自体脐血单个核细胞回输早产儿:免疫功能及预后
自体免疫免疫细胞治疗技术之CIK细胞治疗癌症_陈怡
329BIOTECHWORLD 生物技术世界CIK细胞具有增殖快速、杀癌力强、杀癌谱广、对正常细胞无杀伤作用、对耐药肿瘤敏感、可调整人体的免疫状态、刺激骨髓造血等重要作用。
是目前已知活性最高的非特异性杀伤免疫效应细胞。
树突状细胞(dendritic cell,DC细胞)是体内功能最强大的专职抗原递呈细胞,也是唯一能激活幼稚T细胞的抗原的递呈细胞。
DC细胞在免疫应答过程中具有关键的作用。
将CIK细胞和同源DC细胞以及一系列细胞因子如IL-1、IL-2、IFN-y、CD3mAb共同培养,即可获得DC-CIK细胞。
它既可以促进DC细胞的成熟,更能促进CIK细胞的增殖,并增强其抗肿瘤活性。
1. CIK 细胞治疗技术流程白细胞采集→淋巴细胞→CIK细胞+DC细胞+细胞因子→共培养、添加IL-2扩增→DC-CIK细胞→质量检测→质量合格→静脉回输入患者体内→疗效评估2. CIK 细胞的抗肿瘤机制CIK细胞是一种异质细胞,是混合的细胞群体。
主要细胞成分为CD3+CD56+细胞,主要的效应细胞是CD3+CD8+细胞。
外周血单核细胞经多种细胞因子如IL-1、IL-2、IFN-y、CD3mAb等刺激诱导,并通过体外培养两周左右,细胞数量便可扩增上千倍。
其中CD3+CD56+CIK细胞达到70%以上,这是抗肿瘤作用的主要细胞亚群。
并且在回输到患者体内后,经细胞因子IL-2的诱导仍能进行扩增,这种机能保证了患者体内免疫细胞的数量和活性。
CIK细胞作用于肿瘤细胞主要有5种途径:(1)引发毒性颗粒依赖性溶细胞作用,致使靶细胞死亡。
(2)CIK细胞与T细胞抗原受体结合,参与免疫过程。
T细胞合成并释放毒性颗粒,作用于靶细胞,造成靶细胞溶解。
(3)CIK细胞自身可分泌细胞因子。
细胞因子作用于靶细胞或反作用于效应细胞,提高其活性。
(4)C I K 细胞群中的CD3+CD56+可以合成并释放穿孔蛋白,溶解靶细胞。
(5)CIK细胞能够激活靶细胞的凋亡基因,使凋亡基因转录并表达。
脐血单个核细胞体外分离和定向分化为神经干细胞的实验研究
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维普资讯
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重庆 医学 20 0 7年 7月 第 3 6卷 第 1 期 3
・
论
著 ・
脐血 单 个核 细 胞体 外分 离 和 定 向分 化 为神 经 干 细胞 的 实验 研 究
向 静 , 昌 铭 , 景 周△ 王 王
( 第三 军 医大学 大坪 医院野 战 外科 研 究所神 经 内科 , 庆 4 0 4 ) 重 0 0 2
co e . o o e v he s pe b ir s op n O e m i he ph no y e ft el l l nis T bs r e t ha y m c o c e a d t xa net e t p s o he c l by f ow yt m e r t en i s c o t y, h ndu e ih N GF c dw t a nd RA n v to. i ir The e r et a c i t s l m e a e c a n r a ton( n r ve s r ns rp a epo y r s h i e c i RT— PCR) orn s i n u a hi1 a i n r ror e O f e tn a d m s s 一 ntge we epe f m d t c fr s l nd m u a hi a tge xp e son i SCs Re uls A fe dhe e uli ton, o tc ls b c m e r m b c, n f on im ne tn a s s 一1 n i n e r s i n M . s t tra r ntc tva i m s el e a ho i a d di— f r nta e nt e on lke c l fe ndu ton, xp e sng CD 2 e e i td i o n ur —i elsa t r i ci e rs i 9 butn o CD34. CD nd CD b.RT_ l1a a 11 PCR m on ta e m a1 de srtd s l
