多环芳烃 色谱 HPLC 液相色谱 液相色谱图 液相分析 检测
高效液相色谱-荧光检测法测定土壤中的多环芳烃
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［ #- ］
#" 色谱条件的选择和优化
) ) 在实际测定中， 液相色谱的泵压会随着进样次 数的增多而逐 渐 升 高， 泵 压 的 升 高 会 使 得 "#$% 各 组分的保留时 间 有 所 漂 移， 最 终 导 致 "#$% 各 组 分 不能在相应的波长下出峰。本方法就上述问题进行 了研究， 发现合理地优化液相色谱条件， 特别是选择 合适的色谱柱、 流动相梯度洗脱程序和检测波长程 序等， 可以减缓 因 泵 压 升 高 而 导 致 的 "#$% 各 组 分 保留时 间 的 漂 移， 使 #" 种 "#$% 组 分 在 ($ )*+ 内 都能得到较好 的 分 离。 所 建 立 的 方 法 重 现 性 较 好， 对测定土壤中痕量、 微量 "#$% 具有灵 敏度 高、 检出 限低等优点。 # ! !" 色谱柱的选择 ) ) "#$% 是 由 ! 个 或 ! 个 以 上 的 苯 环 以 线 性、 角 极 性 很 弱， 目前 状或簇状稠 合 在 一 起 的 化 合 物［ #/ ］， 常用非极性键合固定相的反相色谱柱来分离。在众 多的 "#$% 系列专用柱中， 通过比较试 验， 最终 选择 了 7.@*.+ ,B@;)’0B9@ " "#$ 专 用 色 谱 柱， 柱填料 为表面键合 , #- 烷 基 的 硅 胶。 这 种 填 料 的 色 谱 柱 的 最大优点是可以 使 用 梯 度 淋 洗， 柱 效 高， 分 离 度 好， 分离时间短， 适于 分 离 多 环 芳 烃 这 类 非 极 性 及 极 性 较弱的低极性化合物［ !$ ］。本实验 的结果 表明， 采用 #" 种 "#$% 组分的分离效果较佳。 该色谱柱， # ! #" 梯度洗脱程序的优化 ) ) 为了使分子结构相差很大的 "#$% 在适 宜的时 间内全部 出 峰， 实 验 中 采 用 流 动 相 梯 度 洗 脱 程 序。 考虑到色谱 柱、 梯度泵的最大承受压力 （最大压力 ， 对梯度洗脱程序进行了重点优化。经 )!"$ =". ） 过反复调节流动相 乙 腈 和 水 的 体 积 比， 最终把乙腈 的初始体积分 数 设 为 ’$ N ， 之后再随洗脱时间的增
HPLC的常用术语解释
HPLC的常用术语解释高效液相色谱法(HighPerformanceLiquidChromatography\HPLC)又称"高压液相色谱'、"高速液相色谱'、"高分别度液相色谱'、"近代柱色谱'等。
它是在生化和分析化学中常用的柱层析仪。
接下来我为大家整理了HPLC的常用术语解释，希望对你有关怀哦!第一部分色谱曲线1、色谱图(chromatogram)：色谱柱流出物通过检测器系统时所产生的响应信号对时间或流淌相流出体积的曲线图，或者通过适当的〔方法〕观看到的纸色谱或薄层色谱斑点、谱带的分布图。
2、(色谱)峰(chromatographic peak)：色谱柱流出3、峰底(peak base)：峰的起点与终点之间的连接的直线4、峰高(h ，peak height)：色谱峰最大值点到峰底的距离(图1 中的BE)。
5、峰宽(W ，peak width)：在峰两侧拐点(图1 中的F ，G)处所作切线与峰底相交两点的距离6、半高峰宽(W h/2 ，peak withd at half height)：通过峰高的中点作平行于峰底的直线，此直线与峰两侧相交两点之间的距离(图1 中的HJ)。
7、峰面积(A ，peak area)：峰与峰底之间的面积8、拖尾峰(tailing peak)：后沿较前沿平缓的不对称的峰。
9、前伸峰(leading peak)：前沿较后沿平缓的不对称的峰。
(又叫伸舌峰、前延峰)10、假峰(ghost peak)：除组分正常产生的色谱峰外，由于仪器条件的转变等缘由而在谱图上出现的色谱峰，即并非由试样所产生的峰。
这种色谱峰并不代表具体某一组分，简洁给定性、定量带来误差。
(又叫鬼峰)11、畸峰(distrorted peak)：样子不对称的色谱峰，前伸峰、拖尾峰都属于这类。
12、反峰(negative peak)：也称倒峰、负峰，即出峰的方向与通常的方向相反的色谱峰。
多环芳烃的测定液相色谱法
附 2：
液相色谱操作规程
一、电源检查 各设备是否联接好
二、仪器开机 1、P680 电源接通后,根据实验要求（国家标准方法）设定参数。 1）、流动相流速 按 Flow 键后，按数字键输入，按 Enter 键确认。 2）、 混合比例 按 A/B/C/D 键后，在压力显示窗口显示所选通道的混合比例。按数字键输入，按 Enter
1.0ml/min。如果分离效果不理想，适当增加流动相中水的比例，或考虑谱柱温箱，柱箱温度为 35℃。
6.1.4 检测器波长设置
6.1.4.1 荧光检测器：本方法首先进行激发和发射光谱的扫描，根据所获光谱图，找出
各化合物的特征激发和发射波长，见表 1。
表 1 多环芳烃最佳的荧光激发和发射波长
