伊红染色液(水溶)
苏木素染色原理
苏木素-伊红染色液(H-E)说明书【产品名称】苏木素-伊红染色液(H-E）【型号】苏木素染色液分别为：Mayer型、改良Harris型、型改良Lillie-Mayer型；伊红染色液分别为：水溶型、醇溶型。
【包装规格】货号：DH0006单瓶包装规格分别为：100ml、250ml、500ml、5000ml；每套/盒包装规格分别为：2×100ml/盒、2×250ml/盒、2×500ml/盒、2×5000ml/盒。
【预期用途】主要用于对细胞组织进行染色。
【检验原理】苏木素(Hematoxylin)和伊红(Eosin)联合主要用于对细胞组织进行染色，简称HE染色，是病理学常规制片中最基本的染色方法，应用极其广泛，苏木素-伊红染色是生物学、组织学、病理学及细胞学等学科必不可少的最基本的染色方法，在病理诊断、教学与科研中广泛应用，具有重要价值，细胞中的细胞核是由酸性物质组成，它与碱性染料(苏木素)的亲和力较强；细胞浆则相反，它所含的碱性物质与酸性染料(伊红)的亲和力较大。
因此细胞或组织切片经苏木素-伊红染色液染色后，细胞核被苏木素染成鲜明的蓝紫色，细胞浆、肌纤维、胶元纤维等呈不同程度的红色，红细胞则呈橙红色。
【主要组成成分】试剂组成主要成分苏木素染色液(改良Lillie-Mayer)或苏木素染色液(改良Harris)或木素染色液(Mayer) 苏木色精伊红染色液(水溶)或伊红染色液(醇溶) 伊红【储存条件及有效期】5℃～35℃保存，原包装未开封染色液的有效期为18个月，在有效期内的已开封染色建议在开封后6个月内使用完，每次用后及时拧紧瓶盖，以免挥发或变质。
【样本要求】涂片和切片必须充分固定，石蜡切片要充分脱蜡。
【检验方法】l、石蜡切片于二甲苯I、II中脱蜡；2、经无水乙醇和95%乙醇，经8O%乙醇，自来水冲洗；3、苏木素染色液(改良Lillie-Mayer或改良Harris)染色，自来水洗；或苏木素染色液(Mayer)染色；4、苏木素染色后用l%盐酸乙醇溶液分化数秒(l%盐酸乙醇溶液配制：99m1 75%乙醇加1ml浓盐酸）；若用苏木素染色液(Mayer)染色后则不需分化；5、自来水冲洗返蓝；亦可用碳酸锂水溶液返蓝，自来水洗；6、入伊红染色液(水溶)染色，稍洗；若用伊红染液(醇溶），切片应先经80%乙醇脱水后，再入伊红染液(醇溶)染色(忌水洗）；7、95%乙醇I、II中调色；8、无水乙醇I、II中脱水，二甲苯I、II中透明；9、封片胶封片，镜检。
伊红染色液溶液的配制方法
伊红染色液配制方法溶液的配制方法如下：华越洋伊红染色液：100ml伊红染料配方较多在常规配方中，有的染色效果好，但操作较繁琐，且消耗较多试剂。
有的操作简单，但染色时间长，染液有效期短，常需加入冰醋酸，但加入剂量不易掌握，量少达不到促染作用，加入过多染液易沉淀，且引起色调不正，特别是容易褪色，染色结果不能长期保存。
为此，对伊红Y染色液配制进行了改进。
改进后的方法具有操作简便、经济、染色性质稳定、着色力强且持久颜色鲜艳等优点；制备方法：伊红Y1G，蒸馏水90ML，苦味酸饱和水溶液10ML。
将蒸馏水加入伊红，待其全部溶解后，加入苦味酸饱和水溶液。
染色结果观察：染色时间0.5-1分钟。
伊红所着的颜色鲜艳，层次分明，与蓝色的细胞核对比突出。
伊红Y（四嗅荧光素二钠盐，分子式：C20-H6O5Br4NO2）是一种酸性红色胞浆性染料，室温下，在水中的溶解度度远大于在酒精中的溶解度。
它在溶液反应中，由于钠离子的存在而呈碱性状态。
苦味酸[分子式：（NO2）3C6HOH]是一种较强的酸性染料，它的颜色是由硝基发色团所致，染色性能是由羟基助色团产生的。
苦味酸具有三种作用：1本身是一种胞浆染料，具有染色作用。
2又是一种酸，加入伊红Y染色液中，使染色造成比胞浆等电点略为酸性的环境，抑制了部分氨基酸中羟基官能团，从而使氨基酸中氨基官能团和酸性染料结合，增加了染液与组织间的亲和力，起到促染作用。
3苦味酸又是一种氧化剂，在染色体中经过氧化物作用后，使染色剂与组织成份结合的更牢固。
组织着色鲜艳，染色后不易褪色，因而切片可长期保存。
华越洋伊红染色液操作简单，不使用汞、甲醇等有毒试剂，可以用于组织切片或培养细胞的染色。
本伊红染色液染色后细胞浆呈粉红色或红色。
本染色液可以和免疫荧光染色或免疫组化染色配合使用。
一方面可以在本伊红染色液染色后进行免疫荧光染色或其它染料的染色，另一方面也可以在免疫组化染色后再进行伊红复染。
本染色液可以重复使用，直至认为效果不佳时再换用新的染色液。
H.E染色概念、定义及操作步骤
He染色介绍苏木精—伊红染色法 ( hematoxylin-eosin staining ) ，简称HE染色法，石蜡切片技术里常用的染色法之一。
苏木精染液为碱性，主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色；伊红为酸性染料，主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。
