HE(苏木素-伊红)染色试剂盒使用说明书
苏木素染色原理
苏木素-伊红染色液(H-E)说明书【产品名称】苏木素-伊红染色液(H-E）【型号】苏木素染色液分别为：Mayer型、改良Harris型、型改良Lillie-Mayer型；伊红染色液分别为：水溶型、醇溶型。
【包装规格】货号：DH0006单瓶包装规格分别为：100ml、250ml、500ml、5000ml；每套/盒包装规格分别为：2×100ml/盒、2×250ml/盒、2×500ml/盒、2×5000ml/盒。
【预期用途】主要用于对细胞组织进行染色。
【检验原理】苏木素(Hematoxylin)和伊红(Eosin)联合主要用于对细胞组织进行染色，简称HE染色，是病理学常规制片中最基本的染色方法，应用极其广泛，苏木素-伊红染色是生物学、组织学、病理学及细胞学等学科必不可少的最基本的染色方法，在病理诊断、教学与科研中广泛应用，具有重要价值，细胞中的细胞核是由酸性物质组成，它与碱性染料(苏木素)的亲和力较强；细胞浆则相反，它所含的碱性物质与酸性染料(伊红)的亲和力较大。
因此细胞或组织切片经苏木素-伊红染色液染色后，细胞核被苏木素染成鲜明的蓝紫色，细胞浆、肌纤维、胶元纤维等呈不同程度的红色，红细胞则呈橙红色。
【主要组成成分】试剂组成主要成分苏木素染色液(改良Lillie-Mayer)或苏木素染色液(改良Harris)或木素染色液(Mayer) 苏木色精伊红染色液(水溶)或伊红染色液(醇溶) 伊红【储存条件及有效期】5℃～35℃保存，原包装未开封染色液的有效期为18个月，在有效期内的已开封染色建议在开封后6个月内使用完，每次用后及时拧紧瓶盖，以免挥发或变质。
【样本要求】涂片和切片必须充分固定，石蜡切片要充分脱蜡。
【检验方法】l、石蜡切片于二甲苯I、II中脱蜡；2、经无水乙醇和95%乙醇，经8O%乙醇，自来水冲洗；3、苏木素染色液(改良Lillie-Mayer或改良Harris)染色，自来水洗；或苏木素染色液(Mayer)染色；4、苏木素染色后用l%盐酸乙醇溶液分化数秒(l%盐酸乙醇溶液配制：99m1 75%乙醇加1ml浓盐酸）；若用苏木素染色液(Mayer)染色后则不需分化；5、自来水冲洗返蓝；亦可用碳酸锂水溶液返蓝，自来水洗；6、入伊红染色液(水溶)染色，稍洗；若用伊红染液(醇溶），切片应先经80%乙醇脱水后，再入伊红染液(醇溶)染色(忌水洗）；7、95%乙醇I、II中调色；8、无水乙醇I、II中脱水，二甲苯I、II中透明；9、封片胶封片，镜检。
H.E染色概念、定义及操作步骤
He染色介绍苏木精—伊红染色法 ( hematoxylin-eosin staining ) ，简称HE染色法，石蜡切片技术里常用的染色法之一。
苏木精染液为碱性，主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色；伊红为酸性染料，主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。
染色分类易于被碱性或酸性染料着色的性质称为嗜碱性( basophilia )和嗜酸性( acidophilia ) 。
组织内构成蛋白质的氨基酸种类很多，它们有不同的等电点。
在普通染色法中，染色液的酸碱度为pH6左右，细胞内的酸性物质如细胞核的染色质、腺细胞和神经细胞内的粗面内质网及透明软骨基质等均被碱性染料染色，这些物质称为嗜碱性。
而细胞质中的其它蛋白质如红细胞中的血红蛋白、嗜酸粒细胞的颗粒及胶原纤维和肌纤维等被酸性染料染色，这些物质称为嗜酸型。
如果改变染色液的酸碱度，pH值升高时，则原来被酸性染料染色的物质可变为嗜碱性；pH值降低时，原来被碱性染料染色的物质则可变为嗜酸性。
所以说染色液的pH值可以影响染色的反应。
DNA两条链上的磷酸基向外，带负电荷，呈酸性，很容易与带正电荷的苏木精碱性染料以离子键结合而被染色。
苏木精在碱性溶液中呈蓝色，所以细胞核被染成蓝色。
伊红Y是一种化学合成的酸性染料，在水中离解成带负电荷的阴离子，与蛋白质的氨基正电荷的阳离子结合使胞浆染色，细胞浆、红细胞、肌肉、结缔组织、嗜伊红颗粒等被染成不同程度的红色或粉红色，与蓝色的细胞核形成鲜明对比。
伊红是细胞浆的良好染料。
由于组织或细胞的不同成分对苏木精的亲和力不同及染色性质不一样。
经苏木精染色后，细胞核及钙盐粘液等呈蓝色，可用盐酸酒精分化和弱碱性溶液显蓝，如处理适宜，可使细胞核着清楚的深蓝色，胞浆等其它成分脱色。
再利用胞浆染料伊红染胞浆，使胞浆的各种不同成分又呈现出深浅不同的粉红色。
故各种组织或细胞成分与病变的一般形态结构特点均可显示出来。
染色结果细胞核被苏木精染成鲜明的蓝色，软骨基质、钙盐颗粒呈深蓝色，粘液呈灰蓝色。
HE Staining
苏木素-伊红染色（HE）【染色原理】苏木素染液中带正电荷的蓝色色精与细胞核中带负电荷的脱氧核糖核苷通过正、负电荷的极性吸附而守成染色；伊红是带负电荷的酸性染料，通过渗透或弥散作用而使组织着色。
【组织固定与切片】4%甲醛固定，石蜡切片厚度4~6μm。
【染色用具】常规染色用具一套：染色皿或染色缸、刻字笔、标签、树脂胶、盖玻片、鸭嘴镊、绸布或纱布。
滴管数支。
