1株野生香菇属菌株的鉴定及其胞内多糖的抗氧化活性
几种食用菌多糖抗氧化活性比较
用菌在药用保健方面也具有重要价值。已有的研究表明, 食用菌种含有多种活性成分, 除了能提高人体免疫力, 增 强肝功 能 外, 还 具 有 抗 肿 瘤、降 血 脂、抗 氧 化 等 多 种 功效 [ 12] 。
实验组
对照组 F e2+ + H 2O2
F e2+ + H 2O2 + 多糖
多糖 ( g /m L )
0 0 62 5 125 250 500 1000
金钱菇
花菇
冬菇
A 532nm
抑制率 (% )
A532nm
抑制率 (% )
A 532nm
抑制率 (% )
0 392
ห้องสมุดไป่ตู้
0 392
0 392
1 444 100 1 444 100 1 444
100
1 059 26 7 0 575 60 1 0 558 1 172 18 8 1 159 19 4 0 616 1 224 15 2 1 025 29 0 0 282
61 4 57 3 80 5
1 055 26 9 0 879 39 1 0 290 0 911 36 9 0 739 48 9 0 188
的体系组分别下降 0 139, 0 151, 0 190, 0 211 和 0 233,
图 1 多糖还原力的测定
由图 1 可以看出, 随浓度的增加, 金钱菇、花菇、冬菇 的还原力逐渐增强, 其中花菇与冬菇的还原力增强相对较
野生香菇菌株鉴定及其与栽培菌株的生物学特性比较
收稿日期：2023-07-30基金项目：广西重点研发计划项目（桂科AB18221047）；广西农业科技创新联盟科技先锋队专项（桂农科盟202308-2）广东农业科学2023，50（9）：59-67Guangdong Agricultural SciencesDOI:10.16768/j.issn.1004-874X.2023.09.006李宏月，欧小云，刘斌. 野生香菇菌株鉴定及其与栽培菌株的生物学特性比较［J］. 广东农业科学，2023，50（9）：59-67.野生香菇菌株鉴定及其与栽培菌株的生物学特性比较李宏月1,2，欧小云1，刘 斌1（1. 广西大学农学院/广西大学食用菌研究所，广西 南宁 530004；2. 广东茂名农林科技职业学院生物技术系，广东 茂名 525000）摘 要：【目的】对野生香菇进行鉴定，并比较其与栽培菌株的生物学特性，为野生香菇种质资源的应用提供理论基础。
【方法】采用形态特征和分子序列分析方法对野生食用菌进行鉴定，并分析温度、碳源、氮源等因素对菌丝生长的影响，并比较其与6株栽培香菇的生物学特性。
【结果】2株野生食用菌（林香18和林香19）鉴定为香菇，所有供试菌株均能在15~30 ℃条件下生长，其中，林香18在15~30 ℃范围内菌丝生长速度为2.5~4.7 mm/d，菌丝生长力极强；林香19在15~20 ℃时菌丝生长缓慢，生长速度为0.5~1.6 mm/d，在25~30 ℃时生长速度显著加快，为2.58~3.08 mm/d，说明林香19不耐低温。
2株野生菌株在30 ℃时菌丝生长速度最快，分别为4.7、3.08 mm/d，且明显高于栽培菌株，属于耐高温菌株；其余6株栽培菌株在25 ℃时生长速度最快，为3.18~4.91 mm/d，均属于中温菌株。
供试菌株L12、L26、林香19、申香34、申香60和浦香08以可溶性淀粉为最适碳源，林香18和L808的最适碳源为蔗糖，以乳糖为碳源时菌丝生长最差；供试菌株以尿素为氮源时均不能生长，以牛肉膏为氮源时菌丝生长最好，以硝酸钾为氮源时菌丝生长最差；林香18、林香19、申香60和L26最佳C/N 为10/1，申香34、L12最佳C/N 为30/1，浦香08和L808最佳C/N 分别为40/1和50/1，由此可知，申香34、林香18和林香19菌丝生长不受C/N 的影响，其余菌株均受C/N 的影响。
香菇 香菇多糖 提取 纯化 检测 含量测定及表征
09级应用化学
1
目录流程图
香菇简介 香菇多糖含量测定 香菇多糖组成的测 定 结束
营养成分及药用价 值
香菇多糖提取方法 及比较
香菇多糖结构的鉴 定
营养成分及药用价 值
香菇多糖的应用
香菇多糖的纯化
主要参考文献
地理分布
香菇多糖的生物活 性
香菇多糖纯度鉴定
市场分布
香菇多糖简介
香菇多糖的脱色
19
5.7.2主要的仪器分析方法主要有
高分辨率的核磁共振技术[7] 快速原子轰击质谱技术 电喷雾质谱 基质辅助激光解吸飞行时间质谱 串联质谱技术及各种色质联用技术[8] 紫外分光光度法 红外光谱法[9] 气相色谱法[10] 液相色谱法[11] 电泳法[12] 比旋光度法等
11
4. 微波法提取香菇多糖
微波提取法是一种新型提取法，由于溶剂及细胞液吸收微波能， 微波射线辐射于溶剂并透过细胞壁内部时，细胞内部温度升高压力 增大，当压力超过细胞的承受能力时，细胞壁破裂，位于细胞内部 的多糖就从细胞中释放出来； 5. 超声波提取法 香菇多糖的超声波(20KHz一50MHz)提取一利用超声波的空化作 用分散破坏植物组织，加速植物多糖成分的浸出提取；另外超声波 产生的机械振动、乳化和击碎效应 等也能加速多糖成分的扩散释放 并充分与溶剂混合，提高香菇多糖的得率； 6.深层发酵培养提取法 目前，香菇多糖主要从香菇子实体中提取。人工培养香菇子实体， 生产周期长达半年以上，而深层培养发酵法获得香菇菌丝体和香菇 多糖，生产周期将缩短至一周左右；一般从鲜香菇中提取多糖，得 率为6.9％左右，从干香菇中提取多糖，得率是6.72％左右，差异不 大；而香菇菌丝体的多糖得率却明显高于香菇子实体，达7.3％左右。 因此在工业生产中，此法很具竞争优势；
香菇多糖的高效制备及抗氧化功能评价
香菇多糖的高效制备及抗氧化功能评价
香菇多糖是一种重要的天然食品多糖，具有广泛的生物活性和
健康功能。
高效制备香菇多糖的研究有助于开发其应用价值。
目前，高效制备香菇多糖的方法主要包括物理法、化学法和生
