淋病奈瑟菌耐药性的分子基础初探

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细菌耐药性检测方法

细菌耐药性检测方法 Prepared on 22 November 2020细菌耐药性检测方法1、细菌耐药表型检测：判断细菌对抗菌药物的耐药性可根据NCCLS标准，通过测量纸片扩散法、肉汤稀释法和E试验的抑菌圈直径、MIC值和IC值获得。

也可通过以下方法进行检测：（1）耐药筛选试验：以单一药物的单一浓度检测细菌的耐药性被称为耐药筛选试验，临床上常用于筛选耐甲氧西林葡萄球菌、万古霉素中介的葡萄球菌、耐万古霉素肠球菌及氨基糖苷类高水平耐药的肠球菌等。

（2）折点敏感试验：仅用特定的抗菌药物浓度（敏感、中介或耐药折点MIC），而不使用测定MIC时所用的系列对倍稀释抗生素浓度测试细菌对抗菌药物的敏感性，称为折点敏感试验。

（3）双纸片协同试验：双纸片协同试验是主要用于筛选产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）革兰阴性杆菌的纸片琼脂扩散试验。

若指示药敏纸片在朝向阿莫西林/克拉维酸方向有抑菌圈扩大现象（协同），说明测试菌产生超广谱β-内酰胺酶（4）药敏试验的仪器化和自动化：全自动细菌鉴定及药敏分析仪如：Vitek-2、BD-Pheonix、Microscan等运用折点敏感试验的原理可半定量测定抗菌药物的MIC值。

2．β-内酰胺酶检测：主要有碘淀粉测定法（iodometric test）和头孢硝噻吩纸片法（nitrocefin test）。

临床常用头孢硝噻吩纸片法，β-内酰胺酶试验可快速检测流感嗜血杆菌、淋病奈瑟菌、卡他莫拉菌和肠球菌对青霉素的耐药性。

如β-内酰胺酶阳性，表示上述细菌对青霉素、氨苄西林、阿莫西林耐药；表示葡萄球菌和肠球菌对青霉素（包括氨基、羧基和脲基青霉素）耐药。

3．耐药基因检测：临床可检测的耐药基因主要有：葡萄球菌与甲氧西林耐药有关的MecA基因,大肠埃希菌与β-内酰胺类耐药有关的blaTEM、blaSHV、blaOXA基因，肠球菌与万古霉素耐药有关的vanA、vanB、vanC、vanD基因。

检测抗菌药物耐药基因的方法主要有：PCR扩增、PCR-RFLP分析、PCR-SSCP 分析、PCR-线性探针分析、生物芯片技术、自动DNA 测序4．特殊耐药菌检测（1）耐甲氧西林葡萄球菌检测：对 1цg苯唑西林纸片的抑菌圈直径≤10㎜，或其MIC≥4цg/ml 的金黄色葡萄球菌和对1цg苯唑西林纸片的抑菌圈直径≤17㎜，或MIC≥цg/ml的凝固酶阴性葡萄球菌被称为耐甲氧西林葡萄球菌（MRS）。

医学微生物学[第十三章性传播的病原微生物]山东大学期末考试知识点复习

第十三章性传播的病原微生物学习纲要性传播疾病(sexually transmitted disease，STD)：通过性行为引起流行的传染病，简称性病。

引起性病的病原微生物有许多种，包括细菌、病毒、衣原体、支原体、螺旋体、真菌、原虫等。

我国当前发病最多的性病主要有由淋病奈瑟菌引起的淋病。

(一)淋病奈瑟菌1．生物学性状(1)形态与染色：菌体肾形，排列似一对咖啡豆，革兰染色阴性。

有荚膜和菌毛，无鞭毛，无芽孢。

(2)培养特性：营养要求高，常用巧克力(色)血琼脂培养基。

菌落凸起，圆形、灰白色或半透明、光滑。

(3)生化反应：只分解葡萄糖，产酸不产气，氧化酶试验阳性。

(4)抗原结构与分类：外膜蛋白可分为P I、PⅡ和PⅢ三种。

P I为主要外膜蛋白，是淋病奈瑟菌分型的主要基础。

PⅡ蛋白，主要功能是使细菌彼此黏附在一起或黏附于宿主细胞上，并参与营养物质的摄取。

脂多糖具有很强的致热毒性，与致病性及免疫性有关。

菌毛蛋白抗原存在于有毒株。

(5)抵抗力：不耐热和寒冷，对消毒剂敏感。

易产生耐药性。

2．致病性和免疫性(1)致病物质：主要是菌毛、荚膜、外膜蛋白，以及内毒素和IgAl蛋白酶。

IgAl蛋白酶破坏黏膜表面存在的特异性IgAl，有利于淋病奈瑟菌黏附。

PI可直接插入中性粒细胞的膜上，导致膜损伤。

菌毛和荚膜具有抗吞噬作用。

(2)所致疾病：人是淋病奈瑟菌的唯一宿主。

主要引起人类泌尿生殖系统黏膜的急性或慢性化脓性感染。

儿童淋病包括：幼儿淋菌性阴道炎、新生儿淋菌性结膜炎。

(3)免疫性：人类对淋菌缺乏天然抵抗力。

3．微生物学检查方法用棉拭蘸取泌尿生殖道脓性分泌物直接涂片镜检；症状轻或无症状的患者均应作淋病奈瑟菌分离培养及鉴定；PCR检测核酸；还可做免疫酶试验和直接免疫荧光试验。

4．防治原则目前尚无淋病疫苗；预防淋病主要措施是使用安全套；婴儿出生时，不论母亲有无淋病，都应以l％硝酸银或其他银盐溶液滴眼，以预防新生儿淋菌性眼炎的发生。

淋病奈瑟菌129株耐药性分析

１２１最低抑菌浓度（Ｃ测定．．ＭＩ）
采用琼脂稀释法… ，
９．５１７１９；孢曲松中敏的菌株７株，８４％（２／２）头５占
５．４７／２）大观霉素１０８１％（５１９；０％敏感。株
表１４种抗菌药物对１９株淋病奈瑟菌的ＭＩ２Ｃ分布
持续开展常规耐药性监测十分重要。
［关键词］淋病奈瑟茵；生素；药性抗耐［中图分类号］Ｒ３８１７．［文献标识码］Ｂ［文章编号］１０ —８７（０８００１０７２０）５—０８２２—０２
抗生素株数
８４Ｏ
Ｏ
ＭＩ，／Ｃ（ｇｍＬ）ｕ
２１Ｏ．０．５０．２０．６０．３０．１０．００．００．０５２１５０００００５０８０４０２
头孢曲松大观霉素
・
２２・８
中国医学文摘一肤科学２０皮０８年１Ｏ月第２５卷第５期
・
性传播疾病・
淋病奈瑟菌１９株耐药性分析２
钟娜，王芳乾，陆玉珠，朱海花，郑文爱［摘要］目的监测海口地区淋病奈瑟茵对常用抗生素的耐药状况。方法收集本院性病门诊２００４年
～
２００７年６月对１９株淋病奈瑟菌菌株进行了耐药种于各种浓度的平板，６，％２３℃ ５

淋病奈瑟菌的分子生物学检验

一、淋病奈瑟菌的基因组结构特征
淋病奈瑟菌FA1090菌株是最早被完成测序研究的淋病奈瑟菌菌株之一，它的染色体DNA长度为2.15Mbp，其中G+C含量为52.68%。编码区的 DNA长度占总长度的78%。共含有2069个基因，包括2002个具有编码功能的基因和67个编码结构性 RNAs基。Chung GT等人在2008年报道了淋病奈瑟菌新菌株NCCP11945的基因组结构。他们发现 NCCP11945染色体的DNA长度为2.23Mbp，据估计可以编码2622个开放性阅读框。同时，NCP11945 含有一个能编码12个ORFs的质粒，其DNA长度为 4153bp。据他们估计，整个基因组的编码基因的密度约为87%。全基因组平均G+C含量为52.4%。这与FA1090菌株相类似。
4．链替代扩增技术
SDA是一种基于酶促反应的新的DNA体外等温扩增技术。目前使用较多的是Becton Dikinson公司生产的Probe Tec ET，可以同时对CT和NG进行检测，Probe Tec ET特异性扩增 NG染色体PivNg基因，然后用荧光标记的探针检测其相应的DNA靶序列，2小时可以完成96份标本检测。与培养法相比具有很高的敏感性和特异性。
1．克服了淋球菌培养时间长等缺点，提高了临床样本检测的阳性率和准确性。
2．通过分子生物学技术可以进行淋球菌感染的分子流行病学调查。
3．可以准确、快速评价药物治疗的效果。 4．有利于淋病的鉴别诊断。
谢谢！
二、淋病奈瑟菌的分子生物学检验内容
（一）淋病奈瑟菌核酸的检测
1．聚合酶链反应
PCR是分子生物学中最常用检测基因的技术手段，也是淋病奈瑟菌基因诊断中最基本的方法。 PCR引物的设计应选择与其相应的靶基因，多采用：①隐蔽质粒cppB基因(cppBH01/3、1/2及 cppBN3/4)；②16s rRNA基因(SL67/59、NGPl/2)； ③porA假基因；④编码外膜蛋白基因（omp基因）；⑤opa基因等；⑥胞嘧啶DNA甲基转移酶基因(Roche Cobas Amplicor)。不同靶基因设计引物对PCR的敏感性和特异性有一定的影响。

淋病奈瑟菌耐药机制研究进展

淋病奈瑟菌为革兰阴性球菌，是淋病的病原体。据ＷＨＯ估计，全球每年新发病例超过６０００万，发展中国家发病率更呈明显上升的趋势。在我国淋病的感染率居性传播疾病之首…。随着抗生素的广泛使用，淋病奈瑟菌对抗生素的耐药率越来越高，其机制主要由染色体和质粒的基因改变而引起，按耐药性一般将淋病奈瑟菌分成以下几型：质粒介导的产青霉素酶的淋病奈瑟菌（ＰＰＮＧ）；质粒介导的高度耐四环素淋病奈瑟菌（ＴＲＮＧ）；ＰＰＮＧ／ＴＲＮＧ质粒介导的对青霉素和四环素都耐药的淋病奈瑟菌；ＣＭＲＮＧ染色体介导的对青霉素和四环素都耐药的淋病奈瑟菌；ＱＲＮＧ染色体介导的对喹诺酮类耐药的淋病奈瑟菌。因此，研究对淋病奈瑟菌的耐药机制，对指导临床用药，从而有效地控制淋病的传播有着十分重要的意义。
ＢＡ
抗生素有不同的耐药率及耐药机制，对青霉素耐药
的主要机制是产生１３一内酰胺酶；对四环素耐药的主要机制是细胞膜对药物的通透性降低；对大环内酯类、大观霉素耐药的主要机制是作用靶位的改变；对氟喹诺酮类耐药的主要机制是ｇｙｒＡ及ｐａｘＣ基因的突变；对第三代头孢菌素类敏感性降低或耐药的机制尚未明确。２．１青霉素青霉素属于１３一内酰胺类抗生素，淋病奈瑟菌对其已普遍、高度耐药，这种耐药主要表现为质粒和染色体介导两种机制。２．１．１质粒介导的耐药机制质粒介导的耐药机
１．１．１
ＰＢＰｓ是一些位于细胞膜上的酶类，包括：
淋病奈瑟菌的耐药机制ｓｙｓｔｅｍ）起着重要作用。
肽聚糖转肽酶、葡萄糖转基酶、羧肽酶，对维持细菌胞壁的稳定起着重要作用，同时也是Ｂ一内酰胺类抗生素的主要靶位点，Ｂ一内酰胺类抗生素是通过与淋病奈瑟菌细胞膜上ＰＢＰｓ结合，影响细胞壁的合成来杀灭淋病奈瑟菌。在淋病奈瑟菌的耐药机制中，已知ｐｏｎＡ、ＰｅｎＡ等基因是编码ＰＢＰｓ的基因，当ｐｏｎＡ及ＰｅｎＡ基因突变时，可以使相应氨基

