常用液相色谱柱的规范化使用与保养标准操作程序

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常用液相色谱柱使用与保养

常用液相色谱柱使用与保养液相色谱（Liquid Chromatography，简称LC）是一种分离和分析物质的方法，广泛应用于化学、生物化学、环境科学、食品科学等各个领域。

在液相色谱系统中，色谱柱是其中最为重要的组成部分之一，对色谱分离的效果和分析结果有着重要影响。

因此，正确的使用和保养色谱柱是保证色谱实验质量和延长色谱柱寿命的关键。

一、色谱柱的选择1.根据分析需要选择合适的色谱柱类型，如反相、离子交换、凝胶、手性等。

选用的色谱柱应能实现样品分离的目标。

2.考虑色谱柱尺寸，如柱径和柱长。

柱径越小，理论板高度越高，分离效果越好，但同时也容易增大柱后压力。

柱长则决定了分离时间，通常根据样品的复杂程度和实验要求进行选择。

3.考虑色谱柱填充物，如C18、C8、C4等反相填料。

填充物的理化性质不同，会对分离效果产生影响。

根据样品性质和分离目标选择填料。

二、使用色谱柱的注意事项1.在使用前检查色谱柱外观，确保柱壁完好无损，无裂缝或损坏。

同时检查柱头端口是否干净，无污物残留。

2.进行柱前的处理，如样品预处理和溶剂预处理，保证样品的稳定性和纯度，避免对色谱柱产生不利影响。

3.操作时避免剧烈振荡、震动或摇晃色谱柱，以免对柱填料产生机械损伤。

4.在柱温控制装置的帮助下，保持色谱柱运行温度的稳定，以确保分离结果的重复性和再现性。

三、色谱柱的保养1.使用前、使用后和中间暂停使用时需正确保管色谱柱。

使用前，色谱柱应存放在干燥、阴凉的地方，避免阳光直射。

使用后，将色谱柱用保护帽覆盖，防止灰尘、气体和湿气进入柱内。

中间暂停使用时，用适当的主流溶液保养柱床，避免干燥。

保养柱床时需将色谱柱倒放，使柱床保持湿润状态。

2.避免在色谱柱上溢液，以免引起柱床断裂或填料活化。

使用前，尽量将样品溶液过滤或超声处理，避免样品中存在大颗粒杂质。

3.保证洗涤液和贮存液的纯度和质量，避免因杂质和离子引起色谱柱填料的损坏。

对于需要多次使用的色谱柱，洗涤液需要选择与柱填料相容的溶剂进行洗脱。

液相色谱柱安全操作及保养规程

液相色谱柱安全操作及保养规程液相色谱柱是一种常见的分析仪器，在化学、生化、食品、药品、环境等领域得到广泛应用。

因为该分析仪器设备复杂、性能优越、分析精度高，所以在使用时需要注意安全操作和保养规程。

本文将从以下几个方面详细介绍：•操作前准备•操作过程注意事项•操作后的清洗和保养操作前准备在开始操作前，第一步必须检查液相色谱柱的状态，避免因使用中出现损坏等问题影响分析结果。

首先要检查柱罐和柱床是否正常。

若柱床内出现裂缝、变形或渗漏现象，柱就已损坏，不能再继续使用。

其次需要确认流量计、泵、检测器等其他连接设备是否正常，以免造成柱损坏或分析结果失真。

接下来，需要准备相关耗材和溶液，耗材包括固相保护罐、固相萃取柱、色谱柱、纯水、甲醇、乙醇、氨水等。

使用前，要确保各种溶剂都为新开封的纯溶液。

在操作前准备中，还应注意操作手套的使用。

液相色谱柱是高精度分析设备，因此在安全操作中必须佩戴手套，避免因手上油脂、灰尘或细菌等的污染而引起柱床阻塞或色谱杂质的产生。

操作手套应该选用热塑性弹性体材料制作的，手套的外表面需要干爽、无粉、不胶着。

操作手套更换频率应视实际操作情况而定，但至少要每小时更换一次，以保证色谱柱系统的稳定性。

操作过程注意事项在进行液相色谱柱分析前，必须注意以下事项：1. 注入样品时必须注意准确注入样品时必须严格按照固定的容积，并尽可能使样品溶剂与色谱柱中的溶剂相同。

如果溶剂不同，会使分析结果产生偏移和误差。

2. 溶剂配制要准确在制备溶剂时，必须准确控制各浓度和体积，防止出现误差。

为了避免混杂、污染等情况发生，液相色谱柱系统的各项操作必须迅速和准确，尽量避免无意义而又不必要的搅动和震动。

3. 流量、温度要控制恰当液相色谱柱系统，包括液相色谱泵、流量计、检测器、自动采样器等，为了得到可靠数据，必须准确和恰当地控制它们。

流量、温度、进样量等参数的不正确设置，可能会导致实验失误或者测量数据不准确。

流量控制器的精度一般设为0.1%，进样器量程要与所确定体积相吻合，保持恰当的温度，则可以避免柱床挤压和杂质的产生。

液相色谱柱的使用及保养

C18, C18, C18, C18,
phenyl, CN, NH2, Silica C8, phenyl, CN, Silica C8, Silica C4 C18, C8
色谱柱的清洗
对所做的样品要有充分的了解
用对该样品洗脱能力最强的流动相清洗
硅胶柱的一般方法
先用甲醇洗去极性杂质
回收率低，不出峰
“不可逆”吸附固定相过强或流动相过弱非特异性吸附
色谱柱以外的因素（一）
“柱效”问题，不一定是色谱柱问题！
仪器问题：连接不好造成死体积
进样器
检测器
管路，连接口保护柱在线过滤器堵塞
流动相问题：色谱柱未平衡好进样量太大
色谱柱与仪器的联接
影响实验结果好坏的最重要因素
是决定性的步骤
样品预处理常用的方法
高速离心过滤、超滤选择性沉淀衍生反应液-固萃取其他
/ 液-液萃取
Sep-Pak样品处理小柱
样品预处理的过程
去除微粒
过滤
过滤膜/过滤装置
有机(0.5m)/无机(0.45m)
膜片可更换
流速∶1.0 ml/min 纸速∶20 cm/min (用记录仪时，接检测器10mV档) 检测器灵敏度∶0.5-1.0AUFS (用记录仪时) 检测器时间常数∶小于0.2

