药百合多糖的提取工艺研究_储俊
药用百合多糖提取纯化工艺的研究
药用百合多糖提取纯化工艺的研究3何纯莲,张小艳,杨球桢,杨小红3(湖南师范大学医学院,湖南长沙 410006) [摘要] 目的:优化百合多糖提取、纯化工艺。
方法:以水提醇沉法提取百合多糖,s avage 法去蛋白纯化。
在单因素实验的基础上,采用正交试验的方法对影响百合多糖提取、纯化的因素进行优化。
结果:百合多糖的最佳提取工艺为:在65℃下,用15倍药材量的蒸馏水提取3次,每次4h 。
最佳纯化工艺为:样品:氯仿(v ∶v )为3∶2,氯仿:正丁醇为2∶1,振摇时间为15m in 。
结论:优化的百合多糖提取纯化工艺简单、稳定,易于产业化规模生产。
[关键词] 百合多糖;提取;纯化;正交实验[中图分类号]R 28412 [文献标识码]A [文章编号]1673-016x(2008)03-0007-03Study on the Extra ct i on an d Pur i f i ca ti on of L ily Pol ysaccha r i deHE Chun 2lian 1,ZHANG Xiao 2yan 2,Y ANG Q iu 2zhen3(1.Medica l college,H una n N or ma l U niv ersit y,Changsha 410006,China;2.M edica l college,Hunan N or m al U niversity Pha r m acy specia lit y 2004,Changsha 410006,China;3.M edica l college,Hunan N or m al U niversity Pha r m acy specia lit y 2006,Changsha 410006,China )[Abstra ct]O b ject ive The extraction and purifica tion technological conditi on of lily polysaccha ride s were op ti m ized.M e thods U sing the wate r extrac tion e thanol precipita ti on m ethod extract lily polysaccharides,savage m ethod r e moving pr oteins .On the ba sis of single 2fac t or experi ments,the extr acti on and purificati on teacnological conditions of polysaccharides fr om lily we r e op ti m ized by vertical 2me thod .R esu lt s The extrac tion technica l of lily polysaccha ride s is selected as f ollowing :15ti m es of distilled wa ter a s the s olvent,extrac tion f or 3ti m es and 4h for each ti me .The purification technical is se lected a s f oll ow ing:Sa mp le :chlor of or m (v ∶v )is 3∶2,chl or of or m:nbu 2tanol is 2∶1,15m in stirring ti m e .C on clusi on The opti m ized extr acti on technol ogy is stable and feasible .[Key words]lily polysaccha rides;extracti on;purification;vertical 2me thod 药用百合为百合科百合属植物百合的干燥肉质鳞叶,性甘味平,具有润肺止咳,宁心安神的功效[1],在现存的最早一部本草专著《神农本草经》上就有对其防病治病的药理性有记载,现代医学研究表明,百合具有抗癌、抗疲劳、耐缺氧、止咳等作用[2],含有多种微量元素、维生素B 1、B 2等营养物质、多糖、皂苷[3-7]、生物碱等抗癌活性成分和促进细胞免疫功能的生物功能活性成分[7-9]。
百合多糖的研究进展
有效；同时酶提多糖对于人红细胞的脂质过氧化有明显抑制， 而水提多糖的抑制作用并不明显。另外他们提取纯化得到３ 种百合多糖（ＬＢＰ一１，ＬＢＰ一２，ＬＢＰ一３重均相对分子质量 ５３ ７００，１７ ９００，１３ ４００），并发现ＬＢＰ一３是其主要的抗氧化活 性组分。 ３．２纯化百合多糖的药理作用 纯化百合多糖也具有多方 面的药理作用。赵国华等分离出均一多糖（ＬＢＰＳ—ｌ，重均相 对分子质量为３０ ２００）在体内具有明显的抗肿瘤作用，在等于 或高于５０ ｍｇ／ｋｇ剂量的ＬＢＰＳ一１对移植性黑色素Ｂ。６和 Ｌｅｗｉｓ肺癌的抑制效果都达到了显著以上水平，中等剂量 （１５０ｍｓ／ｋｇ）作用最佳，抑瘤活性呈量效相关性。
