Britton-Robinson缓冲溶液
【答疑解惑】溶解度测定搅拌一下就完事了？美国药典通则告诉你正确的测定方法!
美国药典（USP）将增加一个新的通则<1236>Solubility Measurements。这一新的章节概述了与溶解度测定相关的概念和方程，还简要介绍了用于评估药物溶解度的典型实验方法，并讨论了溶解度的测定方法，以获得生物相关的用于人和兽药产品的特定物种的溶解度。一起看下专业人士的解读吧。
溶解度可以用质量摩尔浓度、摩尔分数、摩尔比、重量/体积比、重量/重量比等浓度单位表示。
准确测定药物的水溶性对于理解药物制剂的质量控制和药物传递问题是非常重要的，受药物物理化学性质（例如表面积、颗粒大小、晶型）、介质的性质（例如pH、极性、表面张力、添加表面活性剂、助溶剂、盐）、以及溶解度测定参数的控制（例如温度、时间、搅拌法）等因素的影响。在溶解度测定中控制这些因素是获得准确、可靠的物质平衡溶解度的关键。
溶解需要胶束的形成。在CMC以下增加表面活性剂，会使表面活性剂在溶剂中溶解，没有发生溶解度增加。在CMC之上，溶解度呈线性增加。这种线性增加的斜率表明胶束的溶解效率。
5、络合剂的影响络合剂可与低溶解度物质形成络合物，从而提高其溶解度。不管配体和溶质在这些络合物中的比例如何（例如，1:1、2:1、3:1等等），随着络合剂浓度的增加，溶解度将呈线性增加。这与表面活性剂的溶解度非常相似，但不存在所需的络合剂的最小浓度。具有高稳定性常数的络合物可以紧密结合溶质，从而提高溶液稳定性。环糊精常被用来与药物形成络合物来提高溶解度，但是环糊精是非常亲水的，具有很高的分子量（大于970g/mol），并且不容易渗透到组织中。因此，强结合的环糊精络合物可能会延缓药物的传递，因为只有未结合的药物才能穿透组织。
本章将首先讨论与溶解度测定有关的概念和方程。理解这些关系是准确评估溶解度的基础。接下来将简要介绍用于评估药物溶解度的典型实验方法。最后，讨论了溶解度测量以获得生物相关的溶解度（人用产品）和物种依赖性溶解度（兽用产品）。
共振瑞利散射光谱法测定片剂、人体尿液和血浆中培氟沙星的含量
共振瑞利散射光谱法测定片剂、人体尿液和血浆中培氟沙星的含量韩权;王媚;杨晓慧;杨娜【摘要】Objective To establish a resonance rayleigh scattering method to determine pefloxacin in tablets,human urine and plasma. Methods In pH 4.8～5.9 Britton-Robinson buffer solution, pefloxacin can react with Co2+ to form a chelated cation, but its resonance rayleigh scattering (RRS) was very weak. Significant enhancement of RRS intensity was observed when the chelated cation further reacts with Congo Red to form an ion association complexe showing three scattering peaks at 278, 380 and 560nm respectively. The detection wavelength was 380nm.Results The calibration curve was linear in the range of 0.133～3.33μg/mL for pefloxacin (r=0.9993). The detection limit is 26.4ng/mL. Conclusion The method, which is simple, fast and selective, can be used for the determination of pefloxacin in tablet, human urine and plasma.%目的建立测定片剂、人体尿液和血浆中的培氟沙星含量的共振瑞利散射光谱方法.方法在pH4.8～5.9 Britton-Robinson缓冲溶液中,培氟沙星(PEFX)可与钴(Ⅱ)反应形成配阳离子,其共振瑞利散射(RRS)十分微弱,但当该配阳离子进一步与酸性染料刚果红(CR)阴离子反应形成三元离子缔合物时,RRS显著增强,3个散射峰别位于278、380和560nm,以380nm为测定波长.结果线性范围为0.133～3.33μg/mL(r=0.9993),检出限(3σ)为26.4ng/mL.结论方法简单、快速、并有良好的选择性,可用于片剂、人体尿液和血清中培氟沙星的测定.【期刊名称】《中国抗生素杂志》【年(卷),期】2011(036)005【总页数】4页(P366-369)【关键词】培氟沙星;Co2+;刚果红;共振瑞利散射【作者】韩权;王媚;杨晓慧;杨娜【作者单位】西安文理学院化学与化学工程系,西安,710065;陕西师范大学化学与材料科学学院,西安,710062;陕西师范大学化学与材料科学学院,西安,710062;西安文理学院化学与化学工程系,西安,710065;陕西师范大学化学与材料科学学院,西安,710062【正文语种】中文【中图分类】O657.1培氟沙星(Pefloxacin，PEFX）是第三代喹诺酮类抗菌药物，主要作用于细菌细胞DNA回旋酶，干扰细菌DNA的合成，使细菌死亡，对泌尿生殖系统感染、肠胃道感染、伤寒、皮肤软组织感染具有良好的疗效。
石墨烯修饰的电极对对氨基苯酚和对乙酰氨基酚进行同时测定