2、启柱温箱，根据要求设定温度。 3、开启检测器，氘灯不会自动地开。灯的开/关必须通过CHROMELEON TM执行，为了获 得最佳的结果，灯必须在分析前30分钟开。 注意: 在关灯的命令发出后，再次开灯须等待5分钟以上的时间。否则灯会因为过热而损坏。 4、开启电脑，进入变色龙工作站，通过电脑联机。 5、预热一小时。 三、手动进样 将系统内气泡完全排出。设定工作站进样方法与各项参数，抽出一毫升左右样品，闭合 进样阀，将样品注射进阀门，然后尽量快速打开进样阀，在采样时间内等待工作站采集样品 数据，做出色谱图。 四、色谱图处理 根据国家标准方法的要求，可采用内标法、外标法、单点法、多点法，并进行积分处理， 算出结果。
PSHs
激发波长λex，mm
发射波长λex，mm
FLU
226
449
BbF
302
452
BkF
302
431
BaP
297
405
Bper
最新整理HPLC的常用术语解释
H P L C的常用术语解释高效液相色谱法(H i g h P e r f o r m a n c e L i q u i d C h r o m a t o g r a p h y\H P L C)又称高压液相色谱、高速液相色谱、高分离度液相色谱、近代柱色谱等。
它是在生化和分析化学中常用的柱层析仪。
接下来小编为大家整理了H P L C的常用术语解释，希望对你有帮助哦!第一部分色谱曲线1、色谱图(c h r o m a t o g r a m)：色谱柱流出物通过检测器系统时所产生的响应信号对时间或流动相流出体积的曲线图，或者通过适当的方法观察到的纸色谱或薄层色谱斑点、谱带的分布图。
2、(色谱)峰(c h r o m a t o g r a p h i c p e a k)：色谱柱流出3、峰底(p e a k b a s e)：峰的起点与终点之间的连接的直线4、峰高(h，p e a k h e i g h t)：色谱峰最大值点到峰底的距离(图1中的B E)。
5、峰宽(W，p e a k w i d t h)：在峰两侧拐点(图1中的F，G)处所作切线与峰底相交两点的距离6、半高峰宽(W h/2，p e a k w i t h d a t h a l f h e i g h t)：通过峰高的中点作平行于峰底的直线，此直线与峰两侧相交两点之间的距离(图1中的H J)。
7、峰面积(A，p e a k a r e a)：峰与峰底之间的面积8、拖尾峰(t a i l i n g p e a k)：后沿较前沿平缓的不对称的峰。
9、前伸峰(l e a d i n g p e a k)：前沿较后沿平缓的不对称的峰。
(又叫伸舌峰、前延峰)10、假峰(g h o s t p e a k)：除组分正常产生的色谱峰外，由于仪器条件的变化等原因而在谱图上出现的色谱峰，即并非由试样所产生的峰。
这种色谱峰并不代表具体某一组分，容易给定性、定量带来误差。
水质 多环芳烃的测定 液液萃取和固相萃取高效液相色谱法HJ478-2009
HJ 中华人民共和国国家环境保护标准HJ 478－2009代替GB 13198—91水质多环芳烃的测定液液萃取和固相萃取高效液相色谱法Water quality—Determination of polycyclic aromatic hydrocarbons—Liquid-liquid extraction and solid-phase extraction followed by highperformance liquid chromatographic method2009-09-27发布 2009-11-01实施环境保护部发布HJ478—2009中华人民共和国环境保护部公告2009年第47号为贯彻《中华人民共和国环境保护法》，保护环境，保障人体健康，现批准《水质多环芳烃的测定液液萃取和固相萃取高效液相色谱法》等十八项标准为国家环境保护标准，并予发布。
标准名称、编号如下：一、《水质多环芳烃的测定液液萃取和固相萃取高效液相色谱法》（HJ 478—2009）；二、《环境空气氮氧化物（一氧化氮和二氧化氮）的测定盐酸萘乙二胺分光光度法》（HJ 479—2009）；三、《环境空气氟化物的测定滤膜采样氟离子选择电极法》（HJ 480—2009）；四、《环境空气氟化物的测定石灰滤纸采样氟离子选择电极法》（HJ 481—2009）；五、《环境空气二氧化硫的测定甲醛吸收-副玫瑰苯胺分光光度法》（HJ 482—2009）；六、《环境空气二氧化硫的测定四氯汞盐吸收-副玫瑰苯胺分光光度法》（HJ 483—2009）；七、《水质氰化物的测定容量法和分光光度法》（HJ 484—2009）；八、《水质铜的测定二乙基二硫代氨基甲酸钠分光光度法》（HJ 485—2009）；九、《水质铜的测定 2,9-二甲基-1,10菲啰啉分光光度法》（HJ 486—2009）；十、《水质氟化物的测定茜素磺酸锆目视比色法》（HJ 487—2009）；十一、《水质氟化物的测定氟试剂分光光度法》（HJ 488—2009）；十二、《水质银的测定 3,5-Br2-PADAP分光光度法》（HJ 489—2009）；十三、《水质银的测定镉试剂2B分光光度法》（HJ 490—2009）；十四、《土壤总铬的测定火焰原子吸收分光光度法》（HJ 491—2009）；十五、《空气质量词汇》（HJ 492—2009）；十六、《水质样品的保存和管理技术规定》（HJ 493—2009）；十七、《水质采样技术指导》（HJ 494—2009）；十八、《水质采样方案设计技术指导》（HJ 495—2009）。
高效液相色谱-荧光法测定固体废物中15种多环芳烃(PAHs)