【试剂配制】1. Harris苏木素液苏木素2.5g，无水乙醇25ml，钾明矾50g，蒸馏水500ml，氧化汞1.25g，乙酸20ml。
将苏木素溶于乙醇（加热）后加入预先已加热溶解明矾的蒸馏水中，煮沸1~2min，改用小火加热，慢慢加入氧化汞（注意防止产生大量气泡和溶液溅出）再煮沸2min后立即浸于冷水中，冷却后加入乙酸，过滤后使用。
2. 伊红液（1) 水溶性伊红染液：伊红0.5g，蒸馏水100ml。
（2）醇溶性伊红染液：伊红0.5~1g，80%~95%乙醇100ml。
3. 分化液: 盐酸0.5~1ml，80%乙醇100ml。
4. 返蓝液: 氨水1ml，蒸馏水100ml。
5. 各级乙醇、二甲苯【注意事项】1. 石蜡切片在脱蜡前要烘烤使组织与切片粘贴。
烘烤温度50℃，时间30min 或30℃，24h。
2. 脱蜡要彻底，应定期更换脱蜡液。
3. 分化的时间要恰当掌握，可镜下观察着色情况。
4. 透明要充分。
【染色步骤】1. 石蜡切片二甲苯Ⅰ脱蜡10~15min。
2. 二甲苯Ⅱ脱蜡10~15min。
3. 无水乙醇5min。
4. 95%乙醇5min。
5. 80%乙醇5min。
6. 自来水冲洗1min。
7. 蒸馏水洗1min。
8. 苏木素染液5~15min。
9. 自来水冲洗1~5min。
10. 化液分化数秒至数分钟。
11. 自来水冲洗1~3min。
12. 返蓝液返蓝30s~1min。
13. 自来水冲洗。
14. 伊红液5~10min。
15. 自来水冲洗。
16. 80%乙醇脱水30s。
苏木素伊红HE染色实验说明
苏木素伊红(HE)染色试剂盒北京华越洋----------------------------------------------------------------------------------------- -产品简介：Ø华越洋生物生产的苏木素伊红(HE)染色试剂盒(Hematoxylin and eosin staining kit)综合了多种经典的HE染色方法，例如Harris法、Mayer法等，简化了操作步骤，缩短了操作时间，并且染色液内不使用汞、甲醇等有毒试剂。
可以用于组织切片或培养细胞的染色。
Ø 苏木素伊红染色后细胞核呈现蓝色，细胞浆呈现粉红色或红色。
Ø 本试剂盒可以和免疫荧光染色配合使用。
使用的苏木素伊红染色试剂盒，染色后可以进行免疫荧光染色或其它染料的染色。
Ø 染色液可以重复使用，直至认为效果不佳时再换用新的染色液。
本试剂盒至少可以染色300个样品。
包装清单：苏木素染色液: 200毫升伊红染色液:200毫升说明书:1份保存条件：室温保存，至少一年有效。
注意事项：Ø 需自备4%多聚甲醛、70%乙醇和95%乙醇。
如果需要脱水、透明和封片处理，还需自备二甲苯、中性树胶或其它封片剂。
如果样品是石蜡切片，需自备90％乙醇、无水乙醇以及二甲苯。
Ø 染色液可以重复使用多次，认为效果不佳时再更换新的染色液。
样品数量很多时，可以使用碧云天生产的染色架和染色缸，便于操作。
Ø 第一次使用本试剂盒时建议先取1-2个样品做预实验。
Ø 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明：1.样品处理a) 对于石蜡切片：二甲苯中脱蜡5-10分钟。
换用新鲜的二甲苯，再脱蜡5-10分钟。
无水乙醇5分钟。
90%乙醇2分钟。
70%乙醇2分钟蒸馏水2分钟。
b) 对于冰冻切片：蒸馏水2分钟。
c) 对于培养细胞：用4%多聚甲醛固定10分钟以上。
河南赛诺特生物 苏木素-伊红（H-E）染色液产品说明书
苏木素-伊红（H-E）染色液产品说明书【产品名称】通用名称：苏木素-伊红（H-E）染色液英文名称：Hemaxytolin-Eosin(HE)Staining kit【包装规格】500mL/瓶，5瓶/盒【预期用途】用于对石蜡切片和冰冻切片的细胞组织进行染色。
【检验原理】苏木素经过氧化变成酸性染料苏木红，苏木红与三价铝离子结合形成带正电荷的蓝色色精，便可与细胞中带负电荷的脱氧核糖核酸结合。
苏木素染液主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色；伊红Y为酸性胞质性染料，主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。
【主要组成成份】每套苏木素-伊红（HE）染色液试剂盒是由高清恒定液（A液）、苏木素染液（B液）、分化液（C液）、返蓝液（D液）、伊红染液（E液）组成。
每套苏木素-伊红（HE）染色液试剂盒的主要成分为：1)高清恒定液（A液），由专用稳定剂等成分组成；2)苏木素染液（B液），主要由苏木素、乙二醇、硫酸铝钾等成分组成；3)分化液（C液），主要由酒石酸等成分组成；4)返蓝液（D液），主要由Tris、氯化钠和防腐剂等成分组成；5)伊红染液（E液），主要由伊红二钠Y和乙醇等成分组成。
【储存条件及有效期】试剂盒应存放于室温（15-30℃），有效期为12个月，在有效期内的已开封试剂使用期限为3个月。
每次用后应及时盖上盖子，以免挥发或变质。
【适用仪器】手动常规染色和全自动染色机染色。