术中自体血回输PPT课件
时补充相应血液成份(FFP、Cryo、PLT等); 注意日常检查和保养工作。
注意事项
凝血功能、低蛋白、电解质
回收式自体血主要成分为浓缩红细胞,血小 板、凝血因子及血浆蛋白的减少是大量自体 血回输的主要顾虑
大量自体血回收时(出血量为1/3~2/3), 应注意患者凝血功能变化,适当补充FFP 、 Cryo、PLT等
+
高 + 不能解决
低
自体血 ± +
-- -- --
--
低 -- 可解决
高
库血与自体血的比较
项目 红细胞形态及运氧能力 红细胞变形性、聚集性
红细胞寿命及活力 抗酸缓冲力 抢救时间
患者医疗费用
库血 异常、差 下降、增加 缩短、差
差 慢 高
自体血 正常、好
正常 正常、好
好 快 低
扫描电子显微镜所见
随机选取5个1000倍视野拍照,统计红细胞形态: 浓缩后红细胞形态正常率分别为66%~68%。 清洗后红细胞形态正常率分别为84%~87%。 经微聚体滤器过滤后红细胞正常率均在80%以上。 库存两周的红细胞悬液红细胞正常率为:64.5% 。
C 绝异体输 血、同意术中自体
血回输者
禁忌症
A 血液被污染
B
血液流出血管的时间 过长
C 长期抗生素治疗无效 者
术前准备
病人评估及告知 设备常规检查 抗凝药品(1-2支肝素(1.25万U/支)或枸
橼酸盐溶液) 0.9%氯化钠注射液 若干(1000—3000 ml/
袋 为佳) 血液回收耗材 一套 (储血罐、双管、离
吸嘴
入血口
工作原理图
接负压源
脐血与外周血来源CIK治疗晚期结直肠癌的比较研究
肿瘤是威胁人类健康的主要疾病,结直肠癌是发病率与死亡率均位居前列的肿瘤。
研究显示,2018年全世界新发肿瘤中,结直肠癌在所有肿瘤中位居第三,而在因肿瘤死亡的病例中,结直肠癌位居第二;男性中结直肠癌的发病率及死亡率分别位居第三和第四,女性中结直肠癌的发病率及死亡率分别位居第二和第三[1],结直肠癌在人类发展指数(human development index ,HDI )不同的国家的发病及死亡情况也有所不同。
在HDI 高的国家中,其发病率在男性和女性中分别位居第三及第二位,死亡率分别为第四及第三位;而在HDI 低的国家中,其发病率在男性和女性中分别位居第五及第三位,死亡率都为第五位[1]。
随着手术、放化疗技术的发展,结直肠癌患者的治愈率及生存时间都有明显上升,但对于晚期结直肠癌患者而言,生存率并不乐观[2]。
细胞免疫治疗是一种有潜力的肿瘤治疗方法,细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine-induced killer ,CIK )是其中一种具有广谱杀瘤活性的免疫细胞。
CIK 是一群异质性细胞,主要的效应细胞为CD3+CD56+具有自然杀伤细胞(natural killer ,NK )样特征的T 细胞。
临床研究证实,CIK 对多种肿瘤具有杀伤活性,能使患者临床获益[3-9]。
CIK 的主要来源是患者自身外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell ,PBMC ),简称外周血来源CIK(peripheral derived CIK ,PB-CIK )。
但是对于部分健康状况较差的晚期肿瘤患者或是老年患者而言,获得足够数量的外周血PBMC 比较困难[10]。
针对这种情况,使用脐血来源PBMC 制备CIK (cord blood derived CIK ,CB-CIK )用于肿瘤治疗是一种可行的方法[11]。
本研究探讨CB-CIK 与PB-CIK 治疗晚期结直肠癌患者的安全性及有效性,报告如下。
脐带血干细胞移植,完全没有排斥反应!
脐带血干细胞移植,完全没有排斥反应!
