《中国药典》2020—注射用重组人粒细胞巨噬细胞刺激因子原液相关蛋白检测国家药品标准公示稿

重组人粒细胞刺激因子在《中国药典》和《欧洲药典》中质量标准不同点的对比分析

重组人粒细胞刺激因子在《中国药典》和《欧洲药典》中质量

标准不同点的对比分析

赵先亮;王春雨

【摘要】目的对比重组人粒细胞刺激因子(rhG-CSF,Filgrastim)在<中国药

典>(2005年版)和<欧洲药典>(6.3版)中标准的不同点,为国内研发机构对基因重组蛋白产品的研发及国内企业对该产品的进出口提供参考.方法按两部药典要求,对国产产品实样进行部分关键指标的检测分析.结果两部药典对该产品的标准描述上存在具体内容的区别.结论 :在现代药物的研发和生产中,对药品的国际及国内标准要进行综合分析而拟定.

【期刊名称】《药学研究》

【年(卷),期】2010(029)001

【总页数】3页(P25-27)

【关键词】重组人粒细胞刺激因子;重组人粒细胞刺激因子;欧洲药典;中国药典【作者】赵先亮;王春雨

【作者单位】山东科兴生物制品有限公司,山东济南250200;山东科兴生物制品有限公司,山东济南250200

【正文语种】中文

【中图分类】R921

生物技术药品的质量标准和检测方法的研究水平不仅影响着生物技术新药开发的进程,而且决定着生物技术药品产业的质量水平,是药品进入国际市场的一道大关。从

广义上讲,基因重组蛋白药物是生物技术药物的一种。随着生物技术的飞速发展,尤

其是国际市场部分基因重组蛋白药物专利逐个到期,其流通市场的数倍放大,如何制

定一个既遵守国内标准又符合国际市场需求的基因重组蛋白药物质量标准,值得大

家探讨。我们以《欧洲药典》(第6.3版)(European Pharmacopoeia 6.3)[1]和《中国药典》2005年版(三部)[2]中共有的重组人粒细胞刺激因子(Recombinant Human Granulocyte Colony-stimulating Factor,rhG-CSF,Filgrastim)为例,对该产品的部分质量标准不同点进行了对比分析,提出了自己的观点,以便对国内企业该

《中国药典》2020年版(三部)生物技术产品增修订概况

中国药品标准ＤｒｕｇＳｔａｎｄａｒｄｓｏｆＣｈｉｎａ２０２１，２２（１） ·５　·

　第一作者简介：赵雄，副研究员，研究方向：生物制品研发及质量控制。Ｔｅｌ：０１０６７０７９５９８；Ｅｍａｉｌ：ｚｈａｏｘｉｏｎｇ＠ｃｈｐｏｒｇｃｎ通讯作者简介：

郭中平，研究员，研究方向：生物制品。Ｔｅｌ：０１０６７０７９５６１；Ｅｍａｉｌ：ｇｕｏｚｈｏｎｇｐｉｎｇ＠ｃｈｐｏｒｇｃ

ｎ《中国药典》２０２０年版（三部）生物技术产品增修订概况

赵雄，王晓娟，曹琰，郭中平

（国家药典委员会，北京１０００６１）

摘要：生物技术产业的快速发展推动了生物技术产品国家标准的不断提升。本文介绍了《中国药典》２０２０年版（三部）生物技术产品及相关通用技术要求的增修订概况，阐释了增修订的考量和特点，旨在为正确理解和执行生物技术产品国家标准提供参考。关键词：生物技术产品；国家标准；增修订

中图分类号：Ｒ９２１２文献标识码：Ａ文章编号：１００９－３６５６（２０２１）０１－０００５－０５ｄｏｉ：１０１９７７８／ｊｃｈｐ２０２１０１００１

ＵｐｄａｔｅｓａｎｄＡｍｅｎｄｍｅｎｔｓｏｆＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙＰｒｏｄｕｃｔｓ

ｉｎｔｈｅＣｈｉｎｅｓｅＰｈａｒｍａｃｏｐｏｅｉａ２０２０（ＶｏｌｕｍｅⅢ）

ＺＨＡＯＸｉｏｎｇ，ＷＡＮＧＸｉａｏｊｕａｎ，ＣＡＯＹａｎ，ＧＵＯＺｈｏｎｇｐｉｎｇ

（ＣｈｉｎｅｓｅＰｈａｒｍａｃｏｐｏｅｉａＣｏｍｍｉｓｓｉｏｎ，Ｂｅｉｊｉｎｇ１０００６１，Ｃｈｉｎａ）

Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＴｈｅｒａｐｉｄｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｏｆｔｈｅｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙｉｎｄｕｓｔｒｙｈａｓｐｒｏｍｏｔｅｄｔｈｅｃｏｎｔｉｎｕｏｕｓｉｍｐｒｏｖｅｍｅｎｔｏｆｎａｔｉｏｎａｌｓｔａｎｄａｒｄｓｆｏｒｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙｐｒｏｄｕｃｔｓＴｈｅｕｐｄａｔｅｓａｎｄａｍｅｎｄｍｅｎｔｓｏｆｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙｐｒｏｄｕｃｔｓａｎｄｇｅｎｅｒａｌｒｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔｓｉｎｔｈｅＣｈｉｎｅｓｅＰｈａｒｍａｃｏｐｏｅｉａ２０２０（ＶｏｌｕｍｅⅢ）ａｒｅｉｎｔｒｏｄｕｃｅｄ，ａｎｄｔｈｅｃｏｎｓｉｄｅｒａｔｉｏｎｓａｎｄｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓｏｆｔｈｅｒｅｖｉｓｉｏｎｓａｒｅｅｘｐｌａｉｎｅｄＴｈａｔａｉｍｓｔｏｐｒｏｖｉｄｅａｒｅｆｅｒｅｎｃｅｆｏｒｔｈｅａｃｃｕｒａｔｅｕｎｄｅｒｓｔａｎｄｉｎｇａｎｄｉｍｐｌｅｍｅｎｔａｔｉｏｎｏｆｎａｔｉｏｎａｌｓｔａｎｄａｒｄｓｆｏｒｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙｐｒｏｄｕｃｔｓ．

重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子的临床新用途解析

重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子

的临床新用途

摘要粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（granulocyte macrophage colony stimulating factor,GM-CSF）是一个具有多项潜能的造血生长因子，因为它不

仅能够促进造血前体细胞的增殖、分化和成熟，而且对其他的细胞，如抗原递

呈细胞（APC）、成纤维细胞、角质细胞、皮肤粘膜细胞等，均有着不同程度的

刺激作用。由于GM-CSF对骨髓抑制的修复作用，目前在临床上的用途主要是用

于治疗恶性肿瘤因放、化疗所致的白细胞减少症，有关这方面的报道已有很

多，GM-CSF在升高白细胞方面的作用已经比较肯定。近年来有许多研究报道表明，GM-CSF对恶性肿瘤放、化疗后所致的口腔粘膜溃疡有着很好的治疗作用，

以及在抗病毒、抗真菌感染等的治疗中也有着良好的疗效。

关键词重组人粒细胞- 巨噬细胞集落刺激因子；临床新用途

《中国书资料分类法》分类号R730.5; R456

自1985年Sieff［1］等发表第1篇有关重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（recombinant human granulocyte macrophage colony stimulating

factor,rhGM-CSF）的文章以来，rhGM-CSF的临床用途逐渐引起了各位学者的

兴趣，这些年来有关rhGM-CSF研究报道的文献每年均在千篇左右。作为一个多

潜能的造血生长因子，它的主要临床应用是促进骨髓造血，目前在临床上

rhGM-CSF已成功地用于治疗恶性肿瘤放、化疗后所致的白细胞减少症，以及用

《中国药典》2020版—生物制品病毒安全性控制

生物制品病毒安全性控制

1.概述

生物制品通常以微生物或人/动物源的细胞、组织和体液等为起始原材料，其制备过程或制剂

中可能添加人或动物来源的原材料或辅料，这些起始原材料、原材料或辅料潜在的病毒污染是影响

产品安全性的关键因素。

本通则是对生物制品病毒安全性控制的基本要求，旨在控制生物制品的病毒安全性风险，保证产品

质量。本通则适用于本版药典生物制品定义范围的相关产品。涉及传染性海绵状脑病（TSE）等相

关的传染因子，还应符合国家其他相关法规要求。

2.一般原则

2.1风险评估

生物制品理论上都存在病毒污染的潜在风险，但不同类型的生物制品在来源、潜在污染病毒的特性、制备工艺及临床应用的给药方式和适用人群等方面的不同，导致其病毒安全性风险大小存在差异。因此，生物制品的病毒安全性控制要求，应建立在风险评估的基础上结合产品特点综合考虑。