物法。
物理法主要包括超声波法、微波辐射法、高压法等。
化学法
主要包括酸碱法、酶解法、超临界萃取法等。
生物法主要包括微生
物发酵法、真菌细胞壁降解法等。
其中，生物法制备香菇多糖是目
前最为流行的方法。
抗氧化功能评价是香菇多糖研究的重要方向之一。
现有研究表明，香菇多糖具有良好的抗氧化活性，可以提高机体的抗氧化能力，预防和延缓多种疾病的发生。
综上所述，高效制备香菇多糖以及评价其抗氧化功能是香菇多
糖研究的重要方向。
未来需要开发更加高效的制备方法，并深入研
究其生物活性和机制，促进香菇多糖在食品和医药领域的应用。
香菇中香菇多糖的测定
将香菇颗粒放置到索氏提取容器里面， 向其中添加 90 mL 水，通过电加热进 行回流提取操作，直到提取溶液变为 无色溶液，再将提取液转移到容量为 100 mL 的容量瓶之中，进行定容并摇 晃均匀。精确称取溶液 10 mL，并向 其中添加 150 mL 的乙醇溶液，并摇 晃均匀，然后将其静置于温度为 4 ℃ 的环境之中，经过 12 h 之后液取出， 并进行离心处理，将离心液的上部清 液倾倒，得到沉淀物质加水进行溶解， 将溶解后物质转移到 50 mL 的容量瓶 之中，进行定容处理，并将溶液摇匀， 便得到样品溶液。
2.2.1 对照样品试样制备 精确称取无水葡萄糖试剂 10 mg， 将其放置在 100 mL 的容量瓶之中，然 后加入水并进行定容处理，便可以得 到浓度为 0.1 mg/mL 的对照样品试样。 2.2.2 样品溶液制备 称量鲜香菇 5 g 左右，并且准确计 量称取的数值，将香菇进行粉碎处理， 得到直径约为 2 mm 的香菇颗粒，并
2 香菇多糖含量测定试验
2.1 试验原理
香菇多糖物质在乙醇之中会发生 沉淀现象，能够和水溶性的单糖以及 低聚糖分离，并且和浓硫酸发生反应 会被分解成为单糖，同时在极短的时 间之内发生脱水反应，并形成糠醛物 质或者是羟甲基糠醛物质，再和蒽酮 发生缩合反应，便会形成相应的衍生 物，所得物质自身颜色和香菇多糖含 量存在直接联系，如此便能够通过比 色方法测量多糖物质。 2.2 试验方法
此次试验是在方法学指导下开展 的，制定的试验方法较为简便，而且 操作过程也易于完成，具有相对优良 的稳定性，回收率也相对较高，具有 较大的推广与应用价值。
Technology 科技 分析与检测
香菇中香菇多糖的测定
□ 张春霞 泰安市食品药品检验检测中心
摘 要：此次试验利用紫外可见光光度分析的测量方法，测量香菇多糖含量，并且验证了实验的重复性以及稳定性， 得出此种试验方法较为简便，而且操作过程也易于完成，具有较大的推广与应用价值。
一株野生香菇的鉴定及菌丝最佳生长条件研究
一株野生香菇的鉴定及菌丝最佳生长条件研究袁思明;房丽丽;何德;李翠新【摘要】n order to identify a strain of wild Lentinula edodes exactly,we conducted some experiments u-sing its rDNA ITS sequences analysis and morphological identification.The results indicated that this wild strain is Lentinula edodes.Some studies on the optimum growth rate of its mycelium in this paper showed that the best carbon source was maltose,the optimum nitrogen source was beef extract,the optimum C / N was 30 ∶1,the optimum pH value range was 5 to 6,and magnesi um sulfate could promote the growth of its mycelium.%为了对采集的一株野生香菇进行准确鉴定，实验采取了 rDNA ITS 序列分析以及形态鉴定的方法，研究结果表明该菌株就是香菇。
实验对其菌丝的最佳生长条件进行了研究，结果表明其菌丝生长的最适碳源为麦芽糖，最适氮源为牛肉膏，最适碳氮比为30∶1，最适 pH 为5耀6，硫酸镁能够促进菌丝的生长。
【期刊名称】《湖北民族学院学报（自然科学版）》【年(卷),期】2016(034)001【总页数】4页(P77-80)【关键词】香菇;鉴定;碳源;氮源【作者】袁思明;房丽丽;何德;李翠新【作者单位】西南林业大学生命科学学院，云南昆明 650224;西南林业大学生命科学学院，云南昆明 650224;西南林业大学生命科学学院，云南昆明 650224;西南林业大学生命科学学院，云南昆明 650224【正文语种】中文【中图分类】S646香菇(Lentinula edodes)又名香菌俗称中国蘑菇，被人们誉为“菇中皇后”[1]，是驰名中外的食用菌和药用菌，其人工栽培仅次于双孢菇[2].香菇清香可口，别有风味，深受人们的喜爱.香菇不仅含有丰富的维生素和氨基酸，而且还具有良好的保健功能，如抗肿瘤、增强免疫力、降血脂、抗血栓、保肝[3]、健胃、预防佝偻病和预防现代“文明病”[4]等.野生香菇主要分布在华南、华中、西南地区，人工栽培遍布全国[5].野生香菇除了具有浓郁的香味和脆嫩的质地，还具有很强的抗逆性，因此可以作为培养香菇优良品种的杂交亲本[6],合理开发和利用这些资源将是提高香菇育种水平的前提和保障，因此分离、保藏野生香菇菌株具有十分重要的意义[7-10].云南省地处低纬，干湿分明，气候宜人，为野生食用菌的生长提供了优质的气候环境[11]，该地区的野生香菇资源丰富，香味浓郁，深受消费者喜欢.