《生化实验技术》综合设计性实验论文
生物化学实验课程教改研究的论文
生物化学实验课程教改研究的论文生物化学实验课程教改研究的论文摘要:针对当前国内高等学校培养创新型急需人才的要求,从着重培养创新能力、探索能力以及分析问题、解决问题的能力出发,此文点评和剖析了目前高校生物化学实验教学课程的现状和问题,对于生物化学实验教学所需的改革进行了初步评议,对实验教学中激发学生的学习积极性和探索创新欲,提高生物化学实验教学质量和高校培养创新型人才有着积极意义。
关键词:生物化学;实验教学;改革;创新众所周知,21世纪是生命科学的世纪,而生物化学是生命科学的基石,也是高等学校中生物医学相关专业的一门基础主干课程和重要的理论课程。
通过必要的基本实验实践,不仅使学生学会基本的专业实验课程操作技能,还通过实验实践验证理论课程学的生化基本知识和规律,为学生以后从事专业相关的工作打基础;同时,学生综合的科学素养和创新能力也得到了锻炼和培养,尤其在培养学生动手能力和科学素养等方面所起的作用是任何其他形式的教与学课程都难以替代的。
可是,多年来传统的旧的教学思想坚持认为实验教学要依附于理论教学并须与理论课程保持一致性,认为实验教学的宗旨应该就是单一地验证理论课程知识和规律并加深理解和巩固理论课程所学知识。
然而,生物化学课程相关的实验技术迅猛发展,新实验方法、新实验操作技术层出不穷,已渗透并应用到生命科学相关的各个学科和研究领域,这些发展势必对生物化学实验课程和教学提出更高的要求。
为此,高等学校必须改革生物化学的教学课程和教学体系,与现代社会发展对高层次人才的爆发式需求相适应。
由于传统观念一直认为生物化学实验教学主要依附于理论教学的思想禁锢,高等院校生物化学的实验教学基本上是一个保守、封闭的体系,多年来实验内容和教学方式一成不变,课堂教学形式更是千篇一律,实行捆绑式教学;考核方式单一、呆板和落后……。
如此的实验课程和教学过程不仅不能满足当前科学技术飞速发展的需要,而且还极大地束缚了学生的实践主动性和科研创造性。
生化检验技术实验报告
一、实验目的1. 掌握血糖测定的原理和方法。
2. 熟悉血糖测定仪器的操作流程。
3. 了解血糖在人体代谢中的重要性。
二、实验原理血糖测定是通过检测血液中的葡萄糖浓度来评估血糖水平。
常用的血糖测定方法有葡萄糖氧化酶法、己糖激酶法和葡萄糖氧化酶-氧电极法等。
本实验采用葡萄糖氧化酶法进行血糖测定。
葡萄糖氧化酶(GOD)催化葡萄糖与氧气反应生成葡萄糖酸和过氧化氢,过氧化氢在过氧化物酶的催化下分解为水和氧气,氧气在电极上还原,产生电流,电流大小与葡萄糖浓度成正比。
三、实验设备与试剂1. 实验设备:血糖测定仪、微量移液器、移液管、一次性采血针、酒精棉球、消毒液等。
2. 实验试剂:葡萄糖氧化酶试剂盒、葡萄糖标准品、蒸馏水等。
四、实验步骤1. 标准曲线绘制(1)准备标准溶液:将葡萄糖标准品用蒸馏水稀释成不同浓度的标准溶液。
(2)按照试剂盒说明书设置血糖测定仪,将标准溶液分别加入测定管中。
(3)开启血糖测定仪,依次测定各标准溶液的血糖浓度,记录数据。
(4)以葡萄糖浓度为横坐标,测定值为纵坐标,绘制标准曲线。
2. 血糖测定(1)用酒精棉球消毒采血部位,用一次性采血针对准静脉,待血液流出后,用消毒液消毒采血针。
(2)用微量移液器吸取适量血液,加入测定管中。
(3)按照试剂盒说明书设置血糖测定仪,将测定管放入测定仪中。
(4)开启血糖测定仪,待测定仪显示血糖浓度后,记录数据。
五、实验结果与分析1. 标准曲线绘制绘制标准曲线,得到线性方程:y = 0.0037x + 0.0035,R² = 0.9987。
2. 血糖测定本次实验测得血糖浓度为4.5 mmol/L。
六、实验讨论1. 本实验采用葡萄糖氧化酶法进行血糖测定,操作简便、快速,准确性较高。
2. 在实验过程中,要注意控制操作误差,如准确配制标准溶液、正确设置测定仪等。
3. 血糖测定对于糖尿病等疾病的诊断和治疗具有重要意义,本实验有助于加深对血糖测定原理和方法的理解。
《生物化学》综合性实验体系的构建与实施
更接近 于临床 , 用 了目前 临床常用的仪器和检测方法, 运 有利 于学生参加 实 习和 工作后进行临床转化。
关键词 : 生化 实验 ; 综合 实验 ; 实验教 学 中 图分 类 号 Q —3 5 3 文献 标 识 码 A 文章编号 10 7 3 (0 0 1 0 7— 7 1 2 1 )9—19— 1 7 0
室从 以下几个方 面做 了大量工作 : 2 1 高度重视 , . 成立 科 研 小组 教研 室 非 常重 视 这项 工
24 完 善《 物 化 学》 . 生 综合 性 实 验教 学 体 系 教研 室 重 新编写 了《 物化 学实验 指 导》 增加 了蛋 白质综 合实 验 、 生 ,
酶的综 合性实验 、 维 素 的综 合性 实 验 、 萝 卜素 的吸 附 纤 胡 层 析等 9个 实验 。使用 了半 自动生化分 析仪 、 自动尿液 半 分 析仪 、 酶标 洗扳机 等 中等 医院常用 仪器 。提高 了学 生 的 实 践能力 , 开拓 了学生 的视野 , 现了教学 内容 的综 合性 、 实 系统性 和完 整性 。实验 内容 和试 验 方法 以及 实 验仪 器 接 近 于临床 , 更适应 于 医学类专业 。
安 徽农 学 通 报 , nu . e. u12 1 1 ( 9 A hi A S iB l 00,6 1 ) .
l9 7
《 物化 学》 合 性 实 验体 系 的构 建 与 实 施 生 综
宋英 明 邹 维 孙 吉凤
( 长春医学高等专科学校基础医学部 , 吉林长春 10 3 ) 30 1
基础。
系统操 作
经过 反复推 敲以及在 教学 中不断 实践 、 断改 不
2 3 对 实验课 程 内容和 技术进 行 了更 新和 重组 .
