海藻糖与脂质膜相互作用机理研究
海藻糖--脂肪粒的天敌
海藻糖--脂肪粒的天敌眼部，是最容易泄露秘密的地方之一，也是最娇嫩最脆弱的地方。
保养工作不到位会出现细纹，过度保养恼人的脂肪粒又找上门来。
很多时候，最受关注的眼周问题不是黑眼圈，而是脂肪粒，一旦出现还不好消灭。
让我们来赶紧解决它!脂肪粒从成分来说，就是脂肪形成的脂肪组织。
从表面上看，脂肪粒突出皮肤形成了一个小白点，但是脂肪粒真正的面目不仅如此。
你看到的仅仅还是大树的树冠，脂肪粒还有一部分深深埋藏在真皮层，就如同地面下的树根。
脂肪粒之所以不能够彻底清除，主要是一般的产品仅仅是把露出皮肤的部分清除掉了，没有伤其根本，脂肪粒还是会再次长出来的。
解答好脂肪粒的形成，关于海藻糖是如何去除脂肪粒的，就很好解释的了。
海藻糖是很不错的分解脂肪的物质。
海藻糖是从海藻中提取的分解脂肪的物质。
在临床试验中，海藻糖可以把脂肪分解为脂肪酸和水，并且通过新陈代谢排出体外。
起初，并没有人发现海藻糖这一特质，也是通过专门的科研机构进行研发的。
位于我们的野生海藻生长在4000米下的深海海域。
我们的研发中心在对海藻进行研究后发现，其中含有大量的海藻糖，并利用CO2超临界萃取技术成功从海藻中提取出高倍浓缩的海藻糖因子，并将其作用于脂肪粒，发现可以快速分解堆积的油脂分子，调节恢复眼周微循环，恢复眼周油脂排泄顺畅，彻底消除脂肪粒。
RCD等离子溶脂技术靶向分解油脂脂肪粒油脂分子不溶于水，分子结构致密不易分解。
法国加来研究中心历经11年，研发出RCD等离子溶脂技术，是目前唯一真正可以将油脂分解为水、葡萄糖和二氧化碳的技术，这使彻底消除脂肪粒成为可能。
独家三步祛粒攻略1 分解油脂脂肪粒脱落分解油脂分子，加速眼周代谢循环，分解物随新陈代谢排出，脂肪粒自然脱落。
2 平衡眼周循环光滑肌肤激活眼周细胞活性，调节眼周内分泌，淡化色素沉淀，使眼周肌肤恢复自然营养均衡3 补充营养祛粒不留痕彻底消除粒痕，补充多种个胶原蛋白活性，恢复眼周紧致弹滑，再现无暇眼周美肌。
海藻糖的提取与分离实验设计
目录海藻糖的提取与分离实验设计------------------------------------------ 2 前言----------------------------------------------------------- 2 关键词--------------------------------------------------------- 21、海藻糖的理化性质--------------------------------------------- 21.1密度----------------------------------------------------- 21.2熔点----------------------------------------------------- 21.3溶解热--------------------------------------------------- 21.4甜度----------------------------------------------------- 21.5溶解性、晶体析出性--------------------------------------- 21.6高玻璃化转变温度----------------------------------------- 31.7低吸湿性和保水性----------------------------------------- 31.8耐热、耐酸性--------------------------------------------- 31.9着色性--------------------------------------------------- 32、海藻糖的功效作用--------------------------------------------- 32.1保护功能------------------------------------------------- 32.2抑制淀粉老化--------------------------------------------- 42.3防止蛋白质变性------------------------------------------- 42.4抑制鱼腥味的产生----------------------------------------- 42.5抑制脂质氧化变质----------------------------------------- 52.6矫味作用------------------------------------------------- 53、海藻糖提取分离的原理和影响因素的预判------------------------- 53.1提取分离原理--------------------------------------------- 53.2海藻糖标准曲线的绘制原理--------------------------------- 63.3粉末活性炭脱色脱蛋白效果的表征--------------------------- 73.4离子交换树脂脱盐脱色效果的表征--------------------------- 73.5相关影响因素--------------------------------------------- 74、海藻糖提取分离的实验设计------------------------------------ 84.1实验原料与器材------------------------------------------- 84.2海藻糖提取与分离工艺流程--------------------------------- 94.2.1实验流程----------------------------------------------- 94.2.2相关因素对海藻糖提取效率的影响------------------------- 94.2.3相关因素对粉末活性炭脱色脱蛋白效率的影响-------------- 114.2.4相关因素对离子交换柱脱盐脱色效率的影响---------------- 155、总结------------------------------------------------------------ 17 参考文献----------------------------------------------------------- 18海藻糖的提取与分离实验设计化学132牟丽慧1301020414前言海藻糖是由两个葡萄糖分子以α,α,1,1-糖苷键构成的非还原性糖,广泛存在于海藻、酵母、霉菌、食用菌、虾、昆虫及生物体内，具有保湿性、抗寒抗旱性、耐热耐酸性等特殊的生物学功能，对生物大分子和生物体均有非特异性的保护作用。
海藻糖保护植物组织和动物细胞的作用机制
海藻糖保护植物组织和动物细胞的作用机制海藻糖作为一种天然的糖类，具有许多独特的生物学特性。
其中，它对植物组织和动物细胞的保护作用机制备受关注。
本篇将深入探讨海藻糖如何发挥其保护作用，主要涉及以下几个方面：海藻糖的特性、保护机制的分子生物学基础、对植物组织的保护以及动物细胞的保护。
一、海藻糖的特性海藻糖是一种非还原性双糖，由两个葡萄糖分子通过特殊化学键相连而成。