（收稿日期：２００５４３４－２６）
新型免疫调节剂来氟米特的临床 应用
孙夫东，金春平，许桂月（山东省平邑县人民医院药剂科
山东平邑２７３３００） 中图分类号：Ｒ９７９．５
文献标识码：Ａ
文章编号：１００４－２４０７（２００５）０６４）２８５４）２
来氟米特（Ｌｅｆｌｕｎｏｍｉｄｅ）商品名爱若华（Ａｒａｖａ），是一种新 型的免疫调节剂，能改变类风湿关节炎（ＲＡ）病程及减轻骨质 破坏的药物。现就其药理及临床应用作一综述。 １药理作用
研究［Ｊ］．食品科学，２００２，２３（２）：８７—８９． ［４］滕利荣，孟庆繁，刘培源，等．酶法提取百合多糖及其体
百合科药用植物多糖研究进展
多糖又称多 聚糖 ， 是由 １ Ｏ个 以上 的单糖 通过糖苷键聚合 而 成的天然 高分 子化合物 ， 在 自然界高等植 物 、 藻类 、 细菌类 及动物体 内均有多糖存在。２ Ｏ世纪 ６ ０年代后 ， 人们对多糖 的 研究逐 渐深 入 ， 大量研究证实 ， 多数多糖 不仅具有重要 的药物 活性 ， 而且有一部分多糖具有营养保健作用ｌ １ ｌ 。百合科植物 多 糖存在 于植 物的各器官中 ， 以果实 、 种仁（ 中草药类多为全 草 ） 多糖 的提取 与测 定研 究较 多 ，对此类多糖药用机理的深入研 究较少 。 １ 多 糖 的 提 取分 离纯 化 ［ ｌ 植 物多糖 因存在部位不 同有所差异 ，从 种仁 中提取多糖 常需脱脂处理 ， 其他部位 的预处理与否各研究报道不 同。目前 有 多种 提取方法 ， 如酶法 提取 ， 超 声波 提取 ， 微 波提 取 、 浸提 等。得到的多糖提取液可直接过滤或离心除去不溶物 ， 浓缩后 根 据多糖难 溶于有机溶剂的特性加入一定体积可与水互溶 的 有机溶 剂（ 如 乙醇 、 丙酮等 ） ， 使多糖沉淀 ， 经反复溶解与沉 析 ， 干燥后 可得粗多糖。多糖是极性大分子 ， 所以， 从植物 中提取 多糖一般采用不 同温度的水 、 稀碱或稀 盐溶液 。由于水 提耗 时 且效率低 ， 酸碱提取易破坏多糖 的立体结构及活性 ， 故发展 高 效、 维持多糖结构和生物活性 的方法非常重要日 。提取百合 多 糖通 常采用 水提醇沉法。影响热水浸提多糖的因素主要有提 取 时间 、 提取次数 、 溶剂体 积 、 浸提温度等。 粗 多糖 中往往混杂着蛋 白质 、 色素 、 低 聚糖及无机盐等杂 质 ，须 分别 除去 。利 用不 同多糖分 子大小和溶解 度不 同而分 离， 常用季铵盐沉淀法和有机溶剂沉淀法。还可用葡聚糖凝胶 和琼脂糖凝胶 以不 同浓度 的盐溶液 和缓冲溶液作 为脱色剂 ， 采 用凝胶柱层 析法使不 同大小 的多糖 分子得到分 离纯化 ， 但 该方法 不适 于粘多糖 的分离 。另外 ， 还 可用交换剂 Ｄ Ｅ Ａ Ｅ 一 纤 维素 和 Ｅ Ｃ Ｔ Ｅ Ｏ Ｌ Ａ一 纤 维素 ， 洗脱剂用不 同浓度碱溶液 、 硼砂溶 液、 盐溶液 ， 具有 可吸附杂质 、 纯化多糖 的优点 ， 并适用于分离 各种酸性 、 中型多糖和粘多糖 。 纯化是将多糖混合物分离为单一 的多糖组分 ，纯化方法 有有 机溶剂分级 沉淀法 、 季胺盐 沉淀法 、 柱层析 法 、 盐 析法及 制备性 区带 电泳法等。随着纯化技术 的发展 ， 近年来还 出现 了 膜分离技术 。 ２ 含量 测定 多糖 的含量测定可分为两大类 。一类是直接 测定多糖本 身， 如高效液相色谱法和酶法 ， 另一类是利用组成 多糖 的单糖 缩合反 应而建立 的方法 ， 如苯酚一 硫酸法 、 葱酮一硫 酸法等 。 国内多采用苯酚——硫 酸法测总糖含 量 ， 此法简单 、 快速 、 灵 敏度高 、 重现性好 ， 且无需多糖纯品和贵重仪器。杨林 莎ｐ 】 采用 此法测得百合中多糖 的平均含量为 １ ６ ． ６ ９ ％。 需要强调的是 ， 这 种方法所测定的是 总糖 的含量而不是总多糖的含量 。因此 ， 首 先应测定样 品中游离 的单糖含量 ，然后将总糖 的含量减去游 离单糖的含量 ， 即为总多糖得 率。 ３ 百合科植物多糖的生物活性 ３ ． １ 百 合多糖抗 氧化活性 ： 百合 是传统药食 兼用佳 品 ， 具 有多 种 药理 活性成分 。苗 明三州 研究百合多糖 ， 对 Ｄ 一 半乳糖致衰老 小 鼠的抗 氧化作用得 出结论 ： 与模 型组相 比 ， 大、 小剂 量百合 多糖 均能显著提高衰老小 鼠血 中的 Ｓ Ｏ Ｄ（ 超氧化物歧化酶 ） 、
百合科药用植物多糖研究进展_王娜娜
百合科药用植物多糖研究进展△王娜娜薛培凤＊魏慧耿婕李凤英（内蒙古医科大学药学院呼和浩特０１０１１０）摘要：多糖是一种结构复杂的高分子化合物，百合科植物中含有大量的多糖类物质。
本文对百合科植物多糖的提取分离纯化、含量测定及生物活性进行了综述。
