4维生素分析测定方

具有回收率良好，操作简便的优点，还可克 服分光光度法稳定性较差的缺点，能符合药物原 料，制剂含量测定的要求。
缝管原子捕集原子吸收光谱法
原理：在上述火焰原子吸收法测定Co的基础 上，利用缝管原子捕集技术（即在火焰中浓缩 待测原子的预富集技术），提供极高的原子密 度，从而显著提高灵敏度。
特点： 灵敏度高，所需样品少。
具有线性范围宽 ，重现性好，快速省时，所用 试剂少等优点，利用本法可测定片剂和针剂中 VB1含量。
维生素B2 化学结构
CH2OH
(CHOH)3
CH2
CH3
NNO
CH3
NLeabharlann NHO药典方法 紫外分光光度法
用于维生素B2原料药、片 剂、注射剂的含量测定。
其他方法
原子吸收光谱法
原理: 利用高碘酸对相邻羟基的氧化作用有很强的专属
PAN—Co配合物示波测定
原理：
1-(2-吡啶偶氮)-2-萘酚(PAN)是一种萃取光度法和 光度测定或荧光测定A13+、Cd2+、Co2+、Ga3+等金属 离子的显色剂。在适宜的pH值条件下，PAN能与 Co2+等多种金属离子形成有色配台物。利用PAN可在 NaOH底液中产生灵敏切口且当向其中加入含Co2+的 溶液时，PAN的切口随Co2+的加入量线性降低的示波 特性，对维生素B12中的钴含量(即维生素B12含量) 进行测定。
化学结构：
H3C N N
NH2 S N+
CH2
CH2CH2OH
. Cl- . HCl
CH3
氯化3-[（4-氨基-2-甲基嘧啶-5-）甲基]-5-（2羟乙基）-4-甲基噻唑的盐酸盐
药典方法
非水溶液滴定法
原理： 水V溶B1液分中子，中在含醋有酸已汞成存盐在的下伯，胺均和可季被铵高基氯团酸，滴在定非。
p44
▪ 维生素C的含量测定方法
p50
▪ 维生素D的分析方法
p56
▪ 多种维生素含量同时测定新法
▪ 水溶性维生素
p
▪ 脂溶性维生素
p
维生素A
化学结构
2
9'
1
3
8'
4
6
5
7'
5'
6'
4'
3'
1'
CH2OR
2'
R=H
VA醇 VA1
R= —COCH3 VA醋酸酯 R= —COC15H31 VA棕榈酸酯
积．△E是相应两次电极电位差，s是电位响应斜率。 特点：
简便易行，精密度高，测定结果与药典法一致，是 测 定VB１的简便方法，特别适用于片剂中VB1含量的测定。
荧光反应速率法
原理： VB1本身没有荧光，先将其氧化为硫胺荧。
K定3F都e(必CN须)6在氧碱化性VB条1的件荧下光进反行应，和以硫Na胺O荧H的的加荧入光作测 为反应起点利用荧光分光光度计的时间扫描功能， 监视反应的进行，作出工作曲线，以此来测出 VB1制剂的含量。 特点：
▪ 荧光法是利用维生素本身具有的荧光性，或经过 反应后产生荧光物质，在激发波长和发射波长条 件下对维生素定量分析的方法。
▪ 荧光分析法因其具有灵敏度高、线性关系好、杂 质干扰小等优点而成为近年来检测维生素的标准 方法之一。
▪ 但其稳定性和选择性方面在某些样品检测中仍然 有待提高。
3. 分光光度法
▪ 分光光度法测定维生素是根据化合物分子 因电子跃迁产生的光谱而进行定性定量分 析，是一种简便、快速、成本相对较低的 分析方法，因此广泛应用于各种维生素的 检测。
▪ 两类：
（1）食品添加物直接参与化学发光反应，与化学 发光试剂发生氧化还原反应，产生化学发光。
（2）分析目标对于已有化学发光体系的增敏或抑 制作用。
2.电化学分析
3.毛细管电泳
▪ 毛细管电泳法是经典电泳技术和现代微柱 分离相结合的产物，在电场力作用下基于 样品离子带电荷不同而造成迁移率不同来 进行分离的技术，具有分离速度快、灵敏 度高、成本低、样品用量、少等优点。
▪ 原理： 2VB1＋硅钨酸 → 白色沉淀＋4HCl VB1在酸性溶液中与硅钨酸作用产生沉淀，
根据沉淀的重量和供试品的重量即可计算其含 量。
▪ 特点：（1）比较准确、灵敏； （2）方法简便，不需要特殊仪器； （3）恒重比较费时间。
两点电位滴定法
原理： 电位滴定的终点可由两点法确定： Ve ＝ [(10 ΔE/S-1)/(V110 ΔE/S-V2)]×V1V2 当V2/V1≤1.04时，公式可简化为： Ve ＝ (V210 ΔE/S-V1)/(10 ΔE/S-1). V1,V2是滴定终点前附近两点分别消耗标准溶液的体
▪ 缺点在于样品的微量制备、电渗的控制、 重复性差、定性定量困难。
▪ 另外，毛细管电泳填充物的效果对分析结 果有很大的影响。
4.超临界流体色 （Supercritical Fluid Chromatography，
SFC)