这个特殊的化学键使得海藻糖具有很高的热稳定性，能够在高温和干燥的环境下保持稳定，为细胞提供保护。
此外，海藻糖还具有较低的渗透压，不会对细胞造成过大的负担。
二、保护机制的分子生物学基础抗脱水作用：海藻糖具有很高的亲水性，可以与细胞内的水分子结合，形成一种类似玻璃态的晶体结构。
这种结构可以有效地减少细胞内的水分蒸发，从而保护细胞免受干燥和高温的伤害。
维持细胞结构：海藻糖可以与蛋白质和膜结构相互作用，稳定细胞内的各种结构，防止细胞在不利环境下发生变形或损伤。
抑制蛋白质变性：在高温和干燥条件下，蛋白质容易发生变性失活。
海藻糖可以通过与蛋白质相互作用，稳定其三维结构，从而保护其生物学活性。
抗氧化应激：氧化应激是导致细胞损伤的重要因素之一。
海藻糖可以清除细胞内的自由基，减少氧化应激对细胞的损害，增强细胞的抗氧化能力。
三、对植物组织的保护抗旱性：在干旱条件下，植物细胞容易失水死亡。
海藻糖能够提高植物的抗旱性，通过维持细胞水分和稳定生物膜系统，保护植物免受干旱伤害。
研究显示，在干旱条件下，增加植物体内海藻糖的含量可以提高其存活率。
耐热性：高温会导致植物细胞损伤和功能失调。
通过提高植物体内海藻糖的含量，可以增强其耐热性，使植物在高温环境下保持正常的生理功能。
研究表明，海藻糖可以提高植物在高温下的光合作用效率和抗氧化酶活性。
抗寒性：低温会对植物造成冷害，导致细胞内冰晶形成和生物膜损伤。
海藻糖能够稳定生物膜结构，降低细胞内冰晶的形成速度，从而保护植物免受低温伤害。
海藻糖保护植物组织和动物细胞的作用机制
海藻糖保护植物组织和动物细胞的作用机制海藻糖是一种天然的二糖类物质，广泛存在于海藻、真菌和其他植物中。
它具有保护植物组织和动物细胞的作用，这主要源于其特殊的生化性质。
海藻糖可以在植物组织中起到保护作用。
在环境恶劣或极端温度条件下，植物容易受到脱水和冻害的影响。
海藻糖在植物体内积累，并在脱水或寒冷的情况下起到保护细胞的作用。
海藻糖具有较低的水活性，可以减少细胞脱水，保持细胞膜的完整性和稳定性。
此外，海藻糖还可以与蛋白质和其他细胞成分结合，形成保护性的结构，减少细胞组织受到外界环境的伤害。
海藻糖对动物细胞也具有保护作用。
在一些特殊的环境条件下，如低温、干旱和氧气不足，动物细胞容易受到损伤。
海藻糖可以在细胞内积累，起到保护细胞的作用。
海藻糖能够稳定细胞膜结构，防止细胞脱水和膜脂氧化损伤。
此外，海藻糖还可以调节细胞内的水分平衡和离子浓度，维持正常细胞功能。
海藻糖保护植物组织和动物细胞的作用机制主要包括以下几个方面：一是通过调节细胞内的水分平衡，减少细胞脱水和膜脂氧化损伤。
二是通过与细胞成分结合，形成保护性的结构，减少细胞组织受到外界环境的伤害。
三是通过调节细胞内的离子浓度，维持正常细胞功能。
海藻糖还可以通过与其他分子相互作用，调节细胞内的代谢过程，提高细胞的抗逆性和存活能力。
海藻糖作为一种天然的保护剂，在植物组织和动物细胞中发挥着重要的作用。
它通过调节细胞内水分平衡、保护细胞结构和调节代谢过程等多种机制，保护细胞免受环境的伤害。
海藻糖的保护作用不仅对植物和动物有益，对于人类的健康和生活质量也具有重要意义。
因此，研究和应用海藻糖的保护机制，对于保护植物和动物的生存环境，促进人类健康发展具有重要意义。
海藻糖修饰食品脂质纳米粒的稳定性与结构特性研究
18海藻糖修饰食品脂质纳米粒的稳定性与结构特性研究文震，林菁，郑宗坤，李诗婷，苏君庆，米宏伟（深圳大学化学与化工学院食品科学与工程系，广东深圳 518060）摘要：为改善普通食品脂质纳米粒稳定性，利用海藻糖修饰脂质载体。
以白藜芦醇为模型食品功能因子，探讨了海藻糖修饰载体条件，制备了海藻糖修饰的白藜芦醇脂质纳米粒。
表征了修饰后白藜芦醇脂质纳米粒的微观形貌、粒度分布、物相与晶型等结构特征，考察了纳米粒的负载稳定性与纳米尺度稳定性，探讨了纳米粒的稳定性与微观结构之间关系。
结果表明，经海藻糖修饰的白藜芦醇脂质纳米粒包封率为81.37±1.50%，负载量8.71±0.13%，平均粒径为157.48±1.86 nm ，粒度正态均匀分布。
与未修饰相比，海藻糖修饰后的纳米粒不仅具有更高的负载能力，并能保持长期稳定性。
海藻糖以无定形态分散在脂质载体中，构成晶格排列缺陷，降低了脂质晶格衍射强度，形成低共熔复合物的纳米载体。
海藻糖修饰脂质纳米粒具有脂质缺陷结晶的基质骨架结构，保持了纳米粒负载性能的稳定性与纳米尺度的稳定性。
关键词：脂质纳米粒；海藻糖；稳定性；结构特征；白藜芦醇文章篇号：1673-9078(2015)10-18-23 DOI: 10.13982/j.mfst.1673-9078.2015.10.004Stability and Structural Properties of Food Lipid Nanoparticles Modified byTrehaloseWEN Zhen, LIN Jing, ZHENG Zong-kun, LI Shi-ting, SU Jun-qing, MI Hong-wei(Department of Food Science and Engineering, College of Chemistry and Chemical Engineering, Shenzhen University,Shenzhen 518060, China)Abstract: Trehalose is used to modify lipid-based carriers, i.e., food lipid nanoparticles (FLNs), to increase their stability. Resveratrol, a model functional food factor, was loaded in trehalose-modified food lipid nanoparticles (TMFLPs) to yield functional food colloid particles. The modification conditions of trehalose are discussed. The micromorphology, particle size distribution, phase characteristics, and crystalline features of resveratrol-loaded TMFLPs were characterized. In addition, the stabilities of resveratrol in the TMFLPs and the TMFLPs themselves were investigated. The relationship between the stability and the microstructure of the TMFLPs was studied. The entrapment efficiency, loading capacity, and average size of the resveratrol-loaded TMFLPs were 81.37±1.50%, 8.71±0.13%, and 157.48±1.86 nm, respectively. The size was normally distributed. The TMFLPshad higher loading capacity and long-term