石墨烯修饰的电极对对氨基苯酚和对乙酰氨基酚进行同时测定宋海燕;倪永年【摘要】利用石墨烯修饰的玻碳电极采用微分脉冲伏安法对对氨基苯酚和对乙酰氨基酚进行同时测定.实验证明在pH=5.72的Britton-Robinson(B-R)缓冲溶液中这两种物质都具有良好的氧化峰,在修饰电极上两物质的伏安峰能够很好地分开,因此可以直接对这两种物质进行同时测定.在最佳实验条件下对氨基苯酚和对乙酰氨基酚的线性范围分别为0.1～1.8,0.2～2.2 mg·mL-1,两者的检测限分别为0.067,0.074mg·mL-1.利用本文提出的方法对血清实际样中的对氨基苯酚和对乙酰氨基酚进行测定,可得较高的回收率.%A differential pulse voltammetric method for simultaneous determination of 4-aminophen and acetaminophen with graphene modified glass carbon electrode was developed. Both of the two compounds gave well defined oxidation voltammetric peaks at modified electrode in medium of pH 5. 72 Britton-Rob-inson buffer. As a result,it is possible to simultaneously determine these two compounds. Under the optimum conditions,the linear ranges of 4-aminophen and acetaminophen were 0. 1～1. 8 and 0. 2～2. 2 mg · mL-1 ,with detection limits of 0. 067 and 0. 074 mg · mL-1 respectively. This method was successfully applied for the determination of acetaminophen and 4-aminophen in serum to obtain satisfied results.【期刊名称】《南昌大学学报（理科版）》【年(卷),期】2012(036)004【总页数】4页(P363-366)【关键词】伏安法;石墨烯;对氨基苯酚;对乙酰氨基酚;同时测定【作者】宋海燕;倪永年【作者单位】南昌大学食品科学与技术国家重点实验室,江西南昌 330047;南昌大学化学系,江西南昌 330031;南昌大学食品科学与技术国家重点实验室,江西南昌330047;南昌大学化学系,江西南昌 330031【正文语种】中文【中图分类】O646.54对乙酰氨基酚又称扑热息痛，是一种广泛使用的消炎镇痛退烧药，1893年它首次被化学合成并用于制药业生产。
核酸的定量分析方法
优
点
紫
紫外吸收法测定核酸含量简便快速，灵敏度高，一般可达
外
3ng/L的检测水平。蛋白质也有紫外吸收，通常蛋白质的吸收高
吸
峰在280nm波长处，在260nm处的吸收值仅为核酸的1/10或更低，
收
因此对于含有微量蛋白质的核酸样品，测定误差较小。
法
缺
点 若待测的核酸制品中混有大量的具有紫外吸收的杂质（显著蛋
ssDNA电极杂交 （含一定浓度目 的基因杂交液 SSC）
电
化
DNA传感器 （ssDNA通
学
过生物素-亲 和素的方法
法
固载在Pt电 极）
指示剂： Co(phen)33+
工作电极
DNA序列 检测系统
示差脉冲伏 安法(DPV)
电 流 变 化
方波 伏安法(AWV)
线性范围： 8.0×10-9～ 2.8× 10-8
光在ST存在时明显地被淬灭，说明两者在水溶液中存在能量的转
荧
移，在体系中AO作为荧光能量的给予体，而ST则是能量的接受体。
光
当有DNA存在时，AO-DNA体系的荧光强度被ST淬灭的程度大大 增加。
分
析
法
1.AO荧光发射光谱 2.ST 电子吸收光谱
DNA的存在前后，ST对AO荧光淬灭的变化主要是由于DNA分子对AO 分子、ST分子的极化作用引起。ST对AO-DNA荧光淬灭的效率大于AO荧 光淬灭效率，是由于DNA对AO与ST间的荧光能量转移过程促进的影响。
B：钼酸铵-过 氯酸沉淀剂
紫
RNA（或DNA）的质量浓度（mg/L)
A 260nm
稀释倍数
0.024(0.020) L
外
吸 收
生物电化学
生物电化学生命科学已经成为最活跃的研究领域之一。
将生物学、化学与工程学结合起来，就形成了生物工程学。
采用生物工程学方法，不仅可以增加产量，而且可以生产出许多新的品种来。
毫无疑问，这种方法已经在农业、医药和工业上取得了引人注目的实际应用。
在生物工程学研究领域中，需要对各种各样的生物分子进行分离、鉴定和结构表征，这就要用到各种各样的分析方法。
目前，有好几种分离、分析方法已经成为生物工程学的主要研究手段，如电泳法1-4、色谱法5-8、免疫法9-12及各种用于分子结构测量的近代仪器分析方法13-16等。
当然，这几种方法还需要不断地加以改进，才能适应生物工程学继续发展的需要。
然而另一方面，电分析化学对于解决生物工程学方面的问题，目前尚显得软弱无力。
可是，正是这种新的挑战，开拓了电分析化学的一个新的生长点——生物电分析化学。
生物体系是一个十分复杂的体系。
各种生物组分的分子量相差极大，而许多组分的含量极微。
此外，不少生物组分没有电化学活性；蛋白质等大分子化合物由于吸附作用对测定产生干扰等。
所有这些因素，对电分析化学方法都是极为不利的。
尽管如此，电分析化学方法在生物体系的研究中已经取得了可喜的成果。
生物电分析化学的研究内容和方法都是非常丰富的。
现有的各种电分析化学技术，在生物体系的研究中都是有用的。
不过，将生物学中的一些方法（如免疫法、酶技术等）与电化学结合起来，对于解决生物电分析化学中的问题，可能是更为有效的途径。
一、伏安分析在生命科学中的应用：伏安分析具有灵敏度高、分析对象广、操作简便快速、不需要昂贵仪器等一系列优点。
近年来，把现代伏安技术引入生命科学和医学领域已成为研究的热点。