106株淋病奈瑟菌的耐药性分析

ｐｏｔｏｔｅｔｇｎｒｈａｉｉｒｒｙｔｒａｏｏｅｕ．
【ｅｏｄ】ＮｉｅａｏｏｈｅｅＲｓｔｃ，ｕｃｔｉｙＫｙｒｓｗｅｓｉｇｒｏａ，ｅｓｎｅＳｓｐｂｉｓｒｎｉａｅｉｌｔ【ｕｈｒｓａｄｅｓＴｅＣｎｒｆｏｐｔ，ｈｔ１０１ＣｉａＡｔｏｄｒｓ】ｈｅｔｏｓｉＳａｏ５５３，ｈｅＨｌａｎｕｎ淋病奈瑟菌是淋病的病原体，国目是我前性传播疾病中发病率最高的一种，它可造成不孕、不育及新生儿淋病性眼
ｒｆｒｎｅｆｒｔｅｐｅｅｔｎａｄｔａｍｅｔｆｏｏｒｅ．ＭｅｈｄＴｅｓｓｅｔｉｔｏ５ａｔｉｔｇｎｓｗｓｔｓｅｅｅｃｏｈｒｖｎｉｅｔｎｎｒｈａｏｎｒｏｇｔｏｓｈｕｃｐｉｌｙｔｉｏｉａｅｔａｔｂｉｎｂｃｎｅ —
ｇｎｒｏａ（ＲＧ）ａｃｕｔｄｆｒ６４ｏｏｒｅＴＮｈｌｃｏｎｅ．％．Ｔｅｐｅａｎｅｏｐｏｌａｉｒｓｔｃａ２３，ｈｌｎｎｆｏ２ｈｒｌｃｆｉｒｆｘｃｎ— ｅｉａｅｗｓ．％ｗｉｏｅｏｖｅｃｏｓｎ９ｅ
ａｃｔｗｒ９．％（７１６，ａｄｐｎｉｉａｅ—ｐｏｕｉｎｅｒｅｅ１５ａｅ９／０）ｎｅｉｌｎｓｃｒｃｇ—Ｎｉｅｉｇｎｒｏａ（ＰＧ）５．％（１ｄｎｅｓｒｏｏｈｅｅＰＮｓａ７５６／

PIB基因点突变与淋病奈瑟菌对青霉素和四环素耐药相关性的研究

【论著】ＰＩＢ基因点突变与淋病奈瑟菌对青霉素和四环素耐药相关性的研究孙爱华（浙江医学高等专科学校，杭州３１００５３）［摘要］目的：了解浙江地区分离的淋病奈瑟菌临床菌株对青霉素和四环素的耐药率及该菌ＰＩＢ基因Ｇ１２０和Ａ１２１点突变与青霉素和四环素耐药性的关系。

方法：采用高保真ＰＣＲ扩增２５株淋病奈瑟菌ＰＩＢ基因序列，Ｔ—Ａ克隆后测序。

分析测序菌株ＰＩＢ基因中与耐药性密切相关的Ｇ１２０和Ａ１２１变异情况，采用二倍琼脂稀释法确定ＰＩＢ菌株的耐药性。

结果：２５株淋病奈瑟菌临床菌株对青霉素和四环素均耐药，耐药率为１００％。

经测序的２５株ＰＩＢ淋病奈瑟菌中，１株（４．Ｏ％）Ｇ１２０或Ａ１２１均未突变，其对青霉素和四环素的ＭＩＣ分别为８¨ｇ／ｍｌ和４斗ｇ／ＩＩｌｌ。

５株（２０．０％）Ｇ１２０Ｄ／Ｎ突变而Ａ１２１不变，１株（４．０％）Ｇ１２０不变而Ａ１２１Ｇ突变，２株（８．Ｏ％）Ｇ１２０Ｎ突变但Ａ１２１缺失，１６株（６４．０％）Ｇ１２０Ｋ和Ａ１２１Ｄ双位点突变。

２４株Ｇ１２０和／或Ａ１２１突变的ＰＩＢ菌株均对青霉素和四环素的ＭＩＣ为４～１２８Ｉｘｇ／ｍｌ不等。

结论：浙江地区分离的ＰＩＢ型淋病奈瑟菌对青霉素和四环素的耐药率为１００％。

上述淋病奈瑟菌对青霉素和四环素的耐药与ＰＩＢ基因氨基酸序列Ｇ１２０和／或Ａ１２１突变密切相关。

［关键词］淋病奈瑟茵；青霉素／四环素；耐药性；ＰＩＢ基因；点突变［中圈分类号］Ｒ７５９．２［文献标识码］Ａ［文章绵号】１００４—８６８５（２００７）１２—２１５９—０３ＣｏｒｒｅｌａｔｉｏｎｂｅｔｗｅｅｎｐｅｎｉｃｉｌｌｉｎａｎｄｔｅｔｒａｃｙｃｌｉｎｅｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｏｆＮｅｉｓｓｅｒｉａｇｏｎｏｒｒｈｏｅａｅｉｓｏｌａｔｅｓａｎｄｓｉｔｅｍｕｔａｔｉｏｎｏｆＰｏｒｉｎＩＢｇｅｎｅＳｕｎＡｉ—ｈｕａ（ＺｈｅｊｉａｎｇＭｅｄｉｃａｌＣｏｌｌｅｇｅ，Ｈａｎｇｚｈｏｕ３１００５３，Ｃｈｉｎａ）［Ａｂｓｔｒａｃｔ］Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｕｎｄｅｒｓｔａｎｄｐｅｎｉｃｉｌｌｉｎａｎｄｔｅｔｒａｃｙｃｌｉｎｅｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｏｆＮｅｉｓｓｅｒｉａｇｏｎｏｒｒｈｏｅａｅｉｓｏｌａｔｅｓｆｒｏｍＺｈｅｊｉａｎｇａｎｄｔｏｄｅｔｅｒｍｉｎｅｔｈｅｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎｂｅｔｗｅｅｎｔ１１ｅｒｅｓｉｓｔａｎｃｅａｎｄｓｉｔｅｍｕｔａｔｉｏｎＧ１２０ｏｒ／ａｎｄＡ１２１ｏｆｔｈｅｂａｃｔｅｒｉａｌＰＩＢｇｅｎｅ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：ＴｈｅＰＩＢｇｅｎｅｓｏｆ２５Ｎ．ｇｏｎｏｒｒｈｏｅａｅｉｓｏｌａｔｅｓｗｅｒｅａｍｐｌｉｆｉｅｄｕｓｉｎｇｈｉｇｈｆｉｄｅｌｉｔｙＰＣＲ．ＴｈｅｔａｒｇｅｔａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎｆｒａｇｍｅｎｔｓｗｅｒｅｓｅｑｕｅｎｃｅｄａｆｔｅｒＴ—Ａｃｌｏｎｉｎｇ．ＴｈｅｍｕｔａｔｉｏｎｓｉｔｅｓＧ１２０ａｎｄＡ１２１ｔｈａｔｉｓｃｌｏｓｅｌｙｒｅｌａｔｅｄｔｏｄｒｕｇｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｏｆｔｈｅｓｅｑｕｅｎｃｅｄＰＩＢｓｔｒａｉｎｓｗｅｒｅａｎａｌｙｚｅｄ．Ａｎｄｔｈｅｄｒｕｇｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｏｆｔｈｅｓｅｓｔｒａｉｎｓｗａｓｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｕｓｉｎｇｄｏｕｂｌｉｎｇａｇａｒｄｉｌｕｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄ．Ｒｅｓｕｌｔｓ：Ａｌｌｔｈｅ２５ｉｓｏｌａｔｅｓｗｅｒｅｒｅｓｉｓｔａｎｔｔｏｐｅｎｉｃｉｌｌｉｎａｎｄｔｅｔｒａｃｙｃｌｉｎｅ．Ａｃｃｏｒｄｉｎｇｔｏｔｈｅｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇｒｅｓｕｌｔｓ，１ｓｔｒａｉｎ（４．０％）ｈａｄｎｏａｎｙｍｕｔａｔｉｏｎａｔｔｈｅＧ１２０ａｎｄＡ１２１ｓｉｔｅｓａｎｄｉｔ’ＳＭＩＣｏｆｐｅｎｉｃｉｌｌｉｎａｎｄｔｅｔｒａｃｙｃｌｉｎｅｗａｓ８斗ｇ／ｍｌａｎｄ４Ｉｘｇ／ｍｌ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ；ｗｈｉｌｅ５ｓｔｒａｉｎｓ（２０．０％）ｓｈｏｗｅｄＧ１２０Ｄ／ＮｏｒＡ１２１Ｇｍｕｔａｔｉｏｎ，１ｓｔｒａｉｎｏｎｌｙＡ１２１Ｇ，２ｓｔｒａｉｎｓＧ１２０ＮａｎｄＡ１２１ｄｅｌｅｔｉｏｎ，ａｎｄ１６ｓｔｒａｉｎｓ（６４．Ｏ％）ｅｘｈｉｂｉｔｅｄｔｈｅｄｏｕｂｌｅｓｉｔｅｍｕｔａｔｉｏｎ．ＭＩＣｏｆ２４ＰＩＢｉｓｏｌａｔｅｓｗｉｔｈＧ１２０ａｎｄ／ｏｒＡ１２１ｍｕｔａｔｉｏｎｒａｎｇｅｗａｓＭＩＣ４～１２８斗ｇ／ｍ１．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：ＴｈｅｒａｔｅｏｆｐｅｎｉｃｉｌｌｉｎａｎｄｔｅｔｒａｃｙｃｌｉｎｅｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｉｎＮｅｉｓｓｅｒｉａｇｏｎｏｒｒｈｏｅａｅｉｓｏｌａｔｅｓｆｒｏｍＺｈｅｊｉａｎｇａｒｅａｉｓ１００％ａｎｄｔｈｅｐｅｎｉｃｉｌｌｉｎａｎｄｔｅｔｒａｃｙｃｌｉｎｅｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｏｆｔｈｅｉｓｏｌａｔｅｓｉｓｃｌｏｓｅｌｙａｓｓｏｃｉａｔｅｄｗｉｔｈＧ１２０ａｎｄＡ１２１ｍｕｔａｔｉｏｎｉｎＰＩＢｇｅｎｅｏｆＮｅｉｓｓｅｒｉａｇｏｎｏｒｒｈｏｅａｅｉｓｏｌａｔｅｓ．［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］Ｎｅｉｓｓｅｒｉａｇｏｎｏｒｒｈｏｅａｅ；Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｎ／ｔｅｔｒａｃｙｃｌｉｎｅ；Ｄｒｕｇｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ；ＰＩＢｇｅｎｅ；Ｓｉｔｅｍｕｔａｔｉｏｎ从１９４５年到１９８８年，青霉素一直作为淋病治疗的首选药物，然而随着淋病奈瑟菌临床菌株耐药性的增加，青霉素治疗淋病的疗效不断下降导致青霉素不再是治疗淋病奈瑟菌感染的一线抗生素。