谱带展宽（ml） =1000×W（cm）/20 （记录仪） =1000×W（min）（工作站）
液相色谱实用技术（二）
样品衍生∶氨基酸分析
PT法 IA CG O方 NS C
R
-
N C H O CO ຫໍສະໝຸດ 2氨基酸异酯硫氢酸苯
S R N H O H C C H NC O

液相色谱柱的使用和维护保养

液相色谱柱的使用和维护保养液相色谱柱是一种广泛使用的分离技术，可用于分离和测定复杂混合物中的组分。

由于液相色谱柱具有精确分离、操作简便、分离效率高等特点，因此，越来越多的实验室都开始使用该技术。

在使用液相色谱柱时，正确的维护保养非常关键。

本文将介绍液相色谱柱的使用方法和维护保养技巧，以便确保您的分离实验能够得到最佳的结果。

一、液相色谱柱的使用1. 准备工作使用液相色谱柱之前，必须先进行预备工作。

这包括：清洗和准备液相色谱柱以免携带有污染物。

准备需要分离和测定的样品。

准备适当的流动相。

流动相必须符合样品的性质。

液相色谱柱的流动相应该是无色的，纯净的水或相应的缓冲液，并具有必要的缓冲能力。

根据柱的尺寸来选择适当的样品注射量。

2. 柱的装配通常情况下，液相色谱的柱是由管状的柱壳、填充柱节、柱端固定件和柱段之间的密封件组成。

在对柱进行装配的时候，对组件应该加强检查以保证每一个元件的质量。

柱被放置在可控压力的色谱装置中，直到达到设定的温度，流动相通过柱床高度。

在样品通过柱床的过程中，要确保流动相的速度恰好足够将所有的组分都分开并在规定的时间内溶出。

3. 分析过程准备工作完成后，可以开始进行样品的分离实验。

在整个过程中，以下措施应予以注意：在样品从样品室进入色谱柱之前，流动相必须在柱中流动。

否则，在注入样品时，将有空气囤积在柱床中，会在透射检测器处产生噪音。

更换液相色谱柱的流动相时需要小心，因为对于一些化学品来说，即使是微量的杂质也会对结果产生影响。

如果发现柱床粘住或困住，不应使用力量来拉动柱子，而应该使用相反方向的流动相，以使样品回到某一个位置，并反向流动一会，这样可以避免样品损坏柱子床。

二、液相色谱柱的维护保养液相色谱分析的成功与否，除了预备工作和分析过程外，还与样品的制备、取样位置以及样品进入液相色谱柱中的流动相的条件等因素有关。

因此，经常做好液相色谱柱的保养工作，可以有效防止柱子损坏，延长其寿命并保证实验结果的准确。

日积月累-常用液相色谱柱的规范化使用与保养标准操作程序.

1 目的规范液相色谱柱的使用与管理；液相色谱柱标准化老化与再生；剖析液相色谱柱常见问题与解决办法。

延长色谱柱使用寿命，降低色谱柱使用成本。

提高分析人员液相色谱柱使用与维护水平。

2 范围本SOP适用于###########使用色谱柱的仪器分析操作人员及相关管理人员。

3 责任本程序由新药研发部组织实施，###########备仪器操作人员具体执行。

4 定义液相色谱柱：指用于液相色谱分离的柱形固定相，由柱管、压帽/卡套、筛板（滤片）、填料、接头等组合而成，可用于液相色谱分析与制备。

色谱柱再生：指色谱柱在非正常情况下，针对异常现象及原因采取的一系列修复补救措施，以提高色谱柱柱效和延长其使用寿命的处理过程。

运载溶剂（Shipping Solvent）：指色谱柱生产厂商在柱出厂测试合格后饱和于色谱柱内的合适溶剂，以利于运输保存，多与保存溶剂相同。

保存条件（Storage Conditions）：指色谱柱生产厂商根据不同柱类型及其色谱柱填料的制备、键合、装填、高压定型、净化干燥等工艺条件的不同要求而特别制定的色谱柱保存前净化饱和的处理程序与储存条件，包括净化程序、净化溶剂和保存溶剂、保存条件。

保存溶剂（Storage Solvent）：用于保存色谱柱并指定了溶剂组成与比例的溶液。

5 程序5.1 液相色谱柱的分类目前，我公司色谱分析涉及到的液相色谱柱主要有6大类，具体详见5.2。

5.2 液相色谱柱的使用与保养（仅列举常用分析柱）5.2.1液相色谱柱的老化处理与使用保养程序新购色谱柱出厂前均采用适合的运载溶剂（Shipping Solvent）饱和，密封，由于运输过程周期较长，柱床容易干涸，所以新柱使用前需重新饱和与老化。

若老化方法不正确或时间不够，极易导致色谱柱在使用较短时间后即产生分离度下降、峰形变差、峰拖尾等柱效降低的情况。

需根据色谱柱不同类型选择不同饱和与老化方法。

1、普通C8及C18反相色谱柱（C8&C18 Reversed-phase chromatography column）：（1）准备新鲜超纯水及色谱级乙腈或甲醇，冲洗色谱仪器系统，保证仪器系统管路干净。

