葡聚糖凝胶
葡聚糖层析实验报告
一、实验目的1. 掌握葡聚糖凝胶层析的原理及其在生物大分子分离中的应用。
2. 学习并掌握葡聚糖凝胶层析的基本操作技术。
3. 通过实验,验证葡聚糖凝胶层析对分子量不同的物质具有分离效果。
二、实验原理凝胶层析,又称分子排阻层析或凝胶过滤,是一种基于被分离物质分子量差异的层析分离技术。
该技术利用凝胶颗粒的多孔网状结构,通过分子量差异使不同组分在层析柱中以不同的速度移动,从而达到分离的目的。
葡聚糖凝胶是一种由直链的葡聚糖分子和交联剂3-氯1,2-环氧丙烷交联而成的高分子化合物。
通过调节葡聚糖和交联剂的比例,可以控制凝胶颗粒的孔径大小。
分子量大于允许进入凝胶网孔范围的物质被凝胶排阻,不能进入凝胶颗粒内部,阻滞作用小,随溶剂流动快速流出层析柱;而分子量小的物质可进入凝胶颗粒的网孔内,阻滞作用大,流程慢,后流出层析柱。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:- 葡聚糖凝胶(Sephadex)- 标准蛋白质溶液(如牛血清白蛋白、鸡蛋清蛋白等)- 溶剂(如磷酸盐缓冲溶液)- 离心机- 层析柱- 漏斗- 吸管2. 实验仪器:- 电子天平- 移液器- 显微镜四、实验步骤1. 准备层析柱:将葡聚糖凝胶倒入层析柱中,用溶剂冲洗,直至凝胶床均匀。
2. 加载样品:将标准蛋白质溶液加入层析柱中,使其在凝胶床表面形成一薄层。
3. 洗脱:用溶剂缓慢冲洗层析柱,收集不同时间流出的洗脱液。
4. 分析洗脱液:将收集到的洗脱液进行比色分析或电泳分析,确定各组分的位置。
五、实验结果与分析1. 实验结果:- 洗脱液在比色分析或电泳分析中,可观察到不同分子量的蛋白质分别在凝胶层析柱中的位置。
- 小分子量的蛋白质先流出层析柱,大分子量的蛋白质后流出。
2. 结果分析:- 通过实验,验证了葡聚糖凝胶层析对分子量不同的物质具有分离效果。
- 实验结果表明,小分子量的蛋白质在凝胶层析柱中的流动速度较快,大分子量的蛋白质流动速度较慢。
六、实验结论1. 葡聚糖凝胶层析是一种基于分子量差异的层析分离技术,在生物大分子分离中具有广泛的应用。
丙烯葡聚糖凝胶和葡聚糖凝胶
丙烯葡聚糖凝胶和葡聚糖凝胶《丙烯葡聚糖凝胶和葡聚糖凝胶:在生物医学领域的应用》近年来,丙烯葡聚糖凝胶和葡聚糖凝胶在生物医学领域备受关注。
本文将深入探讨这两种凝胶的结构、特性及应用,并分析它们在组织工程、药物输送、生物传感及细胞培养中的潜在应用价值。
一、丙烯葡聚糖凝胶的特性和结构1. 丙烯葡聚糖凝胶的制备方法2. 丙烯葡聚糖凝胶的微观结构及物理性质3. 丙烯葡聚糖凝胶的生物相容性和生物降解性在介绍丙烯葡聚糖凝胶的特性和结构后,接下来我们将详细讨论该凝胶在生物医学领域的应用。
二、丙烯葡聚糖凝胶在生物医学领域的应用1. 丙烯葡聚糖凝胶在组织工程中的应用2. 丙烯葡聚糖凝胶在药物输送中的应用3. 丙烯葡聚糖凝胶在生物传感中的应用4. 丙烯葡聚糖凝胶在细胞培养中的应用及未来前景接下来,我们将转而研究葡聚糖凝胶的特性和结构。
三、葡聚糖凝胶的特性和结构1. 葡聚糖凝胶的来源及制备方法2. 葡聚糖凝胶的微观结构及物理性质3. 葡聚糖凝胶的生物相容性和生物降解性在介绍葡聚糖凝胶的特性和结构后,我们将深入探讨该凝胶在生物医学领域的应用。
四、葡聚糖凝胶在生物医学领域的应用1. 葡聚糖凝胶在软组织工程中的应用2. 葡聚糖凝胶在药物释放系统中的应用3. 葡聚糖凝胶在植物研究中的应用4. 葡聚糖凝胶在生物医学成像中的应用总结回顾本文首先对丙烯葡聚糖凝胶和葡聚糖凝胶的制备方法、特性和结构进行了全面分析。
随后探讨了这两种凝胶在生物医学领域中的应用,包括组织工程、药物输送、生物传感、细胞培养等方面的应用。
通过本文的学习,我们对丙烯葡聚糖凝胶和葡聚糖凝胶的结构和应用有了更深入的了解。
个人观点和理解作为一种生物医用材料,丙烯葡聚糖凝胶和葡聚糖凝胶在生物医学领域具有广阔的应用前景。
它们不仅具有良好的生物相容性和生物降解性,还能通过调整其微观结构和物理性质来满足不同临床需求。
然而,由于目前对其在生物医学领域的应用还处于初级阶段,还有许多挑战需要克服,如材料的长期稳定性、生物安全性等方面,期待未来能有更多的研究能够推动其在临床上的应用。
葡聚糖凝胶
葡聚糖凝胶葡聚糖凝胶是一种常见的高分子材料,具有非常优秀的生物相容性、生物可降解性及低毒性等特点,因此被广泛应用于医药领域中。
本文将从葡聚糖凝胶的合成方法、结构特点、生物相容性、应用领域等方面进行探讨。
一、葡聚糖凝胶的合成方法葡聚糖凝胶的合成方法多种多样,常见的有化学合成法、生物法以及物理交联法等。
化学合成法是指将各种活性单体引入到葡聚糖分子中,通过其它的化学反应,实现葡聚糖凝胶的形成。
生物法则是通过葡萄糖化还原酶、葡萄糖氧化酶等酶类在葡聚糖中催化作用下,将葡聚糖链上的羟基还原、氧化成为一个紫色的凝胶体。
物理交联法则是指在葡聚糖溶液中加入一种或多种物理反应剂如紫外光线、温度、电场等,使葡聚糖形成凝胶。
二、葡聚糖凝胶的结构特点葡聚糖凝胶的结构是由三维保水凝胶体结构、网络多孔结构和吸水性、固体化学、机械性能等构成。
