lb培养基配方与tb培养基配方
培养基的配制
其他的还有:
YGG培养基:酵母膏0.3 %,胰蛋白胨0.5 %,葡萄糖0.5 %,氯化钠0.5 %,pH自然;
YM培养基:酵母膏0.3 %,胰蛋白胨0.5 %,麦芽糖0.5 %,pH自然或9.0;
Yg培养基:酵母膏0.3 %,胰蛋白胨0.5%,半乳糖0.5%,pH9.0;
YG培养基:酵母膏0.3%,胰
固体培养基:液体培养基加2 %琼脂粉
SB培养基:每升培养基含细菌培养用胰化蛋白陈309,酵母提取物209,MoPs19,pH7.0。
SOC培养基:每升培养基含细菌培养用胰化蛋白脉209,酵母提取物59,NaCI0.59,250mmol/LKCI溶液10mlpH7.0。临用前加人Zmol/LMgC12溶液5ml和1mol/L葡萄糖溶液20ml。
TB培养基
将下列组分溶解在0.9L水中:
蛋白胨 12g
酵母提取物 24g
甘油 4ml
各组分溶解后高压灭菌。冷却到60℃,再加100ml灭菌的170mmol/L KH2PO4/0.72 mol/L K2HPO4的溶液(2.31g的KH2PO4和12.54gK2HPO4溶在足量的水中,使终体积为100ml。高压灭菌或用0.22um的滤膜过滤除菌)。
SOB培养基
将下列组分溶解在0.9L水中:
蛋白胨 20g
酵母提取物 5g
氯化钠 0.5g
1 mol/L 氯化钾 2.5ml
用水补足体积到1L。分成100ml的小份,高压灭菌。培养基冷却到室温后,再在每100ml的小份中加1ml灭过菌的1mol/L氯化镁。
SOC培养基
成分、方法同SOB培养基的配制,只是在培养基冷却到室温后,除了在每100ml的小份中加1ml灭过菌的1mol/L氯化镁外,再加2ml灭菌的1mol/L葡萄糖(18g葡萄糖溶于足够水中,再用水补足到100ml,用0.22um的滤膜过滤除菌)。
常用培养基配方汇总
常用培养基配方汇总培养基是微生物学和生物技术中常用的一种实验工具,用于培养和繁殖微生物。
不同的微生物需要不同的培养基来满足其生长和繁殖的需求。
以下是一些常用的培养基配方汇总。
1. LB培养基(Luria-Bertani培养基)LB培养基是最常用的培养基之一,适用于大多数细菌的培养。
其成分包括植物蛋白胨、酵母提取物、氯化钠和琼脂。
它提供了细菌所需的氨基酸、碳源和能量源。
配方:-植物蛋白胨:10g-酵母提取物:5g-氯化钠:10g-琼脂:15g-加水至1L,调节pH至7.02. 紫砂培养基(Sabouraud培养基)紫砂培养基是一种适用于真菌培养的培养基。
其成分包括葡萄糖、酵母提取物和琼脂。
它提供了真菌所需的碳源和能量源。
配方:-葡萄糖:40g-酵母提取物:10g-加水至1L,调节pH至5.63. TSB培养基(Tryptic Soy Broth培养基)TSB培养基是一种适用于多种微生物的通用培养基。
其成分包括植物蛋白胨、胨肽、大豆胨和琼脂。
它提供了微生物所需的氨基酸、碳源和能量源。
配方:-植物蛋白胨:17g-胨肽:3g-大豆胨:5g-琼脂:15g-加水至1L,调节pH至7.34. MRS培养基(De Man, Rogosa and Sharpe培养基)MRS培养基是一种适用于乳酸菌培养的培养基。
其成分包括蔗糖、氯化镁、氯化钠、蛋白胨、酵母提取物和琼脂。
它提供了乳酸菌所需的碳源、氮源和能量源。
配方:-蔗糖:50g-氯化镁:0.2g-氯化钠:5g-酵母提取物:10g-琼脂:15g-加水至1L,调节pH至6.25.R2A培养基R2A培养基是一种适用于水样中微生物培养的培养基。
其成分包括胨肽、葡萄糖、酵母提取物、琼脂和微量元素。
它提供了水样中微生物所需的氮源、碳源和能量源。
配方:-胨肽:0.5g-葡萄糖:0.5g-酵母提取物:0.5g-琼脂:15g-微量元素:1mL-加水至1L,调节pH至7.2以上是一些常用的培养基配方汇总,适用于不同类型的微生物培养。
LB培养基怎样配制
LB培养基怎样配制LB一般被解释为Luria-Bertani,然而根据其发明人贝尔塔尼(Giuseppe Bertani)的说法,这个名字来源于英语lysogeny broth,即溶菌肉汤。
LB培养基是近年来用于培养基因工程受体菌(大肠杆菌)的常用培养基之一。
LB培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基,有时又称普通培养基,含有酵母提取物、胰化蛋白胨和NaCl。
酵母提取物:酵母经破壁后将其中蛋白质、核酸、维生素等抽提,再经生物酶解的富含小分子的氨基酸、肽、核苷酸、维生素等天然活性成分的淡黄色粉末,其中氨基酸含量30%以上,总蛋白50%以上,核苷酸10%以上,广泛用作生物培养基和食品调味品制造原料。
胰化蛋白胨:一种优质蛋白胨,是以新鲜牛肉和牛骨经胰酶消化,浓缩干燥而成的白色粉末,含有丰富的氮源、氨基酸等。
酵母提取物为微生物提供碳源、能源、磷酸盐、生长因子、维生素等;蛋白胨主要提供氮源;NaCl主要提供微生物生长环境(如渗透压),其次是提供无机盐。
在配制固体培养基时还要加入一定量琼脂作凝固剂。
琼脂在常用浓度下96℃时溶化,一般实际应用时在沸水浴中或垫以石棉网直接煮沸溶化。
琼脂在40℃时凝固,通常不被微生物分解利用。
固体培养基中琼脂的含量根据琼脂的质量和气温的不同而有所不同。
由于这种培养基多用于培养细菌,因此,要用稀酸或稀碱将其pH调至中性或微碱性,以利于细菌的生长繁殖。