染色分类易于被碱性或酸性染料着色的性质称为嗜碱性( basophilia )和嗜酸性( acidophilia ) 。
组织内构成蛋白质的氨基酸种类很多，它们有不同的等电点。
在普通染色法中，染色液的酸碱度为pH6左右，细胞内的酸性物质如细胞核的染色质、腺细胞和神经细胞内的粗面内质网及透明软骨基质等均被碱性染料染色，这些物质称为嗜碱性。
而细胞质中的其它蛋白质如红细胞中的血红蛋白、嗜酸粒细胞的颗粒及胶原纤维和肌纤维等被酸性染料染色，这些物质称为嗜酸型。
如果改变染色液的酸碱度，pH值升高时，则原来被酸性染料染色的物质可变为嗜碱性；pH值降低时，原来被碱性染料染色的物质则可变为嗜酸性。
所以说染色液的pH值可以影响染色的反应。
DNA两条链上的磷酸基向外，带负电荷，呈酸性，很容易与带正电荷的苏木精碱性染料以离子键结合而被染色。
苏木精在碱性溶液中呈蓝色，所以细胞核被染成蓝色。
伊红Y是一种化学合成的酸性染料，在水中离解成带负电荷的阴离子，与蛋白质的氨基正电荷的阳离子结合使胞浆染色，细胞浆、红细胞、肌肉、结缔组织、嗜伊红颗粒等被染成不同程度的红色或粉红色，与蓝色的细胞核形成鲜明对比。
伊红是细胞浆的良好染料。
由于组织或细胞的不同成分对苏木精的亲和力不同及染色性质不一样。
经苏木精染色后，细胞核及钙盐粘液等呈蓝色，可用盐酸酒精分化和弱碱性溶液显蓝，如处理适宜，可使细胞核着清楚的深蓝色，胞浆等其它成分脱色。
再利用胞浆染料伊红染胞浆，使胞浆的各种不同成分又呈现出深浅不同的粉红色。
故各种组织或细胞成分与病变的一般形态结构特点均可显示出来。
染色结果细胞核被苏木精染成鲜明的蓝色，软骨基质、钙盐颗粒呈深蓝色，粘液呈灰蓝色。
伊红化学成分
伊红化学成分
伊红是一种化学合成的酸性染料，在水中离解成带负电荷的阴离子，与蛋白质的氨基正电荷的阳离子结合使胞浆染色，细胞浆、红细胞、肌肉、结缔组织、嗜伊红颗粒等被染成不同程度的红色或粉红色，与蓝色的细胞核形成鲜明对比。
伊红有多种配方，列举部分如下：
1.伊红（水溶性）：伊红（水溶性）
2.5-5g，蒸馏水
500ml。
将水溶性伊红溶于蒸馏水中，然后加浓盐酸10毫升，充分搅拌，静置过夜后过滤。
过滤后的沉淀用蒸馏水冲洗二次，再过滤；将沉淀物连同滤纸一起放入温箱内干燥，加95%酒精1000毫升，配成饱和液。
使用前再用95%的酒精1∶1～2倍稀释，加入1～2%冰醋酸。
2.伊红（醇溶性）：伊红（醇溶性）2.5-5g，75%酒
精1000ml。
加几滴冰醋酸至半透明状。
河南赛诺特生物 苏木素-伊红（H-E）染色液产品说明书
苏木素-伊红（H-E）染色液产品说明书【产品名称】通用名称：苏木素-伊红（H-E）染色液英文名称：Hemaxytolin-Eosin(HE)Staining kit【包装规格】500mL/瓶，5瓶/盒【预期用途】用于对石蜡切片和冰冻切片的细胞组织进行染色。
【检验原理】苏木素经过氧化变成酸性染料苏木红，苏木红与三价铝离子结合形成带正电荷的蓝色色精，便可与细胞中带负电荷的脱氧核糖核酸结合。
苏木素染液主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色；伊红Y为酸性胞质性染料，主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。
【主要组成成份】每套苏木素-伊红（HE）染色液试剂盒是由高清恒定液（A液）、苏木素染液（B液）、分化液（C液）、返蓝液（D液）、伊红染液（E液）组成。
每套苏木素-伊红（HE）染色液试剂盒的主要成分为：1)高清恒定液（A液），由专用稳定剂等成分组成；2)苏木素染液（B液），主要由苏木素、乙二醇、硫酸铝钾等成分组成；3)分化液（C液），主要由酒石酸等成分组成；4)返蓝液（D液），主要由Tris、氯化钠和防腐剂等成分组成；5)伊红染液（E液），主要由伊红二钠Y和乙醇等成分组成。
【储存条件及有效期】试剂盒应存放于室温（15-30℃），有效期为12个月，在有效期内的已开封试剂使用期限为3个月。
每次用后应及时盖上盖子，以免挥发或变质。
【适用仪器】手动常规染色和全自动染色机染色。
【样本要求】病理组织经取材，福尔马林固定，脱水处理，用石蜡包埋后制成蜡块，用切片机切成2-5μm厚度的组织切片采集到载玻片上（有些特殊类型的组织可能要求不同的切片厚度）。
之后将载玻片放置于烤片机上65℃（±5℃）下烤片10-30分钟，即可染色。
【检验方法】1、二甲苯I、II、III脱蜡各2-4min；2、无水乙醇I、II、III各2min；3、95%乙醇15s；4、75%乙醇15s；5、水洗1min；6、高清恒定液30s-60s；7、苏木素染液3-5min；8、水洗1min；9、分化液3-15s；10、水洗1min；11、返蓝液1-2min；12、水洗1min；13、95%乙醇30-60s；14、伊红染液20-60s；15、无水乙醇I、II、III各2min；16、二甲苯I、II、III各2min。