在葡聚糖凝胶的结构中,保水凝胶体结构是最为重要的,其使葡聚糖分子间产生大分子结构。
在分子链上的小分支结构则是通过副产物等物质来实现的。
三、葡聚糖凝胶的生物相容性葡聚糖的中心是具有亲水性的羟基,因此诸如胆囊收缩素和卡维地洛等离子体组分会轻易地扩散进入葡聚糖分子间,从而产生收缩性效应和缓慢药物释放的效应。
同时,这种亲水性的特性还使得葡聚糖对细胞具有较好的黏附性能力,可用于细胞培养、组织工程、药物缓释等方面。
四、葡聚糖凝胶的应用领域由于葡聚糖具有优秀的生物相容性、生物可降解性及低毒性等特点,因此被广泛应用于医药领域中。
目前,葡聚糖凝胶被广泛应用于伤口敷料、骨组织工程、胶囊药物控释等方面。
其中,骨组织工程是应用葡聚糖凝胶进行组织工程修复的最主要领域,由于其生物相容性强,能促进细胞增殖,促进创面愈合,因此被广泛应用于骨组织的修复,具有广泛的应用前景。
总之,葡聚糖凝胶是一种具有突出优势的高分子材料,其多种特性及优秀的生物相容性使其在医学领域中具有广泛的应用前景,有着很大的发展潜力。
葡聚糖凝胶75的操作方法
葡聚糖凝胶75的操作方法葡聚糖凝胶75是一种常用的凝胶材料,适用于生物学分离、电泳、柱层析等实验。
下面是葡聚糖凝胶75的详细操作方法。
1. 材料准备- 一定量的葡聚糖凝胶75。
根据实验需要,确定所需凝胶的重量。
- 缓冲溶液。
根据实验需要,选择合适的缓冲溶液,并按照实验方案调制好。
- 试管或实验室常规操作用品。
2. 准备葡聚糖凝胶- 将葡聚糖凝胶75取出,称取所需重量,放入一个干净的容器中。
3. 膨胀葡聚糖凝胶- 在称量容器中,加入足够的缓冲溶液,使葡聚糖凝胶逐渐膨胀,在液体中悬浮。
- 注意需加入的液体量,以保证膨胀后的葡聚糖凝胶具有所需的性质。
4. 筛选葡聚糖凝胶- 等待膨胀约30分钟,葡聚糖凝胶会逐渐膨胀并在液体中扩散。
- 使用数个试管架,每个试管架上插入一根取下的注射器针头,将其作为筛选葡聚糖凝胶的框架。
- 将膨胀的葡聚糖凝胶倒入筛选框架中,允许其自由流动并同时通过针头间的缝隙中流出。
- 这一步的目的是去除空气泡,并筛选出凝胶颗粒均匀、没有结块的葡聚糖凝胶。
5. 保存和激活- 将筛选后的葡聚糖凝胶用缓冲溶液保存,避免葡聚糖凝胶干燥。
- 如需激活葡聚糖凝胶,将其置于适当的缓冲溶液中,加入一定浓度的盐类或其他激活剂,并在较高温度(通常为60-80C)下固化一段时间,以激活葡聚糖凝胶。
6. 实验操作- 根据实验需求,将激活后的葡聚糖凝胶放入柱层析设备中。
- 将样品加入柱中,并使用缓冲溶液洗脱,或者使用适当的溶液进行柱层析。
- 注意柱层析过程中的操作,避免葡聚糖凝胶碎裂或溢出。
7. 结果分析- 根据实验的结果,可以通过检测样品组分的移动速率、表型等参数,进行结果的分析和解释。
葡聚糖凝胶75的操作方法主要包括材料准备、膨胀葡聚糖凝胶、筛选葡聚糖凝胶、保存和激活、实验操作以及结果分析等步骤。
每一步操作都需要仔细严谨,以确保实验的准确性和重复性。
葡聚糖离子凝胶a25变黄的原因
葡聚糖离子凝胶a25变黄的原因
葡聚糖离子凝胶是一种含有正离子的葡聚糖液体形成的凝胶。
当葡聚糖离子凝胶A25变黄时,可能的原因有以下几种:
1. 氧化反应:葡聚糖离子凝胶在空气中暴露或遭受光照时,可能会发生氧化反应,导致凝胶颜色变黄。
氧化反应可以导致物质的结构改变,使其吸收特定波长的光线而呈现出黄色。
2. 含杂质:葡聚糖离子凝胶可能含有杂质,如金属离子、有机物等,这些杂质可能会与葡聚糖发生反应,改变其结构和颜色。
3. pH变化:改变葡聚糖离子凝胶的pH值(酸性或碱性)可
能导致凝胶结构的改变,从而影响其颜色。
例如,较酸性的条件可能会使葡聚糖发生酸解,并改变其颜色。
4. 热处理:暴露在高温环境中,葡聚糖离子凝胶可能会发生变化,导致凝胶颜色变黄。
以上是可能导致葡聚糖离子凝胶A25变黄的一些原因,具体
的原因需要根据实际情况进行实验和分析确定。
葡聚糖凝胶原理
葡聚糖凝胶原理
嘿,你知道葡聚糖凝胶原理是什么吗?这可太神奇啦!就好像搭积木一样,葡聚糖凝胶有着自己独特的构造方式呢!
比如说,你可以想象一下,葡聚糖分子就像小小的砖块,它们通过特殊的方式连接在一起,形成了像蜘蛛网一样纵横交错的结构!这就是葡聚糖凝胶呀。
它就像是一个神奇的筛子,可以把不同大小的分子分离开来。
你看啊,当我们把混合溶液倒进去的时候,小的分子就可以轻松地在那些网格中穿梭,而大的分子呢,就会被拦住,过不去呀!就好比一群小朋友要通过一个门洞,个子小的能顺利通过,个子大的就被卡在那里啦。
咱再说说它的应用,那可广泛着呢!在生物化学领域,它可以帮助科学家们分离蛋白质啊、核酸啊这些重要的生物分子。
哇塞,这多厉害呀!这就好比是一把精准的钥匙,能打开那些神秘的分子宝库。
我还记得有一次和朋友讨论这个,他一脸茫然,我就给他详细解释,然后他恍然大悟的表情,真的太有趣啦!“哎呀,原来如此啊!”他惊叹道。
而且在制药领域也有着大用处哦,它可以帮助净化药物成分,提高药物的纯度呢!这是不是很了不起?