《生化实验技术》综合设计实验方案设计报告
《生化实验技术与应用》实验设计方案实验项目:水果基因组DNA 的提取与转基因成分分析 专业:生物技术 班级:101 日期:3月1日 一、实验目的:1、掌握提取植物组织基因组DNA 的基本方法。
2、掌握二苯胺法和紫外分光光度法测定DNA 含量的原理和方法。
3、学会转基因植物转基因成分的分析4、学习DNA 的水平式琼脂糖凝胶电泳并学会操作。
5、掌握高速冷冻离心机、微量移液枪、水平电泳仪等仪器设备的使用。
二、实验原理:核酸是生物有机物体重的重要组成成分,在生物体中核酸常与蛋白质结合在一起。
核酸分为DNA 和RNA 两大类,前者主要存在于细胞核内,后者主要存在于细胞质及核仁里。
在制备核酸时,通过研磨破坏细胞壁和细胞膜,使核蛋白被释放出来。
苯酚可使蛋白质变性,蛋白质溶于酚相,DNA 则溶于上层水相。
将氯仿与苯酚混合使用,可减少酚相中因水的存在而造成DNA 的少量溶解。
95%乙醇可使核酸从水相中沉淀出来,用70%的乙醇洗涤可以除一些盐分,经Rnase 降解RNA ,可得较纯的DNA 。
DNA 含量与纯度测定,目前常用紫外吸收法,利用核酸在260nm 有吸收峰,根据公式[DNA(μg /mL)=A260*50*稀释倍数]可计算出核酸DNA 的浓度。
由于蛋白质在280nm 有吸收峰,可根据比值判断DNA 纯度:A260/A280<1.8时,表明蛋白质含量偏高;1.8<A260/A280<1.9时,表明样品较纯;A260/A280>2.0时,表明RNA 或DNA 碎片较多。
二苯胺法定量测定DNA 的原理为:在强酸、加热条件下,可以使DNA 中的嘌呤碱基与脱氧核糖间的糖苷键断裂,产生嘌呤碱基、脱氧核糖与嘧啶核苷酸。
其中,2’-脱氧核糖在酸性环境中成为w-羟基-r-酮基戊醛,此物与二苯胺反应生成蓝色化合物,在595nm处有最大吸收。
DNA在40-400ug范围内光吸收值与DNA 含量成正比。
在转基因技术中,外源基因导入到植物体中时,通常使用花椰菜花叶病毒CaMV35S启动子启动下游编码基因的转录。
生物化学综合性及设计性实验教学的探索
S ONG n - n Fe g ya
( il g p rme to n h n No ma ie st, h o h u Gu n d n , 2 0 1 C i a B o o yDe a t n f Ha s a r l Unv ri C a z o a g o g 5 1 4 , h n ) y
1 开 设 综 合性 、 计 性 实 验 的 必 要 性 设
“ 传授 式” 是验证性实验教学的传统模式 . 实验技术人员做好 实验 前 的所 有准备工作 , 指导教师讲授实验 目的 、 要求 、 原理 、 步骤 、 注意事 项等 , 学生严格按 照实验 指导动手操作 , 得出实验结果完成实验报告 。 在整个 教学过程 中 . 由于学生 的地位相对被 动 . 他们 的主观能动性很 难得 以发挥 . 另外 . 由于验证性实验基本都有 比较明确 的预期结果 , 经 常 出现有些 学生不认真做实验 . 编造实验结果或抄袭他人 实验 报告的 现象 , 常不利于学生科学态度和学术作风的培养 。 非 综合性 、 设计性实 验教 学 . 尤其是设计性实验 . 将学生 由被动接受变为 主动参 与 , 使他们 的思维空 间得 以拓 展 . 自主性设计能力得 以充分体 现 . 是一条 培养学 生创 新能力的重要途径和手段 改革师范院校生物化学实验课程 的教 学模 式 , 尽可能增加综合性 、 设计性实验 的比例 , 有利 于激发学生 的学 习兴趣 、 创新意识和培养创新能力 , 最终提 熟悉实验方案 的制定方法 . 更重要 的是使他 们懂得科研活动 中团结协作 的重要性 [ 2 _ 2 实验室为学 生实验的完成提供基本 的保障条件 .实验操 作 由各 _ 3 小组学生按照 自己的实验方案有序开展 。 学生根据实验 内容 向实验技 术人员领取所需的实验材料 , 分工协作开展实验 。 在实验过程 中, 指导 老师要来 回巡查 . 负责实验监督 . 要求学生 的每一步操 作都要认真 、 规 范. 防止 出现各类意外 . 并及时解决学生实验 中出现 的各种 问题 。 2 实验报告 的撰写 。实验过程 中 , 求学生对 出现 的各 个问题 、 . 4 要 解 决方法 、 实验现象及实验结果都要详 细记 录。 实验完成后 , 师指导 在教 下, 以小组形式对实验结果进行综合分析 , 实验报 告。 撰写
生化检测技术论文
生物检测技术在食品中的应用摘要:随着科技的不断发展和人类文明的进步,我们对世间万物的探求也在继续深入,对我们周围的事物鉴别和检测有了更高的要求,所以,更先进的检测技术应运而生。
生物检测技术的应用极大的保证了机体的健康和安全,对于各种进入人体内的物质,特别是各种药物,必须进行一系列的生物检测。
在本文中,我将总结生物检测技术的在食品中的应用。
并对此技术的应用前景做出一定的阐述和猜想。
关键词:生物检测技术、机体安全、安全性实验、生物效价测定前言在现代社会中,由于人们的视野不断的开阔,对进入我们人体的物质有了更高的要求,尤其是各种药物,不仅要求其要发挥自身功效,而且还要求对人体所造成的伤害最小化。
因为化学检测技术无法鉴别和检测达不到目前人们的检测要求,所以人们发明了生物检测技术。
生物检测(bioassay)技术是利用生物体对被检测物质的特有反应而检测物质的质量和功效的技术。
用于生物检测用的生物体可以是各种微生物、动物和植物,常用的是微生物和某些动物。
生物检测的范围主要包括安全性实验和生物效价测定。
1.安全性实验当外源物质进入人体时,可能会产生某些不良反应,危害机体的健康和安全。
为了保证机体的健康和安全,对于各种进入人体内的物质,特别是各种药物,必须进行一系列安全性实验。
药物的安全性试验应严格按照药典的规定进行。
安全性实验的主要内容包括毒性试验、刺激性实验、溶血试验、热源实验、过敏试验等。
2.生物效价测定生物效价是指某一物质引起生物反应的功效单位。
生物反应是生物体对某一物质的特有反应。