2.2全过程控制

生物制品病毒安全性控制应体现在生物制品质量控制的全过程。其基本要素包括对生产过程使

用的相关物料（起始原材料、原材料和辅料）的来源控制、病毒污染筛查或处理，生产工艺对病毒

的清除作用，以及对产品（包括中间产物和成品）病毒污染的检测。

2.3全生命周期管理

工艺变更对病毒清除的影响应加以评估，根据影响程度，对病毒

清除步骤进行必要的确认或再

验证。必要时还应通过上市后监测追溯产品病毒安全性，保证生物制品全生命周期的病毒安全性控制。

2.4不同类别生物制品病毒安全性控制要点

2.4.1人血液制品

人血液制品起始原材料为健康人血浆，存在经血传播病毒的安全性风险，人血液制品的病毒安

《中国药典》2020版—重组人胰岛素注射液国家药品标准公示稿

重组人胰岛素注射液

Chongzu Ren Yidaosu Zhusheye

Recombinant Human Insulin Injection

本品系将重组人胰岛素原料与适量的抑菌剂、渗透压调节剂等配制而成的无菌水溶液。

1基本要求

生产和检定用设施、原辅料、水、器具等应符合“凡例”的相关要求。

2制造

2.1原料

应符合“重组人胰岛素项下”的规定。

2.2半成品

2.2.1配制与除菌

按照经批准的配方进行稀释、配制，除菌过滤后即为半成品，保存于适宜的温度。

2.2.2半成品检定

按3.1 项进行。

2.3成品

2.3.1分批

应符合“生物制品分批规程”规定。

2.3.2分装

应符合“生物制品分装和冻干规程”及通则 0102 有关规定。

2.3.3规格

3ml：300 单位

10ml：400 单位

2.3.4包装

应符合“生物制品包装规程”及通则 0102 有关规定。

3检定

3.1半成品检定

如需对原液进行稀释或加入其他辅料配制半成品，应确定半成品的质量控制要求，除另有规定外，应按 3.1.1 和 3.1.2 项进行。

3.1.1无菌

按薄膜过滤法处理，依法检查（通则 1101），应符合规定。

3.1.2细菌内毒素

依法检查（通则 1143），每 100 单位重组人胰岛素中含细菌内毒素的量应小于 80 EU。

3.2成品检定

3.2.1性状

本品为无色澄明液体。

3.2.2鉴别

3.2.2.1取本品，照重组人胰岛素项下的鉴别（1）项试验，显相同的结果。

3.2.2.2在苯酚或间甲酚检查项下记录的色谱图中，供试品溶液中苯酚峰

或间甲酚峰的保留时间应与对照溶液中苯酚峰或间甲酚峰的保留时间一致。

《中国药典》2020—精蛋白重组人胰岛素混合注射液(50R)国家标准公示稿

精蛋白重组人胰岛素混合注射液(50R) Jingdanbai Chongzu Ren Yidaosu Hunhe Zhusheye (50R) Mixed Protamine Recombinant Human Insulin Injection (50R) 本品为常规重组人胰岛素与精蛋白重组人胰岛素在灌装前混合而成的预混型制剂，其中常规重组人胰岛素占 50％，精蛋白重组人胰岛素占 50％。