总之啊,葡聚糖凝胶原理真的超级有趣,也有着巨大的实用价值。
它就像一个默默无闻的小英雄,在背后为我们的科学研究和生活默默地贡献着力量!我相信,随着科技的不断发展,它还会发挥出更大的作用,给我们带来更多的惊喜呢!。
葡聚糖凝胶
葡聚糖凝胶葡聚糖是一种天然高分子聚合物,广泛存在于海洋生物中,如海藻、虾壳、蟹壳等。
葡聚糖具有许多优异的特性,如生物相容性好、低毒性等,因此被广泛应用于生物医学领域中。
葡聚糖的特性与结构使其能够被用于制备特殊的材料,如凝胶。
葡聚糖凝胶是一种由葡聚糖组成的交联网络,其结构与物理性质可以通过改变制备条件来调控。
葡聚糖凝胶可以在常温常压下形成,在适当条件下可保持稳定,同时能够吸附大量水分子,形成高度保水的结构。
这些特性使得葡聚糖凝胶在生物医学领域中具有广泛的应用前景。
葡聚糖凝胶具有多种制备方法,其中最常见的是化学交联法和物理交联法。
化学交联法通常涉及到使用交联剂将葡聚糖分子交联在一起形成凝胶网络。
物理交联法通常是将葡聚糖分子通过温度、pH、盐浓度等因素相互作用,在适当条件下形成稳定的凝胶结构。
葡聚糖凝胶具有多种应用前景,其中最具有潜力的是在生物医学领域中。
例如,葡聚糖凝胶可以作为组织修复和再生的载体材料,因为其具有良好的生物相容性和生物可降解性。
葡聚糖凝胶可以作为治疗创伤和烧伤的敷料,因为其可以保持伤口湿润,促进愈合。
葡聚糖凝胶还可以用于制备智能材料,在适当的刺激下,如温度、pH等,可以实现形态转化和释放药物。
此外,葡聚糖凝胶还可以应用于其他领域。
例如,它可以被用作食品和工业加工中的增稠剂和胶凝剂,可以用于制备潜水服和防晒霜等高科技材料。
总的来说,葡聚糖凝胶是一种具有广泛应用前景的材料。
它具有优良的生物相容性和生物可降解性,可以应用于生物医学、食品加工和工业等领域。
不仅如此,葡聚糖凝胶的制备方法也越来越成熟,它的应用前途仍然值得我们进一步探索和研究。
葡聚糖凝胶使用说明
葡聚糖凝胶使用说明1.葡聚糖凝胶的制备2.葡聚糖凝胶的特性-生物相容性好:葡聚糖是一种天然产物,具有良好的生物相容性,不会产生免疫反应。
-可调节性强:葡聚糖凝胶的凝胶特性可以通过改变制备方法、葡聚糖浓度和pH值等条件来调节,以满足不同应用的需要。
-凝胶稳定性好:葡聚糖凝胶具有较好的物理稳定性和化学稳定性,能够在一定条件下保持凝胶状态。
-良好的保水性:葡聚糖凝胶具有良好的保水性能,可用作保湿剂,防止水分的蒸发。
-微生物阻隔性:葡聚糖凝胶的网络结构可以起到一定的微生物阻隔效果,可应用于医疗和食品包装等领域。
3.葡聚糖凝胶的应用3.1医疗应用-创面敷料:葡聚糖凝胶具有良好的吸附性和保湿性能,可用于制备创面敷料,促进伤口愈合。
-药物载体:葡聚糖凝胶的网状结构可以将药物包裹在其中,用于制备药物缓释系统。
-组织工程:葡聚糖凝胶可用作细胞培养的基质材料,用于组织工程的研究和临床应用。
3.2食品应用-增稠剂:葡聚糖凝胶可作为增稠剂添加到食品中,改善食品的口感和质感。
-稳定剂:葡聚糖凝胶具有良好的稳定性,可以作为乳化剂和稳定剂添加到食品中,延长食品的保质期。
-包装材料:葡聚糖凝胶的微生物阻隔性能可以应用于食品包装材料,起到保鲜的作用。
3.3化妆品应用-保湿剂:葡聚糖凝胶可用作化妆品中的保湿剂,增加产品的保湿性能。
-凝胶基质:葡聚糖凝胶可作为凝胶基质,在其中悬浮其他活性成分,提高产品的稳定性和渗透性。
-敏感肌肤护理:葡聚糖凝胶具有良好的生物相容性,可用于敏感肌肤的护理产品中,减少刺激和过敏反应。
3.4农业应用-保水剂:葡聚糖凝胶可用作土壤保水剂,改善土壤的水分状况,提高植物的生长。
-植物保护剂:葡聚糖凝胶可作为植物保护剂的载体,将其包裹在凝胶中,减少化学农药的使用量。
总结:葡聚糖凝胶具有许多优异的特性,广泛应用于医疗、食品、化妆品和农业等领域。
在使用葡聚糖凝胶时,需要根据具体的应用要求选择适当的制备方法和条件,并在应用过程中注意遵守相关的法律法规和安全操作规程,以确保产品的质量和安全性。
葡聚糖凝胶实验报告
一、实验目的1. 掌握葡聚糖凝胶的特性及凝胶层析的原理。
2. 学习葡聚糖凝胶层析的基本操作技术。
3. 了解分子量对分离效果的影响。
二、实验原理凝胶层析,又称分子排阻层析或凝胶过滤,是一种以被分离物质的分子量差异为基础的层析分离技术。
该技术为纯化蛋白质等生物大分子提供了一种非常温和的分离方法。
层析的固定相载体是凝胶颗粒,目前应用较广的是具有各种孔径范围的葡聚糖凝胶(Sephadex)和琼脂糖凝胶(Sepharose)。
葡聚糖凝胶是由直链的葡聚糖分子和交联剂3-氯1,2-环氧丙烷交联而成的具有多孔网状结构的高分子化合物。
凝胶颗粒中网孔的大小可通过调节葡聚糖和交联剂的比例来控制,交联度越大,网孔结构越紧密;交联度越小,网孔结构就越疏松,网孔的大小决定了被分离物质能够自由出入凝胶内部的分子量范围。
可分离的分子量范围从几百到几十万不等。
在葡聚糖凝胶层析中,待分离物质通过葡聚糖凝胶层析柱,各个组分由于分子量不相同,在凝胶柱上受到的阻滞作用不同,而在层析柱中以不同的速度移动。