因此本文将研究野生香菇菌丝体的生物学特性，以期为香菇的生产和基础研究提供依据.1.1 供试菌种对2014年5月采自云南省云县的野生香菇(如图1所示)的一株进行了菌种分离培养.1.2 香菇的DNA提取及ITS分子鉴定1.2.1 基因组DNA的提取将分离得到的野生香菇菌种接到PDA斜面培养基上，26℃培养7～10 d，然后接种于液体培养基中，室温静置培养一个月后用滤纸收集香菇的菌丝体，吸水纸吸干.取适量菌丝体用液氮充分研磨后快速盛入1.5 ml的Eppendorf管中，加入750 μL的预热CTAB(2%)提取缓冲液，振荡混匀后加入5 μL的β-巯基乙醇，65℃水浴1 h后12 000 r/min离心20 min.取上清液加入等体积的苯酚、氯仿、异戊醇混合液(体积比为25∶24∶1)充分混匀，慢慢摇晃1 h后12 000 r/min离心20 min.取上清液转管至新的1.5 mL的Eppendorf管中，加入等体积的氯仿、异戊醇混合液(体积比为24∶1)慢慢摇晃1 h后12 000 r/min离心20 min.取上清液转管，加入2/3体积预冷的异丙醇置于-20℃冰箱30 min，8 000 r/min离心5 min.弃上清液，沉淀用75%的乙醇洗涤2～3次，晾干加入30 μL TE溶液充分溶解，然后用1.0%的琼脂糖凝胶检测DNA样品的浓度和质量，DNA样品置于-20℃保存备用.1.2.2 ITS-PCR扩增利用真菌通用引物ITS1(TCCGTAGGTGAACCTGCG)和ITS4(TCCTCCGCTTATTGATATGC)对香菇菌种进行ITS-PCR扩增，反应体系为35 μL，包括：2×HiFiTaqPCRS tarMix17.5 μL、引物ITS1(10 μM)和ITS4(10 μM)各0.7 μL、DNA模板1 μL，用去离子水将体积补至35 μL.ITS-PCR 反应程序为：94℃预变性2 min，94℃变性1 min，55℃退火1 min，72℃延伸1 min，34个循环，72℃延伸8 min，4℃保存.扩增得到的PCR产物经1.0%琼脂糖凝胶电泳检测扩增结果，对合格的产物送至北京六合华大基因科技股份有限公司进行测序.1.3 野生香菇的菌丝生长条件试验基础培养基配方：葡萄糖20 g、蛋白胨2 g、硫酸镁0.15 g、磷酸二氢钾0.15 g、磷酸氢二钾0.15 g、琼脂15 g、水1 000 mL、pH自然.1.3.1碳源试验供试碳源：葡萄糖、果糖、蔗糖、麦芽糖、淀粉.分别以20 g的果糖、蔗糖、麦芽糖、淀粉代替基础培养基中的葡萄糖，配置成不同的碳源培养基，按常规方法灭菌、倒平板，用内径5 mm的打孔器在活化平板培养基的同一半径处打孔，接种到每一供试平板的中央，每一碳源设置3个重复，置于25℃恒温培养箱中连续培养11 d，第三天开始每隔两天利用十字交叉法测一次菌落的直径，并且观察菌落形态、菌丝的长势.菌丝的生长速度用(mm/d)表示.菌丝生长浓密、粗壮用“+++”表示，生长较为浓密用“++”表示，菌丝稀疏细弱用“+”表示，不生长用“-”表示.1.3.2 氮源试验供试氮源：硝酸铵、硫酸铵、牛肉膏、蛋白胨、尿素.以等量的硝酸铵、硫酸铵、牛肉膏、尿素代替基础培养基中的蛋白胨，配置成不同氮源的培养基，其余操作同1.3.1.1.3.3 无机盐试验在每升基础培养基中分别加入1 g氯化钙、氯化钠、硫酸镁、磷酸二氢钾、硫酸亚铁，其余操作同1.3.1.1.3.4 pH值试验用10%的氢氧化钠和10%的盐酸在灭菌前将基础培养基的pH值调为5、6、7、8、9共5个梯度，其余操作同1.3.1.1.3.5 碳氮比试验以葡萄糖为碳源，以蛋白胨为氮源，以20 g葡萄糖为标准，配制成碳氮比分别为10∶1、20∶1、30∶1、40∶1、50∶1共5种配方，其余操作同1.3.1.1.3.6 菌丝生长速度的测定菌丝平均生长速度(mm/d)=所测得三个菌落半径的平均值/生长的天数.2.1 形态鉴定结果所采集的野生香菇子实体中等大，菌盖表面平整，呈扁平或者稍扁平，周围为浅褐色，中部为黄褐色，相比于人工栽培的菌肉肥厚香菇而言，其菌盖较薄，表面无鳞片，边缘不内卷；菌柄褐色，中生，弯曲，肉质，相比于人工栽培的香菇，其菌柄较细长；菌褶弯生不等长，白色肉质，密集；菌肉白色厚实，具有特殊的香味，从形态上初步鉴定为野生香菇.2.2 DNA的提取野生香菇菌株的DNA提取结果如图2中的1、2、3.得到的野生香菇菌株DNA大小在23 130 bp附近，电泳图中，DNA条带清晰，DNA的浓度、纯度以及产率都比较高，可用于PCR扩增.2.3 野生香菇的ITS-PCR扩增和测序结果利用真菌通用引物ITS1和ITS4对野生香菇菌株进行了ITS-PCR扩增，扩增产物经1%琼脂糖凝胶电泳检测，检测结果如图3.测序结果rDNA ITS区段长度为740 bp.所得序列进行Blast搜索，Blast结果击中(hit)均为香菇(如图4)，序列相似性为96%，E value(期望值)为0，主要击中香菇菌株SB104、香菇菌株GAN046-IAMHAU、香菇菌株TMI1546、香菇菌株YUN102-IAMHAU、香菇菌株50784-ACCC、香菇菌株ndeweert等[5]认为ITS序列经比对，序列相似性≥99%，属于相同种；序列相似性大于95%，小于99%，属于相同属；序列相似性≤95%，属于相同科.因此ITS分子分析结合上面形态上的鉴定，表明分离得到的野生菌株是香菇.2.4 不同的碳源对香菇菌丝生长的影响碳源对香菇菌丝生长的影响见下表1，生长曲线见下图5.