微生物培养基的制备及接种

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培养基的配制

实验五微生物培养基的配制和灭菌培养基是将微生物生长繁殖所需要的各种营养物质，用人工方法配制而成的各种营养基质。

培养基为微生物的生长提供营养物质和生存空间。

它具有微生物正常生活所需的各种养料和适宜的环境条件；（1）适当组分和比例的营养物质；（2）适宜的pH值；（3）合适的渗透压；（4）保持无菌状态。

所以培养基是培养微生物所必需的最主要材料。

培养基的配制是微生物学工作者的主要技术操作之一。

培养基的种类：根据培养基的组成成分，可将培养基分为三类：合成培养基：由各种纯化学物质按一定比例配制而成。

半合成培养基：由一部分纯化学物质和另一部分天然物质配制而成。

天然培养基：利用天然来源的有机物配制而成的。

从培养基的物理状态来分：液体培养基：不加凝固剂的液态状培养基。

固体培养基：在液体培养基中加入2％左右的凝固剂的固体状培养基或固体状农副产品培养基。

半固体培养基：在液体培养基中加入0.2％-0.5％凝固剂而成的半固体状培养基。

微生物最常用的凝固剂为琼脂（其次为明胶），又叫洋菜、冻粉。

它不是一种营养物质，只能被极少数种类的细菌分解利用。

琼脂是从海藻中（主要是石花菜）提取而制成的。

是一种多糖类化合物，主要成分是复杂的多糖硫酸酯钙盐，琼脂是一种可逆性胶体，在常规浓度下加热到96C以上即成溶胶状态，融化的琼脂，当温度下降到42℃以下，又凝固为固体。

一、目的要求l. 了解培养基的配制原理和方法，掌握其配制过程。

2. 了解几种灭菌方法，掌握干热灭菌法和加压蒸汽灭菌法的原理及其使用方法。

3. 熟悉分离、培养微生物前的有关准备工作及操作方法。

二、实验材料1. 药品：牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、琼脂、马铃薯、蔗糖；可溶性淀粉、K2HPO4、KNO3、MgSO4·7H2O、FeSO4·7H2O等。

2. 高压蒸汽灭菌器、恒温干热灭菌箱、细菌过滤器、紫外线杀菌灯。

3. 其它：天平、牛角匙、电炉、1N HCl、1N NaOH、pH试纸、刻度搪瓷杯、量筒、漏斗、漏斗架、玻棒、带玻璃珠的三角瓶、带棉塞的无菌试管、无棉塞的空试管、培养血、吸管、各种包装纸防水纸、绳索、棉花、标签等。

