常用抗凝剂的配制及用法
EDTA抗凝剂简易配制法
EDTA抗凝剂简易配制法【关键词】饱和;抗凝;溶解度常用EDTA-Na 2 抗凝剂的浓度是15g/L,每0.4ml干燥后可抗凝5ml血液 [1] 。
EDTA-Na 2 的溶解度较大,22℃时可达11.1克,其有效抗凝浓度为1~2mg/ml,通过计算得知100ul(约两滴)饱和溶液可抗凝5~10ml血液,由于EDTA-Na 2 的溶解度受Nac1影响不大,为防止溶血在实践中我们用500毫升生理盐水加56克EDTA-Na 2 配制成饱和溶液,每份标本滴加3~5滴直接使用,取得了令人满意的效果。
1.材料和方法1.1对象:1999年~2007年潍坊市无偿献血者。
1.2试剂:ELISA试剂盒HBsAg购自厦门新创和上海科华公司,抗-HCV购自厦门新创和上海科华公司,抗-HIV购自北京吉比艾和北京万泰公司,TP-ELISA购自北京中生和吉比艾公司,ALT活性试剂盒购自北京中生和浙江东瓯公司。
1.3仪器:TECAN全自动酶免加样器,FAME全自动酶免分析系统。
1.4方法:配制方法将EDTA-Na 2 粉末直接加入到生理盐水瓶内边加边摇匀直到瓶子底部有少许晶体不能再溶解为止,静置稳定片刻后即为EDTA-Na 2 饱和溶液。
本溶液用普通塑料滴管滴加2~3滴即可,当血液沿试管内壁下流时由于冲击作用自动与抗凝剂混合均匀勿需再人为摇匀。
每人留取两份标本,一份用本法抗凝,一份非抗凝,两份标本用同一种试剂和方法检验,阳性者均做双孔复试。
抗-HIV阳性标本是向同一个人的两份等量标本中加入等量抗-HIV阳性对照物制得。
将得到的结果对比分析。
所有操作均按试剂盒说明书和仪器操作规程严格进行。
2.结果(见表1)表1抗凝和非抗凝标本的检验结果比较注:各组阳性标本中均包含10例弱阳性标本。
3.讨论3.1由(上表可看出)抗凝标本和非抗凝标本检验结果完全相符,二者之间无差异。
3.2乙二胺四乙酸盐对血细胞和血小板形态影响很小,适用于一般血液学检查,稍微过量不影响检验结果。
血液透析抗凝剂的配置和应用
抗凝剂配置流程一、普通肝素配置方法肝素规格：2ml/支，100mg/支，12500iu/支1毫升=5mg配制方法：NS18ml+肝素2ml（1支）计算方法为：加入NS中肝素的总mg÷（NS+加入肝素的总ml）=每毫升盐水所含肝素量二、低分子肝素的配置方法低分子肝素目前多是预充式注射器，或粉剂，规格不同，医嘱给药量也不同，为保证给药量的准确性，低分子肝素应盐水稀释后在给患者推注。
1、低分子肝素规格如为5000iu/支，应配制完成后为每毫升1000iu/ml配置方法：NS4ml+低分子肝素一支（1ml），则每毫升为1000iu。
计算方法：低分子肝素总单位剂量÷（NS量+低分子肝素总毫升量）=每毫升所含低分子量。
2、低分子肝素为粉剂每支5000iu时，应配制完成后为每毫升1000iu/ml配置方法：用生理盐水5ml稀释后，则配置后的肝素为每毫升1000iu/ml总部建议：配置低分子时最好使用10ml注射器进行稀释药液，配置完成后每2ml含有低分子肝素1000iu。
（原因是如使用5ml注射器配置，透析用穿刺针管腔容积为2.5ml，如果患者应用1-3千单位的低分子肝素量，在推注1-3ml后，药液只能停留在穿刺针管腔内，未做到提前全身肝素化要求）。
附件：2019版sop对药物配置的要求：（1）治疗过程中所需的肝素溶液、低分子肝素制剂、红细胞生成刺激剂、铁剂等药品的配置，必须在透析准备室针对每位患者进行配置。
（2）配置后的药品直接送至每位患者的透析单元，标识清楚，一人一用。
已经进入透析治疗区的药品不可返回进入透析准备室。
（3）配置后未用的药品不能用于其他患者。
抗凝剂剂量选择和使用方案一、普通肝素抗凝1．血液透析、血液滤过或血液透析滤过一般首剂量0.3～0.5mg/kg，追加剂量5～10mg/h，间歇性静脉注射或持续性透析器/滤器前静脉输注（常用）；血液透析结束前30～60min 停止追加。
3 抗凝剂的选用操作程序
1. 目的为保证血液标本可靠，确保检测结果准确度。
2. 标本种类全血或末梢血。
3. 适用范围操作区抗凝剂的选用。