广州地区淋病奈瑟菌耐药性分析

菌科细菌产生，由质粒介导，从ＴＥＭ一１，ＴＥＭ一２和ＳＨＶ一１突变而来。

临床对Ｇ内酰胺类药物耐药（包括青霉素类、头孢菌素类和氨曲南），对碳青霉烯类和头霉烯类药物敏感，体外对酶抑制剂敏感。

在国内由于大量应用头孢噻肟，极易选筛出ＣＴＸ—Ｍ型的ＥＳＢＬｓ。

ＣＴＸ—Ｍ型ＥＳＢＬｓ属于ＡｍｂｌｅｒＡ类酶中Ｋ１一ｌｉｋｅ酶，其特点是对头孢噻肟耐药，对头孢他啶敏感［４］。

由于ＥＳＢＬｓ由质粒介导，可在菌株中传播，极易在病房内爆发流行，给临床抗菌治疗带来极大的困难。

在分离的革兰阳性球菌中，对万古霉素耐药率最低，其次为利福平，而对青霉素、红霉素、克林霉素和复方磺胺甲嗯唑的耐药率比较高。

链球菌属对青霉素的耐药率低于葡萄球菌。

２５株凝固酶阴性葡萄球菌和金葡菌中，检出耐苯唑西林的葡萄球菌（ＭＲＳ）分别为５６．２％和２２．２％。

ＭＲＳ对苯唑西林的耐药机制是由于染色体介导的青霉素结合蛋白（ＰＢＰ）２ａ所致，导致对所有Ｊ３内酰胺类抗生素的亲和力下降。

总之，为了延缓细菌耐药性的产生，控制耐药菌株的播散和流行，医院应加强综合管理，定期监测细菌的耐药趋势，合理使用抗菌药物。

参考文献［２］［３］［４］张卓然，倪语星，洪秀华，等．临床微生物学和微生物检验［Ｍ］．第３版．北京：人民卫生出版社，２００３．李景云，马越，张力，等．临床５２家医院常见分离菌株的药物敏感性监测［Ｊ］．中华检验医学杂志，２００６，２９（５）；４５２—４５３．褚海青，李惠萍，何国钧．铜绿假单胞菌的耐药机制［Ｊ］．中国抗感染化疗杂志，２０（）３，３（１）：５４—５７．倪语星，王金良，徐英春，等．抗微生物药物敏感性试验规范［Ｍ］．上海：上海科学技术出版社，２００２．收稿日期：２（）０６—１１—１４广州地区淋病奈瑟菌耐药性分析吴兴中，郑和平，黄进梅，曾维英，潘慧清，李美玲，薛耀华・实验研究・摘要：目的监测广州地区２００５年分离的淋病奈瑟菌对青霉素、四环素、大观霉素、头孢曲松和环丙沙星的耐药性，分析耐药菌株的流行特点。

淋病奈瑟菌mtrR基因启动子区的IR区碱基缺失与其耐药性关系的研究

巾国皮肤性病学杂志２００６年１月第２０卷第１期ＣｈｉｎＪＤｅｒｍＶｅｎｅｒｅｏｌ，Ｊａｎ．２００６，Ｖ０１．２０，Ｎｏ．１・论著・＜基础研究＞淋病奈瑟菌ｍｔｒＲ基因启动子区的ＩＲ区碱基缺失与其耐药性关系的研究张丽霞，涂亚庭，林能兴，黄长征，陈宏翔，陶娟，林云［摘要］目的探索淋病奈瑟菌（ＮＧ，简称淋球菌）多传递耐药系统Ｒ基因（ｍｔｒＲ）启动子区反向重复序列（ＩＲ）区基因缺失与淋病奈瑟茵染色体所介导的耐药性的关系。

方法以琼脂稀释法做药物敏感试验，选择一临床敏感株采用自身配对法以次抑菌浓度法诱导筛选出对不同抗生素耐药的淋球菌株，以聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增包含ＩＲ区在内的目的基因后，对扩增产物测序，并将其ＩＲ区基因突变与临床分离自然耐药株比较。

结果８株敏感株及２４株单独耐１种药物菌株及１株诱导的多重耐药株无ＩＲ区基因突变，７株诱导多重耐药菌株ＩＲ区有碱基Ａ／Ｔ缺失，与自然多重耐药株两者相比较碱基缺失无差异。

结论淋球菌染色体ＩＲ区基因缺失与单独耐一种药物菌株产生无关，ＩＲ区基因缺失参与了淋球菌多重耐药株的产生，人工诱导的多重耐药株与自然多重耐药株ＩＲ区碱基突变无差异。

［关键词］淋病奈瑟茵；基因突变；反向重复序列；微生物敏感性试验［中图分类号］Ｒ３７８．１［文献标识码］Ａ［文章编号］１００１—７０８９（２００６）０１—０００１—０３ＳｔｕｄｙｏｆＲｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐＢｅｔｗｅｅｎＩＲＧｅｎｅＤｅｌｅｔｉｏｎｉｎＴｈｅｍｔｒＲＧｅｎｅＰｒｏｍｏｔｅｒａｎｄＡｎｔｉｂｉｏｔｉｃＲｅｓｉｓｔａｎｃｅｏｆＮｅｉｓｓｅｒｉａＧｏｎ－ｏｒｒｈｏｅａｅＺＨＡＮＧＬｉ—ｘｉａ，ＴＵＹａ—ｔｉｎｇ，ＬＩＮＮｅｎｇ—ｘｉｎｇ，ｅｔａｌ（ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＤｅｒｍａｔｏｌｏｇｙ，ＸｉｅｈｅＨｏｓｐｉｔａｌ，Ｔｏｎｔ才ｉＭｅｄｉｃａｌＣｏｌｌｅｇｅ，Ｗｕｈａｎ４３００２２，Ｃｈｉｎａ）Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｓｔｕｄｙｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｂｅｔｗｅｅｎＩＲ’ＳｇｅｎｅｄｅｌｅｔｉｏｎｉｎｔｈｅｐｒｏｍｏｔｅｒｏｆｍｔｒＲｇｅｎｅａｎｄａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｒｅｓｉｓｔ—ａｎｃｅｏｆＮｅｉｓｓｅｒｉａＧｏｎｏｒｒｈｏｅａｅ（ＮＧ）．ＭｅｔｈｏｄｓＴｈｅｄｒｕｇｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｉｅｓｏｆｓｔｒａｉｎｓｗｅｒｅｔｅｓｔｅｄｂｙａｇａｒｏｓｅ—ｄｉｌｕｔｉｏｎ—ｍｅｔｈｏｄ．Ｔｈｅｄｉｆｆｅｒ－ｅｎｔａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｒｅｓｉｓｔａｎｔｓｔｒａｉｎｓｗｅｒｅｉｎｄｕｃｅｄｗｉｔｈｓｕｂｏｒｄｉｎａｔｅｍｉｎｉｍａｌｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ（ｓＭＩＣ）ｆｒｏｍｃｌｉｎｉｃｉｓｏｌａｔｅｄｓｅｎｓｉｔｉｖｅｓｔｒａｉｎｓ．Ｔｈｅｍｕｌｔｉｐｌｅｔｒａｎｓｆｅｒａｂｌｅｒｅｓｉｓｔａｎｔｓｙｓｔｅｍ’Ｓ（ｍｔｒ）ｉｎｖｅｒｔｅｄｒｅｐｅａｔｓｅｑｕｅｎｃｅ（ＩＲ）ｏｆＮｅｉｓｓｅｒｉａｇｏｎｏｒｒｈｏｅａｅｗａｓｓｅｑｕｅｎｃｅｄａｆｔｅｒａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎｂｙｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ（ＰＣＲ）．ＲｅｓｕｌｔｓＥｉｇｈｔｓｅｎｓｉｔｉｖｅｏｒｔｗｅｎｔｙ—ｆｏｕｒｓｉｎｇｌｅａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｒｅｓｉｓｔａｎｔｏｒｏｎｅｍｕｈｉｐｌｅａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｒｅｓｉｓｔａｎｔｓｔｒａｉｎｓｈａｄｎｏｂａｓｅｄｅｌｅｔｉｏｎｉｎＩＲｇｅｎｅｂｕｔｓｅｖｅｎｉｎｄｕｃｅｄｍｕｌｔｉｐｌｅａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｒｅｓｉｓｔａｎｔｓｔｒａｉｎｓｈａｄａｓｉｎ—ｇｌｅｂａｓｅｄｅｌｅｔｉｏｎ（Ｔ／Ａ），ａｎｄｔｈｅｒｅｗａｓｎｏｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｂｅｔｗｅｅｎＩＲｇｅｎｅｍｕｔａｔｉｏｎｏｆｉｎｄｕｃｅｄｍｕｌｔｉｐｌｅａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｒｅｓｉｓｔａｎｔｓｔｒａｉｎｓａｎｄｔｈｏｓｅｏｆｃｌｉｎｉｃｏｎｅｓ．ＣｏｎｃｌｕｓｉｏｎＴｈｅｒｅｉｓｎｏｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｂｅｔｗｅｅｎｍｕｔａｔｉｏｎｏｆＩＲｇｅｎｅａｎｄｓｉｎｇｌｅａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｏｆＮＧ，ａｎｄｔｈｅｒｅｉｓｎｏｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｂｅｔｗｅｅｎｍｕｔａｔｉｏｎｏｆＩＲｇｅｎｅｏｆｃｌｉｎｉｃｓｔｒａｉｎｓａｎｄｔｈａｔｏｆｉｎｄｕｃｅｄｏｎｅ，ｂｕｔｓｉｎｇｌｅ—ｂａｓｅｄｅｌｅｔｉｏｎｏｆＩＲｇｅｎｅｍｉｇｈｔｒｅｓｕｌｔｉｎｍｕｌｔｉｐｌｅａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｎｅｉｓｓｅｒｉａｇｏｎｏｒｒｈｏｅａｅ；Ｇｅｎｅｍｕｔａｔｉｏｎ；Ｉｎｖｅｒｔｅｄｒｅｐｅａｔｓｅｑｕｅｎｃｅ；Ｍｉｃｒｏｂｉａｌｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙｔｅｓｔｓ目前的研究认为淋病奈瑟菌（ＮＧ，简称淋球菌）多重耐药性的产生主要与其染色体基因的多传递耐药系统（ｍｕｌｔｉｐｌｅｔｒａｎｓｆｅｒａｂｌｅｒｅｓｉｓｔａｎｔｓｙｓｔｅｍ，ｍｔｒ）有关，其主要机制有两个，一是ｍｔｒ系统的ｍｔｒＲ基因发生突变导致细胞外膜蛋白ｍｔｒＣＤＥ表达增多，细胞外排能力增加；二是ｍｔｒＲ基因启动子区域反向重复序列（ｉｎ－ｖｅｒｔｅｄｒｅｐｅａｔｓｅｑｕｅｎｃｅ，ＩＲ）调控ｍｔｒＲ基因的转录和表达，进而引起淋球菌耐药性的变化…。