特别是在医学临床分析中，直接采用伏安法测定人体内各种微量的无机和有机物质，已经取得了显着的效果并获得了广泛的应用。
1、人体微量元素的测定：调查儿童微量元素的含量并对其分析17。
采用微量元素分析仅(溶出伏安法)测定手指全血中微量元素钙、缺、铜、锌、镁、铅含量.结果926例儿童中,缺锌(24.1%)和缺钙(20.6%)分别占第1位和第2位,男、女儿童间微量元素含量差异无统计学意义(P>0.05),不同年龄组儿童锌、钙含量差异显着(P<0.01),锌含量随年龄增长呈上升趋势;钙含量随年龄的增长而逐步降低;不同年龄组铁、铜、镁含量无显着差异(P>0.05)。
可视化研究银纳米颗粒与柑橘类农药杀扑磷的相互作用
可视化研究银纳米颗粒与柑橘类农药杀扑磷的相互作用摘要：为检测柑橘类农药杀扑磷，选择具有独特局域表面等离子体共振吸收和散射特性的银纳米。
用合成70 nm 大小的银纳米颗粒结合Britton-Robinson缓冲溶液研究银纳米与杀扑磷农药的相互作用，发现银纳米颗粒与杀扑磷农药反应形成Ag-S键，检测限达0.2×10-6 mol/L，表明用银纳米检测杀扑磷农药是一种成本低、简捷、易操作的好办法，以期为杀扑磷农药的检测提供新的思路和基础。
关键词：杀扑磷；银纳米；可视化中图分类号：TQ450.7 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2017）09-1668-05DOI：10.14088/ki.issn0439-8114.2017.09.017Visualization Research on the Interaction between Silver Nanoparticles and Citrus Methidathion PesticideXU Na，ZHAO Xi-juan，ZHOU Zhi-qin（V ocational and Technical College of Anshun，Anshun 561000，Guizhou，China）Abstract：The silver nanoparticles with unique properties of localized surface plasmon resonance absorption and scattering were selected to examine the citrus methidathionpesticide. By combining the silver nanoparticle synthesis at the size of 70 nm and Britton-Robinson buffer solution，the interaction between silver nano and methidathion pesticide was detected. The results showed that the silver nanometer reacted with methidathion pesticide reaction and the Ag-S bond formed，the detection limit was 0.2×10-6 mol/L，which demonstrated it's a good way to detect methidathion pesticide with silver nanoparticles，the method was low cost，simple，easy to operate，and shall be expected to provide new means and basis for the detection of methidathion.Key words：methidathion；silver nanoparticles；visualization中国是一个农业大国，70%的人口是农民，其中多数人靠种植农作物为生，农业种植离不开化学农药。
BR缓冲液 Microsoft Word 文档
BR buffer配制方法(2009-10-20 13:08:35)Britton-Robison缓冲溶液的配制方法伯瑞坦-罗宾森（Britton-Robinson）是由磷酸、硼酸和醋酸混合成，向其中加入不同量的氢氧化钠可以组成pH范围很宽的缓冲溶液，pH1.8~11.9Britton-Robinson缓冲溶液(H3PO4-HAc-H3BO3).Britton2Robinson (BR)缓冲溶液用0. 04 mol/L磷酸、硼酸和醋酸配制而. 成,使用时用0. 2 mol/L NaOH溶液在酸度计上调至所需pH值。
伯瑞坦-罗宾森（Britton-Robinson）缓冲溶液的配制：在100ml磷酸、硼酸和醋酸三种酸（浓度均为0.04mol/l）的混合液中，向其中加入不同体积的氢氧化钠（浓度为0.2mol/l）可以组成pH范围很宽的缓冲溶液，pH1.81～11.92PH值与氢氧化钠体积的对应关系为PH-----------------氢氧化钠/ml1.81－－－－－－－－0.01.89－－－－－－－－2.51.98－－－－－－－－5.02.09－－－－－－－－7.52.21－－－－－－－－10.02.36－－－－－－－－12.52.56－－－－－－－－15.02.87－－－－－－－－17.53.29－－－－－－－－20.03.78－－－－－－－－22.54.10－－－－－－－－25.04.35－－－－－－－－27.54.56－－－－－－－－30.04.78－－－－－－－－32.55.02－－－－－－－－35.05.33－－－－－－－－37.55.72－－－－－－－－40.06.09－－－－－－－－42.56.37－－－－－－－－45.06.59－－－－－－－－47.56.80－－－－－－－－50.07.00－－－－－－－－52.57.24－－－－－－－－55.07.54－－－－－－－－57.57.96－－－－－－－－60.08.36－－－－－－－－62.58.69－－－－－－－－65.08.95－－－－－－－－67.59.15－－－－－－－－70.09.37－－－－－－－－72.59.62－－－－－－－－75.09.91－－－－－－－－77.510.38－－－－－－－－80.010.88－－－－－－－－82.511.20－－－－－－－－85.011.40－－－－－－－－87.511.58－－－－－－－－90.011.70－－－－－－－－92.511.82－－－－－－－－95.011.92－－－－－－－－97.5常用pH缓冲溶液的配制和pH值序号溶液名称配制方法pH值1 