stability than that of FNPss. Trehalose was dispersed in the lipid carriers in an amorphous form and it formed a trehalose/lipid eutectic mixture carrier with crystal lattice disfigurement, leading to lower X-ray diffraction intensity. The results confirm that the modification on food lipid nanoparticles (FLNs) via trehalose resulted in a matrix skeletal structure with lipid crystallographic defects, which play an important role in maintaining high loading capability and stability.Key words: lipid nanoparticles; trehalose; stability ; structural properties; resveratrol食品脂质纳米粒(Food lipid nanospheres, FLNs)指以可食用的、生物相容的脂质为载体材料，负载食品功能因子的营养传送系统[1]。
海藻糖研究进展
关键 词 ：海 藻糖 ； 生物 学 特性 ； 能性 食 品 功
文章 编号 ： ｌ０— ９ ７（０ ２０— ０４ — ０ ０ ８ ５ ８ ０ ）８ ０４ ２ ２
中 图分类 号 ：Ｔ ２２３ Ｓ ０．
（）麦 芽 寡 糖 基 海 藻 糖 合 酶 （ ４ ＭＴＨａｅ 和 麦 芽 寡 糖 基 ｓ） 海 藻 糖水 解酶 （ ＭＴＳ ｓ）１ ３ １ ａｅＥ ，，， ］ １６ ５
体和 生物 大 分子起 着 良好 的 非特 异性 保 护作 用。 因此 ， 藻 海
糖 在 分 子 生物 学 、 医学 、 品 、 食 化妆 品、 业等 方 面 具 有广 阔 农 的应用 前 景。
可 采用 葡 萄糖 、 糖 、 芽糖 或淀 粉等 为底 物 ， 过有 关 蔗 麦 通
酶 的作 用转 换成 海 藻糖。
３４ 基 因 重 组 法 ．
酷的条件下， 海藻糖可以对生物膜、 白质和核酸等生物大 蛋
分子 发挥 保 护作 用 ， 而使 富含 这种 奇 妙化 合 物 的生命 体对 从 外 界恶 劣 环 境表 现 出独 特 的 生物 学 特 性 ［ 。 新 近研 究 证 明 ８ ］ 外 源性 的 海 藻糖 也 能 对 生物 体 和 生物 大分 子 有 良好 的 非特 异性 保 护作 用 ， 正是 海藻 糖 身价 倍增 的重 要 原 因。 这 海 藻糖 生物 保 护作 用 机 制 一般 认 为是 海 藻糖 的 生 物保 护机 构在 于强 力地 束缚 水 分 子 ， 与膜 脂 质共 同拥 有 结合 水或 海 藻 糖本 身起 到 代替 膜结 合 水 的功用 ， 从而 防 止 生物体 膜和 膜 蛋 白等 的 变性 ［９。关 于海 藻 糖对 生 物 分子 的保 护作 用 ， ８． ， 人们进 行 了 大量探 索 ， 出了种 种 假说 。 目前 主要 有两 种假 提 说 解 释 海 藻糖 稳 定 生 物分 子 的机 理 ：一 种 称 为 。 替 代 水 假 说 ］另 一种 称 为。 ， 玻璃 态 ” 说 ［ ｏ。 假 １ ］
生物膜的保护剂海藻糖在冻干红细胞中的应用
生物膜的保护剂海藻糖在冻干红细胞中的应用生物膜的保护剂海藻糖在冻干红细胞中的应用【摘要】 海藻糖作为一种稳定的非还原性双糖～在细胞冷冻、干燥、冻干过程中对细胞活性有着良好的保护作用并已广泛应用于人血细胞的冻干。
海藻糖以其异常的水合能力、独特的玻璃化转换和晶体转变行为及抗高温潮湿的特性受到密切关注～并成为细胞保存研究中首选的一种保护剂。
海藻糖对细胞的保护机制、海藻糖导入哺乳细胞的实验方法以及红细胞对海藻糖负载的可能作用机制都是近几年细胞保存研究的热点～本文就以上几方面的进展详细进行论述。
【关键词】 生物膜保护剂,海藻糖, 冻干保存,红细胞Trehalose —A Biomembrane Protectant Applyied to Lyophilization of Human Red Blood Cells——ReviewAbstractTrehalose, as a nonreducing disaccharide, plays a role in protecting the cytoactivity when the cells is freezing, drying or lyophilization. It has been a biomembrane protectant applied to lyophilization of human blood cells (platelets and erythrocytes), and from which astonishing results have been obtained. Having powerful hydration, distinctive vitrification transform and crystal transform and unique resistance of high temperature and humidification,trehalose is thought of a preferred protectant in the study of cell preservation. In recent years, people concerned trehalose on its protective mechanism, experimental means of transit trehalose to mammal cells and the mechanism of loading in red blood cells. The above aspects were briefly summarized in this article.Key wordstrehalose, vitrification, lyophilization, erythocyte海藻糖作为一种稳定的非还原性双糖～在一些微生物、低湿休眠脊椎动物和更苏植物中有较高的浓度。
海藻糖的生物保护作用
《生命的化学》2001 年 21 卷 3 期
海藻糖的生物保护作用
聂凌鸿 宁正祥
( 华南理工大学食品与生物工程学院 ,广州 510641 )
关键词 :海藻糖 ;非特异性保护作用 ;生物保护作用 中图分类号 :Q53
Charlemagne 等 (1998) [7] 研究发现 , 酿酒 酵母在 高 渗 条 件 下 存 活 与 体 内 的 海 藻 糖 相 关 ,这表明了海藻糖可作为渗透压保护剂 。 史戈峰等 (1999) [8]研究发现 NO. 25 酿酒酵母 对高糖浓度具有较高的抵抗能力 ,其原因是 在高糖浓度下细胞合成较多的海藻糖 ,以保 护自己 ,维持较高的存活率 ,酵母细胞内海藻 糖含量的高低可作为选育耐高浓度和耐高温 酒精酵母的重要指标之一 。
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《生命的化学》2001 年 21 卷 3 期