微生物限度检测操作步骤

微生物限度检测是对产品中微生物数量进行定量或定性检测的过程。

以下是一般的微生物限度检测操作步骤：
1. 准备工作：
-清洁和消毒实验室设备、试剂瓶和工作台等。

-准备所需的培养基、培养基平板和培养基管等。

2. 样品处理：
-取得待检样品，确保样品的采集和保存符合规范和要求。

-如果需要，将样品稀释到适当的浓度，以便在培养基上形成可数的菌落。

3. 培养基制备和接种：
-准备所需的培养基，并按照说明书的要求进行制备。

-将适量的培养基倒入无菌平板或管中，并在适当温度下固化。

-在培养基表面均匀涂布待检样品，或将待检样品滴于培养基管中。

4. 培养和孵育：
-将培养基平板放置在恒温培养箱中，按照规定的时间和温度进行培养。

-监控培养过程中的温度和湿度，确保适宜的条件。

5. 菌落计数和鉴定：
-培养结束后，观察培养基上的菌落情况。

-使用显微镜进行菌落计数和鉴定，根据形态、颜色、大小等特征确定菌落类型。

6. 结果分析和报告：
-根据菌落计数和鉴定结果，判断样品的微生物限度是否符合规定的标准。

-撰写检测报告，将结果详细记录并汇总，包括样品信息、检测方法、结果和结论等。

以上是一般微生物限度检测的操作步骤。

具体的操作可能会因实验室和产品类型而有所不同，需要根据相关标准和方法进行调整和执行。

在进行微生物限度检测时，应严格遵守实验室的操作规程和安全要求，确保检测结果的准确性和可靠性。

微生物培养基配制

培养基配制配制培养基有两种方法可以选择，一是购买培养基中所有化学药品，按照需要自己配制；二是购买商品的混合好的培养基基本成分粉剂，如MS、B5等。

自己配制可以节约费用，但浪费时间、人力、且有时由于药品的质量问题，给实验带来麻烦。

就目前国内的情况看，大部分还是自己配制。

为了方便起见，现以MS培养基为例介绍配置培养基的主要过程。

1、配制几种母液（1）配制MS大量元素母液一般将大量元素分别配制成100倍的母液，使用时再分别稀释100倍。

分别称取NH4NO3 165g KH2PO4 17gKNO3 190g CaCl2·2H2O 44gMgSO4·7H2O 37g各自配成1L的母液。

倒入1L试剂瓶中，存放于冰箱中。

（2）配制MS微量元素母液一般将微量元素配制成100倍母液。

依次称取KI 0.083g Na2MoO4·2H2O 0.025gH3BO3 0.62g CuSO4·5H2O 0.0025gMnSO4·H2O 1.69g CoCl2·6H2O 0.0025gZnSO4·7H2O 0.86g配成1L母液，倒入1L试剂瓶中，存放于冰箱中。

CuSO4·5H2O和CoCl2·6H2O 由于称取量很小，如果天平精确度没有达到万分之一，可先配成调整液。

分别称取CuSO4·5H2O 0.05g CoCl2·6H2O 0.05g各自配成100ml的调整液，然后取5ml就还有0.0025g的量。

（3）配制MS有机母液一般配制成100倍MS有机母液。

依次称取肌醇10g 盐酸硫胺素（VB1）0.01g烟酸0.05g 甘氨酸0.2g盐酸吡哆醇（VB6）0.05g配成1L母液，倒入1L试剂瓶中，存放于冰箱中。

（4）配制MS铁盐母液一般配制成100倍MS铁盐母液。

依次称取EDTA二钠 3.73g FeSO4·7H2O 2.78g配成1L母液，倒入1L试剂瓶中，存放于冰箱中。

《微生物学实验》操作步骤

实验一培养基的制备与灭菌实验步骤：（一）伊红美蓝培养基（EMB，用成品，分离大肠杆菌用）每组1瓶，250 ml三角瓶×200 ml培养基。

按成品说明称量、放入搪瓷杯，加水，加热完全溶化，倒入三角瓶，塞棉花塞，牛皮纸封口，包扎，作标记（培养基名称、批次组别、日期，下同），灭菌。

（二）营养琼脂培养基（即牛肉膏蛋白胨培养基，用成品，分离芽孢杆菌用）每组1瓶，250 ml三角瓶×200 ml培养基，方法同上，灭菌。

（三）PDA培养基（即马铃薯蔗糖培养基，分离酵母菌、根霉用）每组1瓶，250 ml三角瓶×200 ml培养基。

培养基配方：马铃薯20%、蔗糖（白砂糖）2%、琼脂 2%，加水至所需体积，pH自然。

配制方法：马铃薯去皮，称量，切成小方块，放入搪瓷杯，加水适量，煮沸20 min，取汁液，补水至所需体积，加入蔗糖（白砂糖），加热溶化，最后加入琼脂（琼脂要预先单独用水浸泡，然后挤干再加入），加热至琼脂完全溶化，分装三角瓶，塞棉花塞，牛皮纸封口，包扎，灭菌。

培养基统一高压蒸汽灭菌（121℃25 min）。

（四）无菌平皿准备（下次实验倒平板用）每组10套，报纸包扎，高压蒸汽灭菌（121℃25 min）后，置干燥箱80℃烘干1 h。

（五）枯草样预处理及预培养（下次实验分离芽孢杆菌用）枯草样预处理：每组1瓶。

100 ml三角瓶＋自来水约50 ml，加5%可溶性淀粉，溶解。

枯草若干，剪短，浸入三角瓶水中，牛皮纸封口，包扎，置水浴中煮沸10 min，然后置培养箱30℃预培养3～7 d。

（六）葡萄样（或其它水果）酵母菌预培养（下次实验分离酵母菌用）每组1瓶。

葡萄（或其它水果）适量，捏碎，皮渣与汁液一起放入250 ml 三角瓶（装量1/2～2/3），封口，置培养箱25℃预培养3～7 d，观察自然发酵过程。

实验二微生物的分离与纯化实验步骤：（一）污水中大肠杆菌的分离（稀释倒平板法）1）用三角瓶取污水样适量。

细菌培养基的制备灭菌及接种培养技术(共34张PPT)