LB培养基配方(每升)酵母提取物 5g胰化蛋白胨 10g氯化钠 10gNaOH调pH至7.0,121℃、20min高压灭菌。
LB固体培养基LB培养基 1L琼脂粉 15gNaOH调pH至7.0,121℃、20min高压灭菌。
有时需在培养基中添加抗生素,琼脂凝固点为40℃,所以添加抗生素最好在50~55℃。
LB培养基用途:用于一般细菌培养,特别用于分子生物学试验中大肠杆菌的保存和培养。
LB培养基使用原理:蛋白胨、酵母膏粉提供氮源、维生素和生长因子;氯化钠维持均衡的渗透压;葡萄糖提供碳源;琼脂是培养基的凝固剂。
细菌培养常用培养基和抗生素的配制方法
细菌培养常用培养基和抗生素的配制方法、常用培养基1、LB 培养基将下列组分溶解在0.9L 水中:蛋白胨10g酵母提取物5g氯化钠10g如果需要用INNaOH (〜1ml)调整pH至7.0,再补足水至1L。
注:琼脂平板需添加琼脂粉12g/L,上层琼脂平板添加琼脂粉7g/L。
2 、SOB 培养基将下列组分溶解在0.9L水中:蛋白胨20g酵母提取物5g氯化钠0.5g1mol/L 氯化钾2.5ml用水补足体积到1L。
分成100ml的小份,高压灭菌。
培养基冷却到室温后,再在每100ml 的小份中加1ml 灭过菌的1mol/L 氯化镁。
3、SOC培养基成分、方法同SOB培养基的配制,只是在培养基冷却到室温后,除了在每100ml的小份中加1ml 灭过菌的1mol/L 氯化镁外,再加2ml 灭菌的1mol/L 葡萄糖(18g 葡萄糖溶于足够水中,再用水补足到100ml,用0.22um的滤膜过滤除菌)。
4 、TB 培养基将下列组分溶解在0.9L水中:蛋白胨12g酵母提取物24g甘油4ml各组分溶解后高压灭菌。
冷却到60 C , 再加100ml灭菌的170mmol/LKH2PO4/0.72mol/LK2HPO4 的溶液(2.31g 的KH2PO4和12.54gK2HPO4溶在足量的水中,使终体积为100ml。
高压灭菌或用0.22um的滤膜过滤除菌)。
5、2X Y培养基将下列组分溶解在0.9L水中:蛋白胨16g酵母提取物10g氯化钠4ml如果需要用INNaOH (〜1ml )调整pH 至7.0,再补足水至1L 。
注:琼脂平板需添加琼脂粉 12g/L,上层琼脂平板添加琼脂粉 7g/L 。
6、YPD 培 养基将下列组分溶解在 0.9L 水中: 蛋白胨 20g 酵母提取物 10g 葡萄糖 20g用水补足体积为 1L 后,高压灭菌。
建议在高压灭菌之前,对色氨酸营养缺陷型每升培养基 添加1.6g 色氨酸,因为 YPD 培养基是色氨酸限制型培养基。
常用培养基配制
常用培养基参考文献1.Atlas, R.M., Handbook of Microbiological Media, second edition, Ed. Parks,L.C., CRC Press, N.Y., 1997.2.Sambrook, J., et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual, second edition,Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY, A1.2-A2.12, 2001.常用储存液参考文献1.Atlas, R.M., Handbook of Microbiological Media, second edition, Ed. Parks,L.C., CRC Press, N.Y., 1997.2.Sambrook, J., et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual, second edition,Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY, A1.2-A2.12, 2001.常用缓冲液10X 磷酸盐缓冲液(储存液) (PBS) /升终1 X浓度NaCl 80.0 g 137 mMKCl 2.0 g 2.7 mMNa2HPO414.4 g 100 mMKH2PO42.7 g 2 mMH2O 至800 mlHCl 至pH 7.4H2O 至1升20X SSC /升终1 X浓度NaCl 175.3 g 150 mMNa3citrate x H2O 88.2 g 15 mMH2O 至800 ml 1M HCl调节pH值至7.0Tricine 179.2 g 0.1 MSDS 10.0 g 0.1% (w/v) O 至1升H2稀释溶液的pH至8.350X TAE (Tris-醋酸-EDTA)电泳缓冲液/升终1 X浓度Tri 碱242.0 g 40 mM冰醋酸57.1 ml 20 mM0.5 M EDTA (pH 8.0) 100 ml 2% mMO 至1升H2稀释溶液的pH大约为~8.510X TBE (Tris-硼酸-EDTA)电泳缓冲液/升终1 X浓度Tri 碱108.0 g 90 mM硼酸55.0 g 90 mM0.5 M EDTA (pH 8.0) 40 ml 2% mMHO 至1升210X TPE (Tris-磷酸-EDTA)电泳缓冲液/升终1 X浓度Tri 碱108.0 g 90 mM磷酸(85%) 15.5 ml 23 mM0.5 M EDTA (pH 8.0) 40 ml 2% mMO 至1升H2TE (Tris-EDTA) 缓冲液pH 7.4, 7.6或8.0 /升终1 X浓度参考文献1.Atlas, R.M., Handbook of Microbiological Media, second edition, Ed. Parks,L.C., CRC Press, N.Y., 1997.2.Sambrook, J., et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual, second edition,Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY, A1.2-A2.12, 2001.