分子量大于允许进入凝胶网孔范围的物质完全被凝胶排阻,不能进入凝胶颗粒内部,阻滞作用小,随着溶剂在凝胶颗粒之间流动,因此流程短,先流出层析柱;分子量小的物质可完全进入凝胶颗粒的网孔内,阻滞作用大,流程长,后流出层析柱。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:- 葡聚糖凝胶G15- 待分离样品(蛋白质溶液)- 缓冲液(磷酸盐缓冲液,pH 7.0)- 甲醇- 水浴锅- 凝胶层析柱- 移液器- 离心机- 超滤器2. 实验仪器:- 电子天平- 紫外分光光度计- pH计- 显微镜四、实验步骤1. 准备葡聚糖凝胶:将葡聚糖凝胶G15浸泡于蒸馏水中至少24小时,并不断搅拌以保证凝胶溶胀,或者用热水浸泡(不建议煮沸)至少1小时直至充分溶胀,凝胶体积不再变化。
2. 准备缓冲液:配制磷酸盐缓冲液(pH 7.0),用超滤器过滤,以去除其中的大分子物质。
3. 装柱:将凝胶层析柱清洗干净,用缓冲液润湿并保持一小段液位,确保底端无气泡。
葡聚糖凝胶使用说明
葡聚糖凝胶使用说明化学和物理性质葡聚糖凝胶是一种珠状的凝胶,含有大量的羟基,很容易在水中和电解质溶液中溶胀。
G型的葡聚糖凝胶有各种不同的交联度,因此它们的溶胀度和分级分离范围也有所不同。
葡聚糖凝胶的溶胀度基本上不因盐和洗涤剂的存在而受影响。
葡聚糖凝胶有不同的粒度。
超细级的葡聚糖凝胶是用于需要极高分辨率的柱色谱和薄层色谱。
粗级和中级的凝胶用于制备性色谱过程,可在较低的压力下获得较高的流速。
另外,粗级也可用于批量工艺。
化学稳定性葡聚糖凝胶不溶于一切溶剂(除非它被化学降解)。
它在水、盐溶液、有机溶剂、碱和弱酸性溶液中都是稳定的,在强酸中凝胶骨架的糖苷键被水解。
长期接触氧化剂将破坏凝胶,因而应避免使用。
物理稳定性葡聚糖凝胶并不熔融,可以在湿态、中性PH进行灭菌或在高压灭菌器120℃、30分钟而不影响它的色谱性质。
干态的凝胶加热至120℃以上将开始焦糖化。
葡聚糖凝胶的机械强度取决于交联度。
产品说明:产品名称分离范围应用葡聚糖凝胶 G-10<700缓冲液交换、脱盐,分离小分子,去除小分子葡聚糖凝胶 G-15<1500缓冲液交换、脱盐,分离小分子,去除小分子葡聚糖凝胶 G-251000-5000工业上脱盐及交换缓冲液葡聚糖凝胶 G-501000-30000多肽分离、脱盐、清洗生物提取液、分子量测定葡聚糖凝胶 G-752000-70000蛋白分离纯化、分子量测定、平衡常数测定葡聚糖凝胶 G-1002000-120000蛋白分离纯化、分子量测定、平衡常数测定葡聚糖凝胶 G-1505000-300000蛋白分离纯化、分子量测定、平衡常数测定葡聚糖凝胶 G-2005000-600000蛋白分离纯化、分子量测定、平衡常数测定使用方法:1. 乙醇浸泡:在室温下,将干粉浸泡于50-60%乙醇中至少24小时,并不断搅拌以保证凝胶溶胀,用无盐水洗去残存的乙醇滤干;2. 无盐水浸泡:室温下,在无盐水中充分溶胀24小时,间隙搅拌,以保证凝胶的完全溶胀,然后;3. 盐酸浸泡:在常温下再用0.2N HCl浸泡12小时,间隙搅拌,滤干,水洗只中性;4. 将溶胀好的凝胶脱气后(真空抽滤或超声波)根据装柱要求一次性置入柱内,注意保持湿态装柱,并避免柱内产生气泡或断层;5. 上样前平衡层析柱至少3-5个柱体积直到记录仪基线变得平稳为止(流出液的PH值等于上柱的Buffer的PH值);6. 凝胶过滤的上样量一般为5%的柱床体积,我们建议初次上样控制在1-2%的床体积,视分离情况可以调整;脱盐时上样量可以达到20%的柱床体积,柱高的选择也与分离要求相关,柱高控制在40-50cm 以下,过高的凝胶层会引起较大的反压,应当尽可能避免。
葡聚糖凝胶 G-50 Medium 使用说明书
葡聚糖凝胶G-50 Medium使用说明书为确保产品的性能和无忧的操作,使用前请仔细阅读本手册,有任何疑问请咨询本公司售后技术支持或销售人员。
1. 产品介绍葡聚糖凝胶G-50 Medium是一种凝胶过滤层析介质(也叫体积排阻色谱),适用于生物分子的脱盐、缓冲液置换、组群分离、精细纯化。
特点如下:a. 经典的葡聚糖介质,选择性好。
b. 生物大分子(>30kDa)的快速脱盐和缓冲液置换(一步完成)。
c. G-50 Medium,可用于组群分离和杂质的去除(以排阻限30kDa为分界点)。
d. G-50 Fine,可用于小分子蛋白的分离纯化(1.5-30kDa)。
表1:性能参数2.选择2.1 介质级别的选择a. 快速脱盐、缓冲液置换、组群分离和杂质的去除:选择G-50 Medium,粒径大、流速快。
b. 小分子蛋白分离纯化:选择G-50 Fine,粒径小、分辨率高。
2.2 层析柱的选择a. 快速脱盐、缓冲液置换、组群分离和杂质的去除(上样量可达到30%CV):选择粗短型层析柱(柱床高度低,例如XK 16/20),流速快、周期短。
b. 小分子蛋白分离纯化(上样量为0.5%-4%CV):选择细长型层析柱(柱床高度高,例如XK 16/70),柱效高、分辨率好。
备注:CV指柱体积。
3. 使用3.1 溶胀取一定量的干粉,加入过量的纯化水(缓冲液:干粉≥20ml:1g),在室温(25℃)溶胀24小时或沸水浴溶胀3小时。
备注:溶胀过程中可进行柔和的搅拌,杜绝使用高速或剧烈的搅拌方式(例如磁力搅拌等)。
3.2 清洗待介质自然沉降后,小心的倒出上清液(包括极少量没有溶胀好的干粉和一些漂浮的小颗粒介质),再加入3-5倍体积的纯化水进行重悬。
重复此步骤5次。
备注:用于清洗产品中残留的微量有机试剂和碱性物质。