作者:陈金山生物医疗\生物评论
排斥反应又称,免疫排斥反应,就是当一种带有免疫功能的细胞或器官,被移植到另一种器官或人体内,会产生一种与被移植的器官与人体不融合的现象,会对此器官与人体进行破坏性的攻击。
但是如果所移植的细胞与器官与被移植的器官型号相同就不会有排斥反应,或者,所移植的细胞与器官内,不具有免疫功能,也不会产生排斥反应。
也就是说只要移植的细胞与器官没有免疫功能,就可以被移植到任何不同的个体内,都不会产生排斥反应。
目前临床为了避免排斥反应,在器官移植前,都要想办法先把T淋巴免疫细
胞剔除,避免或减少排斥反应的几率。
由于免疫抑制剂的广泛使用,目前对于急性排斥反应已经基本控制,大大提高了异体移植成功的概率。
脐带血中的免疫细胞较为幼稚,免疫功能不成熟,处于一种缄默状态,或者免疫功能还没有开始发育,免疫原性较骨髓来源的干细胞更低,作为一类免疫豁免细胞,不须经过严格配对使用,异体移植无免疫排斥反应,适宜于不同个体之间的移植,且不产生移植物抗宿主病,也就是不会产生任何毒副作用。
同时脐带血刚脱离母体,相对纯净,脐带血潜伏性病毒和病原微生物的感染及传播几率非常低,所以脐带血干细胞移植安全性较高。
而其他成体干细胞。
特别是乙肝患者的自体骨髓干细胞,其本身的增殖能力存在缺陷。
所以说脐带血干细胞的移植,不仅没有异体的排斥反应,更安全可靠。
脐带血单个核细胞迁移体外实验研究的开题报告
脐带血单个核细胞迁移体外实验研究的开题报告一、研究背景脐带血(UCB)是一个重要的来源,包含了丰富的造血干细胞和免疫细胞,被应用于实现造血和免疫重建。
UCB对于临床的应用有很大的潜力,而单个核细胞(SNCs)作为UCB中的一种细胞类型,在此方面有着潜在的功效。
SNCs在UCB中占比较低,但具有独特的功能,能够迁移至其他组织,并发挥生物学效应。
虽然对SNCs进行了广泛的研究,但其迁移机制仍不完全清楚。
因此,进一步研究SNCs在细胞水平上的迁移机制具有很大的意义。
二、研究问题UCB中的SNCs可以迁移至其他组织发挥生物学效应,但其迁移机制仍未被完全阐明。
因此,本研究旨在探究SNCs在体外的迁移机制。
三、研究内容和方法本研究将采用体外细胞迁移试验,建立SNCs迁移的体外模型,评估SNCs迁移的能力和机制。
具体步骤如下:1. 提取UCB,并通过梯度离心法分离SNCs。
2. 构建细胞迁移实验体系,将SNCs放置在Boyden室中。
3. 向Boyden室中加入不同的化学物质,例如CXCL12、CCR7等,以评估这些物质是否能促进或抑制细胞迁移。
4. 使用荧光染色和显微镜观察和记录细胞迁移的情况。
5. 分析和比较不同组的数据,探索SNCs的迁移机制。
四、预期成果通过体外实验,本研究将探索UCB中SNCs的迁移机制,为进一步研究其在体内的作用奠定基础。
预计可以得到以下成果:1. 得到SNCs在体外迁移的能力和方式。
2. 确定影响SNCs迁移的因素和机制。
3. 为UCB的临床应用提供理论基础。