利用生物检测方法检测生物效价的物质主要包括抗生素等生长抑制物质和维生素、氨基酸等生长刺激物质。
食物的成分:食物中一般包含水分、蛋白质、碳水化合物、无机盐类和糖分,对这些成分的检测和含量判定是食品结构分析的主要内容,而特定物质的检测则是针对食品质量和安全性的判断。
例如鱼类食品中降解产生的一磷酸肌苷和次黄嘌呤,能够反映鱼肉的新鲜程度,可以利用黄嘌呤氧化酶制成生物传感器,对鲜度进行评价。
生化实验论文
小鼠肝脏过氧化氢酶的制备与测定小组成员:李朋(10011140010)邱方洲(10011140016)武浩(10011140020)谢黎(10011140022)2010级一大班法医2012年1月3日小鼠肝脏过氧化氢酶的制备与测定过氧化氢酶(Catalase) 是一种广泛存在于生物体内的氧化还原酶,尤其在动物的肝脏、肾脏、红细胞中含量较多,其生物学功能是催化细胞内H2O2分解,防止过多H2O2 对细胞的危害。
人工制备的过氧化氢酶可广泛应用于食品与乳制品业,造纸与印染业,农业与环保业,以及医疗卫生业等多领域。
小鼠肝脏过氧化氢酶分子量约为238KD ,结构上由4个具有相同多肽链的亚基组成,是以铁卟啉为辅基的结合酶,在407nm 波长下有特征性的吸收。
溶于水,几乎不溶于乙醇、氯仿、乙醚等有机试剂,酸性环境下溶解度低易析出,最适温度为37℃,最适pH 值约为7.8。
本实验以小鼠肝脏为原料,根据过氧化氢酶溶解性和大分子等特性,通过组织匀浆、盐析、透析、分子筛层析等步骤,提取纯化过氧化氢酶,并对制备的过氧化氢酶进行蛋白浓度、分子量、米氏常数等测定。
《小鼠肝脏过氧化氢酶的制备与测定》实验方案实验目的熟悉并掌握生化四大技术—离心、层析、比色、电泳。
熟悉并掌握分离纯化小鼠过氧化氢酶和测定其含量的技术和方法。
实验原理匀浆原理:分离纯化某一种蛋白质时,首先要把蛋白质从组织或细胞中释放出来并保持原来的天然状态,不丧失活性,所以要根据所提取蛋白质的性质采用适当的方法将组织和细胞破碎。
过氧化氢酶在乙醇、氯仿等有机溶剂中溶解度很小,而脂质在有机溶剂中溶解度较大,通过加入有机溶剂可实现过氧化氢酶与脂质的分离。
过氧化氢酶在乙醇、氯仿等有机溶剂中稳定性好,不易变性,而某些杂蛋白在有机溶剂中稳定性差,容易变性。
根据上述原理选择0.05mol/L ,pH4.0醋酸-乙醇缓冲液以及氯仿作为匀浆缓冲液,通过匀浆法破碎肝组织细胞,匀浆液离心后脂质分配到有机相中,部分杂蛋白则沉淀下来,而过氧化氢酶主要存在于上清制备过氧化氢酶匀浆盐析透析过氧化氢酶测定米氏常数值测定(Lineweaver -Burk 双倒数作图法)蛋白含量测定(lowry 法)纯度及分子量测定(SDS-PAGE)层析液中,分离出上清液即获得过氧化氢酶的粗提液。
综合设计性生物化学实验教学实践
综合设计性生物化学实验教学实践1选择合适的实验内容设计实用性强、结果可靠稳定、实验材料简单易得的实验内容是关键。
生物化学实验涉及的技术比较多,如提取、离心、破碎、沉淀、膜过滤、层析、电泳、干燥等。
高职卫生院校的学生入学成绩较低,尚未完全摆脱高中时期被动接受的学习模式,为此,我们依据理论知识整合实验项目,且实验涉及内容不能太广泛,不同专业实验侧重点也有所不同。
2充分调动学生主观能动性2.1课前讨论,课堂汇报教师理论课讲解结束后,提前一周给学生布置实验任务,学生查找资料,分小组讨论,自行设计实验方案,教师对其实验方案进行指导,充分调动学生学习热情。
学生需在课堂上展示小组设计方案,包括查找资料、讨论过程、实验准备情况、实验设计与思路、可行性等。
在实验完成后,各小组还需对实验与讨论结果进行总结汇报,以锻炼学生表达能力,展示个人风采。
2.2实验前准备每次实验前,开放实验室,给学生留出2~3天的时间,让学生在实验室准备实验所需试剂,调试所需仪器设备,遇到问题向教师及时请教。
这样就能使学生了解生物化学实验全过程,巩固实验相关技能。
2.3学生参与评价课堂上学生汇报后,让各小组互评,对实验设计、准备、结果进行打分,让学生看到别组实验的优劣及与自己小组的差距,相互学习,形成比、学、赶、超氛围,增加学生学习热情。
3教师给予充分指导在实验准备和实施过程中,教师要给予相应指导,鼓励学生勇于创新、探索,反对相互模仿、抄袭。
如果实验结果不尽如人意,也不要指责学生,应教会其分析、总结。
如果实验需用到较复杂的仪器设备,教师课前单独进行讲解和演示,以保证课堂进度。
如果学生设计的方案过于繁琐,可让学生适当改动,也可让学生课余时间以兴趣小组形式操作一次,并与课堂实验结果进行对比分析。
4评价方式多样化传统的实验教学评价主要以教师评价学生操作过程和实验报告为主,不能全面反映学生参与实验过程的情况。
综合设计性实验旨在培养应用型人才,以培养学生综合素质为核心,强化过程性评价。
生化综合性设计实验论文
中央民族大学生命与环境科学学院 生物化学综合性设计实验报告2013年11月25日CTAB 法提取菠菜DNACTAB-Method of DNA Extraction in SpinachCTAB法提取菠菜DNA1.摘要DNA是生命的遗传物质,英国学者F. Griffith[1](1928年)以Stretococcus pneumonia (肺炎链球菌,旧称“肺炎双球菌”)对小鼠进行活体实验,为发现DNA是遗传物质打下了坚实的基础。
1952年,A. D. Hershey 和M. Chase发表了证实DNA是噬菌体的遗传物质基础的著名实验——噬菌体感染实验。
至此,生命科学研究进入一个崭新的研究时代——DNA 时代。
为进一步认识和了解DNA的本质和特征,研究人员研究出多种分离提取DNA的方法,如氯化铯法、SDS法和一管法等, 并在动、植物和微生物的DNA 研究中运用。
然而这些DNA提取方法有较高的成本以及较大的污染性。
随着这一技术逐步改进,如Sagha-iM aroof等研发出十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)法用于提取植物DNA等, 使得DNA的提取相对较为快捷, 提取的质量提高。
在众多的DNA 提取方法中, 发现CTAB 法是一种较为理想的提取植物DNA 的方法。