淋病奈瑟菌耐药流行病学及机制研究进展

（硎Ｇ）和高水平耐四环索的淋病奈瑟菌（骶矾Ｇ）分别
占钙％和１８。８％；对阿谢霉褰的耐药率为９４。７％；对氧氟沙星、洛美沙星和环丙沙墅的耐药率分别为９７。５％、９５。０％程９５。０％［６１。２耐药机制
ｐｒｏｊｅｃｔ，ＧＩＳＰ）２００５年共收集了６１９９
２。ｌ染色体介导淋病奈瑟菌耐药：染色体上的基因位熹的突变孳ｌ起戆游病奈瑟蕊在一定水平上对抗生索的耐受理象被髂为染色嚣分导的耐蕊，一般必低拳乎耐药，丽多位点突变可导致多重耐药。染色体介导的与青霉素及岛四环素耐药相关的主要位点包括ｐｅｎＡ、ｐｏｎＡ、ｐｅｎＢ、ｐｅｎＣ、ｍｔｒ及ｔｅｔ［引。研究发现，编码ＰＢＰ２的
２．３．２
粒按其分子太小分海３释：◇３９。５ｋｂ结会覆粒或传递
质粒，又称“亚洲糍”Ｒ质粒，它与耐药质粒在菌株间传
播有关；②７—７。４ｋｂ和５，５．３ｋｂ的耐药性质粒，具有编码争痰酰胺酶纂透穗关鹃嚣霞子，叉稼“非溯鎏”嚣
质粒；③４．２ｋｂ的隐蔽质粒，几乎存在予所有淋瘸奈瑟菌。耐隐蔽性质粒能整合予细菌染色体上（包括无质
疆ｊ｜｜羧学２００９冬５月繁３０卷（第５期）Ｓｉｄ，ｕｕｍｌｔｅｎｄｒｉｌＪⅫ＇ｎｄ，２００９，Ｖｏｌ。３０。觞。５
・７５３・
淋病奈瑟菌耐药流行病学及机制研究进展
雒玉辉。综述；林昭春审校
（蹬ｊｌｌ翁人民医院疫默性病辨变麟，ｌ莲ｔＪｌｌ成都６１（Ｘ）３１＞
ｉ关键谲】辩痛；琳病奈瑟菌；流静病学；耐筠机制【巾图分类号】Ｒ７５９。２【文献标识码】Ｂ
＊
膏霉素结合蛋自２基因（ｐｅ畦）出现点突变，在对毒霉
素敏感的淋病奈瑟菌株的ｐｅｎＡ插入一个精氨酸序列
《泓），就会导致其编磁的青霉素结合凝自２（弼砣）
结构的改变，使ＰＢｐ２与霄霉素的亲和力下降，细胞膜对青霉素的渗透性降低，缨菌耐药承警升赢ｌ豁。ｐｅｎＣ

临床分子生物学检验总

四个阶段：一、以导致遗传病的基因突变位点为靶标，以DNA分子杂交为核心二、以PCR技术为核心三、以生物芯片为核心四、以DNA测序技术为核心广义：分子标志物包括基因组DNA、各种RNA、蛋白质和各种代谢物临床分子生物学检验靶标主要以核酸（DNA和RNA）为主基因组DNA是临床分子生物学检验中最常用的分子靶标病原生物基因1.菌种鉴定：PCR-测序和PCR-DNA探针杂交;缩短检测时间2.确定病毒感染和病毒载量：明确感染源，判断病情，监测疗效3.病毒分析：基因型变异产生不同临床症状4.细菌耐药监测和分子流行病学调查：随机扩增多态性DNA；指导选择治疗方案，控制病原菌的感染传播基因变异1.致病基因的分子缺陷 2.线粒体基因突 3.肿瘤相关基因单基因病 1.致病基因结构发生了改变，影响了编码产物量和质的改变，如血红蛋白病、血友病、Duchenne肌营养不良等。

2.致病基因中核苷酸三联体重复序列发生高度扩展，如脆性X综合征、亨廷顿病、强直性肌营养不良等。

基因多态性用于：1.基因定位和疾病相关性分析2.疾病诊断和遗传咨询3.多基因病的研究4.器官移植配型和个体识别循环游离核酸检测（包括游离DNA和游离RNA）用于：产前诊断、恶性肿瘤早期诊断、病例检测临床分子生物学检验技术以分子杂交技术、PCR技术和DNA测序技术、芯片技术、双向电泳技术、生物信息学技术为主要技术分子生物学检验技术可用于微生物感染的确诊、感染性病原体的分型、耐药监测。

分子生物学检验技术有利于临床上对遗传性疾病的早期预防、早期诊断、早期治疗。

重要国际生物信息中心：1.美国国立生物技术信息中心（NCBI）2.欧洲生物信息学研究所(EBI)3.日本国立遗传研究所（DDBJ）一级核酸数据库有GenBank、EMBL和DDBJ；蛋白质序列数据库有SWISS-PROT、PIR、UNIPRO T等。

蛋白质X射线晶体三维结构数据库有PDB等。

蛋白质数据库常用的有SWISS-PROT、 PIR、 PDB数据库。

淋病患者156例淋病奈瑟球菌耐药性分析

可能与近年来长期使用头孢曲松钠治疗泌尿生殖系统疾病感染有关，这也许将会成为研究淋球菌耐药的一个新的焦点。
参考文献
［】肖伟，贺佩，袁静儿．１宁波市北仑区１８ — ０５７种性传播疾９７２０年
病流行病学分析 … ．代预防医学，２０，４８：４０４２现０７３（）１８－１８．
曲松、头孢噻肟、氧化酶试纸片由ＯＸＩＯＤ公司生产，大观霉素、头孢硝噻吩纸片由美国ＢＤ公司生产。淋病奈瑟球菌
ＡＴＣ９２，纸片扩散法，根据２０Ｃ４２６０５年美国临床实验室标准化研究所（ＬＩＣＳ２０ＣＳ／ＮＣＬ）０５年版药敏试验法规操作。
近年来，性传播疾病在我国持续流行，其中由淋球菌感染引起的淋病仍然是最常见的性传播疾病之一。肖伟等“ 报道本区
１８９７至２００５年之间，病在７淋种常见｝传播疾病中位居首位，生
年１月至２００９年４月收治的１６例淋病患者的临Ｊ５术资料及淋球菌药敏试验进行分析，现将结果报道如下：１资料与方法
巧克力平板，置入烛缸，凡士林封口，３ ℃孵箱培养２～于７４
４ｈ８。观察菌落形态、分离出的疑似菌株，经革兰染色、氧
化酶及糖发酵试验鉴定。对所有阳性标本进行药敏分析。
１２方法．青霉素、四环素、丙沙星、头孢他啶、头孢环
１６株淋球菌的抗生素耐药性见表１５５。１６株淋球菌中检３２株（０５产Ｄ内酰胺酶淋病奈瑟菌，４２．％）１株（６３２．％）

淋病奈瑟菌综述

淋病奈瑟菌的研究现状淋病(gonorrhea)是由淋病奈瑟菌，简称淋病奈瑟菌引起的经典性病之一。

人类是淋病奈瑟菌唯一的自然宿主，主要通过性接触而传播。

感染淋病奈瑟菌之后，患者发生泌尿生殖系统的损害，表现为尿道炎和宫颈炎，以及附睾炎、盆腔炎等并发症，女性患者还可由于并发症造成不育、富外孕等严重后果。

淋病常见，在世界范围内广为流行；据近年来世界卫生组织估计，全世界每年约有6200万新病例发生，其中以欧美和非洲一些国家尤甚。

发病与病人因素，诸如年龄、性别、种族、受教育程度、性行为方式及免疫力有关，并随地区和季节的不同会有所变化。

关键词：淋病奈瑟菌、耐药、淋病奈瑟菌PI蛋白、检测方法1.淋病奈瑟菌的感染淋病奈瑟菌主要侵犯粘膜，尤其对单层柱状上皮和移行上皮细胞有很强的亲和力，淋病奈瑟菌侵入前尿道或子宫颈后，借助菌毛、外膜蛋白粘附到柱状上皮细胞表面进行繁殖，之后被柱状上皮细胞吞饮，进入细胞内大量繁殖，导致细胞损伤裂解。

淋病奈瑟菌在逸入粘膜下层，通过内毒素与补体、IgM等协同作用，诱导中性粒细胞聚集吞噬，引起局部急性炎症，出现充血、水肿、粘膜糜烂和尿痛，形成典型尿道脓性分泌物。

当细菌进入尿道腺体和隐窝后，腺管开口及隐窝被阻塞，潜藏的细菌可引起慢性淋病。

2.淋病奈瑟菌PI蛋白目前已知的淋球菌表面抗原有PI(Porin，Por，主要外膜蛋白)，PII(0pa，热修饰蛋白)，PIII(还原反应可修饰蛋白、或浓度相关蛋白)等外膜蛋白，及菌毛蛋白和LPS(脂多糖)、LOS(脂寡糖)，均能诱导相关的特异性体液免疫和细胞免疫。

在这几种抗原中，PI是外膜蛋白中含量最高的蛋白成分，约占60％，且仅有中等程度的抗原变异。

抗PI抗体具有杀菌作用，故而PI抗原最有可能用于制备成功的淋病疫苗，这使其成为目前这一领域的研究热点。

PI 蛋白是淋球菌主要外膜蛋白，它是液态的跨膜蛋白通道，以利于某些离子和大分子通过外膜屏障。

PI蛋白在淋球菌感染致病过程中也起重要作用，因为体外试验显示它能从淋球菌外膜贯穿入中性粒细胞膜，该过程在体内淋球菌粘附至上皮细胞表面中可能起了关键性的作用。

2003-2008年335株淋病奈瑟菌的临床分布及耐药性分析

参考文献：
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ｏｆｔｈｅｏｍｅｎｔｕｍ－ｍｅｄｉａｔｅｄ１４７—１５４．
・２２３・
体瘤中有表达。ＣＡ是一种良性乳头瘤样增生性疾病，其临床上部分疣体富含新生血管，增生快，治疗后常易复发。本研究结果显示。正常组织中ＶＥＧＦ仅有少量表达，但ＣＡ组织中的阳性表达率为８３．３％．明显高于正常对照组。表达强度也明显高于正常对照组。提示ＶＥＧＦ的高表达与ＣＡ发病有关。ＶＥＧＦ可引起血管内皮细胞的增殖．又能促进血管渗漏。在ＣＡ的生长中起着较为重要的作用。由于ＨＰＶ感染免疫功能正常和免疫功能抑制病人的黏膜和皮肤．产生黏膜和皮肤的疣状增生．其增生和复发的机制除与ＨＰＶ分型、免疫等有关外．可能还与ＶＥＧＦ有一定的密切相关性。研究ＶＥＧＦ在ＣＡ中的表达及所起作用，不仅有助于阐明ＣＡ复杂的发病机制．而且可能为探讨其治疗措施及预防复发提供新的思路。
２．２
４０岁一３４５０岁一６０岁以上合计
１８３３３５
合计
３３５
３３５株淋病奈瑟菌对１２种抗生素的耐药率见表２。
表２
３３５株淋病奈瑟菌对１２种抗生素的耐药率
３讨论本研究表明。３３５株淋病奈瑟菌在年龄分布上以２０岁组和３０岁组为主，分别为３４．９％和３０．１％。提示与该年龄组的性生活频繁和紊乱相关，再次是０～１月组占１１％．为新生儿经产道感染引起的淋菌性眼结膜炎…。淋病奈瑟菌青霉素耐药机制包括获得含ＴＥＭ一１基因质粒和染色体上ｐｅｎＡ基因突变，前者产青霉素酶水解青霉素形成耐药，后者导致其青霉素结合蛋白２（ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｎ—

淋病奈瑟菌79株耐药性监测报告

３５１．１７１
研究［］１检验杂志．０１１５：６ —６．Ｊ．临床２０．Ｌ）２１２２９［］曹文苓．４费实．李平．．９９年广州地区所见淋球菌对抗生等１９
拭子插入尿道或宫颈２ｃ（婴阴道２ｃ旋转深部取样立ｍ女ｍ）
表ｌ淋痛奈瑟茵药敏试验结果（１，）
３
讨论
广州曹文苓的报道（／１７。曹文苓报道壮观霉素敏感性ｏ）６为１Ｏ，我们的耐药率高达２．３．明显高于其它地Ｏ而４并区、但亦有文献指出合肥及重庆地区壮观霉素Ｍ１达临。Ｃ界浓度的菌株约占６．示这两个地区应慎用壮观霉素。Ｏ提根据我们的监测结果并结合文献复习．目前治疗淋病的首选药或联合用药的选择药物应推荐为头孢噻吩、孢三嗪、头丁胺卡那，然亦可考虑壮观霉素及环丙沙星．一结果亦可当这
１２细菌培养标本分别接种于血平板、克力平板上．．巧置５～ｌＣ０缸中．规培养．色镜榆．离鉴定。０１烛常染分
１药敏试验采用Ｋ— 纸片扩散法（剂由杭州天和微、３Ｂ试
肤性病学杂志．９．（）３２３３１８１６：５—５．９２