关键词：百合科植物多糖提取含量测定生物活性中图分类号：Ｒ２８６文献标识码：Ａ文章编号：１６７２－８３５１（２０１３）０９－００４６－０２多糖又称多聚糖，是由10个以上的单糖通过糖苷键聚合而成的天然高分子化合物，在自然界高等植物、藻类、细菌类及动物体内均有多糖存在。
20世纪60年代后，人们对多糖的研究逐渐深入，大量研究证实，多数多糖不仅具有重要的药物活性，而且有一部分多糖具有营养保健作用[1]。
百合科植物多糖存在于植物的各器官中，以果实、种仁（中草药类多为全草）多糖的提取与测定研究较多，对此类多糖药用机理的深入研究较少。
1多糖的提取分离纯化[1]植物多糖因存在部位不同有所差异，从种仁中提取多糖常需脱脂处理，其他部位的预处理与否各研究报道不同。
目前有多种提取方法，如酶法提取，超声波提取，微波提取、浸提等。
得到的多糖提取液可直接过滤或离心除去不溶物，浓缩后根据多糖难溶于有机溶剂的特性加入一定体积可与水互溶的有机溶剂（如乙醇、丙酮等），使多糖沉淀，经反复溶解与沉析，干燥后可得粗多糖。
多糖是极性大分子，所以，从植物中提取多糖一般采用不同温度的水、稀碱或稀盐溶液。
由于水提耗时且效率低，酸碱提取易破坏多糖的立体结构及活性，故发展高效、维持多糖结构和生物活性的方法非常重要[2]。
提取百合多糖通常采用水提醇沉法。
影响热水浸提多糖的因素主要有提取时间、提取次数、溶剂体积、浸提温度等。
粗多糖中往往混杂着蛋白质、色素、低聚糖及无机盐等杂质，须分别除去。
利用不同多糖分子大小和溶解度不同而分离，常用季铵盐沉淀法和有机溶剂沉淀法。
还可用葡聚糖凝胶和琼脂糖凝胶以不同浓度的盐溶液和缓冲溶液作为脱色剂，采用凝胶柱层析法使不同大小的多糖分子得到分离纯化，但该方法不适于粘多糖的分离。
百合多糖的提取方法
百合多糖的提取方法作者：袁泽玥张典崔迎春来源：《山东青年》2020年第05期摘要：百合是一种传统中药材。
百合中含有多糖、多酚、皂苷和生物碱等多种生物活性成分，其中百合多糖具有重要的临床药用价值，可抗肿瘤、抗疲劳、抗氧化、降血糖以及免疫调节等。
本文通过文献回顾，综述近年来百合多糖的提取方法，为百合的深入研究提供重要的指导意义。
关键词：百合;多糖;多糖提取;综述百合为百合科植物卷丹Lilium lancifolium Thunb.、百合Lilium brownie F.E.Brownvar.viridulum Baker 或细叶百合Lilium pumilum DC的干燥肉质鳞叶。
百合是“药食两用”的植物，据《本草纲目》记载：百合味甘、性寒，作用于肺经和心经，具有润肺滋阴和清心安神的作用，是我国传统中药材不可或缺的珍贵药物。
我国是百合最主要的起源地，分布于河北、河南、山西、陕西、安徽、浙江、江西、湖北、湖南等地，甘肃省更是国内主要的百合产地。
本文综述了百合多糖的提取方法，为百合的开发利用以及深度研究提供参考。
1 百合多糖的提取方法1.1 热水法滕利荣等[1]研究了热水法提取百合多糖（Lily polysaccharide ，LP）。
分析实验数据显示，提取百合多糖的最佳条件为：浸提时间6h，加水比70：1，浸提温度60℃，在以上三个条件下提取率可高达10.87%。
1.2 回流法杨林莎等[2]依据文献报道，并且在单因素实验的基础上对提取次数、提取时间、浸提温度、溶剂体积这四个身分采用正交试验法进行优选。
对百合多糖提取造成影响因素的主次顺序为浸提温度>溶剂体积>提取次数>提取时间，发现了提取百合多糖的最佳工艺为：浸提温度65℃、溶剂体积1.5倍量、提取次数3次、提取时间4h。
1.3 溶剂法刘成梅等[3]进行正交试验对温度、固液比时间进行优选，发现了影响百合多糖提取率的主次顺序为温度>时间>固液比，且得出提取百合多糖的最佳工艺条件为固液比1：5、时间2h、温度95℃。
百合多糖提取的影响因素研究
百合多糖提取的影响因素研究作者：刘成梅， 付桂明， 涂宗财， 万茵作者单位：江西南大中德食品工程中心，330047刊名：食品科学英文刊名：FOOD SCIENCE年，卷(期)：2002,23(2)被引用次数：31次1.净家麒牛膝多糖工艺研究 1995(11)2.吴梧桐银耳孢子多糖TF-A、TFB、TF-C的分离、纯化及组成单糖的鉴定 1984(04)3.廖周坤超临界萃取藏雪灵芝中总皂甙及多糖的研究4.王叔淳食品分析数理统计与质量控制 19915.国家药典委员会中华人民共和国药典(二部) 19856.郑建仙功能性食品 19991.唐明.秦丹.刘沙.Tang Ming.Qin Dan.Liu Sha百合多糖的提取与纯化研究进展[期刊论文]-农产品加工·创新版2009(10)2.周静华.李汉伟.ZHOU Jing-hua.LI Han-wei正交试验优选大理百合多糖提取的工艺[期刊论文]-食品研究与开发2010,31(4)3.储俊.许娜.凤先哲.孙玉军.