根据实验室的设备以及药剂的具体情况,我组选择以菠菜为原料,利用操作简便且效果较好的CTAB法进行DNA的提取实验。
2.实验目的(1)学习CTAB法提取植物DNA并掌握DNA的琼脂糖凝胶电泳法;(2)利用十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)法提取植物叶片中DNA的操作方法提取菠菜DNA 以及凝胶电泳法检验DNA的提取结果。
3.实验原理(1)采用机械研磨的方法破碎植物的组织和细胞,由于植物细胞匀浆含有多种酶类(尤其是氧化酶类),其对DNA的抽提产生不利的影响,所以在抽提缓冲液中需加入抗氧化剂或强还原剂(如巯基乙醇)以降低这些酶类的活性。
在液氮中研磨,材料易于破碎,并减少研磨过程中各种酶类的作用。
面向综合素质培养的生物化学综合设计型实验教学改革的探索与实践
面向综合素质培养的生物化学综合设计型实验教学改革的探索与实践摘要:针对生物类专业具有综合性和应用性的特点,在国家精品课程“生化实验技术”中设计并实施了综合设计型实验项目,从内容设计,教学方法和实施、评价方式等多角度进行了探索和实践,在培养学生的综合实践能力和创新意识等方面取得了良好的效果。
关键词:生物化学;综合设计型实验;综合素质生物化学实验是生物类专业的重要基础实验课程,也是生物技术实现产业化的关键实验。
掌握生化分离纯化的一般技术和实验方法将有助于提高学生的综合素质,而综合设计型实验对于高等院校创新性人才的培养具有十分重要的作用。
传统的生物化学实验内容,以验证型实验为主,教学方法也采用“照单抓药”式的灌输,导致实验教学内容和教学方法不利于学生对知识整体性和系统化的把握,不能发挥学生的主动性和创造性,忽视了学生综合素质和创新能力的培养。
因此,生物化学实验教学的改革势在必行。
一、教学目标设计生物化学实验课程的教学目标是培养学生的生物实验综合素质与能力,验证并深化所学的理论知识,使学生分析问题和解决问题的能力得到训练。
并充分体现以学生为主体,培养学生的自主创新能力,使学生通过实践,理解相关理论知识,将各类知识信息进行新的组合,创造出新的方法和新的思路,提高学生的科学实验与实际动手操作能力,为学生今后更好地完成科研与生产实践打下坚实基础。
基于以上的目标和设想,我们对生物化学实验课程进行了一系列的涉及实验内容、实验教学方法及评价方式等方面的改革创新。
二、实验内容设计思路生物化学实验涉及的技术比较多,如破碎、离心、沉淀、膜过滤、层析、电泳、干燥、结晶等。
原先占实验主体部分的基本验证型实验项目和实验理论部分一般按实验项目和单元进行介绍,各项实验的知识有一定的独立性,逻辑联系不紧密,实验过程中留给学生发挥的空间不足,实验结果雷同,不容易激发学生的学习兴趣。
因此,我们将生物化学实验课程中大于75%的课时更新为综合设计型实验。
生化实验的设计实验报告
一、实验目的1. 掌握从生物组织中提取DNA的基本原理和方法。
2. 学习使用酚-氯仿法进行DNA的粗提取和纯化。
3. 熟悉DNA的鉴定方法。
二、实验原理DNA是生物体内的重要遗传物质,具有独特的碱基序列。
在提取过程中,利用DNA与蛋白质、RNA等物质的溶解性差异,通过适当的化学试剂和操作步骤,将DNA从细胞中分离出来。
三、实验材料与仪器1. 材料:鸡血、无菌生理盐水、无水乙醇、氯化钠、酚-氯仿、NaCl溶液、DNA标准样品等。
2. 仪器:离心机、玻璃棒、量筒、烧杯、滴管、吸管、移液器、酒精灯、显微镜等。
四、实验步骤1. 鸡血采集:取鸡血2ml,加入10ml无菌生理盐水,充分混匀。
2. 细胞裂解:取2ml鸡血混合液,加入等体积的酚-氯仿,充分混匀后静置5分钟。
3. DNA沉淀:取上述混合液,加入2.5倍体积的无水乙醇,充分混匀后静置10分钟。
4. DNA纯化:将上述混合液转移到离心管中,离心5分钟(8000r/min),弃去上清液。
5. DNA溶解:将沉淀用50μl NaCl溶液溶解,混匀。
6. DNA鉴定:取少量溶解后的DNA溶液,加入2μl DNA标准样品,观察颜色变化。
五、实验结果1. 在实验过程中,观察到鸡血混合液与酚-氯仿混合后分层,上层为红色,下层为无色。
2. 在DNA沉淀过程中,观察到白色沉淀形成。
3. 在DNA溶解过程中,观察到溶液颜色由白色变为无色。
4. 在DNA鉴定过程中,观察到溶液颜色与DNA标准样品颜色相似。
六、实验结论1. 成功从鸡血中提取了DNA。
2. 酚-氯仿法是提取DNA的有效方法。
3. DNA在生物组织中的提取具有实际应用价值。
七、实验讨论1. 实验过程中,酚-氯仿的加入有助于细胞裂解和DNA的提取。
2. 无水乙醇的加入有助于DNA的沉淀。
3. NaCl溶液的加入有助于DNA的溶解。
4. 实验过程中,注意操作规范,避免污染。
5. DNA提取过程中,温度、pH值等条件对实验结果有影响。
生物化学论文范文怎么写
生物化学论文范文怎么写生物化学是一门综合性较强的学科,学习起来也有一定的难度。
下面是店铺为大家整理的生物化学论文,供大家参考。
生物化学论文范文篇一:《生物化学实验课程化改革》引言生物化学实验是生物工程学中的重要学习内容和探究手段,生物化学实验课程教育直接关系着学生对于生物化学的研究和探索精神。
但是传统的生物化学实验课程实验单一,重复性强,注重实验结果而不是实验过程,重视理论得到验证而不是重新探索研究[1]。
如此,学生的在生物化学中的创新能力和探索精神得不到良好的培养条件。
1生物化学实验课程的现状1.1教育观念落后目前大多数生物化学实验课程是以理论为主,实验为辅的教学理念。
在进行实验前学生已经知道实验结果和实验原理,在动手进行实验的过程中不过是重复书本上的知识,因此许多学生对于做实验没有一个明确的目标。
由于种种原因实验室不具备开放性,这使得许多有心的学生没有办法进行相关的实验研究,从另一方面也可以体现即便是生物化学实验课程,真正做实验的机会也是有限的。
生物化学课程的教学方法单一,还是以课堂老师讲解为主要教学方式,课堂气氛沉闷,学生的能动性也弱。
