,达到使用要求。
培养的菌种一般是经过改造的无法在外界环境单独存活和扩增的工程菌。
通过培养工程菌,我们可以表达大量的外源蛋白,也可以拿到带有外源基因的质粒,工程菌的有效扩增是生化分子实验的基础。
成分表(1L溶液中):Tryptone(胰蛋白胨):10gYeast Extract(酵母提取物):5gNaCl(氯化钠):10g若配制固体培养基,则再加入15g Agar(琼脂),切记琼脂直接加入瓶子中,因为它很黏很难冲洗下来。
若配制低盐培养基,则全部减半。
液态培养基根据《分子克隆实验指南》(J.萨姆布鲁克 D.W.拉塞尔著)配制每升培养基,应该在950 ml去离子水中加入:胰化蛋白胨 10g 酵母提取物 5g NaCl 10g摇动容器直至溶质溶解.用5mol/LNaOH调pH至7.4(该pH适合目前使用最广的原核表达菌种 E.coli的生长)。
用去离子水定容至1L。
121℃高压灭菌20min。
高压后一定要在温度降下之前(50℃左右温而不烫)加好抗生素(氨苄青霉素 AMP 分装100mg/ml,使用浓度100μg/ml在1毫升LB培养液中加入1微升氨苄青霉素溶液)。
瓶盖用封口膜封好,4℃保存。
固态培养基LB固体培养基1L和液体一样,加15g琼脂粉。
高压后一定要在温度降下之前(50℃左右温而不烫)加好抗生素(氨苄青霉素 AMP 在1毫升LB培养液中加入1微升氨苄青霉素溶液),并且倒好培养皿(大约1/3高度)。
1.配制:100mlLB培养基加入1.5g琼脂粉2.抗生素的加入:121℃高压灭菌20min。
高压灭菌后,将融化的LB 固体培养基置于55℃的水浴中,待培养基温度降到55℃时(手可触摸)加入抗生素,以免温度过高导致抗生素失效,并充分摇匀。
3.倒板:一般10ml倒1个板子。
培养基倒入培养皿后,打开盖子,紫外照射10-15分钟。
LB培养基怎样配制
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LB培养基怎样配制之巴公井开创作LB一般被解释为LuriaBertani,然而根据其发明人贝尔塔尼(Giuseppe Bertani)的说法,这个名字来源于英语lysogeny broth,即溶菌肉汤。
LB培养基是近年来用于培养基因工程受体菌(大肠杆菌)的经常使用培养基之一。
LB培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基,有时又称普通培养基,含有酵母提取物、胰化蛋白胨和NaCl。
酵母提取物:酵母经破壁后将其中蛋白质、核酸、维生素等抽提,再经生物酶解的富含小分子的氨基酸、肽、核苷酸、维生素等天然活性成分的淡黄色粉末,其中氨基酸含量30%以上,总蛋白50%以上,核苷酸10%以上,广泛用作生物培养基和食品调味品制造原料。
胰化蛋白胨:一种优质蛋白胨,是以新鲜牛肉和牛骨经胰酶消化,浓缩干燥而成的白色粉末,含有丰富的氮源、氨基酸等。
酵母提取物为微生物提供碳源、能源、磷酸盐、生长因子、维生素等;蛋白胨主要提供氮源;NaCl主要提供微生物生长环境(如渗透压),其次是提供无机盐。
在配制固体培养基时还要加入一定量琼脂作凝固剂。
琼脂在经常使用浓度下96℃时溶化,一般实际应用时在沸水浴中或垫以石棉网直接煮沸溶化。
琼脂在40℃时凝固,通常不被微生物分解利用。
固体培养基中琼脂的含量根据琼脂的质量和气温的分歧而有所分歧。
由于这种培养基多用于培养细菌,因此,要用稀酸或稀碱将其pH调至中性或微碱性,以利于细菌的生长繁殖。
LB培养基配方(每升)酵母提取物 5g胰化蛋白胨 10g氯化钠 10gNaOH调pH至7.0,121℃、20min高压灭菌。
LB固体培养基LB培养基 1L琼脂粉 15gNaOH调pH至7.0,121℃、20min高压灭菌。
有时需在培养基中添加抗生素,琼脂凝固点为40℃,所以添加抗生素最好在50~55℃。
LB培养基用途:用于一般细菌培养,特别用于分子生物学试验中大肠杆菌的保管和培养。
LB培养基使用原理:蛋白胨、酵母膏粉提供氮源、维生素和生长因子;氯化钠维持均衡的渗透压;葡萄糖提供碳源;琼脂是培养基的凝固剂。
LB培养基,电泳缓冲液配制
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LB培养基的配制:
1.称取:胰蛋白胨(Tryptone)10 g/L
酵母提取物(Yeast extract) 5 g/L
氯化钠(NaCl)10 g/L
2.加三蒸水至950ml,用烧杯加热搅拌至澄清;
3.加三蒸水至1L;
4.加固体NaOH调节该培养基pH值,使其至7.0-7.4;
对于固体培养基:
加琼脂粉15g/L,加热搅拌至澄清
5.高压蒸汽灭菌25-30min.