2.半合成培
养基：有一部分纯化学物质和另一部分天然物质配制而成。
3.天然培养基：利用天然来源的有机物配制而成。
从培养基的物理状态可分为
1.
液体培养基：不加凝固剂的液体状态培养基。
2.固体培养
基：在液体培养基中加入15～30g/L左右的琼脂。
3.半固体培养基：在液体培养基中加入3～5g/L左右的琼脂。
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实验程序4
（培养基和玻璃器材的灭菌方法）
过滤除菌法：不能用加热灭菌的液体物质（如维生素、血清），一般可用细菌过滤器进行除菌。
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第二部分细菌纯种分离、培养和接
种技术
目的要求
实验材料
实验程序
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目的要求
掌握从环境中分离培养细菌的方法，从而获得若干种细菌纯培养技能。掌握几种接种技术。
注意：器物不能装得太满。 3. 接通电源，进行加热。 4. 排除高压锅内的冷空气，可将排气阀打开，待温度计指示温度为100℃时关闭排气阀；或当排出的蒸气相当猛烈且微带蓝色时关闭排气阀。
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实验程序4
（培养基和玻璃器材等的灭菌） 22) ，延长时间。
6. 灭菌时间一到，切断电源，待压力降至零时，才能打开排气阀，然后打开灭菌器盖，取出物品，排出锅内剩余水。 7. 待培养基冷却后置于37℃恒温箱内培养24h，若无菌生长则放入冰箱或阴凉处保存备用。
④ 取对照无菌培养皿，倒平板待凝固后，打开皿盖10min后盖上，倒置于30℃培养24～48h，然后观察结果。
其它：接种环、酒精灯、恒温箱。实验程序4
（培养基和玻璃器材等的灭菌）
① 取10套无菌培养皿编号， 10－4、10－5、10－6各3个，另一个为空气对照。

细菌的接种与培养—培养基的制备(微生物检验课件)

培养基的主要成分及其作用
营养物质：蛋白胨、肉浸液及牛肉膏、糖类、血液、鸡蛋与动物血清、无机盐、生长因子
水分凝固物质：琼脂、明胶、卵白抑制剂：常用的有胆盐、煌绿等抑制革兰阳性菌生长；亚碲酸盐、四硫磺酸盐
及多种抗生素等指示剂：为了观察细菌是否利用分解糖类、氨基酸等物质，常在某些培养基中
培养基的制备程序
制备程序：调配、溶化、矫正pH、过滤澄清、分装、灭菌、鉴定7个主要步骤分装量：琼脂斜面分装量约为试管容量的1/4，斜面长度约为试管长度的2/3；液
体培养基和半固体培养基为试管长度的1/3；琼脂平板平皿内径为9cm，倾注培养基13-15ml，若内径为7cm，倾注培养基7-8ml 灭菌：高压蒸汽灭菌法最常用
原料称量
加热溶化
pH矫正
水
酚红指示剂
培养基
培养基
比色管
目视
pH矫正
蒸待馏测水管
标培准养比基色
管
过酸
蒸待测馏水管
标准比培养基色
管
相同
蒸待馏测水管
标培准养比基色
管
过碱
培养基分装
培养基的包扎
培养基的包扎
细菌生长繁殖的条件有哪些？叙述培养基的制备程序。简述培养基的种类及用途。
加入一定种类的指示剂，如酚红、溴甲酚紫、增菌培养基选择培养基鉴别培养基厌氧培养基
按物理性状分类 • 液体培养基 • 固体培养基 • 半固体培养基
基础培养基
基础培养基
含有基础生长所需的基本营养成分，最常用的是肉浸液，俗称肉汤，主要成分含牛肉浸液和蛋白胨。
生长繁殖方式：无性繁殖方式，即二分裂。生长繁殖速度：多数细菌分裂一代需20～30min。结核分枝杆菌需