苏木素伊红(HE)染色试剂盒说明书
苏木素伊红(HE)染色试剂盒货号：AG1120规格：3×10ml/3×100ml保存：常温保存，复检期至少1年。
注意：环境温度低时，分化液可能会结晶析出，将分化液37℃水浴融化后即可，不影响使用。
产品说明：苏木精-伊红染色法(Hematoxylin-Eosin staining )，简称HE 染色法，是病理学常规制片中最基本的染色方法。
苏木精染液为碱性，主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色；伊红为酸性染料，主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。
染色过程需要优化，着色情况与组织或细胞的种类有关，也随其生活周期及病理变化而改变。
例如，很多细胞在新生时期胞浆对伊红着色较淡或轻度嗜碱，当其衰老时或发生退行性变则呈现嗜伊红浓染。
胶原纤维在老化和出现透明变性时，伊红着色由浅变深。
本产品所包含试剂均为工作液，可直接使用。
操作说明（以下步骤仅供参考）：（一）石蜡组织切片染色。
1．取材组织块，经固定后，常规石蜡包埋，切片。
2．石蜡切片脱蜡水化：①二甲苯（I ）中脱蜡5min 。
②换用新鲜的二甲苯（Ⅱ），再脱蜡5min 。
③无水乙醇5min 。
④95%乙醇2min 。
⑤80％乙醇2min⑥70%乙醇2min 。
⑦蒸馏水2min 。
3．苏木素染液染色5-20min(具体时间根据染色结果和实验要求调整)，自来水冲洗。
4．分化液分化30s 。
5．自来水浸泡15min 或温水（约50℃）5min 。
6．置伊红染液几秒-2min(具体时间根据染色结果和实验要求调整)，自来水冲洗。
7．自来水浸泡1-2min 。
8．脱水，透明，封片：①95％乙醇（I ）1min②95％乙醇（Ⅱ）1min③100％乙醇（I ）1min 产品内容AG1120-10AG1120-100苏木素染液10ml 100ml 分化液10ml 100ml 伊红染液10ml 100mlShanghai Acmec Biochemical Co.,Ltd.Tel ：400-900-4166WEB ：④100％乙醇（Ⅱ）1min⑤二甲苯石炭酸（3：1）1min⑥二甲苯（I）1min⑦二甲苯（Ⅱ）1min⑧中性树胶封固，镜下观察。
(仅供参考)苏木素伊红染色液说明书
苏木素-伊红染色液（H-E）说明书【产品名称】苏木素-伊红染色液（H-E）H&E Staining System【产品编号】HE-500ml,HE-1000ml,HE-2500ml【包装规格】苏木素染色液500ml、1000ml2500ml；伊红染色液500ml、1000ml 2500ml；返蓝染色液500ml、1000ml2500ml。
【预期用途】主要用于对细胞组织进行染色。
【检验原理】苏木素-伊红染色液（H-E）由3部分组成：苏木素染色液、伊红染色液和返蓝染色液。
苏木素氧化后与金属媒染剂作用，可形成不可替代的细胞核颜料。
带有正电荷的苏木素-金属媒染剂复合体，易与细胞核内DNA上带负电荷的磷酸基团结合，因而使细胞核染色形成特定的蓝色。
伊红染色液是一种广泛用于组织学染色中与苏木素染色形成对比的染料（HE染色法）。
此染色法可观察到清晰的细胞结构。
样本中细胞核可经苏木素染色呈蓝色，细胞质经伊红染色呈粉红色。
伊红是一种阴离子染料，可将红细胞染成亮红色，同样也可对其他基本的细胞组分（细胞质，胶原及肌纤维）进行染色。
返蓝染色液为组织学染色试剂，可替代水洗，快速使核染色质和核膜显现蓝色。
由于其坚硬度和碱性，水冲洗后改变苏木素染核后的颜色。
使用BioGnost 返蓝染色液，粘附在玻片上的样本不会发生像使用其他返蓝染色液时发生降解。
【主要组成成分】苏木素：乙二醇、苏木素、碘酸钠、硫酸铝；伊红：伊红、乙醇；返蓝染色液：碳酸锂。
【储存条件及有效期】保证产品包装完整的情况下，储存温度在+15°C和+25°C 之间。
保持储存环境干燥，不要放置于寒冷的环境中，不要冷冻产品，避免直接阳光直射。
产品使用效期为2年，具体效期见标签。
【适用仪器】不适用【样本要求】使用合适的设备仪器收集组织样本，并标记清楚，根据操作说明进行实验。
为避免发生错误，染色及诊断过程最好由具相关专业知识的技术人员操作。
根据标准医疗诊断实验室标准镜检诊断。
he染色苏木素
苏木素-伊红染色液(H-E)说明书【产品名称】苏木素-伊红染色液(H-E）【型号】苏木素染色液分别为：Mayer型、改良Harris型、型改良Lillie-Mayer型；伊红染色液分别为：水溶型、醇溶型。
【包装规格】货号：DH0006单瓶包装规格分别为：100ml、250ml、500ml、5000ml；每套/盒包装规格分别为：2×100ml/盒、2×250ml/盒、2×500ml/盒、2×5000ml/盒。
【预期用途】主要用于对细胞组织进行染色。
