龟苓膏中绿原酸的测定方法、稳定性的研究

ｈａ ｅ Ｔ ｈ ｌｉ ｎＰ ｄ ｔ ｎ Ｎ ｃ ｏｇｓ ｄｒｕｓ
高 新 技 术
龟苓膏中绿原酸 的测定方法 、 稳定性 的研究
彭翠芳 莫桂 坚 谭 洁 霞 黄 永 文、 明 何 姗 李 蒋 丽
（ 中恒集 团广西梧州双钱 实业有限公 司， 西 梧 州 ５ ３ ０ ） 广 ４０ ２
合在 龟苓 膏 中 取 绿原 酸 ， 到 龟苓 膏绿原 酸含 量的 衰减 数据 。 提 得 关键 词 ： 高效 液相 色谱 法 ； 龟苓 膏 ； 原 酸 绿
中图分 类号 ：Ｍ７ Ｔ 文献 标识 码 ： Ａ
１前言 ２ ． ２力怯 度 ， 。（ 混匀 此标准储备液 在 ４ｃｔ 中 ， ｏｖ￣ ， 可保存 龟苓 膏 口感嫩滑而带有弹性 ， 味道甘甜 ， 既 ２． ．１方法 Ａ ２ ５） ｄ。 ２ ．１色谱条件 ．１ ２． 可以清热 解毒 ， 可以消 暑生津 ， 以来 ， 又 一直 深 ２． ．２ ２ ３标准 曲线制备 受 两广 、 、 港澳 东南亚 的消费者 喜爱 ， 近些年 ， 随 色谱柱 ：１（５ ｍ ｘ． ｍ 。 Ｃ ８２０ ｍ ４ ｒ ） ６ ａ 精密 称取绿原酸标准使用 液 ， 流动相稀 加 温度 ： 室温。 着人民群众生活水平的不断提高，健康理念的 释 并在 容量 瓶 中定容 的浓 度分 别 为 ２ ￣／ｔ ．ｇ ， ｏ ｍ 不断认识 ， 凉茶类产 品逐 渐在全 国范 围热 销 ， 也 流动相 ： 乙腈＿ Ｊ Ｏ 酸溶液 （３ ７ １： ） ８ ４ ￣ ／ｌ ．￣／ｌ ．￣／ｌ１ｕ ｍ 的溶 液 ， ． ｇ ，０ ｇ ，０ ｇ ，０ ￣ ｌ ０ ｍ ６ ｌ ｍ ８ｔ ｍ 即 带动 了龟苓膏市 场的不断扩大 ，产量和销量 逐 流 速 ：． Ｊ ｎ １ ｍＩｍｉ。 ０ 得标 准溶液 。 年提高 ， 创造了较好的经济效益。 场上也 涌出 市 检测波长 ：２ ｎ ３ ７ ｍ。 ２． ．２ ２ ． 品制备 ４样 了很多 的龟苓膏 生产 厂家 ，各种龟苓膏 品牌应 进样量 ：Ｏ Ｌ ｌｌ 。 取膏体适量 ， 搅拌成浆 ， 取试样 １ｇ准确 称 ５（ 运而生 ， 但品质却参差不 齐 ， 至出现 了以凉 粉 甚 ２ ．２标准液制备 ．１ ２． 至 ０ １） ０ ｇ于小烧杯 中， 甲醇 １ｍ 稀 释后转移 加 ５Ｌ 膏滥充龟苓膏 的现象 ， 为了规范龟苓膏行业 ， 统 精密称取绿原酸标准品适量置棕 色容量瓶 于 ５ ｍ 容量瓶 ， ０Ｌ 容器另用约 １ｍ ５ Ｌ甲醇分次洗 龟苓膏 的产 品质量 ，广西 壮族 自治 区质量 技 中 ， 甲醇制成 １ｕ ｍ 的溶液 ， 加 ０￣ ｌ 即得标准溶液 。 涤 并转移 入该容量瓶 中 ； 超声提取 ３ｍ ｎ放冷 ， ０ ｉ， 术监督局 、 广西梧 州市质量技术监督局联合 梧 ２ ．３标准 曲线制备 ．１ ２－ 补加 甲醇至刻度并摇匀 ， 静置后 分取 上清液作 州龟 苓 膏主要 生产 厂家 梧 州双 钱实 业有 限 公 吸 取 上 述 标 准 溶 液 ０ ｍ ，８ ｌ１ｍ ， 为检测液 。 ． ｌ ． ，２ ｌ ４ ０ｍ 司 、梧卅致 中和保健食 品有限公司先后 推 出了 １ ｍ ，０ ｌ 甲醇定容至 １ｍ 容量瓶 中， ｌ ． ｌ． ， ６ ２ｍ 加 ０ｌ 摇匀 ２２ ２ ５结果计算 Ｄ ５ ９－０７地 理标志产 品 梧州 龟苓膏》 即得。注入高效液相色谱仪， Ｂ４￣ １２０ （ 、 测定其峰面积， 以 ｘ： ！ ： Ｑ Ｄ ５１８－ ０９Ｆ ：膏质量安全要求》 Ｂ４， ０ ２０ （Ｅ ｚ ｒ ＂ ５ （ ￣ 标准， 峰 面积为纵坐标 ， 浓度为横坐标绘制标 准曲线 ， 式中： １ｏ ０Ｏ ｏ ０ １０ 对龟苓膏 的原辅 材料要求 、 技术要求 、 生产过 程 求 回归方程 。 要求 、 试验方 法 、 规则等作 出 了规定 ， 中 检验 其 ２． ２１ 品制备 ４样 ｘ 试样 中的含量 ， 位为克每 千克或克 一 单 最 主要 的是规 定了龟苓膏 的几项 营养 指标 和检 取膏体试样适量 ， 搅拌成浆 ， 精密称取 ２ ｇ 每升（／ 或 Ｌ ５ ｇｓ ｋ ） 验方法 ， 确保龟苓 膏应有的营养成分 ， 龟苓 （ 至 ｏ １ 于 １０ ｌ 确保 准确 ． 置 ０ ０ｍ 容量瓶 中 ， 加无水 乙 Ｃ 由标 准 曲线 求得 进样 液 中绿原 酸 的 一 膏 的品质 。标 准 中规定 了通过 高效液 相色谱法 醇 定容至 １０ ｌ ０ｍ ， ， 称量 超声提取处 理 ２ｍｎ放 浓度 ， 为微克每毫升 （咖 １ ０ ｉ， 单位 ） 对龟苓膏绿原酸 的检测 。 冷 ， 水乙醇至处理前质量 ， 匀 ， 置 ， 补无 摇 放 分取 Ｖ 试样定容体积 ， 一 单位为毫升（ １ ｍ） 近年来的研究表 明，绿原酸是一种 重要的 上清 液用 Ｇ 砂芯漏斗过滤 ， ４ 备用。取所制得 的 ｍ 试样质量或 体积 ， —— 单位为克或毫升 （ ｇ 生物活性 物质 ， 有抗菌 、 具 抗病毒 、 增高 白血球 、 上清液 ２ｍ ， ５ｌ 水浴挥 干 ， 加适量 甲醇溶解 ， 移置 或 ｍ ） ｒ 。 保肝利 胆 、 肿瘤 、 抗 降血压 、 降血脂 、 除 自由基 于 １ｍ 容 量瓶 中 ， 甲醇 至刻度 ， 即得试 清 ０ｌ 加 摇匀 ． ３含量 测定 ２． ２ 和兴奋 中枢神经 系统等 作用 。 样 溶液。 在相同色谱条件下根据标准品 、样品 的峰 绿原酸不稳定 ， 自 衰减。陈芳萍等在 会 然 ． １ ２． ２． ５结果计算 面积与标准品的含量， 计算样品绿原酸的含量。 《一 Ｂ 环糊精对绿原酸稳定作用的研究》一文中， 由标 准曲线 计算 出被 测 溶液 中绿 原 酸含 ３结果与分析 得 出结论 ： 绿原酸经 Ｂ 环糊精 包合后， 一 稳定性增 量 ， 出试样 中绿原酸含量 ： 计算 ３ 分 别依据 Ｄ ５ ９－０ ７《 理标 志 ． １ Ｂ４／ １２０ 地 ３ ＿ ｌ ｘ０ ｌ ０ 加 。Ｂ 环糊精可 以作为绿原酸及其 制剂中的稳 一 产品 梧卅龟 苓膏》方法 Ａ 、 Ｂ４／５０２０ Ｉ （ ） ５＇ －０９ Ｄ １８ 定剂 。 