微生物培养基配制实验报告（共5篇）

微生物培养基配制实验报告(共5篇) 培养基的制备与灭菌实验报告(详细)一、实验题目：培养基的制备与灭菌二、实验目的：1、明确培养基的配置原则，掌握配置方法。

2、了解灭菌的原理，学习掌握灭菌器的使用方法。

三、实验器材：1、药品：牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、水、琼脂。

2、仪器：三角瓶、培养皿、试管、线绳、棉花、烧杯、报纸、移液管、试管架、铁针、量筒。

四、实验原理：1、培养基的制备包括一下几种成分：（1）水分：主要成分。

（2）N源：包括无机氮和有机氮。

（3）C源：主要是含碳有机物、碳氢化合物等。

（4）无机盐：如NaCl、KH2PO4等。

微量元素：Cu、K、Mg、S、P、Zn。

有些还需要添加“生长因子”，通常是维生素类、某些氨基酸或核酸等。

2、培养基配置的原则根据不同的培养对象及培养目的，选用不同的培养基，但有机物总量不得超过15%，盐类一般不超过1%。

培养基有以下分类：按成分：天然培养基、合成培养基、半合成培养基按状态：固体培养基、半固体培养基、液体培养基按用途：基础培养基、营养培养基、鉴别培养基、选择培养基培养基配好后应立即灭菌，防止营养物质中的微生物富集。

3、灭菌：用理化手段杀灭一切微生物的营养体，包括芽孢和孢子，在实验中应对所有仪器、操作场所、药品及培养基灭菌或消毒。

（1）高压蒸汽灭菌：将物品放入封闭的加压灭菌器，加热使灭菌锅套间的水沸腾产生蒸汽，将冷空气排尽，压力上升，使水沸点变高，导致菌体蛋白质变性，一般0.1MPa、121℃、15~30min 可以彻底灭菌，本次实验灭菌20min。

若是含糖培养基，110℃、30min。

（2）干热灭菌：微生物细胞内蛋白质因高温而凝固变性。

因高温，所以含水量小，不利于蛋白质受热变性，所以温度高，时间长。

（3）紫外灭菌：诱导胸腺嘧啶二聚体形成抑制DNA复制。

（4）过滤除菌：实验室中用微孔滤膜（孔径一般为0.22μm）。

除病菌需更小。

五、实验步骤：1、牛肉膏蛋白胨培养基的制备依次准确称取0.5g牛肉粉、1.0g蛋白胨、0.5gNaCl放入烧杯，加入100mL水，用玻璃棒搅匀溶解，移入三角瓶，并加入1.5g琼脂。