液相保护柱安全操作及保养规程

液相保护柱安全操作及保养规程液相保护柱是一种重要的分析仪器，承担着保护液相色谱柱和延长使用寿命的重要任务。

液相保护柱使用时需要严格遵守安全操作规程和进行定期保养，以确保其正常运行和延长使用寿命。

本文将介绍液相保护柱的安全操作规程和保养规程，旨在提高使用者的安全意识和保护仪器的维护质量。

安全操作规程1. 仪器安装液相保护柱应安装在一个干燥、通风、远离水源和化学品的地方。

在安装液相保护柱时，应确保仪器与色谱柱和检测器之间的连接正确且紧固，以避免连接处泄漏。

2. 操作前的准备在使用液相保护柱前，首先要检查保护柱的状态是否正常。

应检查保护柱是否清洁，有无损坏或磨损，保护柱内部是否存在杂质，并进行必要的清洁。

此外，还应检查保护柱的连接是否紧固，以确保其正常运行。

3. 操作过程在使用液相保护柱时，应注意以下几点：•使用液相保护柱前，应先进行洗脱，以保证样品不会粘附在柱子表面；•液相保护柱要与样品充分接触，可采用多种方法如插管或长针头等；•使用液相保护柱时不要超过其最大流量，以免影响保护柱的使用寿命；•液相保护柱使用一段时间后，应及时更换，以确保保护液相色谱柱的效果。

4. 操作后的处理在使用液相保护柱后，应立即清洗保护柱，以避免保护柱内部的杂质对色谱柱造成污染。

清洗液相保护柱的方法包括：用甲醇、乙醇或水洗，然后用纯水清洗干净并放置在自然通风处待干燥。

保养规程1. 周期性检查液相保护柱在使用一段时间后，应进行常规的检查。

检查内容包括：•检查保护柱连接处是否有泄漏；•检查保护柱是否有磨损或损坏；•检查内部填充物是否存在杂质或缺失；•检查保护柱表面是否清洁。

2. 常规维护液相保护柱在日常使用中，应做好以下几点常规维护：•定期清洗液相保护柱，以保证柱内无杂质或残留物；•定期更换液相保护柱，以确保保护柱的有效期；•定期检查保护柱连接处是否紧固；•避免液相保护柱受到高温、高压、振动或较强的机械冲击，以避免损坏保护柱。

3. 不良情况处理如果发现液相保护柱发生不良情况，如柱子表面出现损伤或污垢、柱子内部出现杂质、连接处泄漏等情况，应立即停止使用，并采取以下处理措施：•清洗和更换液相保护柱，如柱子表面出现损伤或污垢；•检查、清除杂质或更换液相保护柱，如柱子内部存在杂质；•确认连接处是否正确，如连接处泄漏，应及时紧固。

色谱柱维护系统安全操作及保养规程

色谱柱维护系统安全操作及保养规程色谱柱是色谱分析的核心部件，对于任何一种色谱柱维护系统，都需要注意其安全操作和保养规程。

本文就通过对色谱柱维护系统的安全操作和保养规程进行概述，希望能够对相关从业人员有所帮助。

安全操作1. 使用前检查在使用色谱柱前，必须对其进行检查，确保没有受到损坏或者有其他异常情况。

具体需要注意的内容如下：•检查色谱柱的接口是否正确，是否与仪器连接牢固；•检查柱体是否有异味；•检查柱体表面是否晶莹剔透；•检查柱尖是否损坏；•对柱子进行表面清洁后，观察柱子是否有损伤或表面划痕等。

2. 使用时注意在使用色谱柱的过程中，也要注意以下安全操作：•在操作之前要戴好手套、面罩和护目镜等安全装备；•操作前，要熟悉试剂的性质，并对一定会产生危险的试剂进行特别注意；•操作人员必须严格遵守操作规程，确保自己和周围人员的安全；•操作期间禁止抽烟、喝饮料或进食等易造成创伤的行为。

3. 停用后处理停用后的色谱柱，也需要特别处理才能保障安全：•在停用之前，要将流路关闭，把柱子从仪器上拆下来；•在取下柱子后，在空气中晾干4~5个小时，使得柱子干燥，避免受潮；•在存放的时候，避免阳光直接曝晒。

保养规程色谱柱是分析样品的基础设备，在使用过程中，需要在保证其性能的同时，进行正确的保养，以确保其寿命和性能一直处于在稳定的状态。

1. 清洗柱子在使用前后，需要对色谱柱的柱体进行清洗处理。

步骤如下：•先将柱子插入，确保流路紧闭，电压关断；•开启胶管瓶，在样品成功进入废柱处时关闭胶管瓶；•反向从样品向废针冲洗；•开启旋钮，调整反向泵和正向泵的比例为3:7时，开始正向注入清洗溶液洗脱样品，连续运行3个扫描周期长度；•调整正向和反向泵的比例为1:1，清洗溶液在整个柱子内循环1个小时左右（视污染程度而定）；•关闭胶管瓶，将柱子拿出来，用纯水和90%甲醇交替冲洗，保证柱子表面干净；•最后，将柱子放置在胶盖里面干燥。