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1. 海藻糖的独特的生物学特性 海藻糖成为极受注目的天然物质 ,不仅
伴随盐逆境双歧藻属菌种细胞内海藻糖和蔗 糖浓度的增加 ,当机体再恢复正常生长条件 (即解除盐逆境的作用) ,细胞内这些海藻糖 和蔗糖浓度下降 。蔗糖和海藻糖被认为具有 共存的溶解物 ( compatible solutes) 的作用性 质 ,它们比其他糖的优越之处在于它们是非 还原性糖 ,不会与蛋白质中氨基酸发生美拉 德反应 。在稳定蛋白质作用中 ,海藻糖的表 现优于蔗糖 ,这可以部分地解释为什么海藻 糖在上述形成的海藻糖和蔗糖共存的溶解物 中占主导作用 。海藻糖另一个潜在的优势是 它同蔗糖一样 ,不是关键的中间代谢物 ,比其 它 非 还 原 双 糖 包 括 蔗 糖 更 稳 定 。Piper (1998) [6]认为 ,微生物在盐逆境应激状态涉 及到低分子量共存溶解物的产生和一系列应 激蛋白质的产生 ,海藻糖和蔗糖的合成代表 双歧藻菌盐应激状态下的一种保护性作用 。 对蛋白 质 的 合 成 或 调 节 机 制 仍 需 进 一 步 研 究。
海藻糖的研究进展及其应用前景_张树珍
海藻糖的研究进展及其应用前景张树珍(中国热带农业科学院热带作物生物技术国家重点实验室 海口 571101)摘要 综述海藻糖的理化性质、来源、相关的酶及其对生物分子的保护特性、作用机理和可能的应用前景。
关键词 海藻糖 理化性质 作用机理1 海藻糖的理化性质及来源海藻糖(Trehalose)是一种稳定的非还原性双糖,它由两个吡喃环葡萄糖分子与1,1糖苷键连结而成[1]。
在理论上它存在三种不同的正位异构体(Anomers),即α,α-海藻糖(又叫蘑菇糖,Mycose),α,β-海藻糖(新海藻糖,Neotr ehalose),β,β-海藻糖(异海藻糖,Isotrehalose)。
海藻糖可以几种固体形式存在,最常见的是二水化合物,熔点达97℃,将其加热至130℃,其失去结晶水,成为无水结晶体时,熔点可达214～216℃。
其水溶液性质稳定,无色无嗅,口感略带甜味,它不会焦糖化[2]。
海藻糖的理化性质十分稳定,不能使斐林试剂还原,也不能被α-糖苷酶水解,但在强酸条件下能被水解为两个葡萄糖分子。
海藻糖的某些理化性质如下[3]:①熔点:含结晶水的为97.0℃,不含结晶水的为214～216℃。
②溶解热:含结晶水的为57.8kJ mol,不含结晶水的为53.4kJ mol。
③甜度:相当于蔗糖的45%。
④溶解度:10℃时为55.3,50℃时为140.1,90℃时为602.9。
⑤稳定性:a.pH稳定性:在pH3.5、100℃、24h条件下,99%残存。
b.热稳定性: (水中)120℃、90min,褐变。
c.热稳定性: (含蛋白质溶液)沸水、90min,褐变。
d.水溶液保存期:在37℃下可保存12个月。
海藻糖最初是从生活在沙膜中的一种甲虫蛹中分离得到,后来发现它存在于低等维管植物、藻类、细菌、真菌、酵母、昆虫及无脊椎动物中。
近年来还发现人体的肾脏也存在海藻糖,其中磨菇中海藻糖比较丰富,占其干重的11%～17%,所以海藻糖又称作蘑菇糖[4]。
海藻糖应用的研究进展
海藻糖应用的研究进展摘要；海藻糖是一种非还原性双糖,它广泛存在于自然界中,其化学性质稳定,有稳定细胞膜和蛋白质结构的特性。
它的一些特性也成为研究的热点。
如今，在工农业生产中都有广泛的应用，本文对海藻糖的生物学功能、在医学、农学、食品科学、基因工程，以及微生态制剂等方面的应用进行综述。
关键词：海藻糖食品医药农业基因工程Progress in the application of trehaloseAbstract Trehalose is a non-reducing disaccharide, is widely found in nature, and its chemical stability, a stable membrane properties and protein structure. Some of the features it has become a research hotspot. Now, in the industrial and agricultural production are widely used in this paper on the biological function of trehalose in medicine, agriculture, food science, genetic engineering, and applied aspects of probiotics are reviewedKey words Trehalose Food Medicine Agricultural Genetic Engineering海藻糖（Trehalose）是一种安全、可靠的天然糖类，1832年由Wiggers将其从黑麦的麦角菌中首次提取出来，随后的研究发现海藻糖在自然界中许多可食用动植物及微生物体内都广泛存在，如人们日常生活中食用的蘑菇类、海藻类、豆类、虾、面包、啤酒及酵母发酵食品中都有含量较高的海藻糖海藻糖是由两个葡萄糖分子以α,α,1,1-糖苷键构成的非还原性糖，自身性质非常稳定，并对多种生物活性物质具有神奇的保护作用。
海藻糖在细胞冻存的作用
海藻糖在细胞冻存的作用细胞冻存是一种常见的细胞保存方法，它可以将活细胞在极低温下保存起来，以便日后使用。
在细胞冻存过程中，海藻糖被广泛应用于细胞保护剂的制备中，起到了非常重要的作用。
本文将重点介绍海藻糖在细胞冻存中的作用及其机制。
一、海藻糖的保护作用海藻糖是一种天然的二糖类物质，具有优秀的保护细胞的能力。
它可以通过一系列的机制来保护细胞免受低温冻结和解冻过程中的损伤。
海藻糖可以降低细胞的冻结点。
在低温下，细胞内的水分子会形成冰晶，导致细胞脱水和机械损伤。
海藻糖通过与水分子结合，减少了水分子的可用数量，降低了细胞的冻结点，避免了细胞的脱水和机械损伤。
海藻糖可以稳定细胞膜的结构。
低温条件下，细胞膜的流动性降低，易受损。
海藻糖能够与细胞膜脂质相互作用，增加细胞膜的稳定性，保持其完整性，防止细胞膜的破裂和溶解。
海藻糖还可以减少冷冻解冻过程中的冷冻损伤。
冷冻解冻过程中，细胞内外温度的突然变化会导致细胞内外渗透压的不平衡，进而引起细胞的溶胀和溶解。
海藻糖可以维持细胞内外渗透平衡，减少细胞的溶胀和溶解，降低冷冻解冻过程对细胞的损伤。
二、海藻糖在细胞冻存中的应用海藻糖在细胞冻存中的应用主要包括冷冻保护剂的配制和细胞冻存液的制备。
在冷冻保护剂的配制中，海藻糖通常与其他保护剂如甘油、蔗糖等混合使用，以增强细胞的保护效果。
海藻糖的添加浓度一般在0.1-0.5 M之间，具体的浓度要根据细胞类型和冻存条件来确定。
在细胞冻存液的制备中，海藻糖通常被加入到冻存液中作为保护剂。
冻存液的配方可以根据具体需要进行调整，但海藻糖的添加是必不可少的。
海藻糖可以提供足够的保护，保持细胞的完整性和活力，在细胞冻存过程中起到重要的作用。
三、海藻糖的机制研究海藻糖在细胞冻存中的作用机制一直是科学家们关注的研究领域。
通过对细胞和海藻糖相互作用的研究，科学家们发现，海藻糖与细胞膜脂质、蛋白质和核酸等分子之间存在着多种相互作用。
