葡聚糖凝胶柱使用及注意事项
g-10葡聚糖凝胶色谱柱使用
g-10葡聚糖凝胶色谱柱使用
G-10葡聚糖凝胶色谱柱是一种常用的分离和纯化生物大分子
的柱子，特别适用于分离寡聚糖和多糖混合物。
该柱子采用葡聚糖作为固定相，具有一定的孔隙大小和分子筛效果。
G-10葡聚糖凝胶色谱柱通常用于分离多糖、寡糖和其他大分
子化合物。
在使用之前，需要将柱子进行激活和平衡，具体步骤如下：
1. 将G-10葡聚糖凝胶色谱柱放入柱子支撑架上，并连接到色
谱系统上。
2. 将适当的缓冲液（如适应于样品的缓冲液）通过柱子进行激活，以去除可能存在的杂质和污染物。
3. 进行柱子平衡：将适当的缓冲液通过柱子流经，直到柱子和系统达到平衡状态。
4. 加载样品：将待分离的样品按照柱子载样方法加载到柱子上。
5. 进行色谱分离：根据需要，控制缓冲液的流速和浓度梯度，使待分离的目标化合物在柱子上进行分离。
6. 收集分离物：根据其他方法（如按时间段收集、检测波长等）进行分离物收集和检测。
值得注意的是，G-10葡聚糖凝胶色谱柱通常用于相对较小的
生物大分子分离，如寡聚糖和多糖，对于更大分子的分离可能需要使用其他类型的色谱柱。
此外，在操作过程中需要根据具体样品的特性和需要进行柱子条件的调整。
葡聚糖凝胶色谱柱
葡聚糖凝胶色谱柱概述葡聚糖凝胶色谱柱（dextran gel filtration column）是一种分离生物大分子的常见方法之一。
它是利用生物大分子在不同孔径的凝胶中的分布系数不同，实现分离的原理。
具体来说，大分子无法进入凝胶孔隙，因此在表面上滞留更长时间，而小分子能够进入凝胶孔隙，因此在表面上滞留时间更短，从而实现分离。
实验过程使用葡聚糖凝胶色谱柱进行分离实验的步骤如下： 1. 制备样品：将所需的大分子混合液或生物组织样品制备好。
2. 将样品滴到色谱柱顶部，并保持柱顶刚好覆盖样品。
3. 添加移液管中的洗脱液，并在细流下加缓冲液。
4. 在必要的时候，可以连续添加洗脱液、缓冲液和样品，直到滤出大分子为止。
5. 收集样品，并进行下一步实验。
应用领域葡聚糖凝胶色谱柱广泛应用于生物化学和分子生物学领域。
常见的应用包括：1. 分离蛋白质：通过分离分子量不同的蛋白质来研究其结构和功能。
2. 分离核酸：通过分离不同长度的DNA片段和转录产物来研究基因的组成和调控机制。
3. 分离糖类：例如分离化合物，如淀粉和糖原，以研究其结构和功能。
4. 生物大分子纯化：通过纯化生物大分子（如酶和抗体）来研究其特性和应用。
常见问题解答葡聚糖凝胶色谱柱可以重复使用吗？可以。
只要正确使用和保持清洁，色谱柱可以反复使用多次，提供不断稳定的分离能力。
色谱柱如何保养？在每次使用后，应使用清洁试剂对色谱柱进行冲洗，以防止残留的生物大分子或洗脱液。
还应防止色谱柱干燥，避免损坏凝胶。
如何选择正确的分离柱？对于不同种类的分析样品，应选择不同孔径的凝胶柱。
一般来说，较小的分子要使用较小的孔径凝胶柱，而较大的分子要使用较大的孔径凝胶柱。
此外，应选择适当的缓冲液，以保证生物大分子的稳定性和稳定性。
总结葡聚糖凝胶色谱柱是一种有效的生物分离方法，具有广泛的应用领域，特别是在研究蛋白质、核酸和糖类方面。
正确选择和使用凝胶柱，以及正确维护和保养，可以确保稳定的分离效果。
葡聚糖凝胶柱(sephadex column)使用及注意事项(1)
葡聚糖凝胶柱(sephadex column)使用及注意事项(1)1 Sephadex G型葡聚糖凝胶只适合在水中使用，Sephadex G-25羟丙化后就是Sephadex LH-20。
其既有分子筛作用，在由极性与非极性溶剂组成的溶剂中还有反相层析效果。
虽然价位很高，但由于性能颇佳，可再生利用，所以倍受亲睐。
此外上柱样品损失很少，对处理小样品较好，这也是我们实验室常用的原因之一。
2 Sephadex LH20 的原理。
Sephadex LH20的分离原理主要有两方面：以凝胶过滤作用为主，兼具反相分配的作用（在反相溶剂中）。
因为凝胶过滤作用，所以大分子的化合物保留弱，先被洗脱下来，小分子的化合物保留强，最后出柱。
如果使用反相溶剂洗脱， Sephadex LH20对化合物还起反相分配的作用，所以极性大的化合物保留弱，先被洗脱下来，极性小的化合物保留强，后出柱。
如果使用正相溶剂洗脱，这主要靠凝胶过滤作用来分离。
3 Sephadex LH20 洗脱溶剂。
看完第2点后，就应该清楚Sephadex LH20 洗脱溶剂因分为两类：反相和正相两种。
用得最多的是反相溶剂洗脱，以甲醇－－水系统最为常见，先用水，逐渐增加甲醇比例，最后用100％甲醇冲柱。
正相系统以氯仿－－甲醇最为常见，先用50％氯仿－－甲醇，逐渐增加甲醇比例，最后用100％甲醇冲柱。
4 Sephadex LH20 样品的处理和洗脱溶剂的选择。
如果样品极性大，这选用反相溶剂洗脱（甲醇－－水），样品用最少体积的甲醇－－水（尽可能甲醇少一些）溶解，过滤后，湿法上样（一定要滤喔！要是把 Sephadex LH20 堵啦，就得将Sephadex LH20的柱头部分弃去，很心痛呀）。
如果样品极性小，这选用正相溶剂洗脱（氯仿－－甲醇），样品用最少体积的氯仿－－甲醇溶解，过滤后，湿法上样。
5 Sephadex LH-20的步骤。
(1) 选择条件：梯度洗脱在Sephadex使用中并不象在正相柱层析中那么重要。