2. 保养柱子在使用色谱柱一段时间之后，为了保持柱子的性能，在必要的时候还需要对柱子进行保养处理。

液相色谱柱使用与维护

4、故障处理 30分钟，再换100%甲醇0.2流速冲洗10分钟，再换三氯甲烷0.2流速冲洗10分钟，再换异丙醇0.1流速冲洗10分钟，再换三氯甲烷 0.2流速冲洗10分钟，再换100%甲醇0.2流速冲洗10分钟，最后换10%甲醇0.2流速冲洗30 分钟，即可使用。
4、故障处理 4.3、色谱柱前端严重污染或柱头塌陷：先按5.1.2处理，在冲完100%甲醇后停止操作，取下色谱柱，用扳手打开色谱柱，用平头螺丝刀将污染或塌陷部分的填料挖出（注意向柱头滴入100%甲醇，保持柱头湿润状态：同时按前述方法处理色谱柱筛板），再将事先用100%甲醇调成糊状的好的填料填入柱头，多填出一点，然后装好色谱柱，用100% 甲醇冲柱，从0.2流速开始逐渐提升流速至 2.6-3.0（将新填的填料压紧），再把流速
1.3、新柱使用前应在其前端再加一根保护柱。 1.4、按照冲柱的流程用5-10%甲醇或乙腈（与流动相中的有机溶剂一致）先冲洗保护柱（先不接新色谱柱，废液直接排掉）30分钟，再接色谱柱冲洗。 1.5、换上流动相，开始平衡系统，接下来的操作步骤与旧色谱柱相同。
2、色谱柱柱使用过程中的注意事项 2.1、排气时一定要先打开排气阀，即使系统有超压停机的保护功能，但是色谱柱已经被瞬间高压冲塌柱头，基本无法使用。 2.2、使用过程中，要避免高浓度缓冲盐溶液与有机相相遇，容易使缓冲盐溶液中的盐分析出，损害色谱柱。 2.3、使用过程中，要避免气泡进入系统
色谱柱使用与维护
1、新色谱柱使用前的准备 1.1、按照色谱柱的出厂检验报告中的系统条件测定报告中给出的被检测物质，考察色谱柱性能是否与出厂时一致，发现问题及时处理，避免影响样品测定。 1.2、确认色谱柱性能与出厂时一致后，登记色谱柱台账：品牌、尺寸、填料、P/N 号码（对应色谱柱规格）、S/N号码（色谱柱序列号，每根都有唯一的序列号）

HPLC色谱柱使用维护与保养规程

公司标准操作规程编号：STD-SOP－EM－033－00题目液相色谱柱使用维护与保养规程颁发部门分析测试中心制定日期审核日期批准日期分发分析测试中心研发部目的：建立HPLC色谱柱使用、维护与保养规程范围：HPLC色谱柱职责：分析测试中心对本规程的实施负责正文：1.色谱柱的构造色谱柱由柱管、压帽、卡套（密封环）、筛板（滤片）、接头、螺丝等组成。

2.液相色谱柱的使用：色谱柱在使用前，最好进行柱的性能测试，并将结果保存起来，作为今后评价柱性能变化的参考。

但要注意：柱性能可能由于所使用的样品、流动相、柱温等条件的差异而有所不同；另外，在做柱性能测试时是按照色谱柱出厂报告中的条件进行(出厂测试所使用的条件是最佳条件)，只有这样，测得的结果才有可比性。

2.1样品的前处理：2.1.1最好使用流动相溶解样品。

2.1.2使用予处理柱除去样品中的强极性或与柱填料产生不可逆吸附的杂质。

2.1.3使用0.45μm（或0.45μm以下）的过滤膜过滤除去微粒杂质。

2.2流动相的配制：液相色谱是样品组分在柱填料与流动相之间质量交换而达到分离的目的，因此要求流动相具备以下的特点：2.2.1流动相对样品具有一定的溶解能力，保证样品组分不会沉淀在柱中(或长时间保留在柱中)。

2.2.2流动相具有一定惰性，与样品不产生化学反应(特殊情况除外)。

2.2.3流动相的黏度要尽量小，以便在使用较长的分析柱时能得到好的分离效果；同时降低柱压降，延长液体泵的使用寿命(可运用提高温度的方法降低流动相的黏度)。

2.2.4流动相的物化性质要与使用的检测器相适应。

如使用UV检测器，最好使用对紫外吸收较低的溶剂配制。

2.2.5流动相沸点不要太低，否则容易产生气泡，导致实验无法进行。

2.2.6在流动相配制好后，一定要进行脱气。

除去溶解在流动相中的微量气体既有利于检测，还可以防止流动相中的微量氧与样品发生作用。

2.3流动相流速的选择：因柱效是柱中流动相线性流速的函数，使用不同的流速可得到不同的柱效。

液相色谱柱的使用与维护

液相色谱柱的使用与维护1.使用前准备（1）确认实验装置是否正常，检查电气安全及实验条件是否达到要求；（2）检查手套、眼罩、口罩、护目镜、头盔等安全防护用品，并穿戴安全；（3）熟悉使用液相色谱柱研究的内容，编写实验方案；（4）安装相关器材及检查运行情况，如液相色谱泵，移液器，真空调节器等，使其达到正常的使用状态；（5）准备色谱柱、测定样品及色谱溶液等材料，并确认其质量；（6）清洁色谱柱，安装液相色谱柱，确认连接胶管处没有泄漏，柱入口与移液器或洗涤器处接口无漏液，连接胶管处紧固牢靠；（7）置入样品，手部操作，开启移液器及真空调节器，检查运行情况是否正常，确认各进样口及各接口运行正常；（8）准备测定条件，设定运行参数；连接测定仪器，开启泵，恒压泵调节到要求压力；（9）检查样品是否适宜测定，如检测到有杂质，及时清洗液相色谱柱；（10）实验后，对液相色谱柱进行清洗与保养；2.保养及维护（1）液相色谱柱需要定期进行清洗，完成液相色谱实验后，清洗液相色谱柱需要加入适当的溶剂或表面活性剂，并应按照规定的顺序逐级清洗，以去除杂质，保持高效率；同时，需要密切关注泵密封面和胶管是否损坏，如果出现损坏，应及时修复；（2）清洗有杂质的液相色谱柱，可以加入适量的溶剂或表面活性剂，可以有效的清除杂质；（3）紧固液相色谱柱内各部分的连接处，并及时检查消耗的部分，如O环、胶管、密封围边等，并及时更换；（4）应及时检查液相色谱柱的铝箔制动器等部件，如果损坏及时更换，以保证液相色谱柱正常使用；（5）经常检查液相色谱柱运行状态，保持液相色谱柱正常温度和正常压力，并及时发现异常情况，及时清除故障；（6）定期进行专业检查，以确保液相色谱柱状态正常；（7）当色谱柱停用时，应及时移除色谱柱上的样品，并清洗液相色谱柱，避免长时间停用造成部件老化及不良反应；（8）定期维护，将专业技术人员带入实验室，对色谱柱进行定期的检测、维护及升级，保证液相色谱柱状态正常。