4. 试剂与器材4.1 枸橼酸钠（109mmol/L）：枸橼酸钠与血液中的钙离子结合形成螯合物，从而阻止血液凝固。
4.2 乙二胺四乙酸二钾（EDTA-K2）：抗凝机制与枸橼酸钠相似，一般 1.5mg～2.2mg可阻止1mL血液凝固。
4.3 肝素：是一种含有硫酸基团的粘多糖，相对分子量为15000，具有多方面的抗凝作用，其与抗凝血酶Ⅲ（AT-Ⅲ）结合，促进其对凝血因子Ⅻ、Ⅺ、Ⅸ、Ⅹ和凝血酶的活性的抑制，阻止血小板聚集，从而达到抗凝的作用。
5．抗凝原理5.1 枸橼酸钠（109mmol/L）枸橼酸钠与血液的比例多采用1:9（V/V），用于凝血象和红细胞沉降率测定（魏氏法血沉测定时为1:4）。
5.2 乙二胺四乙酸二钾（EDTA-K2）EDTA-K2特别适用于全血细胞分析仪及红细胞比积测定，室温下6小时红细胞体积不改变。
但由于其影响血小板聚集及凝血因子检测，故不适合做凝血象和血小板功能检查。
5.3 肝素通常用肝素粉剂（100～125U/mg）配成1g/L肝素水溶液（即肝素1mg /mL），吸0.5mL于试管中，在37～50℃烘干后可抗凝5mL血液。
适用于红细胞比容测定，不适合凝血象和血液学一般检查。
6. 标本要求6.1 血液与抗凝剂比例适当，采集后要充分摇匀。
6.2 标本采集后应立即送检。
7. 注意事项7.1 血液与抗凝剂比例适当，采集后要充分摇匀。
7.2 标本采集后应立即送检。
7.3 选用抗凝剂必须适当。
参考文献1.中华人民共和国卫生部医政司.全国临床检验操作规程（第3版）.南京：东南大学出版社，2006.2.江苏省卫生厅.医院检验科建设管理规范（第2版）.南京：东南大学出版社，2013.3.刘成玉,罗春丽.临床检验基础（第5版）[M].人民卫生出版社，2012.。
常用抗凝剂及其配置法
常用抗凝剂的配制及用法在医学实验中常需动物的全身抗凝，采出的全血或血浆有的也需加入适当的抗凝剂抗凝。
对抗凝剂的要求是：用量少、溶解度大、不带进干扰实验的杂质。
一、肝素（1）肝素抗凝作用原理肝素的抗凝作用很强,作死亡复苏等实验时,常用它作动物全身抗凝剂，肝素的抗凝作用主要是抑制凝血致活酶的活力，阻止血小板凝聚以及抑制抗凝血酶等作用，从而使血液不发生凝固。
（2）配制和用量纯的肝素10mg能抗凝65~125 ml血液(按lmg等于125U，10~20U能抗1 ml 血液计)。
但由于肝素制剂的纯度高低以及其保存时间长短不等，因而其抗凝效果也不相同。
一般可配成1％肝素生理盐溶液，用时取0．1毫升于试管内，100℃烘干，每管能抗凝5～10ml血液。
也可将抽血注射器用配好肝素湿润一下管壁，直接抽血至注射器内而使血液不凝。
在动物实验作全身抗凝时，一般剂量为：大白鼠2．5～3．0mg/200～300g体质量，兔10mg／kg体质量，狗5～10mg／kg体质量。
肝素可改变蛋白质等电点，因此当用盐析法分离蛋白质作蛋白质各部分的测定时，不可采用肝素。
市售的肝素钠溶液每毫升含肝素12500U，相当于100mg。
（3）注意事项做全血DNA提取的时候抗凝剂不能采用肝素！因为肝素是聚合酶链式反应的抑制剂！二、草酸盐合剂（1）原理草酸胺能使血细胞略为膨大，而草酸钾能使血细胞微缩小，因此草酸铵与草酸钾按3：2比例配置，可使血细胞体积保持不变；加福尔马林则能防止微生物在血中繁殖。
此抗凝剂最适于作红细胞比积测定。
（2）配制方法及用量草酸铵1．2g、草酸钾0．8g、福尔马林1．0ml、蒸馏水加至100ml每毫升血加草酸盐合剂0．1ml(即相当草酸铵1．2mg，草酸钾0．8mg)。
根据取血量将计算好的草酸盐剂量加入玻璃容器内烤干备用。
如取0．5ml于试管，烘干后每管可使5ml血不凝固。
（3）注意事项草酸的作用在于能够沉淀血凝过程中所必需的钙离子，而达到抗凝目的。
[解答]生化常用抗凝剂
![[解答]生化常用抗凝剂](https://img.taocdn.com/s3/m/9f9c10d8a0c7aa00b52acfc789eb172ded6399aa.png)
常用抗凝剂阻止血液凝固的原理抗凝----应用化学或物理学的方法，抑制或除去血液中的某些凝血因子以阻止血液凝固的方法。
抗凝剂----能阻止血液凝固的化学试剂。