葡聚糖凝胶柱的使用方法
葡聚糖凝胶柱的使用方法：(1) 预处理称取Sephadex G-25（50－100目）约5g，加入蒸馏水100ml，置室温下3h进行溶胀。
(2) 装柱凝胶层析柱的直径与柱长之比一般为1:15。
柱的底部用装有细玻璃管的橡皮塞塞紧，用洗净的玻璃丝（约200目尼龙布）垫底或购买类似规格的商品柱。
然后将柱垂直安装好，先加入1/3柱体积蒸馏水，接着将溶胀好的凝胶边搅匀边连续装入，使它们在柱内自然沉降。
同时大开下口慢速流出蒸馏水。
装柱后的凝胶必须均匀，不能有气泡或明显条纹。
否则，必须到出重装，装好后，用蒸馏水平衡2－3h即可加样品分离。
(3) 加样加样前，首先把柱内凝胶上面多余的蒸馏水放出，直到柱内液面与凝胶表面相齐（或留一极薄液层）为止。
然后，由柱的上端加水解液2ml，注意不要让溶液把凝胶冲松浮起，加完样品后，打开下口缓慢放出液体至液面与凝胶面相齐，再用少量蒸馏水冲洗原来盛样品的容器2－3次，待全部进入层析柱后，即可进行洗脱。
(4) 洗脱与收集洗脱时，用蒸馏水作洗脱剂，并且要连续不断地进行，使凝胶柱上端保持一定的液层，防止凝胶柱表面的液体流干。
本实验洗脱液流出的速度应控制在0.8－1.0ml/min。
洗脱液的收集采用分管连续顺序收集，每管收集3ml，共收集10管。
据经验，4或5号管核苷酸浓度最大，可作为层析鉴定的样品液。
但因层析柱长度的差异，管号会有变化，必要时可用紫外检测A260nm，找出浓度最大的管号。
(5) 凝胶的再生和回收凝胶柱使用一次后，必须反冲疏松一次，平衡后再使用。
若使用数次，就需要再生处理。
用0.1mol/L NaOH-0.5mol/L NaCl溶液浸泡，然后用蒸馏水洗至中性备用。
若实验完毕，将再生后的凝胶在布氏漏斗上用蒸馏水洗涤抽干，再用95%乙醇洗两次，在60℃烘箱中烘干，回收保存。
实验五. 葡聚糖凝胶层析【实验目的】1.掌握葡聚糖凝胶的特性及凝胶层析的原理。
2．学习葡聚糖凝胶层析的基本操作技术。
葡聚糖凝胶柱使用及注意事项(包含各种溶剂的溶胀系数)
葡聚糖凝胶柱使用及注意事项1 Sephadex G型葡聚糖凝胶只适合在水中使用，Sephadex G-25羟丙化后就是Sephadex LH-20。
其既有分子筛作用，在由极性及非极性溶剂组成的溶剂中还有反相层析效果。
虽然价位很高，但由于性能颇佳，可再生利用，所以倍受亲睐。
此外上柱样品损失很少，对处理小样品较好，这也是我们实验室常用的原因之一。
2 Sephadex LH20 的原理。
Sephadex LH20的分离原理主要有两方面：以凝胶过滤作用为主，兼具反相分配的作用（在反相溶剂中）。
因为凝胶过滤作用，所以大分子的化合物保留弱，先被洗脱下来，小分子的化合物保留强，最后出柱。
如果使用反相溶剂洗脱， Sephadex LH20对化合物还起反相分配的作用，所以极性大的化合物保留弱，先被洗脱下来，极性小的化合物保留强，后出柱。
如果使用正相溶剂洗脱，这主要靠凝胶过滤作用来分离。
3 Sephadex LH20 洗脱溶剂。
看完第2点后，就应该清楚Sephadex LH20 洗脱溶剂因分为两类：反相和正相两种。
用得最多的是反相溶剂洗脱，以甲醇－－水系统最为常见，先用水，逐渐增加甲醇比例，最后用100％甲醇冲柱。
正相系统以氯仿－－甲醇最为常见，先用50％氯仿－－甲醇，逐渐增加甲醇比例，最后用100％甲醇冲柱。
4 Sephadex LH20 样品的处理和洗脱溶剂的选择。
如果样品极性大，这选用反相溶剂洗脱（甲醇－－水），样品用最少体积的甲醇－－水（尽可能甲醇少一些）溶解，过滤后，湿法上样（一定要滤喔！要是把Sephadex LH20 堵啦，就得将Sephadex LH20 的柱头部分弃去，很心痛呀）。
如果样品极性小，这选用正相溶剂洗脱（氯仿－－甲醇），样品用最少体积的氯仿－－甲醇溶解，过滤后，湿法上样。
5 Sephadex LH-20的步骤。
(1) 选择条件：梯度洗脱在Sephadex使用中并不象在正相柱层析中那么重要。
蛋白FITC标记及葡聚糖凝胶柱使用
蛋白FITC标记及葡聚糖凝胶柱使用一、蛋白FITC标记1. 准备FITC溶液：将FITC溶解在适量的溶剂中（如PBS缓冲液），使其浓度为1 mg/ml。
2. 准备蛋白溶液：将待标记的蛋白溶解在PBS缓冲液中，使其浓度为1 mg/ml。
3. 将FITC溶液加入蛋白溶液中：将适量的FITC溶液加入蛋白溶液中，使其FITC蛋白的浓度为10 μg/ml。
溶液要充分混合，可以轻轻摇晃或使用旋转器。
4.反应：将反应溶液在室温下孵育30分钟至1小时。
反应时间可以根据实验需要进行调整。
5.停止反应：将反应溶液加入适量的停止溶液中，如甘氨酸溶液。
停止溶液可以中和未反应的FITC，并保护标记的蛋白不被降解。
6.蛋白FITC标记的纯化：可以通过蛋白层析或其他纯化方法将蛋白FITC标记纯化。
葡聚糖凝胶柱是一种常用的蛋白层析方法，用于分离和纯化蛋白。
1.准备葡聚糖凝胶柱：将葡聚糖凝胶柱放入层析柱中，并用适量的缓冲液（如PBS）均匀填充柱内。
2.样品加载：将待分离的蛋白样品加入层析柱中，样品可以预先进行适当的处理，如去除杂质、调整pH值等。
3.缓冲液洗脱：通过加入适量的缓冲液（如PBS），将未结合的蛋白从凝胶柱中洗脱。