【检验原理】苏木素(Hematoxylin)和伊红(Eosin)联合主要用于对细胞组织进行染色，简称HE染色，是病理学常规制片中最基本的染色方法，应用极其广泛，苏木素-伊红染色是生物学、组织学、病理学及细胞学等学科必不可少的最基本的染色方法，在病理诊断、教学与科研中广泛应用，具有重要价值，细胞中的细胞核是由酸性物质组成，它与碱性染料(苏木素)的亲和力较强；细胞浆则相反，它所含的碱性物质与酸性染料(伊红)的亲和力较大。
因此细胞或组织切片经苏木素-伊红染色液染色后，细胞核被苏木素染成鲜明的蓝紫色，细胞浆、肌纤维、胶元纤维等呈不同程度的红色，红细胞则呈橙红色。
【主要组成成分】试剂组成主要成分苏木素染色液(改良Lillie-Mayer)或苏木素染色液(改良Harris)或木素染色液(Mayer) 苏木色精伊红染色液(水溶)或伊红染色液(醇溶) 伊红【储存条件及有效期】5℃～35℃保存，原包装未开封染色液的有效期为18个月，在有效期内的已开封染色建议在开封后6个月内使用完，每次用后及时拧紧瓶盖，以免挥发或变质。
【样本要求】涂片和切片必须充分固定，石蜡切片要充分脱蜡。
【检验方法】l、石蜡切片于二甲苯I、II中脱蜡；2、经无水乙醇和95%乙醇，经8O%乙醇，自来水冲洗；3、苏木素染色液(改良Lillie-Mayer或改良Harris)染色，自来水洗；或苏木素染色液(Mayer)染色；4、苏木素染色后用l%盐酸乙醇溶液分化数秒(l%盐酸乙醇溶液配制：99m1 75%乙醇加1ml浓盐酸）；若用苏木素染色液(Mayer)染色后则不需分化；5、自来水冲洗返蓝；亦可用碳酸锂水溶液返蓝，自来水洗；6、入伊红染色液(水溶)染色，稍洗；若用伊红染液(醇溶），切片应先经80%乙醇脱水后，再入伊红染液(醇溶)染色(忌水洗）；7、95%乙醇I、II中调色；8、无水乙醇I、II中脱水，二甲苯I、II中透明；9、封片胶封片，镜检。
伊红染色液产品技术要求
伊红染色液产品技术要求
1. 伊红染色液应满足国际标准和国内相关的产品技术要求。
2. 伊红染色液的化学成分应符合相关标准，其中应包括染料、溶剂、增韧剂等物质的规定。
3. 伊红染色液的颜色稳定性应良好，染色后的颜色要达到预期效果，并且经过一定的时间和条件后，颜色仍然不发生明显改变。
4. 伊红染色液的染色能力应良好，能够均匀地将染色液渗透和沉积在染色物质的表面，并且均匀地分布在整个染色物质上。
5. 伊红染色液的染色效果应持久，经过一定时间和条件的处理后，染色的效果不会褪色或掉落。
6. 伊红染色液的使用方便性应良好，包括易于携带、易于使用、易于清洗等方面。
7. 伊红染色液的安全性应良好，不应含有任何对人体健康或环境有害的物质，符合相关的安全标准和要求。
8. 伊红染色液的稳定性应良好，存放在规定的条件下，能长期保持其性能和质量。
9. 伊红染色液的包装应符合相关规定，能够保护产品免受外界环境的影响，并能方便使用和储存。
10. 伊红染色液的生产过程应符合相关的生产标准和要求，确保产品的质量和性能稳定。
苏木精染色
苏木素-伊红染色液(H-E)说明书【产品名称】苏木素-伊红染色液(H-E）【型号】苏木素染色液分别为：Mayer型、改良Harris型、型改良Lillie-Mayer型；伊红染色液分别为：水溶型、醇溶型。
【包装规格】货号：DH0006单瓶包装规格分别为：100ml、250ml、500ml、5000ml；每套/盒包装规格分别为：2×100ml/盒、2×250ml/盒、2×500ml/盒、2×5000ml/盒。
【预期用途】主要用于对细胞组织进行染色。
【检验原理】苏木素(Hematoxylin)和伊红(Eosin)联合主要用于对细胞组织进行染色，简称HE染色，是病理学常规制片中最基本的染色方法，应用极其广泛，苏木素-伊红染色是生物学、组织学、病理学及细胞学等学科必不可少的最基本的染色方法，在病理诊断、教学与科研中广泛应用，具有重要价值，细胞中的细胞核是由酸性物质组成，它与碱性染料(苏木素)的亲和力较强；细胞浆则相反，它所含的碱性物质与酸性染料(伊红)的亲和力较大。
因此细胞或组织切片经苏木素-伊红染色液染色后，细胞核被苏木素染成鲜明的蓝紫色，细胞浆、肌纤维、胶元纤维等呈不同程度的红色，红细胞则呈橙红色。
【主要组成成分】试剂组成主要成分苏木素染色液(改良Lillie-Mayer)或苏木素染色液(改良Harris)或木素染色液(Mayer) 苏木色精伊红染色液(水溶)或伊红染色液(醇溶) 伊红【储存条件及有效期】5℃～35℃保存，原包装未开封染色液的有效期为18个月，在有效期内的已开封染色建议在开封后6个月内使用完，每次用后及时拧紧瓶盖，以免挥发或变质。
【样本要求】涂片和切片必须充分固定，石蜡切片要充分脱蜡。
【检验方法】l、石蜡切片于二甲苯I、II中脱蜡；2、经无水乙醇和95%乙醇，经8O%乙醇，自来水冲洗；3、苏木素染色液(改良Lillie-Mayer或改良Harris)染色，自来水洗；或苏木素染色液(Mayer)染色；4、苏木素染色后用l%盐酸乙醇溶液分化数秒(l%盐酸乙醇溶液配制：99m1 75%乙醇加1ml浓盐酸）；若用苏木素染色液(Mayer)染色后则不需分化；5、自来水冲洗返蓝；亦可用碳酸锂水溶液返蓝，自来水洗；6、入伊红染色液(水溶)染色，稍洗；若用伊红染液(醇溶），切片应先经80%乙醇脱水后，再入伊红染液(醇溶)染色(忌水洗）；7、95%乙醇I、II中调色；8、无水乙醇I、II中脱水，二甲苯I、II中透明；9、封片胶封片，镜检。