海藻糖可以与细胞膜脂质相互作用，增加细胞膜的稳定性，减少膜脂质的液晶到凝胶相变，从而保护细胞膜的完整性。
海藻糖
海藻糖——“生命之糖”我们都知道，水是生命的源泉。
在各种生物体内，都含有不等量的水。
以植物为例，水生植物的含水量可高达98％，而有些沙漠植物的含水量却只有16％。
如果低于这个百分比，这些植物细胞中的原生质就会遭受破坏而死去。
可是，有这么一种植物，即便含水量降低到5％以下，几乎成为“干草”了，仍然可以保持生命。
有人把这种植物全株做成干制标本，放在植物分类标本橱中，几年后，这株干草无意中落到了水池中，待第二天被人发现时，它竟舒展开全部枝叶，又变得生机勃勃了。
南美洲的沙漠中，也有一种小植物，当水分不充足的时候，它就会自己把根从土壤里拔出来，让整个身体缩卷成一个圆球状。
由于体轻，只要稍有一点儿风，它就会在地面上滚动，一旦滚到水分充足的地方，圆球就会迅速地打开，根重新钻到土壤里，暂时安居下来。
当水分又一次不足，它住得不称心如意时，就会继续游走寻找充足的水源。
这两种植物，都属卷柏科植物，别名有“一把抓、老虎爪、长生草、万年松，九死还魂草，风滚草”等，因为它的不死神奇，引发了一场研究热潮。
人们给这类植物取了一个新的名词“隐生生物(crypohidden life)”。
后来科学家们发现，隐生生物其实广泛存在于生物界，这类生物在干燥时脱水，以极低或停滞的新陈代谢形式处在一种保存状态，当环境允许再水化时它们可立即复活。
目前对这种隐生现象的分子机制还不清楚，但有一点可以肯定：这类生物在干燥时其组织中的海藻糖(trehalose)含量都很高。
海藻糖可能与隐生现象密切相关：在有水的时候，海藻糖帮助卷柏吸收和储存水分，干燥时，海藻糖可以取代组织中的水，保护细胞免遭脱水的伤害，维持细胞的天然结构，保护生物组织与生命物质不受破坏的作用，从而延续着生命的奇迹！享誉世界的天然海藻糖研究表明，海藻糖对生物分子能起到非常重要的保护作用。
现在一些医用生物产品，如血液制品、菌苗、疫苗、单克隆抗体、载药脂质体等容易失活，多采用冷冻干燥制备和低温保存。
海藻糖在细胞冻存的作用
海藻糖在细胞冻存的作用
海藻糖是一种具有保护细胞的作用的糖类物质，它可以在细胞冻存过
程中发挥重要的作用。
细胞冻存是一种常用的细胞保存方法，它可以
将细胞保存在极低的温度下，以便在需要时重新使用。
然而，细胞冻
存过程中会受到很多不利因素的影响，如低温、冷冻剂、冷冻和解过
程中的压力等，这些因素都会对细胞造成损伤。
海藻糖可以通过一系
列的机制来保护细胞，从而提高细胞冻存的成功率。
首先，海藻糖可以保护细胞膜的完整性。
细胞膜是细胞的外层保护层，它可以控制物质的进出，维持细胞内外环境的稳定。
在细胞冻存过程中，低温和冷冻剂会导致细胞膜的破裂和失去完整性，从而导致细胞
死亡。
海藻糖可以通过与细胞膜中的脂质分子结合，形成一层保护层，从而保护细胞膜的完整性，减少细胞死亡。
其次，海藻糖可以减少细胞内的冰晶形成。
在细胞冻存过程中，水分
子会形成冰晶，从而导致细胞内部的结构和功能受到破坏。
海藻糖可
以通过与水分子结合，形成一种类似于胶体的物质，从而减少冰晶的
形成，保护细胞内部的结构和功能。
最后，海藻糖可以促进细胞的代谢活动。
在细胞冻存过程中，细胞的
代谢活动会受到抑制，从而导致细胞死亡。
海藻糖可以通过提供能量
和营养物质，促进细胞的代谢活动，从而增强细胞的生存能力。
综上所述，海藻糖在细胞冻存中发挥着重要的作用，它可以保护细胞膜的完整性，减少细胞内的冰晶形成，促进细胞的代谢活动，从而提高细胞冻存的成功率。
因此，在细胞冻存过程中，加入适量的海藻糖可以有效地保护细胞，提高细胞的存活率，为细胞的研究和应用提供了重要的保障。
海藻糖蔗糖mrna-lnp冻干保护机制
海藻糖蔗糖mrna-lnp冻干保护机制
海藻糖和蔗糖在mRNA-LNP冻干保护机制中起到关键作用。
这两种糖类物质具有相似的冻
干保护效果，但具体机制略有不同。
以下是海藻糖和蔗糖在mRNA-LNP冻干保护机制中的
作用：
1. 防止冰晶形成：海藻糖和蔗糖都能降低水相的结晶温度和结冰量。
在冻干过程中，它们可以防止冰晶对mRNA-LNP结构造成破坏。
2. 保护剂作用：海藻糖和蔗糖作为保护剂，可以吸附在油水界面形成的界面膜上，增大空间位阻，降低脂质纳米颗粒（LNP）之间的相互作用。
此外，它们还可以减少膜融合、保护脂质体粒子不在冻干过程中破裂、泄露药物。
3. 调节渗透压：蔗糖在冻干制剂中可以调节渗透压，有助于维持mRNA-LNP的稳定性。
而海藻糖在这方面的作用相对较弱。
4. 性价比：与甘露醇、葡萄糖等相比，蔗糖具有较高的玻璃化转变温度和粘度，保护效果更好。
同时，蔗糖的性价比更高，因此在mRNA-LNP冻干保护中得到广泛应用。
5. 复溶稳定性：使用海藻糖或蔗糖作为冻干保护剂的mRNA-LNP制剂，在复溶后药液
稳定性和复溶效果（主要是药物包封率和粒径变化）方面都有很好的表现。
综上所述，海藻糖和蔗糖在mRNA-LNP冻干保护机制中起到关键作用，通过防止冰晶形成、保护剂作用、调节渗透压、性价比和复溶稳定性等多方面保证mRNA-LNP疫苗的质量和稳
定性。
在实际应用中，根据具体需求和实验条件，可以选择适合的糖类物质作为冻干保护剂。
海洋植物药物的抗糖病作用研究
海洋植物药物的抗糖病作用研究随着现代生活方式的改变和全球糖尿病患者数量的不断增加，寻求有效的抗糖尿病疗法已成为一项重要的研究领域。
近年来，许多研究表明海洋植物可能具备抗糖尿病的潜力，成为了潜在的药物来源。
本文将探讨海洋植物药物的抗糖尿病作用研究，并分析其潜在应用前景。
一、海洋植物药物的抗糖病活性成分在糖尿病的治疗中，研究人员发现了一些具有抗糖尿病活性的海洋植物化合物。
例如，海带中的褐藻胶酸可以通过抑制胆固醇吸收和糖元酸转化来降低血糖水平。
此外，一种称为硫酸软骨素的海洋生物活性物质也已被证明具有调节胰岛素敏感性和改善胰岛素抵抗的作用。
此外，一些海洋植物中发现的多糖类物质也显示出潜在的抗糖尿病活性。
研究表明，海藻中的多糖能够降低血糖水平，并通过增加胰岛素分泌和改善脂质代谢来改善胰岛素抵抗。
二、海洋植物药物的抗糖病作用机制海洋植物药物的抗糖病作用机制复杂多样。
其中一种机制是通过抑制糖消化酶活性来降低血糖水平。
海藻中的多糖类物质可以抑制α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶的活性，从而延缓碳水化合物的降解和吸收过程，减少血糖的升高。
此外，海洋植物中的抗氧化物质也显示出抗糖尿病的能力。
研究表明，一些海洋植物中的活性物质如多酚类化合物和黄酮类化合物可以减轻氧化应激，提高胰岛素敏感性，并减少胰岛细胞的损伤，从而改善胰岛素抵抗。
此外，海洋植物药物还可能通过调节炎症反应、改善脂质代谢和抑制肠道菌群的生长等机制发挥抗糖尿病作用。
三、海洋植物药物的应用前景海洋植物药物的抗糖尿病作用研究为寻找新的抗糖尿病治疗方法提供了新的思路和潜在的药物来源。
基于海洋植物药物活性成分的研究，可能有助于开发出更安全有效的抗糖尿病药物。
然而，目前海洋植物药物的研究还面临着一些挑战和限制。
首先，海洋植物资源的获取、提取和纯化过程相对困难，限制了研究的进展。
其次，对海洋植物药物的安全性和药理学特性还有待进一步研究和评估。
此外，海洋植物药物的应用前景还需要进行更多临床实验和人体试验的验证。
1999海藻糖的生物学功能简介