周正义.Chun Jun.Xu Na.Feng Xianzhe.Sun Yujun.Zhou Zhengyi药百合多糖的提取工艺研究[期刊论文]-中国林副特产2009(1)4.周静华.李芬.汪祖芳大理百合中多糖的提取与总糖含量的测定[期刊论文]-临床和实验医学杂志2006,5(6)5.李琼.何纯莲.李志光.李明松.刘海林.LI Qiong.HE Chun-lian.LI Zhi-guang.LI Ming-song.LIU Hai-lin响应面优化百合多糖提取条件[期刊论文]-食品研究与开发2010,31(12)6.郑卫红.张小玲.ZHENG Weihong.ZHANG Xiaoling湖州药用百合和兰州食用百合多糖提取及含量测定比较[期刊论文]-中国当代医药2010,17(17)7.罗金花微波辅助萃取百合多糖的工艺研究[期刊论文]-宜春学院学报2008,30(4)8.何纯莲.张小艳.杨球桢.杨小红药用百合多糖提取纯化工艺的研究[期刊论文]-湖南师范大学学报（医学版）2008,5(3)9.吴晓斌.任凤莲.邱昌桂.吴泓毅.WU Xiao-bin.REN Feng-lian.QIU Chang-gui.WU Hong-yi百合皂甙多糖的连续提取工艺研究[期刊论文]-广州化学2006,31(2)10.赵国华.李志孝.陈宗道百合多糖的化学结构及抗肿瘤活性[期刊论文]-无锡轻工大学学报2002,21(1)1.彭程.周晓琛.张晓东百合提取物中苯丙氨酸解氨酶的固定化研究[期刊论文]-西北民族大学学报：自然科学版2012(2)2.李新华.弥曼.李汾.任利君.王多宁.杨颖百合多糖免疫调节作用的实验研究[期刊论文]-现代预防医学 2010(14)3.李汾.袁秉祥.弥曼.任利君.李新华.王多宁.王颖纯化百合多糖抗肿瘤作用和对荷瘤小鼠免疫功能的影响[期刊论文]-现代肿瘤医学 2008(2)4.弥曼.任利君.梅其炳.李汾.王多宁.刘绍国百合多糖对小鼠免疫功能的影响[期刊论文]-第四军医大学学报。
百合多糖提取和功能性活性评价
百合多糖提取和功能性活性评价百合（Lilium spp.）是野生花卉之一，广泛种植和栽培于世界各地，被广泛用于食品、医药和化妆品等领域。
百合花中含有许多种类的化学成分，其中多糖是其中一种重要的成分。
百合多糖是由多种单糖组成的复合多糖，具有多种保健和药用价值。
因此，研究百合多糖的提取和功能性活性评价具有重要的意义。
一、百合多糖的提取百合多糖的提取方法有很多种，常用的有水提法、醇提法和酸水提法等。
其中，酸水提法是一种常用的提取方法。
其具体步骤如下：1.将干燥的百合花材料粉碎，并使用适量的水浸泡2-3小时。
2.将浸泡好的百合花材料煮沸，加入适量的醋酸和HCl，使溶液pH值在3-5之间，然后继续沸腾3-4小时。
3.离心，将上清液收集起来。
4.用等量的酒精沉淀百合多糖，再用酒精洗涤2-3次，最后干燥制备。
二、百合多糖的功能性活性评价1.抗氧化活性百合多糖具有抗氧化作用，可以通过清除自由基和抑制氧化反应来预防和治疗氧化应激相关疾病。
可以通过多种方法来评价百合多糖的抗氧化活性，如DPPH自由基清除试验、ABTS自由基清除试验和还原力试验等。
其中DPPH自由基清除试验是最常用的方法之一。
2.免疫调节作用百合多糖具有免疫调节作用，可以增强机体的免疫功能，调节免疫系统的平衡。
可以通过评价其对T淋巴细胞的增殖活性、调节细胞因子的表达等指标来评价其免疫调节作用。
其中，T淋巴细胞增殖活性试验是评价其免疫调节作用的重要方法之一。
3.抗肿瘤作用百合多糖具有抗肿瘤作用，可以抑制肿瘤细胞的生长和扩散，预防和治疗肿瘤。
可以通过评价其对肿瘤细胞的细胞毒作用、抑制肿瘤细胞的迁移和侵袭等指标来评价其抗肿瘤作用。
其中，细胞毒作用试验是评价其抗肿瘤作用的重要方法之一。
总结百合多糖是一种具有多种保健和药用价值的复合多糖。
其提取方法有多种，酸水提法是其中一种常用的提取方法。
通过评价其抗氧化、免疫调节和抗肿瘤等功能性活性，可以更好地研究其保健和药用价值。
百合多糖超声提取工艺条件优化
百合多糖超声提取工艺条件优化Study on the Optimization of Ultrasonic Extracting Technique of Polysaccharide from Lilium brownii◎ 陈 杰1，周 芳2（1.陕西孙思邈高新制药有限公司，陕西 咸阳 712021；2.陕西理工大学生物科学与工程学院，陕西 汉中 723000）Chen Jie 1, Zhou Fang 2(1.Shaanxi Sun Simiao High-Tech Pharmaceutical Co., Ltd., Xianyang 712021, China;2.College of Biological Science and Engineering, Shaanxi University of Technology, Hanzhong 723000, China)摘 要：为研究百合多糖超声波提取的最佳工艺，从超声功率、提取温度、提取时间、固液比4个方面对提取率进行了分析。