从表1可知，供试的5种碳源均可以作为野生香菇菌丝生长的碳源，但在以蔗糖为碳源的培养基上菌丝的长势明显低于其他几种碳源，结合菌丝在不同碳源下的生长曲线，可以看出野生香菇在以麦芽糖和葡萄糖为碳源的培养基上生长势最好.2.5 不同氮源对香菇菌丝生长的影响不同氮源对野生香菇菌丝生长的影响见下表2，菌丝在不同氮源下的生长曲线如图6，从表2和图6可以看出，香菇菌丝在以尿素为氮源的培养基上不生长，在以硝酸铵、硫酸铵、蛋白胨、牛肉膏为氮源的培养基上都能生长，总体看来菌丝在有机氮上比在无机氮上生长更好，其中在牛肉膏上生长最好，菌丝浓密、粗壮.2.6 无机盐对野生香菇菌丝生长的影响无机盐对野生香菇菌丝生长的影响见下表3，从表3可以看出除了硫酸亚铁降低了菌丝的生长速度以外，其余几种无机盐均不同程度的促进了菌丝的生长，其中硫酸镁效果最明显.2.7 不同pH值对香菇菌丝生长的影响野生香菇菌丝在不同pH值下的平均生长速度见下图7，野生香菇菌丝在pH值为5～9中均能生长，在pH值为6时生长最好，菌丝浓密，但是菌落不规则，pH 为7～9时菌丝生长速度逐渐下降，总体来说在偏酸性环境中生长的更好.2.8 碳氮比的影响碳氮比对香菇菌丝生长的影响见下表4，不同碳氮比下的生长曲线见下图8，从表4和图8可以看出在供试的五种碳氮比中，菌丝都能够生长.所有菌落均表现出规则圆形，生长速度最快的是30∶1，从30∶1到50∶1随着碳氮比的增加，菌丝生长速度逐渐减慢，说明氮源过低不利于菌丝的生长.在云南省云县采集的一株野生菌株通过形态鉴定和分子生物学技术可以确定该菌株就是香菇.对该野生香菇进行了菌丝生长条件的研究，该实验表明，该野生香菇菌丝生长的最适碳氮源分别为麦芽糖和牛肉膏，菌丝不但生长快，而且色泽洁白菌丝浓密，长势旺盛.菌丝在pH值为5～9中均能生长，在pH为6时菌丝生长最快，菌丝生长浓密.无机盐对香菇菌丝的生长有一定的促进作用，特别是硫酸镁和氯化钠.菌丝在C/N为10∶1～50∶1的范围内均可以生长，但以C/N为30∶1时菌丝生长最快，菌丝浓密粗壮、长势旺盛.我国地域广阔，生态环境多样，香菇种质资源十分丰富，在香菇育种中应更多地引进我国丰富的野生香菇种质资源[10].在香菇生产的三大要素(菌种、培养料、栽培管理)中，菌种是最重要的基础生产资料，是影响香菇产量和质量的关键要素[11]，了解野生香菇的生物学特性将为香菇的生产栽培提供依据.。
香菇胞外多糖的化学结构与抗氧化活性
元向东．香菇胞外多糖的化学结构与抗氧化活性［ Ｊ ］ ．江苏农业科学， ２ ０ １ ６ ， ４ ４ （ １ ２ ） ： ３ １ ３－ ３ １ ６ ． ｄ ｏ ｉ ： １ ０ ． １ ５ ８ ８ ９ ／ ｊ ． ｉ ｓ ｓ ｎ ． １ ０ ０ ２－ １ ３ ０ ２ ． ２ ０ １ ６ ． １ ２ ． ０ ９ ７
— ３ １ ３—
香菇胞外多糖的化学结构与抗氧化活性
元向东
（ 包头轻工职业技术学院， 内蒙古包头 ０ １ ４ ０ ３ ５ ）
㊀㊀摘要： 利用高效液相色谱（ Ｈ Ｐ Ｌ Ｃ ） 、 气相色谱（ Ｇ Ｃ ） 和红外光谱（ Ｉ Ｒ ） 分析法等对香菇（ Ｌ ｅ ｎ ｔ ｉ ｎ ｕ ｓ ｅ ｄ ｏ ｄ ｅ ｓ ） 发酵液中香 菇胞外多糖（ ｅ ｘ ｏ ｐ ｏ ｌ ｙ ｓ ａ ｃ ｃ ｈ ａ ｒ ｉ ｄ ｅ ｓ ， Ｅ Ｐ Ｓ ） ２种组分 Ｅ Ｐ Ｓ－ １ 、 Ｅ Ｐ Ｓ－ ２的化学结构进行特征分析， 测定其抗氧化活性。结果 表明， Ｅ Ｐ Ｓ － １的单糖组成主要为鼠李糖、 阿拉伯糖和甘露糖， 其摩尔比为 １ ． ７ʒ １ ． ０ʒ ３ ． ０ ； Ｅ Ｐ Ｓ－ ２的单糖组成主要为 鼠李糖、 阿拉伯糖、 甘露糖和葡萄糖， 其摩尔比为 ７ ． ２ʒ ２ ． ３ʒ １ ． ０ʒ ８ ． ４ ； Ｅ Ｐ Ｓ－ １ 、 Ｅ Ｐ Ｓ－ ２均有较强的抗氧化活性， Ｅ Ｐ Ｓ － ２体外抗氧化活性相对更强。 ㊀㊀关键词： 香菇； 胞外多糖； 化学结构； 抗氧化 ㊀㊀中图分类号：Ｒ ２ ８ ４ ． １ ㊀㊀文献标志码：Ａ ㊀㊀文章编号： １ ０ ０ ２－ １ ３ ０ ２ （ ２ ０ １ ６ ） １ ２－ ０ ３ １ ３－ ０ ３
㊀㊀香菇（ Ｌ ｅ ｎ ｔ ｉ ｎ ｕ ｓ ｅ ｄ ｏ ｄ ｅ ｓ ） 别称花菇， 世界第二大真菌门侧耳 科香菇属（ Ｌ ｅ ｎ ｔ ｉ ｎ ｕ ｓ ） 食用菌， 口味鲜美， 营养丰富， 富含多糖、 维生素、 蛋白质、 多元酚、 朴菇素、 膳食纤维等多种生物活性物 质， 其中， 香菇多糖具有抗氧化、 抗衰老、 抗肿瘤、 抗炎、 保肝护 肝和降血糖等作用
香菇中一种抗氧化活性成分的分离及组成分析
香菇中一种抗氧化活性成分的分离及组成分析
彭冬兵;田亚平
【期刊名称】《食品研究与开发》
【年(卷),期】2008(029)006
【摘要】香菇全体经浸提,匀浆,脱色等预处理,经DEAE纤维素柱及Ultrogel ACA-44凝胶柱层析得到一种具有高抗氧化活性的成分(Le-Ⅱ).其浓度为1 g/L时可完全清除1,1-二苯基苦基苯肼自由基(DPPH).Le-Ⅱ红外扫描有典型的多糖和蛋白质的吸收峰.氨基酸分析表明其氨基酸种类齐全,其中酸性氨基酸与中性氨基酸较多,蛋白质质量含量为14.29%.气相色谱测得单糖组成为鼠李糖,阿拉伯糖,甘露糖,葡萄糖,摩尔比为0.58:0.67:0.78:3.69.多糖质量含量为1.29%.β-消去反应表明Le-Ⅱ中存在O-型连接的糖蛋白.刚果红反应初步表明其多糖部分存在三股螺旋构象.【总页数】5页(P89-93)
【作者】彭冬兵;田亚平
【作者单位】江南大学,工业生物技术教育部重点实验室,江苏,无锡,214122;江南大学,工业生物技术教育部重点实验室,江苏,无锡,214122
【正文语种】中文
【中图分类】TS2
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龙;曾晓雄;孙怡;胡冰;周莉
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5.白莲蒿中一个保肝活性成分的提取分离 [J], 党丽娟;邓健生
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香菇菌丝体多糖的分离纯化和抗氧化作用
erythrocyte hemolysis in a dose-dependent fashion. Thus, LMP Ⅱ has a strong antioxidant potential.