可以通过监测洗脱液的吸光度或测定蛋白浓度来确定洗脱的程度。
4.目标蛋白洗脱：通过加入适量的洗脱缓冲液（如含有高浓度盐的缓冲液），将目标蛋白从凝胶柱中洗脱。
可以根据实验需要选择不同的洗脱条件，如改变盐浓度、改变pH值等。
5.纯化目标蛋白：通过收集洗脱的蛋白样品，可以进行进一步的纯化步骤，如使用其他层析方法、电泳等。
葡聚糖凝胶柱的使用可以根据实验需要进行调整，如选择不同的凝胶柱大小、调整缓冲液成分和流速等。
通过葡聚糖凝胶柱的分离和纯化，可以获得纯度较高的蛋白样品，用于后续的实验分析。
总结：蛋白FITC标记和葡聚糖凝胶柱使用是常见的蛋白实验技术。
蛋白FITC标记可以用于检测蛋白的位置和定量，通过将FITC与蛋白共价结合。
葡聚糖凝胶柱(sephadex column)使用及注意事项(1)
葡聚糖凝胶柱(sephadex column)使用及注意事项(1)1 Sephadex G型葡聚糖凝胶只适合在水中使用，Sephadex G-25羟丙化后就是Sephadex LH-20。
其既有分子筛作用，在由极性与非极性溶剂组成的溶剂中还有反相层析效果。
虽然价位很高，但由于性能颇佳，可再生利用，所以倍受亲睐。
此外上柱样品损失很少，对处理小样品较好，这也是我们实验室常用的原因之一。
2 Sephadex LH20 的原理。
Sephadex LH20的分离原理主要有两方面：以凝胶过滤作用为主，兼具反相分配的作用（在反相溶剂中）。
因为凝胶过滤作用，所以大分子的化合物保留弱，先被洗脱下来，小分子的化合物保留强，最后出柱。
如果使用反相溶剂洗脱， Sephadex LH20对化合物还起反相分配的作用，所以极性大的化合物保留弱，先被洗脱下来，极性小的化合物保留强，后出柱。
如果使用正相溶剂洗脱，这主要靠凝胶过滤作用来分离。
3 Sephadex LH20 洗脱溶剂。
看完第2点后，就应该清楚Sephadex LH20 洗脱溶剂因分为两类：反相和正相两种。
用得最多的是反相溶剂洗脱，以甲醇－－水系统最为常见，先用水，逐渐增加甲醇比例，最后用100％甲醇冲柱。
正相系统以氯仿－－甲醇最为常见，先用50％氯仿－－甲醇，逐渐增加甲醇比例，最后用100％甲醇冲柱。
4 Sephadex LH20 样品的处理和洗脱溶剂的选择。
如果样品极性大，这选用反相溶剂洗脱（甲醇－－水），样品用最少体积的甲醇－－水（尽可能甲醇少一些）溶解，过滤后，湿法上样（一定要滤喔！要是把 Sephadex LH20 堵啦，就得将Sephadex LH20的柱头部分弃去，很心痛呀）。
如果样品极性小，这选用正相溶剂洗脱（氯仿－－甲醇），样品用最少体积的氯仿－－甲醇溶解，过滤后，湿法上样。
5 Sephadex LH-20的步骤。
(1) 选择条件：梯度洗脱在Sephadex使用中并不象在正相柱层析中那么重要。
葡聚糖凝胶柱使用及注意事项(包含各种溶剂的溶胀系数)
葡聚糖凝胶柱使用及注意事项1 Sephadex G型葡聚糖凝胶只适合在水中使用，Sephadex G-25羟丙化后就是Sephadex LH-20。
其既有分子筛作用，在由极性及非极性溶剂组成的溶剂中还有反相层析效果。
虽然价位很高，但由于性能颇佳，可再生利用，所以倍受亲睐。
此外上柱样品损失很少，对处理小样品较好，这也是我们实验室常用的原因之一。
2 Sephadex LH20 的原理。
Sephadex LH20的分离原理主要有两方面：以凝胶过滤作用为主，兼具反相分配的作用（在反相溶剂中）。
因为凝胶过滤作用，所以大分子的化合物保留弱，先被洗脱下来，小分子的化合物保留强，最后出柱。
如果使用反相溶剂洗脱， Sephadex LH20对化合物还起反相分配的作用，所以极性大的化合物保留弱，先被洗脱下来，极性小的化合物保留强，后出柱。
如果使用正相溶剂洗脱，这主要靠凝胶过滤作用来分离。
3 Sephadex LH20 洗脱溶剂。
看完第2点后，就应该清楚Sephadex LH20 洗脱溶剂因分为两类：反相和正相两种。
用得最多的是反相溶剂洗脱，以甲醇－－水系统最为常见，先用水，逐渐增加甲醇比例，最后用100％甲醇冲柱。
正相系统以氯仿－－甲醇最为常见，先用50％氯仿－－甲醇，逐渐增加甲醇比例，最后用100％甲醇冲柱。
4 Sephadex LH20 样品的处理和洗脱溶剂的选择。
如果样品极性大，这选用反相溶剂洗脱（甲醇－－水），样品用最少体积的甲醇－－水（尽可能甲醇少一些）溶解，过滤后，湿法上样（一定要滤喔！要是把Sephadex LH20 堵啦，就得将Sephadex LH20 的柱头部分弃去，很心痛呀）。
如果样品极性小，这选用正相溶剂洗脱（氯仿－－甲醇），样品用最少体积的氯仿－－甲醇溶解，过滤后，湿法上样。
5 Sephadex LH-20的步骤。
(1) 选择条件：梯度洗脱在Sephadex使用中并不象在正相柱层析中那么重要。
葡聚糖凝胶色谱柱
葡聚糖凝胶色谱柱使用说明：一、凝胶的选择1.型号的选择凝胶型号不同，筛分范围也不同。
SephadexG型一般适用于分离蛋白质。
根据下图选择所需要的SephadexG型凝胶的型号2．凝胶用量的计算根据层析柱的体积和干凝胶的膨胀度，按下面公式可计算出所需干凝胶用量：干凝胶用量=πr2h膨胀度（床体积g)用此法计算出的干胶用量还需增加10%～20%，因为凝胶在处理过程中会有一部分损失。