临床分子生物学检验技术模拟题及答案

临床分子生物学检验技术模拟题及答案一、单选题（共100题，每题1分，共100分）1、5'-末端的 DNA 探针标记主要依靠的酶是A、T4多聚核苷酸激酶B、末端转移酶C、AKPD、DNA pollE、DNA pol正确答案：A2、氟喹诺酮类药物主要作用靶位是A、糖基转移酶B、DNA 旋转酶C、泵蛋白D、吡嗪酰胺酶E、DNA依赖RNA聚合酶正确答案：B3、第三代测序技术的最主要特征是A、对单分子 DNA 进行非 PCR的测序B、针对SNP进行非 PCR的测序C、高通量和并行 PCR测序D、直接分析SNPE、直接进行个体基因组测序和 SNP研究正确答案：A4、连接酶链反应正确的是A、不能用来检测 DNA 点突变B、DNA连接酶代替DNA 聚合酶C、不需预知靶DNA 的序列D、引物在模板上的位置不能紧密相连E、属于靶序列扩增正确答案：B5、以下哪种检测技术不属于DNA分析A、基因芯片B、ASO杂交C、Northern blotD、RFLP分析E、PCR正确答案：C6、bDNA 扩增是一种A、依赖PCR 扩增B、只能用于扩增DNAC、RNA模板需预先逆转录为cDNAD、基于分支探针的核酸杂交信号放大检测技术E、需要对标本进行抽提纯化正确答案：D7、非整倍体形成的原因可以是A、双雌受精B、核内复制C、染色体不分离D、双雄受精E、核内有丝分裂正确答案：C8、基因多态性连锁分析中，第一、二、三代遗传标记分别是A、VNTR、STR、SSCPB、VNTR、SNP、STRC、VNTR、STR、SNPD、VNTR、SCCP、SNPE、VNTR、STR、RTLP正确答案：B9、最早应用于HLA基因分型的方法是A、RFLP分型技术B、PCR-SSCP 技术C、测序技术D、PCR-SSO技术E、PCR-SSP技术正确答案：A10、先天性卵巢发育不全(Turner综合征)的最常见核型是A、47, XXXB、45,XC、46,YYD、47, XXYE、47, XYY正确答案：B11、下列属于核苷酸三联体重复序列发生高度重复所致的是A、珠蛋白生成障碍性贫血B、血友病C、迪谢内肌营养不良D、镰状细胞贫血E、脆性X综合征正确答案：E12、PCR-RFLP 技术分析 mtDNA A3243G 突变,用ApaI酶切后电泳会观察到几条条带A、1条B、2条C、3条D、4条E、5条正确答案：C13、关于DNA 变性的描述不正确的是A、二级结构破坏B、一级结构破坏C、黏度降低D、生物活性丧失E、浮力密度增加正确答案：B14、关于梅毒螺旋体的描述错误的是A、不会对胎儿产生影响B、梅毒螺旋体属于苍白密螺旋体的苍白亚种C、主要通过性接触、输血、胎盘或产道等途径感染人体D、梅毒螺旋体是梅毒的病原体E、可侵犯皮肤黏膜、内脏器官，导致心血管及中枢神经系统损害正确答案：A15、以下不符合沙眼衣原体基因组结构特征的是A、CT染色体为一闭合环状双链DNAB、CT有一个隐蔽性质粒，此质粒与其他生物间没有同源序列C、DNA 修复能力较弱D、CT原体和网状体内皆含有DNA和RNA两种核酸E、G+C含量小于A+T正确答案：C16、SYBR Green I技术常要求扩增片段不大于A、50bpB、100bpC、200bpD、300bpE、400bp正确答案：D17、关于多重PCR，错误的是A、在同一反应体系中加入多对引物B、同时扩增一份 DNA样品的靶 DNAC、扩增的产物为序列相同的DNA片段D、扩增时应注意各对引物之间的扩增效率基本一致E、扩增产物可以通过电泳分离正确答案：C18、DNA指纹分子的遗传性基础是A、连锁不平衡B、MHC的多样性C、DNA的多态性D、反向重复序列E、MHC的限制性正确答案：C19、异种移植的首要障碍是A、人畜共患病B、供器官来源的选择C、超急性排斥反应D、器官大小和功能的匹配E、伦理道德问题正确答案：C20、Down综合征是A、单基因病B、染色体病C、体细胞病D、多基因病E、线粒体病正确答案：B21、用于肺炎支原体DNA 检测的痰液标本应悬浮于A、1mol/L NaOHB、1mol/L HCLC、变性剂D、酒精E、生理盐水正确答案：E22、以下符合新生隐球菌基因组结构特征的是A、目前全球范围内的新生隐球菌分为8种主要的基因型B、新生隐球菌为二倍体，有14条染色体C、不同基因型菌株间遗传相似度很高D、同一基因型菌株间存在较大的遗传变异E、新生隐球菌主要基因型的致病特点相似正确答案：A23、细菌感染分子生物学检验的检验对象是A、测定血清中蛋白酶活性B、测定样本中核酸含量C、镜检病原体形态D、测定血清中病原体蛋白含量E、测定血清中抗原抗体正确答案：B24、理想的质控品应具备的条件不包括A、靶值或预期结果已知B、基质与待测样本一致C、阳性质控品所含待测物浓度接近试验的决定性水平D、稳定、价廉、同一批次可大量获得E、含有未灭活的传染性病原体正确答案：E25、DNA探针的长度通常为A、1000~2000个碱基B、500~1000个碱基C、400~500个碱基D、100~400个碱基E、<100个碱基正确答案：C26、在多维液相分离技术中最常与其他色谱联合应用的是A、离子交换色谱B、反向色谱C、亲和色谱D、分子排阻色谱E、色谱聚焦正确答案：B27、美国国立生物信息中心是A、NCBIB、EMBLC、SWISS-PROTD、PDBE、NIG正确答案：A28、多基因家族的特点描述错误的是A、由某一祖先基因经过重复和变异所产生的一组基因B、通常由于突变而失活C、假基因与有功能的基因是同源的D、所有成员均产生有功能的基因产物E、可以位于同一条染色体上正确答案：D29、CYP450酶在哪个组织表达量最多A、心脏B、肝脏C、肾脏D、肺部正确答案：B30、检测靶分子是RNA的技术是A、Southern 印迹杂交B、Western 印迹杂交C、Northern印迹杂交D、Eastern 印迹杂交E、杂交淋巴瘤正确答案：C31、提取DNA的原则除外A、保证核酸一级结构完整性B、保留所有核酸分子C、核酸样品中不应存在有机溶剂和过高浓度的金属离子D、蛋白质、多糖和脂类分子的污染应降低到最低程度E、排除RNA分子的污染与干扰正确答案：B32、线粒体病分子生物学检验标志物不包括A、重复序列B、点突变位点C、缺失或插入片段D、线粒体单体型E、SNP位点正确答案：A33、下列不能被列入可移动基因范畴的是A、插入序列B、质粒C、染色体DNAD、转座子E、可转座噬菌体正确答案：C34、mtDNA中基因数目为A、39个B、27个C、22个E、13个正确答案：D35、Alu家族属于A、可变数目串联重复序列B、短串联重复序列C、长散在核元件D、短散在核元件E、DNA 转座子正确答案：D36、镰状细胞贫血患者，代替其血红蛋白β链N端第六个氨基酸残基谷氨酸的是A、酪氨酸B、丝氨酸C、缬氨酸D、丙氨酸E、苯丙氨酸正确答案：C37、以下哪种典型疾病的患者以性发育幼稚、身材矮小、肘外翻为特征A、Edward综合征B、Down综合征C、猫叫综合征D、Turner综合征E、Klinefelter综合征正确答案：D38、DNA芯片的固相载体不可以用A、半导体硅片B、玻璃片C、滤纸D、硝酸纤维素膜E、尼龙膜正确答案：C39、扩增产物为 RNA的技术是A、PCRB、逆转录 PCRC、TSAD、巢式PCRE、多重PCR正确答案：C40、不能作为 PCR模板的是A、DNAB、RNAC、质粒DNAD、蛋白质E、cDNA正确答案：D41、荧光定量PCR反应中,Mg²⁺的浓度对Taq酶的活性是至关重要,以DNA 或cDNA 为模板的 PCR反应中最好的Mg²⁺浓度是A、0.2~0.5mMB、1~2mMC、2~5mMD、6~8mME、0.5~2mM正确答案：C42、在对病原体检测中，一次性获得信息量最大的技术是A、ELISAB、荧光定量 PCR技术C、PCR-RFLP技术D、原位杂交技术E、基因芯片技术正确答案：E43、关于电转移下列描述不正确的是A、快速、高效B、需要特殊设备C、缓冲液用TAE或TBED、可产生高温E、常用NC膜作为支持介质正确答案：E44、肽质量指纹图谱常与哪一种质谱技术联合应用A、TOFB、ESIC、ESI-MSD、MALDIE、FAB正确答案：D45、单核苷酸多态性检测芯片探针的设计不正确的是A、一般采用等长移位设计法B、包括与靶序列完全匹配的野生型探针C、三种不同的单碱基变化的核苷酸探针D、靶序列与探针完全匹配的杂交点显示较弱的荧光信号E、可以对某一段核酸序列所有可能的SNPs位点进行扫描正确答案：D46、转录依赖扩增系统的描述错误的是A、以RNA为模板B、首先由靶RNA 合成DNA拷贝C、再由DNA 转录生成大量RNA 拷贝D、产物为DNAE、为等温扩增正确答案：D47、对于寡核苷酸探针，杂交温度一般低于其Tm值A、20~30℃B、10~15℃C、30~40℃D、15~30℃E、5℃正确答案：E48、结核杆菌耐氟喹诺酮类药物的分子机制是A、ropB基因突变B、rpsL基因突变C、katG基因突变D、gyrA基因突变E、embB基因突变正确答案：D49、遗传物质的突变不会导致下列哪些遗传事件A、遗传(基因)多态性B、遗传病C、等位基因D、新性状或表型的产生E、SNP正确答案：C50、关于定量PCR的描述，不正确的是A、可以定量或半定量检测PCR产物的方法B、定量PCR主要进行基因表达的分析和病原体的核酸检测C、水解探针技术中 TaqMan探针的位置位于两条引物之间D、分子信标在自由状态下为发夹结构，荧光信号极低E、定量PCR在封闭状态下进行，有效避免了产物的实验室污染正确答案：A51、在核酸检测体系中加入内质控，其作用不是监控的是A、标本中抑制物或干扰物所致的假阴性B、仪器故障如扩增仪孔间温度差异所致的假阴性C、核酸提取效率太低所致的假阴性D、样本吸取错误所致的假阴性E、试剂失效或Taq酶活性降低所致的假阴性正确答案：D52、下列关于淋病奈瑟菌的分子生物学检测正确的是A、以胞嘧啶 DNA 甲基转移酶基因为扩增靶序列，是早期应用于 PCR的靶点之一，敏感性较高，但是存在假阳性结果B、cppB基因在某些淋病奈瑟菌株中拷贝数较高，可导致假阳性C、omp3和opa基因相对于其他靶基因位点发生重组的频率较高D、以PorA假基因为靶基因扩增敏感度和特异性较低E、采用多个靶基因进行PCR检测可提高敏感性正确答案：E53、以下哪种疾病以身材高、睾丸小、第二性征发育差、不育为特征A、Edward综合征B、Down综合征C、猫叫综合征D、Turner综合征E、Klinefelter综合征正确答案：E54、关于核酸数据库叙述正确的A、主要包含于 GenBank、EMBL和DDBJ三大生物信息数据库B、各个数据库对核酸序列均采用了不同的记录格式C、三大数据库每周进行数据交换以达到数据更新一致D、用户通过特定的申请后可免费获取数据库中的核酸序列信息E、GenBank包含部分已知的核酸序列和部分蛋白质序列正确答案：A55、数字 PCR技术与荧光定量PCR的区别主要在于A、数字 PCR依赖Ct值,而荧光定量PCR不依赖Ct值B、荧光定量PCR是一种绝对定量，而数字PCR是一种相对定量C、数字PCR一般包括 PCR扩增和荧光信号分析两部分，而荧光定量PCR 不是D、荧光定量PCR一般包括PCR扩增和荧光信号分析两部分，而数字 PCR 不是E、荧光定量 PCR是一种相对定量，而数字 PCR是一种绝对定量正确答案：E56、TPMT在哪类药物的体内代谢中起着重要作用A、嘧啶类B、氨基糖苷类C、头孢类D、嘌呤类E、β内酰胺类正确答案：D57、NSCLC患者K-ras基因突变最常见的是A、A突变为TB、C突变为GC、T突变为AD、G突变为TE、G突变为A正确答案：D58、STR法医鉴定的基础是A、蛋白质空间结构B、基因扩增技术C、碱基配对原则D、孟德尔遗传定律E、基因多态性正确答案：D59、在pH为下述何种范围时，Tm值变化不明显A、pH为8~11B、pH为3~5C、pH为5~9D、pH为5~6E、pH为4~5正确答案：C60、1个体细胞中的全部染色体，按照其大小、形态特征顺序排列所构成的图像称为A、核型B、单倍体C、基因组D、染色体组E、整倍体正确答案：A61、焦磷酸测序技术不使用的酶是A、DNA 聚合酶(DNA polymerase)B、DNA 连接酶(DNA ligase)C、ATP硫酸化酶(ATPsulfurylase)D、荧光素酶(luciferase)E、三磷酸腺苷双磷酸酶(Apyrase)正确答案：B62、下面关于 mtDNA转录的描述不正确的是A、mtDNA转录是对称性转录B、重链和轻链的转录分别启动C、转录方向与复制方向相同D、转录过程类似于原核细胞E、成熟的mRNA 在3'末端加 poly尾,5'末端不加帽子结构正确答案：C63、线粒体疾病的遗传特征是A、近亲婚配的子女发病率增高B、女患者的子女约1/2 发病C、交叉遗传D、母系遗传E、发病率有明显的性别差异正确答案：D64、目前已发现多少个 mtDNA突变位点与Leber遗传性视神经病变有关A、20个B、25个C、30个D、35个E、40个正确答案：C65、血浆蛋白质组学研究的关键是A、2-DEB、去除高丰度干扰蛋白质C、质谱分析D、蛋白质酶解E、串联质谱正确答案：B66、PCR-RFLP技术分析mtDNAA3243G突变,PCR产物是A、300bpB、350bpC、400bpD、450bpE、500bp正确答案：C67、具有母亲生育年龄偏大和单卵双生的一致性两个特点的是A、Down综合征B、着色性干皮病C、家族性高胆固醇血症D、猫叫综合征E、WAGR综合征正确答案：A68、由线粒体基因编码的ATP酶亚基数目有A、1个B、2个C、7个D、3个E、13个正确答案：B69、下列叙述不正确的是A、F质粒的主要特征是带有耐药性基因B、R质粒又称抗药性质粒C、Col质粒可产生大肠杆菌素D、F质粒是一种游离基因E、F和Col El质粒可以在同一菌株内稳定共存正确答案：A70、MCC基因定位于哪个染色体上A、染色体5q21B、染色体10p24C、染色体5p23D、染色体1q13E、染色体10q21正确答案：A71、inhA基因的突变与下列哪种药的耐药性相关A、利福平B、异烟肼C、吡嗪酰胺D、乙胺丁醇E、链霉素正确答案：B72、BRCAI基因定位于人哪个染色体上A、染色体11q24B、染色体1p32C、染色体9p21D、染色体2p32E、染色体17q21正确答案：E73、PCR反应中延伸的时间取决于A、引物长度B、待扩增片段的长度C、模板的纯度D、Taq DNA 聚合酶的量E、模板的含量正确答案：B74、线粒体基因组与核基因组之间，下面描述不正确的是A、线粒体基因组与核基因组分别在不同的位置进行自主复制和转录，之间互不影响B、mtDNA突变可引起编码蛋白功能障碍，影响细胞呼吸、氧化功能，进而影响核DNA的表达C、mtDNA 自主性复制，但复制所需的酶、调控因子等由核基因编码D、二者虽在地理位置上独立的，但二者之间关系十分密切E、线粒体基因组与核基因组之间存在“交叉对话”，相互影响，相互协调正确答案：A75、DNA 双螺旋之间氢键断裂，双螺旋解开，DNA分子成为单链，这一过程称A、变性B、复性C、复杂性D、杂交E、探针正确答案：A76、结核杆菌的分子生物学检验临床意义中不包括A、早期诊断B、鉴别诊断C、疗效评价D、快速诊断E、耐药检测正确答案：A77、一种标记核酸与另一种核酸单链进行配对形成异源核酸分子的双链，这一过程称A、复性B、探针C、杂交D、复杂性E、变性正确答案：C78、关于白假丝酵母菌的分子生物学检验，正确的描述是A、PCR技术用于假丝酵母菌诊断研究，主要采用真菌核糖体 RNA 基因(rDNA)片段作为靶基因B、5.8SrDNA、18SrDNA和28SrDNA保守区序列分析适用于种间水平的鉴定C、rDNA 保守序列的ITSI/ITSⅡ可变性很小D、ITSI/ITSⅡ具有一定种间保守性和种内特异性E、ITSI/ITSⅡ可作为属间鉴定的靶点正确答案：A79、流感病毒的植物血凝素和神经氨酸酶是A、胞膜B、衣壳C、胞膜刺突D、核酸E、壳粒正确答案：C80、IPG的特点描述中不正确的是A、IPG是丙烯酰胺衍生物，可形成pH梯度B、IPG-IEF较两性电解质具有更高的分辨率,可达到pH0.001C、IPG长度越长，能分辨出来的蛋白质数量越多D、IPGpH梯度越宽分辨率越高E、IPG在进行第二向电泳前必须进行平衡正确答案：D81、不可进行活体供体器官移植的移植物有A、肝脏B、心脏C、肾脏D、皮肤E、骨髓正确答案：B82、TaqMan探针技术要求扩增片段应在A、300~350bpB、150~200bpC、250~300bpD、200~250bpE、50~150bp正确答案：E83、下列有关遗传病的叙述中正确的是A、遗传病是指由遗传物质改变而引起的疾病B、遗传病只能诊断不能治疗C、先天性疾病都是遗传病D、遗传病都是由基因突变引起的E、遗传病一定是先天性疾病正确答案：A84、核酸分子杂交的基础是A、抗原抗体B、配体受体结合C、甲基化D、磷酸化E、碱基互补配对正确答案：E85、杂交时的温度与错配率有关，错配率每增加1%，则Tm值下降A、2~2.5℃B、1~1.5℃C、3~3.5℃D、0.5℃E、4~4.5℃正确答案：B86、目前被 DNA 自动化测序技术广泛采用的酶是A、大肠杆菌DNA聚合酶ⅠB、Klenow 片段C、测序酶D、耐热 DNA 聚合酶E、限制性内切核酸酶正确答案：D87、当SDS 单体浓度>1mmol/L时，它与大多数蛋白质平均结合比为A、0.14gSDS/1g蛋白质B、0.54gSDS/1g蛋白质C、1.4gSDS/1g蛋白质D、2.4g SDS/1g蛋白质E、3.4g SDS/1g蛋白质正确答案：C88、相对于第二代测序技术，新一代测序技术不具有的优点是A、高通量B、并行C、一次运行可产生海量的高质量数据D、模板不需要克隆E、较长的测序读长正确答案：E89、乙型肝炎病毒的核酸类型是A、双股DNAB、负股DNAC、正股 DNAD、单股DNAE、DNA-RNA 二聚体正确答案：A90、产前诊断临床应用尚不广泛，原因不包括A、需要生殖医学与遗传学技术的结合B、诊断技术不成熟C、诊断的准确性受到多种制约D、单个细胞的遗传诊断困难E、已明确母亲为携带者的婴儿正确答案：B91、假二倍体的染色体条数是A、46B、45C、47D、44E、数目不定正确答案：A92、下列实验材料中不能用于制备染色体的有A、腹水细胞B、红细胞C、绒毛膜细胞D、骨髓细胞E、胸水细胞正确答案：B93、原核生物基因组结构特点不应包括A、断裂基因B、含有重复顺序C、含插入序列D、具有操纵子结构E、转录产物为多顺反子正确答案：A94、以下关于原癌基因说法不正确的是A、普遍存在于人类或其他动物细胞基因组中的一类基因B、在生物进化过程中不稳定C、在控制细胞生长和分化中起重要作用D、容易在多种因素作用下激活成活性形式的癌基因E、活性形式的癌基因才引起细胞癌变正确答案：B95、不是自动 DNA 测序仪主要系统之一的是A、测序反应系统B、电泳系统C、荧光检测系统D、探针荧光标记系统E、电脑分析系统正确答案：D96、电脑显示和打印出的DNA碱基序列图谱中不出现的颜色是A、紫B、蓝C、绿D、橙E、红正确答案：A97、人类可遗传的变异中最简单、最常见的一种是A、RFLPB、VNTRC、STRD、SNPE、CNV正确答案：D98、属于探针序列扩增技术的是A、PCRB、RT-PCRC、巢式PCRD、链置换扩增E、bDNA正确答案：D99、在 Southern印迹中常用的核酸变性剂是A、氢氧化钠B、碳酸钠C、甲醛D、乙醛E、盐酸正确答案：A100、封闭易对膜产生“负染”的封闭剂是A、脱脂奶粉B、凝集素C、血红蛋白D、酪蛋白E、牛血清蛋白正确答案：C。