液相色谱柱的保护及操作规程

液相色谱柱的保护及操作规程液相色谱柱的保护在液相色谱仪的使用中,保持液相色谱柱的柱效、容量和渗透特性,延长柱子的使用寿命特别紧要。

色谱柱用久后常显现柱压上升,柱效降低,峰形畸变, 保留时间更改等变化,如不实行适当措施,色谱柱将无法再使用,缩短色谱柱的使用寿命,本文从影响色谱柱的外界因素启程,并考虑色谱柱固定相性质的变化,讨论流动相和样品对色谱柱造成损害的因素,探讨保护方法。

1、样品对色谱柱的损害因素杂质堵塞:样品中的微粒同样会使柱子堵塞,样品也应进行过滤处理。

样品组分的不可逆吸附:通常被吸附的组分有蛋白质、醣等,可以实行加装保护柱,或使用适应的溶剂反冲来处理。

常用溶剂有四氢呋喃（适用于溶解有机高聚物和工业样品中的焦油）、高浓度的脲或盐酸胍溶液（使蛋白质改性而洗脱）、高离子强度的磷酸盐缓冲液（pH=7,适合反相柱和离子交换柱,可除去蛋白质和醣等）。

样品组分与固定相反应:这种反应对NH2柱的影响较严重,NH2易和酐、酮形成希夫（Schiff）缩合而削减活性点,使保留时间缩短,因此羰基化合物样品和流动相（如丙酮、乙酸乙酯等）不宜使用NH2柱。

活性点被覆盖:由于固定相吸附样品中的构成或杂质而使活性点被覆盖,在柱压上升的同时保留时间削减,将样品过滤或使用萃取分别柱（对大分子有机物如蛋白质、白细胞等）效果较好。

2、动相对色谱柱的损害因素颗粒杂质:目前广泛使用的柱填料直径多在10um以下,微小的颗粒杂质很简单使柱子发生堵塞,因此使用的溶剂应当过滤,柱子上端接头应当装微孔过滤片以阻拦颗粒物进入柱中。

水溶液中的微生物:以水溶液为流动相时,应防止细菌的生长,五氯酚、叠氮化钠、辛酸等能防止细菌生长。

当用水溶液或有机酸缓冲液保护柱子时,一些厌氧霉菌可能在色谱柱中繁殖,堵塞固定相颗粒间的空隙。

pH值:对硅胶基键合相填料,水溶液pH值不可超过2—7.5这一范围,当pH8时,硅胶会释出生成絮状物堵塞柱子,且难以复原,柱效很快降低,甚至完全失效。

常用液相色谱柱的规范化使用与保养标准操作规程

目的：规范液相色谱柱的使用与管理；液相色谱柱标准化老化与再生；剖析液相色谱柱常见问题与解决办法。

延长色谱柱使用寿命，降低色谱柱使用成本。

提高分析人员液相色谱柱使用与维护水平。

范围：适用于使用高效液相色谱仪的仪器分析操作人员及相关管理人员。

责任：设备员、液相操作人员、质控主管、质量管理部经理、质量受权人。

内容：1.定义液相色谱柱：指用于液相色谱分离的柱形固定相，由柱管、压帽/卡套、筛板（滤片）、填料、接头等组合而成，可用于液相色谱分析与制备。

色谱柱再生：指色谱柱在非正常情况下，针对异常现象及原因采取的一系列修复补救措施，以提高色谱柱柱效和延长其使用寿命的处理过程。

运载溶剂：指色谱柱生产厂商在柱出厂测试合格后饱和于色谱柱内的合适溶剂，以利于运输保存，多与保存溶剂相同。

保存条件：指色谱柱生产厂商根据不同柱类型及其色谱柱填料的制备、键合、装填、高压定型、净化干燥等工艺条件的不同要求而特别制定的色谱柱保存前净化饱和的处理程序与储存条件，包括净化程序、净化溶剂和保存溶剂、保存条件。

保存溶剂：用于保存色谱柱并指定了溶剂组成与比例的溶液。

反相色谱柱：以键合非极性基团的载体为填充剂填充而成的色谱柱。

常见的载体有硅胶、聚合物复合硅胶和聚合物等。

常用的填充剂有十八烷基硅烷键合硅胶、辛基硅烷键合硅胶和苯基键合硅胶等。

正相色谱柱：用硅胶填充剂，或键合极性基团的硅胶填充而成的色谱柱，常见的填充剂有硅胶、氨基键合硅胶和氰基键合硅胶等。

氨基柱（-NH2）：可以同时用于正相条件和反相条件，但多用于正相色谱条件。

使用时需注意，正相反相交替使用时必需用异丙醇过度，保证柱保存溶剂与流动相互溶。

[氨基柱出厂保存溶剂多用正相溶剂，例如：正己烷-乙腈（99：1）]。

2.液相色谱柱的使用及保养普通C8及C8反相色谱柱的老化处理与使用保养程序新购色谱柱出厂前均采用适合的运载溶剂饱和，密封，由于运输过程周期较长，柱床容易干涸，所以新柱使用前需重新饱和与老化。