3.凝胶的处理将所用的干胶慢慢倾入5～10倍的纯水中，参照表格凝胶所需时间来进行充分浸泡使胶溶胀。
用0.5mol/L NaOH-0.5mol/L NaCl溶液在室温下浸泡0.5h，以抽滤法去除碱液，用蒸馏水洗至中性。
也可以采用煮沸的方式，能加快凝胶溶胀的速度，但是必须置于弱酸或弱碱溶液中煮沸。
然后用对胶进行脱气处理。
二、凝胶柱的制备1.凝胶柱的选择对层析柱选择的合理与否，将直接影响分离结果。
当用同样直径的层析柱分离两种以上的物质时，长层析柱比短的分离效率高；当用同样长度的层析柱分离两种以上物质时，层析柱直径大的比小的分辨率高；当用同样体积的层析柱分离两种以上物质时，仍是层析柱长的比短的分辨率高。
一般理想的层析柱的直径与长度之比是1:25～1:100。
2.装柱(1)将层析柱垂直固定在支架上，拧紧柱的下端出口。
（2）脱气后的填料表面若有杂质，用胶头滴管吸走。
检查溶胀后的填料应与柱体积相当，若溶胀时候加水多一些，可以吸走一些水。
将凝胶调成较稀薄的浆液用玻璃棒引流，灌入柱子内，注意连续灌入，一定不要有气泡或纹路，否则要重新灌。
将凝胶全部灌入柱子后，拧紧上出水口，让凝胶自然沉降，并打开下面的出水口。
当出现明显的填料与水的分层时，打开泵注入水，等柱床稳定后做个标记，过夜平衡，直到柱床体积不变时，柱子平衡好。
三、加样与洗脱1.加样（1）首先关闭下端出水口，打开上端出水口，吸走柱内凝胶上部分的水，注意贴近凝胶时一定用胶头滴管，不要把凝胶吸起来。
葡聚糖凝胶
(1)预处理称取葡聚糖凝胶（有不同型号）若干克，加入洗脱剂（通常为甲醇或者水，这里以甲醇为例）约20倍凝胶量，置室温下3h进行溶胀，溶胀必须彻底，否则会使上柱后流速变慢，凝胶断裂等。
(2) 装柱凝胶层析柱的直径与柱长之比一般为1:15。
柱的底部用装有细玻璃管的橡皮塞塞紧，用洗净的玻璃丝（约200目尼龙布）垫底或购买类似规格的商品柱。
然后将柱垂直安装好，接着将溶胀好的凝胶边搅匀边缓缓连续装入，色谱柱的出口流速m维持在5~10ml/min。
凝胶颗粒沉积到柱底后关紧色谱柱，等沉降到1-2cm时再2打开色谱柱。
直至降到满意高度为止，等凝胶柱内的液体留的与凝胶高度差不多时，用较小的滤纸盖住凝胶床表面，再用洗脱剂洗脱过夜。
装柱后的凝胶必须均匀，不能有气泡或明显条纹。
否则，必须到出重装。
(3) 加样装好的色谱柱至少要用相当于3倍保留体积的洗脱剂平衡，待洗脱剂流至与凝胶柱液面相平时（不能流干，否则会带入气泡），用滴管吸取样品溶液，在高于凝胶表面约1cm 处，沿管壁四周缓缓滴加样品液，加完后打开下面的出口，使样品渗入凝胶内。
再关闭出口，用少量洗脱液将管壁残留的样品洗下，再打开出口，至溶液渗入柱内，再关闭出口。
可以考虑再加一层薄薄的脱脂棉以保护柱表面（我一般不加），然后即可进行洗脱。
(4) 洗脱与收集洗脱时，用甲醇作洗脱剂，并且要连续不断地进行，使凝胶柱上端保持一定的液层，防止凝胶柱表面的液体流干。
一般酸性洗脱剂中碱性物质容易洗脱，碱性洗脱剂中酸性物质容易洗脱。
多糖类物质等极性大的物质考虑用水洗脱，常用的洗脱剂是水-甲醇，水-乙醇，水-丙酮等，一般根据自己样品的性质选择洗脱液，洗脱液可一直用单一梯度。
凝胶色谱的共性是流速慢，每份一般体积较小。
（内径1.3cm左右，长80cm左右的柱子我一般每份收集液为8ml）(5) 凝胶的再生和回收凝胶柱多次使用后，若污染严重，则考虑用50度左右的2%的NaOH和0.5mol/LNaCl 混合液浸泡后，再用水洗净即可。
葡聚糖凝胶柱使用方法2
葡聚糖凝胶柱的使用方法：(1) 预处理称取Sephadex G-25（50－100目）约5g，加入蒸馏水100ml，置室温下3h进行溶胀。
(2) 装柱凝胶层析柱的直径与柱长之比一般为1:15。
柱的底部用装有细玻璃管的橡皮塞塞紧，用洗净的玻璃丝（约200目尼龙布）垫底或购买类似规格的商品柱。
然后将柱垂直安装好，先加入1/3柱体积蒸馏水，接着将溶胀好的凝胶边搅匀边连续装入，使它们在柱内自然沉降。
同时大开下口慢速流出蒸馏水。
装柱后的凝胶必须均匀，不能有气泡或明显条纹。
否则，必须到出重装，装好后，用蒸馏水平衡2－3h即可加样品分离。
(3) 加样加样前，首先把柱内凝胶上面多余的蒸馏水放出，直到柱内液面与凝胶表面相齐（或留一极薄液层）为止。
然后，由柱的上端加水解液2ml，注意不要让溶液把凝胶冲松浮起，加完样品后，打开下口缓慢放出液体至液面与凝胶面相齐，再用少量蒸馏水冲洗原来盛样品的容器2－3次，待全部进入层析柱后，即可进行洗脱。
(4) 洗脱与收集洗脱时，用蒸馏水作洗脱剂，并且要连续不断地进行，使凝胶柱上端保持一定的液层，防止凝胶柱表面的液体流干。
本实验洗脱液流出的速度应控制在－min。
洗脱液的收集采用分管连续顺序收集，每管收集3ml，共收集10管。
据经验，4或5号管核苷酸浓度最大，可作为层析鉴定的样品液。
但因层析柱长度的差异，管号会有变化，必要时可用紫外检测A260nm，找出浓度最大的管号。
(5) 凝胶的再生和回收凝胶柱使用一次后，必须反冲疏松一次，平衡后再使用。
若使用数次，就需要再生处理。
用L L NaCl溶液浸泡，然后用蒸馏水洗至中性备用。
若实验完毕，将再生后的凝胶在布氏漏斗上用蒸馏水洗涤抽干，再用95%乙醇洗两次，在60℃烘箱中烘干，回收保存。