3.3 重悬在清洗好的介质中加入一定量的缓冲液(缓冲液:介质=1:3),用玻璃棒或其它搅拌装置柔和搅拌3-5分钟。
葡聚糖凝胶g10与g15的区别
葡聚糖凝胶是一种重要的生物材料,在生物医学和生物制造领域有着广泛的应用。
其中,葡聚糖凝胶的不同规格型号也在实际应用中起着重要的作用。
其中,g10和g15是两种常见的葡聚糖凝胶产品,它们在化学性质、物理性质以及应用领域等方面都有一定的差异。
本文将从多个方面比较g10和g15,以便读者更好地了解这两种葡聚糖凝胶产品的区别。
一、化学性质1.1 结构g10和g15在化学结构上的主要区别在于其聚合度不同。
g10的聚合度较小,分子量较低,而g15的聚合度较大,分子量较高。
这一点决定了两者在一些性质上的差异。
1.2 羟基含量另外,g10和g15的羟基含量也有所不同。
一般来说,g10的羟基含量较低,而g15的羟基含量较高。
这一点在一定程度上影响了它们的降解速度和生物相容性。
二、物理性质2.1 成型性在物理性质方面,g10和g15在成型性上存在差异。
由于其分子量和聚合度的不同,g10相对容易进行成型加工,而g15则需要更高的加工温度和压力。
2.2 结构稳定性由于分子量和聚合度的不同,g10和g15的结构稳定性也有所不同。
在不同的应用场景下,需要根据具体的要求选择适合的产品。
三、应用领域3.1 生物医学在生物医学领域,g10和g15有着不同的应用。
由于其结构和物理性质的差异,g10适合用于一些需要较低成型温度和压力的医疗器械制造,而g15则更适合用于一些对结构稳定性要求较高的生物医用材料的制备。
3.2 食品工业在食品工业中,g10和g15也有着不同的应用。
由于其化学性质和结构稳定性的不同,g10和g15在食品包装材料、食品添加剂等方面都有着不同的应用。
葡聚糖凝胶g10和g15在化学性质、物理性质和应用领域等方面都有着一定的区别。
在实际应用中,需要根据具体的要求选择适合的产品,以发挥其最大的作用。
希望通过本文的介绍,读者能更好地了解葡聚糖凝胶g10和g15的区别,为实际应用提供参考。
四、生物相容性4.1 细胞相容性在生物医学应用中,生物材料的细胞相容性是非常重要的考量因素。
葡聚糖凝胶柱层析
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外。
亲水性
葡聚糖凝胶是一种亲水性凝胶,在 水中能够膨胀并保持稳定的结构。
分子筛作用
由于凝胶的网孔大小不同,不同大 小的分子在通过凝胶柱时的路径和 速度也不同,从而实现分子的分离。
柱层析分离原理
吸附与解吸
样品中的各组分在葡聚糖凝胶上 的吸附能力不同,通过选择合适 的洗脱液,可以实现各组分的分
离。
分子筛效应
4. 上样
5. 洗脱与收集
将待分离样品溶解在少量洗脱液中,沿柱 内壁缓慢加入,避免冲击凝胶表面。
开启恒流泵,以恒定流速进行洗脱,同时 用收集器按一定时间或体积收集流出液。
6. 检测与记录
7. 结果分析
对收集到的流出液进行适当稀释后,利用 紫外可见分光光度计或酶标仪等检测目标 物质的含量,并记录数据。
优点
分辨率高,操作简便,重 复性好,对样品的适用范 围广。
缺点
对于某些非水溶性物质或 极端条件下的分离效果不 佳,且分离过程中可能存 在吸附损失。
02 实验材料与方法
主要试剂与仪器
主要试剂
葡聚糖凝胶(如Sephadex G-25 、G-50、G-100等)、洗脱液( 一般为缓冲液或盐水)、待分离 样品。
基本原理 • 实验材料与方法 • 葡聚糖凝胶柱层析在生物大分子分离中应
用 • 葡聚糖凝胶柱层析在药物分析中应用 • 葡聚糖凝胶柱层析在环境科学中应用 • 实验结果分析与讨论
01 葡聚糖凝胶柱层析基本原 理
葡聚糖凝胶结构与性质
三维网状结构
葡聚糖凝胶具有三维的交联网状 结构,这种结构允许小分子进入 凝胶内部,而大分子则被排除在
环境污染物检测与去除
葡聚糖凝胶的操作方法
葡聚糖凝胶的操作方法
1.将葡聚糖凝胶粉末放入1.5ml离心管中,并加入所需的培养基或溶液(通常是0.1M PBS缓冲液)
2.用紫外灯或消毒灯照射管子和粉末,以杀菌消毒。
3.将管子在室温下静置15分钟,使凝胶充分水解。
4.在使用前,用无菌过滤器或离心管转运转移液体中的小颗粒或杂质。
5.将细胞或材料悬浮在凝胶中,并快速转移和组装需要的实验器具(如培养皿、培养板等)。
6.将实验器具放置在37的恒温箱中,使凝胶在液体中固定并形成3D结构。
7.根据实验的需要,可以选择添加细胞营养物质或生长因子等,以促进细胞的生长和分化。
8.在实验结束后,可以用酶解剂将凝胶中的细胞和材料溶解,并收集并分离细胞和其他成分,进行后续的分析和研究。
葡聚糖凝胶
(1)预处理称取葡聚糖凝胶(有不同型号)若干克,加入洗脱剂(通常为甲醇或者水,这里以甲醇为例)约20倍凝胶量,置室温下3h进行溶胀,溶胀必须彻底,否则会使上柱后流速变慢,凝胶断裂等。
(2) 装柱凝胶层析柱的直径与柱长之比一般为1:15。
柱的底部用装有细玻璃管的橡皮塞塞紧,用洗净的玻璃丝(约200目尼龙布)垫底或购买类似规格的商品柱。
然后将柱垂直安装好,接着将溶胀好的凝胶边搅匀边缓缓连续装入,色谱柱的出口流速m维持在5~10ml/min。
凝胶颗粒沉积到柱底后关紧色谱柱,等沉降到1-2cm时再2打开色谱柱。