淋病奈瑟菌的分类与鉴定-精选文档

淋病奈瑟菌感染预防及阻断
•凡在1个月内和淋病患者有过性接触者，均应进行预防性治疗。
•如有淋病证据者，则应按淋病的治疗方案接受治疗。
•治疗期间禁止性生活，注意隔离。
杜绝不洁性生活
•污染物如内裤、浴巾以及其他衣物等应煮沸消毒。
•与家人分开使用洗浴用具。
•禁止与婴幼儿、膜炎，继发性输卵管卵
巢脓肿及破裂所致的盆腔脓肿、腹膜炎等并发症。
标本采集原则
•在抗菌药物应用之前采集
•禁用一切消毒剂清洗消毒会阴部 •采集标本后及时进行床旁接种
男性病人标本采集急性期：无菌生理盐水清
慢性期：无菌生理盐水清洗
会阴部后，用特制的棉拭子插入尿道内约2cm，旋转采
目前，常采用基因探针杂交技术及PCR技术针对淋病奈瑟菌的保守基因，包括隐蔽性质粒、抗淋病奈瑟菌胞嘧啶DNA甲基转移酶、透明蛋白基因、菌毛DNA、rRNA基因和porA基因进行检测。
淋病奈瑟菌感染治疗原则
尽早确诊，及时治疗考核疗效、疗后观察
明确感染类型
伴侣检查，同时治疗正规、足量、全面治疗
1、产青霉素酶菌株( PPNG菌株)：质粒介导耐青霉素菌株 2、染色体介导耐药性菌株（CMRNG菌株）：是由细菌染色体介导，耐受青霉素、四环素、头孢菌素、链霉素和大观霉素等。 3、耐四环素菌株（TRNG菌株）：为由细菌质粒介导耐四环素菌株。 4、耐氟喹诺酮菌株：是由细菌染色体介导环丙沙星、氟哌酸和氧氟沙星等。
是否合并其他感染
是否存在耐药
淋病奈瑟菌感染治疗药物
•青霉素类 •Β -内酰胺酶抑制剂 •氨基糖苷类 •头孢菌素类 •氟喹诺酮类
•四环素类
•大环内酯类
淋病奈瑟菌感染治疗中的问题
•抗菌药物使用量不足：诱导耐药 •滥用抗菌药物进行预防：促进耐药菌株产生 •抗菌药物过量使用：抗菌药物选择作用