这样的教学方式直接导致的是学生的自主创新能力和自我学习能力偏弱,在生物化学方面也没有做够的探索方式和探索精神。
对于实验评估也没有一个规范的标准,通常只要实验结果与理论相同即视为通过。
1.2实验室的投入建设力度不够一所学校只有1~2个实验室是目前学校大多数的情况。
实验室已经满足不了学校学生对于实验室的需求。
实验室单一,综合运用性和设计性项目的实验室不多。
实验室里的器材均为较为传统的,没有做到及时更新,致使在进行一些较为新颖的课题时无法进行相关实验。
大多数学校的实验室只有在课程需要的情况下才会被允许使用。
这样就会造成实验室在同一时间被使用的频率频繁,实验室根本就满足不了两个班级或几个班级同时使用的状况。
并且学生在等待实验室的时间中慢慢忘记之前所学习的相关实验步骤和实验理论,致使在实验过程中没有一个清晰的思路和明确的目标。
“基础生理生化实验”综合性实验教学设计与探讨
20 0 8年 5月
“ 础 生理 生化 实验 " 合 性 实验教 学设 计 与 探讨 基 综
龙 绛 雪 周 小 慧 苏冬梅 邢 伟 一 孙 吉康
( 中南林 业科 技大学 生命 科学 与技 术学 院 ,湖 南 长沙 摘 4 00 ) 10 4
要 :“ 基础 生理 生化 实验 ” 一 门实践 性 、 是 综合 性很 强的课 程 。本文 以“ 物 生长 素物 质对插枝 生 植
新 性 的要 求 . 课题 组 在 本实 验 课 程 中开 设 了“ 物 植
生 长激素类 物质 对插枝 生根 的影 响 ” 合性 实验 。 综
l 设 计 本 实 验 项 目 的 意 义
的种 类 及不 定 根 的形 成 机 制 等 多个 领 域 的 理论 问
题 . 需 配 置 生 长 调 节 剂 溶 液 、 择 插 枝 、 取 插 又 选 剪 穗 、 长 素溶 液 处 理 、 生 扦插 、 后 管 理 、 验 结 果 长 插 实
研究怎样 把 理论 知识 与生产实 践联 系起 来 , 使所 学理 论转 化 为生 产
力 , 培 养 的学 生 成 为受 社会 欢 迎 的人 才 , 该课 使 是
为此 . 本课 题 组结 合学 生专 业 、 教学 要求 、 实践 课 时 , 计 了“ 物 生 长 素类 物 质 对插 枝 生 根 的影 设 植
文 献标 志码 : A
文章编 号 :6 2 7 8 ( 0 80 — 0 5 0 1 7 — 3 X 2 0 )3 0 6 — 4
为 了全面培 养学 生科 学实 验 的综 合素 质 . 强 增 创新 意 识 。 优化 知识 结 构 ,9 9年 我 校实 行实 验 课 19 程改革 , “ 物生 理学 ” “ 物化 学 ” 将 植 与 生 实验 教学 部 分从 理论 部 分 独立 出来 . 并为 “ 础生 理 生 化 实 合 基 验 ”成 为与 “ 物 生理 学 ” “ 物化学 ” . 植 、生 配套 的一 门 课 堂实践课 l 1 】 。目前 ,基 础生 理生 化实验 ” 我校林 “ 是
生化实验技术实验设计
生化实验技术实验设计实验设计题目:高效液相色谱-质谱联用技术测定大米中农药的残留课程:生物学实验技术概述专业:生物化学与分子生物学学号:2015116105姓名:杨洁舒高效液相色谱-质谱联用技术测定大米中农药的残留一、方案必要性与可行性分析我国是水稻种植大国,大米是我国人民的主食,占口粮消费的63%以上。
大米除被制成米饭直接食用外,还被加工成米粉、甜点及酒精饮料等。
我国大米人均年消费量在140kg以上。
水稻生产中为了保证水稻的高产,往往不可避免地需要使用各种农药。
据报道,在农药的使用过程中,真正起作用的仅占喷施量的0.1%,其余99.9%的农药都分散于环境中,中国每年受农药污染的农田面积达到6.67×106hm2。
因此,在大米的进出口中,世界各主要农业大国都对大米的农药残留制定了严格的限量标准。
研究大米中农药残留的检测方法,既是保障人类健康的需要,又是促进进出口贸易的需要。
为了保证水稻的产量,种植者施用大量的化学农药,不仅造成环境污染,而且直接影响大米的食用安全,威胁人们的健康。
鉴于上述原因,世界各国严格规定了包括大米在内的食品中农药最大残留限(MRLs)和每日最大摄入量。
目前大部分实验室监测食品中农药残留的方法是采用经典的气相色谱法,选择性检测器包括电子捕获检测器(ECD)、氮磷检测器(NPD)和火焰光度检测器(FPD),然而这些检测器限制了农药残留的检测范围。
其原因是萃取共存物的干扰存在假阳性和不准确性,用单一方法检测呈阳性后,还必须做确证试验。
此外,经典的预处理方法操作复杂,耗时且溶剂消耗量大,因此,有必要研究新的样品预处理及检测方法。
随着联用技术的日趋完善,高效液相色谱-质谱联用技术(HPLC-MS)逐渐成为最热门的分析手段之一。
特别是在分子水平上可以进行蛋白质、多肤、核酸的分子量确认,氨基酸和碱基对的序列测定及翻译后的修饰工作等,这在HPLC-MS联用之前都是难以实现的。
HPLC一MS 作为已经比较成熟的技术,目前国内外己在生化分析、天然产物分析、药物和保健食品分析以及环境污染物分析等许多领域得到了广泛的应用。
综合实验论文(5篇)
综合实验论文(5篇)综合试验论文(5篇)综合试验论文范文第1篇1.1试验内容支配综合性试验会提前2周通知同学,集中介绍试验目的、意义和要求,以及试验室现有仪器设备等状况。
试验操作支配同学每4人为1组,以对乙酰氨基酚为原料药,要求同学依据所学学问制备片剂,并对制备的片剂进行制剂通则检查和含量测定。
检查内容包括外观、片重差异、崩解时限、脆碎度检查等内容,含量测定采纳分光光度法测定吸光度,依据百分汲取系数计算含量。
1.2试验实施过程试验前要求同学查阅资料,进行试验总体设计,拟定试验方案,预备试验材料等内容。
依据内容制定出时间进度方案,主要包括制剂制备、检查和含量测定进度方案。
在正式试验前,会集中进行同学汇报,每组派代表进行讲解,做到每个成员都参加试验。
在试验过程中,要求同学遵守试验室规章制度,仔细操作,做好数据记录。
同学在试验中遇到问题,主要由同学自己思索解决问题,老师可以进行指导,目的是为了提高同学发觉问题、解决问题的力量。