用蒽酮-硫酸法测定多糖的含量，在单因素试验的基础上通过正交试验筛选出最佳提取工艺条件。
结果表明，正交试验得出百合多糖的最佳提取工艺为：固液比1∶50、超声功率420 W、提取温度60 ℃、提取时间60 min，此条件下百合中多糖含量为12.54%。
关键词：百合；多糖；超声提取；正交试验Abstract ：To study the ultrasonic extraction technology and contents of the polysaccharide from the Lilium brownii , from the ultrasonic power, extraction temperature, extraction time and solid-liquid ratio on extraction yield are analyzed in four aspects. According to the single factor experiment and orthogonal test ，the optimum conditions for supersonic extraction of polysaccharide from the Lilium brownii were determined. The content of polysaccharides in garlic was determined by the method anthrone-sulfuric acid. The results showed that the orthogonal test showed that supersonic power was 420 W ，extraction time was 60 min ，extraction temperature was 60 ℃ and the solid-liquid ratio was 1∶50. Theextraction percent of polysaccharides from Lilium brownii was 12.54%.Key words ：Lilium brownii ; Polysaccharide; Supersonic extraction; Orthogonal test中图分类号：R284百合为百合科百合属百合的鳞茎，营养丰富。
百合多糖的研究进展
百合多糖的研究进展摘要：本文主要通过对百合多糖的提取纯化工艺、结构分析、药理作用进行整理分析。
指出在百合多糖研究过程中的一些不足，探讨百合多糖将来的的研究方向。
关键词：百合多糖；药理作用The research progress of Lily- PolysaccharideHE Hong,LIU Yuehong,LIU Jie.(Dong zhi men Hospital Beijing University of Chinese Medicine,Beijing100700,China)Abstract: This article collects and analyze that the extraction 、depuration 、 structural analysis and pharmacologic actions of Lily- Polysaccharide。
Indicating that the shortage of the research procedure, and approaching the trend of future' s research.Keywords: Lily- Polysaccharide pharmacological effects原发性肝癌是最常见的消化系统恶性肿瘤之一,当今在治疗肝癌的方法上不断改进，主要有手术切除、进行肝脏移植、放化疗、细胞免疫法治疗等，治病同时还要考虑病人的术后生存率。
诸多因素，对肝癌的治疗仍然很局限，特别在预防方面和治疗手段的选择上都不太成熟。
近年来[2]，一些中药材所含的植物多糖的多种显著的生物活性和药理作用备受关注重视。
百合中含有含秋水仙碱、皂苷、百合多糖等多种天然活性成分，其中百合多糖是其主要功能因子之一，具有多种药理作用：抗肿瘤作用，降血糖作用,抗氧化作用，免疫调节作用，抗疲劳、抗应激作用。
这是多糖类所共有的功效[4]。
药百合多糖的提取工艺研究
药百合多糖的提取工艺研究
储俊;许娜;凤先哲;孙玉军;周正义
【期刊名称】《中国林副特产》
【年(卷),期】2009(000)001
【摘要】对药百合多糖的提取工艺进行了探索性研究,选取与比较了固液比、提取时间、提取温度3个因素对药百合粗多糖提取率的影响,并采用L9(33)正交设计法优化提取条件, 确定了最佳的提取条件为:提取温度70℃、固液比1∶15、提取时间4h.选择此条件提取药用百合粗多糖, 提取率为1.25%.