微生物培养基的制备

微生物培养基的制备一、玻璃器皿的清洗在制备培养基的过程中，首先要使用一些玻璃器皿，如试管、三角瓶、培养皿、烧杯和吸管等。

这些器皿在使用前都要根据不同的情况，经过一定的处理，洗刷干净。

有的还要进行包装，经过灭菌等准备就绪后，才能使用。

1、新购的玻璃器皿除去包装沾染的污垢后，先用热肥皂水刷洗，流水冲净，再浸泡于１～２％的工业盐酸中数小时，使游离的碱性物质除去，再以流水冲净。

对容量较大的器皿，如大烧瓶、量筒等，洗净后注入浓盐酸少许，转动容器使其内部表面均沾有盐酸，数分钟后倾去盐酸，再以流水冲净，倒置于洗涤架上将水空干，即可使用。

2、用过的玻璃器皿凡确无病原菌或未被带菌物污染的器皿，使用后可随时冲洗，吸取过化学试剂的吸管，可先浸泡于清水中，待到一定数量后再集中进行清洗。

有可能被病原菌污染的器皿，必须经过适当消毒后，将污垢除去，用皂液洗刷，再用流水冲洗干净。

若用皂液未能洗净的器皿，可用洗液浸泡适当时间后再用清水洗净。

洗液的主要成份是重铬酸钾和浓流酸，其作用是将有机物氧化成可溶性物质，以便冲洗。

洗液有很强的腐蚀作用，使用时应特别小心，避免溅到衣服、身体和其他物品上。

二、培养基的类型在实验室中配制的适合微生物生长繁殖或累积代谢产物的任何营养基质，都叫做培养基(Media)。

由于各类微生物对营养的要求不同，培养目的和检测需要不同，因而培养基的种类很多。

我们可根据某种标准，将种类繁多的培养基划分为若干类型。

1、根据对培养基组成物质的化学成分是否完全了解来区分，可以将培养基分为天然培养基、合成培养基和半合成培养基。

１）天然培养基天然培养基是指利用各种动、植物或微生物的原料，其成分难以确切知道。

用作这种培养基的主要原料有：牛肉膏、麦芽汁、蛋白胨、酵母膏、玉米粉、麸皮、各种饼粉、马铃薯、牛奶、血清等。

用这些物质配成的培养基虽然不能确切知道它的化学成分，但一般来讲，营养是比较丰富的，微生物生长旺盛，而且来源广泛，配制方便，所以较为常用，尤其适合于配制实验室常用的培养基。

微生物纯种分离,培养及接种技术实验原理

微生物纯种分离,培养及接种技术实验原理微生物纯种分离、培养及接种技术是微生物学中最基本的实验技术之一。

其目的是从混合的微生物菌群中分离出单一的微生物菌落，并在适宜的培养条件下进行纯化和生长，以获得纯种微生物。

一、实验器材和试剂1.灭菌针2.毛细胞计数板3.显微镜4.平板接种器、针头5.无菌匀浆棒、吸管6.细菌培养基7.消毒液二、实验步骤1. 样品处理及制备首先需要选择一份待测试的样品，包括土样、水样、空气、食品等，然后将样品采集到无菌容器中，再将其送到实验室。

在进行样品处理之前，需要先进行简单的初步处理，将样品进行稀释或者过滤，将其中的杂质和大颗粒物去除，以利于后续实验的操作。

接下来需要进行制备培养基，根据不同的微生物种类，需要选择适当的培养基进行培养。

通常情况下，我们可以使用凝胶培养基、液体培养基、甜菜汁培养基等，以满足微生物在不同环境下生长所需的营养物和成分。

2.分离纯化分离纯化是该实验的关键步骤。

将经过预处理的样品移到无菌试管中，打开试管口，加入适量的制备好的培养基，然后利用匀浆棒或吸管将混合物均匀混合。

然后利用平板接种器将混合物接种到培养基平板上，使其密切接触。

然后将接种好的平板置于恒温箱中，以利于微生物的生长和营养物质的自我繁殖。

在接种后2-7天内，不同类型的微生物将在培养基平板上生长出不同的菌落，每一种菌落都代表一种单一的微生物。

将这些菌落分离提取，并再次进行培养，就能得到单纯的微生物菌种。

3.纯种微生物菌种接种在获得单纯的微生物菌种之后，需要将其再次接种到培养基中进行培育。

将相应体积的纯种菌种接种到培养基平板上，使其能够生长繁殖。

在接种后约24小时内，微生物将在培养基中生长出许多菌落。

根据菌落的特征和形态，可以对不同的微生物进行鉴定和分类。

如果需要进行更加深入的分析，可以对微生物菌种进行进一步培养、萃取定量和测序等工作，以获取更多的相关信息。

三、实验注意事项1. 实验前需要保证实验室内部环境和仪器均为无菌状态。

培养基的制备与细菌的接种的实验报告

培养基的制备与细菌的接种的实验报告篇一：细菌的分离纯化和接种实验环工综合实验细菌的分离纯化和接种实验实验报告环境科学与工程学院实验中心篇二：微生物实验报告细菌微生物实验报告题目年级专业实验者学号小组成员指导老师一、实验目的脓汁和粪便标本中病原菌的检测 2021级临床医学八年制1.了解细菌生长的基本营养条件，熟悉培养基的类型，学习并掌握培养基的原则与方法。