刚等在 （ 银花提取物 中绿原酸的稳定 李 淦 式中： 孟 ０ ０ ０ 膏质量安全要求》方法 Ｂ 的方法 ， 出两 （ ） 得 性 研究》 文中 ， 出结论 ： 原酸 在碱性 条件 一 得 绿 ｘ 试样 中绿原 酸含量 ， 一 单位为 毫克每百 组样品数据 （ 方法 Ａ数据 、 方法 Ｂ 据 ） 数 ， 高 通过 下， 极不稳 定 ， 易水解 。本文要研究 的就是绿 克（ ｇ Ｏ ｇ 容 ｍ／ Ｏ） ｌ 效液相色谱法对 同一批号龟苓膏绿原酸进行 检 原 酸在 龟苓膏 中的检测方法 和绿原酸在龟苓膏 ｍ一 由标 准 曲线计 算 出的被测液 仲绿原 测 ， 得出表 １ 据： 数 中的直链淀粉 、 ｐ 低 Ｈ等条件综 合影 响下 ， 绿原 酸质量 ， 单位为微克 （ｇ ） 表１ 酸 的衰减情况 。 检 验项 目 数 据 １ 数 据 ２ 数 据 ３ 数据 ４ 数 据 ５ Ｄ ５ ９－０ ７地理 标志产品 梧州龟苓 Ｂ４／ １２０ （ ３ （ 方 法 Ａ （ ５ ９ —０ ７ 《 理 标 ４ ＤＢ ４ ／ １２ ０ 地 ３ 膏》Ｄ ５１８－０９《 、Ｂ４／５０２０ 龟苓膏 质量安全要求 》 ＂ 志 产品 梧州龟 苓膏》 ） ８ ４６ ． ５３ － ４４ ． ４２ ． 的绿原酸检测方 法不 同 ， 文拟在对 比的过程 本 绿 原 酸 中探讨方法 、 在分析 的过程 中比较优劣 ， 客观 的 方 法 Ｂ （ ５Ｔ ８ －０９ 《 苓 膏 ８ ＤＢ４ ／ ５ ０２ ０ 龟 质 量安全要求》 ） ２ ８ ． ０ ８１ ． ８ ． Ｏ ７９ ． 选 出较 好的检 测方法 。 ２材料与方法 ２ ． １试材 、 药品和仪器 ｍ 一试样的质量 ， 为克 （） ｒ— 单位 ｇ 由表 １ 出， 比之下 ，Ｄ ５＇ ０２０ 看 相 Ｂ４／５ －０ ９ １８ － 龟苓 膏按 包装型式不同主要分为易拉罐装 ２ ．方 法 Ｂ ．２ ２ 《 龟苓膏质量安全要求》的检测方法有以下优 和塑料碗装两种 型式 ， 由于包装材料不 同， 透光 ２ ．１ ．２ 色谱条件 ２． 点： 检测数据稳定 、 能充分检测绿 原酸含量 。 率、 陛都不同， 透气． 造成了对绿原酸稳定性影响 色谱柱 ： １（５ ｍ ｘ ． ｍ） Ｃ ８２ ０ ｍ ４ ｍ 。 ６ ３ 依照 Ｄ ５Ｆ８－０９￣， 膏质 量安 ２ Ｂ４，５０２０（＿ ｒ ． 苓 也不同。因此 ， 易拉罐装龟苓膏、 塑料碗装龟苓 温度 ： 室温。 全 要求 》 的检测方法 ， 同一 批次 、 同时 ��
摘 要： 通过高效液相色谱法准确测定绿原酸的含量，并通过对龟苓膏的长期跟踪检测， 掌握绿原酸在龟苓膏中的稳定性 。 分别按照 Ｄ ５３ １２０ （ Ｂ ４／９— ０７ 地理标志产品 梧 州龟苓膏》 Ｄ ５ ５ ０ ２０ （Ｅ 膏质量安全要求》 （ 和 Ｂ ４／ ８— ０９ ￣苓 Ｔ 的方法检测龟苓 膏的绿原酸， 通过正交试 验设 计 ， 找到 适合 的检 测方 法 ， 期对 龟苓 膏 中的绿 原酸进 行跟 踪检 验 。 Ｂ ４ ／５０ ２０ （Ｅ 膏质 量安 全要 求》 定 Ｄ ５ ８— ０９ ￣苓 Ｔ （ 的样 品制 备 方法适