1基本要求

生产和检定用设施、原辅料、水、器具等应符合“凡例”的相关要求。

2制造

2.1原料

应符合“重组人胰岛素项下”的规定。

2.2半成品

2.2.1配制与除菌

按照经批准的配方进行稀释、配制，除菌过滤后即为半成品，保存于适宜的温度。

2.2.2半成品检定

按3.1 项进行。

2.3成品

2.3.1分批

应符合“生物制品分批规程”规定。

2.3.2分装

应符合“生物制品分装和冻干规程”及通则 0102 有关规定。

2.3.3规格

3ml：300 单位

2.3.4包装

应符合“生物制品包装规程”及通则 0102 有关规定。

3检定

3.1半成品检定

中国药典2020微生物限度检查

中国药典2020的微生物限度检查是一项严格的检查标准，用

于评估药物及相关产品中微生物污染的程度。根据中国药典2020的要求，药品和相关产品在销售前必须经过微生物限度

检查，以确保其质量和安全性。

微生物限度检查包括检测制备过程中是否存在微生物污染、产品使用后是否易受微生物感染等方面。根据不同的药品性质和用途，微生物限度检查可以涵盖不同的微生物指标，如细菌、真菌、酵母菌等。

中国药典2020中关于微生物限度检查的要求包括样品采集、

检验方法、标准和评估等方面。具体的检验方法和标准根据不同的药品类别和用途而有所不同，例如，口服药品、注射剂、眼用制剂等都有各自的微生物限度标准。

微生物限度检查的目的是为了确保药品及相关产品无微生物污染或其污染水平在规定范围内，以保证使用者的安全。在药品生产和销售过程中，严格遵守微生物限度检查的标准是非常重要的，以避免因微生物污染引发的健康问题。

需要注意的是，微生物限度检查只是药品质量控制的一部分，其他重要的质量控制措施还包括化学成分分析、物理性质检查、稳定性评估等。所有这些质量控制步骤的目标是确保药品的质量和安全性，以满足患者的需要。

注射用重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子说明书

注射用重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子用于防治肿瘤病人因化疗、放疗引起的白细胞减少。下面是店铺整理的注射用重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子说明书，欢迎阅读。

注射用重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子商品介绍

通用名：注射用重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子

生产厂家: 哈尔滨里亚哈尔生物制品有限公司

批准文号：国药准字S1*******

药品规格：150μg,冻干粉

药品价格：￥159元

注射用重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子说明书

【通用名】注射用重组人粒细胞/巨噬细胞集落刺激因子(γhGM-CSF)

【商品名】里亚尔

【英文名】LEUBENE

【汉语拼音】Liyaer

【主要成分】

活性成份：重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(γhGM-CSF)。

非活性成份：甘露醇、氨化钠、磷酸氯二钠、磷酸二氯钾、聚乙二醇(4000)、人血白蛋白。

【性状】白色无菌冻干粉针，易溶于水、pH6.9-7.1。

【适应症】用于防治肿瘤病人因化疗、放疗引起的白细胞减少。

【用法用量】癌症化疗或放疗后。3-10µg/kg/d，皮下注射持续5-7天(注意：本药不应与抗癌化疗药同时使用，应在化疗停止24小时后可使用)，根据白细胞回升速度和水平，确定维持量。

用1ml的无菌生理盐水溶解(切勿剧烈振荡)，可在腹部、大腿外侧或上臀三角肌处进行皮下注射(要求：注射后局部皮肤隆起约1cm2，以便药物慢慢吸收)。

【药理作用】里亚尔作用于造血祖细胞，促进其增殖和分化，其

很重要作用是刺激粒、单核巨噬细胞成熟，促进成熟细胞向外周血释放，并能促进巨噬细胞及嗜酸性细胞的多种功能。吸收、分布、消除，自愿者皮下注射3、10或20µg/kg和静注3至30µg/kg可观察到血浓峰值和曲线下面积(AUC)随剂量的增大而增高。皮下注射里亚尔，在3-4小时血浓达到峰值，静注里亚尔的消除半衰期为1-2小时，皮下注射则为2-3小时。

《中国药典》2020版重组人粒细胞刺激因子注射液原液相关蛋白检测国家标准草案公示稿

《中国药典》2020版重组人粒细胞刺激因子注射液原液相关

蛋白检测国家标准草案公示稿

重组人粒细胞刺激因子注射液原液相关蛋白检测

依法测定（通则 0512）。色谱柱采用四烷基硅烷键合硅胶为填充剂（如： C 4 柱，4.6mm×15cm，粒径5μm 或其他适宜的色谱柱），柱温60℃；以 0.1%三

氟乙酸的水溶液为流动相 A ，以0.1%三氟乙酸-90%乙腈的水溶液为流动相 B ；流速为 0.8ml/min ；在波长 215nm 处检测；按下表进行梯度洗脱。