2.掌握无菌操作技术，掌握病原菌的分离与培养方法。

3.了解并比较细菌在固体、半固体和液体培养基的生长特征。

4.学习并掌握空气及人体细菌检测学方法。

5.掌握细菌涂片标本的制备以及革兰染色法，熟悉不同类型细菌的基本形态。

6.掌握糖发酵实验、抗菌素敏感性实验和血浆凝固酶实验的原理与方法。

7.从脓汁和粪便标本中分离培养和检测出病原体。

二、实验器材1.培养基的制备：干粉培养基、天平、蒸馏水、称量皿、药勺、锥形瓶、量筒、电炉、试管、洗耳球、试管筐、移液管、棉塞、牛皮纸、橡皮筋、手套、石棉网2.空气与人体体表细菌学检查：琼脂培养基、酒精、碘酒3.细菌的分离培养：脓汁标本、粪便标本、伊红美蓝平板、营养琼脂平板、接种环、酒精灯、打火机4.细菌的纯培养：接种环、酒精灯、打火机、中性笔、斜面培养基5.细菌的形态学检测：斜面培养物、营养肉汤、生理盐水、镜油瓶、拭镜纸、吸水纸、载玻片、显微镜、接种环、酒精灯、打火机、中性笔、革兰染色试剂、液体培养基6.细菌的生化试验：葡萄糖发酵管、乳糖发酵管、接种针、酒精灯、打火机、中性笔、菌液、营养琼脂平板、接种环、药物纸片（青霉素、庆大霉素、头孢曲松）、玻片、兔血浆、生理盐水7.细菌的血清学试验：玻片、福氏志贺菌诊断血清、生理盐水、接种环、酒精灯三、实验方法与步骤1.培养基的制备称量琼脂粉→蒸馏水→加热溶化→分装→集中放在试管筐里→罩上硫酸纸、牛皮纸→ 用橡皮筋扎好→放入讲台边的灭菌桶或灭菌筐内→送到高压蒸汽灭菌室（洗刷室）→灭菌2.空气与人体体表细菌学检查2.1空气的细菌学检查每组1个营养琼脂平板，选择实验楼女厕所→将平板盖打开，盖朝下放置在平板旁边→平板暴露于空气中15分钟→平板倒扣盖上→作标记→37℃温箱培养24小时→观察结果。

微生物接种技术

实验八微生物无菌接种技术一、实验原理微生物接种就是在无菌条件下，用接种工具（针、环）从一支原菌种中挑取少许菌体，接入到另一支新的培养基上扩大培养的技术。

要想得到大量的菌种，适应生产、科研和教学要求，就要进行微生物的接种，扩大菌种数量。

接种因使用不同容器、不同的培养基，达到不同的目的，而有不同的接种方法，但它们的基本要求是相同的。

通常接种都应在空气经过消毒灭菌的接种室或接种箱或超净工作台内完成。

二、实验步骤1.斜面接种（1）左手夹住试管（2）灼烧接种环（3）拔出棉塞，夹在小指、无名指上，管口过火（4）取菌、接种，接种后在火焰上方迅速塞好棉塞（5）写好标签（菌种名、日期、接种者姓名），贴于斜面正上方前端约1cm处.（6）于37度培养箱中培养24小时。

（全班统一装入一保鲜袋）（7）一星期后观察分离效果，拍照，分析结果2.平板培养基（平板）制备（1）将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上，右手拿装有培养基的锥形瓶，左手拔出棉塞。

（2）右手拿锥形瓶，使瓶口迅速通过火焰。

（3）用左手的拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，右手将锥形瓶中的培养基（约10到20ml）倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖。

（4）等待平板冷却凝固。

3.涂布平板法（以小组为单位，对混合菌菌悬液进行涂布分离）(1)用75%酒精或0.01%新洁而灭擦洗双手,进行消毒处理。

（2）将涂布器浸在盛有酒精的烧杯中。

(3) 取少量菌液滴加到培养基表面。

（4）将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃，待酒精燃尽后，冷却8~10s。

（5）用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面，涂布时可转动培养皿，使菌液分布均匀。

（6）将接种好的平板在皿底做好标记。

（7）涂布分离的平板全班一起放入保鲜袋中，37度培养箱中倒置培养24h。

（8）一星期后以小组为单位观察分离效果，拍照，分析结果4.划线分离：从污染平板中纯化细菌菌落（每人1个平板）(1)用75%酒精或0.01%新洁而灭擦洗双手,进行消毒处理。