氯化钾-盐酸13.0 ml 0.2 mol/L HCl 与25.0 ml 0.2 mol/L KCl混合均匀后，加水稀释至100 ml 1.72 氨基乙酸-盐酸在500 ml 水中溶解氨基乙酸150 g，加480 ml浓盐酸，再加水稀释至1L 2.33 一氯乙酸-氢氧化钠在200 ml 水中溶解2 g 一氯乙酸后，加40 g NaOH，溶解完全后再加水稀释至1 L 2.84 邻苯二甲酸氢钾-盐酸把25.0 ml 0.2 mol/L的邻苯二甲酸氢钾溶液与6.0 ml 0.1 mol/L HCl混合均匀，加水稀释至100 ml 3.65 邻苯二甲酸氢钾-氢氧化钠把25.0 ml 0.2 mol/L的邻苯二甲酸氢钾溶液与17.5 ml 0.1 mol/L NaOH混合均匀，加水稀释至100 ml 4.86 六亚甲基四胺-盐酸在200 ml水中溶解六亚甲基四胺40 g，加浓HCl 10 ml，再加水稀释至1 L 5.47 磷酸二氢钾-氢氧化钠把25.0 ml 0.2 mol/L的磷酸二氢钾与23.6 ml 0.1 mol/L NaOH混合均匀，加水稀释至100 ml 6.88 硼酸-氯化钾-氢氧化钠把25.0 ml 0.2 mol/L的硼酸-氯化钾与4.0 ml 0.1 mol/L NaOH 混合均匀，加水稀释至100 ml 8.09 氯化铵-氨水把0.1 mol/L 氯化铵与0.1 mol/L 氨水以2：1比例混合均匀9.110 硼酸-氯化钾-氢氧化钠把25.0 ml 0.2 mol/L 的硼酸-氯化钾与43.9 ml 0.1 mol/L NaOH 混合均匀，加水稀释至100 ml 10.011 氨基乙酸-氯化钠-氢氧化钠把49.0 ml 0.1 mol/L 氨基乙酸-氯化钠与51.0 ml 0.1 mol/L NaOH混合均匀11.612 磷酸氢二钠-氢氧化钠把50.0 ml 0.05 mol/L Na2HPO4与26.9 ml 0.1 mol/L NaOH 混合均匀，加水稀释至100 ml 12.013 氯化钾-氢氧化钠把25.0 ml 0.2 mol/L KCl与66.0 ml 0.2 mol/L NaOH混合均匀，加水稀释至100 ml 13.0。
4酸碱滴定
2
K a1
2
[H ] [HA ] 2 A ] [OH ] [
[H ]
2K a2 [H 2A]K a1(1 ) Kw [H ]
[H ]
2K a2 [H 2A]K a1(1 ) Kw [H ]
2
[H ] C [H 2A] 2 [H ] K a1[H ] K a1 K a2
室温时饱和碳酸溶液的浓度约为0.040mol/L，计算其pH Ka1=4.2×10-7, Ka2=5.6×10-11
2.4 混合溶液
弱酸或弱碱混合溶液
设有弱酸HA和HB，浓度分别为C1和C2
0.10mol/LHF和0.2mol/LHAc的pH. HF: Ka1=6.6×10-4 HAc: Ka2=1.8×10-5
2.1 强酸或强碱
pH lgc
2.2 弱酸或弱碱
HAc： H2C2O4： H3PO4： HF： NH3
NaAc等
HAc H Ac
H 2O H
OH
一元弱酸/弱碱pH的精确计算
HAc H Ac– H2O H OH– [H ] [Ac–] Ka [HAc] Kw [H ] [OH ]
Ka C 10Kw [H ] [H ]
Ka(C [H ]) Ka C
C 100 Ka
如果KaC<10Kw
[H ]
Ka [HAc] Kw
C 100Ka
忽略酸的电离，则[HAc]=c
[H ]
Ka C Kw
计算0.10mol/L乳酸（2-羟基丙酸）溶液的pH。Ka=1.4×10-4
钙黄绿素
作者：张蕾，董学芝，胡卫平，陈文静【摘要】目的采用荧光光度法测定加替沙星的含量。
方法在ph6.0的britton-robinson（b-r）缓冲溶液中，刚果红能与钙黄绿素生成配合物，使钙黄绿素荧光猝灭，加入加替沙星后，加替沙星与刚果红可生成比钙黄绿素-刚果红更稳定的配合物，使钙黄绿素游离重现荧光。
结果将该方用于片剂、粉针剂和尿液中加替沙星的测定，结果与文献报道的紫外法一致。
结论所用方法简单、快速、准确、灵敏。
【关键词】钙黄绿素；刚果红；加替沙星加替沙星（gatifloxacin,am-1155,gflx）是新的第四代喹诺酮类抗生素药物，具有抗菌谱广，抗菌活性强的特点。
它对革兰阳性菌、革兰阴性菌、厌氧菌及衣原体均具有强大的抗菌作用［1］。
加替沙星的测定方法有高效液相色谱法、荧光光度法、反相离子对色谱法、高效毛细管电泳法和紫外分光光度法［2～6］等。
但利用钙黄绿素-刚果红荧光体系来测定加替沙星含量还未见报道。
本文经研究发现刚果红能与钙黄绿素生成没有荧光的配合物，使钙黄绿素荧光猝灭，加入加替沙星后，加替沙星与刚果红反应生成比钙黄绿素-刚果红更稳定的配合物，游离出钙黄绿素，释放出荧光。
以此为基础，建立了测定加替沙星的新方法。
1 实验与方法1.1 仪器与试剂 phs-3ct型酸度计（上海大中仪器有限公司）；970crt型荧光分光光度计（上海精密仪器厂）；labtech-1000紫外-可见分光光度计（北京莱伯泰科仪器有限公司）。
