三七有效成分的提取方法和含量测定研究
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三七有效成分的提取方法和含量测定研究
摘要】近年来对三七有效成分的提取方法研究较多,有传统的,也有现代的,
本文就这些提取方法和含量测定方法做一综述,对三七的提取方法和含量测定有
一个更进一步的认识。
【关键词】三七皂苷提取含量测定
【Abstract】 In resent years, there are many researches about methods of extracting effective components of Panax notoginseng. Some methods are traditional, and some are modern, this paper is a summarize on the extraction method and the content determination methods, the extraction method and panax notoginseng content determination have a further understanding.
【Key words】 Panax notoginseng Ginsenosides extraction content determination 三七为五加科植物三七Panax notoginseng(Burk.)F.H.Chen的干燥根及茎。
具有散瘀止血,消肿定痛的功用。
三七主要有效成分为三七皂苷类,三七药材在
单方、复方及中成药中广泛应用,对其提取工艺也有多方面的研究。
其提取方法
中醇提优于水提,且回流法优于渗漉法和浸渍法[1]。
但对三七提取工艺仍不够系统。
本文就三七有效成分的提取和含量测定做一小小的总结
一三七中有效成分的提取方法
1.醇提
袁旭江等[2]在醇提醇沉实验研究中,得出最佳提取工艺为用7倍量的70%乙
醇提取2次,每次2h为最佳提取方法,此时得到的人参皂苷含量较高、干固物
含量较低,并且在实际生产中可适当节省溶剂、缩短时间和降低成本。
2.水煎煮法[3]
煎煮法是我国最早使用的传统提取方法。
操作时将中药粗粉放在适当的容器
中加水浸过药面,充分浸泡后,直火或蒸气加热煮沸的方法。
3.浸渍法
浸渍法是简便而最常用的一种浸出方法。
浸渍法尤其适合于有效成分遇热易
挥发和易破坏的药材。
中国药典应用的三七提取方法是冷浸法,区洁雯[4]经过试
验得出15倍量的水冷浸24h的三七叶皂苷含量最高,且总皂苷收率最高。
4.渗漉法
渗漉法是将适度粉碎的药材置渗漉筒中,由上部不断添加溶剂,溶剂渗过药
材层向下流动过程中浸出药材成分的方法。
渗漉法属于动态浸出方法,溶剂利用
率高,有效成分浸出完全,可直接收集浸出液。
闰光军[5]实验研究得出最优工艺:用三七中粉(过20目筛),15倍量的75%乙醇,渗漉速度为5mL/min进行提取,
三七总皂苷含量平均为10.25%,提取率为93.1%。
5.回流提取法
回流提取法为两种,一种是回流热浸法:是在应用乙醇等易挥发的有机溶剂
进行加热提取有效成分时,为了减少溶剂的消耗,提高提取效率而采用的提取方法;另一种是循环回流冷浸法:采用少量的溶媒,通过连续循环回流进行提取,
使药物有效成分充分提取(即索式提取法)。
樊钰虎[6]得出三七醇回流提取的最佳
工艺条件为:药材加50%乙醇浸泡40min,加醇量为药材的8倍量,回流2次,
每次2h。
6.超声提取
高春波[7]采用超声提取方法,称取三七粗粉20g,经正交选择,用75%的乙
醇超声提取三次,每次2h,得出最佳工艺。
7.超声复合酶法
周琳[8]在实验中确定的最佳提取工艺:在pH为4.5,酶解温度为50℃,酶解时间为2.5h条件下,纤维素酶用量为15U/g(生药),果胶酶用量为140U/g(生药),超声时间为90min,加水量为8倍量。
所得三七提取液中总皂苷的含量为10.33%,提取物得率为35.17%。