微生物培养基的制备实验报告

微生物培养基的制备实验报告
《微生物培养基的制备实验报告》
一、实验前准备
1、实验器材及试剂：镊子、移液管、玻片、烧杯、自配液、营养培养基、微生物。

2、开展实验前需要准备微生物样本，冰箱内温度需要维持在4~8摄氏度，确保实验室洁净无尘，洁净台面下需要使用75%酒精进行消毒。

二、培养基制备过程
1、将自配液（含氯仿、葡萄糖、碳水化合物和微量元素）与营养培养基（包含维生素、氨基酸、脂肪酸和胞外因子）加入烧杯中，按比例混合搅拌。

2、将混合液穿透0.45微米的超滤膜滤出，经抗原体和游离细菌滤除，消毒后的液体集中成培养基。

3、将微生物样本放入玻片中，用镊子均匀涂抹在玻片表面，再将其加入到烧杯中。

4、将混合液用移液管移到培养皿中，上面覆盖一层无菌纸，放入37摄氏度的培养箱中培养48小时，即可正常繁殖成熟。

三、实验观察结果
1、几乎99%的膜通量率被超滤膜滤出，液体清澈，污染较少，实验结果满意。

2、经过48小时的培养，微生物繁殖数量显著增加，可以观察到大量的微生物群落在培养基中，表明培养基中有较高的生物可用性。

3、细菌细胞及环境氢离子浓度在正常范围内，PH值稳定在7.2-7.3，表明培养基环境适宜微生物生长繁殖。

四、总结
以上实验证明，自配的微生物培养基可以有效的支持微生物的繁殖，环境条件稳定而有利于微生物生命活动，培养基污染率低，满足了培养表面的要求。

本实验为进一步在微生物培养基中开展实验提供了良好的条件，为研究微生物起到了重要作用。

动物微生物培养基的制备

动物微生物培养基的制备
动物微生物培养基的制备
动物微生物培养基的制备是细菌和真菌研究的关键，它能够提供有利于动物细
胞和微生物生长及繁殖的基本物质和充分的营养，从而使得研究者获得高品质的实验数据。

动物细胞和微生物培养基可有效保证细胞生长和发育，从而获得有用的细胞和微生物信息。

制备动物微生物培养基需要以下几个步骤：
首先，确定培养基的成分，用不同的物质，比如淀粉、蛋白质、碳源、氮源等，按照不同的比例进行混合，以满足动物细胞和微生物所需的物质和营养元素。

其次，测定营养元素的品质和水质，包括溶解氧、PH值等，以保证动物细胞
及微生物生长所需的稳定的浓度条件。

接着，按照一定的比例添加抑制剂，如克林霉素、抗生素等，可以抑制污染物
和竞争性细菌的生长，从而保证实验的准确性。

最后，休眠微生物的接种，可以进一步确保实验的可靠性，并积极促进动物细
胞和微生物的生长及存活。

综上，动物微生物培养基的制备复杂而精密，除了正确配比、选择营养元素和
抑制剂之外，还要控制水质和浓度，才能获得高品质的实验数据。

培养基的制备与微生物接种技术(1)

培养基的制备与微生物接种技术（1）培养基的制备一、实验目的1、了解人工培养基的主要成分及一般制备原则。

2、掌握基础培养基的制造方法和过程。

二、实验原理培养基是人工配制的适合微生物生长繁殖的营养基质。

培养基要具备以下条件：①要有适宜的营养物质和水分；②具有适宜的PH值；③配制后应经灭菌呈无菌状态。

培养基按物理状态可分液体培养基、固体培养基、半固体培养基。

常用琼脂作凝固剂。

培养基制备的基本程序：配料、溶化、测定及矫正PH、过滤、分装、灭菌、无菌检验三、仪器设备试管、刻度吸管、纱布、滤纸、三角瓶、培养皿、量筒、漏斗、棉塞、电炉、天平、包装纸、棉线、ph试纸、玻棒。