【样本要求】病理组织经取材，福尔马林固定，脱水处理，用石蜡包埋后制成蜡块，用切片机切成2-5μm厚度的组织切片采集到载玻片上（有些特殊类型的组织可能要求不同的切片厚度）。
之后将载玻片放置于烤片机上65℃（±5℃）下烤片10-30分钟，即可染色。
【检验方法】1、二甲苯I、II、III脱蜡各2-4min；2、无水乙醇I、II、III各2min；3、95%乙醇15s；4、75%乙醇15s；5、水洗1min；6、高清恒定液30s-60s；7、苏木素染液3-5min；8、水洗1min；9、分化液3-15s；10、水洗1min；11、返蓝液1-2min；12、水洗1min；13、95%乙醇30-60s；14、伊红染液20-60s；15、无水乙醇I、II、III各2min；16、二甲苯I、II、III各2min。
(仅供参考)苏木素伊红染色液说明书
苏木素-伊红染色液（H-E）说明书【产品名称】苏木素-伊红染色液（H-E）H&E Staining System【产品编号】HE-500ml,HE-1000ml,HE-2500ml【包装规格】苏木素染色液500ml、1000ml2500ml；伊红染色液500ml、1000ml 2500ml；返蓝染色液500ml、1000ml2500ml。
【预期用途】主要用于对细胞组织进行染色。
【检验原理】苏木素-伊红染色液（H-E）由3部分组成：苏木素染色液、伊红染色液和返蓝染色液。
苏木素氧化后与金属媒染剂作用，可形成不可替代的细胞核颜料。
带有正电荷的苏木素-金属媒染剂复合体，易与细胞核内DNA上带负电荷的磷酸基团结合，因而使细胞核染色形成特定的蓝色。
伊红染色液是一种广泛用于组织学染色中与苏木素染色形成对比的染料（HE染色法）。
此染色法可观察到清晰的细胞结构。
样本中细胞核可经苏木素染色呈蓝色，细胞质经伊红染色呈粉红色。
伊红是一种阴离子染料，可将红细胞染成亮红色，同样也可对其他基本的细胞组分（细胞质，胶原及肌纤维）进行染色。
返蓝染色液为组织学染色试剂，可替代水洗，快速使核染色质和核膜显现蓝色。
由于其坚硬度和碱性，水冲洗后改变苏木素染核后的颜色。
使用BioGnost 返蓝染色液，粘附在玻片上的样本不会发生像使用其他返蓝染色液时发生降解。
【主要组成成分】苏木素：乙二醇、苏木素、碘酸钠、硫酸铝；伊红：伊红、乙醇；返蓝染色液：碳酸锂。
【储存条件及有效期】保证产品包装完整的情况下，储存温度在+15°C和+25°C 之间。
保持储存环境干燥，不要放置于寒冷的环境中，不要冷冻产品，避免直接阳光直射。
产品使用效期为2年，具体效期见标签。
【适用仪器】不适用【样本要求】使用合适的设备仪器收集组织样本，并标记清楚，根据操作说明进行实验。
为避免发生错误，染色及诊断过程最好由具相关专业知识的技术人员操作。
根据标准医疗诊断实验室标准镜检诊断。
he染色吉姆萨染色试剂方法[精华]
![he染色吉姆萨染色试剂方法[精华]](https://img.taocdn.com/s3/m/414c5dc03086bceb19e8b8f67c1cfad6195fe9f1.png)
两种染色试剂和方法如下。
000000一、HE染色000000试剂：000000苏木素染液：苏木精1g；无水乙醇25mL；硫酸铝钾10g；蒸馏水350mL；碘酸钾0.1g；冰醋酸10mL。
A 液：用25mL 无水乙醇溶解1g苏木精，摇动即可溶解。
B 液：用350mL 蒸馏水溶解10g硫酸铝钾，摇动或振荡即可溶解。
把A 液和 B 液混合，加入碘酸钾摇动至颜色加深。
最后加入10mL冰醋酸，摇动颜色变为深葡萄酒红色。
染液配制当日即可应用于染色。
酸化液：醋酸20-35mL加蒸馏水至700mL。
000000伊红染液：储液：取1g伊红，溶于100mL 95%的乙醇，待溶解完全后加几滴冰醋酸至染液呈半透明状，避光保存备用。
工作液：取一定量的伊红储液，加入等量70%乙醇，此液即为伊红染液的工作液。
000000染色步骤：000000（1）细胞爬片放用PBS漂洗3次，每次5min，无水乙醇固定5min，风干。
000000（2）95%乙醇1min，75%乙醇1min，三蒸水1min。
000000( 3 ) 浸洗5 % 的醋酸液 ( 酸化液 ) 数秒。
000000( 4 ) 苏木精染液 3 - 5 m i n，胞核呈橙红色。
000000( 5 ) 自来水冲洗至颜色变蓝。
000000( 6) 盐酸乙醇液分化数秒，颜色再次返红。
000000(7) 自来水再次冲洗，返蓝。
000000( 8) 伊红染液5min，流水漂洗15min左右。
000000二、吉姆萨染色000000试剂：000000吉姆萨染液配制：取吉姆萨粉末1g溶于66ml甘油中研磨混匀，然后放置55-60℃水浴2h，冷却后加入66ml甲醇中混匀，过滤后棕瓶分装保存。
0000 00PBS甲醇液：PBS与甲醇一比一混合。
000000染色步骤：000000（1）细胞爬片使用PBS漂洗3次，每次5min。
000000（2）加PBS甲醇液静置2min，去掉PBS甲醇液。
000000（3）加甲醇固定10min，去掉甲醇，加入新无水甲醇漂洗去掉。