实验五. 葡聚糖凝胶层析【实验目的】1.掌握葡聚糖凝胶的特性及凝胶层析的原理。
2．学习葡聚糖凝胶层析的基本操作技术。
【实验原理】凝胶层析又称分子排阻层析或凝胶过滤，是以被分离物质的分子量差异为基础的一种层析分离技术，这一技术为纯化蛋白质等生物大分子提供了一种非常温和的分离方法。
葡聚糖凝胶柱使用及注意事项
葡聚糖凝胶柱使用及注意事项葡聚糖凝胶柱是一种常用的色谱柱，其主要由多糖聚合物构成，具有多孔结构以及极高的比表面积。
葡聚糖凝胶柱在生物分离、蛋白质纯化以及分析等方面有重要的应用。
下面将介绍葡聚糖凝胶柱的使用方法以及注意事项，并列举了几种常见溶剂的溶胀系数作为参考。
使用方法：1.预处理：新柱使用前需进行预处理。
首先，在使用前用适当的缓冲液再生柱子，一般推荐使用PBS缓冲液进行再生。
其次，用去离子水进行洗脱，去除缓冲液中的离子。
2.样品准备：准备好带有样品的溶液，可以是蛋白质溶液、核酸溶液或者其他需要分离的溶液。
3.进样：将样品溶液注入到柱子中，可以使用曲线尖管或者注射器进行。
4.溶剂流动：使用适当的流动缓冲液进行柱子的着色，常用的缓冲液有PBS缓冲液、甲醇和乙醇。
5.收集分离的组分：通过收集分离的组分，可以进行后续的实验操作或者分析。
注意事项：1.柱子的平衡：在使用柱子前，将柱子放入合适的缓冲液中，进行平衡处理，通常需要约30分钟。
2.柱子的保管：使用完毕后，需将柱子用适当的缓冲液保存，避免干燥。
3.柱子的温度：柱子的运行温度一般在室温下进行，避免过高温度的使用，以免影响柱子的性能。
4.溶液选择：在选择适当的缓冲液时，应根据样品的性质以及需求进行选择，不同的缓冲液对分离的效果会有影响。
5.柱子的清洗：使用完毕后的柱子需要进行彻底的清洗工作，尤其是对于经常使用的柱子，清洗工作要做得彻底。
下面是几种常见溶剂的溶胀系数参考值：1.水：溶胀系数为1，对于葡聚糖凝胶柱来说，水是适用的溶剂。
2.硫酸：溶胀系数为0.57，硫酸能够完全渗透葡聚糖凝胶柱。
3.乙醇：溶胀系数为0.44，适量的乙醇可以使用，但过高浓度的乙醇可能会影响柱子的性能。
4.甲醇：溶胀系数为0.65，甲醇也可以使用，但同样需要注意控制浓度。
总结：葡聚糖凝胶柱是一种常见的色谱柱，具有广泛的应用。
在使用葡聚糖凝胶柱时，需进行适当的处理以及注意事项，以保证柱子的性能和寿命。
葡聚糖凝胶柱使用及注意事项(包含各种溶剂的溶胀系数)
葡聚糖凝胶柱使用及注意事项1 Sephadex G型葡聚糖凝胶只适合在水中使用，Sephadex G-25羟丙化后就是Sephadex LH-20。
其既有分子筛作用，在由极性与非极性溶剂组成的溶剂中还有反相层析效果。
虽然价位很高，但由于性能颇佳，可再生利用，所以倍受亲睐。
此外上柱样品损失很少，对处理小样品较好，这也是我们实验室常用的原因之一。
2 Sephadex LH20 的原理。
Sephadex LH20的分离原理主要有两方面：以凝胶过滤作用为主，兼具反相分配的作用（在反相溶剂中）。
因为凝胶过滤作用，所以大分子的化合物保留弱，先被洗脱下来，小分子的化合物保留强，最后出柱。
如果使用反相溶剂洗脱，Sephadex LH20对化合物还起反相分配的作用，所以极性大的化合物保留弱，先被洗脱下来，极性小的化合物保留强，后出柱。
如果使用正相溶剂洗脱，这主要靠凝胶过滤作用来分离。
3 Sephadex LH20 洗脱溶剂。
看完第2点后，就应该清楚Sephadex LH20 洗脱溶剂因分为两类：反相和正相两种。
用得最多的是反相溶剂洗脱，以甲醇－－水系统最为常见，先用水，逐渐增加甲醇比例，最后用100％甲醇冲柱。
正相系统以氯仿－－甲醇最为常见，先用50％氯仿－－甲醇，逐渐增加甲醇比例，最后用100％甲醇冲柱。
4 Sephadex LH20 样品的处理和洗脱溶剂的选择。
如果样品极性大，这选用反相溶剂洗脱（甲醇－－水），样品用最少体积的甲醇－－水（尽可能甲醇少一些）溶解，过滤后，湿法上样（一定要滤喔！要是把Sephadex LH20 堵啦，就得将Sephadex LH20 的柱头部分弃去，很心痛呀）。
如果样品极性小，这选用正相溶剂洗脱（氯仿－－甲醇），样品用最少体积的氯仿－－甲醇溶解，过滤后，湿法上样。
5 Sephadex LH-20的步骤。
(1) 选择条件：梯度洗脱在Sephadex使用中并不象在正相柱层析中那么重要。
[讲解]葡聚糖凝胶柱的使用方法
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葡聚糖凝胶柱的使用方法：(1) 预处理称取Sephadex G-25（50－100目）约5g ，加入蒸馏水100ml ，置室温下3h 进行溶胀。
(2) 装柱凝胶层析柱的直径与柱长之比一般为1:15。
柱的底部用装有细玻璃管的橡皮塞塞紧，用洗净的玻璃丝（约200目尼龙布）垫底或购买类似规格的商品柱。
然后将柱垂直安装好，先加入1/3柱体积蒸馏水，接着将溶胀好的凝胶边搅匀边连续装入，使它们在柱内自然沉降。
同时大开下口慢速流出蒸馏水。
装柱后的凝胶必须均匀，不能有气泡或明显条纹。
否则，必须到出重装，装好后，用蒸馏水平衡2－3h 即可加样品分离。
(3) 加样加样前，首先把柱内凝胶上面多余的蒸馏水放出，直到柱内液面与凝胶表面相齐（或留一极薄液层）为止。