精子活体染色液(伊红法)
北京雷根生物技术有限公司
精子活体染色液(伊红法)
简介：
伊红(Eosin)又称曙红，属人工合成染料中的呫吨类染料，为桃红色或粉红色的粉末。
分子式为C 20H 6O 5Br 4Na 2，分子量为691.86。
临床上，可通过检测精子膜的完整性来评价精子的存活率，用Leagene 精子活体染色液(伊红法)可以常规检测所有精子标本的存活率，通过染料拒染法来鉴别细胞膜完整的精子，从而得出活精子的百分率。
该染色液由伊红、去离子水等组成，利用了染料拒染原理，即相关基于损伤的细胞膜，如在非活的(死)细胞上的膜，允许非透过膜性染料可进入膜内染色；而活细胞的细胞膜能够抗拒染料进入，所以产生拒染现象，不着色。
该染色液液仅适用于科研领域，不适用于临床诊断或其他用途。
组成：
操作步骤（仅供参考）：
1、 取洁净载玻片，滴加新鲜精液和精子活体染色液(伊红法)各1滴，混匀。
2、 加盖盖玻片，放置，立即在高倍镜(可用400×)下观察。
3、 计数200个精子，计算未着色(活精子)占200个精子的百分率。
染色结果： 活精子
不着色(白色) 死精子
红色
注意事项：
1、 精液标本一旦液化应立即检测精子存活率，最好在30min 内，在任何情况下都不能超过1h ，以免因脱水或温度变化导致精子失活而使染色检测结果不准。
2、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期： 12个月有效。
编号 名称 DA0182 Storage 精子活体染色液(伊红法) 10ml RT 避光 使用说明书 1份。
常用染色步骤HE,马松,糖原
常用染色步骤HE,马松,糖原联系人:周昌斌137******** 133********苏木素伊红染色液一.苏木素伊红染色液套装组合:Harris苏木素染色液50ml水溶性伊红染色液50ml苏木素染色分化液50ml苏木素染色返兰液50ml概述:苏木素伊红染色是组织病理学经典的常规染色方法,历经上百年的应用历史至今仍无可替代。
因此,苏木素伊红染色是病理切片制作中极为重要的技术环节。
二.染色方法:1. 切片脱蜡二甲苯I 5分钟,2. 切片脱蜡二甲苯II 5分钟,3. 100%1、100%2、95%1、95%2、70%梯度乙醇各30,秒钟,4. 自来水流水冲洗1分钟,5. 苏木素染色5—8分钟(依染液新旧调整染色时间),6. 自来水流水冲洗1分钟,7. 进入分化液分化数秒钟,8. 自来水流水冲洗1分钟,9. 进入返兰液处理5—10秒钟,10. 自来水流水冲洗2分钟,11. 进入伊红染色液1-3分钟,12. 自来水冲洗30—60秒钟,13. 75%I、75%II乙醇脱水分色各10秒钟,14. 95%乙醇1、95%乙醇2各脱水10秒钟,15. 100%乙醇1、100%2脱水30-60秒钟,16. 二甲苯1、二甲苯2透明各1分钟,17. 中性树胶封固。
三.染色技术要点:苏木素染色液在静止由于时染液表面于空气中的氧分子接触极液体代表面水分蒸发会产生氧化作用并形成氧化膜。
因此,在使用前应使用滤纸吸附去除氧化膜以免污染切片。
一般情况下应建立良好的使用习惯,每隔2~3天将苏木素染液彻底过滤一次。
为保证HE切片的恒定染色质量建议每500ml苏木素染色液染1200~1500张切片为宜。
苏木素染色液在用于免疫组织化学染色的的复染时应注意调控染色时间,核染色过浅不易辨识组织结构而核染色过深则喧宾夺主,一般复染的时间应控在10-30秒以内。
此外,复染后的分化和返兰步骤不应省略否则将造成整张切片呈淡蓝色,使DAB呈现土黄色。
分化和返兰步骤是HE染色关键点,应在染色实践中依据分化液和返兰液的新旧调整分化和返兰的处理时间。
苏木素-伊红染色液是什么
苏木素-伊红染色液(H-E)说明书【产品名称】苏木素-伊红染色液(H-E）【型号】苏木素染色液分别为：Mayer型、改良Harris型、型改良Lillie-Mayer型；伊红染色液分别为：水溶型、醇溶型。
【包装规格】货号：DH0006单瓶包装规格分别为：100ml、250ml、500ml、5000ml；每套/盒包装规格分别为：2×100ml/盒、2×250ml/盒、2×500ml/盒、2×5000ml/盒。
【预期用途】主要用于对细胞组织进行染色。
【检验原理】苏木素(Hematoxylin)和伊红(Eosin)联合主要用于对细胞组织进行染色，简称HE染色，是病理学常规制片中最基本的染色方法，应用极其广泛，苏木素-伊红染色是生物学、组织学、病理学及细胞学等学科必不可少的最基本的染色方法，在病理诊断、教学与科研中广泛应用，具有重要价值，细胞中的细胞核是由酸性物质组成，它与碱性染料(苏木素)的亲和力较强；细胞浆则相反，它所含的碱性物质与酸性染料(伊红)的亲和力较大。