一、枸橼酸钠【原理】枸橼酸钠（柠檬酸钠）是枸橼酸钠的三钠盐。
它能与血液中的钙离子形成可溶性的螯合物，使Ca2+失去凝血作用，从而阻止血液凝固。
【应用范围】血沉、凝血象、血小板功能检查及血液保养液。
【用量】凝血象: 109mmol/L水溶液,与血液之比为1:9；血沉: 106mmol/L水溶液,与血液之比为1:4。
二、乙二胺四乙酸盐【原理】乙二胺四乙酸（EDTA）盐可与血液中的钙离子结合形成配位化合物，从而阻止血凝。
【应用范围】一般血液学检查和血液粘度测定。
不适于凝血象及血小板功能检查。
【用量】其有效抗凝浓度为1～2mg/ml血液。
血细胞分析仪用EDTA-K2作抗凝剂，用量为EDTA-K2•2H2O 1.5～2.2mg/ml血液。
三、肝素【原理】通过与抗凝血酶Ⅲ结合，增强抗凝血酶的作用，灭活丝氨酸蛋白酶，从而可阻止凝血酶的形成和阻止血小板聚集，阻止血液凝固。
【应用范围】血细胞比容测定、血液粘度测定和多种生化分析。
【用量】通常用肝素的钠盐或钾盐粉剂配成1g/L肝素水溶液。
取0.5ml置小瓶中，37～50℃烘干后，能抗凝5ml血液。
四、草酸盐草酸盐也是常用的抗凝剂，优点是溶解度大，作用原理是溶解后解离的草酸根与标本中的Ca2+形成草酸钙沉淀，使Ca2+失去凝血功能，凝血过程被阻断。
血液采集中用何种抗凝剂1、乙二胺四乙酸（EDTA）EDTA有二钠、二钾和三钾盐。
均可与钙离子结全成螯合物，从而阻止血液Na2C10H14O8N2+CA2+CAC10H12O8N2+2NA++2H+ EDTA盐经1000C烘干，抗凝作用不变，通常配成15g/L水溶液，每瓶0.4ml，干燥后可抗凝5ml血液。
EDTA盐对红、白细胞形态影响很小，根据国际血液学标准公委员会（Internationalcommittee standard of hematology ,ICSH）1993年文件建议，血细胞计数用EDTA二钾作抗凝剂，用量为EDTA-K2。
第二班透析用抗凝药配制规定
第二班透析用抗凝药配制规定
1、责任到人：当天第二班透析用抗凝药物由连班护士配制。
2、配制时间：上午10点・11点。
3、配制地点：治疗室。
4、配制要求：三查七对，无菌操作。
5、配制流程：
①清点第二班透析人次，确定普通肝素、低分子肝素的患者数。
②普通肝素统一用20M1.注射器以生理盐水配制成2mg∕ml*20ml,贴上打印标签，根据人数配制相应份数。
③低分子肝素统一用5M1.注射器以注射用水配制成100OIU/ml,贴上手写标签，注明剂量，根据人数配制相应份数，低分子肝素钙与低分子肝素钠不得混配。
④配制完毕，再次核对后铺好无菌盘连同治疗车推至透析间备用。
6、注意事项：
①病区患者的低分子肝素统一先从科室备药中取用，连班护士接收到药品核对无误后即补充到科室备药中。
②门诊患者的低分子肝素由配制护士从其存放在科室的患者私人药盒中取用，正确核对，并记录。
常用抗凝剂的配制及用法_常用抗凝剂的配制及用法
常用抗凝剂的配制及用法专业相关2010-08-08 14:48:34 阅读458 评论0 字号：大中小订阅在医学实验中常需动物的全身抗凝，采出的全血或血浆有的也需加入适当的抗凝剂抗凝。
对抗凝剂的要求是：用量少、溶解度大、不带进干扰实验的杂质。
一、肝素（1）肝素抗凝作用原理肝素的抗凝作用很强,作死亡复苏等实验时,常用它作动物全身抗凝剂，肝素的抗凝作用主要是抑制凝血致活酶的活力，阻止血小板凝聚以及抑制抗凝血酶等作用，从而使血液不发生凝固。
注意事项：做全血DNA提取的时候抗凝剂不能采用肝素！因为肝素是聚合酶链式反应的抑制剂！（2）配制和用量纯的肝素10mg能抗凝65~125 ml血液(按lmg等于125U，10~20U能抗1 ml血液计)。
但由于肝素制剂的纯度高低以及其保存时间长短不等，因而其抗凝效果也不相同。
一般可配成1％肝素生理盐溶液，用时取0．1毫升于试管内，100℃烘干，每管能抗凝5～10ml血液。
也可将抽血注射器用配好肝素湿润一下管壁，直接抽血至注射器内而使血液不凝。
在动物实验作全身抗凝时，一般剂量为：大白鼠2．5～3．0mg/200～300g体质量，兔10mg／kg体质量，狗5～10mg／kg体质量。