▪ 超临界流体色谱是以超临界流体为流动相, 依靠流动相的溶剂化能力来进行分离,分析 的色谱过程,既可分析气相色谱不适应的高 沸点，低挥发性样品，又比高效液相色谱 有更快的分析速度和条件。
电极为参比电极，AgNO3标准溶液为滴定 剂的电位滴定法测定维生素B1含量 。 特点：
仪器价廉，操作方法简便，不需标样， 测定结果与药典法基本一致，可用于维生 索B1含量的常规测定 。
间接原子吸收法
原理： 在强电解质溶液中，Ag+与VB1中Cl-生成AgCl沉
淀，离心沉降，不经过滤分离，直接测其清液中 剩余Ag+含量、间接计算出VB1含量 。 特点：
特点：
选择性好，仪器简单，操作简便，灵敏度 较高。
维生素B6 化学结构
CH2OH
HO
CH2OH HCl
H3C N
药典方法 非水溶液滴定法
用于VB6原料药的含量测定
紫外分光光度法
用于VB6片剂、注射剂的含量测定
其他方法
流动注射一原子吸收法
原理： 在弱酸性介质中，新生态MnO2与维生素
B6发生反应，通过FIA-AAS测定反应产物 Mn2+，来测定VB6的含量。 特点：
▪ 因此，维生素的定量分析在食品营养分析中占有 ▪ 重要地位。
▪ 针对不同形式维生素的检测，一些传统的分析 检测方法已不能满足现代检测的要求， 依据
目前我国国家标准，维生素分析方法有微生物 法，荧光分光光度法和高效液相色谱法。方法 比较单一，与实际需求有一定差距。 随着分
析化学新方法和新技术的不断发展，分析维生 素的方法也不断更新。
具有简便、快速、重现性好等优点，用 于实际样品的测定，结果与药典法一致。
流动注射一化学发光法
原理： 在酸性介质中，维生素B6与高锰酸钾发
生氧化还原反应并产生化学发光信号，连 二亚硫酸钠的存在能使这一反应的化学发 光强度大大增强。结合流动注射技术测定 维生素B6的含量。 特点：
快速、灵敏
示波极谱滴定法
▪ 本章将对维生素的方法进行总结，并重点介绍 两种对维生素同时检测的分析方法。
参见
▪ 张太昌，孟萌，宋佩，田溪，薛虎寅，张，昱， 尹永梅，郗日沫. 食物中维生素分析方法的研 究进展.生物技术进展. 2012, vol.2(2): 116-123
传统的维生素分析方法
1.微生物分析法
▪ 微生物分析法根据某种维生素是某种细菌生长 所必需的原理,利用比浊法或酸度滴定法测定 细菌繁殖程度或代谢产物,间接对该维生素进 行定量测定。
然后再用虹吸的方法将己烷层导出分离，定容。 避免了使用乙醚的不安全性，但分离方法仍比 较烦琐。
改进二：用环己烷代替己烷，省去分离定容 过程，直接取上清液用异丙醇稀释后进行比色 分析，这种方法既简便又安全。
维生素B的测定方法
包括： ➢ 维生素B1 ➢ 维生素B2 ➢ 维生素B6 ➢ 维生素B12
维生素B1
反应速度快，反应体系为碱性，与硫色素的荧 光应测产定 物体 进系 一相 步同分，解但，由所于以过实量际的工作K3F中e(利CN用)6这能个使反反 应进行VB1的荧光光谱法测定时操作要求非常严 格，以减少硫色素的进一步分解，才能获得较为 满意的结果。
离子选择性电极电位滴定法
原理： 用氯离子选择性电极为指示电极，甘汞
采用本方法测定，避免了非水滴定法中由于温 度变化而使高氯酸标液浓度变化产生的结果偏差， 并且对试剂要求不高。
维生素B12 化学结构
药典方法 紫外分光光度法
适用于维生素B12原料药及注射剂的含量测定
其他方法
原子吸收光谱法
原理： 维生素B12含有元素钴，可用火焰原子吸收光
谱法测定维生素B12及注射液的含量。 特点：
维生素分析测定方法
概述
▪ 维生素是人和动物维持正常的生理功能必需的一类微 量有机物质， 根据其溶解性分为水溶性维生素和脂 溶性维生素两大类。 不同的维生素对人体具有不同 的生理作用，缺乏任何一种维生素都会导致相应的缺 乏病症，严重不足时可以致命。
▪ 随着食品工业的发展和人们对营养保健食品需求程度 的日渐提高，市场上出现了添加维生素的婴儿配方食 品，谷物产品和果汁等维生素强化食品。对于食品中 添加的维生素，尤其婴幼儿食品和孕妇及乳母食品必 须通过检测，严格控制维生素的添加量。
原理：
在KCI溶液中，用汞膜电极作极化电极，银 棒电极作去极化电极，直接用0.05mol／ LNaOH标准液进行滴定，以示波极谱图上的 切口消失米指示终点。
特点：
终点直观，操作简便，结果准确，且设 备简单，成本低廉。
两点电位滴定法
原理同VB1的两点电位滴定法测定
荧光分光光度法
原理：
荧光法测定维生素B6原料，激发光谱最大吸收 Ex=323nm,发射光谱最大吸收Em=395nm.在0400ng/ml范围内呈良好线性 关系。 特点：