因此细胞或组织切片经苏木素-伊红染色液染色后，细胞核被苏木素染成鲜明的蓝紫色，细胞浆、肌纤维、胶元纤维等呈不同程度的红色，红细胞则呈橙红色。
【主要组成成分】试剂组成主要成分苏木素染色液(改良Lillie-Mayer)或苏木素染色液(改良Harris)或木素染色液(Mayer) 苏木色精伊红染色液(水溶)或伊红染色液(醇溶) 伊红【储存条件及有效期】5℃～35℃保存，原包装未开封染色液的有效期为18个月，在有效期内的已开封染色建议在开封后6个月内使用完，每次用后及时拧紧瓶盖，以免挥发或变质。
【样本要求】涂片和切片必须充分固定，石蜡切片要充分脱蜡。
【检验方法】l、石蜡切片于二甲苯I、II中脱蜡；2、经无水乙醇和95%乙醇，经8O%乙醇，自来水冲洗；3、苏木素染色液(改良Lillie-Mayer或改良Harris)染色，自来水洗；或苏木素染色液(Mayer)染色；4、苏木素染色后用l%盐酸乙醇溶液分化数秒(l%盐酸乙醇溶液配制：99m1 75%乙醇加1ml浓盐酸）；若用苏木素染色液(Mayer)染色后则不需分化；5、自来水冲洗返蓝；亦可用碳酸锂水溶液返蓝，自来水洗；6、入伊红染色液(水溶)染色，稍洗；若用伊红染液(醇溶），切片应先经80%乙醇脱水后，再入伊红染液(醇溶)染色(忌水洗）；7、95%乙醇I、II中调色；8、无水乙醇I、II中脱水，二甲苯I、II中透明；9、封片胶封片，镜检。
伊红染色液(水溶)
伊红染色液(水溶)简介：伊红(Eosin)又称曙红，属人工合成染料中的呫吨类染料，为桃红色或粉红色的粉末。
分子式为C20H6O5Br4Na2，分子量为691.86。
伊红最适宜与苏木精配合染色以显示正常或病理组织的形态结构。
水溶性伊红Y含有一个醌型苯环的发色团和两个形成钠盐的酸性助色团(R-COONa、R-ONa)。
这种形成盐类的酸性染料在水中溶解时解离为带负电荷的色酸部分(R-COO-、R-O-)，即染料的有色部分和带正电荷的钠离子部分(Na+)。
染色时伊红Y 带负电荷的色酸部分与组织内带正电荷的物质以离子键的形式结合而显色。
Leagene 伊红染色液(Eosin Y Stain)采用Leagene特有防腐剂，操作简单，不使用汞、甲醇等有毒试剂，可以用于组织切片或培养细胞的染色。
可以和免疫荧光染色或免疫组化染色配合使用。
一方面可以在伊红染色后进行免疫荧光染色或其它染料的染色，另一方面也可以在免疫组化染色后再进行伊红复染。
本染色液可以重复使用，直至认为效果不佳时再换用新的染色液，染色后细胞浆呈粉红色或红色。
组成：自备材料：1、蒸馏水2、4%多聚甲醛3、系列乙醇操作步骤（仅供参考）：1、样品处理a)对于石蜡切片:二甲苯中脱蜡。
换用新鲜的二甲苯，再脱蜡。
b)对于冰冻切片:蒸馏水2min。
c) 对于培养细胞: 编号名称DH0051 DH0051 Storage Eosin Y Stain100ml 500ml RT 避光使用说明书1份用多聚甲醛固定。
蒸馏水洗涤。
换用新鲜的蒸馏水，再洗涤。
2、伊红染色对于上述处理好的样品，伊红染色液染色0.5~2min(根据染色结果和要求调整时间)。
如果需要直接观察，可以用70%乙醇洗涤2次。
如需脱水、透明后封片按后续步骤进行，70%乙醇洗涤后仍可按照后续步骤进行脱水、透明和封片处理。
注：如果用于免疫组化等染色后的复染，参考上述步骤在其它染色完成后进行伊红染色。
3、脱水、透明、封片或进行其它染色a)脱水、透明、封片：乙醇脱水。
伊红染色液说明书
伊红染色液说明书【产品名称】通用名称：伊红染色液英文名称：Dako Modified Eosin Y solution【包装规格】1L【预期用途】主要用于细胞浆染色。
伊红染色液预期用于给用福尔马林固定并用石蜡包埋的组织切片、冻结切片和细胞制片中的细胞质进行初步染色（红色）。
它是供在DakoCoverStainer仪器上使用的即用型试剂。
【主要组成成分】伊红水溶液。
每瓶当中都含有1000 mL即用型试剂。
当把伊红染色液加载到DakoCoverStainer仪器上后，应在5天内用掉或在处理完3000张载玻片后更换掉（取决于先发生的情况）。
配套产品代码CS709, Dako Harris Hematoxylin代码CS702, Dako Bluing Buffer代码CS703, Dako Mounting Medium或代码CS705, Dako Toluene Free Mounting Medium代码CS704, Dako Cover Glass【储存条件及有效期】15℃～30℃保存，有效期12个月。
过了瓶上印刷的有效期后，请勿使用。
如果每天晚上都回收到瓶中，则试剂的机载稳定时间可达5天。
如果将试剂存储在其它任何非规定条件下，则用户须对条件进行验证。
没有显著标志标明本产品的不稳定性。
如果出现实验室的程序实施差异无法解释的不合理染色效果且怀疑是试剂出了问题时，请联系Dako的技术支持部。