加替沙星片（通化金马药业集团股份有限公司，批号：20080201，每片0.1g）；沙星粉针剂（浙江亚太药业股份有限公司，批号：070201，每安瓿0.2g）。
加替沙星对照品（gflx，0.2g/l，河南省药检所提供）溶液：准确称取0.0200g gflx，加水溶解后定量转移到100ml容量瓶中，用水定容，用时逐级稀释。
钙黄绿素（1×10-4mol/l）：准确称取0.0175g 钙黄绿素，加少量水溶解后配制成溶液250ml。
钴镍铁铜检测方法
一、钴检测试剂及设备1、亚硝基红盐0.2%水溶液制取方法：称取2克亚硝基红盐溶解于1000毫升水中定容制得。
2、硝酸（1+1）制取方法：每1000毫升硝酸加入50毫升磷酸。
3、醋酸钠-柠檬酸钠缓冲液制取方法：50%醋酸钠与30%柠檬酸钠等体积混合。
4、钴标注溶液5、分光光度计二、镍检测试剂及设备1、分光光度计；2、分液漏斗；3、100μg.mL-1Ni2+贮备液；4、1%丁二酮肟乙醇溶液；5、2:3HNO3溶液，1:20HNO3溶液；6、HCIO4；7、20%柠檬酸铵溶液；8、0.1%溴麝香草酚蓝溶液；9、1:30NH3•H2O溶液；10、CHCI3；11、30%酒石酸钠溶液；12、10%NaOH溶液；13、4%(NH4)3S2O8溶液。
三、铁检测试剂及设备⒈仪器：分光光度计；1cm吸收池；10mL 吸量管；50mL 比色管(7个)。
⒉试剂：1.0×10-3 mol·L-1 铁标准溶液；100μg·mL-1铁标准溶液；0.15%邻二氮菲水溶液；10%盐酸羟胺溶液（新配）；1mol·L-1乙酸钠溶液；1 mol·L-1NaOH溶液；6 mol·L-1 HCl（工业盐酸试样）。
四、铜的检测试剂及设备1、实验仪器TU-1901双光束紫外可见光分光光度计；pHS-3D型精密酸度计；2、实验药剂离子液体四氟硼酸1-丁基-3-甲基咪唑（〔Bmim〕BF4）：按照规定配制纯化；铬天青S(CAS)：2.22×10-4mol/L；铜（‖）标准溶液：Britton-Robinson（B-R）缓冲溶液：pH2.0~11.0，常规方法配制；Tween-80；十二烷基磺酸钠（SLS）；氯代十六烷基吡啶（CPC）溶液：10.0mg/mL；NaH2PO4·2H2O（固体）；试剂均为分析纯，实验用水要求为去离子水再蒸馏一次。
五、镉的检测试剂及设备常规滴定法：EDTA差减滴定法测定溶液中的镉。
血清的制备
1.血清的制备：血样收集在试验期，每隔35d采1次血，颈静脉采血10mL，待凝血后，5 000r／min 7rain，分离血清后分装，一20~C冰箱中保存。
杨镒峰，魏海军等，不同单宁水平日粮对育成前期雄性梅花鹿生长和血液生化指标的影响[J]，特产研究，2010，08，252.尿素浓度的测定方法：A血清尿素测定是常用的肾功能检测项目之一，其检测方法一直以传统的湿化学方法为主，例如二乙酰一肟法、脲酶一波氏比色法和酶偶联速率法。
随着干化学分析技术的发展，干化学法已经成为可以与湿化学测定相媲美的定量分析方法。
由于干化学法具有快速、简便等独特的优点，近些年，在我国得到了较为广泛的应用检测原理：在碱性环境下，尿素在脲酶作用下水解生成氨气，氨气和指示剂反应发生颜色变化，生成氨气的量和显色程度成比例关系，从而可达到对血清尿素定量检测的目的。
测试方法：将5 l血清样本滴加至加样，此时迅速将试纸条插入反射式分光光度计测试槽内，同时仪器自动开始计时，反应环境温度为37±0．2℃，测试时间为100 S。
定标方法：收集正常体检者血清，制得混合血清，分成6等份，其中一份使用7 g／dl BSA 稀释一倍，往其中4份添加不同量的尿素标准品。
制备含不同浓度尿素的血清样本。
6份样本使用脲酶一谷氨酸脱氢酶速率法(科华尿素氮液体试剂盒，日立7020生化分析仪)定值，每份样本重复测定两次。
依此定值血清作为临时校准品校准自建尿素测试方法。
使用自建方法测试临时校准品，每份样本重复测定3次，记录100 S处反射吸光度值，拟合标准曲线。
将确定的标准曲线输入仪器，每批试纸条只需定标一次，以后测试无需再定标。
宁绍华，朱世成，王缦，快速定量检测血清尿素含量干化学方法的建立[J],现代检验医学杂志,2010.1.49B目前主要测定方法有尿素酶速率法、尿素酶电极法、二乙酰一肟法和流动注射分析法等，其中二乙酰一肟法应用最为广泛，但具有线性范围窄、反应~,-tl可长、易褪色和影响因素多等的缺点。
一种新型1,8-萘酰亚胺衍生物的合成及光谱性能研究
一种新型1,8-萘酰亚胺衍生物的合成及光谱性能研究张聿平;陆林华;徐冬梅【摘要】在温和的条件下合成了一种新型的化合物N-正丁基-4-(2-(2-羟乙基氨基)乙氨基)-1,8-萘酰亚胺(ABN).利用红外光谱、核磁和质谱表征了ABN的结构.在甲醇中,ABN的最大吸收波长为436 nm(摩尔消光系数为1.20×104 L/mol·cm),最大荧光波长为522 nm(荧光量子效率为0.509).随着溶剂极性的增加,ABN溶液的吸收和荧光发射光谱发生红移.在二甲基甲酰胺(DMF)/Britton-Robinson缓冲溶液[V(DMF)∶V(Britton-Robinson缓冲溶液)=1∶99]中,ABN的荧光强度随pH值减小而增强,并且在pH=6.73～9.61与pH值呈良好的线性关系.【期刊名称】《化工科技》【年(卷),期】2015(023)003【总页数】4页(P9-12)【关键词】1,8-萘酰亚胺;紫外-可见吸收光谱;荧光光谱;pH探针【作者】张聿平;陆林华;徐冬梅【作者单位】苏州大学材料与化学化工学部,江苏苏州215123;苏州大学材料与化学化工学部,江苏苏州215123;苏州大学材料与化学化工学部,江苏苏州215123【正文语种】中文【中图分类】O625.631,8-萘酰亚胺及其衍生物因具有色泽鲜艳、荧光强烈、荧光量子效率高、光稳定性和热稳定性好、分子易于修饰等优点，而成为一类备受关注的功能材料，被广泛用于荧光染料和荧光增白剂[1]、荧光探针和传感器[2]以及光电材料[3]。