常用缩写下面红色字体为赠送的个人总结模板,不需要的朋友下载后可以编辑删除xx年电气工程师个人年终总结模板根据防止人身事故和电气误操作事故专项整治工作要求,我班针对现阶段安全生产工作的特点和重点,为进一步加强落实安全工作,特制定了防止人身事故和防电气误操作事故的(两防)实施细则。
常用缓冲液及培养基配方
常用缓冲液及培养基配方LB液体培养基:加950ml蒸馏水溶解,用5N氢氧化钠调pH至7.0,定容至1000ml,高压灭菌后保存。
LB固体培养基:每升LB液体培养基中加入12g琼脂粉,高压灭菌后保存。
SOB液体培养基Bacto-蛋白胨 20g酵母抽提物 5gNaCl 0.5g加950 ml水溶解,加入250mmol/L KCl 溶液10ml,用5 N NaOH调pH至7.0,定容至1000 ml,高压灭菌后保存。
使用前加入5ml经灭菌的2mol/LMgCl2。
SOC液体培养基SOB中加入经灭菌的葡萄糖溶液至终浓度为20mmol/L。
麦康凯固体培养基每1000ml水中加52g培养基粉,煮沸溶解后分装,高压灭菌。
NA固体培养基加950ml蒸馏水溶解,调pH至7.0,定容至1000ml,高压灭菌后保存。
TB培养基:将下列组分溶解在0.9L水中:各组分溶解后高压灭菌。
冷却到60℃,再加100ml灭菌的170mmol/L KH2PO4/ 0.72 mol/L K2HPO4的溶液。
高压灭菌或用0.22um的滤膜过滤除菌。
溶液Ⅰ葡萄糖 2.25 g 50mmol/L1mol/L Tris·Cl(pH8.0) 6.25ml 20mmol/L0.5mol/L EDTA(pH8.0) 5ml 10mmol/L调pH至8.0后,用水定容至250 ml,高压灭菌后保存。
溶液Ⅱ10 mol/L NaOH 2ml10% SDS 10ml用水定容至100 ml,现配现用。
溶液Ⅲ5 mol/L 醋酸钾 60ml冰醋酸 11.5ml水 28.5ml高压灭菌后保存。
高盐TE缓冲液10mmol/L Tris.Cl, pH 8.0*0.1mmol/L EDTA, pH 8.0*1mol/L NaCl于室温保存(可在几年内保持稳定)CTAB抽提液2%(w/v)CTAB(古立烷基三乙基溴化铵)100mmol/L Tris.Cl,pH 8.0 *1.4mol/L NaCl于室温保存(可在几年内保持稳定)CTAB/NaCl 溶液(10% CTAB/0.7mol/L NaCl)在80ml H2O中溶解4.1g NaCl,缓慢加入10一CTAB(十六烷基三乙基溴化铵),同时加热并搅拌。
固体lb培养基的配方
固体lb培养基的配方固体LB(Luria-Bertani)培养基是一种常用的细菌培养基,用于培养大肠杆菌(Escherichia coli)以及其他革兰氏阴性菌。
LB培养基含有许多必需营养物质,如碳源、氮源、矿物质等,可以满足细菌的生长需求。
以下是一种常用的固体LB培养基的配方:1.碳源:- 葡萄糖(Glucose):1%2.氮源:- 蛋白胨(Peptone):1%蛋白胨是LB培养基的主要氮源,提供细菌生长所需的氨基酸和肽类物质。
3.矿物质:- 酵母浸膏(Yeast extract):0.5%酵母浸膏富含多种维生素和矿物质,对细菌生长有促进作用。
4.pH调节剂:-氢氧化钠(NaOH):将溶液调至pH7.0±0.2氢氧化钠用于调节LB培养基的酸碱度,使其适合细菌的生长。
5.凝固剂:- 琼脂(Agar):1.5%琼脂用于增稠培养基,使其成为固体培养基,方便细菌营养体的生长。
制备过程:1.首先,将适量的葡萄糖、蛋白胨和酵母浸膏加入适量的去离子水中,充分溶解。
2.加入适量的琼脂,搅拌均匀。
3.将溶液倒入试管或培养皿中。
4.用自动调节pH的仪器或适量的氢氧化钠调节溶液的pH值为7.0±0.25.灭菌:将试管或培养皿用高压蒸汽灭菌锅或培养皿灭菌器进行高温高压灭菌,时间一般为15-20分钟。
6.灭菌后,可将LB固体培养基储存在冰箱中,温度一般设置在4℃,有效期为2周。
在使用固体LB培养基进行培养时,首先需要取少量的固体LB培养基,加入适量的去离子水中,使其变成液体LB培养基。
然后,在无菌条件下,将液体LB培养基倒入培养皿或试管中。
等到液体LB培养基凝固成固体后,将需要培养的细菌接种于LB固体培养基表面,培养条件一般为37℃,时间根据细菌的生长速度而定。
使用固体LB培养基的主要优点之一是可以用于检测细菌的菌落形态,因为固体培养基上细菌形成的菌落会有可见的外在特征。
此外,固体LB培养基还可以用于制备菌种库或保存细菌菌株。
细菌培养系统常用液体配制标准SOP操作规程样本