【总页数】3页(P15-17)
【作者】储俊;许娜;凤先哲;孙玉军;周正义
【作者单位】安徽科技学院生命科学院,安徽,凤阳,233100;安徽科技学院生命科学院,安徽,凤阳,233100;安徽科技学院生命科学院,安徽,凤阳,233100;安徽科技学院生命科学院,安徽,凤阳,233100;安徽科技学院生命科学院,安徽,凤阳,233100
【正文语种】中文
【中图分类】TQ46
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5.百合多糖提取工艺研究进展 [J], 宁娜;韩建军;郁建生
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百合多糖提取的影响因素研究
食品科学
抑菌的互补作用。 < 结论
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又称乳链菌肽或乳酸链球菌素 乳球菌肽 . *898: / ， 或尼森。它是由某些乳酸乳链球菌在代谢过程中合 成和分泌的具有很强杀菌作用的小肽。 *898: 的分子 式 ;,<) =##! >)" ?" ，由 )< 个氨基酸残基组成。在天然状 态下有 *898:@ 和 *898:A 两种形式，后者的抑菌能力 比 前 者 强 ， *898: 有 较 强 的 的 热 稳 定 性 ， 并 耐 酸 。 *898: 能抑制大部分革兰氏阳性菌及其芽胞的生长和 繁殖，如葡萄球菌属、链球菌属、乳酸杆菌属、梭 状芽孢杆菌属等。 *898: 对微生物的作用机制是 *898: 在细胞膜上吸附，然后在细胞膜上形成孔洞，从而 引起胞内物质泄露，导致细胞解体死亡。但 *898: 对 革兰式阴性菌、酵母菌和霉菌均无作用。 复合磷酸盐对霉菌和芽孢菌有抑制作用，如磷 酸三钠对霉菌有抑制作用，六偏磷酸钠对肉毒梭菌 具有抑制作用。 菌肽和复合磷酸盐共同使用延长消毒牛奶保质 期具有明显的效果，可能是乳球菌肽和复合磷酸盐
在百合多糖提取工艺中，诸多因素影响其得率， 已不显著，且蛋白质易溶出，增加了去蛋白的难度 经初步实验选定提取温度、固液比、提取时间为主要 因素， 采用 :/ 7 ( 8 正交表 ， 以酶法与 ABCDEB 联用法去
( I.J
蛋白、 透析、 有机溶剂洗涤后的百合多糖得率为指标， 低温浸提虽对多糖活性影响较小，但得率太低。在 进行正交实验。
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LM89 BTBKY 9LQH8KH Z[ &YLM&S&:T’ K\BKY8CK:L &O 0I . )) / L& T:T’[]K 9K^KYT’ OTRL&Y9 &O TOOKRL8:S 89HTL8&: R&:_
药用百合多糖研究进展
药用百合多糖研究进展
李琼;李志光;刘海林;李明松
【期刊名称】《天津化工》
【年(卷),期】2009(023)004
【摘要】多糖是一种结构复杂的高分子化合物.本文就药用百合多糖的研究近况,包括提取、纯化、含量测定、结构分析以及药理作用等作一综述,并对以后的研究提出了展望.