液相色谱仪色谱柱的使用及保养(PPT课件)

除HP外，不同公司产品，其接头不同。处理不当时，会造成：
色谱峰展宽（死体积）使柱效下降、或渗漏

解决办法：
自制相应的转换接头
使用“通用”型接头（锥箍及螺母）
这种锥箍在不锈钢管上是活动的，因此可以换接不同
的色谱系统及色谱柱。从Phase Separations公司能得到一些PEEK工程塑料的接头，可用在所有类型的色谱柱上的。
柱效低

为什么柱效低
色谱柱被污染过滤片部分堵塞样品、流动相或密封垫的细小颗粒造成的堵塞色谱柱内的死体积流动相pH值及组成不合适造成固定相流失流速急剧变化造成固定相物理损坏机械震动造成固定相产生裂缝柱床收缩或干枯
重复性差、回收率低

实验的重复性差
色谱柱被污染流动相pH值及组成不合适造成键合相流失样品溶剂不同或样品本身不稳定
样品稳定性不好
方法的开发不好缓冲液的pH值不合适缓冲液的缓冲能力不足
液相色谱实用技术（二）
流动相及样品的预处理
液相色谱对流动相的要求

除色谱柱对流动相对的要求外，还有∶
与检测器匹配脱气避免卤素离子（不锈钢系统）溶剂的粘度

流动相的脱气

流动相脱气的目的
使色谱泵的输液准确输液均匀准确，并且脉动减小保留时间及色谱峰面积的重现性提高提高检测的性能防止气泡引起的尖峰基线稳定，信噪比增加溶剂的紫外吸收本底降低保护色谱柱减少死体积防止填料的氧化