细菌培养系统常用液体配制标准SOP操作规程样本1、LB培养基:每1000mL加分析纯NaCl 10g ,蛋白胨10g,酵母粉5g,用ddH2O 配制,再用10M NaOH调pH至7.4(1000mL一般加450ul),高压蒸汽灭菌15min冷却后使用。
2、固体培养基:LB培养基中加入琼脂至1.5%,高压蒸汽灭菌15min后使用。
3、10%(g/V) 氨苄青霉素钠(Ap):注射用氨苄青霉素钠(粉末)50g溶于500ml无菌去离子水中,溶解后分装入4ml灭菌的EP管,全程超净工作台内操作,避免染菌,分装后-20度保存,培养细菌时做1000×使用。
注:如果购买的氨苄青霉素粉末不是无菌包装的,溶解后需用0.22滤膜过滤除菌后再分装。
4、2.5%(g/V)硫酸卡那霉素(Kan)注射用硫酸卡那霉素(液体)通常是2ml/支,内含0.5g卡那霉素。
取25支药剂(50ml),加入450ml无菌去离子水中,分装入4ml灭菌的EP管,全程超净工作台内操作,避免染菌,分装后-20度保存,培养细菌时做1000×使用。
注:如果购买的卡那霉素是粉末状的非无菌包装,溶解后需用0.22滤膜过滤除菌后再分装。
5、细菌培养:配制相应抗性培养基,每试管倒入3~4ml培养基(卡那霉素抗性培养采用标记试管),无菌牙签挑取单克隆至试管中,于37℃,220rpm 培养。
剩余培养基做好抗性和日期标记,置于4℃保存。
6、化学感受态制备:1)原理::细菌处于容易吸收外源DNA的状态叫感受态,这时的菌细胞称为感受态细胞(Competent cell)。
将细菌置于0℃,低渗CaCl2 溶液中时,菌细胞壁和膜的通透性增强,菌体膨胀成球型。
外源DNA与Ca2+形成抗DNase的羟基-钙磷酸复合物黏附于细胞表面,在经42℃短暂的热冲击处理(一般热休克90s)后能促进细胞吸收外源DNA 复合物。
2)仪器、材料与试剂:①超净工作台、低温离心机、摇床、-80℃冰箱,装液氮的泡沫盒及液氮、50ml的离心管2个,50ml的注射器及0.22um小过滤器各1个。
培养基配方
培养基配方一、LB培养基:Yeast extract 5 g/LTryptone 10g/LNacl 10g/LPH为7.0 若配制固体培养基加入1.5%的琼脂。
二、YEB培养基:Yeast extract1 g/LPeptone(或Tryptone) 5 g/LBeef extract 5 g/LSucrose 5 g/LMgSO4 2 mmol/LPH为7.0 若配制固体培养基加入1.5%的琼脂。
三、N6D2培养基(2,4D浓度2mg/L):① N6大量母液1:20×大量元素(1L)50ml KNO356.6g(NH4)2SO49.26gKH2PO48g②N6大量母液2:40×大量元素(500ml) 25ml2·2H2O 3.32g③N6大量母液3:40×大量元素(500ml) 25ml MgSO4?7H2O 3.7g④B5微量元素I:100×微量元素(1L) 10ml溶液A:MnSO4?H2O 781mgZnSO4?7H2O 200mg溶于400ml无菌水溶液B:H 3BO3300mgKI 75mg溶于400ml无菌水然后缓慢将溶液A和溶液B混合,定容至1L⑤B5微量元素II:1000×微量元素(500ml) 1ml Na2MoO42O 125mgCuSO4·5H2O 12.5mgCoCl2·6H2O 12.5mg⑥B5维生素I:100×维生素(500ml) 10ml盐酸硫胺素 500mg盐酸吡哆醇 50mg烟酸 50mg⑦B5维生素II:100×维生素(500ml)10ml甘氨酸 100mg⑧200×铁盐(500ml) 5mlNa2-EDTA 3730mgFeSO4·7H2O 2780mg⑨ 2,4 D:100×2,4 D10ml200mg 2,4 D,先溶于1ml 无水乙醇中,再定容到1L。
几种培养基的配方
几种培养基的配方培养基是用于细菌、真菌、细胞等生物体的培养和繁殖的人工营养物质。
不同生物体对于培养基的要求各不相同,因此配方也存在着各种不同的类型。
下面将介绍几种常见的培养基配方。
1. Luria-Bertani(LB)培养基配方:LB培养基是一种广泛应用于细菌培养的标准培养基,对于大多数非选择性的细菌和其他微生物都具有很好的生长支持作用。
其配方主要包括牛肉膏(或酵母提取物),蛋白胨,食盐和大肠杆菌细胞(如:DH5α),其具体比例可以根据实验要求进行调整。
2.苏氨酸–葡萄糖培养基配方:3. Sabouraud培养基配方:Sabouraud培养基是一种用于培养真菌的常规培养基。
其配方主要包括葡萄糖,蛋白胨和琼脂。
葡萄糖提供真菌所需的碳源和能量,蛋白胨提供维持真菌生长所需的氮源和其他营养物质,琼脂用于凝胶化培养基。
4. MEM(Minimum Essential Medium)培养基配方:MEM是一种用于培养哺乳动物细胞的基础培养基。
其配方主要包括氨基酸、维生素、微量元素和葡萄糖等。
相对于其他培养基,MEM还可添加胎牛血清或其他生长因子以提供细胞生长所需的营养物质和因子。
5. DMEM(Dulbecco's Modified Eagle Medium)培养基配方:DMEM是一种通用的哺乳动物细胞培养基,对于多种细胞株的生长具有良好的支持作用。
其配方基本与MEM类似,但DMEM常含有高葡萄糖浓度,可以提供更多的能量和碳源给细胞。
以上仅是几种常见的培养基配方,实际上根据不同的细胞株或微生物的特性和需求,还有更多种类和变种的培养基配方。