Key words：Lentinus edodes mycelium；polysaccharides；purification；antioxidation
解，使其质量浓度达到 50mg/mL 后进行 DEAE-52 离子交 换柱(2.6cm × 60cm)层析纯化粗多糖，上样体积 10mL， 以 0～1.0mol/L NaCl 梯度洗脱。洗脱液每 3mL 收集 1 管， 硫酸 - 蒽酮法跟踪检测，以每管样品相同稀释倍数条件 下与波长 620nm 处的吸光度对洗脱液体积做图，得到洗 脱曲线，利用 DPPH 自由基清除效率鉴定抗氧化组分， 收集活性峰，蒸馏水透析 4 8 h ，冷冻干燥。
fractionated sequentially by DEAE-52 ion exchange column and Sephadex G-100 gel permeation column and as a result, a
polysaccharide having DPPH free radical scavenging ability was obtained and named as LMP Ⅱ. UV spectral scanning and cellulose
收稿日期：2010-08-02 基金项目：辽宁省科技厅农业攻关计划项目(2009209001)；辽宁省教育厅高等学校科研项目(L2010154，2009A811)；
辽宁大学“211 工程”三期建设项目“现代生物技术与东北种质资源开发利用” 作者简介：刘剑利(1980 —)，男，讲师，硕士，研究方向为食品生物技术。E-mail：jianliliu@ * 通信作者：曹向宇(1980 —)，男，讲师，博士，研究方向为食品生物技术。E-mail：caoxiangyu@
香菇营养与活性功能成分
1.1.6 香菇营养与活性功能研究进展香菇是侧耳科担子菌的一种药食两用的真菌，是世界名贵食用菌兼药用菌之一。
它含有多种有效药用组分，尤其是它含有抗病毒、抗肿瘤、调节免疫功能和刺激干扰素形成等功能的香菇多糖( lentinan简称LNT )[1]。
香菇多糖是一种特殊的生物活性物质，是一种生物反应增强剂和调节剂，它能增强体液免疫和细胞免疫功能[2]，故近些年对香菇的研究引起了人们广泛的重视。
1968年日本千原吴郎首先利用热水从香菇子实体中浸提出6种胞外LNT[3]。
80年代以来科研人员对于LN T有了更为深入、多元化的研究。
如Schulty从深层发酵香菇菌丝体中提取到一种胞内多糖KS2, 是一种相对分子质量在(6.0～9.5)×104之间, 含α链的甘露糖苷, 并伴有少量肽类(由丝氨酸、苏氨酸和丙氨酸构成)的免疫活性物质[4]。
日本石田博士研究认为，香菇含有一种双链核糖核酸，能刺激人体网状细胞及白血球释放干扰素，而干扰素具有抗病毒作用[5]。
英国从培养的香菇菌丝体中提取到一种物质，可使因艾滋病病毒感染的T淋巴细胞复原，刺激巨噬细胞，有助于产生抗体治疗艾滋病，且安全无副作用[6]。
我国学者王顺春、方积年对该类衍生物的结构进行了详细的研究，制备了硫酸化香菇多糖，测定了硫酸基的含量，并尝试运用甲基化分析方法和核磁共振法测定硫酸基取代的位置。
制备的硫酸化香菇多糖，经美国国家癌症研究中心初步试验表明，具有良好的抗HIV活性[7]。
据报道，香菇多糖能提高巨噬细胞功能。
香菇多糖对小鼠脑炎有显著的治疗和预防作用，治疗组100%存活而对照组全部死亡[8]。
香菇多糖抗感染的机制与多糖本身的特性有关。
体液中游离的糖分子可以与病毒结合起到屏蔽作用，因此糖分子的干扰也是其抗感染的机制之一[9]。
随着分子生物学的发展和香菇多糖研究的不断深入，科学家们已经开始在基因水平探讨香菇多糖生物活性的机制。
香菇多糖在不同品系小鼠中的抗肿瘤活性有较大差异，在DBA/2、SWM/MS和A/J等小鼠中抗肿瘤活性明显，而在Balb/ C、C57BL/ 6和C3H/HE等小鼠中则不明显。
一株野生茶树菇菌株鉴定及菌丝生物学特性初探
一株野生茶树菇菌株鉴定及菌丝生物学特性初探
刘叶高;陈新淇
【期刊名称】《食用菌》
【年(卷),期】2024(46)2
【摘要】将野外采集的茶树菇进行分离提纯,得到纯培养物。
为探究其是否为新菌种以及最适的培养条件,进行菌丝拮抗试验、菌株鉴定以及相关生物学特性研究。
结果表明:拮抗试验确定其与茶树菇-5等菌株不同;经鉴定确定其为Agrocybe sp(.田头菇属),是潜在的新种,并命名为茶树菇-20;菌丝生物学特性试验确定茶树菇-20菌丝的最适生长温度为25~30℃,培养基最适含水量为60%左右,最适生长pH为6~7,最适光照强度为0 lx,最适培养基为PDA培养基和麦芽浸膏琼脂培养基。
【总页数】5页(P18-21)
【作者】刘叶高;陈新淇
【作者单位】三明市三真生物科技有限公司
【正文语种】中文
【中图分类】S33;S646.9
【相关文献】
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3.一株长白山野生桦褐孔菌菌株的分离及菌丝生长特性研究
4.一株野生球盖菇的鉴定及其菌丝生物学特性研究初报
5.4个贵州野生花脸香蘑菌株的菌丝体生物学特性研究
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香菇多糖体内抗氧化活性研究
香菇多糖体内抗氧化活性研究
杨溢烁;曾德永;刘艳;张丽香;张智
【期刊名称】《中国食物与营养》
【年(卷),期】2016(022)008
【摘要】目的:探究香菇多糖的体内抗氧化活性.方法:以灌胃生理盐水的小鼠为正常对照组,将香菇多糖药物组分为低、中、高3种剂量组.小鼠在灌胃3w后,由眼眶取血,按照试剂盒要求测定小鼠血清中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力以及丙二醛(MDA)含量.结果:香菇多糖可显著提高小鼠血清中SOD和GSH-Px的活力,同时减少血清中MDA含量.结论:香菇多糖对小鼠体内抗氧化活性的提高具有显著作用.
【总页数】3页(P72-74)
【作者】杨溢烁;曾德永;刘艳;张丽香;张智
【作者单位】东北林业大学林学院,哈尔滨150040;东北林业大学林学院,哈尔滨150040;东北林业大学林学院,哈尔滨150040;东北林业大学林学院,哈尔滨150040;东北林业大学林学院,哈尔滨150040
【正文语种】中文
【相关文献】
1.香菇多糖中半乳糖醛酸的含量测定及抗氧化活性研究 [J], 赵鹤鹏;许秋达;常丹;周鸿立
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3.超声细胞破碎辅助提取江永香菇多糖工艺及其抗氧化活性研究 [J], 王希;朱攀宇;
蒋荣娜;刘燚琳;王宗成
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香菇多糖的化学结构与抗氧化活性分析
香菇多糖的化学结构与抗氧化活性分析作者：魏元来源：《江苏农业科学》2016年第11期摘要：对香菇多糖（Lentinus edodes polysaccharides，LPS）经过离子交换柱层析和凝胶柱层析法得到的2种组分（LPS-1和LPS-2）的化学结构特征进行分析，旨在为香菇多糖的构效关系研究提供依据。
采用高效液相色谱法（HPLC）、气相色谱（GC）、红外光谱（IR）分析等手段对其化学结构特征进行解析，并对其抗氧化活性进行分析。
构成糖分析结果显示，LPS-1单糖组成为鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖，其物质量之比为1.52 ∶2.96 ∶2.91 ∶0.78 ∶1.00 ∶1.35；LPS-2的单糖组成为鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、葡萄糖和半乳糖，其物质量之比为2.91 ∶1.00 ∶1.10 ∶0.20 ∶0.50。
LPS-1和LPS-2均有较强的抗氧化活性，LPS-2更为显著。
结果表明，香菇多糖主要是阿拉伯糖和鼠李糖组成的吡喃型多糖，有较强的抗氧化活性。
关键词：香菇；多糖；化学结构；抗氧化中图分类号： R284.1 文献标志码： A文章编号：1002-1302（2016）11-0305-04香菇（Lentinus edodes）别称花菇、香菌、香蕈、冬菇、香菰，属真菌门（Eumycophyta）侧耳科（Pleurotaceae）香菇属（Lentinus），是世界第二大食用菌。