可更换的消耗品
更换滤芯，
更换垫圈，
保护柱
可避免化学污染。多数保护柱影响到整个色谱柱的柱效，特别是在用微柱时保护柱的种类

常用液相色谱柱使用与维护保养

常用液相色谱柱使用与维护保养液相色谱柱是一种重要的分析仪器，在化学、药物研发、环境科学等领域广泛应用。

正确的使用和维护保养可以延长色谱柱的寿命，提高色谱分离的效果。

一、使用液相色谱柱的注意事项1.选择合适的柱使用液相色谱柱前，需要根据分析目标和样品性质选择适合的柱型和填料。

常用的柱型有反相柱、离子交换柱、正相柱等。

不同的柱具有不同的分离机理和性能，选择合适的柱可以提高分离效果。

2.准备好适当的溶剂系统液相色谱的溶剂系统通常由溶剂A和溶剂B构成。

在使用液相色谱柱之前，需要准备好适当的溶剂系统，并将溶剂通过泵送到色谱柱中。

溶剂的选择应根据柱和样品性质来确定，通常要尽量避免对柱产生腐蚀或损害的溶剂。

3.校准柱的流速在使用液相色谱柱之前，需要对柱进行流速校准。

根据柱的规格和品牌，确定适当的流速范围。

过高或过低的流速都会影响分离效果和柱的寿命。

通常，可以通过控制泵的流速和封堵时间来调整柱的流速。

4.准备样品在使用液相色谱柱进行分析之前，需要准备好样品。

样品可以是纯净物质，也可以是复杂的混合物。

样品的准备和预处理会影响分离效果和柱的寿命。

合适的样品准备方法包括稀释、过滤、目标成分的预处理等。

5.正确设置色谱仪的条件在使用液相色谱柱之前，需要根据柱的特性和样品的性质，正确设置色谱仪的条件。

包括流速、柱温、检测器、梯度和等时并行等。

设置合适的条件可以提高柱的寿命和分离效果。

二、液相色谱柱维护保养1.定期保养色谱柱为了保证液相色谱柱的寿命和分离效果，需要定期进行柱的保养。

在每次使用完柱后，需要冲洗柱，将样品和残留物彻底清除。

冲洗柱时可以使用适当的溶剂或清洗液，根据需要选择正向或反向洗涤。

一般推荐用高纯度的有机溶剂冲洗柱。

2.避免柱的过载和超压过载和超压是液相色谱柱常见的问题。

过高的样品浓度或过高的流速都可能导致浓度过载，产生色谱峰畸变或柱堵塞。

超压则会导致柱的损坏或泄漏。

需要根据柱的规格和样品的性质，控制样品浓度和流速，避免过载和超压。

常用液相色谱柱使用与维护保养

常用液相色谱柱使用与维护保养液相色谱柱是分离和分析中常用的仪器配件之一，它的使用和维护保养对于实验结果的准确性和可靠性有着至关重要的作用。

本文将介绍常用液相色谱柱的使用和维护保养方法。

一、液相色谱柱的使用方法1.准备工作：在使用前，需要对液相色谱柱进行准备工作。

首先，检查柱的外观是否完好无损，如果发现任何损坏或污染，应立即更换。

其次，检查柱装置是否牢固，连接是否紧密。

最后，将固定相和移动相装入柱中，确保固定相充分均匀地填充在柱内。

2.柱的条件调节：根据实验需要，调节液相色谱柱的柱温、流速和柱压等参数。

在调节柱温时，应注意避免温度过高或过低对柱的损害。

调节流速时，应根据样品性质和分离效果选择合适的流速。

控制柱压时，要确保柱内压力稳定在可接受范围内，避免超过柱的承压能力。

3.样品进样：将待测样品注入进样口或进样器中，注意避免空气进入柱，避免对柱的污染。

可以选择外部进样或直接进样的方法，具体方法根据实验要求和样品性质进行选择。

4.运行柱：在启动液相色谱仪前，先将柱进行预冲洗。

预洗液可以选择与移动相相同的溶剂。

启动液相色谱仪后，根据实验要求设定好运行条件，开始进行实验。

在实验过程中，要及时观察色谱图的变化，根据实验需要调节柱温、流速等参数。

5.柱的保存：在柱使用完毕后，将固定相充分冲洗干净，保证柱内固定相的干燥和保存。

然后，将柱装入保护柱架中，避免碰撞和损坏。

柱的保管环境要保持清洁、干燥、避光和稳定的温度。

二、液相色谱柱的维护保养方法1.柱的清洗：在使用液相色谱柱之前，需要先清洗柱以去除可能存在的污染物。

清洗方法包括预洗和后洗。

预洗可以选择与移动相相同的溶剂，将溶剂通过柱时，将固定相表面的杂质冲洗掉。

后洗可以选择与前一个样品不同的溶剂，将固定相和样品残留物进行清洗。

2.避免柱的干燥：柱在使用过程中，应尽量避免柱的干燥，因为柱的干燥会对固定相造成损害。

在柱停用时，应及时用溶剂进行冲洗并封存起来，以保持柱内的湿润状态。

液相色谱系列产品安全操作及保养规程

液相色谱系列产品安全操作及保养规程前言液相色谱技术在化学、生物、医药、环境等多个领域广泛应用。

为了确保液相色谱系列产品的正常使用和维护，保证用户的人身安全和实验室的设备安全，本文整理了针对液相色谱系列产品的安全操作和保养规程，希望可以为广大用户提供参考。

安全操作规程1. 实验前准备在进行实验前，应具备相应的理论和实验知识，并对所需仪器设备进行检查和准备。

在操作前，应先仔细阅读并熟悉仪器使用说明书和技术参数，按照操作步骤正确进行实验。

2. 液相色谱柱的使用与保养2.1 柱的安装在安装柱时，应先检查柱底接头是否清洁，并在所使用的连接器上加装垫圈，以防止泄漏。

连接器的紧固力应适当，不宜过度，以免损坏柱和连接器。

2.2 使用条件使用柱时，应确保流动相符合柱的使用要求，且使用寿命未过时方可使用。

当柱使用后，需要及时停止柱内的流动相，防止样品残留及堆积。

2.3 柱的保养使用完毕后，应及时清洗柱和连接器，并用纯净水和乙醇将柱内残留液体冲洗干净，以保证柱的使用寿命和准确性。

3. 液相色谱仪的使用与保养3.1 操作前准备使用液相色谱仪之前，应先检查仪器是否连接正确，并按照使用说明书进行操作。

在操作之前，应先开机预热，并进行系统检查，以保证仪器的正常工作。

3.2 制备液相色谱流动相溶液制备液相色谱流动相溶液时，需按照操作说明书进行溶液的配制。

切忌在操作过程中直接触碰有毒腐蚀性液体或固体，并戴上适当的防护用品。

3.3 液相色谱柱的更换液相色谱柱的更换需要在安全门关闭状态下进行。

当柱更换完成之后，需要清洗柱，以保证柱内液体的完全更换，防止混杂。

3.4 保养与维护在使用过程中，应及时对仪器进行保养与维护，例如及时更换气源过滤器，检查压力表和流量计的准确性等，以保证仪器的正常工作状态和寿命。

4. 样品制备与储存4.1 样品制备在制备样品时，应遵守实验室安全规定，戴上适当的防护用品。