【总页数】3页(P5-7)
【作者】李琼;李志光;刘海林;李明松
【作者单位】湖南农业大学理学院,湖南长沙,410128;湖南农业大学理学院,湖南长沙,410128;湖南农业大学理学院,湖南长沙,410128;湖南农业大学理学院,湖南长沙,410128
【正文语种】中文
【中图分类】Q949.71+8.23
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收稿日期:2008-08-041)基金项目:安徽科技学院引进人才专项/药百合组织培养及脱毒的研究0(ZRC2007143)药百合多糖的提取工艺研究1)储俊,许娜,凤先哲,孙玉军,周正义(安徽科技学院生命科学院,安徽凤阳233100)摘 要:对药百合多糖的提取工艺进行了探索性研究,选取与比较了固液比、提取时间、提取温度3个因素对药百合粗多糖提取率的影响,并采用L 9(33)正交设计法优化提取条件,确定了最佳的提取条件为:提取温度70e 、固液比1B 15、提取时间4h 。
选择此条件提取药用百合粗多糖,提取率为1125%。
关键词:药百合;多糖;正交试验Extraction Technology of Amylase from Lilium spp.Chun Jun,Xu Na,Feng Xianzhe ,Sun Yuju n,Zhou Zhengyi(School of Life S cience,Anhui Science and Technology University,Fengyang 233100)Abstract:T he ext ract ing technique of polysaccharide from L il ium spp.was studied in this paper.Poly -saccharide was extracted by wat er.T he time,temperat ure and water weight ratio were considered as the main factors affecting this ext ract ion.T he experiment s were first done on single factors.T hen the ort hog -onal layout L 9(33)was used.Result s showed t hat the high ext ract ion rat e was 1125%at optimum cond-i t ions of t he w at er w eight ratio was 1B 15,the t emperature was 70e and t he t ime was 4h.Key words:L ilium spp.;Polysaccharide;Extraction rat e 药百合为百合科百合属植物,其干燥肉质鳞茎味甘、微苦、性微寒、内含丰富的淀粉、蛋白质、脂肪、维生素、胡萝卜素、多种活性多糖以及微量的秋水仙碱、钙、铁、磷等。
现代药理学表明,其具有镇痰止咳、滋阴润肺、清心安神作用,其水溶性成分多糖能够作用于机体的细胞免疫系统,促进细胞免疫功能[1-3]。
同时,药用百合耐旱、抗冻、抗风,可与林粮间作,适种范围特别广,具有很大的经济价值和广阔的应用前景。
植物多糖具有非常重要与特殊的生理活性,如参与生物体的免疫调节功能、降血糖、降血脂、抗炎、抗疲劳、抗衰老等多种多样的生物学功能。
为此,试验选取固液比、提取时间、提取温度3个因素,在单因素试验的基础上,采用L 9(33)正交试验设计,进行三因素三水平试验,对药百合水溶性粗多糖的提取影响因素进行探索性的研究,以期为药百合资源的进一步开发利用和药百合多糖的生物学活性研究奠定基础。
1 材料与方法1.1 试验材料1.1.1 供试材料药百合,来自安徽霍山县当地栽培品种。
1.1.2 主要仪器HH -4数显恒温水浴锅(国华电器股份有限公司);T DL -5离心机(上海安亭科学仪器厂);FA/JA 电子分析天平(上海精密科学仪器有限公司);冷冻干燥机(北京博医康实验仪器有限公司);高速万能粉碎机(天津泰斯特仪器有限公司)。
1.1.3 试剂95%乙醇、氯仿、正丁醇、无水乙醇、丙酮、无水乙醚均为国产分析纯。
试验用水为自制蒸馏水。
1.2 试验方法1.2.1 药百合多糖的提取流程药百合鲜品y 乙醇回流y 离心分离y 上层清液醇沉y 加水溶解y 离心分离y 上层清液y 醇沉y 沉淀y 淋洗y 干燥y 百合粗多糖y 加水溶解y Se vag 试剂(氯仿B 正丁醇=4B 1)萃取y 上层清液减压蒸馏y 醇提y 沉淀y 无水乙醇、丙酮、无水乙醚顺序洗涤y 干燥y 百合粗多糖。
准确称取10g 药百合鲜品,洗净后按设计的固液比加入蒸馏水,置于恒温水浴锅中浸提,将浸提后的滤液在3000r 常温下离心10min,取上清液,冷却后加入3倍体积的95%乙醇,然后置于低温放置30min,使其沉淀完全,去上清然后待沉淀完全干燥后,将沉淀溶解于水中,在3000r 常温下离心10min 。
再采用Sevage 法去除蛋白。
除蛋白后的沉淀物依次用无水乙醇、丙酮、无水乙醚各淋洗1次,将洗过的沉淀物溶于水后在15第1期(总第98)中国林副特产N o 11(GSNO 198)2009年2月Forest By -Pro duct and Speciality in China Feb 12009冷冻干燥机上进行冷冻干燥得药百合粗多糖,称其重量,计算粗多糖提取得率。