临床分子生物学检验技术模拟练习题(附答案)

临床分子生物学检验技术模拟练习题（附答案）一、单选题（共100题，每题1分，共100分）1、检测TB的实验室技术中，被认为是目前最先进的一种检测TB及其耐药性的方法是A、PCR技术B、荧光定量 PCR技术C、PCR-RFLP技术D、全自动结核杆菌检测技术E、DNA 测序技术正确答案：D2、属于微小缺失综合征的不包括A、Wilms瘤B、着色性干皮病C、Angelman 综合征D、Prader-Willi综合征E、WAGR综合征正确答案：B3、淋病奈瑟菌耐青霉素的分子机制与以下哪组基因有关A、katG和inhAB、gyrA和parCC、penA和ponAD、gyrA和gyrBE、rrs和rpsL正确答案：C4、下列不是影响DNA复性因素的是A、DNA浓度B、DNA的分子量C、温度D、碱基组成E、DNA 的来源正确答案：E5、硝酸纤维素和 PVDF膜结合蛋白主要靠A、疏水作用B、氢键作用C、离子键作用D、盐键作用E、酯键作用正确答案：A6、下列不能用于核酸转移作固相支持物的是A、NC膜B、尼龙膜C、化学活性膜D、滤纸E、PVC膜正确答案：E7、有关多重PCR的描述正确的是A、同一个模板，多种不同的引物B、相同的引物，多种不同的模板C、多个模板，多种引物D、引物的Tm值、反应时间和温度、反应缓冲液等尽量不一致以区分不同产物E、同一反应内各扩增产物片段的大小应尽可能相同或接近正确答案：A8、Western 印迹过程中若转移<20kD的蛋白质时应采用何种硝酸纤维素膜A、0.2μmB、0.3μmC、0.4μmD、0.5μmE、0.6μm正确答案：A9、双向电泳的样品制备目的不包括的是A、还原B、氧化C、变性D、去除蛋白质杂质E、溶解正确答案：B10、寡核苷酸探针的Tm简单计算公式为A、Tm=4(G+C)+2(A+T)B、Tm=2(G+C)+4(A+T)C、Tm=6(G+C)+4(A+T)D、Tm=2(G+C)+6(A+T)E、Tm=6(G+C)+2(A+T)正确答案：A11、骨髓移植后引起GVHD的主要效应细胞是A、T细胞B、B细胞C、基质细胞D、造血干细胞E、单核细胞正确答案：A12、阴性质控品失控的原因不包括A、扩增产物污染B、标本交叉污染C、放射性污染D、基因组DNA或质粒的污染E、试剂污染正确答案：C13、下列何种技术不可用于 PGDA、微卫星 DNA序列B、变性高效液相色谱分析法C、基因芯片D、基因测序E、Sourthern blot正确答案：E14、以等位基因特异的寡核苷酸探针杂交法诊断某常染色体隐性遗传病时，若能与突变探针及正常探针接合，则该样本为A、正常人B、杂合体患者C、携带者D、不能确定E、纯合体患者正确答案：C15、提高移植存活率的方法以下不可行的是A、HLA配型B、mH的鉴定C、ABO血型鉴定D、移植前输入补体和抗体E、移植前应用免疫抑制剂正确答案：D16、移植物抗宿主反应以下列何项为主要特征A、上皮癌的高发生率B、供者T淋巴细胞与受者同种异型抗原发生应答C、被移植的B淋巴细胞产生自身抗体D、常出现自然缓解E、被移植的T淋巴细胞产生自身抗体正确答案：B17、关于肺炎支原体的实验室检测，正确的是A、体外培养生长缓慢但阳性率很高B、免疫学方法检测的假阳性率较低C、体外培养在支原体感染的早期诊断上具有重要意义D、利用分子生物学方法可以进行流行病学调查和耐药基因分析E、PCR技术可检测到极微量的DNA，但特异性不高正确答案：D18、下列方法中不属于RNA诊断的是A、Northern blotB、RNA斑点杂交C、基因芯片D、mRNA差异显示PCR技术E、逆转录 PCR正确答案：C19、下列关于病毒基因组描述不正确的是A、基因组可以由DNA或RNA组成B、有重叠基因C、基因组大部分是用来编码蛋白质的D、有高度重复序列E、相关基因往往丛集形成一个功能单位正确答案：D20、纯DNA 的A₂₆₀/A₂₈₀比值为1.8,可使比值升高的是A、蛋白质B、酚C、氯仿D、RNAE、乙醇正确答案：D21、下列符合解脲脲原体基因组结构特征的是A、基因组大于肺炎支原体基因组B、UU为环状染色体C、终止密码子 UGA编码赖氨酸D、完全遵循遗传密码的通用性E、G+C含量丰富正确答案：B22、操纵子结构不存在于A、原核生物基因组中B、大肠杆菌基因组中C、真核生物基因组中D、病毒基因组中E、细菌基因组中正确答案：C23、下面关于线粒体的描述不正确的是A、是真核细胞重要的细胞器B、线粒体的主要功能是氧化产能C、是细胞的能量工厂D、半寿期是10天左右，其数量和体积保持不变E、线粒体中存在基因，线粒体基因突变会导致疾病的发生正确答案：D24、第一个被发现可以预测晚期转移性结直肠癌患者是否能从靶向治疗药物西妥昔单抗中获益的生物标志物是A、K-rasB、EGFR基因C、TTF-1D、CEAE、bcl-2基因正确答案：A25、目前国际唯一公认的线粒体糖尿病致病突变是A、C3254AB、T3271CC、A4833GD、A3243GE、T16189C正确答案：D26、可以用来检测具有生物活性的蛋白质的是A、native PAGEB、SDS-PAGEC、2-DED、IEFE、Western blotting正确答案：A27、人类染色体中，形态最小的是A、X染色体B、Y染色体C、22号染色体D、21号染色体E、1号染色体正确答案：D28、判断HBV复制及传染性的直接指标是检测A、HBV DNA多聚酶活力B、HBsAgC、HBV DNAD、HBeAgE、HBcAg正确答案：C29、经检查,某患者的核型为46,XY, del(6)p11-ter,说明其为何种患者A、染色体部分丢失B、染色体丢失C、嵌合体D、环状染色体E、染色体倒位正确答案：A30、著名的Ph1染色体发生的易位是A、t(9;22)(q11;q34)B、t(5;11)(q34;q22)C、t(9;22)(q34;q1l)D、t(9;21)(q33;q11)E、t(5;22)(q34;q11)正确答案：C31、线粒体基因组编码几种rRNAA、22种B、20种C、18种D、3种E、2种正确答案：E32、患者进行抗结核治疗2个月后检出结核杆菌的rpoB基因耐药突变，建议患者更换的药物是A、利福平B、左氧氟沙星C、吡嗪酰胺D、乙胺丁醇E、链霉素正确答案：A33、下列不是微流控芯片常用检测方法的是A、紫外吸收检测法B、化学发光检测法C、电泳检测法D、电化学检测法E、荧光检测法正确答案：C34、下列疾病中发病率与母亲年龄增大有关的是A、血友病 AB、着色性干皮病C、Patau 综合征D、猫叫综合征E、WAGR综合征正确答案：C35、Western 印迹过程中若转移>20kD的蛋白质时应采用何种硝酸纤维素膜A、0.25μmB、0.35μmC、0.45μmD、0.55μmE、0.65μm正确答案：C36、染色体结构畸变的基础是A、染色体核内复制B、染色体断裂及断裂后的异常重排C、姐妹染色单体交换D、染色体丢失E、染色体不分离正确答案：B37、任意引物 PCR的特点描述错误的是A、需预知靶基因的核苷酸序列B、通过随机引物与模板序列随机互补C、扩增后可直接得到靶基因的多态性指纹图谱D、可用于基因组DNA图谱构建E、可用于临床致病菌的流行病学检测、分型正确答案：A38、与异烟肼耐药无关的基因是A、katGB、ahpCC、embBD、inhAE、kasA正确答案：C39、生物传感器中的免疫传感器所使用的生物敏感材料是A、细胞B、酶C、核酸D、抗原和抗体E、微生物正确答案：D40、关于梅毒螺旋体的实验室检测，下列描述正确的是A、分子生物学方法是耐药基因分析和流行学研究的首选方法B、诊断梅毒的传统方法是体外培养C、分子生物学方法不能早期诊断梅毒感染D、血清学检查普遍用于梅毒的筛查、疗效观察和流行病学检查，对早期梅毒诊断敏感E、镜检法简便，特异性高，但不能用于皮肤黏膜损害的早期诊断正确答案：A41、可同时引起 MELAS 综合征、耳聋和糖尿病的mtDNA 突变是A、C3254AB、T3271CC、A4833GD、A3243GE、T16189C正确答案：D42、关于 Sanger双脱氧链终止法叙述错误的是A、每个 DNA模板需进行一个独立的测序反应B、需引入双脱氧核苷三磷酸(ddTNP)作为链终止物C、链终止物缺少3'-OH，使链终止D、测序反应结果是产生4组不同长度的核苷酸链E、高分辨率变性聚丙烯酰胺凝胶电泳可分离仅差一个核苷酸的单链DNA 正确答案：A43、关于 PCR-RFLP错误的是A、采用特定的限制性内切酶对 PCR产物进行处理B、对酶切后的片段长度进行分析C、判断有无点突变D、突变位点不必在限制酶识别序列中E、需先进行 PCR扩增正确答案：D44、基因诊断间接方法不包括A、基于SNP的单倍型分析B、Southern blotC、基于STR的微卫星分析D、PCR-RFLPE、RFLP连锁分析正确答案：B45、用于蛋白质检测的标本长期保存于A、8℃B、-20℃C、4℃D、-70℃E、室温正确答案：D46、下面对mtDNA中D环区(D-loop)的描述正确的是A、是结构基因，编码13个蛋白多肽B、编码22个 tRNAC、编码2种rRNA,即12S rRNA 和16S rRNAD、参与调控线粒体的复制和转录E、可折叠成茎环结构正确答案：D47、作为芯片固相载体的材料描述正确是A、主要有玻片、硅片等实性材料B、不使用硝酸纤维素膜、尼龙膜及聚丙烯膜等膜性材料C、这些载体材料不需要处理，其表面存在活性基团(如羟基或者氨基)D、可以直接固定已经合成的寡核苷酸探针E、不需要对介质表面进行化学预处理——活化正确答案：A48、点突变引起的血友病A的分子诊断方法不包括A、PCR-SSCPB、PCR-RFLPC、PCR-VNTRD、PCR-STRE、长距离 PCR正确答案：E49、单基因遗传病分子诊断的主要应用是A、症状前诊断B、耐药基因检测C、携带者诊断D、携带者筛查E、产前诊断正确答案：E50、关于mtDNA非编码序列，描述正确的是A、不参与mtDNA 的复制、转录等，属“无用”信息B、是高度重复序列C、占整个mtDNA 的15%,比例较大D、mtDNA 中有两段非编码区E、位于 mtDNA的轻链正确答案：D51、到目前为止已确定的36个NAT2 基因变异种最常见的等位基因是A、NAT2*3B、NAT2*4C、NAT2*5D、NAT2*6E、NAT2*7正确答案：B52、在器官移植中HLA 