五、研究意义UCB作为一种重要的来源,SNCs具有在体外和体内迁移的功能,具有良好的生物学效应。
本研究将探索SNCs迁移的机制和影响因素,为其在临床应用中的发挥作用提供理论基础。
此外,研究结果还可以为相关研究提供参考,促进干细胞和免疫细胞的研究和应用。
肺癌骨转移后的症状、治疗方法以及预后分析
肺癌骨转移后的症状、治疗方法以及预后分析晚期肺癌不仅病情加重、癌痛显著,而且会出现癌细胞多组织、多部位的转移。
此时对患者应用手术治疗的意义不大,因手术并不能完全清除转移灶,还会对机体造成创伤,患者在手术切口恢复过程中还有可能罹患感染等并发症,故不建议患者手术治疗。
1、骨转移好发部位肺癌骨转移与原发性肺癌的病理类型密切相关,尤以肺腺癌患者骨转移的发生率高,其次为小细胞肺癌及鳞癌。
因肺部解剖位置与胸部肋骨及腰部接近,故骨转移后的部位多在肋骨、胸椎、腰椎、骨盆等,少见四肢骨转移。
2、骨转移后症状同肺癌类似,早期患者并无显著地特异性症状,甚至多数患者无任何异常,多经同位素扫描等检查手段确诊。
骨转移症状又与骨转移的部位相关,如发生在肋骨则表现为胸壁位置合并有显著而又局限性的骨痛。
脊髓部位则为背部正中部的疼痛。
如果转移瘤灶发生在胸椎、颈椎、腰椎等人体重要承重部位,患者则有可能发生瘫痪。
3、骨转移后的主要治疗方法3.1 放疗约50%的肺癌骨转移病人在放射治疗后,疼痛可完全缓解,约75%的病人疼痛可显著减轻。
放射性核素治疗:原则上不和化学治疗同用,并须定期观察白细胞变化。
肺癌骨转移放疗也可以采取姑息性放疗,分为短程低剂量放疗和长程高剂量放疗,长程高剂量分割方案有更好的镇痛效果。
采用肺癌骨转移放疗治疗的目的旨在减轻患者的疼痛,延长生存期,该治疗方法是肺癌骨转移放疗中最普遍的治疗手段,可防止急性病理骨折和脊髓压迫的发生。
3.2 化疗首先要使用帕米磷酸二钠或者唑来膦酸注射液,每个月输液1次就可以,且必须坚持6个月以上,或者一直注射。
帕米代表作品是第二代的博宁和第三代的泽泰。
泽泰大概2200左右,博宁要1400左右。
博宁比较不错,视当地医保情况再做决定,泽泰不需要长时间输液,很快就完事,而博宁比较实惠,治疗效果二者差不多,博宁需要注射4小时以上。
这种针保护骨头继续被癌细胞侵蚀,避免日后出现骨病事件,如骨折等。
全身联合化学治疗在治疗骨转移灶的同时对其他可能存在的潜在转移灶亦有治疗作用。
自体血回输 ppt课件
读
自体输血-回收式
适应症
➢择期手术:术前备红细胞>=2u以上,无回收式自体输血禁忌症, 如创伤比较大的骨科手术。 ➢急症手术:如肝、脾破裂、异位妊娠、颅脑外伤、心脏及大血管 损伤等。 ➢体外循环
自体输血-回收式
禁忌症
➢血液流出血管外超过6 小时; ➢怀疑流出的血液含有癌细胞; ➢怀疑流出的血液被细菌、粪便或羊水等污染; ➢流出的血液严重溶血; ➢和白细胞滤器联合使用可适当放宽使用适应证。
自体输血-回收式
2、残留的肝素会对患者造成损害吗?
不会!