试剂：牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、磷酸氢二钾、琼脂条、0.1mol/L和1mol/L氢氧化钠、0.1mol/L和1mol/L的盐酸溶液、蒸馏水等。

四、相关知识点一、配制原则和种类（一）培养基配制原则1、培养基：培养基是提供食用菌等生物生长发育所需的营养与特定环境条件的基质，如蘑菇菌是有机营养型中的草腐生菌。

制备培养基不仅要考虑它所需要的含碳化合物、含氮化合物、矿物盐类、生长因子，还要考虑水与pH环境，同时还应考虑它们培养方式是固体培养还是液体培养。

因此，可以把按菌类生长发育需要比例配制的灭菌营养基质，称为培养基。

换言之，培养基必须具备三个条件：含有菌株生长发育所需要的营养物质；具有菌类生长环境条件；经过灭菌，并保持无菌状态。

2、培养基的选择：在整菌种制备过程中，从母种到原种、栽培种，各个阶段的目的要求有所不同，所选用的培养基的配比也应有所区别。

一般母种初生菌丝较嫩弱，分解养分能力差，要求营养丰富、完全，氮源、维生素的比例应高。

须选用易于被菌丝吸收利用的物质，如葡萄糖、蔗糖、马铃薯、蛋白胨、无机盐类及生长素等为等而原种、栽培种所需数量较多，且菌丝分解能力强，可利用大量农作物秸秆、粪草、棉籽壳、麸皮、米糠等原料作为培养基。

（二）培养基的种类1、根据营养物质的来源，可以把培养基分炎天然培养基、半合成培养基和合成培养基。

液体培养基接种法步骤

液体培养基接种法步骤液体培养基接种法是微生物学实验中常用的一种方法，用于培养细菌、真菌等微生物。

接下来将详细介绍液体培养基接种法的步骤。

一、准备工作在进行液体培养基接种实验之前，首先要准备好所需的试剂和实验器具。

试剂包括培养基、生长因子等，实验器具包括试管、移液管、培养皿等。

二、制备培养基根据实验需要，选择合适的培养基配方，并按照所需比例将培养基粉末溶解于适量的蒸馏水中。

然后，将溶液倒入试管或其他容器中，并用自动灭菌器或高压灭菌锅进行灭菌处理。

三、接种微生物1. 选择待接种的微生物菌株，可以是细菌、真菌等。

在接种前，可以通过显微镜观察菌落形态、颜色等特征，确保选择到正确的菌株。

2. 取一小块含有待接种微生物的培养基，称为接种物。

接种物可以来自已培养的菌落或是冻存的菌株。

3. 使用无菌的移液管，将接种物转移到已经灭菌的培养基中。

注意避免接种物与外界环境接触，以防止污染。

4. 将接种好的培养基用无菌的塞子或膜覆盖，以防止外界细菌或真菌的污染。

5. 将接种好的培养基放置在恰当的温度和湿度条件下进行培养。

四、培养过程管理1. 在培养过程中，要定期观察培养基的变化，如颜色、透明度等。

如果出现异常现象，如菌落变色、液体变浑浊等，可能表示有外来微生物的污染。

2. 在培养过程中，可以根据需要添加适当的营养物质，如氮源、糖类等，以促进微生物的生长。

3. 根据实验的要求，可以在培养基中添加抗生素或其他抑菌剂，以抑制其他微生物的生长。

五、培养基的收获和应用1. 经过一定时间的培养，微生物会在培养基上生长形成菌落。

可以通过观察菌落的形态、大小等特征，初步判断微生物的种类。

2. 如果需要进一步分离和纯化菌株，可以通过移液管或接种环等工具，将单个菌落转移到新的培养基上进行培养。

3. 培养基中的微生物可以用于进一步的实验研究，如鉴定微生物的生理特性、生化反应等。

4. 培养基中的微生物还可以用于生产工业产品，如抗生素、发酵酒精等。