肝素可改变蛋白质等电点，因此当用盐析法分离蛋白质作蛋白质各部分的测定时，不可采用肝素。
市售的肝素钠溶液每毫升含肝素12500U，相当于100mg。
二、草酸盐合剂（1）原理草酸胺能使血细胞略为膨大，而草酸钾能使血细胞微缩小，因此草酸铵与草酸钾按3：2比例配置，可使血细胞体积保持不变；加福尔马林则能防止微生物在血中繁殖。
此抗凝剂最适于作红细胞比积测定。
（2）配制方法及用量草酸铵1．2g、草酸钾0．8g、福尔马林1．0ml、蒸馏水加至100ml每毫升血加草酸盐合剂0．1ml(即相当草酸铵1．2mg，草酸钾0．8mg)。
根据取血量将计算好的草酸盐剂量加入玻璃容器内烤干备用。
如取0．5ml于试管，烘干后每管可使5ml血不凝固。
抗凝剂
抗凝剂种类很多，性质各异，必须根据检验止的适当选择，才能获得预期的结果。
现将实验常用抗凝剂及其使用方法简述如下：1、乙二胺四乙酸（EDTA）盐EDTA有二钠、二钾和三钾盐。
均可与钙离子结全成螯合物，从而阻止血液凝固。
EDTA盐经1000C烘干，抗凝作用不变，通常配成15g/L水溶液，每瓶0.4ml，干燥后可抗凝5ml血液。
EDTA 盐对红、白细胞形态影响很小，根据国际血液学标准公委员会（Internationalcommittee standard of hematology ,ICSH）1993年文件建议，血细胞计数用EDTA二钾作抗凝剂，用量为EDTA-K2。
2H2O1.5-2.2MG （4.45±0.85μmol）/ml血液。
EDTA-NA与EDTA-K2对血细胞计数影响均较小，但二钠溶解度明显低于二钾，有时影响抗凝效果，其他抗凝剂不适合于血细胞计数。
表1-1是几种抗凝剂对白细胞计数的影响，EDTA影响小板聚集，不适合于作凝血象检查和血小板功能试验。
2.枸椽酸钠（trisodium citrate）枸椽酸盐可与血中钙离子形成可溶性螯合物，从而阻止血液凝固。
枸椽钠对凝血因子有较好的保护作用，使其活性减低缓，故常用于凝血象的检查，也用于红细胞沉降率的测定。
因毒性小，是输积压保养中的成分之一。
由于枸椽酸钠溶液是按体积肥比例加入血液内达到抗凝目的的，而抗凝剂主要是作用于积压浆成分，通常所谓的1：9比例抗凝的概念是提1份体积的抗凝剂作用9份红细胞比积正常血液内的血浆成分而言。
所以台果对贫血或红细胞增多症患者的血液仍按1：9的比例加入抗凝剂时，就会发生抗凝剂足或相对过多，这将明显地影响凝象检查结果。
为了避免这种现象，有文献报道应根据抗凝剂用量（ml）=0.00185×血量×（100—病人红细胞比积%）这一公式，来计算抗凝剂的用量。
3．草酸钠（sodium oxalate）草酸盐可与血中钙离子生成草酸钙沉淀，从而阻止血液凝固。
抗凝剂
4.枸椽酸钠（trisodium citrate）枸椽酸盐可与血中钙离子形成可溶性螯合物，从而阻止血液凝固。
枸椽酸钠有2Na3C6H5O7。和2Na3C6H5。11H2O等多种晶体。通常用前者配成109mmol/l(32g/l)水溶液（也有用106mmol/l浓度），与血液按1：9或1：4比例使用。枸椽钠对凝血V因子有较好的保护作用，使其活性减低缓，故常用于凝血象的检查，也用于红细胞沉降率的测定。因毒性小，是输积压保养中的成分之一。
枸橼酸钠可使钙失去活性，故能防止血凝。但其抗凝作用较差，其碱性较强，不适作化学检验之用。可用于红细胞沉降速度测定。急性血压实验中所用的枸橼酸钠为5％～6％溶液。
（四）草酸钾
每毫升血需加1～2mg草酸钾。如配制10％水溶液，每管加0.1m1则可使5～10ml血不凝固。
（2）配制和用量
纯的肝素10mg能抗凝65~125 ml血液(按lmg等于125U，10~20U能抗1 ml血液计)。但由于肝素制剂的纯度高低以及其保存时间长短不等，因而其抗凝效果也不相同。一般可配成1％肝素生理盐溶液，用时取0．1毫升于试管内，100℃烘干，每管能抗凝5～10ml血液。也可将抽血注射器用配好肝素湿润一下管壁，直接抽血至注射器内而使血液不凝。在动物实验作全身抗凝时，一般剂量为：大白鼠2．5～3．0mg/200～300g体质量，兔10mg／kg体质量，狗5～10mg／kg体质量。肝素可改变蛋白质等电点，因此当用盐析法分离蛋白质作蛋白质各部分的测定时，不可采用肝素。市售的肝素钠溶液每毫升含肝素12500U，相当于100mg。