➢ 抗凝原则:宁快勿慢、宁多勿少 ➢ 肝素清除率达(97.5 ±0.5)% -99% ➢ 回输血残余的肝素(0.3-0.5U/L),不会对患者的凝
血系统产生影响。 ➢ 抗凝不足,降低血液的回收率,容易形成微血栓后堵
塞离心杯管腔导致爆杯。
自体输血-回收式
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自体输血的临床应用
自体血液回收的意义
异体输血的发展
➢1667年英国医生lower成功将羊血输入人体。 ➢同年法国医生Denis给一位15岁男孩输注羊血。 ➢由于输动物血常发生严重反应,被法国、英国国会下令禁 止输血 ➢1818年英国产科医生Blundell将人血输给大出血产妇成功, 由于不配血型,常发生严重反应,甚则死亡。 ➢1900年Karl Landsteiner发现ABO血型; 1930年因此他获 得了诺贝尔医学奖。 ➢100年实践,抢救了成千上万的病人,异体输血功不可没。
自体输血-稀释式
(3)注意事项
➢ 血液稀释程度,一般使红细胞压积不低于25%;
➢ 术中必须密切监测患者血压、心电图、脉搏血氧饱和度、红细 胞压积以及尿量的变化,必要时应监测中心静脉压。
脐血单个核细胞ppt课件
(Cord Blood Mononuclear Cell,CB-MNC)
报告人:陈莉 2014-9-20
主要内容
❖ 一、脐血介绍 ❖ 二、脐血临床应用历史 ❖ 三、脐血MNC治疗病种 ❖ 四、脐血MNC治疗原理 ❖ 五、脐血MNC分离及保存 ❖ 六、脐血MNC治疗常用回输方式及日程
一、脐血介绍
血重建,也能满足部分成人移植的需要; ❖ 6)脐血中免疫细胞不成熟,移植后急、慢性GVHD的发生率低且严重程度较轻,
可耐受较大的HLA差异; ❖ 7)脐血中各种病毒感染的机会较小,移植术后病毒性疾病发生率低; ❖ 8)可针对少数民族人群收集相应的脐血,可避免因种族不同而造成不易找到
合适的造血干细胞来源。
❖ 二次世界大战期间,苏联战地医院的的血液供给极其紧张, 情急之下苏联Ascoli医生首次大胆的使用了血型相合的脐 血进行了静脉输注,挽救了部分战士的生命。
历史应用
脐血优势
❖ 1)脐血来源丰富,取之不尽,用之不竭; ❖ 2)采集方便,对产妇和胎儿无任何损害; ❖ 3)脐血是以实物的形式保存,不会被供者拒绝; ❖ 4)寻找HLA相合脐血所需时间短,可根据患者需要及时进行移植; ❖ 5)脐血中早期造血干细胞含量丰富,一份脐血可满足30~40kg体重的儿童造
2.内皮修补机制
脐血MNC可向内皮细胞分化;EPC可向损伤区归巢,参与 构建毛细血管网并分泌血管形成因子,具有多分化潜能的 脐血MNC可增殖并增补EPC,脐血MNC中的EPC可直接参与受 损局部血管的形成及损伤修复过程。
3.免疫内分泌刺激机制
脐血MNC可对机体产生免疫刺激作用,刺激机体的内分 泌系统产生反应,促进组织损伤的修复。
SUCCESS
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造血干细胞移植的免疫学研究进展
造血干细胞移植的免疫学研究进展孙湘兰综述(江苏大学杂志社,江苏镇江212013)[ 关键词] 造血干细胞;免疫;进展[ 中图分类号] R329. 1 ;R392 [ 文献标识码] A [ 文章编号] 1671 - 7783 (2003) 01 - 0075 - 04造血干细胞(hemotopoietic stem cell , HSC) 又称多能造血干细胞,它是从卵黄囊全能间叶细胞分化而来的最原始的造血细胞,具有高度自我更新或自我复制并进一步分化为各系祖细胞的能力。
造血干细胞经有丝分裂后,正常稳定状态下约半数子细胞仍保持干细胞的全部特性,称自我更新,这样就能使干细胞池的大小维持不变。