研究者可以根据具体实验目的和需求灵活调整培养基的配方,以满足所需的生长条件。
TB培养基与LB培养基培养大肠杆菌后提取质粒对比
TB培养基与LB培养基培养大肠杆菌后提取质粒对比摘要: LB培养基中的酵母粉可以为微生物提供丰富的维生素、微量元素和生长因子。
nacl的作用是提供微生物生长的渗透压和提供无机盐离子。
TB培养基是一种通用培养基,用于各种微生物的培养,其中甘油主要是为大肠杆菌的生长提供碳源。
两种培养基各有优缺。
本实验以碱裂解法为例,探究TB培养基与LB 培养基的培养大肠杆菌提取质粒的区别。
在试验过程中两种培养基同步对比实验条件下,TB培养基提取效果没有LB培养基的效果理想。
关键词:大肠杆菌;碱裂解法;TB培养基;LB培养基;质粒TB medium LB medium e. coli extraction train after plasmidcontrastAbstract:LB medium yeast powder for microbes can provide rich vitamin, trace elements and growth factors. Nacl role is to provide microbial growth of osmotic pressure and provide inorganic salt ions. TB culture medium is a kind of common culture medium, used for the training of all kinds of microbes, which is mainly for e. coli glycerin provide carbon source of growth. Two kinds of culture media and each has advantages and disadvantages. This experiment with alkali cracking method for example, explore TB medium medium of e. coli LB training extraction plasmid difference. In the course of the experiments, two kinds of culture media synchronization contrast experiment condition, the TB medium effect no LB medium of extraction results.Keywords:escherichia coli alkali cracking method TB medium LB medium plasmid碱裂解法是一种应用最为广泛的制备质粒DNA的方法,碱变性抽提质粒DNA是基于染色体DNA与质粒DNA的变性与复性的差异而达到分离目的。
常用25种培养基详细配方
常用25种培养基详细配方以下是常用的25种培养基的详细配方:1. LB培养基(Luria-Bertani medium)-天然培养基:10g蛋白胨,5g酵母粉,10gNaCl,添加适量蒸馏水,pH值调至7.0。
- 固体培养基:添加15g agar。
2. TSA培养基(Tryptic Soy Agar)-17g蛋白胨,3g酵母提取物,5gNaCl,添加适量蒸馏水,pH值调至7.3-7.5- 固体培养基:添加15g agar。
3. NB培养基(Nutrient Broth)-8g蛋白胨,2g胰蛋白胨,5gNaCl,添加适量蒸馏水,pH值调至7.4 - 固体培养基:不添加agar。
4. R2A培养基(Reasoner's 2A medium)- 0.5g peptone,0.5g casein hydrolysate,0.5g yeast extract,0.5g glucose,0.5g soluble starch,0.3g dipotassium phosphate,0.05g magnesium sulfate,0.3g sodium pyruvate,10μg m anganese sulfate,添加适量蒸馏水,pH值调至7.2-7.4- 固体培养基:添加15g agar。
5. BHIS培养基(Brain Heart Infusion with 20% Sucrose)- 37.5g BHIS培养基,10g sucrose,添加适量蒸馏水,pH值调至7.5- 固体培养基:添加15g agar。
6. PDA培养基(Potato Dextrose Agar)-200g马铃薯,20g葡萄糖,添加适量蒸馏水,pH值调至5.6- 固体培养基:添加20g agar。
7. MRS培养基(de Man Rogosa Sharpe medium)- 10g peptone,10g beef extract,4g yeast extract,20g glucose,5g sodium acetate,2g dipotassium phosphate,0.02g magnesium sulfate,添加适量蒸馏水,pH值调至6.2-6.6- 固体培养基:添加20g agar。
培养基配方1000
培养基配方LB:蛋白胨10g,NaCl5.0g,酵母膏10g, 琼脂20g,蒸馏水1000ml,pH7.2。