试验结束时,每组还需对该次试验进行总结,包括试验中遇到的问题、如何解决的、试验体会、试验产品展现等内容。
1.3试验成果评定主要依据整个试验过程中,同学的综合分析力量、解决问题力量提高程度来评价。
试验成果主要包括试验汇报状况(占20%)、试验课堂表现(占30%)、试验结果(占30%)、试验报告内容(占20%),依据该比例评定综合试验成果。
2设计性试验教学方法2.1试验内容支配设计性试验是在试验老师指导下,由同学进行试验设计并确立的试验项目。
设计性试验需要提前1个月通知同学查阅相关资料,将同学4~5人分为1组,按设定的试验目的进行试验设计。
内容主要包括:文献资料的查阅、方源和处方设计、剂型的选择、工艺流程、质量掌握方法讨论、稳定性讨论等内容[3]。
2.2试验实施过程老师对每组同学的书面试验设计报告先进行批阅,并在正式试验前支配时间进行试验设计汇报,重点是汇报设计的科学性、可行性、新奇性等内容。
生化实验论文
摘要:不同的蔬菜中硝酸盐含量一般是不相同的,在不同的环境条件下所生长的同一种蔬菜的硝酸盐含量也不同,因此,研究蔬菜中硝酸盐的含量对我们的身体健康非常重要。
硝酸盐本身毒性不大,但在人体内可转化为亚硝酸盐。
亚硝酸盐是强致癌物质并可引起高铁血红蛋白症。
我们都知道,蔬菜中硝酸盐含量是很高的,人体摄取的硝酸盐约80%来自蔬菜,蔬菜中硝酸盐含量一般是有这样的规律:根类>薯类>叶菜类>葱蒜类>豆类>茄果类。
近年来,随着大量施用氮肥,蔬菜硝酸盐污染已引起重视。
测定和比较不同蔬菜中的硝酸盐含量可鉴定其品质为食用提供参考。
关键词:蔬菜硝酸盐氨缓冲液蛋白质沉淀剂前言:硝态氮是植物生长最重要的氮源之一,也是蛋白质合成的原料。
特别是叶菜类中含有大量的硝酸盐,人吃下后在人体内可转化为亚硝酸盐,在调制和研制过程中也可能转化为亚硝酸盐,而亚硝酸盐是一种强致癌物质并可引起高铁血红蛋白症,对人体健康构成威胁。
因此,硝酸盐含量又成为蔬菜及其加工品的重要指标,近年来,随着氮肥的大量施用,硝酸盐污染也越来越严重。
因此测量和比较各种蔬菜中的硝酸盐含量,不仅能反映蔬菜的氮素供应情况,而且对检测蔬菜及其加工品的品质也有重要意义。
1材料与方法:1.1材料试剂材料:胡萝卜,小瓜,莲花白,黄瓜,土豆,白菜。
试剂:氨缓冲液(Ph=9.6~9.7),蛋白质沉淀剂Ⅰ(铁氰化钾),蛋白质沉淀剂Ⅱ(硫酸锌),吸附剂(活性炭)。
1.2 仪器设备电子分析天平,紫外光光度分光计,研磨设备,石英比色皿。
1 .3材料处理:供试材料为云南农业大学农贸市场购买所得,在测量之前洗净晾干。
白菜和莲花白是取内部新叶作为研究材料,小瓜、黄瓜是皮内部分作为研究材料,白菜为绿色叶片部分,胡萝卜、马铃薯均为地下块根的皮内部分作为研究材料。
所有材料均为鲜样采样。
1 .4实验方法:硝酸盐含量的测定方法为紫外吸收法。
称取样品1g,放入乳钵中研磨成匀浆,用300ml 蒸馏水冲入100ml 容量瓶中,同时用蒸馏水30ml 放入另一100ml 容量瓶中做空白校正,两瓶分别加5ml 氨缓冲液(ph=9.6),30ml 蒸馏水,0.5克粉末状活性炭,振摇静置20分钟,加入蛋白质沉淀剂溶液I,II 各1ml 后充分混合,蒸馏水定容到100ml (V ),摇匀,放置5-10min,定量滤纸过滤;取滤液用石英比色皿在紫外分光光度计219nm 处测定吸光度(A )。
生化综合实验项目的设计及应用
生化综合实验项目的设计及应用作者:王芳吴文惠蒋霞云来源:《现代农业科技》2016年第10期摘要生物化学实验课程发展迅速并且渗透到生命科学的各个领域,在生物科学学科中的地位非常重要。
其中DNA的提取、酶切及电泳就是典型的综合型实验,对学生的动手能力和发散思维的培养都有重要意义。
通过对原有实验项目的优化和思路的创新,改进新的实验项目,增加了酶和质粒的理论知识和酶切的实验技术,使学生更加全面地学习和理解相关知识和实验操作。
经过2次预做实验,对学生在实验中遇到的问题进行分析改进,为学生今后的进一步学习深造提供基础,为学有余力的学生提供更大的学习空间,真正地实现了师生间教学与科研的互动。
关键词 DNA提取;酶切;电泳;综合型实验;实验教学中图分类号 G40 文献标识码 A 文章编号 1007-5739(2016)10-0328-02随着社会现代化的发展,对于人才的要求也越来越丰富,不仅要具备扎实的理论基础,更要有熟练的动手能力和创造性思维。
这就对各高校在学生的培养方面,提出了新的要求和期望。
实验课程教学既能培养学生严谨求实的科学态度,独立探索知识的动手能力,又能使学生巩固和验证理论知识,是高等教育提高学生综合素养和实践能力的重要途径[1]。
生物化学是生命科学领域中一门重要的基础学科,生物化学实验课程既能让学生验证基本理论知识,又能掌握基本操作技术,为后续的专业课学习和应用打下了基础[2]。
生物化学实验课程发展迅速并且渗透到生命科学的各个领域,以上海海洋大学为例,每年有14个专业20个班级的生物化学实验课程,是所有生物以及生物相关学科的专业基础课,在生物科学学科中的地位非常重要。
对于生物化学理论和实验课程的改革与探索一直在进行[3-4],经多年努力,上海海洋大学的生物化学实验课程也形成了一套独具特色的体系,并获得了市级精品课程和优秀实验项目等荣誉。
我校的生物化学实验课程由验证型实验和综合型实验两大类组成,涵盖了氨基酸、蛋白质、核酸和酶等生化理论知识。
生化实验论文
细胞色素C的制备及测定作者冯潇摘要本实验采用沉淀猪心抽提液中大部分蛋白质,再加入试剂提纯的方法制备细胞色素C。
采用测消光值法算其产量、产率,采用紫外光吸收差法测其蛋白质含量、纯度,采用分光光度吸收值法测其光吸收峰和光度吸收值。
制备的细胞色素C产率为46产量不高,制备方法有待改进,但纯度尚可,细胞色素C在蛋白质中的纯度为30.294%。
实验测得,氧化型细胞色素C的光吸收峰误差不大,几乎与文献值吻合。
关键字:细胞色素C、分光光度吸收值、紫外光吸收差、消光值0 引言细胞色素C是生物氧化体系中细胞色素类群的一种, 广泛存在于一切真核生物的细胞中,在线粒体内膜起电子传递作用。
在医药上是治疗组织缺氧及其引起的一系列症状的重要药物。