另有半数的干细胞有丝分裂过程中特征发生改变走向逐渐分化的途径,离开干细胞池进入增殖分化池。
从而维持了机体的正常造血,保证了机体在生命过程中对各类细胞的需要,如果二者失去平衡则会导致病理性造血。
临床利用造血干细胞的自我更新和分化这两个重要的基本特性应用造血干细胞移植技术治疗各种疾病,并使造血功能得以重建[ 1 ] 。
造血干细胞移植包括骨髓细胞移植和从外周血、脐带血中分离的造血干细胞,经体外培养扩增后移植给患者,用于重建或恢复受者的造血功能和免疫功能。
随着分子生物学、免疫学及细胞培养技术的完善,对造血干细胞生物学特性、免疫表型的研究日益深入。
本文对造血干细胞移植的免疫学研究进展作一综述。
1 造血干细胞移植类别造血干细胞移植已成为治疗恶性血液病和某些对免疫疗法有耐药性的难治性自身免疫病、实体瘤等的有效手段。
目前,造血干细胞的移植包括自体移植和同种异体移植。
自体移植又分为自体骨髓细胞移植、自体外周血干细胞移植; 异体移植有异体骨髓细胞移植、脐带血造血干细胞移植。
它们因各自的特点都得到了临床医生的高度重视。
自体骨髓干细胞移植减少了排斥反应的发生,但临床移植也不易成功,其主要原因是回输了肿瘤细胞致肿瘤复发。
近年来研究发现外周血和骨髓干细胞对血液系统的恢复效果是相同的,但二者比较,自体外周血干细胞移植则表现出更大的优势:取材方便,不需多次多部位骨髓穿刺,对病人基本无创伤;可从周身各处造血组织采集细胞,对骨髓有浸润或是接受放射线照射不能采集骨髓的病人可施行; 移植物所含肿瘤细胞和T 细胞数量少,降低了复发和同种异基因移植后移植物抗宿主病( GVHD) 的发生;动物实验证明造血和免疫重建早,辐射敏感性低和植入率高而备受青睐[ 2~5 ] ; 脐带血中不仅含有丰富的、有旺盛增殖能力的、未分化的造血干细胞,而且还有较高活性的造血调控因子和一定量的造血支持细胞。
免疫细胞使用说明书
免疫细胞使用说明书(V1.0)【适用范围】该产品说明书适用于人和动物PBMC、SMC、CBMC、BMMNCs等单个核细胞和人、小鼠CD3+T、CD4+T、CD8+T、CD19+B、单核、NK细胞等亚型免疫细胞的复苏、保存、使用等过程。
【产品描述】单个核细胞是白细胞中只有一个细胞核的细胞,相对密度在1.076~1.090。
根据其组织来源不同,又可分为外周血单个核细胞(Peripheral Blood Mononuclear Cell,PBMC)、脐带血单个核细胞(Cord Blood Mononuclear Cell,CBMC)、脾脏单个核细胞(Spleen Mononuclear Cell)、骨髓单个核细胞(Bone Marrow Mononuclear Cells,BMMNCs)等。
IPHASE单个核细胞均是由新鲜的组织或器官,利用细胞比重的差异,通过密度梯度离心的方法获得。
免疫细胞(Immune cell),由多种不同类型的细胞组成,包括淋巴细胞、单核细胞、巨噬细胞、树突状细胞、自然杀伤细胞等。
免疫细胞作为免疫系统的重要成员,具有吞噬异物并产生抗体、机体伤病的损伤治愈、抗御病原体入侵等能力,在执行免疫应答和免疫功能方面担负重任。
IPHASE免疫亚型细胞均是通过免疫磁性细胞阴选分选的方法,从新鲜制备的单个核细胞悬液中分选而来。
【包装规格】5×106cells/管1×107cells/管2×107cells/管5×107cells/管【应用方向】可作为大分子药物临床前药代动力学和药效学研究、药物毒性筛选、免疫学研究、疫苗开发以及移植免疫等多个领域研究的原材料。
【合规保障】合规是研究的开始。
按照国家要求,凡涉及到人和猴相关的细胞产品均需办理合规审批流程,只有审批通过,且取得证明文件后才可买卖细胞。
IPHASE/汇智和源分离免疫细胞的组织或器官均由合规渠道获得,来源清晰,免除客户后顾之忧。
治疗80多种疾病!关于脐带血干细胞,看完此文你就不用再纠结了!