高效液相色谱-荧光法测定固体废物中15种多环芳烃（PAHs） 引言多环芳烃（Polycyclic Aromatic Hydrocarbons，PAHs）是分子中含有两个或两个以上苯环的化合物的总称。
迄今已发现有200多种，其中相当部分具有致癌性，如苯并[α]芘、苯并[α]蒽等。
在已知的500多种致癌物中，有200多种和PAHs有关，PAHs已成为癌症的代名词。
PAHs广泛存在于人类生活的大气、土壤、水域等自然环境以及食用的食品中，种类多，数量大。
鉴于多环芳烃的极大危害性，环境中多环芳烃的检测十分重要。
本文参考国家环境保护标准《HJ892-2017 固体废物 多环芳烃的测定 高效液相色谱法》，应用日立Chromaster高效液相色谱仪配荧光检测器，对15种常见的多环芳烃（不包含苊烯）进行了测定。
1.仪器配置日立Chromaster高效液相色谱仪：CM5110输液泵CM5260 自动进样器CM5310 柱温箱CM5440荧光检测器2.色谱条件色谱柱：Eclipse PAH, 4.6 mm × 250 mm, 5 μm流动相：乙腈和水，梯度洗脱程序见表1。
表1 梯度洗脱时间程序柱 温：25 ℃检测器：荧光检测器检测波长：采用时间程序，激发和发射波长及对应的化合物见表2。
表2 波长时间程序及对应的化合物3.实验结果使用2.中色谱条件分别对标准溶液和样品进行测定。
图1和图2为多环芳烃标准溶液（浓度分别为500 μg/L和5μg/L）的色谱图。
图1. 多环芳烃标准溶液（500 μg/L）色谱图即使PAHs的浓度很低（5μg/L）时，色谱图仍然基线平坦，峰型尖锐，且15种多环芳烃的分离度良好，这充分体现了Chromaster荧光检测器的高灵敏度。
图2. 多环芳烃标准溶液（5 μg/L）色谱图将多环芳烃标准品配置成一系列标准溶液，浓度分别为25、50、100、200、500 μg/L。
分析完成后，得到15种多环芳烃的标准曲线，如下图3所示。
多环芳烃(PAHs)检测方法
信标检测分析技术服务中心始终着眼于客户的需求，我们一直致力于材料的研究，我们的经验与知识多环芳烃（PAHs ）检测方法信标（Symbol ）检测分析技术服务中心提供包括汽车内饰件、石化产品、橡胶、塑胶、润滑油、防锈油等产品的多环芳烃的检测分析服务。
1标准检测方法目前GC-FID 、GC-MS 和HPLC-UV/FL 是检测PAHs 最常用的方法。
气相色谱具有高选择性、高分辨率和高灵敏度的特性，而且由于多环芳烃的热稳定性，用质谱（如EI 源）作为检测器时，能够得到大的分子离子峰和很少的碎片离子，所以用GC-MS 测定时能够得到很高的灵敏度，与GC-FID 相比，GC-MS 在定性方面更准确。
相对于气相色谱，液相色谱可以更好地测定低挥发性的多环芳烃，并能够有效分离多环芳烃的同分异构体。
在分离复杂的PAHs 母体化合物及样品净化方面有着相当的优势。
在PAHs 的标准检测方法中以GC-MS 为检测手段的主要有：针对大气的EPA TO-13A 、ISO 12884:2000(E)、ASTMi D6209-98(2004)等方法；针对饮用水的EPA 525.2Rev 2.0方法；针对废水的EPA 1625方法；针对固体废气物的EPA 8270D ；针对土壤的EPA 8275A 和ISO 18287:2006方法。
以LC-UV/FL 为检测手段的标准方法主要有：针对大气的ISO 16362:2005；针对饮用水的EPA 550、ISO 79811:2005、ISO 79812:2005、ISO 17993:2002和我国的GB13198-91；针对固体废气物的EPA 8310；针对土壤的ISO 13877:1998。
以GC-FID 作为检测器的有：EPA 8100方法。
2新的检测方法2.1化学电离源质谱法测定多环芳烃由于GC-MS 在定性方面具有很好的准确性，该方法是标准方法比较认可的检测手段。
在标准方法中GC-MS 测定多环芳烃都是用的电子轰击离子源（EI 源）。
使用液相色谱荧光检测器快速检测多环芳烃,确保海产品的安全
使用液相色谱荧光检测器快速检测多环芳烃，确保海产品的安全方法优势筛选海产品中的多环芳烃（PAHs）用时不到4分钟通过更快、更简单的样品制备取得准确的结果通过使用荧光检测进行选择性测定沃特世解决方案配有荧光检测器的ACQUITY UPLC@ H-Class系统DisQuETM基质分散样品制备试剂盒Empower™ 2软件关键词多环芳烃，PAHs，QuEChERS，荧光检测，食品安全目的证实DisQuE基质分散样品制备试剂盒和UPLC®-FLR的组合能够提供一种适合海产品中PAHs检测的快速筛选工具。
引言以往重大漏油事件，如：1989年瓦尔迪兹号（ExxonValdez）漏油和2010年4月墨西哥湾漏油事件，已经引起人们对出自这些地区的海产食品质量的担忧。
鱼、甲壳类动物以及软体动物可能会接触或摄食石油，从而给消费者带来潜在的健康风险。
在石油中发现的多种化合物中，一组重要的化合物是多环芳烃（PAHs）。
美国环境保护局（US EPA）已经将这些化合物确定为重点污染物1。
美国食品药品管理局（US FDA）还确定了多个方面的问题，包括鱼类中苯并（a）芘的含量达3.5 x 10-2mg/kg，牡蛎中菲和蒽的总含量达2.0 x 103mg/kg。
2如果PAHs的含量达到关注水平的一半，则必须进行确证实验分析2。