苏木素伊红(HE)染色试剂盒
苏木素伊红(HE)染色试剂盒产品简介：苏木素(Hematoxylin)和伊红( Eosin)染色，简称HE染色，是病理学常规制片中最基本的染色方法，应用机器广泛。
苏木精是从原产中南美的洋苏木中提取出来的浅黄褐色的结晶，是一种碱性染色剂，它在被氧化后生成苏木素，同媒染剂(常用的是三价的铝或盐铁)一起使用，能够使细胞核染色。
在病理诊断、教学和科研工作中，常用HE染色对正常组织和病变组织进行形态结构观察。
对于确定或鉴别病变组织、细胞中出现的某些异常物质与特殊成分，而需要采用的特殊染色方法、酶组织化学方法、免疫组织化学方法等也均是在观察HE染色组织切片的基础上进行的。
在HE染色的组织切片中，细胞核呈蓝色，细胞浆呈红色，二者形成鲜明的对比，易于观察分析。
Leagene苏木素伊红染色试剂盒中，苏木素染色液采用进口的高纯度苏木精、硫酸铝钾、甘油等组成，不含氧化汞、甲醇等有害物质，对细胞核染色效果好。
其特点：长期保存，不易产生沉淀和金属; 应用范围广，可以用于人、动物、畜牧、水产等领域，可以用于组织石蜡切片、冰冻切片和组织细胞的染色等；苏木素染色液可以重复使用。
染色原理：1、细胞核染色的原理：苏木素为碱性天然染料，可使细胞核着色。
细胞核内染色质的成分主要是DNA，在DNA 双螺旋结构中，两条核苷酸链上的磷酸基向外，使DNA双螺旋的外侧带负电荷，呈酸性，很容易与带正电荷的苏木素碱性染料以离子键或氢键结合而被染色。
苏木素在碱性溶液中呈蓝色，所以细胞核被染成蓝色。
2、细胞浆染色的原理：伊红是一种化学合成的酸性染料，在一定条件下可使细胞浆着色。
细胞浆的主要成分是蛋白质，为两性化合物，细胞浆的染色与染液的pH值密切相关。
当染液的pH值在胞浆蛋白质等电点(4.7～5.0)以下时，胞浆蛋白质以碱式电离，则细胞浆带正电荷，就可被带负电荷的酸性染料染色。
伊红在水中离解成带负电荷的阴离子，与胞浆蛋白质带正电荷的阳离子结合，使细胞浆着色，呈现红色。
he染色
苏木素-伊红染色液(H-E)说明书【产品名称】苏木素-伊红染色液(H-E）【型号】苏木素染色液分别为：Mayer型、改良Harris型、型改良Lillie-Mayer型；伊红染色液分别为：水溶型、醇溶型。
【包装规格】货号：DH0006单瓶包装规格分别为：100ml、250ml、500ml、5000ml；每套/盒包装规格分别为：2×100ml/盒、2×250ml/盒、2×500ml/盒、2×5000ml/盒。
【预期用途】主要用于对细胞组织进行染色。
【检验原理】苏木素(Hematoxylin)和伊红(Eosin)联合主要用于对细胞组织进行染色，简称HE染色，是病理学常规制片中最基本的染色方法，应用极其广泛，苏木素-伊红染色是生物学、组织学、病理学及细胞学等学科必不可少的最基本的染色方法，在病理诊断、教学与科研中广泛应用，具有重要价值，细胞中的细胞核是由酸性物质组成，它与碱性染料(苏木素)的亲和力较强；细胞浆则相反，它所含的碱性物质与酸性染料(伊红)的亲和力较大。
因此细胞或组织切片经苏木素-伊红染色液染色后，细胞核被苏木素染成鲜明的蓝紫色，细胞浆、肌纤维、胶元纤维等呈不同程度的红色，红细胞则呈橙红色。
【主要组成成分】试剂组成主要成分苏木素染色液(改良Lillie-Mayer)或苏木素染色液(改良Harris)或木素染色液(Mayer) 苏木色精伊红染色液(水溶)或伊红染色液(醇溶) 伊红【储存条件及有效期】5℃～35℃保存，原包装未开封染色液的有效期为18个月，在有效期内的已开封染色建议在开封后6个月内使用完，每次用后及时拧紧瓶盖，以免挥发或变质。
【样本要求】涂片和切片必须充分固定，石蜡切片要充分脱蜡。
【检验方法】l、石蜡切片于二甲苯I、II中脱蜡；2、经无水乙醇和95%乙醇，经8O%乙醇，自来水冲洗；3、苏木素染色液(改良Lillie-Mayer或改良Harris)染色，自来水洗；或苏木素染色液(Mayer)染色；4、苏木素染色后用l%盐酸乙醇溶液分化数秒(l%盐酸乙醇溶液配制：99m1 75%乙醇加1ml浓盐酸）；若用苏木素染色液(Mayer)染色后则不需分化；5、自来水冲洗返蓝；亦可用碳酸锂水溶液返蓝，自来水洗；6、入伊红染色液(水溶)染色，稍洗；若用伊红染液(醇溶），切片应先经80%乙醇脱水后，再入伊红染液(醇溶)染色(忌水洗）；7、95%乙醇I、II中调色；8、无水乙醇I、II中脱水，二甲苯I、II中透明；9、封片胶封片，镜检。
(仅供参考)苏木素伊红染色液说明书
苏木素-伊红染色液（H-E）说明书【产品名称】苏木素-伊红染色液（H-E）H&E Staining System【产品编号】HE-500ml,HE-1000ml,HE-2500ml【包装规格】苏木素染色液500ml、1000ml2500ml；伊红染色液500ml、1000ml 2500ml；返蓝染色液500ml、1000ml2500ml。
【预期用途】主要用于对细胞组织进行染色。
【检验原理】苏木素-伊红染色液（H-E）由3部分组成：苏木素染色液、伊红染色液和返蓝染色液。
苏木素氧化后与金属媒染剂作用，可形成不可替代的细胞核颜料。