配型最重要的位点是A、HLA-DRB、HLA-AC、HLA-BD、HLA-DPE、HLA-C正确答案：A53、属于染色体结构异常的染色体病为A、Klinefelter 综合征B、Patau 综合征C、Edward综合征D、猫叫综合征E、Down综合征正确答案：D54、猫叫综合征患者的核型为A、46, XY,r(5)(p14)B、46,XY, ins(5)(p14)C、46,XY, del(5)(p14)D、46,XY,t(5;8)(p14;p15)E、46, XY, dup(5)(p14)正确答案：C55、生殖健康的内容主要包括A、计划生育咨询、信息、教育、交流及服务，人工流产的预防和流产后果管理B、产前保健、安全分娩及产后保健的教育与服务，特别是母乳喂养和母婴保健C、不孕症的预防和适当治疗生殖道感染、性传播疾病及其他生殖健康问题治疗D、关于性行为、生殖健康及父母责任的信息、教育和咨询E、以上都是正确答案：E56、核酸序列的基本分析不包括A、测序分析B、限制性酶切分析C、序列变换分析D、统计分析E、分子量、碱基组成、碱基分布正确答案：D57、下列说法正确的是A、液状石蜡切片中缩短蛋白酶K的消化时间可增加提取DNA片段的长度B、组织样本不需蛋白酶K消化即可进行核酸提取C、用于提取核酸的石蜡切片需要先用二甲苯脱蜡D、用于提取核酸的石蜡切片不需脱蜡即可进行核酸提取E、新鲜的组织样本需要先用二甲苯脱蜡才能进行核酸提取正确答案：C58、PCR反应体系不包括A、耐热的 Taq DNA 聚合酶B、cDNA 探针C、4种dNTPD、合适的缓冲液体系E、模板DNA正确答案：B59、点/狭缝杂交可以用于A、快速确定是否存在目的基因B、不仅可以检测DNA样品中是否存在某一特定的基因，而且还可以获得基因片段的大小及酶切位点分布的信息C、用于基因定位分析D、阳性菌落的筛选E、蛋白水平的检测正确答案：A60、HCV 基因分型的“金标准”是A、基因分型检测芯片B、测序分析法C、实时荧光 PCRD、基因型特异性引物扩增法E、RFLP正确答案：B61、人类基因组的组织特点描述不正确的是A、基因组中各个基因的大小和内部组织的差异不大B、基因组含重复序列C、大部分为非编码序列D、功能相关的基因常散在分布于不同的染色体上E、每个结构基因都有单独的调控序列正确答案：A62、荧光定量 PCR检测核酸量的时间段在A、非指数期B、PCR反应的最初阶段C、PCR反应最后的时间段D、指数期的起始阶段E、指数期的终末阶段正确答案：D63、通常标记第二抗体的酶是A、ALTB、ASTC、ACPD、ACATE、AKP正确答案：E64、ICAT碘代乙酰亚胺结构与哪一种氨基酸发生耦联A、半胱氨酸B、胱氨酸C、酪氨酸D、精氨酸E、碱性氨基酸正确答案：A65、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的原理不正确的是A、SDS是一种阴离子去污剂B、SDS可以与蛋白质的疏水部分相结合，从而使蛋白质获得负电荷C、SDS-PAGE时蛋白质的迁移率与分子大小相关D、SDS-PAGE使具有不同等电点的蛋白质得以分离E、SDS与蛋白质结合后可以屏蔽天然蛋白质的电荷正确答案：D66、Sanger双脱氧链终止法使用的链终止物是A、dNTPB、NTPC、ddNTP正确答案：C67、核酸分子杂交的基础是A、抗原抗体结合B、甲基化C、碱基互补配对D、配体受体结合E、磷酸化正确答案：C68、核型为47，XXY 的细胞中可见到几个X染色质A、0B、3C、2D、1E、2或3正确答案：D69、线粒体基因组22个tRNA 可转录几种 tRNAA、22种B、20种C、18种D、13种E、2种正确答案：B70、下列说法错误的是A、用于RNA检测的样本短期可保存在-20℃B、用于 PCR检测的样本可用肝素作为抗凝剂C、如使用血清标本进行检测应尽快分离血清D、外周血单个核细胞可从抗凝全血制备E、用于核酸提取的痰液标本应加入 1mol/L NaOH初步处理正确答案：B71、人类基因组的碱基数目为A、2.9×10⁶bpB、3.0×10⁹bpC、4.0×10⁹bpD、4.0×10⁶bpE、4.0×10⁸bp正确答案：B72、基因芯片技术的优点不包括A、操作简便B、缩微化C、观察结果直观D、芯片检测稳定性高E、高通量正确答案：D73、一些致死性呼吸障碍、乳酸酸中毒、肝肾衰竭病例mtDNA 突变形式是A、点突变B、插入C、缺失D、拷贝数变异E、动态突变正确答案：D74、关于AR说法不正确的是A、AR基因位于Xq11.2-q12,编码雄激素受体B、AR基因的内含子含有可变数目的CAG串联重复序列C、CAG序列具有多态性D、美国黑人易患前列腺癌的主要遗传基础就是AR基因的串联重复序列较短E、阻断 AR可以延缓前列腺癌的进展正确答案：B75、发出临床检验报告前应进行结果审核，审核内容不包括A、室间质量评价是否合格B、临床医生申请的检验项目是否已全部检验C、室内质控是否在控D、检验报告是否正确E、检验结果与临床诊断是否相符正确答案：A76、HBV DNA 中最小的一个开放阅读框是A、P基因区B、S基因区C、X基因区D、前S基因区E、C基因区正确答案：C77、目前测序读长最大的测序反应是A、双脱氧终止法B、边合成边测序C、焦磷酸测序D、化学裂解法E、寡连测序正确答案：A78、第二代测序技术一般不用到A、双脱氧链终止法B、文库接头C、高通量的并行PCRD、高通量的并行测序反应E、高性能计算机对测序数据进行拼接和分析正确答案：A79、常见的进行乳液 PCR(emulsion PCR)的场所是A、芯片表面B、磁珠表面C、PTP板孔D、尼龙膜上E、毛细管内正确答案：B80、关于 Leber遗传性视神经病的描述不正确的是A、mtDNA 突变是Leber遗传性视神经病的分子基础B、属母系遗传病C、病变会累及视网膜、巩膜等，最终导致视神经变性D、目前已发现与本病相关30多个mtDNA 突变位点E、mtDNA 突变分原发突变和继发突变，只有原发突变会导致本病的发生正确答案：E81、若某人既有睾丸又有卵巢，内外生殖器间性，第二性征发育异常，则此人患有以下哪种疾病A、性逆转综合征B、真两性畸形.C、男性假两性畸形D、女性假两性畸形E、性腺发育不全正确答案：D82、关于电转膜的描述不正确的是A、半干转特别适合大分子蛋白质的转移B、转膜的顺序是膜在负极一侧，凝胶靠近正极一侧C、缓冲液 pH过低会导致部分蛋白质凝集沉淀D、转膜缓冲液中含有甲醇成分E、转膜时间不宜过长正确答案：A83、基因芯片技术的临床应用不包括A、由于蛋白质翻译后修饰改变而引起的疾病的诊断B、疾病的诊断C、基因突变的检测D、指导个体用药E、药物的筛选正确答案：A84、可作为分子遗传标记的是A、HLAB、单拷贝序列C、高表达蛋白D、RFLPE、染色体正确答案：D85、关于单基因遗传病的叙述，正确的是A、原发性高血压是单基因遗传病B、发病机制都已阐明C、受多对等位基因控制D、可进行定性诊断和定量诊断E、在群体中发病率高正确答案：D86、最常用的DNA 探针标记方法是A、随机引物标记B、切口平移标记C、3'-末端标记D、5'-末端标记E、PCR法正确答案：A87、离子交换层析有效分离蛋白质的依据是A、蛋白的pIB、蛋白的分子大小C、配体的特异性亲和力D、蛋白的溶解度E、蛋白所带电荷正确答案：E88、探针基因芯片技术的本质就是A、基因重组技术B、酶切技术C、聚合酶链反应技术D、核酸分子杂交技术E、蛋白质分子杂交技术正确答案：D89、常见的常染色体病为A、Turner综合征B、Down综合征C、WAGR综合征D、猫叫综合征E、Klinefelter综合征正确答案：B90、G-6-PD缺乏时导致机体下列哪些物质增多(↑)或减少(↓)A、H₂O₂、GSH和NADPH↑B、H₂O₂和GSH↑,NADPH↓C、H₂O₂↑,GSH和NADPH↓D、GSH和NADPH↑,H₂O₂↓E、H₂O₂和NADPH↑,GSH↓正确答案：C91、基因芯片技术的主要步骤不包括A、杂交反应B、芯片的设计与制备C、信号检测D、酶切分析E、样品制备正确答案：D92、PCR-SSCP 描述中错误的是A、检测核酸点突变的技术B、需制备成单链DNAC、根据空间构象由DNA 的碱基组成决定的原理D、不需电泳E、敏感性与待分离DNA 的长度有关正确答案：D93、单基因遗传病诊断最重要的前提是A、了解患者的家族史B、疾病表型与基因关系已阐明C、了解相关基因的基因克隆和功能分析等知识D、了解相关基因的染色体定位E、进行个体的基因分型正确答案：A94、下列叙述错误的是A、原核生物基因组具有操纵子结构B、原核生物结构基因是断裂基因C、原核生物基因组中含有插入序列D、原核生物基因组中含有重复顺序E、原核生物结构基因的转录产物为多顺反子型mRNA 正确答案：B95、羊膜穿刺的最佳时间在孕期多少周时A、4B、30C、10D、2E、16正确答案：E96、下列方法中能同时检测几种疟原虫混合感染的是A、竞争PCRB、巢式PCRC、多重PCRD、普通PCRE、PCR-RFLP正确答案：C97、关于 Western 印迹以下说法正确的是A、固相膜保存时间短B、需要对靶蛋白进行放射性核素标记C、是由凝胶电泳和固相免疫组成的D、缺点是不能对转移到固相膜上的蛋白质进行连续分析E、检测的灵敏性为0.1~1ng正确答案：C98、下列哪种质粒带有抗性基因A、F质粒B、Col质粒C、接合型质粒D、Vi质粒E、R质粒正确答案：E99、pncA基因突变与下列哪种酶活性改变相关A、糖基转移酶B、DNA 旋转酶C、泵蛋白D、吡嗪酰胺酶E、DNA 依赖RNA 聚合酶正确答案：D100、下列哪一种病毒的遗传物质为RNAA、乙肝病毒B、乳头瘤状病毒C、疱疹病毒D、人类免疫缺陷病毒E、腺病毒正确答案：D。

淋球菌耐药机制和治疗策略研究进展

淋球菌耐药机制和治疗策略研究进展
罗晶晶;戎成婷;惠磊;吴新安;张旺
【期刊名称】《解放军药学学报》
【年(卷),期】2024(37)1
【摘要】淋球菌是引起淋病的病原体,淋球菌对抗生素的耐药性不断增加,影响淋病的有效治疗。

随着耐药淋球菌株的不断增加,其临床治疗难度也越来越大。

本文就近年来对淋球菌的耐药进展、耐药机制、治疗研究等方面进行综述。

【总页数】4页(P80-83)
【作者】罗晶晶;戎成婷;惠磊;吴新安;张旺
【作者单位】合肥京东方医院;合肥市第三人民医院
【正文语种】中文
【中图分类】R969
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