（3）注意事项
草酸的作用在于能够沉淀血凝过程中所必需的钙离子，而达到抗凝目的。用时注意加的量应适中，不能过多，以免妨碍去蛋白质血滤液的制取。不适用于血液内钙或钾的测定，也不能用于血液非蛋白氮测定。
临床检验基础考点常用抗凝剂和使用方法
临床检验基础考点常用抗凝剂和使用方法常用抗凝剂和使用方法：
（1）乙二胺四乙酸（EDTA）盐：常用有钠盐或钾盐，能与血液中钙离子结合成螯合物，使Ca2＋失去凝血作用，阻止血液凝固。
EDTA盐对血细胞形态、血小板计数影响很小，适用于血液学检查，尤其是血小板计数。
根据国际血液学标准化委员会（ICSH）建议，CBC抗凝剂用EDTA-K2•2H2O，量为1.5～2.2 mg/ml血液。
不适于凝血检查、血小板功能试验。
（2）草酸盐：常用有草酸钠、草酸钾、草酸铵，溶解后解离的草酸根离子能与样本中钙离子形成草酸钙沉淀，使Ca2＋失去凝血作用，阻止血液凝固。
草酸盐不适于凝血检查。
双草酸盐抗凝剂：草酸钾可使红细胞体积缩小，草酸铵则可使红细胞胀大，两者按适当比例混合，恰好不影响红细胞形态和体积，可用于血细胞比容、CBC、网织红细胞计数等项目检查。
双草酸盐抗凝剂可使血小板聚集、影响白细胞形态，不适于血小板计数、白细胞分类计数。
（3）肝素：加强抗凝血酶（AT）灭活丝氨酸蛋白酶作用，阻止凝血酶的形成，并阻止血小板聚集等作用，从而阻止血液凝固。
肝素是红细胞渗透脆性试验的理想抗凝剂。
但肝素可引起白细胞聚集，瑞氏染色后产生蓝色背景，不适于CBC、细胞形态学检查。
（4）枸橼酸盐：常用有枸橼酸钠，能与血液中钙离子结合形成螯合物，阻止血液凝固。
枸橼酸钠与血液的抗凝比例为1:9或1:4。
适用于红细胞沉降率、凝血检查，是输血保养液的成分。
抗凝剂配方的配方有什么？
抗凝剂配方的配方有什么？抗凝血剂无法凝固的血液。
人体的血液跟人体分开会发生凝固，这是正常的现象，逐渐出现血清，因试验要求血液不能凝固，否则凝固的血液无法进行试验，这个时候血液一定不能凝固起来，这个时候需要抗凝剂来使血液不出现凝固的现象，抗凝剂配方的配方有什么？下面我们来看看。
★一.备料动物，注射器，枸橼酸钠等★二.步骤1.制作抗凝剂抗凝剂有很多种，如肝素、枸橼酸钠、柠檬酸钠、EDTA等，每种都有其适合的应用。
一般来讲，实验室常用的、配方简单的就是枸橼酸钠（3%-5%）。
与血液比例1:4，也就是2ml抗凝剂+8ml 血液.2.保定动物采血对象以鸡为例，用10ml细针头注射器采集新鲜的鸡抗凝血，采血部位翼根静脉。
左手抓住鸡的两翼，使其侧卧，身体朝向内侧，翅膀朝向外侧，完成保定。
3.采血右手取酒精棉，沿鸡的腋窝处向翅膀外侧擦拭，会出现一条明显的静脉，此为翼根静脉。
左手压住近心端，右手持已吸入2ml抗凝剂的10ml注射器沿此静脉平行刺入，松开左手，即可采集8ml血液。
4.止血采血完毕后，小心抽出注射器，用干燥的脱脂棉按压采血部位使其快速止血。
5.充分混匀抗凝剂要与血液充分混匀才能发挥抗凝作用，混合不匀经常出现血块，影响下一步使用。
混匀后，拔去注射器针头后方可将抗凝血推入其他试验容器中。
6.真空采血管有条件的实验室可以直接购买真空采血管，这种采血管内就含有抗凝剂，而且是负压，相连的针头成功刺入血管后，血液自动流入管内，无需注射器，方便快捷。
★三.注意事项抗凝剂配置后最好过滤除菌，存放时间不宜过长；抗凝剂与血液要充分混匀，避免出现血凝块！。
常用抗凝剂的配制及用法
在医学实验中常需动物的全身抗凝，采出的全血或血浆有的也需加入适当的抗凝剂抗凝。
对抗凝剂的要求是：用量少、溶解度大、不带进干扰实验的杂质。
一、肝素（1）肝素抗凝作用原理肝素的抗凝作用很强,作死亡复苏等实验时,常用它作动物全身抗凝剂，肝素的抗凝作用主要是抑制凝血致活酶的活力，阻止血小板凝聚以及抑制抗凝血酶等作用，从而使血液不发生凝固。
（2）配制和用量纯的肝素10mg能抗凝65~125ml血液(按lmg等于125U，10~20U能抗1ml血液计)。