20ml/个3-5mm 灭菌时锥形瓶不要超过二分之一
电泳缓冲液的配制:
配制1.2%琼脂糖电泳的50×TAE贮存液
配方:TAE贮存液40ml
三蒸水2L
溴化乙锭(EB)66.7μl (移液枪加) 总体积约为2L,终浓度333μg/μl(0.333/mgμl)
将上面试剂加至2.5L细口棕色瓶中,用力摇匀,避光保存。
Bio DL2000使用说明:
保存条件:短期:2-8℃
长期:-20℃
大小:2000 1000 750 500 250 100bp
制备1.2%的电泳用凝胶:
小胶:薄胶:20ml 0.24g
厚胶:30ml 0.36g
大胶:30ml 0.36g
电泳电压:
大电泳槽:150V 时间:30min-45min
小电泳槽:80V 时间:30min-40min。
LB培养基配方
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LB培养基LB一般被解释为Luria-Bertani培养基,其发明人为贝尔塔尼(Giuseppe Bertani),这个名字来源於英语的lysogeny broth,即溶菌肉汤。
液态LB培养基固态LB培养基液态培养基根据《分子克隆实验指南》(J.萨姆布鲁克 D.W.拉塞尔著)配制每升培养基,应该在950 ml去离子水中加入:胰化蛋白胨 10g酵母提取物 5gNaCl 10g摇动容器直至溶质溶解.用5mol/LNaOH调pH至7.0.用去离子水定容至1L.在15psi高压下蒸汽灭菌20min.LB培养基是一种培养基的名称,生化分子实验中一般用该培养基来预培养菌种,使菌种成倍扩增,达到使用要求.培养的菌种一般是经过改造的无法在外界环境单独存活和扩增的工程菌.通过培养工程菌,我们可以表达大量的外源蛋白,也可以拿到带有外源基因的质粒,工程菌的有效扩增是生化分子实验的基础.LB培养基的配方如下:胰蛋白胨(Tryptone) 10g/L酵母提取物(Yeast extract) 5g/L氯化钠(NaCl) 10g/L另外根据经验值用NaOH调节该培养基的pH,使其达到7.4(该pH适合目前使用最广的原核表达菌种E.coli的生长)固态培养基LB固体培养基1L和液体一样,加15g琼脂粉,一定要在温度降下之前加好抗生素,并且倒好板。
LB固体培养基倒板1.配制:100mlLB培养基加入1.5g琼脂粉2.抗生素的加入:高压灭菌后,将融化的LB固体培养基置与55℃的水浴中,待培养基温度降到55℃时(手可触摸)加入抗生素,以免温度过高导致抗生素失效,并充分摇匀。
3.倒板:一般10ml倒1个板子。
培养基倒入培养皿后,打开盖子,在紫外下照10-15分钟。
4.保存:用封口胶封边,并倒置放于4℃保存,一个月内使用。
lb固体培养基的配方
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lb固体培养基的配方
lb固体培养的配方:
1.配制:100mlLB培养基加入1.5g琼脂粉
2.抗生素的加入:高压灭菌后,将融化的lb固体培养基置与55℃的水浴中,待培养基温度降到55℃时(手可触摸)加入抗生素,以免温度过高导致抗生素失效,并充分摇匀。
3.倒板:一般10ml倒1个板子。
培养基倒入培养皿后,打开盖子,在紫外下照10-15分钟。
4.保存:用封口胶封边,并倒置放于4℃保存,一个月内使用。
lb固体培养基是一种培养基的名称,生化分子实验中一般用该培养基来预培养菌种,使菌种成倍扩增,达到使用要求。
肉膏蛋白胨培养基是一种广泛用于培养细菌的培养基。
而lb培养基则是一种近年来用于培养基因工程受体菌(大肠杆菌)的常用培养基。
两者都属于半合成培养基。
肉膏蛋白胨的培养基主要成分是牛肉膏、蛋白胨和NaCl。
而lb固体培养基的主要成分是胰蛋白胨、酵母提取物和氯化钠。
高氏合成一号培养基是一种用于培养放线菌的合成培养基。
培养基中的可溶性淀粉作为碳源和能源。
LB培养基
