骨髓检验

骨髓检验

复旦大学附属华山医院

陈勤奋chenqinfen@

主要内容

⏹骨髓细胞学检查

–细胞形态学

–细胞化学染色

–免疫表型分析

–染色体分析

–基因诊断

⏹骨髓病理学检查

–组织结构

–免疫组织化学染色

骨髓检查流程

1.骨髓检查适应证

⏹造血系统疾病

⏹某些血液病及其相关疾病

⏹某些寄生虫感染性疾病

⏹恶性肿瘤骨髓转移

⏹某些类脂质沉积病

⏹待查

–贫血原因待查

–发热原因待查

–淋巴结肿大原因待查

–肝脾肿大原因待查

–骨痛原因待查

2.标本制备

⏹取材部位：髂后、髂前上棘、胸骨、棘突、病灶部位⏹采集、涂片

⏹染色：瑞氏（Wright）染色或瑞-姬（Giemsa）混合染色Bone Marrow Aspirate

3.镜检

⏹低倍镜

–制片质量

–增生程度（5级）

–巨核细胞计数

–异常细胞筛查

–选择油镜检查区域

⏹油镜

–有无造血岛

–细胞形态观察

–有核细胞分类计数

–计算粒红比值

–有无异常细胞及寄生虫

4.分析

⏹要结合外周血象来分析

⏹对疑难细胞或不典型标本的处理

–借助其他方法：化学染色、免疫表型分析

–两个阶段间的细胞，计入下一阶段

–换部位重抽或定期复查

⏹形成骨髓象检查报告

–描写细胞形态与数量，作出肯定性诊断、支持性诊断、排除性诊断或形态学描写。

⏹注意事项

–骨髓片应制作良好，才能进行形态学观察

正常骨髓象

⏹有核细胞增生活跃

⏹粒红比值为2~4：1，平均3：1

⏹各系细胞比例、形态、染色大致正常

⏹巨核细胞7~35个/1.5x3cm2，多为产板型

⏹可见少量单核细胞、浆细胞、骨髓基质细胞、组织嗜碱细胞、成骨细胞、破骨细胞等

⏹核分裂细胞约为0.1%

骨髓有核细胞增生程度

各系细胞

⏹粒系细胞：原粒、早幼粒、中性幼粒、中性杆状核、中性分叶核、嗜酸性、嗜碱性粒细胞

⏹红系细胞：原红、早幼红、中幼红、晚幼红

⏹淋巴细胞：成熟、原淋、幼淋

⏹巨核系细胞：原始、幼稚、颗粒型、产板型

⏹少量单核细胞、浆细胞、骨髓基质细胞（成纤维细胞、内皮细胞、脂肪细胞、巨噬细胞等）、组织嗜碱细胞、成骨细胞、破骨细胞

细胞化学染色（cytochemical stain)

⏹髓过氧化物酶（POX）染色

⏹酯酶（esterase）染色

⏹中性粒细胞碱性磷酸酶（ALP）染色

⏹糖原（PAS）染色

⏹铁染色

一些名词缩写介绍

⏹AML：急性髓系白血病

–AML-md：微分化型（AML-M0）

–AML-wom：未成熟型（AML-M1）

–AML-wm：成熟型（AML-M2）

–AMML：急性粒-单核细胞白血病（AML-M4）

–AMoL：急性原单核细胞和单核细胞白血病（AML-M5）

–AEL：急性红白血病（AML-M6）

–AMegL：急性巨核细胞白血病（AML-M7）

一些名词缩写介绍

⏹ALL：急性淋巴细胞白血病

⏹APL：急性早幼粒细胞白血病

⏹CML：慢性髓性白血病

⏹CLL：慢性淋巴细胞白血病

⏹AA：再生障碍性贫血

⏹PNH：阵发性睡眠性血红蛋白尿

⏹MDS：骨髓增生异常综合征

⏹IDA：缺铁性贫血

⏹RARS：难治性贫血伴环形铁粒幼细胞增多

POX染色

⏹正常细胞染色反应（-～++++）

–存在于髓系细胞胞质中，愈成熟反应愈强，原粒C（-）。

–原单C（-），幼单C和单核C（±）。

–淋巴、巨核、幼红细胞（-）

⏹临床意义

–AML-md（-）

–AML-wom（-）

–AML-wm（+++）

–AMML（+）

–AMoL（-/±）

–AMegL（-）

–ALL（-）

酯酶染色

⏹三种酯酶

–特异性酯酶(SE)

–非特异性酯酶(NSE)

–单核细胞酯酶(ME)

⏹用于鉴别诊断AML亚型

酯酶染色（正常细胞反应）

酯酶染色（临床意义）

ALP染色

⏹正常中性粒细胞染色反应（-～++++）

–10%~40%（+）

–积分7~51

⏹临床意义

–鉴别感染性疾病的类型（细菌感染时酶活性增强）

–鉴别CML和类白

–鉴别AA和PNH

–鉴别真性红细胞增多症和继发性红细胞增多症

PAS染色

⏹正常细胞染色反应

–粒系细胞：中幼粒以下阶段（+~+++）；巨核系和PLT:（+++）–淋巴、单核:（±）

–幼红C、RBC:（-）

⏹临床意义

–ALL、淋巴瘤细胞白血病：（+++，粗颗粒或块状）；

–AML-wom：（-）；AMML：（+,弥漫,细颗粒）

–CLL：（+，粗颗粒）

–幼红细胞克隆增生：（+，粗颗粒或块状）；幼红细胞良性增生：（-）

铁染色

⏹正常染色反应（-～++++）

–细胞外铁：+~++

–铁粒幼细胞：19%~44%，无环形铁粒幼细胞

⏹临床意义

–鉴别IDA与非IDA

–诊断铁粒幼细胞性贫血

–诊断MDS-RARS

几种常见AL的细胞化学染色结果

细胞免疫表型（immunophenotypes）分析

⏹标本：血液、骨髓、淋巴结穿刺液、胸腹水、脑脊液、肺泡灌洗液

⏹临床意义

–急性白血病和淋巴瘤的分型诊断与疗效、预后判断

–成熟淋巴细胞肿瘤的分类诊断

–淋巴细胞免疫表型分析判断免疫功能

–造血干细胞计数

⏹方法

–流式细胞仪：目前的首选方法

–免疫组织化学法：用于病理切片

–免疫荧光显微镜法：现已少用

ALL与AML细胞免疫表型特点

骨髓病理学检查

⏹反映骨髓组织结构及间质成分

–较全面地衡量造血细胞增生程度，以及造血组织、脂肪组织和纤维组织的容积比例；

–“干抽”时能反映造血情况及纤维组织增生程度，如骨髓纤维化、髓样化生；

–协助某些血液病的诊断，如MDS、毛白、淋巴瘤累及骨髓；

–较早期预测疾病的预后，反映白血病治疗效果；

–观察重要的骨髓组织学变化，如铁储备、炎性肉芽肿、转移瘤、骨小梁变化、血管栓塞、骨髓坏死、淀粉样变。

Bone Marrow Biopsy

骨髓病理学检查

⏹正常骨髓的组织形态学

–造血组织

–骨质

–间质

骨髓病理学检查

⏹常见血液病的骨髓病理学诊断

–骨髓纤维化（MF）

•细胞期

•胶元形成期