为避免食用受污染的海产食品并尽可能减小对海产食品业的影响，需要采用一种快速筛选法对这些令人担忧的化合物进行分析。
我们在这里证明了通过使用.DisQuE基质分散样品制备试剂盒（QuEChERS）进行简单萃取后，配有荧光检测器的ACQUITY UPLC H-Class系统可用不到4分钟的时间完成一次PAHs分析。
试验LC条件系统：带大容量流动池（LV FC）的ACQUIT Y UP LCH-Class色谱柱： PAH 4.6 x 50 mm，3μm柱温： 35℃进样量： 10μL采样率： 20点/秒检测：采用程序定时控制荧光检测波长变化软件： Empower 2流动相A： Milli-Q 水流动相B：甲醇，Fisher最优级流动相C：乙腈，Fisher最优级标准品： PAH认证标准，AccuStandard M 8310流速： 2.0 mL/min梯度程序：时间流速 %A %B %C 梯度线型（分钟）（mL/min）0.00 2.0 30 70 02.25 2.0 0 70 30 63.50 2.0 0 0 100 63.60 2.0 30 70 0 6样本制备用食品加工机按Ramalhosa等人3描述的方法对鱼肉块（比目鱼）、带壳虾以及带水的去壳牡蛎分别进行均质化处理。
环境中多环芳烃的检测方法综述
5 .气相色谱法(GC)
❖ 气相色谱法是以气体为流动相的色谱法，
❖ 分类：
气-固色谱(GSC)
❖ 按固定相的聚集状态 气一液色谱(GLC)
一般填充柱
❖ 按柱的粗细 毛细管柱
❖ 主要优点：是分离效率大大提高。可用GC测定的多 环芳烃至少已有20多种。
❖ 缺点：
①操作比较复杂，使用高压气作为流动相，有一定的 危险性，且对测定物质的理化特性有一定要求。
一、了解多环芳烃
❖ 别名：多核芳烃 英文缩写：PAHs
❖ 多环芳烃是一类最早发现且数量最多的具有 “三致性”的环境污染物，其污染面广，来 源多，一直是环境领域的重点关注对象 致癌
❖ 三致性 致畸 致基因突变
❖ 自然来源：火山爆发、❖ 大气中PAHs存在形式：气 森林植被和灌木丛燃 态、吸附到飘尘上
6. SFC
❖ SFC是以超临界流体作为色谱流动相的色谱．能通 过调节压力、温度、流动相组成多重梯度，选择最 佳色谱条件。
❖ SFC既综合了GC与HPLC的优点，又弥补了它们的 不足，可在较低温度下分析分子量较大、对热不稳 定的化合物和极性较强的化合物．可与大部分GC、 HPLC的检测器联用，还可与红外（FTIR)、MS联 用，极大地拓宽了其应用范围。许多在GC或HPLC 上需经衍生化才能分析的有机化合物．都可用SFC 直接测定。
②通过废水灌溉、大气降尘 等多种途径PAHs，进入土 壤。
二、多环芳烃的检测方法
1.高效液相色谱法(HPLC) 2 .毛细管电泳分析法 3 .气相色谱／质谱法(GC／MS) 4. 薄层扫描法 5 .气相色谱法(GC) 6. SFC 7 .荧光光度法
1.高效液相色谱法(HPLC)
❖ 高效液相色谱(HPLC)法是近30年来发展起来 的一项新的仪器分析技术，该技术具有速度 快、灵敏度高的特点。现已逐步应用于物质 分析的许多方面。
六种特定多环芳烃的测定高效液相色谱法
HZHJSZ0066 水质六种特定多环芳烃的测定高效液相色谱法HZ-HJ-SZ-0066水质高效液相色谱法1 范围本方法规定了测定水中多环芳烃(PAH)的高效液相色谱(HPLC)法本方法适用于饮用水湖库水苯并(b)荧蒽苯并(a)芘茚苯(1,2,3-cd)芘六种多环芳烃的测定提取液通过弗罗里硅土柱用丙酮加二氯甲烷混合液脱附PAH后本方法对六种PAH通常可检测到ng/L水平本法用弗罗里硅土柱层析净化分离2 试剂和材料2.1 高效液相色谱流动相为水和甲醇的混合溶液分析纯要求有足够低的空白电渗析水或蒸馏水在测定的化合物检测限内未观察到干扰2.2.1 二氯甲烷(CH2Cl2)Ôڲⶨ»¯ºÏÎï¼ì²âÏÞÄÚ²»³öÏÖÉ«Æ׸ÉÈÅΪºÏ¸ñ同2.2.1·ÖÎö´¿注可采用附录中两种办法中的任一种进行净化分析纯加热2h5H2O)2.2.6 弗罗里硅土(Florisil)É«²ã·ÖÎöÓÃ加热2hÓÃË®(2.1.2)调至含水量为11%²ãÎöÓÃ活度为Brockmann´ïµ½将氧化铝加热至550± 20冷却至200~250移入放有高氯酸镁的干燥器内即得活度为Brockmann ÔÚ¸ÉÔïÆ÷ÄÚ¿É´æ·ÅÎåÌì100目活化4h分析纯注因此操作时必须极其小心溶剂萃取物多环芳烃可随溶剂一起挥发而沾附于具塞瓶子的外部被多环芳烃污染的容器可用紫外灯在360nm紫外线下检查浓硫酸洗液中浸泡4h·À»¤Ò·þÓùÌÌ廯ºÏÎïÅä¶à»··¼Ìþ±ê׼Ʒ²»ÄܽøÐйÌÌå¶à»··¼Ìþ±ê×¼ÎïΪӫÝì±½²¢(b)荧蒽茚并(1,2,3-cd)芘及苯并(ghi)等六种采用固体标准物质配制标准储备液2.2.10.2 用固体多环芳烃配制标准储备液０．１ｍｇ溶解于50~70mL环已烷(2.2.1)中０．