但由于肝素制剂的纯度高低以及其保存时间长短不等，因而其抗凝效果也不相同。
一般可配成1％肝素生理盐溶液，用时取0．1毫升于试管内，100℃烘干，每管能抗凝5～10ml血液。
也可将抽血注射器用配好肝素湿润一下管壁，直接抽血至注射器内而使血液不凝。
在动物实验作全身抗凝时，一般剂量为：大白鼠2．5～3．0mg/200～300g体质量，兔10mg／kg体质量，狗5～10mg／kg体质量。
肝素可改变蛋白质等电点，因此当用盐析法分离蛋白质作蛋白质各部分的测定时，不可采用肝素。
市售的肝素钠溶液每毫升含肝素12500U，相当于100mg。
二、草酸盐合剂（1）原理草酸胺能使血细胞略为膨大，而草酸钾能使血细胞微缩小，因此草酸铵与草酸钾按3：2比例配置，可使血细胞体积保持不变；加福尔马林则能防止微生物在血中繁殖。
此抗凝剂最适于作红细胞比积测定。
（2）配制方法及用量草酸铵1．2g、草酸钾0．8g、福尔马林1．0ml、蒸馏水加至100ml每毫升血加草酸盐合剂0．1ml(即相当草酸铵1．2mg，草酸钾0．8mg)。
根据取血量将计算好的草酸盐剂量加入玻璃容器内烤干备用。
如取0．5ml于试管，烘干后每管可使5m l血不凝固。
（3）注意事项草酸的作用在于能够沉淀血凝过程中所必需的钙离子，而达到抗凝目的。
用时注意加的量应适中，不能过多，以免妨碍去蛋白质血滤液的制取。
不适用于血液内钙或钾的测定，也不能用于血液非蛋白氮测定。
生化常用抗凝剂
常用抗凝剂阻止血液凝固的原理抗凝----应用化学或物理学的方法，抑制或除去血液中的某些凝血因子以阻止血液凝固的方法。
抗凝剂----能阻止血液凝固的化学试剂。
一、枸橼酸钠【原理】枸橼酸钠（柠檬酸钠）是枸橼酸钠的三钠盐。
它能与血液中的钙离子形成可溶性的螯合物，使Ca2+失去凝血作用，从而阻止血液凝固。
【应用范围】血沉、凝血象、血小板功能检查及血液保养液。
【用量】凝血象: 109mmol/L水溶液,与血液之比为1:9；血沉: 106mmol/L水溶液,与血液之比为1:4。
二、乙二胺四乙酸盐【原理】乙二胺四乙酸（EDTA）盐可与血液中的钙离子结合形成配位化合物，从而阻止血凝。
【应用范围】一般血液学检查和血液粘度测定。
不适于凝血象及血小板功能检查。
【用量】其有效抗凝浓度为1～2mg/ml血液。
血细胞分析仪用EDTA-K2作抗凝剂，用量为EDTA-K2•2H2O 1.5～2.2mg/ml血液。
三、肝素【原理】通过与抗凝血酶Ⅲ结合，增强抗凝血酶的作用，灭活丝氨酸蛋白酶，从而可阻止凝血酶的形成和阻止血小板聚集，阻止血液凝固。
【应用范围】血细胞比容测定、血液粘度测定和多种生化分析。
【用量】通常用肝素的钠盐或钾盐粉剂配成1g/L肝素水溶液。
取0.5ml置小瓶中，37～50℃烘干后，能抗凝5ml血液。
四、草酸盐草酸盐也是常用的抗凝剂，优点是溶解度大，作用原理是溶解后解离的草酸根与标本中的Ca2+形成草酸钙沉淀，使Ca2+失去凝血功能，凝血过程被阻断。
血液采集中用何种抗凝剂1、乙二胺四乙酸（EDTA）EDTA有二钠、二钾和三钾盐。
均可与钙离子结全成螯合物，从而阻止血液Na2C10H14O8N2+CA2+CAC10H12O8N2+2NA++2H+ EDTA盐经1000C烘干，抗凝作用不变，通常配成15g/L水溶液，每瓶0.4ml，干燥后可抗凝5ml血液。
EDTA盐对红、白细胞形态影响很小，根据国际血液学标准公委员会（International committee standard of hematology ,ICSH）1993年文件建议，血细胞计数用EDTA二钾作抗凝剂，用量为EDTA-K2。
常用抗凝剂及血液凝固的原理
抗凝---—应用化学或物理学的方法，抑制或除去血液中的某些凝血因子以阻止血液凝固的方法。
抗凝剂---—能阻止血液凝固的化学试剂.
一、枸橼酸钠
【原理】枸橼酸钠(柠檬酸钠）是枸橼酸钠的三钠盐.它能与血液中的钙离子形成可溶性的螯合物，使Ca2+失去凝血作用，从而阻止血液凝固。
【应用范围】血沉、凝血象、血小板功能检查及血液保养液.
【用量】凝血象：109mmol/L水溶液，与血液之比为1：9; 血沉：106mmol/L水溶液，与血液之比为1：4.