然后，由柱的上端加水解液2ml ，注意不要让溶液把凝胶冲松浮起，加完样品后，打开下口缓慢放出液体至液面与凝胶面相齐，再用少量蒸馏水冲洗原来盛样品的容器2－3次，待全部进入层析柱后，即可进行洗脱。
(4) 洗脱与收集洗脱时，用蒸馏水作洗脱剂，并且要连续不断地进行，使凝胶柱上端保持一定的液层，防止凝胶柱表面的液体流干。
本实验洗脱液流出的速度应控制在0.8－1.0ml/min 。
洗脱液的收集采用分管连续顺序收集，每管收集3ml ，共收集10管。
据经验，4或5号管核苷酸浓度最大，可作为层析鉴定的样品液。
但因层析柱长度的差异，管号会有变化，必要时可用紫外检测A260nm ，找出浓度最大的管号。
(5) 凝胶的再生和回收凝胶柱使用一次后，必须反冲疏松一次，平衡后再使用。
若使用数次，就需要再生处理。
用0.1mol/L NaOH-0.5mol/L NaCl 溶液浸泡，然后用蒸馏水洗至中性备用。
若实验完毕，将再生后的凝胶在布氏漏斗上用蒸馏水洗涤抽干，再用95%乙醇洗两次，在60℃烘箱中烘干，回收保存。
实验五. 葡聚糖凝胶层析【实验目的】 1.掌握葡聚糖凝胶的特性及凝胶层析的原理。
2．学习葡聚糖凝胶层析的基本操作技术。
葡聚糖凝胶柱的使用方法
葡聚糖凝胶柱的使用方法一、准备工作：1.准备好葡聚糖凝胶柱和所需的缓冲液，如PBS（磷酸盐缓冲液）、TBS（三甲基氨基甲烷缓冲液）等。
2.将葡聚糖凝胶柱放入柱层析设备中，并根据设备的要求进行调整和固定。
3.预冲柱层析设备和葡聚糖凝胶柱，以去除可能的污染和杂质。
二、样品处理：1.将待纯化的生物大分子样品先进行预处理，如去除悬浮物、离心沉淀等。
2.将样品溶液以适当的缓冲液进行稀释，以达到最佳的样品浓度和适合葡聚糖凝胶柱操作的样品体积。
三、样品加载：1.将处理好的样品溶液缓慢地倒入柱顶，让样品从柱顶进入柱内。
避免产生气泡。
2.分子在葡聚糖凝胶柱中会根据分子大小和亲疏水性质的不同而发生分离和吸附。
较大分子会在柱上层析，而较小分子会透过凝胶层均匀流出。
因此，样品会在柱内逐渐被分离和纯化。
四、缓冲液流动：1.样品完成加载后，使用适当的缓冲液进行柱洗涤，以洗掉非特异结合的杂质。
2.缓冲液的选择应根据样品的性质而定，具体的选择和流动条件可以参考相关的文献或经验。
五、洗脱纯化：1.在用于洗脱纯化的缓冲液中，调整适当的条件以实现目标分子的洗脱。
如调整pH值、离子浓度、添加洗脱剂等。
2.根据分子的亲疏水性质，选择适当的缓冲液浓度梯度进行洗脱。
一般来说，较强亲疏水性的分子需要更高浓度的洗脱缓冲液。
六、收集洗脱液：1.将洗脱液通过柱底收集，收集不同时间点或不同分析目的的洗脱液。
2.根据实验需要，将洗脱液分为不同部分进行后续的分析或纯化处理。
七、重复使用：1.柱层析后，葡聚糖凝胶柱可以进行再生，以重复使用。
具体的再生方法可以参考柱层析设备和葡聚糖凝胶柱的说明书。
总结：葡聚糖凝胶柱是一种常用的生物大分子纯化方法，通过分子在柱内的分离和纯化来实现样品纯化的目的。
使用葡聚糖凝胶柱时，需要根据样品的特性和需求进行适当的样品处理、缓冲液选择、洗脱纯化条件的优化等。
如操作规范且配合适当的实验条件，葡聚糖凝胶柱可以快速、高效地纯化和富集生物大分子。
葡聚糖凝胶使用说明书
葡聚糖凝胶使用说明书一、产品名称产品名称：葡聚糖凝胶型号:Gel-300二、适用范围葡聚糖凝胶适用于生物实验室、化学实验室、制药厂等场所，用于分离、纯化蛋白质、核酸、肽类等生物分子。
三、使用方法1.准备葡聚糖凝胶和缓冲液。
根据所需的分离纯化效果，选择合适的缓冲液类型和浓度。
2.将缓冲液加入玻璃柱或层析柱中，直至填满整个柱子。
3.加入适量的葡聚糖凝胶，使其均匀分布在柱子的底部。
4.将样品溶液缓慢地加入柱子中，注意不要过快，以免影响分离效果。
5.收集洗脱液，并进行分析。
根据分离纯化的目的，可以采用不同的收集方法，如分步收集或集中收集。
6.在每次使用后，及时清洗和保存凝胶柱，以延长其使用寿命。
四、注意事项1.在使用葡聚糖凝胶前，应仔细阅读本说明书并遵守操作规程。
2.避免直接接触皮肤和眼睛，若不慎接触，应立即用清水冲洗。
3.使用过程中要避免剧烈震动或晃动，以免影响分离效果。
4.在使用前应确认所需缓冲液的种类和浓度是否合适，避免浪费和影响分离效果。
5.不要使用已经过期或变质的凝胶和缓冲液。
6.在储存和使用过程中要保持环境干燥，避免潮湿和高温。
7.使用后要及时清洗和保存凝胶柱，以免被污染和变质。
五、常见问题及解决方案1.分离效果不佳：可能是由于凝胶或缓冲液质量问题、操作不当等原因引起的。
解决方法是检查凝胶和缓冲液的质量和浓度是否合适，确认操作规程是否正确。
若问题仍未解决，建议更换新的凝胶柱。
2.柱子压力过高：可能是由于样品溶液中存在杂质或凝胶柱堵塞等原因引起的。
解决方法是检查样品溶液是否含有杂质，或者对样品进行预处理以去除杂质。
同时检查凝胶柱是否堵塞，若堵塞则进行清洗或更换新的凝胶柱。
3.柱子漏液：可能是由于接头松动或密封圈损坏等原因引起的。
解决方法是重新拧紧接头或更换新的密封圈。
若问题仍未解决，建议联系售后服务与支持部门寻求帮助。
4.洗脱液中含有杂质：可能是由于样品溶液中存在杂质或缓冲液不纯等原因引起的。
葡聚糖凝胶的操作方法
葡聚糖凝胶的操作方法