１ｍＬ若用市售溶液配制标准储备液使标准储备液的浓度各为200ìg/mL的单化合物溶液冰箱中在10mL容量瓶中加入各种PAH储备液(2.2.10.4) 1用甲醇稀释至标线标准液保存在42.2.10.4 标准工作溶液取不同量的混合PAH标准溶液(2.2.10.3)ÅäÖƳɼ¸ÖÖ²»Í¬Å¨¶ÈµÄ±ê×¼¹¤×÷ÈÜÒº´øÓ«¹âºÍ×ÏÍâ¼ì²âÆ÷µÄ¸ßЧҺÏàÉ«Æ×ÒÇ3.1.1 恒流梯度泵系统填料为Zorbax 5ìODS, 柱长250mm3.1.3 荧光检测器激发波长280nmÓ«¹â¹â¶È¼Æ¼ì²âÆ÷Ó¦Óм¤·¢ÓõÄÉ«É¢¹âϵͳºÍ¿ÉÓÃÂ˹âƬ»òÉ«É¢¹âѧϵͳµÄÓ«¹â·¢É䲿·Ö¿É¼û¹â¼ì²âÆ÷¿Éµ¥¶ÀʹÓÃ3.1.5 记录仪3.1.6 微量注射器１０１００及500ìL3.2 采样瓶3.3 振荡器配备自动间歇延时控制仪3.4.1 分液漏斗玻璃活塞不涂润滑油３．４．３ 层析柱长500mm3.4.3.2 样品预处理层析柱内径10mm玻璃活塞不涂润滑油的玻璃柱Ｄ浓缩瓶带刻度带磨口玻璃塞Ｄ蒸发瓶 ３．４．６ Ｋ三球3.4.7K¶þÇò3.4.8量筒 ３．５ 玻璃毛或玻璃纤维滤纸加热1h±£´æÔÚ¾ßÈûÄ¥¿ÚµÄ²£Á§Æ¿ÖÐÔÚ100冷却后4试样制备4.1 样品的性质4.1.1 样品名称4.1.2 样品状态4.1.3 样品稳定性4.2 水样采集和储存方法4.2.1 水样采集采样前不能用样品预洗瓶子防止采集表层水在采样点采样及盖好瓶塞时不留空气要在每升水中加入80mg硫代硫酸钠(2.2.5)除氯水样应放在暗处冰箱中保存萃取后的样品在40天内分析完毕摇匀水样可增减)手摇分液漏斗安装分液漏斗于振荡器架上(3.3)È¡Ï·ÖҺ©¶·分出下层水相留待进行第二次萃取3.4.2ÔÙÓÃ50mL环已烷对水样进行第二次萃取环已烷萃取液并入同一碘量瓶中至少放置30min4.3.2 萃取液的净化可以不经柱层析净化4.3.2.2 地表水及工业污水用柱层析净化在玻璃层析柱(3.4.3.2)的下端加入3mL环已烷(2.2.1)润湿柱子 2.2.6 3.4.9用环已烷制成匀浆净化地表水的柱净化污水的柱放出柱中过量的环已烷至填料的界面从层析柱(4.3.2.1)的上端加入已干燥的环已烷萃取液用柱已烷洗碘量瓶中的无水硫酸钠三次环已烷洗涤液亦加入层析柱被吸附在柱上的PAH用丙酮(2.2.2)和二氯甲烷(2.2.1)的混合溶液解脱污水用75mL (15mL 丙酮+60mL二氯甲烷)脱附Ｄ蒸发瓶(3.4.5)的K ¼ÓÈëÁ½Á£·Ðʯ(3.6)待浓缩将KÔÚ65~70从水浴锅上移下KÀäÈ´ÖÁÊÒÎÂÓÃÉÙÁ¿±ûͪϴÖù¼°Æä²£Á§½Ó¿Ú¼ÓÈëÒ»Á£Ð·Ðʯ在水浴锅中如上述浓缩留待HPLC分析甲醇二氯甲烷及丙酮等是易燃的有机溶剂5操作步骤5.1 调整仪器安装高效液相色谱仪预热运转至获得稳定的基线355.1.2 流动相组成85%水＋１５％甲醇100%甲醇视柱的性能可采用下列方式的一种进行洗脱5.1.3.1 恒溶剂洗脱等浓度洗脱以60%B泵+40%A泵的组成洗脱 以3%B/min增量至成为96%B+4%A泵的组成以8%B/min减量至成为60%B泵+40%A泵的组成使流动相组成恒定5.1.4 流动相流量或按柱的性能选定流量5.1.5.1 荧光检测器(3.1.3)波长的选择六种PAH在荧光分光光度计特定的条件下最佳的激发和发射波长如表1表１ 六种多环芳烃最佳的荧光激发和发射波长 化合物激发波长ëex nm荧蒽365 462苯并(b)荧蒽302 452苯并(k)荧蒽302 431苯并(a)芘297 450或430苯并(ghi)302 419或407茚苯(1,2,3-cd)芘300 500水样中含茚并(13ëem=450nm较好２ｃｄ）芘的荧光强度较高=430nmemb. 荧光计检测器em=460nm为宜>370nm下测定em在254nm下检测PAHÒà¿ÉÒÔ°ÑÓ«¹âºÍ×ÏÍâÁ½ÖÖ¼ì²âÆ÷´®ÁªÊ¹ÓÃ5.1.6.1 放大使谱图在记录纸量程内0.25cm/min5.2.2 标准样品在线性范围内用混合PAH标准溶液(2.2.10.3)配制几种不同浓度的标准溶液5.2.2.2 高效液相色谱法中使用标准样品的条件两者的响应值也要相近相对标准偏差<10%5.2.2.3 使用次数若某一化合物的响应值与预期值间的偏差大于10%5.2.3 校准数据的表示可得一条通过原点的直线可用平均比值或响应因子代替标准曲线来计算测定结果以注射器人工进样5~25mLÓÃÊÔÑù(4.3.2.3)润湿微量注射器(3.1.6)的针头及针筒抽取样品迅速注射样品至HPLC的柱头5.3.2 记录5.3.2.1 放大和纸速5.3.2.2 组分的色谱峰记下色谱峰的保留时间及对应的化合物记下漂移值不同填料的色谱柱下图为两种不同检测器串联的16种PAH 标准色谱图图2为荧光分光光度计在ëex =286 nm¶à»··¼Ìþ±êÑùŨ¶ÈÊ®ÁùÖÖ»¯ºÏÎï½ÔΪ2ìg/mL图1 十六种PAH 标样的HPLC 紫外谱图 图2 十六种PAH 标样的HPLC 荧光谱图5.4.2 定性分析5.4.2.1 各组分的洗脱次序图1和图2为十六种PAH 标准在Zorbax ODS 柱的HPLC 图 2.苊稀 4.菲6.荧蒽8.苯并(a)蒽+10.苯并(k)荧蒽12.二苯并(a, h)蒽１４．