海藻糖的生物学功能简介封德顺(山东大学生物系济南250100) 海藻糖(T rehalo se,Α2D2glucop yrano syl2Α2 D2glucop yrano side)是一种非还原性二糖,广泛存在于海藻、酵母、霉菌、食用菌、虾、昆虫、高等植物等生物体内,是一种贮藏性碳水化合物。
它具有保护生物细胞和生物活动性物质在脱水、干旱、高温、冷冻、高渗透压及有毒试剂等不良环境条件下活性免遭破坏的功能,是国际上最近开发的主要低聚糖之一。
自然界中的一些动植物能够在干枯后得水而恢复生命活力,就是因为细胞中含有大量的海藻糖的缘故。
海藻糖能在干燥状态下保持其组织的脂类、蛋白质、碳水化合物和核酸等不受破坏。
研究表明,通过饥饿法可使酵母细胞内海藻糖含量大大提高,当含量较高(10%～15%)时,酵母细胞对干燥的抵抗力明显增强,原因是海藻糖的还原基团不会与蛋白质的游离氨基酸反应生成氨基糖,而且它在蛋白质周围形成一个保护层抑制这类反应,使酵母发酵活性得以保护。
自80年代后,科学家们开展了对海藻糖的生理生化和分子生物学的研究。
1 理化性质海藻糖为白色结晶,带两个结晶水,分子式为C12H22O11・2H2O,分子量为378.33,是由两个葡萄糖残基通过半缩醛羟基相结合,熔点为96.5～97.5℃,比旋度[Α]D=178.3°(20℃,7%于水中),甜味弱,能溶于水和热醇中,不溶于乙醚,不能使斐林试剂还原。
无毒无害,化学性质稳定,在体内可被酶水解成葡萄糖而被利用。
2 体内合成海藻糖在微生物细胞中的合成非常强烈。
它的积累一般和生长速度的降低有关,特别是在分化过程和营养不足时。
它的合成主要由两种酶催化,其反应分两步进行:第1步,尿苷二磷酸葡萄糖或鸟苷二磷酸葡萄糖经62磷酸海藻糖合成酶的催化转移给62磷酸葡萄糖,形成62磷酸海藻糖;第2步,62磷酸海藻糖经62磷酸海藻糖磷酸酯酶催化水解,形成海藻糖。
近年来,卡森Kaasen等已对大肠杆菌海藻糖合成酶基因进行了分子克隆。
海藻糖对膜脂液晶相到六角相变温度的影响
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研究壳聚糖、果胶、透明质酸、海藻酸纳修饰的脂质体化妆品
研究壳聚糖、果胶、透明质酸、海藻酸纳修饰的脂质体化妆品1986 年，Dior开发了世界上第一个脂质体化妆品—Capture ，开启了脂质体化妆品应用的先河。
如今脂质体技术依然是新型化妆品研究热点，经过多年的发展更加成熟可靠。
脂质体的作用机理主要有两个层面：其一作用于皮肤，其二作为活性成分的载体应用于护肤化妆品以及营养品中。
脂质体对皮肤的作用机理主要是两个方面：（1）脂质体涂于皮肤上后，类脂双层膜破裂，在皮肤上形成一个封闭的薄膜，然后活性成份渗透到表皮中，而类脂留在皮肤上。
（2）脂质体的主要成份是卵磷脂，卵磷脂又是细饱的主要成份，所以脂质体与细饱之间有很强的亲和力。
能够很快渗透到皮肤中，被皮肤所吸收。
脂质体作为活性成分的载体在化妆品、营养品中的应用：（1）在作用靶点形成活性储库，以脂质体包封的活性物质经皮吸收后在表皮与真皮层之间，形成活性成分储库，活性成分可持续地释放，提高生物利用度，以达到长效和降低刺激性的目的。
（2）保护活性成分。
高活性的活性成分如果只是简单地与其它基质混合在一起，由于物质的相互作用、氧化、PH 的影响等，在制备和贮藏过程中一部分便失去了活性。
如果将活性成分包藏于脂质体囊泡中，由于脂质体囊泡的分割包封作用，而使活性成分与外界不稳定因素接触机会减少，稳定性提高。
化妆品类脂质体:羧甲基壳聚糖修饰紫甘薯花青素脂质体壳聚糖表面修饰维生素C脂质体壳聚糖表面修饰β-胡萝卜素脂质体羧甲基壳聚糖修饰黑米麸皮花青素脂质体羧甲基壳聚糖修饰酒花原花青素脂质体羧甲基壳聚糖修饰沙棘籽原花色素脂质体羧甲基壳聚糖修饰葡萄籽原花青素脂质体羧甲基壳聚糖修饰山楂原花青素脂质体羧甲基壳聚糖修饰蓝莓原花青素脂质体壳聚糖表面修饰β-胡萝卜素-薏苡仁油复合脂质体(L-βC-CSO) 海藻酸钠修饰紫甘薯花青素脂质体海藻酸钠修饰维生素C脂质体海藻酸钠修饰β-胡萝卜素脂质体海藻酸钠修饰黑米麸皮花青素脂质体海藻酸钠修饰酒花原花青素脂质体果胶修饰蓝莓原花青素脂质体果胶修饰紫甘薯花青素脂质体果胶修饰黑米麸皮花青素脂质体透明质酸修饰包封维生素C的脂质体透明质酸修饰包封积雪草的脂质体透明质酸修饰包封人参水提取液脂质体透明质酸修饰包封神经酰胺脂质体透明质酸修饰包封光甘草定脂质体透明质酸修饰铁皮石斛提取物脂质体透明质酸修饰葡萄籽提取物脂质体透明质酸修饰竹叶黄酮脂质体透明质酸修饰的穿心莲内酯脂质体透明质酸修饰大麻二酚脂质体透明质酸包封富勒烯脂质体透明质酸包封沙棘油脂质体透明质酸包封红山茶籽脂质体海藻酸钠修饰沙棘籽原花色素脂质体海藻酸钠修饰葡萄籽原花青素脂质体海藻酸钠修饰山楂原花青素脂质体海藻酸钠修饰蓝莓原花青素脂质体海藻酸钠修饰紫甘薯花青素脂质体海藻酸钠修饰黑米麸皮花青素脂质体果胶修饰紫甘薯花青素脂质体果胶修饰维生素C脂质体果胶修饰β-胡萝卜素脂质体果胶修饰黑米麸皮花青素脂质体果胶修饰酒花原花青素脂质体果胶修饰沙棘籽原花色素脂质体果胶修饰葡萄籽原花青素脂质体果胶修饰山楂原花青素脂质体透明质酸包封铁皮石斛多糖脂质体透明质酸包封表没食子儿茶素没食子酸酯脂质体透明质酸包封珍珠水解液脂质体透明质酸包封烟酰胺脂质体透明质酸包封白番茄提取物脂质体。
海藻糖合酶的作用机理及发展
1.2.2 数轴学案1. 了解数轴的概念，理解数轴的三要素的作用，会准确地画出数轴.2. 会用数轴上的点表示有理数，了解有理数集合与数轴上的点之间的对应关系，体会数形结合思想.1. 一般地，在数学中人们用画图的方式把数“直观化”，通常用一条直线上的点表示数，这条直线叫做.2. 规定了、、的直线叫做数轴.3. 在数轴上表示数0的点叫，正数在原点的边，负数在原点的边.如果设a是一个正数，则数轴上表示数a的点与原点的距离是个单位长度；表示数-a的点与原点的距离是个单位长度.【注】所有的有理数都可以在数轴上表示出来，但数轴上的点并不都表示有理数.问题1：在一条东西向的马路上，有一个汽车站，汽车站东3m和7.5m处分别有一棵柳树和一棵杨树，汽车站西3m和4.8m处分别有一棵槐树和一根电线杆. 试画图表示这一情景.问题2：上面的问题中，“东”与“西”、“左”与“右”都具有相反意义. 我们知道，正数和负数可以表示两种具有相反意义的量，那么如何用数表示这些树、电线杆与汽车站牌的相对位置呢？问题3：我们对温度计非常熟悉，你能描述一下温度计的结构吗？比较上面的问题，你认为它用了什么数学知识？问题4：你能说说上述两个实例的共同点吗？请学生带着下列问题阅读教科书P8：（1）画数轴的步骤是什么？（2）根据上述实例的经验，“原点”起什么作用？（3）你是怎么理解“选取适当的长度为单位长度”的？（4）数轴上，在原点的右边，离原点越远的点所表示的数；在原点的左边，离原点越远的点所表示的数 .定义：一般地说，在数学中人们用画图的方式把数“直观化”，通常用一条直线上的点表示数，这条直线叫做数轴.数轴要满足以下要求：（三要素）1. 原点O——在直线上任意一点表示数“0”；2. 正方向——通常取向右为正方向，画上箭头；3. 单位长度——选取适当的长度作为单位长度，单位长度要统一，从原点向右每隔一个单位长度取一点，依次标上1，2，3，…；从原点向左每隔一个单位长度取一点，依次标上-1，-2，-3，….判断下列直线都是数轴吗？说说你的理由.问题5：数轴可以表示整数，那么数轴怎么来表示分数和小数？问题6：观察数轴上的有理数排列的大小，你能得出哪些结论？