生产日期、失效日期：见包装标签。
【适用仪器】在Dako CoverStainer仪器（组织染色机）上使用。
有关仪器及使用说明的更多信息，请参阅DakoCoverStainer仪器的《用户指南》。
【样本要求】石蜡切片：伊红染色液可用于对用福尔马林固定并用石蜡包埋的组织切片进行初步染色。
冻结切片和细胞制片：伊红染色液可用于对用丙酮固定的冻结切片或者固定的细胞制片进行初步染色。
【检验方法】伊红染色液（代码CS711）是一种即用型试剂。
伊红配制
伊红，是我们常用的染料，英文名为Eosin，又叫四溴荧光素，是一种混合物。
伊红是生物学上常用的染料，一般观察细胞用的HE染色，其中的E就是伊红的简称。
伊红的分子式，但是实际试用的是混合物，而非纯净物，根据溶解度不同，分为水溶性和醇溶性的两种，水溶性的并不是不溶于醇，而是溶解度较小的缘故。
加入浓盐酸之后，原来的水溶液，竟然分成两层了。
因为常用，所以科里面有许多以前购买的伊红试剂，反正我们上班之后一直用的就是那些试剂，技术员说，从来没有购买过。
不过最近技术员说配置的伊红不怎么着色，她用的方法大概是2.5-5g伊红，溶于500毫升蒸馏水中配称伊红染液；后来我看了一下，还有其他的方法，就用另外一种方法：伊红0.5克，蒸馏水75毫升，95%的酒精25毫升，以前用这种方法配的着色还行，不过这次用这种方法配，着色效果也不是很好。
大家找不到原因，最后担心是不是试剂时间太长，过了失效期了？不过试剂瓶上并没有有效期一说。
就想到到病理技术网上问问，后来丁老师给了一个方法：2.5克溶于500毫升水当中，然后加入10毫升浓盐酸，静置过夜然后过滤，之后把放置烤箱内烤干，用这些干燥物，加95%的酒精1000毫升配称原液，用时可以用1：1到1：2的比例稀释。
其实这个方法以前看到过，只不过没有看明白。
最主要的疑惑就是不知道用水溶解之后过滤剩余的该如何处理？难道要把这些滤液倒掉吗？所以一直有着用的一个疑问。
这个疑问是因为我们用的是水溶性的伊红，在水中的溶解度比较高，简单的方法直接就可以使用，这些滤液倒掉岂不可惜。
但是实际操作的时候，发现原来自己的担心是多余的。
因为伊红溶解添加浓盐酸10毫升之后，原来的水溶液逐渐出现浑浊，最后慢慢地出现分层，上层的是淡黄色的清亮液体，而下面粉红色的絮状沉淀。
原来是添加酸之后，水溶液里出现了絮状沉淀。
这样伊红是不会随着过滤流掉的。
看到这个现象才明白了这样做的目的，这样第二天过滤之后，原来的伊红不仅没有减少，似乎反而多了点。
伊红染液(Eosin staining solution)使用说明书
杭州昊鑫生物科技股份有限公司 htpp://
1 伊红染液
伊红染液（Eosin staining solution ）
为了正确区分胞内结构，伊红常常用于苏木素染色后的复染。
伊红是酸性染料，可染细胞质，尤其是线粒体、分泌颗粒和胶原。
它可以区分细胞内不同的细胞器以及不同的结缔组织。
实验流程
1.样品处理
1)对于石蜡切片
二甲苯中脱蜡2×3~5min。
无水乙醇5 min 、90%乙醇2 min 、70%乙醇2 min 、PBS 漂洗2 min 。
2)对于冰冻切片
PBS 漂洗2 min 。
3)对于培养细胞
用4%多聚甲醛固定10 min 以上；PBS 洗涤2×2 min 。
2. 伊红染色
伊红复染30~60sec ，可根据染色结果和要求调整染色时间。
注意：使用伊红复染组织切片的失败，将导致组织切片的低分化。
染色较弱是由于：1）组织切片过薄；2）染色时间不足；3）随后95%酒精分化过度。
染色过度是由于：1）染液浓度较高（可能是由于过度蒸发）；2）组织切片过厚；3）染色时间过长；4）随后95%酒精分化不足。
结果
细胞质：红色。
温馨提示
1. 为了您的自身安全，使用试剂前，请做好防护，如穿实验服，戴手套等。
2. 试剂应保存于阴凉、干燥、通风良好的环境中。
储存温度
避光储存于室温。
包装清单 货号
品名 包装 HCY106
Eosin staining solution 100mL 说明书 1份。
he染色原理
苏木素-伊红染色液(H-E)说明书【产品名称】苏木素-伊红染色液(H-E）【型号】苏木素染色液分别为：Mayer型、改良Harris型、改良Lillie-Mayer型；伊红染色液分别为：水溶型、醇溶型；苏木素-伊红染色液混合型。
【包装规格】货号：DH0006单瓶包装规格分别为：100ml、250ml、500ml、5000ml；每套/盒包装规格分别为：2×100ml/盒、2×250ml/盒、2×500ml/盒、2×5000ml/盒。
【预期用途】主要用于对细胞组织进行染色。
【检验原理】苏木素(Hematoxylin)和伊红(Eosin)联合主要用于对细胞组织进行染色，简称HE染色，是病理学常规制片中最基本的染色方法，应用极其广泛，苏木素-伊红染色是生物学、组织学、病理学及细胞学等学科必不可少的最基本的染色方法，在病理诊断、教学与科研中广泛应用，具有重要价值，细胞中的细胞核是由酸性物质组成，它与碱性染料(苏木素)的亲和力较强；细胞浆则相反，它所含的碱性物质与酸性染料(伊红)的亲和力较大。