直至降到满意高度为止,等凝胶柱内的液体留的与凝胶高度差不多时,用较小的滤纸盖住凝胶床表面,再用洗脱剂洗脱过夜。
装柱后的凝胶必须均匀,不能有气泡或明显条纹。
否则,必须到出重装。
(3) 加样装好的色谱柱至少要用相当于3倍保留体积的洗脱剂平衡,待洗脱剂流至与凝胶柱液面相平时(不能流干,否则会带入气泡),用滴管吸取样品溶液,在高于凝胶表面约1cm 处,沿管壁四周缓缓滴加样品液,加完后打开下面的出口,使样品渗入凝胶内。
再关闭出口,用少量洗脱液将管壁残留的样品洗下,再打开出口,至溶液渗入柱内,再关闭出口。
可以考虑再加一层薄薄的脱脂棉以保护柱表面(我一般不加),然后即可进行洗脱。
(4) 洗脱与收集洗脱时,用甲醇作洗脱剂,并且要连续不断地进行,使凝胶柱上端保持一定的液层,防止凝胶柱表面的液体流干。
一般酸性洗脱剂中碱性物质容易洗脱,碱性洗脱剂中酸性物质容易洗脱。
多糖类物质等极性大的物质考虑用水洗脱,常用的洗脱剂是水-甲醇,水-乙醇,水-丙酮等,一般根据自己样品的性质选择洗脱液,洗脱液可一直用单一梯度。
凝胶色谱的共性是流速慢,每份一般体积较小。
(内径1.3cm左右,长80cm左右的柱子我一般每份收集液为8ml)(5) 凝胶的再生和回收凝胶柱多次使用后,若污染严重,则考虑用50度左右的2%的NaOH和0.5mol/LNaCl 混合液浸泡后,再用水洗净即可。
葡聚糖凝胶使用说明书
上课下子棋保证书详细(第一篇)此文档协议是通用版本,可以直接使用,符号*表示空白。
敬重的班主任老师:在此,非常愧疚地向你递交我这份保证,由于一次保证意味着我犯了一次重大过错。
此次,我由于上课玩五子棋、不好好听课,给班级上课秩序造成了比较严峻的影响。
您观看到我的不良行为,准时加以制止,并且没收我的手机作为惩罚。
如今,经过面壁思过与深刻反剩我深深地觉悟到自己所犯错误的严峻性:第一,我身为一名在校同学,学习无疑是自己的本职工作,也是必需履行的义务。
其次,在高校期间的教育对于每个人来说都是非常宝贵的,而我却不思进取,甚至严峻到在上课期间玩手机、不用心听课。
这更是犯了非常严峻的错误,这是对于教育资源的铺张。
第三,身为一名同学,我犯这样的错误,无疑是大大辜负了我父母对我的殷切期望。
这对于我年迈的父母来说,是一个很大的打击。
我的父母辛苦赚钱,送我们进入高校深造,为的就是我们能够努力学习,找到一份好的工作,将来能够生活得更好。
而为的使我们能够在各方面活动好的条件,父母为我们购得手机。
而我却恰恰不用功读书,不能全身心的投入学习,反倒是上课玩五子棋。
如今我做了错事,辜负了我的父母,我觉得很惭愧,想起父母的辛苦,不由地流泪。
再看我的。
错误,我也是很抱歉辛勤教育我的老师的。
老师为我们辛勤工作,为我们努力备课,而我却辜负老师的辛苦,上课不好好听讲是对老师的不敬重。
此次保证过后,我也会跟老师做当面正式赔礼的。
最终我写一下对今后保证:我保证今后上课期间不做任何**行为了,上课期间不再玩五子棋。
今后仔细听每一节课,在校当一名好同学,在家做一个孝顺的儿子,将来为社会做出自己的一份贡献。
此致敬礼!保证人:******日期:*****上课下子棋保证书详细(第二篇)合同范本合同编号:[合同编号]标题:上课下子棋保证书日期:[签署日期]甲方:[甲方机构/个人名称]地址:[甲方地址]电话:[甲方电话]乙方:[乙方机构/个人名称]地址:[乙方地址]电话:[乙方电话]鉴于甲方作为[甲方机构/个人名称](以下简称“甲方”)提供上课下子棋服务,乙方作为[乙方机构/个人名称](以下简称“乙方”)接受上述服务,双方达成以下协议,以兹共同遵守:一、合作内容1.1 甲方将为乙方提供专业的上课下子棋服务,包括但不限于教授棋谱、指导棋局策略等。
sephadex g-10葡聚糖凝胶 孔径
1. 概述Sephadex G-10 是一种常用的葡聚糖凝胶,具有广泛的应用范围。
在生物化学、分子生物学等领域中,它被广泛用于分离和纯化生物大分子,例如蛋白质、核酸等。
而Sepahdex G-10的孔径大小则是影响其分离和纯化效果的重要因素之一。
2. Sephadex G-10的基本介绍2.1 Sephadex G-10是一种由交联葡聚糖制成的凝胶,属于凝胶过滤层析介质的一种。
它以其较大的孔径而闻名,这使得它在许多生物大分子的分离过程中具有重要的应用价值。
2.2 Sephadex G-10的结构具有高度规则的孔隙结构,能够可靠地分离分子,并且不易受到外界因素的影响。
2.3 在分子生物学和生物化学的实验中,Sephadex G-10经常被作为一种理想的分离介质,用于分离蛋白质、核酸等大分子物质。
3. Sephadex G-10的孔径大小3.1 Sephadex G-10的孔径大小通常为10微米左右。
这种中等大小的孔径使得它能够有效地分离分子,但也相对于有一定的分辨能力,不会因为孔径过大而导致分离效果不理想。
3.2 对于一些较大的生物大分子,例如大分子蛋白质、核酸等,Sephadex G-10的孔径大小能够保证其能够顺利地通过凝胶中的孔隙,实现有效的分离和纯化。
4. Sephadex G-10的孔径大小对分离效果的影响4.1 由于Sephadex G-10的孔径大小适中,它能够较好地区分不同大小的分子。
对于较小的分子而言,它们能够更容易地穿过Sephadex G-10的孔隙,实现快速的分离。