带有正电荷的苏木素-金属媒染剂复合体，易与细胞核内DNA上带负电荷的磷酸基团结合，因而使细胞核染色形成特定的蓝色。
伊红染色液是一种广泛用于组织学染色中与苏木素染色形成对比的染料（HE染色法）。
此染色法可观察到清晰的细胞结构。
样本中细胞核可经苏木素染色呈蓝色，细胞质经伊红染色呈粉红色。
伊红是一种阴离子染料，可将红细胞染成亮红色，同样也可对其他基本的细胞组分（细胞质，胶原及肌纤维）进行染色。
返蓝染色液为组织学染色试剂，可替代水洗，快速使核染色质和核膜显现蓝色。
由于其坚硬度和碱性，水冲洗后改变苏木素染核后的颜色。
使用BioGnost 返蓝染色液，粘附在玻片上的样本不会发生像使用其他返蓝染色液时发生降解。
【主要组成成分】苏木素：乙二醇、苏木素、碘酸钠、硫酸铝；伊红：伊红、乙醇；返蓝染色液：碳酸锂。
【储存条件及有效期】保证产品包装完整的情况下，储存温度在+15°C和+25°C 之间。
保持储存环境干燥，不要放置于寒冷的环境中，不要冷冻产品，避免直接阳光直射。
产品使用效期为2年，具体效期见标签。
【适用仪器】不适用【样本要求】使用合适的设备仪器收集组织样本，并标记清楚，根据操作说明进行实验。
为避免发生错误，染色及诊断过程最好由具相关专业知识的技术人员操作。
根据标准医疗诊断实验室标准镜检诊断。
PH0516-苏木素伊红(HE)染色试剂盒使用手册
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
试剂组分
Component 试剂 A: 苏木素染色液 | Hematoxylin Stain Solution 试剂 B: 伊红染色液 | Eosin Staining Solution 2×100mL 100mL 100mL 2×500mL 500mL 500mL Storage RT 避光 RT 避光
自备材料： 1、盐酸乙醇分化液；2、蓝化液（如稀氨水、碳酸锂溶液等）；3、系列乙醇；4、4%的多聚甲醛
保存
室温避光保存，有效期 12 个月
使用参考
（一） 石蜡切片染色 1、 切片脱蜡至水 ①二甲苯作用 2 次，每次 5～10min。 ②（可选）无水乙醇作用 2 次，每次 3～5min。 ③95%的乙醇 3～5min
PH0516 | 苏木素伊红(HE)染色试剂盒 实验手册
Catalog No：PH0516 Size： 2×100mL | 2×500mL Store at RT
简介
1、 细胞核染色的原理： 苏木素为碱性天然染料，可使细胞核着色。细胞核内染色质的成分主要是 DNA，在 DNA 双螺旋 结构中，两条核苷酸链上的磷酸基向外，使 DNA 双螺旋的外侧带负电荷，呈酸性，很容易与带正电荷的苏木素碱性染料以 离子键或氢键结合而被染色。苏木素在碱性溶液中呈蓝色，所以细胞核被染成蓝色。 2、 细胞浆染色的原理： 伊红是一种化学合成的酸性染料，在一定条件下可使细胞浆着色。细胞浆的主要成分是蛋白质，
（三） 细胞染色 1、4%的多聚甲醛固定 10～20min。 2、自来水冲洗 2 次，每次 2min。 3、 蒸馏水冲洗 2 次，每次 2min。 4、染色、脱蜡、透明、封固步骤同石蜡切片的染色步骤，作用时间相应缩短。 染色结果：细胞核呈蓝色；细胞质、纤维呈红色。
苏木素-伊红染色试剂盒使用说明书
注意：当跳过此步骤时，不使用二甲苯透明，酒精将会保存于组织切片上，导致伊红从切片 上流出。
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杭州昊鑫生物科技股份有限公司
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13 封片：中性树胶封片，自然风干或烤干，显微镜观察。
注意事项 HE 染色是一个对经验要求非常高的染色，上述实验流程中所提供的染色时间都是参考时间， 要根据实验原理，结合具体情况而定。
染色较弱是由于：1）组织切片过薄；2）染色时间不足；3）随后 95%酒精分化过度。 染色过度是由于：1）染液浓度较高（可能是由于过度蒸发）；2）组织切片过厚；3）染色时 间过长；4）随后 95%酒精分化不足。
伊红染色未分化（一种颜色）是由于： 1）固定不彻底； 2）过度染色，a）染色时间过长；b）染液浓度过高。
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4. 水洗：苏木素染色后，用水洗组织是非常重要的。这一步以及随后的水洗，可将多余的 染料，媒染剂等去除。适当的漂洗可以去除表面金属光泽，金属光泽可阻止苏木素的染色。 注意：跳过此步，将产生不好的结果，例如沉淀的形成，染液的稀释，表面金属光泽的存在。 5. 酸酒精：酸酒精分色剂 3~5sec。在苏木素染色方 注意：如果没有此步骤，组织切片将变为暗紫色。嗜酸结构，例如，胶原，将不会呈现明亮 的粉红色。组织结构之间将很难区分。很难对切片做出正确的判断。 分色过度可能是由于：1)酸浓度过高；2)脱色时间过长等。分色不足是由于：1)酸浓度过低； 2)脱色时间不足；3)在切片上有多余的蛋白或者明胶等。
结果 细胞核染为蓝色；细胞质染为红色。