茚并(13-cd)芘以试样的保留时间和标样的保留时间相比较来定性用一个化合物保留时间标准偏差的三倍计算设定的窗口宽度可用加标样使峰高叠加的方法测定各组分荧光激发和发射谱图与对应标样的荧光图对比的办法来帮助鉴证化合物以峰最大值到峰底的垂线为峰高通过峰高的中点作平行峰底的直线两点之间的距离为半高峰宽等于峰底乘半高峰宽X iìg/mL标样中组分i 进样量对其峰高(或峰面积)的比值或ng/mm2B imm萃取液浓缩后的总体积V i ìL水样体积 6 结果计算si t i i i V V V B A X ⋅⋅⋅=6.1 定性结果根据标准色谱图各组分的保留时间6.2 定量结果6.2.1 含量的表示方法以ìg/L 表示见表2¼û±í3ÒÔHPLC 最灵敏档噪音的五倍作为仪器的检出限表2 不同实验室测定的精密度(再现性)实 验 室 编 号 PAH 项 目 1 2 3 4 5 6 7 测定平均值% 2 6 4 10 15 13 3 荧蒽 测定次数 3 6 3 6 6 66测定平均值11%16 12 7 8 22 11 3 苯并(b)荧蒽 测定次数3 6 3 6 6 6 6 测定平均值%3 6 7 10 16 苯并(k)荧蒽 测定次数3 6 3 6 6 测定平均值%5 86 4 15 17 3 苯并(a)芘 测定次数3 6 3 6 6 6 6 测定平均值% 10 6 茚苯(1,2,3-cd)芘测定次数 4 6 测定平均值%4 9 7 4 12 19 8 苯并(ghi) 测定次数 3 636666注1空格表示未检出或分不开表3 各实验室准确度(地表水加标回收率)测定汇总实验室编号PAH 项目 1 2 3 4 5 6 7 加标量% 70 67 92.3 98 59 90 94 加标量% 98 81.7 101 86 109 106 94 加标量% 91 86 97 82 84加标量% 80 90 93 93 72 62 93 加标量% 83 86 1加标量% 96 91 87 79 93 86 95 注1°´±½²¢(ghi)计算结构及其在自然界的分布（补充件） 多环芳烃几乎存在于所有的水中沉积物)所吸附世界卫生组织拟定了饮用水中表列的六种特定多环芳烃总的最高可接受的水平为200ng/L各种不同水中地下水最高达500ng/L废水最高达100ìg/L附录 Ｂ 环已烷的净化方法（补充件） B1 浓硫酸净化将环已烷与浓硫酸(2.2.9)共振摇经无水硫酸钠(2.2.4)干燥后进行蒸馏先加入再从顶端加入20g干燥硅胶(2.2.8)Ó÷ÖҺ©¶·´ÓÖù¶¥¶ËÂýÂý¼ÓÈë»·ÒÑÍéÔÚÒ»°ãÇé¿öÏÂÒ»Ö§Öù¿É´¿»¯2.5L环已烷就必须停止过柱。
植物油中15种多环芳烃的高效液相色谱测定方法
植物油中15种多环芳烃的高效液相色谱测定方法目的建立植物油中15种多环芳烃的中性氧化铝小柱固相萃取—高效液相色谱检测方法。
方法植物油经正己烷溶解后过中性氧化铝固相萃取小柱净化，Waters PAH 4.6×250mm色谱柱进行分离，乙腈-水梯度洗脱，流速1.5ml/min，进样量10ul，柱温30，荧光检测器检测，外标法定量。
结果15种多环芳烃混合标准溶液在浓度为0.01-0.50ug/mL的范围内，在荧光检测器下呈良好的线性关系，该方法的检出限为0.1-1.5ug/kg之间，样品的加标回收率在62.14%-120.35%之间，RSD在0.91%-4.32%之间。
结论本实验所用方法具有样品前处理简单，检测方法高效快速，灵敏度高，准确性好等优点，能够满足植物油中多种多环芳烃含量的检测。
标签：多环芳烃；植物油；高效液相色谱法；食品安全Abstract：Objective To establish a method for simultaneous determination of 15 PAHs in plant oil by SPE-HPLC.Methods The edible vegetable oil was dissolved in n-hexaneand，cleaned up with neutral alumina SPE cartridges. The 15 PAHs was carried out by waters-PAHs column （4. 6 mm ×250 mm）with a gradient elution using acetonitrile-water as mobile phase at a flow rate of 1. 5 ml /min，the column temperature was 30 ℃，and the injection volume was 10 μl. Detection was carried out by a fluorescence detector with external standard.Results The 15 PAHs solution was a good linear relationship at a concentration within a range of 0.01-0.50ug / mL，The LOD was in the range of 0. 1 ～1.5 μg /kg with average recovery ranging from 62.14% to 120.35%. The RSD was in the range of 0. 91% ～4.32 0%.Conclusions The method had the advantages of simple pretreatment，high sensitivity and accuracy，which could be applied to the determination of the 15 PAHs in plant oil.Keywords：PAHs ；Edible vegetable oil ；HPLC；Food safety多环芳烃是一组由两个或两个以上苯环和稠环链接在一起的芳香族化合物及其衍生物，来源于工业生产、有机物热解或不完全燃烧等，为持久性有机污染物[1]。