因此细胞或组织切片经苏木素-伊红染色液染色后，细胞核被苏木素染成鲜明的蓝紫色，细胞浆、肌纤维、胶元纤维等呈不同程度的红色，红细胞则呈橙红色。
【主要组成成分】试剂组成主要成分苏木素染色液(改良Lillie-Mayer)或苏木素染色液(改良Harris)或苏木素染色液(Mayer) 苏木色精伊红染色液(水溶)或伊红染色液(醇溶) 伊红苏木素-伊红染色液混合型苏木色精、伊红【储存条件及有效期】5℃～35℃保存，原包装未开封染色液的有效期为18个月，在有效期内的已开封染色建议在开封后6个月内使用完，每次用后及时拧紧瓶盖，以免挥发或变质。
【样本要求】涂片和切片必须充分固定，石蜡切片要充分脱蜡。
【检验方法】l、石蜡切片于二甲苯I、II中各脱蜡若干分钟；2、经无水乙醇和95%乙醇各约若干分钟，经80%乙醇若干分钟，自来水冲洗若干分钟；3、苏木素染色液(改良Lillie-Mayer或改良Harris)染色若干分钟，自来水洗若干分钟；或苏木素染色液(Mayer)染色若干分钟；或苏木素-伊红染色液(混合型)染色若干分钟；4、苏木素染色后用l%盐酸乙醇溶液分化数秒(l%盐酸乙醇溶液配制：99m1 75%乙醇加1ml浓盐酸）；若用苏木素染色液(Mayer)和苏木素-伊红染色液(混合型)染色后则不需分化；5、自来水冲洗返蓝若干分钟；亦可用碳酸锂水溶液返蓝若干秒，自来水洗若干分钟；6、入伊红染色液(水溶)染色若干分钟，稍洗；若用伊红染液(醇溶），切片应先经80%乙醇脱水后，再入伊红染液(醇溶)染色若干分钟(忌水洗）；此步骤苏木素-伊红染色液(混合型)不适用。
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仅供科研版本号：170602
伊红染色液(水溶)
【产品组成】
【保存条件】
室温,避光,12个月
【产品概述】
伊红(Eosin)又称曙红，属人工合成染料中的呫吨类染料，为桃红色或粉红色的粉末。
分子式为
C20H6O5Br4Na2，分子量为691.86。
伊红最适宜不苏木精配合染色以显示正常或病理组织的形态结构。
水溶性伊红Y含有一个醌型苯环的发色团和两个形成钠盐的酸性助色团(R-COONa、R-ONa)。
这种形成盐类的酸性染料在水中溶解时解离为带负电荷的色酸部分(R-COO-、R-O-)，即染料的有色部分和带正电荷的钠离子部分(Na+)。
染色时伊红Y带负电荷的色酸部分不组织内带正电荷的物质以离子键的形式结合而显色。
伊红染色液(Eosin Y Stain)采用特有防腐剂，操作简单，丌使用汞、甲醇等有毒试剂，可以用于组织切片或培养细胞的染色。
可以和免疫荧光染色或免疫组化染色配合使用。
一方面可以在伊红染色后进行免疫荧光染色或其它染料的染色，另一方面也可以在免疫组化染色后再进行伊红复染。
本染色液可以重复使用，直至认为效果丌佳时再换用新的染色液，染色后细胞浆呈粉红色或红色。
【使用方法】
1、样品处理
a)对于石蜡切片:
二甲苯中脱蜡5~10min。
换用新鲜的二甲苯，再脱蜡5~10min。
无水乙醇5min。
90%乙醇2min。
70%乙醇2min。
蒸馏水2min。
b)对于冰冻切片:
蒸馏水2min。
c)对于培养细胞:
用4%多聚甲醛固定10min以上。
蒸馏水洗涤2分钟。
换用新鲜的蒸馏水，再洗涤2min。
2、伊红染色
对于上述处理好的样品，伊红染色液染色0.5~2min(根据染色结果和要求调整时间)。
如果需要直接观察，可以用70%乙醇洗涤2次。
如需脱水、透明后封片按后续步骤进行，70%乙醇洗涤后仍可按照后续步骤进行脱水、透明和封片处理。
注：如果用于免疫组化等染色后的复染，参考上述步骤在其它染色完成后进行伊红染色。
3、脱水、透明、封片或进行其它染色
a)脱水、透明、封片：
95%乙醇脱水2min。
换用新鲜的95%乙醇再脱水2min。
二甲苯透明5min。
换用新鲜的二甲苯，再透明
5min。
用中性树胶或其它封片剂封片。
显微镜下观察，细胞浆呈粉红色或红色。
b)进行其它染色：
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如果进行免疫荧光染色，或进行Hoechst等荧光染料的染色，在伊红染色液染色后：70％乙醇洗涤2次，每次2min。
PBS或生理盐水或TBS或TBST等用于免疫染色或荧光染料染色的溶液浸泡5min。
进行免疫荧光染色或其它荧光染料的染色。
【注意事项】
1、如果需要脱水、透明和封片处理，需自备二甲苯，中性树胶或其它封片剂。
如果样品是石蜡切片，需自备90％乙醇，无水乙醇以及二甲苯。
2、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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