用超纯水将供试品稀释至每1ml 中约含0.5mg ，作为供试品溶液；用超纯

水将对照品稀释至每 1ml 中约含 0.5mg ，作为对照品溶液 A ；取250µl 对照品溶液 A ，加入2.5µl 的 0.45%（m/m ）的过氧化氢溶液，混匀后于23~27℃放置 30 分钟，再加入 1.9mg L-甲硫氨酸，作为对照品溶液 B ；取250µl 对照品溶液A ，加入 0.25mg 的二硫苏糖醇，混匀后于33~37℃温浴 60 分钟，作为对照品溶液 C 。取供试品溶液和对照品溶液 A 、B 、C 各50µl 注入液相色谱仪。

供试品溶液及对照品溶液A 、B 、C 图谱中，粒细胞刺激因子主峰的保留时间约为 23 分钟。对照品溶液 B 图谱中，氧化Ⅰ型峰相对于主峰的保留时间约为0.84，氧化Ⅱ型峰相对于主峰的保留时间约为

0.98，主峰的对称因子不得过

1.8，Hp/Hv 不小于

2.0（Hp 指氧化Ⅱ型峰在基线以上的峰高，Hv 指氧化Ⅱ型峰与主峰之间最低点的高度）。对照品溶液C 图谱中，还原型峰相对于主峰的保留时间约为 1.04 ，与主峰的分离度应不低于 1.5 ，主峰的对称因子不得过

动态显色法检测注射用重组人粒细胞巨噬细胞刺激因子中内毒素的含量

动态显色法检测注射用重组人粒细胞巨噬细胞刺激因子中内毒素的

含量

目的建立定量检测注射用重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（rhGM-CSF）中内毒素的质控方法。方法采用动态显色法，通过标准曲线的可靠性验证和干扰试验，建立检测rhGM-CSF中内毒素的定量方法。结果标准曲线可靠性验证中，曲线的R2均>0.98，标准曲线成立；干扰试验显示，供试品复溶后稀释5倍后加入0.5 EU/ml的标准内毒素作为供试品回收液，经检测其内毒素回收率均接近100%，该稀释倍数下，供试品浓度对内毒素实验的干扰作用较小；另外，日常检测2批供试品的内毒素含量均小于限值，与凝胶法检测结果一致。结论该动态显色法方法可用于rhGM-CSF中内毒素的定量检测。

标签：动态显色法；注射用重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子；内毒素；定量

细菌内毒素是目前医药工业中最普遍和最主要的外源性致热原[1]，它是G-菌细胞壁的脂多糖成分，能够在有机体内作用于单核巨噬细胞，产生肿瘤坏死因子、白细胞介素、前列腺素、凝血素及干扰素等多种细胞因子，这些因子过量时可引起机体发热、心动过速，甚至休克[2]。因此，为了保证注射剂药品的安全使用，各国药典均将热原检测列为重要检查项目，热原控制也成为药品生产质控的重要对象之一[3-4]。

Levin和Bang于1968年发现并建立了鲎试剂法进行体外检测细菌内毒素[5]，该法简便快速、灵敏度高及重现性好的优点使其迅速成为热原检测中家兔法的替代方法[6]。目前所使用的鲎试剂法多为凝胶限值法，《中国药典》对注射用重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（rhGM-CSF）的细菌内毒素检查也采用该法。凝胶法是目前最常用的细菌内毒素检查法，但其是一种半定量测定方法，无法给出准确的含量。因此，为了更好满足药品检查和生产过程质控的严格要求，内毒素检测已逐渐向定量方向发展，其中，动态显色法是目前灵敏度最高和检测范围最宽的定量测定法，该法是通过检测反应产物中对硝基苯氨到达某一预设吸光度所需要的反应时间来检测样品中的内毒素含量[7]。因此，动态显色法已被各国药典逐渐推广并应用于药品中细菌内毒素的定量检测[8]。国内目前采用动态显色法进行内毒素检测的报道尚不多见，本研究参照《中国药典》2010年版细菌内毒素检查法进行试验[9]，并将结果与凝胶法进行比较，探讨并研究动态显色法定量检测rhGM-CSF中细菌内毒素的可行性。