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LB固体平板培养基配制成分:1、碳源和能源:酵母提取物(Yeast extract)5g/L2、氮源:胰蛋白胨(Tryptone)10g/L3、无机盐:氯化钠(NaCl)10g/L4、凝固剂:琼脂15g/L(琼脂在常用浓度下96℃时熔化,实际应用时在沸水浴中熔化,以免琼脂烧焦。
琼脂在40℃时凝固)5、去离子水6、1mol/L(5mol/L)的NaOH或1mol/L的Hcl(调节培养基的pH至7.4)器材:高压蒸汽灭菌锅、水浴锅、试管、三角瓶、天平、烧杯、量筒、玻璃棒、平皿、药匙、pH试纸(pH 5.5~9.0)、棉花、旧报纸、记号笔、麻绳、纱布、酒精灯、打火机、石棉网、镊子等。
步骤:1、称量:按照配方比例依次称量酵母提取物、胰蛋白胨、NaCl放入烧杯中。
琼脂称好备用。
(蛋白胨容易吸潮,称取时动作要迅速。
另外,称量药品时严防药品混杂,一个药匙只能用一种药品,或者称取完一种药品后,洗净、擦干,再称取另一种药品,瓶盖放置要倒放,且不要盖错)2、溶化:向上一步烧杯中先加入少于所需的水量,将烧杯放在石棉网上加热使其溶解,并不断搅拌。
溶解后,将琼脂放入烧杯中,加热溶化,溶化过程中要不断搅拌,以防琼脂糊底使烧杯破裂。
琼脂完全溶化后,加入水至所需的体积定容。
然后用1mol/L的NaOH调pH至7.4--7.6(加一滴、搅匀、测pH)3、包扎:将配好的培养基倒入三角瓶中(培养基倒入量约为三角瓶体积的一半。
),瓶口塞上棉塞或者纱布,用旧报纸将瓶口包上,并用麻绳扎好。
用记号笔注明培养基名称、组别、日期4、灭菌:将高压锅打开,拿出内胆,向高压锅内加水,水要没过加热管。
将内胆放回,并将培养基放入锅中,拧紧锅盖,将排气阀打开。
接通电源,打开开关。
当锅内喷出大量气体5分钟左右,将排气阀关闭,观察压力表,当温度上升到121摄氏度左右(红色刻度)或者压力表的压力上升到0.1个MPa左右(黑色刻度)时,开始计时,计时时间为20分钟。
LB培养基怎样配制

LB培养基怎样配制之袁州冬雪创作LB一般被诠释为Luria-Bertani,然而根据其发明人贝尔塔尼(Giuseppe Bertani)的说法,这个名字来历于英语lysogeny broth,即溶菌肉汤.LB培养基是近些年来用于培养基因工程受体菌(大肠杆菌)的常常使用培养基之一.LB培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基,有时又称普通培养基,含有酵母提取物、胰化蛋白胨和NaCl.酵母提取物:酵母经破壁后将其中蛋白质、核酸、维生素等抽提,再经生物酶解的富含小分子的氨基酸、肽、核苷酸、维生素等天然活性成分的淡黄色粉末,其中氨基酸含量30%以上,总蛋白50%以上,核苷酸10%以上,广泛用作生物培养基和食品调味品制造原料.胰化蛋白胨:一种优质蛋白胨,是以新鲜牛肉和牛骨经胰酶消化,稀释干燥而成的白色粉末,含有丰富的氮源、氨基酸等.酵母提取物为微生物提供碳源、动力、磷酸盐、生长因子、维生素等;蛋白胨主要提供氮源;NaCl主要提供微生物生长环境(如渗透压),其次是提供无机盐.在配制固体培养基时还要加入一定量琼脂作凝结剂.琼脂在常常使用浓度下96℃时溶化,一般实际应用时在沸水浴中或垫以石棉网直接煮沸溶化.琼脂在40℃时凝结,通常不被微生物分解操纵.固体培养基中琼脂的含量根据琼脂的质量和气温的分歧而有所分歧.由于这种培养基多用于培养细菌,因此,要用稀酸或稀碱将其pH调至中性或微碱性,以利于细菌的生长繁殖.LB培养基配方(每升)酵母提取物 5g胰化蛋白胨 10g氯化钠 10gNaOH调pH至7.0,121℃、20min高压灭菌.LB固体培养基LB培养基 1L琼脂粉 15gNaOH调pH至7.0,121℃、20min高压灭菌.有时需在培养基中添加抗生素,琼脂凝结点为40℃,所以添加抗生素最好在50~55℃.LB培养基用途:用于一般细菌培养,特别用于分子生物学试验中大肠杆菌的保管和培养.LB培养基使用原理:蛋白胨、酵母膏粉提供氮源、维生素和生长因子;氯化钠维持平衡的渗透压;葡萄糖提供碳源;琼脂是培养基的凝结剂.LB培养基配制方法配制每升培养基,应该在950 ml去液态lb培养基离子水中加入:胰化蛋白胨10g 酵母提取物5g NaCl 10g 摇动容器直至溶质溶解.