目前我国有不少厂家从猪心肌中制备细胞色素C, 并用于临床。
【1】一般来说,组织的细胞色素C 含量与它们的呼吸活性大致成平行关系,在心肌与其他剧烈运动的肌肉中含量最为丰富,猪心便宜易得,故本实验选用猪心为原料提取纯化细胞色素C。
关于细胞色素C 的结晶制备, 文献上已报导了许多方法【2】、【3】、【4】,本实验采用沉淀猪心抽提液中大部分蛋白质,再加入试剂提纯的方法制备细胞色素C。
在细胞色素C的研究和生产中, 需要经常测定其产率、纯度和光吸收值, 并以此作为考查左产品合格与否的一个指标。
我国药典【4】规定用百分含铁量法测定细胞色素C的纯度,这是经典的测定方法。
该法虽较明确可靠, 但手续繁杂, 工作量大,费时较多。
另外,分光光度法也是细胞色素C含量测定的普遍方法【5】。
本实验采用测消光值法算其产量、产率,采用紫外光吸收差法测其蛋白质含量、纯度,采用分光光度吸收值法测其光吸收峰和光度吸收值。
1 材料和方法1.1材料1.1.1原料猪心,购于下沙农贸市场1.1.2 试剂试剂:10%氢氧化钠(100g/L);硫酸铵粉末;20%三氯乙酸(200g/L);三氯乙酸溶液(0.145mol/L);饱和硫酸铵溶液;铁氰化钾(10mmol/L)饱和连二亚硫酸钠溶液;pH7.4磷酸钠缓冲液(0.145mol/L)(试剂均为分析纯)1.2仪器:……1.3 实验方法1.3.1 细胞色素C的制备方法取猪心若干,剔除脂肪,称重,绞碎。
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《生化实验技术》综合设计性实验论文班级组别:生物技术122学号:2012013456姓名:钮群崛指导教师:汪财生谭志文斯越秀完成日期:2014-6-26海藻活性多糖的分离纯化摘要:海藻多糖属一类海藻提取物,应用价值很高,如:琼脂、卡拉胶、褐藻酸盐在工业上已长期使用。
海藻多糖作为药物和药物中间体有具有潜在的功能。
利用酶法去除多糖中的蛋白质并且运用酶法辅助提取多糖;采用苯酚—硫酸法,借助紫外分光光度计进行对多糖含量的测定。
关键词:海藻多糖,层析,透析,Sevag法,DEAE1前言多糖类物质是除蛋白质和核酸之外的又一类重要的生物大分子。
早在60年代,人们就发现多糖复杂的生物活性和功能。
多糖是普遍存在于自然植物界中的由许多相同或不同的单糖以α-或β-糖苷键所组成的化合物,其分子量一般为数万甚至数百万,是构成生命活动四大基本物质之一,与维持生命功能密切相关。
大部分植物多糖不溶于冷水,在热水中呈粘液状,遇乙醇能沉淀。
多糖具有抗氧化性、抗病毒性、反互补特性,大量药理及临床研究表明,多糖类化合物是一种免疫调节剂,它具有明显的抗补体活性和促进淋巴细胞增殖作用,能激活免疫受体,提高机体的免疫功能,在用于癌症的辅助治疗中,具有毒副作用小、安全性高、抑瘤效果好的优点。
多糖的纯化,就是将存在于粗多糖中的杂质去除而获得单一的多糖组分。
一般是先脱除非多糖组分,再对多糖组分进行分级。
常用的去除多糖中蛋白质的方法有:Sevag法、三氟三氯乙烷法、三氯醋酸法,这些方法的原理是使多糖不沉淀而使蛋白质沉淀,其中Sevag 方法脱蛋白效果较好,它是用氯仿:戊醇或丁醇,以4:1比例混合,加到样品中振摇,使样品中的蛋白质变性成不溶状态,用离心法除去。
本实验采用Sevag法(氯仿:正丁醇=4:1混合摇匀)进行脱蛋白,用DEAE-纤维素层析柱进行纯化,然后合并多糖高峰部分,浓缩后透析,冻干,得多糖组分。
DEAE纤维素阴离子柱层板分离多糖的原理主要是其可吸附离子型物质,比如蛋白质、酸性多糖等,而作为大多数的中性多糖则可顺利流出,从而去粗取精、达到分离的目的。
当然,DEAE的细度很细,也可起到分子筛的作用,但其分离效果会和柱高、洗脱溶剂、粒径的关系很大,效果并不很好,且在大量水冲的情况下,中性多糖基本均可洗脱下来。
多糖被浓硫酸水合产生的高温迅速水解,产生单糖,并迅速脱水生成醛糖衍生物,在这种强酸条件下与苯酚反应生成橙色衍生物,该衍生物在波长490nm处和一定浓度范围内,吸光度与糖浓度呈线性关系,采用比色法对多糖含量进行测定。
DEAE纤维素阴离子柱层板分离多糖的原理主要是其可吸附离子型物质,比如蛋白质、酸性多糖等,而作为大多数的中性多糖则可顺利流出,从而去粗取精、达到分离的目的。
当然,DEAE的细度很细,也可起到分子筛的作用,但其分离效果会和柱高、洗脱溶剂、粒径的关系很大,效果并不很好,且在大量水冲的情况下,中性多糖基本均可洗脱下来。
2材料与方法2.1材料与设备2.1.1实验材料干燥的海藻粉末2.1.2试剂及配制方法平衡缓冲液:0.01mol/L Tris-HCl,pH7.2:用小烧杯称取1.211g Tris,用50ml 蒸馏水溶解,用50%盐酸调节pH7.2,移至1000ml容量瓶,并定容。
洗脱液:A:0.1mol/L NaCl,0.01mol/L Tris-HCl,pH7.2:用小烧杯称取5.85g NaCl,用0.01mol/L Tris-HCl,pH7.2溶解,并定容至1000ml。
B: 0.5mol/L NaCl,0.01mol/L Tris-HCl,pH7.2: 用小烧杯称取29.25g NaCl,用0.01mol/L Tris-HCl,pH7.2溶解,并定容至1000ml。
标准葡萄糖溶液(40ug/ml):称取0.4g葡萄糖,用蒸馏水定容至100ml,准确移取1ml定容后溶液于100ml容量瓶中,并定容,此时的溶液浓度为40ug/ml。
6%苯酚溶液:取苯酚100 g,加铝片0. 1 g和碳酸钠0. 05 g,常压蒸馏,收集182℃馏分。
称取该馏分(100%苯酚)6 g,置100 ml容量瓶中,加蒸馏水至刻度,摇匀后,置棕色试剂瓶中,冰箱中冷藏储存备用。
单糖标准品,浓硫酸,氯仿,正丁醇,乙醇(95%),磷酸二氢钠等,均为分析纯。
2.1.3实验器材DEAE52,旋转真空蒸发仪,摇床,离心机,层析柱2.6cm*40cm,自动液相分析仪,玻璃板,分析天平,恒温水浴锅,紫外分光光度计,精密pH计等2.2实验方法2.2.1粗多糖的提取热水浸提法(水提):称取海藻粉末10g,采用热水浸提法(原料:水=1:5),在70~80摄氏度下,浸提1小时,重复提取四次,合并浸提液。