温馨提示 1. 为了您的自身安全，使用试剂前，请做好防护，如穿实验服，戴手套等。 2. 试剂应保存于阴凉、干燥、通风良好的环境中。
储存温度 避光储存于室温。
包装清单 货号
HCY112A HCY112B
he染色原理
苏木素-伊红染色液(H-E)说明书【产品名称】苏木素-伊红染色液(H-E）【型号】苏木素染色液分别为：Mayer型、改良Harris型、改良Lillie-Mayer型；伊红染色液分别为：水溶型、醇溶型；苏木素-伊红染色液混合型。
【包装规格】货号：DH0006单瓶包装规格分别为：100ml、250ml、500ml、5000ml；每套/盒包装规格分别为：2×100ml/盒、2×250ml/盒、2×500ml/盒、2×5000ml/盒。
【预期用途】主要用于对细胞组织进行染色。
【检验原理】苏木素(Hematoxylin)和伊红(Eosin)联合主要用于对细胞组织进行染色，简称HE染色，是病理学常规制片中最基本的染色方法，应用极其广泛，苏木素-伊红染色是生物学、组织学、病理学及细胞学等学科必不可少的最基本的染色方法，在病理诊断、教学与科研中广泛应用，具有重要价值，细胞中的细胞核是由酸性物质组成，它与碱性染料(苏木素)的亲和力较强；细胞浆则相反，它所含的碱性物质与酸性染料(伊红)的亲和力较大。
因此细胞或组织切片经苏木素-伊红染色液染色后，细胞核被苏木素染成鲜明的蓝紫色，细胞浆、肌纤维、胶元纤维等呈不同程度的红色，红细胞则呈橙红色。
【主要组成成分】试剂组成主要成分苏木素染色液(改良Lillie-Mayer)或苏木素染色液(改良Harris)或苏木素染色液(Mayer) 苏木色精伊红染色液(水溶)或伊红染色液(醇溶) 伊红苏木素-伊红染色液混合型苏木色精、伊红【储存条件及有效期】5℃～35℃保存，原包装未开封染色液的有效期为18个月，在有效期内的已开封染色建议在开封后6个月内使用完，每次用后及时拧紧瓶盖，以免挥发或变质。
【样本要求】涂片和切片必须充分固定，石蜡切片要充分脱蜡。
【检验方法】l、石蜡切片于二甲苯I、II中各脱蜡若干分钟；2、经无水乙醇和95%乙醇各约若干分钟，经80%乙醇若干分钟，自来水冲洗若干分钟；3、苏木素染色液(改良Lillie-Mayer或改良Harris)染色若干分钟，自来水洗若干分钟；或苏木素染色液(Mayer)染色若干分钟；或苏木素-伊红染色液(混合型)染色若干分钟；4、苏木素染色后用l%盐酸乙醇溶液分化数秒(l%盐酸乙醇溶液配制：99m1 75%乙醇加1ml浓盐酸）；若用苏木素染色液(Mayer)和苏木素-伊红染色液(混合型)染色后则不需分化；5、自来水冲洗返蓝若干分钟；亦可用碳酸锂水溶液返蓝若干秒，自来水洗若干分钟；6、入伊红染色液(水溶)染色若干分钟，稍洗；若用伊红染液(醇溶），切片应先经80%乙醇脱水后，再入伊红染液(醇溶)染色若干分钟(忌水洗）；此步骤苏木素-伊红染色液(混合型)不适用。
HE(苏木素-伊红)染色试剂盒使用说明书
HE（苏木素-伊红）染色试剂盒使用说明书货号：L9406规格：10ml/100ml保存：本试剂盒常温保存，复检期至少1年。
注意：环境温度低时，分化液可能会结晶析出，将分化液37℃水浴融化后即可，不影响使用。
产品说明：苏木精-伊红染色法( Hematoxylin-Eosin staining )，简称HE染色法，切片技术里常用的染色法之一。
苏木精染液为碱性，主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色；伊红为酸性染料，主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。
染色过程需要优化，着色情况与组织或细胞的种类有关，也随其生活周期及病理变化而改变。
例如，很多细胞在新生时期胞浆对伊红着色较淡或轻度嗜碱，当其衰老时或发生退行性变则呈现嗜伊红浓染。
胶原纤维在老化和出现透明变性时，伊红着色由浅变深。
本产品所包含试剂均为工作液，可直接使用。
操作说明：石蜡组织切片的HE染色（以下步骤仅供参考）。
1．取材组织块，经固定后，常规石蜡包埋，切片。
2．切片用二甲苯脱蜡，经各级乙醇至水洗：二甲苯（I）5min→二甲苯（Ⅱ）5min→100％乙醇2min→95％乙醇1min→80％乙醇1min→75％乙醇1min→蒸馏水洗2min。
3．苏木素染液染色5-20min(可以根据染色结果和要求调整时间)，自来水冲洗。
4．分化液分化30s。
5．自来水浸泡15min或温水（约50℃）5min。
6．置伊红染液2min。
7．自来水冲洗。
8．常规脱水，透明，封片：95％乙醇（I）1min→95％乙醇（Ⅱ）1min→100％乙醇（I）1min→100％乙醇（Ⅱ）1min→二甲苯石碳酸（3：1）1min→二甲苯（I）1min→二甲苯（Ⅱ）1min →中性树脂封固，镜下观察。
冰冻切片不用脱蜡，可固定后直接染色，其方法与石蜡切片相同。
医院常规苏木素-伊红(HE)染色操作规程