NA:蛋白胨5.0g,牛肉浸膏3.0g,葡萄糖2.5g,酵母粉1.0g,琼脂粉20g,蒸馏水1000ml pH7.0~7.2。
营养琼脂:牛肉膏 1g,酵母膏 2g,蛋白胨 5g,NaCL 5g,琼脂20g,加水1000ml,PH7。
TB:胰蛋白胨12g ,酵母膏24g 、甘油 4mL、蒸馏水1000ml,pH7.2~7.4。
琼脂20g。
0.17 MKH2PO4/0.72 MK2HPO4100mL(2.31gKH2PO4和2.54gK2HPO4定容至100mL)。
2×YT:蛋白胨 16g,酵母膏10g,NaCl5g、蒸馏水1000ml,pH7.0。
琼脂20g。
(重组大肠杆菌菌株的培养)YPD:蛋白胨 20g,酵母提取物 10g,葡萄糖 20g,琼脂20g,pH7.2±0.2。
(用于酵母菌)TSA:胰蛋白胨15g,大豆蛋白胨5g,NaCl 5g,琼脂20g ,蒸馏水1000ml,pH7.2~7.4。
YG培养基:酵母膏3,胰蛋白胨5,葡萄糖5,琼脂20g,蒸馏水1000ml, pH9。
R2A:酵母膏0.5g 示蛋白胨0.5g,酪蛋白胨0.5g,葡萄糖0.5g,淀粉0.5g,磷酸氢二钾0.3g,无水硫酸镁0.024g,丙酮酸钠0.3g,琼脂20g,纯化1000ml,PH值为7.2±0.2。
金氏B(KB):蛋白胨 20g,磷酸氢二钾 1.5g,硫酸镁 1.5g,琼脂 10g,无菌水1000ml。
pH7.2~7.4。
MRS:蛋白胨10g,牛肉膏10g,酵母粉5g,柠檬酸二铵2g,磷酸氢二钾2g,乙酸钠5g,MgSO4 .7H2O 0.58g,MnSO4 4H2O 0.25g,葡萄糖20g,土温80 1.0ml,蒸馏水1000ml,PH 6.2-6.4,琼脂20g。
(用于乳酸菌培养)PTYG:胰蛋白胨T5g,大豆蛋白胨5g,酵母粉10g,葡萄糖10g,吐温80 1mL,琼脂20g,L-半胱氨酸盐酸盐0.05g,盐溶液4mL(无水氯化钙0.2g,K2HPO4 1.0g,KH2PO4 1.0g,MgSO4 。
LB培养基怎样配制
LB培养基怎样配制之迟辟智美创作LB一般被解释为LuriaBertani,然而根据其发明人贝尔塔尼(Giuseppe Bertani)的说法,这个名字来源于英语lysogeny broth,即溶菌肉汤.LB培养基是近年来用于培养基因工程受体菌(年夜肠杆菌)的经常使用培养基之一.LB培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基,有时又称普通培养基,含有酵母提取物、胰化卵白胨和NaCl.酵母提取物:酵母经破壁后将其中卵白质、核酸、维生素等抽提,再经生物酶解的富含小分子的氨基酸、肽、核苷酸、维生素等天然活性成份的淡黄色粉末,其中氨基酸含量30%以上,总卵白50%以上,核苷酸10%以上,广泛用作生物培养基和食品调味品制造原料.胰化卵白胨:一种优质卵白胨,是以新鲜牛肉和牛骨经胰酶消化,浓缩干燥而成的白色粉末,含有丰富的氮源、氨基酸等.酵母提取物为微生物提供碳源、能源、磷酸盐、生长因子、维生素等;卵白胨主要提供氮源;NaCl主要提供微生物生长环境(如渗透压),其次是提供无机盐.在配制固体培养基时还要加入一定量琼脂作凝固剂.琼脂在经常使用浓度下96℃时溶化,一般实际应用时在沸水浴中或垫以石棉网直接煮沸溶化.琼脂在40℃时凝固,通常不被微生物分解利用.固体培养基中琼脂的含量根据琼脂的质量和气温的分歧而有所分歧.由于这种培养基多用于培养细菌,因此,要用稀酸或稀碱将其pH调至中性或微碱性,以利于细菌的生长繁殖.LB培养基配方(每升)酵母提取物 5g胰化卵白胨 10g氯化钠 10gNaOH调pH至7.0,121℃、20min高压灭菌.LB固体培养基LB培养基 1L琼脂粉 15gNaOH调pH至7.0,121℃、20min高压灭菌.有时需在培养基中添加抗生素,琼脂凝固点为40℃,所以添加抗生素最好在50~55℃.LB培养基用途:用于一般细菌培养,特别用于分子生物学试验中年夜肠杆菌的保管和培养.LB培养基使用原理:卵白胨、酵母膏粉提供氮源、维生素和生长因子;氯化钠维持均衡的渗透压;葡萄糖提供碳源;琼脂是培养基的凝固剂.LB培养基配制方法配制每升培养基,应该在950 ml去液态lb培养基离子水中加入:胰化卵白胨10g 酵母提取物5g NaCl 10g 摇动容器直至溶质溶解.用5mol/LNaOH调pH至7.0.用去离子水定容至1L.在15psi高压下蒸汽灭菌20min.2.抗生素的加入:高压灭菌后,将融化的LB固体培养基置与55℃的水浴中,待培养基温度降到55℃时(手可触摸)加入抗生素,以免温渡过高招致抗生素失效,并充沛摇匀.3.倒板:一般10ml倒1个板子.培养基倒入培养皿后,翻开盖子,在紫外下照1015分钟.4.保管:用封口胶封边,并颠倒放于4℃保管,一个月内使用. 配400ml的话成份按比例减少就行了,pH还是要按规定的.。
lb固体培养基的配方
lb固体培养基的配方
lb固体培养的配方:
1.配制:100mlLB培养基加入1.5g琼脂粉
2.抗生素的加入:高压灭菌后,将融化的lb固体培养基置与55℃的水浴中,待培养基温度降到55℃时(手可触摸)加入抗生素,以免温度过高导致抗生素失效,并充分摇匀。
3.倒板:一般10ml倒1个板子。
培养基倒入培养皿后,打开盖子,在紫外下照10-15分钟。
4.保存:用封口胶封边,并倒置放于4℃保存,一个月内使用。