真空旋转蒸发浓缩一倍体积。
2.2.2脱色处理以1%的比例加入活性炭,搅拌均匀15min后过滤。
滤液中加入3倍体积的乙醇搅拌,沉淀为多糖和蛋白质的混合物,即粗多糖。
2.2.3除蛋白粗多糖溶液中加入Sevag法试剂(氯仿:正丁醇=4:1),置恒温振荡器中振荡过夜,使蛋白质充分沉淀,离心(3500r/min,15min),收集水层,除去蛋白层和有机溶剂层,水层继续重复该步骤到无游离蛋白为止,最终得到脱蛋白的羊栖菜多糖样品水相,真空旋转蒸发浓缩,加入4倍体积的95%乙醇沉淀多糖。
丙酮沉淀,冷冻干燥。
2.2.4浓缩透析取样品0.2g溶于10ml 0.01mol/L Tris-HClpH7.2中(上样的时候用2ml),上样用A:0.1mol/L NaCl,0.01mol/L Tris-HClpH7.2;B: 0.5mol/L NaCl,0.01mol/L Tris-HClpH7.2,C:1.0mol/L NaCl0.01mol/L Tris-HClpH7.2,进行线性洗脱,分部收集(4ml/管),合并多糖高峰部分,浓缩后透析,冻干。
2.2.5多糖纯度的测定分别吸取0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4ml的标准葡萄糖液,各以蒸馏水补至2.0ml,然后加入6%苯酚1.0ml及浓硫酸5.0ml,静置10min,摇匀,室温放置20 min后于490nm波长下测光密度,以2.0ml水按同样显色操作作为空白。
以横坐标为糖微克数,纵坐标为光密度值,作标准曲线。
精确称取0.1g样品,配置成40ug/ml的糖溶液。
吸取1ml上述糖溶液,蒸馏水1ml,然后加入6%苯酚1.0ml及浓硫酸5.0ml。
重复上述步骤50次。
静置10min,摇匀,室温放置20 min后于490nm波长下测光密度,作出样品吸光值图。
再把其值代入葡萄糖标准方程中,算出含糖量。
作出葡萄糖标准曲线图,作出样品吸光值图后,测其吸光值。
再把其值代入葡萄糖标准方程中,算出含糖量。
3结果与分析(1)多糖含量测定(2)多糖活性测定根据标准曲线的到峰1多糖浓度为:8.7×10-3mg/ml , 峰2为:1.7×10-4mg/ml ,峰3为:5.2×10-3mg/ml ,峰4为:3.2×10-2mg/ml 对第4个峰进行海藻多糖的活性测定 S A( % ) = 1- ( A i - A j ) / A 0 ×100%=92.88% 4.结论对分离等到的4种多糖进行含量的分析其中第4个峰的多糖含量最高,DPPH 的分析结果为4种糖都有清除自由基的能力其中第4个峰清除自由基的能力最强。
参考文献:[1] 陈彦,谢继锋,金先菊等.海藻多糖的分离纯化和组成分析[J]. 《安徽农业科学》,2003,31(5):710-717.[2] 王长海.海洋生化工程概论[M]. 化学工业出版社,2004:121-127.[3] 王安利,胡俊荣. 海藻多糖生物活性研究进展[J]. 海洋科学,2002,26(9):36-39.定性PCR检测转基因大豆摘要:“转基因食品”(GM FOOD)如今已经在世界上多个国家成了环境和健康的中心议题。
并且,它还在迅速分裂着大众的思想阵营:赞同它的人认为科技的进步能大大提高我们的生活水平,而畏惧它的人则认为科学的实践已经走得“太快”了。
转基因食品,就是指科学家在实验室中,把动植物的基因加以改变,再制造出具备新特征的食品种类。
许多人已经知道,所有生物的 DNA上都写有遗传基因,它们是建构和维持生命的化学信息。
通过修改基因,科学家们就能够改变一个有机体的部分或全部特征。
关键词:PCR、转基因大豆,核酸1前言PCR基本原理是以单链DNA为模板,4种dNTP为底物,在模板3’末端有引物存在的情况下,用酶进行互补链的延伸,多次反复的循环能使微量的模板DNA得到极大程度的扩增。
在微量离心管中,加入与待扩增的DNA片段两端已知序列分别互补的两个引物、适量的缓冲液、微量的DNA膜板、四种dNTP溶液、耐热Taq DNA聚合酶、Mg2+等。
反应时先将上述溶液加热,使模板DNA 在高温下变性,双链解开为单链状态;然后降低溶液温度,使合成引物在低温下与其靶序列配对,形成部分双链,称为退火;再将温度升至合适温度,在Taq DNA聚合酶的催化下以dNTP为原料,引物沿5’→3’方向延伸,形成新的DNA片段,该片段又可作为下一轮反应的模板,如此重复改变温度,由高温变性、低温复性和适温延伸组成一个周期,反复循环,使目的基因得以迅速扩增。
CTAB(hexadecyltrimethylammonium bromide,十六烷基三甲基溴化铵),是一种阳离子去污剂,具有从低离子强度溶液中沉淀核酸与酸性多聚糖的特性。
在高离子强度的溶液中(>0.7mol/L NaCl),CTAB与蛋白质和多聚糖形成复合物,只是不能沉淀核酸。
通过有机溶剂抽提,去除蛋白,多糖,酚类等杂质后加入乙醇沉淀即可使核酸分离出来。
在生物体中核酸常与蛋白质结合在一起,以核蛋白的形式存在;在制备核酸时,通过研磨破坏细胞壁和细胞膜,使核蛋白被释放出来。
2材料与方法2.1材料与设备2.1.1实验材料转基因大豆,非转基因大豆标样2.1.2试剂及配制方法1.0.1mol/lTris-硼酸-EDTA缓冲液(TBE缓冲液),pH8.32.0.02mol/lEDTA,PH.8.03.异戊醇(24:1,V/V)4.氯仿(24:1,V/V)5.70%乙醇6.0.6ml-20℃的异丙醇7.TE溶液(10mmol/L Tris,1mmol/L EDTA ,pH8.0)8.Tris-硼酸-EDTA缓冲液(TBE缓冲液),pH8.3:称取10.78gTris,5.50g硼酸,9.0.93g EDTA-Na2溶于去离子水,定容至1000mL。
10.琼脂糖: 1g 溶于TBE缓冲液中加热配成100mL。
11.0.05%溴酚蓝-50%甘油溶液(5×Loading Buffer ):取一定量的0.1%溴酚蓝水溶液,与等体积甘油混合而成。