1.将葡聚糖凝胶粉末放入1.5ml离心管中，并加入所需的培养基或溶液（通常是0.1M PBS缓冲液）
2.用紫外灯或消毒灯照射管子和粉末，以杀菌消毒。
3.将管子在室温下静置15分钟，使凝胶充分水解。
4.在使用前，用无菌过滤器或离心管转运转移液体中的小颗粒或杂质。
5.将细胞或材料悬浮在凝胶中，并快速转移和组装需要的实验器具（如培养皿、培养板等）。
6.将实验器具放置在37的恒温箱中，使凝胶在液体中固定并形成3D结构。
7.根据实验的需要，可以选择添加细胞营养物质或生长因子等，以促进细胞的生长和分化。
8.在实验结束后，可以用酶解剂将凝胶中的细胞和材料溶解，并收集并分离细胞和其他成分，进行后续的分析和研究。
葡聚糖凝胶安全操作及保养规程
葡聚糖凝胶安全操作及保养规程葡聚糖凝胶简介葡聚糖凝胶是一种可重复使用的生物材料，由天然高聚糖葡聚糖制成。
其特点是具有强盛的吸水性和高度的生物相容性，能够支持各种3D细胞培养和组织工程。
安全操作1.手术前处理：在进行手术前,要对葡聚糖凝胶进行消毒处理。
消毒液不要直接浸泡葡聚糖凝胶中。
2.贮存温度：葡聚糖凝胶的贮存温度范围是2-8℃，在常温环境下不要让其暴露太久。
葡聚糖凝胶长时间放在高温环境中会使凝胶变形、损坏或变质，影响使用效果。
3.操作前检查：在进行葡聚糖凝胶操作之前，要根据生产批号、生产日期、有效期、贮存条件等进行检查。
4.操作过程中：在操作过程中，要注意手套的选择，尽可能选择质量好、颜色鲜艳、无杂质、无破损的手套，防止对凝胶的污染。
5.严禁注射使用：葡聚糖凝胶严禁注射使用，不得与注射器、输液器等穿刺性器械接触。
6.正确使用：手术中应按照使用说明书操作，严格掌握操作技术。
保养规程1.注意环境条件：葡聚糖凝胶的使用环境要保持清洁卫生，不要让其受到扰动和振动。
2.防潮防晒：葡聚糖凝胶不能长时间暴露于强光下和潮湿的环境中，防止凝胶失去弹性和变质。
3.防止污染：在使用过程中，要注意避免凝胶被污染，应该使用无菌器具进行操作。
4.防止变形：使用后，葡聚糖凝胶可以用干净的纸巾或棉布轻轻擦拭外表面，然后封存起来。
不要沾水，不宜摆放成卷式。
5.制定规范的保养计划：要制定规范的保养计划，记录葡聚糖凝胶不同批次的使用情况，及时更新保养记录。
结语以上就是葡聚糖凝胶的安全操作及保养规程。
通过掌握这些规程，可以提高葡聚糖凝胶的使用寿命和使用效果，避免不必要的风险和污染。
葡聚糖凝胶的处理、装柱及平衡
葡聚糖凝胶的处理、装柱及平衡
（1）柱材处理
称取一定量的Sephadex G-200干粉，加无离子水或蒸馏水浸泡溶胀48h,去掉悬浮的细微颗粒，为防止凝胶颗粒中的空气存在，影响层析效果，凝胶装柱前一定要将凝胶液中的气体除掉，其办法是将凝胶液放进抽滤瓶中，进行抽真空处理，
直到凝胶液中没有气泡出现为止。
（2）装柱
将层析柱清洗干净垂直固定到层析架上，加1/3体积的无离子水，打开下出液口，水流畅通，即刻将小烧杯中装有适宜浓度的凝胶液（凝胶的浓度过高会产生气泡，影响蛋白质分离速度，浓度过低易产生凝胶分层，影响蛋白质的分离效果）轻轻倒入层析柱中，凝胶自然慢慢沉降在层析柱底部，凝胶沉积直到离层析柱上端1.5-2cm处，停止装柱，剪一与柱内径相等的滤纸片覆盖于凝胶上。
层析柱上端
进液口连接恒流泵，下出液口连接蛋白质监测仪，待层析柱的平衡。
（3）平衡
在柱层析上样前必须对层析柱进行平衡，所谓平衡就是将层析柱中的溶液用层析过程的缓冲液（洗脱液）置换出来，使层析柱中的缓冲系统与柱层析过程中的系统一致。
其方法是：利用层析柱上端的恒流泵将平衡缓冲液泵入到层析柱内，打开层析柱下端的出口，平衡液流速在0.5-1ml/min，当下出口流出液的PH值与平衡缓冲液的PH值一致时，层析柱达到了平衡。
在本实验中，用0.002M Tris-HCL 缓冲液PH7.4(内含0.0001M EDTA)，平衡Sephadex G-200凝胶。
2．上样：将粗酶液上柱。
3．洗脱：用0.02M Tris-HCL缓冲液Ph7.4（内含0.001M EDTA）洗脱，收集洗脱液进行酶活性、蛋白质浓度、聚丙烯酰胺凝胶电泳分子量的基本性质分析测定。
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葡聚糖凝胶柱使用及注意事项
1 Sephadex G型葡聚糖凝胶只适合在水中使用，Sephadex G-25羟丙化后就是Sephadex LH-20。
其既有分子筛作用，在由极性与非极性溶剂组成的溶剂中还有反相层析效果。
虽然价位很高，但由于性能颇佳，可再生利用，所以倍受亲睐。
此外上柱样品损失很少，对处理小样品较好，这也是我们实验室常用的原因之一。
2 Sephadex LH20 的原理。
Sephadex LH20的分离原理主要有两方面：以凝胶过滤作用为主，兼具反相分配的作用(在反相溶剂中)。
因为凝胶过滤作用，所以大分子的化合物保留弱，先被洗脱下来，小分子的化合物保留强，最后出柱。
如果使用反相溶剂洗脱，Sephadex LH20对化合物还起反相分配的作用，所以极性大的化合物保留弱，先被洗脱下来，极性小的化合物保留强，后出柱。
如果使用正相溶剂洗脱，这主要靠凝胶过滤作用来分离。
3 Sephadex LH20 洗脱溶剂。
看完第2点后，就应该清楚Sephadex LH20 洗脱溶剂因分为两类：反相和正相两种。