二、乙二胺四乙酸盐
【原理】乙二胺四乙酸（EDTA)盐可与血液中的钙离子结合形成配位化合物,从而阻止血凝。
【应用范围】一般血液学检查和血液粘度测定。
不适于凝血象及血小板功能检查。
【用量】其有效抗凝浓度为1～2mg/ml血液. 血细胞分析仪用EDTA-K2作抗凝剂，用量为EDTA—K2•2H2O 1.5～2.2mg/ml血液。
三、肝素
【原理】通过与抗凝血酶Ⅲ结合，增强抗凝血酶的作用，灭活丝氨酸蛋白酶，从而可阻止凝血酶的形成和阻止血小板聚集，阻止血液凝固。
【应用范围】血细胞比容测定、血液粘度测定和多种生化分析。
用量通常用肝素的钠盐或钾盐粉剂配成1g/L肝素水溶液。
取0.5ml置小瓶中，37～50℃烘干后，能抗凝5ml血液。
四、草酸盐
草酸盐也是常用的抗凝剂,优点是溶解度大，作用原理是溶解后解离的草酸根与标本中的Ca2+形成草酸钙沉淀，使Ca2+失去凝血功能，凝血过程被阻断.。
第二节 常用抗凝剂的种类、浓度与配置方法
第二节常用抗凝剂的种类、浓度与配制方法在机能学实验研究中，常用的抗凝剂有3.8%枸橼酸钠、2%草甲酸、2%草酸钠、1%乙二胺四乙酸钠和肝素等。
一、枸橼酸钠它与血液中Ca2+结合形成络合物，去除血Ca2+而防止血液凝固，且枸橼酸盐类对动物机体无毒，故一般若需抗凝血回注动物体内时，宜用枸橼酸钠抗凝。
二、草甲酸其溶解度大，抗凝作用强，是机能学实验和生化实验常用抗凝剂。
能与血液中Ca2+结合生成不溶解的草酸钙，使血液不凝固。
2mg草酸钾可抗凝1mL血，常用于全血抗凝，但不宜用于钾、钙等离子测定。
此外草酸钾对乳酸脱氢酶、酸性磷酸酶及淀粉酶有抑制作用。
2%草酸钾溶液。
取准备取血用的试管数支，每支试管加0.5ml 2%草酸钾溶液，置80℃烤箱内烤干备用，每管可抗凝5mL血。
三、乙二胺四乙酸（EDTA）可与钙形成螯合物，而使血液不凝固。
常用EDTA-Na，1～2mg可抗凝1mL血液。
特别2适用血液学检查，不宜用于含氮化合物和钠的测定。
四、肝素肝素能阻止凝血酶原转变为凝血酶，从而抑制纤维蛋白原形成纤维蛋白，达到抗凝效果。
是机能实验研究中最常用的抗凝剂，最合适电解质、血气与pH值的测定。
肝素浓度表示法有体积-质量百分比和国际单位计量法，两者的等量关系是1mg相当于100U。
其使用浓度因使用目的、方法与对象而定。
①实验动物全身体内抗凝，一般用量为：大白鼠2.5～3mg/200～300g；家兔10mg/kg；狗50～100mg/kg。
②实验动物局部抗凝，如记录实验动物动脉血压时，需在动脉插管和血压换能器等血压传输管道系统内充满0.1%(100U/mL)为例，是取12500U/2mL肝素一支，加水至125mL即成。
肝素应避光低温保存。
常用抗凝剂的配置、用法和选择
常用抗凝剂的配置、用法和选择常用抗凝剂大致分为三类，一类为化学药品.其作用为消除钙离子作用。
使血液中的钙转变成可溶性的，但不离子化的络合物，药物如枸橼酸钠，草盐酸和二乙胺四乙酸二钠等.另一类为生物制剂，如肝素，其作用是阻止凝血酶的生成，从而抗凝。
第三类为离子交换剂,系采用物理性方法防治血液凝固.1。
枸橼酸钠（Sodium citrate）：溶于水，不溶于醇.可直接用本品粉末,每ml血液加3~5mg，用于红细胞沉降率测定.按30mg/ml的枸橼酸钠溶液1份，血液9份比例混合剂可使血液不凝固。
因本贫碱性较强，可用枸橼酸调节pH接近7。
0，所含成份为枸橼酸钠56mg/ml，枸橼酸5mg/ml和葡萄糖29mg/ml,成为复方枸橼酸钠抗凝剂，常用于各种动物连接血压计时的抗凝.现用的枸橼酸钠有两种：（1）枸橼酸三钠（Trisodium citrare)：有两种结晶水含量不同的成品,一种是2Na3C6H5O7·11H2O，其与血浆成等渗浓度为3。
8%；另一种是Na3C6H5O9·2H2O与血浆成等渗浓度为3.2％（2。
5%~4.0%），均为碱性，枸橼酸或其盐与钙作用生成可溶性络合物，当制成2.5％溶液时，Ph为7.5。
最低的抗凝浓度为0。
2％，一般在血液中的最终浓度应为0.4％~0.6%,是长久以来国际上最通用的抗凝剂。
（2）枸橼酸二钠（Disodium citrare）:因其中含有大量的枸橼酸离子,属于酸性的枸橼酸。
3。
5%溶液的pH为4。
5,其优点是:简化了配置保存液的处方及其配制手续；防止高压消毒时葡萄糖的焦化现象,但大量输血时,枸橼酸钠可能产生毒性反应.2.草酸钾（Potassium oxalate）和草酸钠(Sodium oxalate）：草酸溶于水，微溶于醇,具有溶解度大，抗凝作用强的特点.体外抗凝时1ml血液用草酸钾1～2ml，微量检验用血较少时，可配成20mg/ml溶液。
也可根据需要,用100mg/ml草酸钾溶液放入试管中摇动，使其分散浸湿管壁周围，置60℃烘箱内烤干。
抗凝剂ACD的配置
抗凝剂ACD的配置