香菇口味鲜美、营养丰富、富含多种生物活性物质，如多糖、维生素、蛋白质、多元酚、朴菇素、膳食纤维等。
香菇多糖是香菇中最重要的一种生物活性物质，作为一种免疫促进剂，已引起人们广泛的兴趣。
香菇多糖的生物学功能主要有以下几方面：抗氧化、抗衰老、抗肿瘤、免疫调节、抗炎、保肝护肝和降血糖等[1-2]。
有关香菇多糖的药理研究，特别是结构方面的研究已引起国内外学者的高度关注，并成为多糖领域的研究热点。
本研究对香菇多糖（Lentinus edodes polysaccharides，LPS）通过DEAE-52纤维素柱和 G-100 葡聚糖多糖进行分离纯化，分别研究了LPS-1和LPS-2的分子量、单糖组成、键型和抗氧化活性，为香菇多糖的研究开发及利用提供参考。
香菇多糖抗氧化性与抑菌特性的研究
Study on Antioxidative and Antimicrobial Activities
of Lentinan
作者： 汤强[1];杨靖东[1];方玲[1];胡雯[1]
作者机构： [1]芜湖职业技术学院生物学院,安徽芜湖241003
出版物刊名： 安阳工学院学报
页码： 102-106页
年卷期： 2018年 第2期
主题词： 香菇;抗氧化;抑菌活性
摘要：本研究主要从清除超氧阴离子自由基功能、清除羟自由基功能及抗DPPH自由基能力测试来评价香菇胞外多糖抗氧化功能。
在浓度为0.30mg·mL-1条件下,香菇胞外多糖对羟自由基、DDPH自由基的清除率分别为76.23%和62.58%,而如果浓度为0.25mg·mL-1,香菇胞外多
糖能将68.12%的超氧阴离子自由基清除。
实验结论最终表明,其抗氧化能力比较突出。
此外,对
香菇胞外多糖的抑菌活性及其抑菌稳定性进行了研究。
结果证实:酸碱度值如果处在5-9之间,香
菇胞外多糖则全面存在着抑菌活性,其中最强抑菌活性发生在酸碱度值pH=6时。
结果证实,该菌株的酸碱抑菌谱比较广。
而且这种香菇胞外多糖的热稳定性能较好,121℃条件下30min处理,抑菌活性依然不会受到明显影响。
香菇胞外多糖的生化特征良好,有效奠定了其未来的发展与应用基础。
真菌多糖的抗氧化活性研究
真菌多糖的抗氧化活性研究杨岚;邱树毅;卢卫红【摘要】机体在生命活动的氧化代谢过程中不断产生各种活性氧自由基(ROS),ROS容易损伤机体内的组织,从而引发各种各样的疾病.大量的研究表明,大部分从自然界物质中分离获得的多糖类化合物具有抑制脂质过氧化和清除自由基等抗氧化作用.通过本次实验,研究了黑木耳、香菇多糖的抗氧化活性.结果表明:黑木耳多糖、香菇多糖都具有一定的体外抗氧化能力,其中香菇多糖具有较强的清除羟基自由基(·OH)和1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH·)的作用;并且黑木耳、香菇多糖也具有一定的体内抗氧化活性,均能不同程度的提高血清和肝脏中超氧化物歧化酶(SOD)活力以及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力,可以减少肝脏和血清中丙二醛(MDA)含量,增强心脏过氧化物酶(POD)活力以及减少全脑单胺氧化酶(MAO)活力.%The body produces a variety of reactive oxygen species (ROS) in the oxidative metabolism of life activities.ROS can damage tissue in the body and cause several of diseases.A large number of studies proved that a large number of polysaccharides isolated from natural products can scavenge free radicals,inhibit lipid peroxidation,and inhibit linoleic acid oxidation and so on.The antioxidant activities of Auricularia auricula polysaccharide and Letinous edodes polysaccharide were studied in this paper.Auricularia auricula polysaccharide and Letinous edodes polysaccharide have a certainly in vitro and in vivo antioxidant capacity.Letinous edodes polysaccharide has stronger a bility to scavenge DPPH · and hydroxyl radicals.Auricularia auricula polysaccharide and Letinous edodes polysaccharide can increase SOD activity and GSH-Px activity in serum andliver,reduce MDA content in serum and liver,decrease MAO activity of whole brain and increase cardiac POD activity.【期刊名称】《贵州师范大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2017(035)004【总页数】6页(P95-99,119)【关键词】真菌多糖;活性氧自由基;体外抗氧化;体内抗氧化【作者】杨岚;邱树毅;卢卫红【作者单位】贵州大学酿酒与食品工程学院,贵州贵阳550025;哈尔滨工业大学化工与化学学院,黑龙江哈尔滨 150090;贵州大学酿酒与食品工程学院,贵州贵阳550025;哈尔滨工业大学化工与化学学院,黑龙江哈尔滨 150090【正文语种】中文【中图分类】O629.12;Q503Highlights: The body produces a variety of reactive oxygen species (ROS) in the oxidative metabolism of life activities. ROS can damage tissue in the body and cause several of diseases. A large number of studies proved that a large number of polysaccharides isolated from natural products can scavenge free radicals, inhibit lipid peroxidation, and inhibit linoleic acid oxidation and so on. The antioxidant activities of Auricularia auricula polysaccharide and Letinous edodes polysaccharide were studied in this paper. Auricularia auricula polysaccharide and Letinous edodes polysaccharide have a certainly in vitro and in vivo antioxidant capacity.Letinous edodes polysaccharide has stronger ability to scavenge DPPH· and hydroxy l radicals. Auricularia auricula polysaccharide and Letinous edodes polysaccharide can increase SOD activity and GSH-Px activity in serum and liver, reduce MDA content in serum and liver, decrease MAO activity of whole brain and increase cardiac POD activity. 生物体在新陈代谢过程中，会不断地产生各种活性氧自由基(ROS)。