用5mol/LNaOH调pH至7.0.用去离子水定容至1L.在15psi高压下蒸汽灭菌20min.2.抗生素的加入:高压灭菌后,将融化的LB固体培养基置与55℃的水浴中,待培养基温度降到55℃时(手可触摸)加入抗生素,以免温度过高导致抗生素失效,并充分摇匀.3.倒板:一般10ml倒1个板子.培养基倒入培养皿后,打开盖子,在紫外下照10-15分钟.4.保管:用封口胶封边,并倒置放于4℃保管,一个月内使用. 配400ml的话成分按比例减少就好了,pH还是要按规定的.。
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LB培养基怎样配制
LB一般被解释为Luria-Bertani,然而根据其发明人贝尔塔尼(Giuseppe Bertani)的说法,这个名字来源于英语lysogeny broth,即溶菌肉汤。
LB培养基是近年来用于培养基因工程受体菌(大肠杆菌)的常用培养基之一。
LB培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基,有时又称普通培养基,含有酵母提取物、胰化蛋白胨和NaCl。
酵母提取物:酵母经破壁后将其中蛋白质、核酸、维生素等抽提,再经生物酶解的富含小分子的氨基酸、肽、核苷酸、维生素等天然活性成分的淡黄色粉末,其中氨基酸含量30%以上,总蛋白50%以上,核苷酸10%以上,广泛用作生物培养基和食品调味品制造原料。
胰化蛋白胨:一种优质蛋白胨,是以新鲜牛肉和牛骨经胰酶消化,浓缩干燥而成的白色粉末,含有丰富的氮源、氨基酸等。
酵母提取物为微生物提供碳源、能源、磷酸盐、生长因子、维生素等;蛋白胨主要提供氮源;NaCl主要提供微生物生长环境(如渗透压),其次是提供无机盐。
在配制固体培养基时还要加入一定量琼脂作凝固剂。
琼脂在常用浓度下96℃时溶化,一般实际应用时在沸水浴中或垫以石棉网直接煮沸溶化。
琼脂在40℃时凝固,通常不被微生物分解利用。
固体培养基中琼脂的含量根据琼脂的质量和气温的不同而有所不同。
由于这种培养基多用于培养细菌,因此,要用稀酸或稀碱将其pH调至中性或微碱性,以利于细菌的生长繁殖。
LB培养基配方(每升)
酵母提取物 5g
胰化蛋白胨 10g
氯化钠 10g
NaOH调pH至7.0,121℃、20min高压灭菌。
LB固体培养基
LB培养基 1L
琼脂粉 15g
NaOH调pH至7.0,121℃、20min高压灭菌。
有时需在培养基中添加抗生素,琼脂凝固点为40℃,所以添加抗生素最好在50~55℃。
LB培养基用途:
用于一般细菌培养,特别用于分子生物学试验中大肠杆菌的保存和培养。
LB培养基使用原理:
蛋白胨、酵母膏粉提供氮源、维生素和生长因子;氯化钠维持均衡的渗透压;葡萄糖提供碳源;琼脂是培养基的凝固剂。
LB培养基配制方法
配制每升培养基,应该在950 ml去液态lb培养基离子水中加入:胰化蛋白胨10g 酵母提取物5g NaCl 10g 摇动容器直至溶质溶解。
用5mol/LNaOH调pH 至7.0。
用去离子水定容至1L。
在15psi高压下蒸汽灭菌20min。
1.LB固体培养基1L和液体一样,加15g琼脂粉,一定要在温度降下之前加好抗固态LB培养基生素,并且倒好板。
LB固体培养基倒板1。
配制:100mlLB 培养基加入1.5g琼脂粉
2.抗生素的加入:高压灭菌后,将融化的LB固体培养基置与55℃的水浴中,待培养基温度降到55℃时(手可触摸)加入抗生素,以免温度过高导致抗生素失效,并充分摇匀。
3.倒板:一般10ml倒1个板子。
培养基倒入培养皿后,打开盖子,在紫外下照10-15分钟。
4.保存:用封口胶封边,并倒置放于4℃保存,一个月内使用。
配400ml 的话成分按比例减少就行了,pH还是要按规定的。