切勿使用有毒、易燃、易爆等危险品进行制备，并按照操作说明书进行操作，避免产生有害气体和对人体造成伤害的高温等物质。

月旭液相色谱柱安全操作及保养规程

月旭液相色谱柱安全操作及保养规程月旭液相色谱柱是一种常见的实验室仪器，它广泛应用于药物分析、生命科学和环境保护等领域。

在使用月旭液相色谱柱时，正确的操作和保养至关重要，这不仅可以提高实验结果的准确性和可靠性，还可以延长液相色谱柱的使用寿命。

本文将介绍月旭液相色谱柱的安全操作和保养规程。

安全操作1. 压力限制液相色谱柱在操作时会产生高压，因此必须确保操作过程中压力始终处于安全范围内。

不同型号的液相色谱柱压力限制不同，应严格按照仪器使用说明书上的指示进行操作，不得超过压力限制值。

此外，当压力突然升高时，应立即停止操作并进行检查。

2. 操作前检查在操作前，应检查柱子和接头的密封性。

如果柱子和接头的密封不良，将导致流体泄漏和柱子的破裂，从而对操作人员和仪器造成伤害。

因此，应定期检查柱子和接头的密封性，并在发现问题时及时更换。

3. 操作时的防护措施在使用月旭液相色谱柱时，应遵守实验室的安全操作规程。

操作人员应正确穿戴实验室安全防护用品，如实验室大衣、护目镜、手套等。

4. 操作结束后的处理操作结束后，应按照实验室的废物处理规程处理废液和废料。

同时，应关闭色谱柱，并按照操作手册上的指示进行保养。

保养规程1. 柱子储存月旭液相色谱柱应在常温下储存，并保存在干燥通风的地方。

柱子不得存放在高温和高湿的环境中。

2. 定期检查和保养在使用液相色谱柱过程中，应定期进行检查和保养。

首先，检查并清洗柱子表面，以确保表面的洁净和光滑。

其次，检查紫外可见检测器和泵的运行情况，确认设备的正常运行。

如果发现设备不正常，则应立即停止使用并进行维护。

3. 液相色谱柱的清洗清洗液相色谱柱的方法主要包括用纯水冲洗、以及使用醇、甲醛等溶液进行反向冲洗。

清洗时应避免使用强酸或强碱。

清洗后，应将色谱柱空转数小时，以便将水分和其他残留物完全清除。

4. 更换液相色谱柱液相色谱柱随着使用时间的增加和寿命的结束，应定期更换。

在更换柱子时，应按照操作手册上的指示进行操作。

色谱柱的使用和维护方法及操作规程

色谱柱的使用和维护方法及操作规程色谱是一种分别分析手段，分别是核心，因此担负分别作用的色谱柱是色谱系统的心脏。

对色谱柱的要求是柱效高、选择性好，分析速度快等。

当然，色谱柱的正确使用和维护特别紧要，稍有不慎就会降低柱效、缩短使用寿命甚至损坏。

在色谱操作过程中，需要注意下列问题，以维护色谱柱。

1、避开压力和温度的急剧变化及任何机械震动。

温度的蓦地变化或者使色谱柱从高处掉下都会影响柱内的填充情形；柱压的蓦地上升或降低也会冲动柱内填料，因此在调整流速时应当缓慢进行，在阀进样时阀的转动不能过缓。

2、应渐渐更改溶剂的构成，特别是反相色谱中，不应直接从有机溶剂更改为全部是水，反之亦然，流动相使用前必需经脱气和过滤处理。

3、一般说来色谱柱不能反冲，只有生产者指明该柱可以反冲时，才可以反冲除去留在柱头的杂质。

否则反冲会快速降低柱效。

4、选择使用适合的流动相（尤其是pH），以避开固定相被破坏。

有时可以在进样器前面连接一预柱，分析柱是键合硅胶时，预柱为硅胶，可使流动相在进入分析柱之前预先被硅胶“饱和”，避开分析柱中的硅胶基质被溶解，压力上升是需要更换预柱的信号。

5、避开将基质多而杂的样品尤其是生物样品直接注入柱内，需要对样品进行预处理或者在进样器和色谱柱之间连接一保护柱。

保护柱一般是填有相像固定相的短柱。

保护柱可以而且应当常常更换。

6、常常用强溶剂冲洗色谱柱，清除保留在柱内的杂质。

在进行清洗时，对流路系统中流动相的置换应以相混溶的溶剂渐渐过渡，每种流动相的体积应是柱体积的20倍左右，即常规分析需要50～75ml。

7、避开使用高粘度的溶剂作为流动相；假如使用极性或离子性的缓冲溶液作流动相，应在试验完毕柱子冲洗干净。

8、进样样品要提纯。

9、严格掌控进样量，不要超载。

10、每天分析测定结束后，都要用适当的溶剂来清洗柱，好用洗脱本领强的洗脱液冲洗，例如ODS柱宜用甲醇冲洗至基线平衡。

当接受盐缓冲溶液作流动相时，使用完后应用无盐流动相冲洗。

12个液相色谱柱的使用和维护要点

12个液相色谱柱的使用和维护要点液相色谱仪的日常维护与注意事项一、日常维护：1.定期清洗单向阀：将单向阀卸下，一般先用纯洁水超声10分钟，然后用异丙醇超声，10分钟；也可直接用异丙醇超声10分钟。

2.定期清洗吸滤头：将吸滤头卸下，一般先用纯洁水超声10分钟，然后用异丙醇超声10分钟；也可直接用异丙醇超声10分钟。

3.定期冲洗检测池：把色谱柱卸下，在流速1.0ml/min的状态下先用纯洁水冲洗30分钟，然后再用30%磷酸（色谱级）冲洗30分钟左右，再用超纯水冲洗至流出液为中性，最后用甲醇冲洗，待用。

二、注意事项：1.开始进样前30分钟开氘灯即可，节省灯的能量和使用时间。

2.流动相的使用和注意事项：①所用流动相必须预先滤过和脱气，流动相一般贮存于玻璃不锈钢容器内。

贮存容器肯定要盖严，防止溶剂挥发引起构成变更。

磷酸盐、乙酸盐缓冲液很易长霉，应尽量新鲜配制使用，不要长期贮存。

容器应定期清洗，特别是盛水、缓冲液和混合溶液的瓶子，以除去底部的杂质沉淀和可能生长的微生物。

②配制流动相用水需为娃哈哈牌纯洁水或经超声过滤后的纯化水，流动相配制好后先用直径为5cm，孔径为0.45ｕm的滤膜，通过沙芯过滤器的过滤，然后在超声仪上超声。

③不得将装流动相的容器直接放置与超声仪内，需放与筛网上进行超声。

3.六通阀的使用和维护注意事项：①样品溶液进样前必须用滤膜过滤，以削减微粒对进样阀的磨损。

②转动阀芯时不能太慢，更不能停留在中心位置，否则流动相受阻，使泵内压力剧增，甚至超出泵的最大压力；再转到进样位时，过高的压力将使柱头损坏。

③为防止缓冲盐和样品残留在进样阀中，每次分析结束后应冲洗进样阀。

通常可用水冲洗，或先用能溶解样品的溶剂冲洗，再用水冲洗。

4.色谱柱柱压上升的重要因素：①LC—10AT/20AT/10ATPlus泵的单向阀堵塞。

②色谱柱的入口筛板堵塞。

③吸滤头堵塞。

④PEEK管接口处堵塞。

5.色谱柱柱压不稳的因素：①泵内有空气。