香菇多糖的提取及其抗氧化性和保湿性评价_王玢
选取健康无皮肤病的志愿者 10 名，进行测试。测试方法 为：①确定左右前臂 4 块测试区域，区域面积为 5 cm×5 cm，分 别测试该区域的空白值。②将待测样品涂敷于测试区域，用 量 为 2 mg/cm2。 ③ 使 用 后 15 min、30 min、60 min、90 min、 120 min 进行测试，每块区域测试 5 个点，取平均值。
表 1 正交试验因素水平表
水平
时间/h
因素
料液比
pH 值
温度/℃
1
2
1:3
8
90
2
4
1:5
6
70
3
6
1:7
10
80
1.2.2 多糖含量的测定 香菇多糖采用苯酚－硫酸法[9]测 定。 1.2.3 抗氧化性能评价 采用结晶紫法[10]测香菇多糖对羟基 自由基的抗氧化性。 1.2.4 保湿性能评价 采用体内法和体外法两种方法，测试 香菇多糖的保湿性能，并将其与甘油的保湿性能进行对比。 1.2.4.1 体外法 选用 7.5 cm×7.5 cm 的玻璃板，在上面贴一 层医用透气胶带，香菇多糖按 w＝1%，甘油按 w＝5％配成水 溶液，用移液枪吸取 200 μL，均匀涂敷在透气胶带上，然后将 其放入在干燥器中，放置一定时间（4 h、8 h)后分别称重，计算 保湿率。
2.3 滑菇发酵营养饮料氨基酸含量 将滑菇真菌饮料及发酵
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3讨论
研究表明，滑菇深层发酵饮料与其子实体一样，有着丰富 的营养。必需氨基酸占氨基酸总量的比例也很高，除丰富的氨 基酸成分外，还含有多种维生素和对人体有益的矿物质元索。
香菇菌丝体多糖的化学结构与抗氧化活性分析
香菇菌丝体多糖的化学结构与抗氧化活性分析摘要：对香菇菌丝体多糖(Lentinusedodesmyceliumpolysaccharides，LMPS)的2种组分(LMPS-1和LMPS-2)进行化学结构特征分析，旨为香菇菌丝体多糖的构效关系研究提供依据。
文中利用高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱(GC)、红外光谱(IR)分析等对其化学结构特征进行解析，并测定其抗氧化活性。
构成糖分析结果显示：LMPS1单糖组成为阿拉伯糖、木糖、甘露糖和葡萄糖，其摩尔比为2.5：0.8：1：1.8；LMPS-2的单糖组成为鼠李糖、木糖和葡萄糖，其摩尔比为4.2：1：2.7。
LMPS-1和LMPS-2均有较强的抗氧化活性，LMPS-2更为显著。
香菇菌丝体多糖主要由阿拉伯糖和鼠李糖组成的吡喃型多糖，有较强的抗氧化活性。
关键词：香菇；菌丝体；多糖；化学结构；抗氧化香菇(Lentinusedodes)又称为花菇，属真菌门(Eumycophyta)，侧耳科(Pleurotaceae)，香菇属(Lenti-ns)，是世界第二大食用菌。
香菇口味鲜美，营养丰富，富含多糖、维生素、蛋白质、多元酚、朴菇素、膳食纤维等多种生物活性物质菌丝体多糖是香菇菌丝体中最重要的生物活性物质，作为一种免疫促进剂，已引起人们广泛的兴趣。
菌丝体多糖的生物学功能主要有以下几方面：抗氧化、抗衰老、抗肿瘤、免疫调节、抗炎、保肝护肝和降血糖等作用。
有关香菇菌丝体多糖的药理研究，特别是结构方面的研究已引起国内外学者的高度关注，并成为多糖领域的研究热点。
本研究对香菇菌丝体多糖(LentinusedodesmyceliumPolysaccharides，LMPS)通过DEAE-52纤维素柱和G-100葡聚糖多糖进行分离纯化。
分别研究了LMPS-1和LMPS-2分子质量、单糖组成、键型和抗氧化活性，为香菇菌丝体多糖的研究开发及利用提供参考。
1.两种组分的体外抗氧化活性1.1LMPS-1和LMPS-2对DPPH自由基的清除作用在浓度为200mg/L时，LMPS-1和LMPS-2对DPPH的清除率分别为(13.85±0.69)％和(32.96±1.65)％。
香菇多糖的生物活性及作用机制研究
香菇多糖的生物活性及作用机制研究摘要】香菇为我国传统的著名食用菌，含有多种有效成分，尤其富含香菇多糖（1entinan，简称LNT）。
近些年来研究发现香菇多糖有抗肿瘤、调节免疫功能、抗氧化、抗病毒和降低血糖等多种生理功能。
【关键词】香菇多糖抗肿瘤生物活性作用机制【中图分类号】R28 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2014）22-0127-01香菇(Lentinas edodes)为担子菌亚门担子菌纲侧耳科香菇属真菌，是一种著名的食用菌和药用菌[1]。
传统中医理论认为其味甘性平，健脾益气，扶正祛邪，调和阴阳。
香菇含有多种有效成分，尤其富含香菇多糖（1entinan，简称LNT）。
近些年来研究发现香菇多糖有抗肿瘤、调节免疫功能、抗氧化、抗病毒和降低血糖等多种生理功能。
1 香菇多糖的概述香菇(Lentinas edodes)又称椎耳、香信、冬蒸、厚菇、花菇，为我国传统的著名食用菌。
子实体菌盖直径5-12cm，扁平球形至稍平展，表面菱色、浅褐色、深褐色至深肉桂色，有深色鳞片，而边缘往往鳞片色浅至污白色，有毛状物或絮状物，菌肉白色，稍厚或厚，细密[2]。
香菇是全球第二大人工种植最为普遍的食用菌[3]，世界上最早人工驯化栽培。
香菇营养丰富，味道鲜美，含有十多种氨基酸，包括异亮氨酸、赖氨酸、苯丙氨酸、蛋氨酸、苏氨酸、撷氨酸等7种人体必需的氨基酸，以及维生素B1、B2、D及矿物盐和粗纤维等。
随着分子生物学的发展，多糖在生物合成反应以及在细胞间的识别、受精，胚胎的形成、神经细胞的发育、激素激活、细胞增殖、病毒和细菌感染、肿瘤细胞转移等许多基本生命过程中发挥的重要作用被逐步发现。
近年来研究人员又发现多糖的糖链在分子生物学中具有决定作用，并且还能控制细胞的分裂和分化，调节细胞的生长和衰老，因而多糖的生物活性引起了科研人员的广泛关注。
香菇多糖是研究得较早的多糖之一，它是从香菇的子实体中分离得到的多糖，分子式(C6H10O5)n，分子量约40～80万，是一种重要的免疫调节剂，它通过刺激免疫细胞成熟，分化和增殖，改善宿主机体平衡，达到恢复和提高宿主细胞对淋巴因子、激素和其它生理活性因子的反应性，能够间接达到抗肿瘤的作用。
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贵州农业科学2018,46(3) :15〜20Guizhou Agricultural Sciences[文章编号]1001-3601(2018)03~0086-0015-06 1株野生香菇属菌株的鉴定及其胞内多糖的抗氧化活性伍燕U2,陈艳娟\王柳忠\申利群2,朱华2**(1.兴义民族师范学院，贵州兴义562400; 2.广西民族大学，广西南宁530008)[摘要]为翘鳞香菇资源的进一步开发应用提供科学依据，对采自贵州册亨县分离的野生香菇属CH8-1菌株经P D A平板培养获得菌丝纯培养物，以提取的总D N A为模板扩增其I T S序列，并进行生物特 性培养及形态学鉴定，结果‘明：CH8-1菌株是香蒜属勉鱗香兹（Lerariraws。
最适氮源和碳源为酵母粉和葡萄糖，最适温度为28€，最适p H为6. 0〜7.0,一定量的无机盐M gS04&微量的V B1有助于 该菌生长。
菌丝提取的胞内多糖抗氧化活性明显，其农度为2. 0mg/m L时的总还原力为0.455，D P P H和 寒自由基清除率EC50值分别为0. 21 mg/m L和1.20 mg/m L。