高效液相色谱法分离测定土壤中的多环芳烃
高效液相色谱法分离测定土壤中的多环芳烃
（） ａ 芘。苯并 （ 芘、 ｅ ） 苯并 （） ａ 蒽、荧蒽、
９ ０二甲基－， 苯 并蒽、 ，－ ｌ １－ ２ 苯并（ｈ） 、０ ｇ ｉ ２－ 甲基胆蒽等均为购买试剂。分别用苯溶，配 成２ 毫克／ 毫升的原液。 使用前再用苯稀释。
（ 三）操作过程
目前，国内外测定大气、水体、食品中 的Ｐ ＡＨ报道较多〔 ６，而对土壤 Ｐ Ｈ的 ２ 〕 － Ａ 分离测定报道尚少。１８年，我们曾建立了 ９０
析、色谱分析。其标准差与变异系数见 表
２ 。表２ 结果表明，本方法重现性良好，除 Ｂ Ｐ的 变异系数 在 １． ａ ３ ％以外，苊、芘、 ２
市土壤的提取液，点板后观察湿度 对 Ｐ Ｈ Ａ 与其它杂质分离的影响。当板的湿度过大， 展开后在紫外光下观察，可见荧光带随着展 开剂的前沿移动，几个带叠加在一起，积聚
Ｘｉ Ｃ ｏｇｇ ＆ Ｙ ｎ Ｚ ｉｙｎ ，Ｉ ｓ ｔｔ ｏ ｅ ｎ－ｅ ｈ ａ ｙ ｈ－ｏｇ ｎｔ ｕｅ ｉ ｆ Ｆ ｒｓｒ ａ ｄ ｅ ｏｏｙ Ａｃｄｍ ａ ｎｃ，Ｓ ｅ－ ｏｅｔｙ Ｐ ｄ ｌｇ， ａ ｅ ｉ Ｓ ｉ ｎ ｉ ａ ｈｎ
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Ａ ｐ ，ａ ａｄ ｃｒｔ Ｈ Ｌ ｍ ｔ ｄ ｓ ｌ ｆ ｔ ａ ｕａ ｉ ｅ ｓ ｎ ｃ ｅ Ｃ ｅ ｏ ｍ Ｐ ｈ ｈｓ ｎ ｖｌ ｅ ｆ ｑａｔｉ ａｄ ａｔａ ａ ｂｅ ｄ ｅ ｐｄ ｕｌａｏ ｎ ｑ ｎ ｔ ｅ ｅ ｏ ｏ ｒ ｉ ｔｎ ｕ ｉ － ｔｎ ｐｌ ｙｌ ａｏ ａ ｃ ｒｃｒｏｓ Ｈ） ｉ ｏ ｏ ｃｃｃ ｍ ｔ ｈｄｏ ｂｎ （Ａ ｏ ｆ ｙ ｉ ｒ ｉ ｙ ａ Ｐ ｉ ｓｉ Ｓｉ ａ ｐ ｓ ｒｅｔ ｃｄ ｔ ｄ ｈ ｒ－ ｎ ｌ ｏ ｓｍ ｌ ｗ ｅ ｒ ｔ ｗ ｈ ｌ ｏ ｏ． ｌ ｅ ｅ ｘ ａ ｅ ｉ ｉ ｏ ｃ ｍ ｔ ｎ ｉ ａ ｈ ｔ ａ ｔ ． ｈ ｅｔ ｃ ｗ ｒ ｅ ａｅ Ｓｘｌ ａｐｒ ｕ Ｔ ｅ ｒ ｔ ｅ ｈ ｎ ｏ ｅ ｐ ａ ｓ ｘ ａ ｓ ｅ
水质 六种特定多环芳烃的测定 高效液相色谱法71
水质六种特定多环芳烃的测定高效液相色谱法GB 13198—911 适用范围本标准规定了测定水中多环芳烃(PAH)的高效液相色谱(HPLC)法。
本标准参照采用国际标准ISO/DIS 7981/2高效液相色谱法分析的六种特定多环芳烃。
本标准适用于饮用水、地下水、湖库水、河水及焦化厂和油毡厂的工业污水中荧蒽、苯并(b)荧蒽、苯并(k)荧蒽、苯并(a)芘、苯并(ghi)苝、茚并(1,2,3-cd)芘六种多环芳烃的测定。
本法用环己烷提取水中多环芳烃，提取液通过弗罗里硅土柱，PAH吸附在柱上，用丙酮加二氯甲烷混合溶液脱附PAH后，用配备荧光和(或)紫外检测器的高效液相色谱仪测定。
本方法对六种PAH通常可检测到ng/L水平。
水样中假设存在可被共萃取的能产生荧光信号或熄灭荧光的物质对本法也有干扰。
本法用弗罗里硅土柱层析净化别离，可降低荧光背景。
2 试剂和材料2.1 高效液相色谱流动相为水和甲醇的混合溶液。
2.1.1 甲醇：分析纯，用全玻璃仪器重蒸馏，要求有足够低的空白。
2.1.2 水：电渗析水或蒸馏水，加高锰酸钾在碱性条件下重蒸。
在测定的化合物检测限内未观察到干扰。
2.2 配制标准样品和水样预处理使用的试剂和材科。
2.2.1 二氯甲烷(CH2Cl2)：用全玻璃蒸馏器重蒸馏，在测定化合物检测限内不出现色谱干扰为合格。
2.2.2 丙酮(C3H6O)：同2.2.1。
2.2.3 环已烷：分析纯，同2.2.1。
注：假设环已烷的纯度不够，可采用附录中两种方法中的任一种进行净化。
2.2.4 无水硫酸钠(Na2SO4)：分析纯，在400℃加热2h。
2.2.5 硫代硫酸钠(Na2S2O3·5H2O)：分析纯。
2.2.6 弗罗里硅土(Florisil)：60～100目，色层分析用。
在400℃加热2h。
冷却后，用水(2.1.2)调至含水量为11％(m/m)。
2.2.7 碱性氧化铝；层析用，50～200μm，活度为BrockmannⅠ级。
HPLC法检测土壤中的16种多环芳烃
HPLC法检测土壤中的16种多环芳烃摘要：本文依据《土壤和沉积物多环芳烃的测定高效液相色谱法》新标准的测定方法对土壤中16种多环芳烃进行了测定。
该方法采用超声波萃取方法提取土壤样品中多环芳烃，萃取液用硅胶柱方式净化，浓缩定容后，用配备了紫外/荧光检测器的高效液相色谱仪检测。
最低定量限在0.16~3.39 μg/kg之间，平均回收率在71.2%~103%之间，相对标准偏差在6.1%~13.8%之间。
关键词：农残超高效液相色谱仪三重四极杆质谱仪多环芳烃(PAHs)是指分子中含有两个或两个以上苯环结构的化合物，是煤、石油、煤焦油等有机化合物的热解或不完全燃烧产物，具有致畸、致癌、致突变和生物难降解的特性，是目前国际上关注的一类持久性有机污染物(POPs). 多环芳烃性质稳定，极易吸附在固体颗粒物上，在环境中难降解，可在生物体内蓄积。