pH值在生命体系和生理活动以及工农业生产和环境等领域都起着重要的作用，其监测和控制意义重大[4]。
1,8-萘酰亚胺衍生物是一个典型的光诱导电子转移(PET) 体系，可以在其结构的4-位或5-位上引入不同的烷胺基调节PET过程，从而改变其对pH值的响应性[5-6]。
在温和的条件下将2-(2-羟乙基氨基)乙氨基引入到1,8-萘酰亚胺的4-位上，合成了一种新型的化合物N-正丁基-4-(2-(2-羟乙基氨基)乙氨基)-1,8-萘酰亚胺(ABN)，并研究了其光物理性能及其光物理性能对pH值的响应性。
牛血红蛋白催化香豆素体系荧光光度法测定过氧化氢
牛血红蛋白催化香豆素体系荧光光度法测定过氧化氢单雅琦;陈永宁;张容珲;唐宁莉【摘要】在 pH 3.5的 NaOH －H2 SO4缓冲溶液中，牛血红蛋白催化 H2 O2氧化香豆素生成7-羟基香豆素，导致体系的荧光强度明显增强。
该氧化产物在456 nm 处有最大荧光强度。
实验表明：在456 nm 处，体系的荧光增加值ΔF 与 H2 O2的浓度在3.940×10－7～7.880×10－5 mol／L 范围内呈良好的线性关系，相关系数r 为0.9985，检出限为1.25×10－8 mol／L。
据此建立了一种简单、灵敏度高的检测水样中痕量 H2 O2的荧光新方法。
该方法已用于雨水及消毒液中H2 O2的测定，结果满意。
%In pH 3.5 NaOH -H2 SO4 buffer solution,with bovine hemoglobin as catalyst,coumarin was oxi-dized to produce 7-hydroxycoumarin by hydrogen peroxide,which had strong fluorescence in acid solution.At the length of maximum emission 456 nm,the increased value of fluorescence intensity (ΔF)was linear to the concentration of hydrogen peroxide in the range of 3.940 ×10 -7 -7.880 ×10 -5 mol /L,with a correlation coef-ficient of 0.998 5 and a detec tion limit of 1.25 ×10 -8 mol /L.Based on this,a simple and highly sensitive flu-orometric method was proposed for the determination of trace H2 O2 .This new fluorometric method can be ap-plied to the analysis of H2 O2 in rainwater and disinfectant fluid samples with satisfactory results.【期刊名称】《桂林理工大学学报》【年(卷),期】2016(036)002【总页数】4页(P333-336)【关键词】过氧化氢;牛血红蛋白;香豆素;荧光法【作者】单雅琦;陈永宁;张容珲;唐宁莉【作者单位】桂林理工大学化学与生物工程学院，广西桂林 541004;桂林理工大学化学与生物工程学院，广西桂林 541004;桂林理工大学化学与生物工程学院，广西桂林 541004;桂林理工大学化学与生物工程学院，广西桂林 541004【正文语种】中文【中图分类】O657.3过氧化氢普遍存在于自然生态体系中,是生物和环境系统中存在的一种重要中间产物,在食品科学、医学、化学、生物、环境保护等众多领域应用广泛。
N-乙酰-5羟色胺的电化学行为研究
Ｎ－乙酰－５羟色胺的电化学行为研究摘要：利用伏安法研究了N-乙酰-5羟色胺在玻碳电极(GCE)上的电化学行为，在pH9.33的硼砂-氢氧化钠缓冲液中，N-乙酰-5羟色胺在约＋0.2V （vs.Ag/AgCl）电位处产生一个阳极氧化峰，通过伏安实验研究了体系的电极表面反应机理及吸附行为。
关键词：N-乙酰-5羟色胺；伏安法；电化学1 引言N-乙酰-5羟色胺(NAHT)，化学结构式见式3.1，属于吲哚类激素，主要存在于松果体内及松果体外的组织器官，如人的外周血、胃肠道、脾、视网膜、兔子的晶状体、副泪腺等，是松果体中褪黑素（MT）生物合成的直接式3.1前体物，含量呈昼夜性周期节律变化，人们也发现加入NAHT显著促进了脾细胞产生MT，同时它也是MT代谢物之一，随着尿液排泄出体外，因此NAHT在研究MT合成代谢过程中具有特殊的地位和作用，可以作为昼夜节律与一些神经内分泌疾病的临床观测指标[1,2]。
NAHT在体内能阻断MT引起的某些生理学效应，表现出拮抗剂的性质，这对于MT的受体作用机制研究和开发新型药物有着理论意义[3]。
NAHT也是一种有临床价值的新型药物，如具有抗神经毒性和神经保护性的作用，是良好的抗抑郁剂和抗高血压药。
它还具有抗肿瘤作用，可有效抑制脓毒性休克时病理性血管扩张，有利于脓毒症治疗。
文献已报道了利用色谱联用技术对吲哚类化合物（包含NAHT）的分离分析,方法包括了高效液相色谱（HPLC）-紫外/电化学/或荧光检测[4,5]、薄层色谱（TLC）-荧光法[6]、液质联用（LC-MS）或气质联用（GC-MS）[7]、液相色谱-化学发光（LC-CL）[8]法和电泳-荧光法[9]等，其中NAHT主要以共存物形式被分离测定。
电分析法可以直接将化学信息转化成电信号，仪器简单、操作简便快速，无需中介的光学或者磁学载体，克服了其他方法的不利因素，同时各种伏安技术不仅能够进行含量测定，还可以通过其他手段进一步提高测定灵敏度与选择性，同时对神经生物物质能够进行均相电化学机制研究。
差示脉冲极谱法测定避孕药中甲地孕酮的含量
差示脉冲极谱法测定避孕药中甲地孕酮的含量
丁友真;李昭昭;周文懿