《中国药典》2020版—重组人干扰素α2 类相关产品原液检定增修订内容

重组人干扰素α2 类相关产品原液检定增修订内容

3.1.5 相关蛋白依法测定（通则 0512）。色谱柱采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂（如：C 18 柱，

4.6mm×25cm，粒径 5μm 或其他适宜的色谱柱），柱温为室温；以 0.2%三氟乙酸-30%乙腈的水溶液为流动相 A ，以 0.2%三氟乙酸- 80%乙腈的水溶液为流动相 B ；流速为 1.0ml/min ；在波长 210nm 处检测；按下表进行梯度洗脱。

用超纯水将供试品稀释至每 1ml 中约含 1.0mg ，作为供试品溶液；取供试品溶液和过氧化氢溶液混合，使过氧化氢终浓度为 0.005%（m/m ），室温放置 1 小时，再向每毫升该溶液中加入 L-甲硫氨酸 12.5mg ，作为对照品溶液（2-8℃

时间（分钟）

A （%）

B （%） 0 72 28 1 72 28 5 67 33 20 63 37 30 57 43 40 40 60 42 40 60 50 72 28 60

72

28

《中国药典》2020版—生物制品实验动物质量控制国家药品标准公示稿

生物制品实验动物质量控制

生物制品实验动物分为生物制品生产用实验动物和检定用实验动物。生产用实验动物是指用于生物制品生产的实验动物，检定用动物则是用于生物制品检定的实验动物。

本通则是对生物制品生产用和检定用实验动物微生物与寄生虫

学的质量控制要求。实验动物的管理应符合国家相关要求。

一、实验动物微生物学等级分类

按照实验动物携带微生物与寄生虫情况进行等级分类，分为普通级、清洁级、无特定病原体级和无菌级实验动物。

普通级实验动物[conventional (CV) animal]系指不携带所规定的重要人兽共患病和烈性传染病病原的实验动物。

清洁级实验动物[clean (CL) animal]系指不携带普通级实验动物的病原，并且不携带对动物危害大和对科学研究干扰大的病原体的实验动物。

无特定病原体级实验动物[specific pathogen free (SPF) animal]系指不携带普通级和清洁级实验动物的病原，并且不携带主要潜在感染或条件致病和对科学研究干扰大的病原体的实验动物。

无菌级实验动物[Germ Free (GF) animal]指无可检出的一切生命体的实验动物。

SPF 鸡胚是指由SPF 鸡所产的受精卵，在符合生物制品生产条件下，经孵化后所生成的鸡胚。

疫苗生产与检定应采用适宜级别的实验动物，具体应符合相关各

论的要求。

二、检测要求

1、外观要求实验动物应外观健康、无异常。

2、微生物与寄生虫学检测项目常用实验动物检测要求见表1-8。必须检测项目，在日常检查时必须定期检测；必要时检测项目，在供应商评估或者怀疑有感染时进行检查，根据需要而定。

《中国药典》2020—免疫化学法国家药品标准公示稿

免疫化学法

免疫化学法是利用抗原抗体在适宜条件下发生特异性、可逆性和非共价结合形成抗原-抗体复合物的原理，采用不同技术对抗原或抗体待测物进行定性、定量或定位检测的一种分析方法。该法可广泛用于生物原料药或制剂的鉴别试验、纯度与杂质分析、含量或生物活性/效价测定及稳定性等质量属性的监测。

根据对抗原或抗体是否进行标记，免疫化学法可分为标记免疫化学法和非标记免疫化学法。标记免疫化学法可采用酶、荧光基团、发光基团或放射性核素等作为标记物，常见方法有酶联免疫吸附法、免疫印迹法、免疫荧光分析法、发光免疫分析法、放射免疫分析法等。非标记免疫化学法常见方法有免疫沉淀法、免疫电泳法、凝集反应等。各类方法的优缺点和典型用途见附表。