多环芳烃在环境中虽是微量的，但分布广，人们通过大气、水、食品、吸烟等途径摄取，是人类癌症的重要起因。
多环芳烃的提取方法目前主要有索氏提取法、超声提取法、超临界流体萃取、微波辅助萃取、加压流体萃取等方法。
目前，多环芳烃的监测技术应用最广的分析方法是色谱法，常用的有气相色谱法和液相色谱法。
高效液相色谱具有选择性好、灵敏度高的优点，应用最为普遍，已成为分析多环芳烃的首选方法。
河南省环境监测中心站编制了《土壤和沉积物多环芳烃的测定高效液相色谱法》新标准的意见征询稿，本文采用此稿方法，测定了土壤中16种多环芳烃的含量。
该方法采用超声波萃取方法提取土壤样品中多环芳烃，萃取液用硅胶柱方式净化，浓缩定容后，用配备了紫外/荧光检测器的高效液相色谱仪检测。
1. 实验部分1.1 试剂乙腈、正己烷、二氯甲烷、丙酮为液相色谱纯级别；多环芳烃标准贮备液：含十六种多环芳烃的乙腈溶液，包括萘、苊、二氢苊、芴、菲、蒽、荧蒽、芘、屈、苯并[a]蒽、苯并[b]荧蒽、苯并[k]荧蒽、苯并[a]芘、二苯并[a,h]蒽、苯并[g,h,i]苝、茚并[1,2,3-c,d]芘，浓度为1000 μg/mL。
水质多环芳烃类的测定高效液相色谱法
水质 多环芳烃类的测定 高效液相色谱法编 制 说 明（征求意见稿）沈阳市环境监测中心站2008年3月水质 多环芳烃类的测定 高效液相色谱法编 制 说 明一、任务来源2007年2月国家质检总局公布了《关于下达2007年第一批国家标准制修订项目经费的通知》（国质检财函[2007]971 号），向沈阳市环境监测中心下达了编制《水质 多环芳烃类的测定 高效液相色谱法》的项目计划。
根据环境保护部科技标准司的意见，由沈阳市环境监测中心承担《水质 多环芳烃类的测定 高效液相色谱法》的编制工作。
二、编制目的和意义多环芳烃（简称PAHs或PNA）是一类非常重要的化学三致物（致癌、致畸、致突变），因其具有生物难降解性和累积性，所以广泛存在于水体、大气、土壤、生物体等环境中。
多环芳烃引起的环境污染越来越引起人们的重视，它已成为世界许多国家的优先监测物。
1976年EPA列出了16项PAHs为优先控制污染物。
1990年我国提出的68种水体优先控制污染物中有7种属于PAHs。
PAHs主要是在煤、石油等矿物性燃料不完全燃烧时产生的，主要的污染源是焦化、石油炼制、冶炼、塑胶、制革、造纸等工业排放的三废物质以及船舶油污、机动车尾气、香烟烟雾等等。
自1775年Pott医生发现扫烟囱工人患阴囊癌至今，许多人研究了PAHs的致癌性，其中已有不少被确定或被怀疑具有致癌、致畸或致突变作用。
尤其是苯并[a]芘和荧蒽是强致癌物质，严重影响人体健康，所以日益受到人们的关注。
人们对空气中多环芳烃的污染研究较多，实际上多环芳烃是水中普遍存在的污染物质，多环芳烃在不同水体中的分布取决于它们的污染源。
我国原有的标准方法GB 13198-91规定了测定水体中六种特定多环芳烃的高效液相色谱法，但已不能满足当前环境监测和管理的需要。
因此，修订GB 13198-91标准，将会进一步完善我国的有机污染物分析方法体系，努力使环境保护标准与环保目标相衔接。
修订该标准由环境保护部科技标准司提出，由沈阳市环境监测中心站起草。
试论超高效液相色谱法检测土壤中的多环芳烃
试论超高效液相色谱法检测土壤中的多环芳烃发布时间：2021-01-21T09:26:54.115Z 来源：《防护工程》2020年29期作者：贾慧茹[导读] 其中液相色谱法在检测多环芳烃中最为突出，可以有效的检测出土壤中存在的多环芳烃。
江苏承泰环境技术服务有限公司摘要：为了保证土壤安全，本文阐述了检测土壤中多环芳烃的重要性，分析了超高效液相色谱法以及使用超高效液相色谱法检测土壤中多环芳烃时出现的问题，提出了多环芳烃的处理及检测方法，旨在提高土壤质量，推动农业生产的发展。
关键词：土壤；超高效液相色谱；PAHs1、检测土壤中多环芳烃的重要性多环芳烃英文简称PAHs，作为一种对严重损害人体健康的一类有机污染物，持续时间长，是由大于等于两个的苯环通过连接组合而成的。
多环芳烃的类型主要分为两种，稠环型和非稠环型。
其中稠环型的多环芳烃为多个苯环共同拥有多个碳原子，非稠环型主要包含联苯及联多苯和多苯代脂肪烃。
产生多环芳烃的因素主要由两个，一个是自然因素，另一个是人为因素。
在陆地生物、水生生物以及微生物的合成过程中会产生多环芳烃，同时，在火山喷发的时候以及森林火灾中也会形成，这些都是自然环境的因素。
在人类的生活中，会使用大量的矿物燃料或者其他包含碳氢化合物的材料，在进行不完全燃烧时也会产生大量的多环芳烃。
至今为止已经发现接近200种的多环芳烃，因为多环芳烃中存在大量的有毒物质和致癌物质，对生活环境带来恶劣影响，所以多环芳烃逐渐被全球学者进行研究。
多环芳烃存在的地方多种多样，既可以存在大气、土壤和水中，又会在石油、木材和生活中用到的纸中存在，稍有不慎就会通过各种途径进入人的体内，对人类健康造成危害。
多环芳烃在土壤中存在的数量较多，而且都集中在土壤的表面。
在当前检测多环芳烃中存在较多的方法，其中液相色谱法在检测多环芳烃中最为突出，可以有效的检测出土壤中存在的多环芳烃。
图1 有机污染物的超标情况2、超高效液相色谱法的使用超高效液相色谱是在高效液相色谱的基础上建立的全新技术，更新了能够快速检测的技术方法，加入了小型的颗粒填料，同时又增添了分析通量、色谱的容量以及灵敏度。