酶联免疫反应加速仪在检测HBsAg中的应用

分别 为 ０ ２ Ｉ／ 、 ． Ｕ ｍ 、 Ｕ ｍｌ２ Ｉ ／ ｌ４ Ｉ／ ０ １ ５ ， ． Ｕ ｍｌ０ ５ Ｉ ／ ｌ１ Ｉ／ 、 Ｕ ｍ 、 Ｕ ．０ ） 判断定 性结 果 。并将 ０ ５Ｉ ／ ｌ Ｈ ｓ ｇ 值 ． Ｕ ｍ 的 Ｂ Ａ 定
血清用 实 时荧光 定 量 Ｐ Ｒ法 检测 Ｈ Ｖ —Ｄ Ａ 的含 量 ， Ｃ Ｂ Ｎ 严格按 照 《 临床基 因扩 增检 验 实 验室 管 理 暂行 办 法 》 和 １ ２ 分组 每个 浓 度 ＨＢＡ ． ｓ ｇ定 值血 清 取 ４支 ， 每支 取 Ａ７０ Ｃ ５次共 ２ ０次 ， 分别用 酶 联 免疫 反 应 加 速仪 、 常规 温 育 方 Ｄ ６ ０全 自动荧 光定 量 Ｐ Ｒ检 测仪 的标 准 操作 规 程 法测 定 Ｈ ｓ ｇ ＢＡ 。 进行操 作 。
果相 符合 。现报 道如 下。
１ 材 料与 方法
ｍｎ使 用 常规 温 育 法 ３ ｃ 温 水 浴 箱 第 一 步 孵 育 ３ ｉ； ７Ｉ Ｃ恒 ０
ｍ ｎ 第 二 步 孵 育 １ ｉ。分 别 读 取 各 组 的 吸 光 度 值 ｉ、 ５ ｍｎ
１ １ Ｈ Ｓ ｇ定值 血清 ． Ｂ Ａ
购 自康 彻 思坦 生 物 公 司 ， 量 （ Ｄ值 ）吸 光度 与Ｉ 含 Ｏ 、 临界值 （／ Ｏ值 ） 各组 的 临界值 为 ＳＣ （
ｍ ， 格为 ０ ５ｍｌ支 ， 号 ２ ０ ０ ０ ２ ｌ规 ． ／ 批 ０ ９ ５０ 。
使用 上海科 华 生物 技术 有 限公 司生 产
清 Ｈ ｓ ｇ阳性 的最 低 浓 度 为 ０ ５ Ｉ ／ ｌ ＢＡ ． Ｕ ｍ 。酶 联 免 疫 反 的 乙肝 Ｈ Ｓ ｇ检测 试 剂 盒 。具 体 操 作 方 法 按 《 国临 ＢＡ 全 床检验 操作 规程 》 及试 剂盒使 用说 明 书进行 … 。用酶 联 应加 速仪 有利 于临床 判读 “ 区 ” 灰 样本 结 果 ， 和实时 荧光 定量 聚合 酶链反 应 （ Ｃ ） 检测 Ｈ Ｖ—Ｄ Ａ的 检测 结 免疫反 应 加 速 仪 第 一 步 孵 育 １ ｎ 第 二 步 孵 育 ｌ ＰＲ 法 Ｂ Ｎ ５ｍｉ、 ０
目前 ， 内 最 常 使 用 的 测 定 乙 肝 病 毒 表 面 抗 原 １４ 仪 器 国 ．
Ｎ ／ Ｊ酶联 免 疫 反应 加 速仪 （ Ｙ ＭＭ 上海 复 星
（ ＢＡ ） Ｈ ｓ ｇ 的方法是 酶 联免 疫 吸 附试 验 （ ＬＳ 。Ｅ ＩＡ 长征 医 学 科 学 有 限 公 司 ） ＭＩ Ｅ ＩＡ） ＬＳ 、 （ 标 仪 （ 兰 雷 勃 ） ３酶 芬 、 上 、 法简 单 、 便 、 速 ， 口试 剂 盒 可 测 到 的 血 清 ＨＢ Ａ ３ ℃恒 温水 浴 箱 （ 海 跃 进 医疗 仪 器 厂 ） 微 量 振 荡 器 方 快 进 ｓｇ ７ 最低 浓度 为 ０ ５ Ｉ ／ ｌ 国产 试 剂 盒 目前 能 达 到 １Ｉ／ （ ． Ｕ ｍ ， Ｕ 姜堰 市 电子仪 器 厂 ）４ ２ ０ｕ 移 液 器 （ 兰 雷勃 ） 、０～ ０ ｌ 芬 、 ｍ 。