常规苏木素－伊红（HE）染色操作规程染色步骤：1、二甲苯Ⅰ：5－10min2、二甲苯Ⅱ：5－10min3、二甲苯Ⅲ：5－10min4、无水乙醇Ⅰ：1－3min5、无水乙醇Ⅱ：1－3min6、95%乙醇：1－3min7、80%乙醇:：1－3min8、水洗：1min9、苏木素：3－10min10、流水冲洗：1min11、酸乙醇分化：1－3S12、水洗：30S13、40%氨水或温水（40度左右）返蓝1min14、0.5%伊红液染色：1－3min15、水洗：10S16、80%乙醇：10S17、95%乙醇：1－3min18、无水乙醇Ⅰ：1－3min19、无水乙醇Ⅱ：1－3min20、二甲苯Ⅰ：3－5min21、二甲苯Ⅱ：3－5min22、二甲苯Ⅲ：3－5min中性树胶封固（湿封）以上1、2、3中二甲苯的作用：石蜡切片的常规染色必须先用二甲苯脱去切片中的石蜡，其作用是二甲苯可以溶解切片中的石蜡，以使染料易于进入细胞和组织，石蜡的存在妨碍水和染料进入细胞。
以上4、5、6、7中酒精的作用：酒精用于苏木素染色前由高浓度向低浓度逐渐下降处理切片，是为了洗脱用于脱蜡的二甲苯，使水能进入细胞和组织中，因为纯酒精可以中和二甲苯互溶，二甲苯经过二次纯酒精的洗涤，完全被除去，再经过95%、80%酒精使水分逐渐进入切片，以免引起细胞形太结构改变。
此时水洗作用：洗去未与切片结合的染液。
此时分化的作用：苏木素染色之后，用水洗去未结合在切片中的染液，但是在细胞核中结合过多的染料和细胞浆中吸附的染料必须用分化液0.5~1%盐酸酒精脱去，才能保证细胞核和细胞浆染色的分明，把这个过程称为染色的分化作用，因酸能破苏木素的醌型结构，使色素与组织解离，分化不可过度。
此时水洗的作用：为了除去分化液和脱下的染料中止分化作用。
此时水洗的作用：用水洗去未结合的染液，以防止大量伊红染液进入脱水的酒精中。
以上16、17、18、19中酒精的作用：为二甲苯进入细胞创造条件，这时必须彻底脱水，否则二甲苯不能进入细胞组织切片透明度达不到光符显微镜观察时透光度的要求，在显微镜下能显示清晰的细胞和组织结构。
苏木素伊红(HE)染色液
苏木素伊红(HE)染色液简介：苏木素(Hematoxylin)和伊红(Eosin)联合染色，简称HE染色，是病理学常规制片中最基本的染色方法，应用极其广泛。
苏木精是从原产中南美的洋苏木中提取出来的浅黄褐色的结晶，是一种碱性染色剂，它在被氧化后生成苏木素，同媒染剂(常用的是三价的铝或盐铁)一起使用，能够使细胞核染色。
在病理诊断、教学和科研工作中，常用HE染色对正常组织和病变组织进行形态结构观察。
对于确定或鉴别病变组织、细胞中出现的某些异常物质与特殊成分，而需要采用的特殊染色方法、酶组织化学方法、免疫组织化学方法等也均是在观察HE染色组织切片的基础上进行的。
在HE染色的组织切片中，细胞核呈蓝色，细胞浆呈红色，二者形成鲜明的对比，易于观察分析。
Leagene苏木素伊红染色液中，苏木素染色液采用Leagene自主研发的配方，由进口的高纯度苏木精、氧化剂等组成，不含氧化汞、甲醇等有害物质，对细胞核染色效果好。
其特点是不易产生沉淀和金属; 应用范围广，可以用于人、动物、畜牧、水产等领域，可以用于组织石蜡切片、冰冻切片和组织细胞的染色等；苏木素染色液可以重复使用。
染色原理：1、细胞核染色的原理：苏木素为碱性天然染料，可使细胞核着色。
细胞核内染色质的成分主要是DNA，在DNA 双螺旋结构中，两条核苷酸链上的磷酸基向外，使DNA双螺旋的外侧带负电荷，呈酸性，很容易与带正电荷的苏木素碱性染料以离子键或氢键结合而被染色。
苏木素在碱性溶液中呈蓝色，所以细胞核被染成蓝色。
2、细胞浆染色的原理：伊红是一种化学合成的酸性染料，在一定条件下可使细胞浆着色。
细胞浆的主要成分是蛋白质，为两性化合物，细胞浆的染色与染液的pH值密切相关。
当染色液pH值在胞浆蛋白质等电点(4.7～5.0)以下时，胞浆蛋白质以碱式电离，则细胞浆带正电荷，就可被带负电荷的酸性染料染色。
伊红在水中离解成带负电荷的阴离子，与胞浆蛋白质带正电荷的阳离子结合，使细胞浆着色，呈现红色。
苏木精-伊红(HE)染色
苏木精-伊红（HE）染色（一）染色程序
1.石蜡切片HE染色
（1）二甲苯Ⅰ：10min；
（2）二甲苯Ⅱ：10min；
（3）无水乙醇Ⅰ:1-3min；
（4）无水乙醇Ⅱ:1-3min；
（5）95%乙醇Ⅰ：1-3min；
（6）95%乙醇Ⅱ：1-3min；
（7）80%乙醇：1min；
（8）蒸馏水：1min；
（9）苏木精液染色：10min;
（10）流水冲洗去苏木精液：1min；
（11）1%盐酸-乙醇：1-3s（显微镜下观察效果）；（12）稍水洗：1-2s；
（13）返蓝（用温水或1%氨水等）：5-10s；（14）流水冲洗：1-2min；
（15）蒸馏水洗：1-2min；
（16）0.5%伊红液染色：1-3min；
（17）蒸馏水稍洗：1-2s；
（18）80%乙醇：1-2s；
（19）95%乙醇Ⅰ：2-3min；
（20）95%乙醇Ⅱ：2-3min；
（21）无水乙醇Ⅰ：3-5min；
（22）无水乙醇Ⅱ：3-5min；
（23）二甲苯Ⅰ：3-5min；
（24）二甲苯Ⅱ：3-5min；
（25）中性树胶封固。
2.冰冻切片HE染色
（1）冰冻切片固定：1-2min；
（2）稍水洗：1-2s；
（3）苏木精液染色（60℃）30-60s；
其余同石蜡切片。
（二）染色结果