抗凝剂ACD：
柠檬酸0.48g、柠檬酸钠1.32g、葡萄糖1.47g，溶解于100ml双蒸水(ddH20)中，
高压灭菌备用(血液：ACD=6：1)
（高压灭菌条件为：115"C，15 min 0.075～O.08 M Pa。
)
博客文章：
2009年10月29日星期四
如果是提取全血中的DNA的话，应用酸性的柠檬酸葡萄糖（ACD）效果最好！若条件不便可以应用EDTA替代！
抗凝剂ACD的配制方法：
1 （酸性）柠檬酸葡萄糖溶液B（ACD）（用于新鲜抽提或者是冻存的血样品）
柠檬酸钠：1.32%（M/V）
柠檬酸：0.48%（M/V）
葡萄糖：1.47%（M/V）
一般20ML新鲜血液中加入3.5ML ACD抗凝剂。
比例依次类推！！
血液可以在0度条件下保存数天，或者是零下70度条件下无限期保存！
注意事项：做全血DNA提取的时候抗凝剂不能采用肝素！因为肝素是聚合酶链式反应的抑制剂！
从全血中制备基因组DNA，ACD做为抗凝剂要优于EDTA，因为他更加能保存高分子质量的DNA，然而，血样常常被收集于用定量EDTA作为抗凝剂的小管中。
在大多数美国的医院中，收集血样的小管均用颜色标明是否含有抗凝剂，紫色顶管盖的小管一般含有抗凝剂，通常是EDTA的干粉。
黄色顶盖的小管不含抗凝剂。
在分子克隆实验中，前者一般用于收集血样用于制备基因组的DNA，后者用于收集血样作为用EB病毒的永生化淋巴细胞的来源。
这些永生化的细胞可以作为可更新的来源来制备大量的DNA以备后用，如进行遗传学的研究等等！。
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常用抗凝剂的配制及用法 Prepared on 22 November 2020
在医学实验中常需动物的全身抗凝，采出的全血或血浆有的也需加入适当的抗凝剂抗凝。
对抗凝剂的要求是：用量少、溶解度大、不带进干扰实验的杂质。
一、肝素
（1）肝素抗凝作用原理
肝素的抗凝作用很强,作死亡复苏等实验时,常用它作动物全身抗凝剂，肝素的抗凝作用主要是抑制凝血致活酶的活力，阻止血小板凝聚以及抑制抗凝血酶等作用，从而使血液不发生凝固。
（2）配制和用量
纯的肝素10mg能抗凝65~125 ml血液(按lmg等于125U，10~20U能抗1 ml血液计)。
但由于肝素制剂的纯度高低以及其保存时间长短不等，因而其抗凝效果也不相同。
一般可配成1％肝素生理盐溶液，用时取0．1毫升于试管内，100℃烘干，每管能抗凝5～10ml血液。
也可将抽血注射器用配好肝素湿润一下管壁，直接抽血至注射器内而使血液不凝。
在动物实验作全身抗凝时，一般剂量为：大白鼠2．5～3．0mg/200～300g体质量，兔10mg ／kg体质量，狗5～10mg／kg体质量。
肝素可改变蛋白质等电点，因此当用盐析法分离蛋白质作蛋白质各部分的测定时，不可采用肝素。
市售的肝素钠溶液每毫升含肝素12500U，相当于100mg。
二、草酸盐合剂
（1）原理
草酸胺能使血细胞略为膨大，而草酸钾能使血细胞微缩小，因此草酸铵与草酸钾按3：2比例配置，可使血细胞体积保持不变；加福尔马林则能防止微生物在血中繁殖。
此抗凝剂最适于作红细胞比积测定。
（2）配制方法及用量
草酸铵1．2g、草酸钾0．8g、福尔马林1．0ml、蒸馏水加至100ml每毫升血加草酸盐合剂0．1ml(即相当草酸铵1．2mg，草酸钾0．8mg)。
根据取血量将计算好的草酸盐剂量加入玻璃容器内烤干备用。
如取0．5ml于试管，烘干后每管可使5ml血不凝固。
（3）注意事项
草酸的作用在于能够沉淀血凝过程中所必需的钙离子，而达到抗凝目的。
用时注意加的量应适中，不能过多，以免妨碍去蛋白质血滤液的制取。
不适用于血液内钙或钾的测定，也不能用于血液非蛋白氮测定。
三、枸橼酸钠
常配成3～5%水溶液。
也可直接加粉剂，每毫升血加3～5mg，即可达到抗凝目的。
枸橼酸钠可使钙失去活性，防止凝血。
但其抗凝作用较差，碱性较强，不宜作化学检验之用。
仅可用于红细胞沉降速度测定。
急性血压测定实验所用枸橼酸钠为5～6％溶液。
四、草酸钾
（一）原理和注意事项
草酸钾为最常用的抗凝剂。
其与血液混合后可迅速与血液中的钙离子结合，形成不溶解的草酸钙，使血液不凝固。
常用于非蛋白氮测定，但不适用于测定钾和钙。
草酸盐能抑制乳酸脱氢酶、酸性磷酸酶和淀粉酶的活性，故应注意。
（二）配制及使用方法
取草酸钾10g，加蒸馏水少许使溶解，再加蒸馏水至100ml。
配制成10％水溶液，如每管加则可使5~10ml血不凝。
一般如作微量检验，用血量较少，可配制成2％溶液，如每管加0．1ml可使1~2ml血液不凝。
五、乙二胺四乙酸二钠盐（EDTA）
EDTA对血液中钙离子有很大的亲和力，能与钙离子络合而使血液抗凝。
每可抗凝1 ml血液。
除不能用于血浆中钙、钠及含氮物质之测定外，适用于多种抗凝。