4.2 对于较大的生物大分子,Sephadex G-10的孔径大小也能够保证其能够通过凝胶的孔隙,实现高效的分离。
这就体现了SephadexG-10的孔径大小对于分离效果的积极影响。
5. 结语Sephadex G-10作为一种常用的葡聚糖凝胶,在分离和纯化生物大分子的过程中具有重要的应用价值。
其孔径大小的适宜性,使得它能够有效地区分不同大小的分子,实现高效的分离和纯化。
葡聚糖凝胶的使用说明
葡聚糖凝胶的使⽤说明葡聚糖凝胶使⽤说明化学和物理性质葡聚糖凝胶是⼀种珠状的凝胶,含有⼤量的羟基,很容易在⽔中和电解质溶液中溶胀。
G型的葡聚糖凝胶有各种不同的交联度,因此它们的溶胀度和分级分离范围也有所不同。
葡聚糖凝胶的溶胀度基本上不因盐和洗涤剂的存在⽽受影响。
葡聚糖凝胶有不同的粒度。
超细级的葡聚糖凝胶是⽤于需要极⾼分辨率的柱⾊谱和薄层⾊谱。
粗级和中级的凝胶⽤于制备性⾊谱过程,可在较低的压⼒下获得较⾼的流速。
另外,粗级也可⽤于批量⼯艺。
化学稳定性葡聚糖凝胶不溶于⼀切溶剂(除⾮它被化学降解)。
它在⽔、盐溶液、有机溶剂、碱和弱酸性溶液中都是稳定的,在强酸中凝胶⾻架的糖苷键被⽔解。
长期接触氧化剂将破坏凝胶,因⽽应避免使⽤。
物理稳定性葡聚糖凝胶并不熔融,可以在湿态、中性PH进⾏灭菌或在⾼压灭菌器120℃、30分钟⽽不影响它的⾊谱性质。
⼲态的凝胶加热⾄120℃以上将开始焦糖化。
葡聚糖凝胶的机械强度取决于交联度。
产品说明:使⽤⽅法:1. ⼄醇浸泡:在室温下,将⼲粉浸泡于50-60%⼄醇中⾄少24⼩时,并不断搅拌以保证凝胶溶胀,⽤⽆盐⽔洗去残存的⼄醇滤⼲;2. ⽆盐⽔浸泡:室温下,在⽆盐⽔中充分溶胀24⼩时,间隙搅拌,以保证凝胶的完全溶胀,然后;3. 盐酸浸泡:在常温下再⽤0.2N HCl浸泡12⼩时,间隙搅拌,滤⼲,⽔洗只中性;4. 将溶胀好的凝胶脱⽓后(真空抽滤或超声波)根据装柱要求⼀次性置⼊柱内,注意保持湿态装柱,并避免柱内产⽣⽓泡或断层;5. 上样前平衡层析柱⾄少3-5个柱体积直到记录仪基线变得平稳为⽌(流出液的PH值等于上柱的Buffer的PH值);6. 凝胶过滤的上样量⼀般为5%的柱床体积,我们建议初次上样控制在1-2%的床体积,视分离情况可以调整;脱盐时上样量可以达到20%的柱床体积,柱⾼的选择也与分离要求相关,柱⾼控制在40-50cm 以下,过⾼的凝胶层会引起较⼤的反压,应当尽可能避免。
难分离物质要有⼀定柱⾼和流速控制,脱盐时⾼径⽐为5:1即可;7. 洗脱⽅法:可以⽤⽆盐⽔,也可以采⽤上柱时的缓冲液洗脱;在上柱Buffer中加⼊NaCl等梯度洗脱或盐梯度洗脱也可以完全分离纯化;8. 在位清洗(CIP)凝胶使⽤⼗次后作⼀次CIP,⽬的是去除柱床内沉淀的及顽固残留的蛋⽩。
葡聚糖凝胶安全操作及保养规程
葡聚糖凝胶安全操作及保养规程葡聚糖凝胶简介葡聚糖凝胶是一种可重复使用的生物材料,由天然高聚糖葡聚糖制成。
其特点是具有强盛的吸水性和高度的生物相容性,能够支持各种3D细胞培养和组织工程。
安全操作1.手术前处理:在进行手术前,要对葡聚糖凝胶进行消毒处理。
消毒液不要直接浸泡葡聚糖凝胶中。
2.贮存温度:葡聚糖凝胶的贮存温度范围是2-8℃,在常温环境下不要让其暴露太久。
葡聚糖凝胶长时间放在高温环境中会使凝胶变形、损坏或变质,影响使用效果。
3.操作前检查:在进行葡聚糖凝胶操作之前,要根据生产批号、生产日期、有效期、贮存条件等进行检查。
4.操作过程中:在操作过程中,要注意手套的选择,尽可能选择质量好、颜色鲜艳、无杂质、无破损的手套,防止对凝胶的污染。
5.严禁注射使用:葡聚糖凝胶严禁注射使用,不得与注射器、输液器等穿刺性器械接触。
6.正确使用:手术中应按照使用说明书操作,严格掌握操作技术。
保养规程1.注意环境条件:葡聚糖凝胶的使用环境要保持清洁卫生,不要让其受到扰动和振动。
2.防潮防晒:葡聚糖凝胶不能长时间暴露于强光下和潮湿的环境中,防止凝胶失去弹性和变质。
3.防止污染:在使用过程中,要注意避免凝胶被污染,应该使用无菌器具进行操作。
4.防止变形:使用后,葡聚糖凝胶可以用干净的纸巾或棉布轻轻擦拭外表面,然后封存起来。
不要沾水,不宜摆放成卷式。
5.制定规范的保养计划:要制定规范的保养计划,记录葡聚糖凝胶不同批次的使用情况,及时更新保养记录。
结语以上就是葡聚糖凝胶的安全操作及保养规程。
通过掌握这些规程,可以提高葡聚糖凝胶的使用寿命和使用效果,避免不必要的风险和污染。
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5.分辨率不高,分离操作较慢。由于凝 胶层析是以物质分子量的不同作为分离 依据的,分子量的差异仅表现在流速的 差异上,所以分离时流速必须严格把握。 因而分离操作一般较慢。而且对于分子 量相差不多的物质难以达到很好的分离。 此外,凝胶层析要求样品粘度不宜太高。 凝胶颗粒有时还有非特异吸附现象 。
三、常用凝胶的结构和性质 凝胶层析法常用的凝胶有天然凝胶 (如琼脂粉凝胶)和人工合成凝胶(如 葡聚糖凝胶和聚丙烯酰胺凝胶)。
5.凝胶层析有何优缺点?
6.常用凝胶分那几类?分别叙述它们各 自的应用范围及特点。 7.在实验中应如何选择凝胶与预处理?
8.细粒凝胶柱流速慢,洗脱峰越窄,分辨 率高,适用于什么产品多分离或分析?粗 粒凝胶柱流速高,但洗脱峰平坦,分辨率 低,适用于产品制备那个阶段的分离?