细胞核呈蓝色，细胞质、肌纤维、胶原纤维和红细胞呈不同程度的红色。
钙盐和细菌可呈蓝色或紫蓝色。
索莱宝he染色试剂盒说明书
索莱宝he染色试剂盒说明书
1、染色时调节pH值很重要。
如果组织块在福尔马林中固定时间长，组织酸化而影响细胞核着色。
因此，要在自来水中冲洗时间长一些或在饱和碳酸锂水溶液中处理10-30分钟，这样可以使细胞核着色较深。
染伊红时胞浆着色不佳，可在伊红溶液中滴加1-2滴冰醋酸。
2、切片染苏木精后，分色这一步是关键，应在显微镜下控制进行，一般以细胞核染色清楚（晰）而细胞质基本无色为佳。
如果过分延长分色时间将导致染色太浅，应重新染色后再行分色。
3、切片经酒精脱水后，入二甲苯时可出现白色不透明状态，此为脱水不彻底，应将切片退回无水酒精，更换酒精、二甲苯，以求彻底脱水与透明。
4、在染色过程中不要让切片干燥，以免切片收缩、变形，影响神经元形态。
5、切片从二甲苯取出或进入二甲苯前，切片周边均应擦干净或吸干多余水分。
6、最后封固时，要用中性树脂，防止日后褪色，盖片要选大于组织块的面积，如漏出一部分不久将会褪色，所用树脂浓度要适当，树脂封固时不能有气泡。
HE染色操作流程
H E染色操作流程 The document was finally revised on 2021HE染色操作流程HE染色，即是苏木精-伊红染色法，是最常用的染色方法，在质量较佳的HE染色切片上，各种组织或细胞的一般形态结特点都可以观察到。
苏木精染液为碱性，主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色；伊红为酸性染料，主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。
[试剂材料]1.试剂：%醇溶性伊红染液，改良的哈瑞（Harris）苏木素，%盐酸酒精溶液伊红：配制方法：中性红 0.5g，80%酒精100ml,将伊红溶于酒精内搅拌，全部溶解后即可使用。
苏木精：配制方法：A液：苏木素1g，无水酒精10mlB液：硫酸铝钾20g，蒸馏水200ml两液分别溶解后混合，加热煮沸后，慢慢加入红色氧化汞，此时有大量气泡产生，故容器要大，以防液体溢出，然后将染液迅速冷却，冷却后过滤，并每100ml加入冰醋酸6ml，甘油10ml。
%盐酸酒精溶液配制方法：盐酸，70%酒精100ml2.材料：石蜡切片[操作流程]1.将石蜡切片置于烘箱中60℃烤1～2h；2.石蜡切片常规二甲苯，乙醇脱蜡至水，3.苏木素染10分钟，4.流水冲洗，去余色，5.0.7%盐酸乙醇分化数秒钟，6.流水冲洗，切片变蓝约15分钟，%乙醇30秒钟，8.酒精性伊红染30秒，95%乙醇30秒钟，95%乙醇30秒钟，100%乙醇30秒钟，%乙醇30秒钟，13.石碳酸二甲苯30秒钟，（1： 4石碳酸1-二甲苯4）二甲苯30秒钟，二甲苯30秒钟，16.中性树胶封片。
[实验结果]：镜下观察细胞核呈蓝色；细胞浆一般呈红色；胶原纤维呈不同程度的红色，红细胞呈亮红色；粘蛋白呈浅蓝色；钙化组织呈深蓝色等。
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HE（苏木素-伊红）染色试剂盒使用说明书
货号：L9406
规格：10ml/100ml
保存：本试剂盒常温保存，复检期至少1年。
注意：环境温度低时，分化液可能会结晶析出，将分化液37℃水浴融化后即可，不影响使用。
产品说明：
苏木精-伊红染色法( Hematoxylin-Eosin staining )，简称HE染色法，切片技术里常用的染色法之一。
苏木精染液为碱性，主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色；伊红为酸性染料，主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。
染色过程需要优化，着色情况与组织或细胞的种类有关，也随其生活周期及病理变化而改变。
例如，很多
细胞在新生时期胞浆对伊红着色较淡或轻度嗜碱，当其衰老时或发生退行性变则呈现嗜伊红浓染。
胶原纤维在
老化和出现透明变性时，伊红着色由浅变深。
本产品所包含试剂均为工作液，可直接使用。
操作说明：
石蜡组织切片的HE染色（以下步骤仅供参考）。
1．取材组织块，经固定后，常规石蜡包埋，切片。
2．切片用二甲苯脱蜡，经各级乙醇至水洗：二甲苯（I）5min→二甲苯（Ⅱ）5min→100％乙醇2min→95％乙
醇1min→80％乙醇1min→75％乙醇1min→蒸馏水洗2min。
3．苏木素染液染色5-20min(可以根据染色结果和要求调整时间)，自来水冲洗。
4．分化液分化30s。
5．自来水浸泡15min或温水（约50℃）5min。
6．置伊红染液2min。
7．自来水冲洗。
8．常规脱水，透明，封片：95％乙醇（I）1min→95％乙醇（Ⅱ）1min→100％乙醇（I）1min→100％乙醇（Ⅱ）1min→二甲苯石碳酸（3：1）1min→二甲苯（I）1min→二甲苯（Ⅱ）1min →中性树脂封固，镜下观察。
冰冻切片不用脱蜡，可固定后直接染色，其方法与石蜡切片相同。