一般地，设a是一个正数，则数轴上表示数a在原点的____边，与原点的距离是____个单位长度；表示数-a的点在原点的____边，与原点的距离是____个单位长度.例1：说出下图中数轴上的A、B、C、D、E各点表示什么数？例2：画出数轴，并用数轴上的点表示下列各数：32- ，－5，0，5，－4，321. 数轴上表示数-3的点在原点的 边，离原点 个单位长度；表示数2.5的点在原点的 边，离原点 个单位长度.2. 到原点距离为3个单位长度的数是 .3. 在数轴上点A 表示数-4，若把点A 向左移动1个单位长度，则移动后的点表示数是 ；若把点A 向右移动3.5个单位长度，则移动后的点表示数是 .4. 在数轴上点A 表示数1，点B 与点A 相距3个单位，点B 表示数是 .1．（2021•凉山州中考）下列数轴表示正确的是（ ）A ．B ．C ．D ． 2．（2021•怀化中考）数轴上表示数5的点和原点的距离是（ ）A ．15B ．5C ．5-D ．15- 3．（2020•长春中考）如图，数轴上被墨水遮盖的数可能为（ ）A ．1-B ． 1.5-C ．3-D ． 4.2-【参考答案】1.数轴；2.原点；正方向；单位长度；3.原点；右；左；a；a.问题1：问题2：问题3、问题4：答案不唯一，略.（1）答案不唯一，略；（2）“原点”是数轴的“基准”，表示0，是表示正数和负数的分界点；（3）与问题的需要相关，表示较大的数，单位长度取小一些；（4）越大；越小.（1）×；（2）√；（3）×；（4）×；（5）×；（6）√.问题5：答案不唯一，略.问题6：位于数轴左（下）边的数总比右（上）边的数小；右；a；左；a.例1：解：点A表示–3；点B表示+2；点C表示+4；点D表示0.5；点E表示-2.5.例2：解：如下图：1. 左；3；右；2.5；2.-3、+3；3.-5；-0.5；4.+4、-2.1．【解析】解：A选项，应该正数在右边，负数在左边，故该选项错误；B选项，负数的大小顺序不对，故该选项错误；C选项，没有原点，故该选项错误；D选项，有原点，正方向，单位长度，故该选项正确；故选：D．2．【解析】解：数轴上表示数5的点和原点的距离是5；故选：B．3．【解析】解：由数轴上墨迹的位置可知，该数大于-4，且小于-2，因此备选项中，只有选项C符合题意，故选：C．。
海藻糖抑制淀粉质β多肽聚集的实验研究的开题报告
海藻糖抑制淀粉质β多肽聚集的实验研究的开题报告
一、研究背景
淀粉样β蛋白多肽聚集是阿尔茨海默症的重要特征之一，在病理学上被称为“珠质样斑块”。
研究发现，淀粉样β蛋白多肽的聚集是由于其自身的互相作用和聚集行为导致的。
因此，寻找阻止淀粉样β蛋白多肽聚集的药物成为阿尔茨海默症药物研究的重要方向之一。
海藻糖作为一种天然的低聚半乳糖，在保健食品、医药和化妆品等领域已有广泛应用。
研究表明，海藻糖可以抑制淀粉样β蛋白多肽聚集，但其具体作用机制仍需探究。
二、研究内容
本研究旨在探究海藻糖抑制淀粉样β蛋白多肽聚集的作用机制。
具体研究内容如下：
1. 制备淀粉样β蛋白多肽样品，采用动态光散射法(DLS)确定其粒径和稳定性。
在样品中添加不同浓度的海藻糖，通过DLS法检测淀粉样β蛋白多肽的聚集情况。
2. 采用透射电镜(TEM)观察淀粉样β蛋白多肽的聚集状态，研究海藻糖对淀粉样β蛋白多肽聚集形态的影响。
3. 应用荧光共振能量转移(FRET)技术，研究海藻糖对淀粉样β蛋白多肽聚集的抑制作用及其与淀粉样β蛋白多肽之间的相互作用。
4. 利用分子模拟技术分析海藻糖与淀粉样β蛋白多肽的结合模式及其相互作用机制。
三、研究意义
本研究有助于了解海藻糖抑制淀粉样β蛋白多肽聚集的作用机制，并为进一步研究开发阿尔茨海默症药物提供参考。
此外，本研究的成果还有助于拓展海藻糖的应用领域，为其在医药、保健食品和化妆品等领域的开发和应用提供科学依据。
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海藻糖与脂质膜相互作用机理研究胥传来 姚惠源(江南大学食品学院,无锡 214036)摘 要 本文以蛋黄卵磷脂(EPC)为模型,通过相变发生时卵磷脂吸热量的变化,反映卵磷脂头部基团运动情况的荧光各向异性的变化以及磷脂脂肪酸链CH2基团的对称伸展振动频率的变化等方面的研究,阐明了海藻糖对蛋黄卵磷脂(EPC)脂质膜相变时的影响,并对其作用机理进行探讨。
实验发现海藻糖可以抑制水化卵磷脂PC的双层到非双层相变,从而将脂质体于双层相。
试验表明:海藻糖之所以能在相变温度以上将脂质膜维持在双层相,是由于海藻糖和磷脂酰胆碱的头部基团形成氢键,这是一种直接相互作用的结果。
通过对海藻糖与卵磷脂(EPC)相互作用的FTIR红外光谱分析得到了进一步验证。
关键词 蛋黄卵磷脂 海藻糖 相互作用 相变0 前言研究证明被选用的冻干保护剂海藻糖对磷脂脂双层有保护作用,它可以降低磷脂主相变温度,抑制膜脂侧相分离和膜融合。
但有关海藻糖和磷脂膜相互作用的研究不多,本实验以蛋黄卵磷脂(EPC)为模型,通过相变发生时磷脂吸热量的变化反映磷脂头部基团运动情况的荧光探剂的荧光各向异性的变化以及磷脂脂肪酸链CH2基团的对称伸展振动频率的变化等方面研究海藻糖对蛋黄卵磷脂(EPC)脂质膜相变时影响,并对其作用机理进行探讨。
1 材料与方法1.1 试验材料卵磷脂:生化试剂,上海华东师大化工厂。
胆固醇:分析纯,上海生物化学试剂厂。
十八胺:分析纯,fluka公司进口。
曲拉通:分析纯,上海化学试剂中心化工厂。
鱼精蛋白:华美生物工程公司。
考马斯亮兰:化学纯,上海化学试剂公司。
牛血清蛋白:生化试剂,华美生物工程公司。
PST:由深圳绿鹏生物技术中心提供。
海藻糖:美国Sigma公司。
1.2 主要试验仪器旋转蒸发仪:ZFA-1型:上海玻璃仪器二厂。
收稿日期:2003-07-21胥传来:男,1965年出生,博士,副教授,动物生物技术研究 超声波处理器:S onics&Materials Vibra Cell,功率400W,频率20kH z。
AB204-N型天平:上海梅特勒-托利多。
NIC OCET&NEX US870FTIR光谱仪。
1.3 实验方法1.3.1 PST脂质体的制备制备方法:逆相蒸发法(1)按7∶2∶1摩尔比称取一定黄卵磷脂、胆固醇、十八胺,转移至圆底烧瓶;(2)加30m L乙醚,待其完全溶解;(3)加适量PST溶于25m LP BS(0.01m ol/L)中,倒入圆底烧瓶中;(4)超声5min(强度为40%,间隔1s);(5)减压蒸发(38℃)至胶状,成膜,加25m LP BS (0.01m ol/L)使膜完全洗下;(6)减压蒸发(38℃)至完全除去乙醚,3000r/min 5min离心分离,去除游离药物,充氮保存。
1.3.2 脂质体脂质膜的制备方法同1.3.1,仅加适量的卵磷脂(PC)、海藻糖、乙醚和P BS缓冲液,并形成浓度为5mg/m L水化磷脂,其中海藻糖与卵磷脂(PC)质量比分别为0、0.25、0.5、1、1.8。
1.3.3 DSC图谱测量进行DSC测量时,所用仪器型号为Pyris I差示扫描量热仪(美国),温度范围30℃～70℃,热扫描率为0.5℃/min。
2004年8月第19卷第4期中国粮油学报Journal of the Chinese Cereals and Oils Ass ociationVol.19,No.4Aug.20041.3.4 荧光各异性测量所用仪器为Hitachi850型荧光光度计,测量时固定激发波长530nm ,发射波长588nm 。