在免疫化学法的方法开发阶段，可使用不同的实验设计（DOE）考察多种因素和各因素之间的相互作用对实验结果的影响，还可设定适宜的系统适用性要求以判定实验结果的有效性。免疫化学法开发时的主要问题为交叉反应，应通过严格筛选试剂来控制交叉反应，实验中使用的试剂一般有关键试剂和非关键试剂：关键试剂是特定免疫化学法中所特有和专用的，其成分或稳定性有细小变化即会影响实验结果；非关键试剂是指成分上有一定改变也不影响免疫化学法检测性能的试剂。免疫化学法的建立既可采用自制试剂，也可采用商品化的试剂盒。对于采用自制试剂的，抗体的选择至关重要，其决定了方法的特异性和灵敏度，应根据实验的预期用途来选择合适的抗体；另外还需关注自建方法的检测范围、定量区间、检测稀释液的选择、试剂不同批次间的差异性和标准化的操作等。对于采用商品化试剂盒的，需考察供试品的适用性，如用于供试品中低浓度杂质残留等检测时，尤其要关注高浓度制品本身的组分是否会对残留杂质的检测产生干扰；同时还需考察试剂盒推荐的数据拟合模型的适用性，并关注检测稀释液的适宜性和试剂盒不同批次间的一致性。

中国药典2020微生物限度检查

（原创版）

1.2020 版《中国药典》微生物限度检查概述

2.非无菌产品微生物限度的检查要点

3.微生物限度计数及其在药典中的应用

4.药典委发布的相关国家标准草案

5.中药饮片微生物限度检查法

6.美国药典 USP 微生物限度检查概述

正文

2020 版《中国药典》微生物限度检查概述

2020 版《中国药典》是药品质量标准的重要参考文献，其中包含了关于微生物限度检查的详细规定。微生物限度检查旨在确保药物的微生物质量符合标准，从而保证患者的安全和药物的有效性。在药典中，微生物限度检查涉及到非无菌产品、生物制品以及中药饮片等多个领域。

非无菌产品微生物限度的检查要点

非无菌产品的微生物限度检查是药典中的一个重要内容。这类产品在使用过程中，需要确保其微生物数量不超过一定的限度，以避免微生物污染对患者造成不良影响。检查要点包括：菌种及菌液制备、培养基的选择、培养条件、计数方法等。

微生物限度计数及其在药典中的应用

微生物限度计数是药典中关于微生物数量限制的一个重要指标。在药典中，微生物限度计数主要有两种方法：一种是基于菌落形成的计数方法，另一种是基于荧光定量 PCR 法的计数方法。这些方法在药典中得到了广

泛应用，为药物的微生物质量控制提供了重要依据。

药典委发布的相关国家标准草案

为了不断完善和提高药物质量标准，药典委发布了一系列相关的国家标准草案。这些草案包括《微生物限度检查法》、《生物制品》等。这些标准的发布和实施，将有助于进一步提高药物的微生物质量，保证患者的用药安全。

中药饮片微生物限度检查法

重组人粒细胞刺激因子在《中国药典》、《美国药典》和《欧洲药典》中的质量标准对比分析

徐小蓉;郭旺明;黄磊;蔡谨;徐志南;岑沛霖

【期刊名称】《药学研究》

【年(卷),期】2011(030)002

【摘要】目的对比重组人粒细胞刺激因子(rhG- CSF,Filgrastim) 在<中国药典>(2010 年版)、<美国药典>33版初稿和<欧洲药典>(7.0 版)中标准的差异,为国内研发机构在rhG-CSF质量标准的提高研究提供参考.方法按三部药典要求,对rhG-CSF产品进行主要关键指标的检测分析.结果 <中国药典>在对该产品的标准描述上不如<欧洲药典>(7.0 版)和<美国药典>33版初稿,而<美国药典>33版初稿的rhG-CSF标准要求最高.三部药典存在具体内容的区别.结论提高rhG-CSF现行产品质量标准可参照<美国药典>33版初稿.

【总页数】4页(P76-79)

【作者】徐小蓉;郭旺明;黄磊;蔡谨;徐志南;岑沛霖

【作者单位】浙江华阳药业有限公司,浙江,杭州,310053;浙江大学化工系生物工程研究所,浙江,杭州,310027;杭州九源基因工程有限公司,浙江,杭州,310018;浙江大学化工系生物工程研究所,浙江,杭州,310027;浙江大学化工系生物工程研究所,浙江,杭州,310027;浙江大学化工系生物工程研究所,浙江,杭州,310027;浙江大学化工系生物工程研究所,浙江,杭州,310027