lb固体培养基是一种培养基的名称,生化分子实验中一般用该培养基来预培养菌种,使菌种成倍扩增,达到使用要求。
肉膏蛋白胨培养基是一种广泛用于培养细菌的培养基。
而lb培养基则是一种近年来用于培养基因工程受体菌(大肠杆菌)的常用培养基。
两者都属于半合成培养基。
肉膏蛋白胨的培养基主要成分是牛肉膏、蛋白胨和NaCl。
而lb固体培养基的主要成分是胰蛋白胨、酵母提取物和氯化钠。
高氏合成一号培养基是一种用于培养放线菌的合成培养基。
培养基中的可溶性淀粉作为碳源和能源。
lb培养基配方与tb培养基配方
lb培养基配方与tb培养基配方LB培养基和TB培养基这两种培养基名字有点像,它们之间的区别在哪呢首先是用途上,LB经常用来预培养菌种,而TB培养基则用于慢病毒载体等多种实验中,另外,两者的配方也是大有不同的;一起了解一下吧;TB培养基的配方去离子水加至 900 ml 胰蛋白胨 12 g 酵母提取物 24 g 甘油 4 ml摇动容器使溶质完全溶解,在 15 psi 1.05 kg/cm2高压下蒸汽灭菌 20 min ;当溶液冷却至60°C或60°C以下时加入100 ml无菌的 nol/L KH2PO4, nol/L K2HPO4该溶液的配置方法是:用90 ml 去离子水溶解2.31 g KH2PO4和12.54 g K 2HPO4,完全溶解后,用去离子水定容至 100 ml,在 15 psi 1.05 kg/cm2高压下蒸汽灭菌 20 min ;LB培养基的配方10g NaCl 10g 蛋白胨 5g酵母粉加去离子水至1L 调PH 分装灭菌即可用之配方区别:TB培养基,Terrific肉汤Terrific Broth,TB去离子水加至 900 ml胰蛋白胨 12 g,酵母提取物 24 g,甘油 4 ml摇动容器使溶质完全溶解,在 15 psi 1.05 kg/cm2高压下蒸汽灭菌 20 min ;当溶液冷却至60°C或60°C以下时加入100 ml无菌的 nol/L KH2PO4, nol/L K2HPO4该溶液的配置方法是:用90 ml 去离子水溶解2.31 g KH2PO4和12.54 g K 2HPO4,完全溶解后,用去离子水定容至 100 ml,在 15 psi 1.05 kg/cm2高压下蒸汽灭菌 20 min ;LB培养基的配方如下:胰蛋白胨Tryptone 10g/L酵母提取物Yeast extract 5g/L氯化钠NaCl 5g/L另外根据经验值用NaOH调节该培养基的pH,使其达到该pH适合目前使用最广的原核表达菌种的生长其他区别:TB培养基是一种通用培养基,用于各种微生物的培养;LB培养基是一种培养基的名称,生化分子实验中一般用该培养基来预培养菌种,使菌种成倍扩增,达到使用要求.培养的菌种一般是经过改造的无法在外界环境单独存活和扩增的工程菌.最后,值得注意的是,LB配制好后,一定要在冷却前加好抗生素;配TB培养基时,最后分开灭菌,否则配出来的培养基容易因为营养缺失而发黑;好了,最后祝大家实验成功;。
LB培养基怎样配制
LB培养基怎样配制LB一般被解释为Luria-Bertani,然而根据其发明人贝尔塔尼(Giuseppe Bertani)的说法,这个名字来源于英语lysogeny broth,即溶菌肉汤。
LB培养基是近年来用于培养基因工程受体菌(大肠杆菌)的常用培养基之一。
LB培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基,有时又称普通培养基,含有酵母提取物、胰化蛋白胨和NaCl。
酵母提取物:酵母经破壁后将其中蛋白质、核酸、维生素等抽提,再经生物酶解的富含小分子的氨基酸、肽、核苷酸、维生素等天然活性成分的淡黄色粉末,其中氨基酸含量30%以上,总蛋白50%以上,核苷酸10%以上,广泛用作生物培养基和食品调味品制造原料。
胰化蛋白胨:一种优质蛋白胨,是以新鲜牛肉和牛骨经胰酶消化,浓缩干燥而成的白色粉末,含有丰富的氮源、氨基酸等。
酵母提取物为微生物提供碳源、能源、磷酸盐、生长因子、维生素等;蛋白胨主要提供氮源;NaCl主要提供微生物生长环境(如渗透压),其次是提供无机盐。
在配制固体培养基时还要加入一定量琼脂作凝固剂。
琼脂在常用浓度下96℃时溶化,一般实际应用时在沸水浴中或垫以石棉网直接煮沸溶化。
琼脂在40℃时凝固,通常不被微生物分解利用。
固体培养基中琼脂的含量根据琼脂的质量和气温的不同而有所不同。
由于这种培养基多用于培养细菌,因此,要用稀酸或稀碱将其pH调至中性或微碱性,以利于细菌的生长繁殖。
LB培养基配方(每升)酵母提取物 5g胰化蛋白胨 10g氯化钠 10gNaOH调pH至7.0,121℃、20min高压灭菌。
LB固体培养基LB培养基 1L琼脂粉 15gNaOH调pH至7.0,121℃、20min高压灭菌。
有时需在培养基中添加抗生素,琼脂凝固点为40℃,所以添加抗生素最好在50~55℃。
LB培养基用途:用于一般细菌培养,特别用于分子生物学试验中大肠杆菌的保存和培养。
LB培养基使用原理:蛋白胨、酵母膏粉提供氮源、维生素和生长因子;氯化钠维持均衡的渗透压;葡萄糖提供碳源;琼脂是培养基的凝固剂。
LB培养基怎样配制