用得最多的是反相溶剂洗脱，以甲醇--水系统最为常见，先用水，逐渐增加甲醇比例，最后用100%甲醇冲柱。
正相系统以氯仿--甲醇最为常见，先用50%氯仿--甲醇，逐渐增加甲醇比例，最后用100%甲醇冲柱。
4 Sephadex LH20 样品的处理和洗脱溶剂的选择。
如果样品极性大，这选用反相溶剂洗脱(甲醇--水)，样品用最少体积的甲醇--水(尽可能甲醇少一些)溶解，过滤后，湿法上样(一定要滤喔!要是把Sephadex LH20 堵啦，就得将Sephadex LH20 的柱头部分弃去，很心痛呀)。
如果样品极性小，这选用正相溶剂洗脱(氯仿--甲醇)，样品用最少体积的氯仿--甲醇溶解，过滤后，湿法上样。
5 Sephadex LH-20的步骤。
(1) 选择条件：
梯度洗脱在Sephadex使用中并不象在正相柱层析中那么重要。
首先你的样品须要能溶解在尽量少量的洗脱剂中。
极性在的用甲醇水系统;极性小者一般用
不含水的系统。
我们实验室常用正己烷二氯甲烷甲醇系统，用了很多年，效果较好。
(2) 饱和层析柱：
用洗脱剂将凝胶摇匀，直立柱身，让其自然沉降，此时要防止气泡留在其中。
至少半小时打开开关，流出几个柱体种的洗脱剂，目的是使其膨胀在正确比例的洗脱剂中。
(3) 样品处理：用尽量少的洗脱剂溶解样品，常压过滤。
(4) 湿法上柱。
这也是要有技巧的步骤。
(5) 洗脱：控制流速，一般1drop/s以下，可参见厂家的一些参数;必要时更改极性(很多时一个极性就可以将样品洗脱完毕)。
再生以备下次使用。
6 分离的技巧，最后说说我的使用心得
(1) 流速不可太快，切切不可新急，所谓欲速则不达。
(2)柱子尽可能长，Sephadex LH20 柱长的增加将极大地改善分离，所不要吝惜填料，宁可将填料全装在一根大柱子中，不要将填料装成几根小柱。
所谓集中优势兵力，打击敌人。
(3) 馏分一定要接的细，可1/10，或1/20 个保留体积接成一馏分。
(4) 洗脱体积一般为2-3个保留体积，对特殊保留强的化合物，可洗脱5个保留体积。
(5)鞣质成分死吸附严重，如不在乎填料者，可用Sephadex LH20 分鞣质
(6)Sephadex LH20 对黄酮类成分的分离效果极佳，方法很成型，有大量文献参考。
(7)填料反复使用，每次用完，一般可用甲醇将柱子洗干净，然后用下一次分离的起步溶剂将甲醇替换出来，待用。
Sephadex LH-20是由葡聚糖G-25羟丙基化加工而成，属于分子筛凝胶，尤其适用于天然产物在有机溶剂中的纯化。
例如：类固醇、萜类、脂类以及小分子多肽等，Pharmadex LH-20同时适用于分子类别非常相似的物质的分离和工
业规模的制备，既可用于初步纯化步骤，也可用于最终精制步骤，如非对映同分异构体的分离。
1. 装柱
装填的重要原则之一就是需要形成一个稳定均一的柱床。
胶颗粒越均一(粒径分布越窄)，越容易获得稳定均一的柱床。
但是对于Sephadex LH-20而言，25～100μm的粒径范围相对于许多用于制备色谱的填料而言，不能说分布均一，也就是说其粒径分布较宽。
然而当胶溶胀后就相对容易得到均一的柱床。
这对于长柱(最高至250cm)而言也是同样的。
在装柱前，层析柱和储槽都必须进行彻底的清洗。
Sephadex LH-20在使用之前必须进行溶胀。
在溶胀的过程中，要尽量避免过分搅拌，否则会破坏球形胶粒，且要避免使用磁力搅拌器。
在室温下，将凝胶溶胀于层析溶剂中至少三小时，溶胀后胶体积的大小决定于所使用的溶剂系统，请参考后页之干胶溶胀表计算特定柱体积所需要干胶的量。
使溶胀胶体积沉淀之后占总体积的75%，上层溶剂占25%，这时，悬浮液从一个容器倒入另一容器时胶粒可移动。
将溶胀后的凝胶根据装柱要求均匀倒入柱内，在保证胶粒不变形的前提下，应在尽可能高的压力下装柱，反压不要超过
1.5ba。
2.平衡
上样前，用洗脱液平衡层析柱至少两个柱体积直到基线变得平稳为止，如改变溶剂应该注意凝胶在新溶剂中的溶胀性质，并根据性质确定柱高调节器的位置，如使用相同的溶剂，在以后的层析中柱平衡可以省略。
3.洗脱液
为确保延长层析柱的使用寿命，所有的缓冲液都应该离心或经过0.45um的膜过滤以除去杂质。
4.样品
样品体积应该占柱总体积的1-2%，同样在使用之前样品应该离心或经过0.45um的膜过滤。
5.洗脱
洗脱流速应根据情况而定，最大线性流速约12cm/min(反压1.5ba)，建议流速为1-10cm/h。
总体来说，较低的流速，具有较高的分辩率。
6. 再生
凝胶再生通常是先用2-3个柱体积的洗脱液进行清洗，如更换洗脱液，则需要重新平衡。
7.体积流速与线性流速的关系
线性流速=体积流速/横截面积
8.溶胀体积
由于Sephadex LH-20的溶胀体积依赖于溶剂，所以对于不同直径的柱可根据比例增加或减少旧柱体积以便计算出新体积。
新体积=旧体积×(新柱体积/旧柱体积)
9.胶的性质
Sephadex LH-20同时具备亲水和亲脂双重性质，且被分离物质的极性在分离过程中起着重要作用。
10. 排阻极限4-5KD(与所用溶剂有关)
11.上样量
吸附模式取决于所需分辩率
分子量大小小于总体积的20%
正相分配小于总体积的1%
12.其他
胶粒形状球形，多孔
颗粒大小(干) 18-111um(直径)
颗粒大小中间值(干) 70um(直径)。