1.2.2药用百合多糖提取的单因素试验分别从固液比、浸提时间、浸提温度3个方面进行单因素试验,以药百合多糖的提取率(%)作为指标,探讨不同因素、同一因素的不同水平对药百合多糖提取率的影响,为正交试验设计提供依据。
(1)提取温度的影响。
在确定提取时间为1h、固液比为1B5不变的条件下,比较提取温度分别为50、60、70e对药百合多糖提取率的影响。
(2)固液比的影响。
在确定提取温度为60e、提取时间为1h不变的条件下,比较固液比分别为1B5、1 B10、1B15对药百合多糖提取率的影响。
(3)提取时间的影响。
在确定提取温度为60e、固液比为1B5不变的条件下,比较提取时间分别为1、2、4h对药百合多糖提取率的影响。
1.2.3正交试验在以上单因素试验的基础上,按L9(33)正交表设计表头,以提取温度(A)、固液比(B)、提取时间(C)为因素,以多糖得率为指标进行正交试验。
正交试验的因素水平见表一所示。
温度:指药百合进行热水浸浴处理时水的温度固液比:指在进行新鲜药百合的捣碎处理时,药百合和加水量的比时间:指药百合进行浸浴处理的时间表1因素水平表水平A(温度/e)B(固液比)C(时间/h)1501B51102601B102103701B154102结果与分析2.1单因素对药百合多糖得率的影响2.1.1提取温度的影响表2不同温度下的多糖得率温度/e固液比时间/h多糖得率/% 501B511001096601B511001280701B511001320图1温度的影响由表2可见,温度对药用百合多糖提取的影响较大。
在所选取的温度下,多糖得率是呈上升的趋势。
结合图1的曲线可见,在50~60e范围内,多糖得率的增长较快,而在60~70e时,增长趋势较为缓慢。
在温度过低时,溶剂的渗透能力和溶解能力降低,多糖不能有效溶出;在温度过高时,多糖得率增长缓慢。
综合考虑,选取60~70e较合适。
2.1.2固液比对多糖得率的影响表3不同固液比下的多糖得率固液比温度/e时间/h多糖得率/%1B560110012801B1060110015071B156011011040图2固液比的影响如表3所示,在所取的固液比下,药百合的多糖得率仍呈上升趋势。
由图2可见,固液比对多糖提取的影响变化趋势较缓慢。
固液较低时,由于加水量少,多糖浓度过高,难以完全溶解于水中,不利于多糖的浸出,因此提取率低。
随着加水量的增多,多糖的浸出率增加,但增加量逐渐趋于缓慢,若加水量过多,则浸提液过多,不利于以后的浓缩,且能耗增加,效率降低。
因此选取1B10至1B15是较好的固液比。
2.1.3提取时间的影响表4不同时间下的多糖得率时间/h温度/e固液比多糖得率/%110601B501280210601B501353410601B501307图3时间的影响从表4可见,浸提时间在2h内,药百合多糖的得率随着浸提时间的延长而增加。
当浸提时间从2h提高到4h时,多糖的得率有所降低。
这可能是因为在被浸提物与提取液在未达到扩散平衡前,浸提时间越长也就意味着被提物质与提取液相互作用时间越长,因此多糖得率越高。
当时间到了2h后,此时被提物与提取液两者162009年中国林副特产第1期扩散已接近平衡,继续延长浸提时间影响药百合的多糖得率。
结合图3,选取提取时间为2~4h为宜。
此外,醇沉时间不宜过长,一般以24h为宜,否则会有部分多糖复溶,这是因为多糖是一种多元醇,呈弱酸性,乙醇的加入使溶液的酸度增加,酸性物质处于低pH条件时可以转溶于有机溶剂中。
2.2正交试验结果与分析在药百合多糖提取工艺中,诸多因素影响其提取率,经单因素试验选定提取温度、固液比、提取时间为主要因素。
采用L9(33)正交表(见表1),药百合多糖提取率为指标,进行正交试验。
表5正交试验试验序号A(温度/e)B(固液比)C(时间/h)多糖得率/% 1111010962122011323133012504212013535223018506231110407 8 9 K1 K2 K3 R333011590174811041018821230158301558018070124931201609015380180101263113020169211130结果表明,从极差R值的大小,可得出温度(A)是主要因素,其次是时间(C),最后是固液比(B),即各因素作用主次顺序是:A>C>B。
3讨论3.1方差分析通过方差分析,得到温度对药百合多糖提取具有显著的影响,且温度对药百合多糖提取的影响最大。
温度升高,多糖提取速度加快,得率增加。
但温度高于70e 时,多糖的增加已不显著,且蛋白质易容出,增加了去蛋白的难度和工作量,另外升高温度至沸腾在长时间内可能会影响多糖的活性,所以温度不能过高。
综合考虑提取率、多糖活性,70e是最好的温度选择。
固液比对药百合的多糖提取没有显著的影响,当固液比太低时,会增加真空浓缩的工作量,故选取1B15为宜。
提取时间对药百合的多糖提取影响也不显著,但当时间超过4h 后,大部分的多糖包括果胶、粘液质等已经溶出达到平衡,所以多糖得率的提高很少,因此,选取4h为宜。
综上所述,可获得较好的因素水平,即提取温度为70e、料液比1B15、提取时间为4h。
3.2过程讨论植物中多糖的提取多采用水、稀酸或稀碱做浸提剂,但由于酸和碱易引起糖苷键的断裂,造成多糖得率的降低,故试验采用水做提取剂。
多糖是一种极性大分子,不溶于乙醇、乙醚、丙酮等有机溶剂,采用这些有机溶剂做沉淀剂,将提取液中的多糖沉淀下来,并且能去除部分色素。