8.微波辅助萃取法
微波萃取利用高频电磁波穿萃取媒质,到达被萃取物料的内部,微波能迅速
转化为热能使细胞内部温度快速上升,细胞内部压力超过细胞壁承受能力,细胞
破裂,细胞内有效成分自由流出的方法
9.酶法提取
酶法是通过加入某些特定的酶,使包裹于植物细胞内的有效成分转移到溶剂中。
可以采用纤维素酶解提取三七中有效成分,酶法提取技术同时也存在着一定的
局限性。
酶法提取对实验条件要求较高,为使酶发挥最大作用,需先通过实验确
定最佳温度、pH值及最佳提取时间等,还需要考虑酶的浓度、底物的浓度、抑制剂、激动剂等对提取物的影响,以及酶对植物中其它成分、药效和毒性的影响。
10.加速溶剂提取法
加速溶剂提取法是在密闭容器内,通过升高压力使提取溶剂的沸点升高,使
得提取过程可以在高于正常溶剂沸点的温度。
具有提取时间短、溶剂消耗少、提
取效率高、操作模式多样化以及操作过程自动化等诸多优点,李鹏[9]对三七皂苷
类成分提取的最佳条件为以甲醇为溶剂,药材粒径为0.3~0.45mm,提取温度150℃,提取压力6.895MPa,提取15min,提取1次。
11.内部沸腾法
内部沸腾提取法是先用一定浓度的乙醇对提取物料进行解吸一定时间,然后
倒入一定量高于乙醇溶液沸点的热水,达到提取目的。
李春玲等[10]采用减压内
部沸腾法对三七原料中的总皂苷成分进行了提取研究,通过提取过程中的解吸剂(乙醇浓度)、乙醇用量、提取剂(水)的温度及其用量、提取时间的单因素实验,获
得了最佳提取参数:物料提取两次,每一次提取中,解吸剂乙醇浓度为70%,解
吸剂用量与物料的比例为4:5,料液比为1:10,在45℃的温度下提取4min。
内部
沸腾法与传统法相比,提取时间缩短了20余倍,耗醇量也降低了,三七总皂苷
的得率和含量都提高了,特别是对于热稳定性较差的人参皂苷Rbl来说,通过减
压内部沸腾法低温提取,其含量提高了9.2%。
这说明,减压低温提取时有利于
三七皂苷的提取。
二三七有效成分的含量测定方法
1.分光光度法
测定总皂苷的含量常用分光光度法。
样品以冰乙酸(含5%香荚兰醛)和高氯酸
的混合液在70℃热水浴中显色(蓝紫色),再加入冰乙酸定容至适量体积,于
560nm波长测定吸收度,依标准曲线计算含量。
因为三七皂苷中含有甙元的脂环
结构所以能够显色。
但测定的专属性不强。
2.薄层层析法
一般是用薄层层析分离各组分,分离后色谱用荧光等方法定位。
刮下相应的
斑点,洗脱成分,再用分光光度法测定含量。
由于皂甙极性大,结构类似,分离
困难.很难在薄层层析板上完全地分离各组分,尤其是三七皂甙Rl和人参皂甙Re,人参皂甙Rbl和Rb2,斑点往往有交叉,导致测定结果偏高。
3.高效液相法
高效液相色谱用于三七皂甙的分析测定,方法精确、灵敏,回收率高,结果
准确、可靠,重现性好,分析时间短,是目前优先发展的方法。
4.毛细管电泳法
采用胶束毛细管电色谱法测定三七皂苷类成分,具有样品前处理简单,操作
简便,方法稳定,柱效较高,可同时测定几种成分,所得色谱图信息丰富等优点,值得推广和使用。
三结论
在这些提取方法中,煎煮法、浸渍法、渗漉法是传统的中药提取方法,虽然
方法较简单,但是比较耗时,且得率不高。
超声法、超声复合酶法、微博辅助萃
取法、酶法、加速溶剂提取法、内部沸腾法这几种方法是随着科技进步而发展起
来的现代提取方法,方法新颖,能大大地缩短提取时间,得率较高,且不易破坏
其中的有效成分。
在对三七有效成分的提取中,乙醇提取方法是目前最成熟和最
广泛应用的方法,在实际生产中也应用最多。
但是现代提取方法应该受到重视,
虽然有些方法工艺还不是很成熟,需要进一步的研究。
但我们可以利用现代方法
的优点与传统提取工艺相结合,得到更好的提取工艺,使三七的提取工艺日趋完美。
三七有效成分的含量测定目前应用最广的是HPLC法,毛细管电色谱法也会
被广泛地应用于皂苷的分离测定中。
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