【期刊名称】《中国医药工业杂志》
【年(卷),期】1990(21)4
【摘要】用差示脉冲极谱法,在pH2～3的Britton-Robinson缓冲液和异丙醇的混合溶液中测定避孕药中甲地孕酮的含量,方法的重现性和精密度均较高,准确度优于分光光度法。
【总页数】3页(P168-170)
【关键词】甲地孕酮;避孕药;脉冲极谱法;药物含量测定
【作者】丁友真;李昭昭;周文懿
【作者单位】福建师范大学化学系;上海第九制药厂
【正文语种】中文
【中图分类】R979.21;R927.2
【相关文献】
1.差示脉冲极谱法测定硝普钠含量的改进 [J], 蒋长敏;季秉清
2.二阶导数差示脉冲极谱法测定青黛中靛蓝的含量 [J], 班福志;景志坚
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茜素红S标记分光光度法测定微量人血清白蛋白
茜素红S标记分光光度法测定微量人血清白蛋白赵丹华【摘要】研究有机染料茜素红S（alizarin red S，ARS）与牛血清白蛋白（bovine serum albumin，BSA）、人血清白蛋白（human serum albumin，HSA）的结合反应，选择实验的最佳条件：PH=5．10的B—R缓冲溶液3．00mL，4．00mL5．0×10-4mol／L茜素红S溶液．反应20min后，体系的吸光度很稳定，在入λ=420nm处有最大吸收峰，并且随着牛血清白蛋白（BSA），人血清白蛋白（HSA）的加入，茜素红S的吸收峰下降．因此以茜素红S为标记物，根据其在波长420nm处吸收峰下降的程度，可用于定量测定BSA和HSA．测量BSA的线性响应范围为0～32．0μg／mL，相关系数为0．9987，测量BSA的线性响应范围为0～28．0μg／mL，相关系数为0．9968．该方法具有较高的灵敏度和选择性，用于实际试样分析，实验结果令人满意．%The protein is a kind of important biological macromolecules in the human body. It is not merely very important and essential for maintaining the life. A acidic dye has been applied to the assay of proteins in the fields of medicine and life science. The reactions of human serum albumen （HSA） and bovine serum albumen （BSA） with alizarin red have been studied. Both BSA and HSA can form orange complexes, which decrease the absorbance. The optimum conditions of complex reactions of a new chromogenic reagent alizarin red with BSA and HSA was studied. The method was used in the photometric determination of BSA and HSA. In a buffer medium of pH 5.10, alizarin red reacts with BSA and HSA to form a complex having its absorption maxima at 420nm and the reactionssteady with 80 rain. Beefs law is obeyed in the concentration in the range of 0-32.0 μg/mL（r=0. 998 7） for BSA and 0-28.0μg/mL（r= 0. 996 8） for HSA. The BSA and HSA in human serum samples were determined, and the result is satisfactory.【期刊名称】《广东第二师范学院学报》【年(卷),期】2011(031)005【总页数】5页(P51-55)【关键词】茜素红S;牛血清白蛋白;人血清白蛋白;分光光度法【作者】赵丹华【作者单位】广东第二师范学院化学系,广东广州510303【正文语种】中文【中图分类】O657.32人体血液中的白蛋白是形成血浆渗透压的主要成分，它在维持体液的正常分布，保持血容量及血压等方面起着重要作用.同时，血浆白蛋白对人体具有营养作用.现已报道将它作为人体营养健康、疾病诊断和疗效观察的重要指标［1］.测定研究血浆中白蛋白的含量，可对人体健康和生命科学的研究提供重要的科学依据.蛋白质含量的测定方法很多，有荧光光度法［2］以及近年来新兴的共振光散射法［3］、分光光度法［4］等.目前，研究测定核酸较灵敏和较常用的手段是荧光光谱法.由于DNA内源荧光很弱，直接用其天然荧光来测定DNA受到了限制.共振光散射（RLS）法近年来得到了广泛的研究与应用.童沈阳等［5］首次将其作为一种新的高灵敏度方法应用于核酸的测定.肖锡林等［6］建立了纳克级核酸的分析方法.其中染料结合分光光度法具有简便、快速、经济、准确的特点，因而在蛋白质的定量分析中较为常用.近年来，利用某些染料作为标记物，如：乙基紫［7］、维多利亚蓝B［8］等测定DNA，取得了较好的效果.如维多利亚蓝的灵敏度高，反应快速，操作简便，是目前测定DNA较好的方法.茜素红S是由天然产物中提出的有机物质，其作为光谱探针与生物大分子作用的研究和应用中发现在一定的条件下，茜素红S能与生物大分子在一定的部位结合，生成复合物.