我们将 一种 酶 联 免 疫 反应 加 速 仪 应 用 于 国产 试 剂 Ｄ ６０全 自动荧光 定量 Ｐ Ｒ检测 仪 （ ｌ Ａ７０ Ｃ 中山大 学达安 基 盒 Ｅ ＩＡ法 检 测 ＨＢ Ａ ， 常规 的温 育方 式 比较 ， 现 因 ） ＬＳ ｓｇ 和 发 。 应用 此仪 器可 以提 高 Ｅ ＩＡ检 测 的灵敏 度 ， ＬＳ 可测 到 的血 １５ 检测 方法 ．
值 （ Ｄ值 ） Ｏ 比较 ， 有显著性 差异 （ ＜ ．５ 。有 ４个浓度 的 ＨＢＡ Ｐ ００ ） ｓ ｇ定值血 清定性 结果相 一致 ，． Ｕ ｍ 的 ＨＢＡ 定值 ０ ５Ｉ／ ｌ ｓｇ 血 清用 常规 温 育 法 检 测 结 果 为 阴性 ， 酶联 免 疫 反 应 加 速 仪 检 测 结 果 为 阳 性 ， Ｏ ５ Ｉ／ ｌ Ｈ ｓ ｇ定 值 血 清 ＨＢ 用 而 ． Ｕ ｍ 的 Ｂ Ａ Ｖ— Ｄ Ａ的含量均大 于 ｌｘ１ 拷 贝／ ｌ Ｎ ０ ｍ 。５个浓度的 Ｈ ｓ ｇ Ｂ Ａ 定值血 清， 酶联 免疫反应加速仪的 Ｏ Ｄ值 Ｃ ％分别为 ２ ３ ２ ５ Ｖ ． 、． 、 ２０ ２ ２ ２４ 常 规 温 育 方 法 的 Ｏ ． 、． 、 ． ， Ｄ值 Ｃ ％ 分 别 为 ３ ８ ４４、． 、 ． 、． 。 结 论 酶联 免 疫反 应加 速 仪 在 确 定 最 佳 反 应 Ｖ ． 、． ４ ３４ ７ ４ ５ 时间条件下 ， 有加速抗 原抗 体反 应的作用 ， 具 可以提 高 Ｅ ＩＡ检 测的灵敏度 ， 于临床 判读 “ 区” ＬＳ 利 灰 标本 的结果 ， 且重复 性好 ， 可替代 常规 温育方法 ， 值得推广。 【 关键词 】 乙型肝 炎 ＨＢＡ 酶联 免疫反应加速仪 常规温育法 “ 区” ｓｇ 灰 标本
临床和 实验 医学杂 志 ２ １ ０ ０年 ８月 第９卷 第１ ５期
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酶 联 免 疫 反 应 加 速 仪 在 检 测 Ｈ ｓ ｇ中 的 应 用 ＢＡ
刘军礼 马艳 侠 １成 阳市疾病预 防控 制 中心 陕 西 （ ２陕西 中 医学 院附属 医院 陕西 成 阳 ７２０ ） １０ ０ 成阳 ７２０ １０ ０；
【 要】 目的 探 讨酶联免疫反应加速仪在酶联免疫吸 附试验 （ ＬＳ 检测 乙型肝 炎 乙肝病毒表 面抗原 （ ｓ ｇ 摘 Ｅ ＩＡ） ＨＢＡ ）
中 的应 用 。方 法 用 酶 联 免 疫 反 应 加 速 仪 和 常规 温 育方 法 同 步检 测 ５个 浓 度 的 ＨＢＡ ｓ ｇ定值 血 清 ， 时 用 实 时 荧光 定 量 同 Ｐ Ｒ 法检 测 Ｈ Ｖ—Ｄ Ａ， 对 结 果进 行 比较 分析 。 结果 ５个 浓 度 的 ＨＢＡ Ｃ Ｂ Ｎ 并 ｓ ｇ定值 血 清 用 两种 方 法检 测 的 Ｈ ｓ ｇ 光 度 ＢＡ 吸