LB 【2 】造就基如何配制LB一般被说明为Luria-Bertani,然而依据其创造人贝尔塔尼(Giuseppe Bertani)的说法,这个名字起源于英语lysogeny broth,即溶菌肉汤.LB造就基是近年来用于造就基因工程受体菌(大肠杆菌)的常用造就基之一.LB造就基是一种运用最普遍和最通俗的细菌基本造就基,有时又称通俗造就基,含有酵母提取物.胰化蛋白胨和NaCl.酵母提取物:酵母经破壁后将个中蛋白质.核酸.维生素等抽提,再经生物酶解的富含小分子的氨基酸.肽.核苷酸.维生素等自然活性成分的淡黄色粉末,个中氨基酸含量30%以上,总蛋白50%以上,核苷酸10%以上,普遍用作生物造就基和食物调味品制作原料.胰化蛋白胨:一种优质蛋白胨,是以新颖牛肉和牛骨经胰酶消化,浓缩湿润而成的白色粉末,含有丰硕的氮源.氨基酸等.酵母提取物为微生物供给碳源.能源.磷酸盐.发展因子.维生素等;蛋白胨重要供给氮源;NaCl重要供给微生物发展情况(如渗入渗出压),其次是供给无机盐.在配制固体造就基时还要参加必定量琼脂作凝固剂.琼脂在常用浓度下96℃时熔解,一般现实运用时在滚水浴中或垫以石棉网直接煮沸熔解.琼脂在40℃时凝固,平日不被微生物分化运用.固体造就基中琼脂的含量依据琼脂的质量和蔼温的不同而有所不同.因为这种造就基多用于造就细菌,是以,要用稀酸或稀碱将其pH调至中性或微碱性,以利于细菌的发展滋生.LB造就基配方(每升)酵母提取物 5g胰化蛋白胨 10g氯化钠 10gNaOH调pH至7.0,121℃.20min高压灭菌.LB固体造就基LB造就基 1L琼脂粉 15gNaOH调pH至7.0,121℃.20min高压灭菌.有时需在造就基中添加抗生素,琼脂凝固点为40℃,所以添加抗生素最好在50~55℃.LB造就基用处:用于一般细菌造就,特殊用于分子生物学实验中大肠杆菌的保存和造就.LB造就基运用道理:蛋白胨.酵母膏粉供给氮源.维生素和发展因子;氯化钠保持平衡的渗入渗出压;葡萄糖供给碳源;琼脂是造就基的凝固剂.LB造就基配制办法配制每升造就基,应当在950 ml去液态lb造就基离子水中参加:胰化蛋白胨10g 酵母提取物5g NaCl 10g 动摇容器直至溶质消融.用5mol/LNaOH调pH至7.0.用去离子水定容至1L.在15psi高压下蒸汽灭菌20min.1.LB固体造就基1L和液体一样,加15g琼脂粉,必定要在温度降下之前加好抗固态LB造就基生素,并且倒好板.LB固体造就基倒板1.配制:100mlLB造就基参加1.5g琼脂粉2.抗生素的参加:高压灭菌后,将熔化的LB固体造就基置与55℃的水浴中,待造就基温度降到55℃时(手可触摸)参加抗生素,以免温渡过高导致抗生素掉效,并充分摇匀.3.倒板:一般10ml倒1个板子.造就基倒入造就皿后,打开盖子,在紫外下照10-15分钟.4.保存:用封口胶封边,并倒置放于4℃保存,一个月内运用. 配400ml的话成分按比例削减就行了,pH照样要按划定的.。
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lb培养基配方与tb培养基配方
LB培养基和TB培养基这两种培养基名字有点像,它们之间的区别在哪呢?首先是用途上,LB经常用来预培养菌种,而TB培养基则用于慢病毒载体等多种实验中,另外,两者的配方也是大有不同的。
一起了解一下吧。
TB培养基的配方
去离子水加至900 ml 胰蛋白胨12 g 酵母提取物24 g 甘油4 ml
摇动容器使溶质完全溶解,在15 psi (1.05 kg/cm2)高压下蒸汽灭菌20 min 。
当溶液冷却至60°C或60°C以下时加入100 ml无菌的0.17 nol/L
KH2PO4,0.17 nol/L K2HPO4(该溶液的配置方法是:用90 ml 去离子水溶解2.31 g KH2PO4和12.54 g K 2HPO4,完全溶解后,用去离子水定容至100 ml,在15 psi (1.05 kg/cm2)高压下蒸汽灭菌20 min 。
)
LB培养基的配方
10g NaCl 10g 蛋白胨5g酵母粉加去离子水至1L 调PH 7.0-7.2 分装灭菌即可用之
配方区别:
TB培养基,Terrific肉汤(Terrific Broth,TB)
去离子水加至900 ml
胰蛋白胨12 g,
酵母提取物24 g,
甘油4 ml
摇动容器使溶质完全溶解,在15 psi (1.05 kg/cm2)高压下蒸汽灭菌20 min 。
当溶液冷却至60°C或60°C以下时加入100 ml无菌的0.17 nol/L
KH2PO4,0.17 nol/L K2HPO4(该溶液的配置方法是:用90 ml 去离子水溶解2.31 g KH2PO4和12.54 g K 2HPO4,完全溶解后,用去离子水定容至100 ml,在15 psi (1.05 kg/cm2)高压下蒸汽灭菌20 min 。
)
LB培养基的配方如下:
胰蛋白胨(Tryptone) 10g/L
酵母提取物(Yeast extract) 5g/L
氯化钠(NaCl) 5g/L
另外根据经验值用NaOH调节该培养基的pH,使其达到7.4(该pH适合目前使用最广的原核表达菌种E.coli的生长)
其他区别:TB培养基是一种通用培养基,用于各种微生物的培养。
LB培养基是一种培养基的名称,生化分子实验中一般用该培养基来预培养菌种,使菌种成倍扩增,达到使用要求.培养的菌种一般是经过改造的无法在外界环境单独存活和扩增的工程菌.
最后,值得注意的是,LB培养基配制好后,一定要在冷却前加好抗生素。
配TB培养基时,最后分开灭菌,否则配出来的培养基容易因为营养缺失而发黑。
好了,最后祝大家实验成功。