本文采用分光光度法研究了以茜素红S作为标记物与牛血清白蛋白、人血清白蛋白的结合反应，发现在3.00 m L p H＝5.10的B-R缓冲溶液中，取5.00 m L 2.0×10-4 mol／L茜素红S，以二次蒸馏水作为参比溶液，随着BSA、HSA浓度的增加，在420 nm处有最大吸收峰，据此建立了一种测定BSA、HSA 的新方法.该方法操作简便，灵敏度高，选择性较好，用于实际样品分析，结果令人满意.仪器：721型可见分光光度计（上海光谱仪器有限公司）；半自动电光分析天平（上海第二分析仪器厂）；p HS-3C型酸度计（上海第二分析仪器厂）；TU-1901双光束紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器有限公司）.试剂：牛血清白蛋白溶液（BSA上海生物化学试剂公司）、人血清白蛋白（HSA上海文化科技有限公司）各100μg／m L的溶液；5.0×10-4 mol／L的茜素红S （分析纯）溶液；Britton-Robinson（B-R）缓冲溶液.所用其他试剂均为分析纯，实验用水为二次去离子水.于25 m L比色管中依次加入p H＝5.10的3.00 m L B-R缓冲溶液，4.00 m L 5.0×10-4 mol／L茜素红S，一定量的标准BSA溶液，稀释至刻度，静置20 min，于λ＝420 nm处读取吸光度A值；不加入BSA，按上述步骤做空白，测定吸光度A 0值.以二次去离子水作为参比溶液，测定吸光度值.令ΔA＝A 0-A，以ΔA作为测定BSA的信号响应.在选定的B-R缓冲溶液（p H＝5.10）的体系中，茜素红S与BSA相互作用，其UV-Vis光谱见图1.由图1可知，BSA溶液和茜素红S在420 nm处有最大吸收峰，且由于茜素红S与BSA的相互作用，导致体系吸光度发生变化，即随BSA浓度的增加，体系的吸光度显著下降，并且在420 nm处吸收峰的灵敏度最大.所以本文选择420 nm作为测定波长.2.2.1 最佳p H值的选择用不同PH值的B-R缓冲溶液作酸度影响实验，在B-R缓冲介质中不同p H值对体系复合物的影响.按照实验方法取4.00 m L 5.0×10-4 mol／L茜素红S；1.00 m L 100.0μg／m L BSA；3.00 m L B-R缓冲溶液.结果表明，当p H＝5.10时，体系的吸光度ΔA变化最大且最稳定，实验选择p H＝5.10的B-R缓冲溶液作为最佳酸度.2.2.2 茜素红S用量的选择在p H 5.10的B-R介质中，室温条件下研究了茜素红S的用量对实验的影响，实验表明，随着茜素红S用量的增加ΔA先变大后变小.当茜素红S的用量为4.00 m L时，ΔA最大，且体系稳定性好，本实验选择茜素红S用量为4.00 m L.2.2.3 缓冲溶液用量的选择在4.00 m L 5.0×10-4 mol／L茜素红S，p H 5.10的B-R介质中，在室温条件下研究了缓冲溶液的用量对实验的影响，结果表明，当缓冲溶液用量为3.00 m L 时，ΔA最大且比较稳定.本实验选择缓冲溶液用量为3.00 m L.2.2.4 放置时间选择在p H 5.10的B-R介质中，在室温条件下研究了时间对反应的影响，实验结果（如图2）表明该体系的反应速度很快，20 min后ΔA可达到稳定，并在80 min 内ΔA不变，本实验选择20 min后测定体系吸光度.2.2.5 工作曲线的绘制在确定的最佳实验条件下，改变BSA、HSA的加入量，绘制测定BSA、HSA的工作曲线，当BSA、HSA的浓度分别为在0～32.0μg／m L、0～28.0μg／m L时，体系的吸光度与BSA、HSA浓度呈良好的线性关系.其线性回归方程及相关系数分别为A＝0.372-0.006C，r＝0.9987和A＝0.373-0.005C，r＝0.9968.本实验具有较宽的线性范围，用BSA作为标准蛋白质的代用标准进行人血清白蛋白的测定.2.2.6 其他物质的干扰在确定的最佳实验条件下，当体系中含有12.0μg／m L蛋白质时，研究了各种金属离子、蛋白质及氨基酸等干扰因素对测定准确性的影响，结果见表1.试验结果表明，各种常见金属离子、及氨基酸等对BSA的测定基本没有影响.2.2.7 温度的影响由于高温下BSA、HSA会变性，所以本实验只讨论了10～40℃范围内BSA、HSA与茜素红S的反应，结果表明，在室温范围内ΔA很稳定，本实验可在室温下进行.在确定的最佳实验条件下，对人血清样品（淮北市人民医院提供）总蛋白量进行测定，获得较好的结果.结果见表2.基于茜素红S与BSA、HSA结合形成有色化合物而建立一种测定蛋白质含量的新方法，在BSA和HSA浓度分别为0～32.0μg／m L和0～28.0μg／m L内，吸光值与BSA、HSA的浓度呈良好的线性关系，该方法用于实际样品的测定，结果令人满意.【相关文献】［1］杨忠东，郭伟明，沈菲，等.检测人血清白蛋白制品中微量铝荧光分析法的建立［J］.中国生物制药品杂志，2004，17（5）：316-317.［2］宋功武，成耀鹏，何治柯，等.小蘖碱与核酸作用荧光光谱及其分析应用［J］.分析化学，1999，27（1）：44-46.［3］达毛拉·杰力里，黄承志.酚藏花红与DNA作用的共振光散射特征及微量DNA的光散射测定［J］.分析化学，1999，10（27）：1204-1207.［4］胡秋娈，李克安，童沈阳，等.氟磺酸酚与蛋白质作用的分光光度研究［J］.分析化学，1999，27（2）：166-169.［5］迟燕华，李克安，童沈阳.以锌试剂显色法测定蛋白质的研究［J］.高等学校化学学报，1998，19（6）：879-991.［6］肖锡林，王永生，李贵荣，等.甲基胺蓝共振光散射法测定纳克级脱氧核糖核酸［J］.光谱学与光谱分析，2004，2（24）：190-193.［7］李天剑，沈含熙，罗云敬.乙基紫分光光度法测定脱氧核糖核酸［J］.分析化学，1998，11（26）：1372-1375.［8］苏界殊，龙云飞，郑峰.维多利亚蓝B标记分光光度法测定DNA［J］.光谱实验室，2003，20（6）：894-896.。