[关键词]翘鳞香菇；鉴定；培养特性；抗氧化活性[中图分类号]S646.1+2 [文献标识码]AIdentification and Antioxidant Activity of Intracellular Polysaccharides of aWild Lentinus squarrosulusWU Yan1'2, CHEN Yanjuan1, WANG Liuzhong1, SHEN Liqun2, ZHU Hua2*(1. X ingyi N orm al University fo r Nationalities 9X in g yi, Guizhou562400 ；2. Guangxi University fo rN ationalities，N anning，Guangxi 530008，China)Abstract ：In order to provide a scientific basis for further exploitation and utilization of Lentinus squarrosulus resources,the authors identified a wild edible fungus from CehengCounty,GuizhouProvince.A pure cultured strain CH8-1 was isolated from the fruiting body by PDA.Genomic DNA was extracted from mycelia，then used as temple for the ITS gene PCR amplification.Then the biological features cultivation and morphological identification were conducted as well.Results：Strain CH8-1 was identified as L.squarrosulus.The best carbon source for the mycelium growth is glucose,the best nitrogen source is yeast extract,temperature is optimal at 28*C,and the optimal pH range is 6. 0 〜7. 0•It is beneficial to mycelium growth of L.squarrosulus by addingtrace inorganic salt MgS04and growth factor VB i.The intracellular polysaccharides extracted from mycelia show significant antioxidant activities,its reducing power is0. 455 and ECs〇values of DPPH free radical scavenging rate and hydroxyl free radical scavenging rate are0.21 mg/mL and 1.2 mg/m L,respectively,when the intracellar polysaccharides concentration is 2.0 mg/mLKey words：Lentinus squarrosulus ^identification；cultivation characteristics；antioxidant activity翅鱗香截（)属担子菌亚门（Basidiomycotina)、层菌纲（Hymenomycetes)、伞 菌目（Agaricales)、多孔菌科（Polyporaceae)、香蘇属 Fr.)[1]真菌。
广泛分布于亚洲、非洲及大 洋洲，在我国主要分布于贵州、四川、云南、湖南、湖 北、海南和福建等地，是一种常见的食用真菌，春 末夏初在阔叶林或混交林倒伏的腐木上均可采集到，煲汤味道鲜美，因需长时间炖煮，老百姓俗称为 “八担柴”。
目前，翘鱗香菇是继香菇(L.ec/o c/^)、贝特香截(L.洁丽香蘇（L.和簇毛香截(L.后研究比较深入的香蘇属食用真菌W，国内研究主要在基础应用方面，如张国广等[4]已人工栽培出翘鱗香菇子实体，余昌霞等[5]对 其菌丝交配类型做了深人的研究，对香菇属物种间 杂交新品种的开发提供了理论基础。
国外不仅在驯化栽培、深层发酵方面的研究较为成熟，且在抑菌、免疫调节、抗氧化、抑制肿瘤和生物修复等药理活性 方面都有涉及，如A H M A D等[6]对翘鱗香菇菌丝的 深层发酵进行了优化，胞外多糖产量可达5. 7 mg/ m L;IS A K A等[7_幻从其发酵液中分离到抑菌活性物 质;B H U N IA等％从子实体热水浸提液中分离得到 具有免疫活性的多糖;M H D等通过给大鼠喂食翘鱗香菇菌丝体热水浸提物后，发现小鼠血浆中抗氧化等指标明显提髙。
国内外研究展示了翘鳞香菇广阔的应用前景，但国内对翘鱗香菇的药理活性如抗氧化、抗肿瘤和 活性物质分离研究甚少，笔者等对云贵髙原采集到的野生翘鱗香菇CH8-1进行分离和鉴定，研究其菌 丝培养特性和抗氧化活性，以期为翘鱗香菇资源的 进一步开发应用提供科学依据。
[收稿日期]2018~01~02[基金项目]广西壮瑶药重点实验室项目[桂科基字（2014)32];贵州省大学生创新创业训练项目（201710666041)>贵州省科技厅联合基金项目（黔科合LH20167035)[作者简介]伍燕(1974_),女，副教授，硕士，从事应用微生物研究。
E-mail:767692523@*通讯作者：朱华(1957_)，男，教授，博士，从事天然药物化学研究。
E-mail:zhuhuagx@• 16 •贵州农业科学Guizhou Agricultural Sciencesi 材料与方法1.1材料和仪器供试菌株采自贵州省册亨县西郊青冈树枯木 上，经分离纯化后的菌种保存于兴义民族师范学院 微生物实验室，编号为CH 8-1。
尼康光学显微镜、Bio~Rad P C R 扩增仪、Bio ~ R ad 凝胶成像仪、博讯髙压蒸汽灭菌锅、精宏电热干 燥鼓风箱、博讯超净工作台、摇床、赛默飞酶标仪等。
T a q 酶、琼脂糖、DNA marker 均购自全式金生 物公司，引物购自华大基因，D N A 提取试剂和PCR 纯化试剂盒购自天根生物公司，D P P H 购自麦克林、 水杨酸等购自国药，测序由上海生工完成。
1.2 方法1.2.1 培养基纪制 P D A 培养基：马铃薯200 g , 葡萄糖20 g ，蛋白胨2 g ,琼脂18 g ,蒸馏水1 L ，pH 自然。
基础培养基:葡萄糖20 g ,尿素2 g ,磷酸二氢 钾1.0 g ，硫酸镁〇. 5 g ，琼脂粉18 g ，蒸馏水1 L 。
灭菌条件均为115'C ，20 min 。
1.2.2 形态学观察及鉴定参照《中国真菌志》第 45卷[11]，观察记录子实体特征，制作临时装片显微 镜观察菌丝和孢子形态，P D A 平板分离观察菌落特 征。
1.2.3 分子生物学操作D N A 提取：在分离纯化 的P D A 平板上刮取长势良好的菌丝0.5 g ,采用改 良的C T A B 法提取基因组DN A [12]。
P C R 扩增通 用引物 ITS ,，5'-TCCGTAGGTGAACCTGCGG -3';it s 4, s ^t c c t c c g c t t a t t g a t a t g c -s ^ 反应体系（50 p L ) : 10 X PCR buffer 5. 0 p L , dNTP 2. 5 jxL ,引物IT S ,和引物ITS 4各 1 p L ,模板1. 0 ；i L ，Taq 酶 0• 5 p L ，ddH 2〇 39 p L 。
PCR 反应 条件:95X ：预变性5 min ;95'C 变性30 s ，55X ：退火 30 s ，72€延伸 50 s ，30 个循环；72X ：延伸 10 min 。
扩增产物在加有核酸染料的1%琼脂糖凝胶中以 120 V 电泳30 min 检测，将产物纯化后转人T 载体导人大肠杆菌中保存。
1.2.4 菌丝生物特性培养条件1) 温度及p H 。
将长势良好的P D A 平板培养菌丝6 m m 直径打孔，接种长势一致的菌饼于PDA培养基上，分别置于18°C 、22'C 、24‘C 、26‘C 、28‘C 和 32'C 恒温培养箱中避光培养7 d ;同方法接种于pH 分别为 4. 0、5. 0、6. 0、7. 0、8. 0 和 9. 0 的 PDA 平板上26'C 恒温避光培养[13]。
2) 碳、氮源。
以基础培养基中20 g 葡萄糖的 含碳量为标准，分别以相等含碳量的可溶性淀粉、蔗糖、麦芽糖、乳糖、葡萄糖、甘油代替基础培养基中的葡萄糖，同时设置不添加碳源的基础培养基为空白对照。
以基础培养基中2 g 尿素的含氮量为标准，分别以相等含氮量的蛋白胨、酵母粉、硝酸铵、硫酸铵、尿素代替基础培养基中的尿素，同时设置不添加氮源的基础培养基为空白对照[13]。