9.什么是“类分离”和“分级分离 ”?
3 .分离条件缓和。凝胶骨架亲水,分 离过程又不涉及化学键的变化,所以对 分离物的活性没有不良影响。 4 .应用广泛。适用于各种生化物质,如 肽类、激素、蛋白质、多糖、核酸的分离 纯化、脱盐、浓缩以及分析测定等。分离 的分子量范围也很宽,如Sephadex G类为 102~105d;Sepharose类为105~108d。
凝胶层析的定义:
凝胶是一种具有多孔、网状结构的分子筛。 利用这种凝胶分子筛对大小、形状不同的分 子进行层析分离,称凝胶层析 。
凝胶层析的应用范围:
凝胶层析法适用于分离和提纯蛋白质、酶、 多肽、激素、多糖、核酸类等物质。分子大小 彼此相差25%的样品,只要通过单一凝胶床就可 以完全将它们分开。利用凝胶的分子筛特性, 可对这些物质的溶液进行脱盐、浓缩、去热源 和脱色。 凝胶层析的优点 凝胶层析具有设备简单、操作方便、分离 迅速及不影响分子生物学活性等优点。目前已 被广泛应用于各种生化产品的分离和纯化。
凝胶层析法
思考题(课前设疑)
1.层析分离技术包括哪些技术?分别叙 述凝胶层析、离子交换层析、亲和层析、 高压液相层析、疏水层析、聚焦层析的 分离纯化原理。 2.一般在粗品制备阶段和精品纯化阶段 分别应采用哪些层析分离技术?
3.膜分离技术的原理是什么?它同一般
的透析方法相比有何特点?
4.凝胶层析的应用范围有那几方面?
不同型号葡聚糖凝胶柱床参数 型号 G-10
G-15 G-25 G-50 G-75 G-100 G-200
Vt 2
3 5 10 13 17 30
V0 0.8
1.1 2 4 5 6 9
Vi 1
1.5 2.5 5 7 10 20
二、凝胶层析的特点
1.凝胶层析操作简便,所需设备简单。 有时只要有一根层析柱便可进行工作。 分离介质—凝胶完全不需要像离子交换 剂那样复杂的再生过程便可重复使用。 2.分离效果较好,重复性高。最突出 的是样品回收率高,接近100%。
一凝胶颗粒,如此不断地进入与逸出,使 流量增长,移动速率慢而最后流出层析柱。 而中等大小的分子,它们也能在凝胶颗粒 内外分布,部分进入颗粒,从而在大分子 物质与小分子物质之间被洗脱。这样,经 过层析柱,使混合物中的各物质按其分子 大小不同而被分离。
Vt=Vo+Vi+Vg
Vt=π R2h
V。简称为外水体积,Vo等于被完全排阻 的大分子的洗脱体积。可以用一个已知相对 分子质量远超过凝胶排阻极限的有色分子, 如常用的蓝色葡聚糖 -2000 溶液通过柱床, 即可测出柱床的外水hadex)具有良好的 化学稳定性,是目前生化产品制备中最 常用的凝胶。
G类葡聚糖凝胶(Sephadex-G)的最基本骨架是 葡聚糖,它是一种以右旋葡萄糖为残基的多糖, 分子间主要是α-1,6- 糖苷键(约占 95% ),分 枝为l,3-糖苷键(约占5%),以1-氯-2,3-环 氧丙烷(见右式)Cl-CH2-CH-CH2为交联剂将
-、凝胶层析的基本原理
凝胶层析的原理
l 分子大小不同混合物上柱; 2 洗脱开始,小分子扩散进人凝胶 颗粒内,大分子被排阻于颗粒之外;3 大小分子分开: 4大分子行程 较短,已洗脱出层析柱,小分子尚在进行中
凝胶是一类多孔性高分子聚合物,每 个颗粒犹如一个筛子。当样品溶液通过 凝胶柱时,相对分子质量较大的物质由 于直径大于凝胶网孔而只能沿着凝胶颗 粒间的孔隙,随着溶剂流动,因此流程 较短,向前移动速度快而首先流出层析 柱;反之,相对分子质量较小的物质由 于直径小于凝胶网孔,可自由地进出凝 胶颗粒的网孔,在向下移动过程中,它 们从凝胶内扩散到胶粒孔隙后再进入另
Vi 简称内水体积,可由 g· Wr 求得(g 为干 凝胶质量,单位为g,Wr为凝胶吸水量,以mL /g表示)。Vi也可以从洗脱一种完全不受凝 胶微孔排阻的小分子溶质(如重铬酸钾)的 洗脱体积Ve计算,即
Ve=Vo+Vi
对某物质在凝胶柱内洗脱体积Ve、Vo和 Vi之间的关系可用下式表示: Ve=Vo+Kd.Vi
10.在凝胶层析中要想得到好的层析结果 应注意那些问题和采取那些措施? 11.凝胶用过后,有那几种保存方法? 12.葡聚糖凝胶离子交换剂,葡聚糖凝胶 和离子交换剂有何异同及特点?
凝胶层析(gel chromatography)常出 现多种名称 :
如凝胶过滤、分子筛层析、排阻层析、凝 胶渗透层析等。
式中Ve为脱体积,它包括自加入样品时算 起,到组分最大浓度出现时所流出的体积。 Kd为每个溶质分子在流动相和固定相之间的 一个特定的分配系数,它只与被分离物质分 子大小和凝胶颗粒内孔隙大小分布有关。Kd 可通过实验由Ve、Vo和Vi求得。
Ve=Vo+Kd.Vi
可改写为:
(Ve-Vo) Kd=---- Vi
当Kd=0时,Ve=Vo,说明这种溶质相对分子 质量大,完全不能进入凝胶颗粒微孔内,被 排阻于凝胶颗粒之外而最先洗脱下来;
当Kd=1时,即Ve小分子 =Vo+KdVi,说明这 种溶质的相对分子质量小,完全向凝胶颗粒 内扩散,在洗脱过程中将最后流出柱外。
但实际上,约有1/5的内水因溶剂化作用 而呈水合状态,妨碍小分子的自由扩散。故 实际上Ve小分子 =Vo+0.8Vi;当0<Kd<l时, 意味着溶质分子只有部分向凝胶颗粒内扩散, Kd愈大,进入凝胶颗粒内的程度愈大;Kd= 0.5时,其洗脱体积Ve=Vo十0.5Vi。