激发和发射狭缝均为15nm ,温度用循环水浴进行控制,温度范围为30℃～70℃,并用数字温度计监测样品温度,在整个测量过程中,样品用磁力搅拌子加以搅拌。
荧光各向异性(fluorescence anis otropy ,A )A =(I 11-I L )(I 11+2I L ),I 11为起、检偏器光轴方向与样品杯长轴方向平行时的荧光强度,I L 为起偏器光轴方向与样品杯长轴方向平行,检偏器光轴方向与样品杯长轴方向垂直时的荧光强度。
1.3.5 FTIR 测量V SCH2的变化采用NIC OCET &NEX US 870FTIR 光谱仪,分别取不同浓度的样品25m L 滴于CaF 2窗片之间,T eflon垫片的厚度为50μm ,温度由可控温电池加热控制,扫描次数200次,分辨率为4cm-1,每升温5℃,收集一次吸收谱。
每次升温后间隔10min 进行热力学平衡后再采集。
1.3.6 海藻糖对卵磷脂(EPC )作用FTIR 分析取出少许样品,与干燥的K Br 混合;研磨至细粉状,充分混合后装入压片头进行压片;将压成片的样品装入Magna -IR T M SPECTROMETER 750(Nicolet )仪器中,进行红外分析。
1.3.7 包封率的测定鱼精蛋白法:(1)取脂质体0.1m L 于10m L 的离心管中;(2)加鱼精蛋白0.1m L (10m g/m L )摇匀静止3m in ;(3)加入3.8m L 生理盐水,离心30min ;(4)吸取上清液1m L ,加入5m L 的生理盐水(0.15m ol/L ),加入考马斯亮兰5m L 试剂比色,从蛋白标准曲线查得游离药物的浓度;(5)弃去上清液,沉淀加入1m L10%的曲拉通溶解,并补充生理盐水至4m L ;(6)吸取1m L 沉淀液,加入5m L 的生理盐水,加入5m L 考马斯亮兰试剂比色,查蛋白质标准曲线并计算包封药物浓度。
空白试剂为6m L 生理盐水加入5m L 考马斯亮兰试剂。
2 结果与讨论2.1 海藻糖对脂质膜的保护作用海藻糖(Trehalose )是一种稳定的非还原性二糖,它由两个葡萄糖分子通过α,α-1,1半缩醛羟基结合而成。
海藻糖的理化性质十分稳定,不能使斐林试剂还原,也不能被α-糖苷酶水解。
生物膜表面结合水的存在对膜的稳定及保持完整有着重要作用。
正常的情况下,膜表面都存在大量的结合水,结合水的存在使膜表面能降低,且使膜与膜间的紧密接触———膜融合的第一步不能实现。
但一旦失去结合水,膜结构将发生一系列变化,出现诸如磷脂相变温度升高,磷脂侧向相分离,膜脂缺陷及形成非双层相等,从而使膜通透性增高乃至产生膜融合,海藻糖或其它糖类由于拥有许多羟基,则能够替代水和磷脂头部发生氢链结合,从而取代失去的结合水,维持着膜表面“水化”状态。
海藻糖能稳定脂质体的结构,在干燥状态下亦保持结构的完整性,这便于脂质体的贮存、包装和运输,有利于脂质体在制药工业上的应用。
2.1.1 海藻糖对PST 脂质体在干燥-再水化过程中的保护作用试验采用加入2.5%的海藻糖制备PST 脂质体,测定冷冻干燥-再水化产品的包封率,其结果见表1。
可以看出,海藻糖在30℃～70℃之间并无吸热峰出现,纯卵磷脂(PC )在48.3℃出现一吸收峰,此处即为纯卵磷脂(PC )的T bh 。
表1 加入2.5%海藻糖的PST 脂质体包封率 (%)PST 脂质体干燥前再水化后不含海藻糖的PST 脂质体73.3763.29含海藻糖的PST 脂质体85.9584.67 脂质体在水化状态的稳定性不够理想,而且在保存的过程中,易于发生聚集、融合并由此导致其内含物的漏出。
冷冻烘干能使脂体处于一种干燥状态,而不损坏其结构的完整性。
从表1可以看出,加入海藻糖的PST 脂质体重新水化后其包封率基本不变。
试验还发现不含糖的PST 脂质体样品经冷冻干燥再水化后成混悬液状态,而含海藻糖的样品溶液则较为澄清,因此试验认为不含糖的PST 脂质体经干燥-再水化后,由于发生融合而呈混悬液状态。
2.1.2 DSC 相图分析图1中(A )～(F )分别为海藻糖、纯卵磷脂(PC )、卵磷脂(PC )加0.25、0.5、1.0、1.8浓度海藻糖(质量比)的DSC 图谱。
17第19卷第4期胥传来等 海藻糖与脂质膜相互作用机理研究图1(A ) 海藻糖DSC图谱图1(B ) 纯卵磷脂(PC )DSC图谱图1(C ) 卵磷脂(PC )加0.25浓度海藻糖(质量比)DSC图谱图1(D ) 卵磷脂(PC )加0.5浓度海藻糖(质量比)DSC图谱图1(E ) 卵磷脂(PC )加1.0浓度海藻糖(质量比)DSC图谱图1(F ) 卵磷脂(PC )加1.8浓度海藻糖(质量比)DSC 图谱由图1(A )～(F )可知:不加海藻糖的脂质体在48.3℃出现一吸收峰,加入不同浓度海藻糖后的脂质体,在测量范围内没有出现吸热峰。
2.1.3 荧光各向异性测定结果图2中(A )～(E )分别为纯卵磷脂(PC )、卵磷脂(PC )加0.25、0.5、1.0、1.8浓度海藻糖(质量比)所测得的荧光各向异性A 值随温度变化的曲线。
由图2中(A )～(E )可见纯卵磷脂(PC )脂质体在48℃左右荧光各向异性A 值突然降低,而后又回升(A ),加入各种浓度海藻糖后,A 值未有突变出现(B 、C 、D 、E )。
图2(A ) 纯卵磷脂(PC )荧光各向异性A 值随温度变化的曲线从图2(A )～(E )可以看出:A 值随温度变化曲线呈抛物线形状。
这一现象符合Han and G ross 的解释:液晶相随着磷脂的升温,磷脂头部之间的距离增27中国粮油学报2004年第4期图2(B ) 卵磷脂(PC )加0.25浓度海藻糖(质量比)所测得的荧光各向异性A值变化曲线图2(C ) 卵磷脂(PC )加0.5浓度海藻糖(质量比)所测得的荧光各向异性A值变化曲线图2(D ) 卵磷脂(PC )加1.0浓度海藻糖(质量比)所测得的荧光各向异性A值变化曲线图2(E ) 卵磷脂(PC )加1.8浓度海藻糖(质量比)所测得的荧光各向异性A值变化曲线图2(F ) CH 2基团的伸展振动频率随温度化曲线大,头部荧光基团的加速运动成为可能,从而导致A值的降低,而在经过双层到非双层相变后,磷脂头部基团间的空间位阻加大,有效地限制了头部基团的自由运动,从而导致A 值的升高,因为相变发生时,A 值位于整条曲线的最低点。
2.1.4 红外测量V SCH2结果图3中(A )～(E )分别为纯卵磷脂(PC )、卵磷脂(PC )加0.25、0.5、1.0、1.8浓度海藻糖(质量比)所测CH 2基团的伸展振动频率随温度变化的曲线。
图3(A ) 纯卵磷脂(PC )CH 2基团的伸展振动频率随温度变化的曲线图3(B ) 卵磷脂(PC )加0.25浓度海藻糖(质量比)所测CH 2基团才的伸展振动频率变化曲线从图3可以看出在纯卵磷脂(EPC )脂质体中V SCH2值在50℃左右突然升高,而在加入各种浓度海藻糖后未见有此情况发生。
37第19卷第4期胥传来等 海藻糖与脂质膜相互作用机理研究图3(C ) 卵磷脂(PC )加0.5浓度海藻糖(质量比)所测CH 2基团的伸展振动频率变化曲线图3(D ) 卵磷脂(PC )加1.0浓度海藻糖(质量比)所测CH 2基团的伸展振动频率变化曲线图3(E ) 卵磷脂(PC )加1.8浓度海藻糖(质量比)所测CH 2基团的伸展振动频率变化曲线2.1.5 海藻糖对蛋黄卵磷脂(PC )FTIR 分析为了弄清楚海藻糖对蛋黄卵磷脂(EPC )发挥作用的机制,实验测试了有海藻糖和无海藻糖存在时干态蛋黄卵磷脂(EPC )的红外光谱。