治疗80多种疾病!关于脐带血干细胞,看完此文你就不用再纠结了!脐带血是胎儿娩出、脐带结扎并离断后残留在胎盘和脐带中的血液,含有丰富的造血干细胞,已应用于80多种疾病的治疗。
关于脐带血你可以查找到很多的文献资料和新闻报道,我们试图通过26个英文字母的引领,为你快速简洁地勾勒出脐带血的动人面孔。
Arthritis / 关节炎A2018年8月,韩国首尔国立大学的研究者开展的一项1a期临床试验显示,静脉输注脐带血干细胞治疗类风湿关节安全有效,这也是首次在人体使用脐带血干细胞进行的一项临床试验。
Blood Bank / 血库(血站)B血站是采供血机构是指采集、储存血液,并向临床或血液制品生产单位供血的医疗卫生机构。
在我国,血站分为一般血站和特殊血站。
特殊血站包括脐带血造血干细胞库和卫生部门根据医学发展需要批准、设置的其他类型血库。
Cryopreservation / 冻存C脐带血造血干细胞置入-196℃深低温液氮中,可以进行长期冻存,在需要时提取出来复苏使用。
Donor / 供体D脐带血造血干细胞移植是将健康供体或自体的造血干细胞输注给患者,使之重建正常的造血和免疫功能。
Endothelial Progenitor Cells内皮祖细胞E脐带血来源的内皮祖细胞在心脑血管疾病、外周血管疾病、肿瘤血管形成及创伤愈合等方面均发挥重要作用,并为缺血性疾病的研究治疗提供了新思路。
First Cord Blood Transplantation首例脐带血移植F全球首例脐带血造血干细胞移植用于一位 Fanconi 贫血患者Matthew Farrow 的治疗。
GVHD / 移植物抗宿主病G移植物抗宿主病(GVHD)是由于移植后异体供者移植物中的T 淋巴细胞,以受者靶细胞为目标发动细胞毒攻击,其中皮肤、肝及肠道是主要的靶目标。
脐带血造血干细胞的免疫系统处于原始阶段,排斥反应小,因此相比骨髓和外周血干细胞移植物抗宿主病发生率低。
两步法分离人脐血单个核细胞的最佳条件
两步法分离人脐血单个核细胞的最佳条件郭继强;刘爱兵;沈丹【摘要】背景:如何获得较为纯化、高活性的干细胞,目前未见深入研究报告,也未见一个标准化操作流程方案.目的:探讨两步法分离人脐血单个核细胞最佳分离条件.方法:观察羟乙基淀粉在20,30,40,50,60,70 min不同时间沉淀脐血中红细胞的效果;使用人淋巴细胞分离液,分别在800,700,600,500,400 g/min,离心30,25,20 min的条件下分离人脐血单个核细胞.结果与结论:6%羟乙基淀粉沉淀脐血60 min 效果最好;使用密度为(1.077 0±0.000 1) g/mL人淋巴细胞分离液,在4 ℃条件下以700 g/min离心力,离心30 min,洗涤3次,这样获得的人脐血单个核细胞效果最好,所得细胞沉淀中混杂细胞如红细胞及其他细胞碎片较少,人脐血单个核细胞的细胞得率及活力比较高.提示应用羟乙基淀粉沉淀和人淋巴细胞分离液分离两步法,在最佳时间条件下可提高脐血干细胞的回收率.%BACKGROUND: It has not been deeply reported howto obtain high-purity and high-vigor stem cells as well as the standardizedoperation plan has not been seen, yet.OBJECTIVE: To explore the best condition for isolating human umbilical cord blood mononuclear cells.METHODS: Umbilical cord blood red blood cells precipitated by hydroxyethyl starch were observed in different time points (20,30, 40, 50, 60, 70 minutes). The human umbilical cord blood mononuclear cells were separated in human lymphocyte separatingmedium (LSM) by using centrifugation method at 800, 700, 600, 500, 400 g/min for 30, 25, and 20 minutes.RESULTS AND CONCLUSION: The 6% hydroxyethyl starch precipitation for umbilical cord blood red blood cells was best within60 minutes. Using the human LSM of (1.0770+0.000 1) g/mL at 4 ℃, centrifugation at 700 g/min for 30 minutes, and rinsing for 3times the best conditions to harvest human umbilical cord blood mononuclear cells. Under the above-mentioned conditions, notonly higher umbilical cord blood mononuclear cells rate and higher mononuclear cells vigor were obtained, but fewer red bloodcells and other cell fragments were seen. The best condition for isolating the human umbilical cord blood mononuclear cells usingtwo steps methods (6% hydroxyethyl starch precipitation and LSM) at the optimal time can improve the recovery rate of humanumbilical cord blood stem cells.【期刊名称】《中国组织工程研究》【年(卷),期】2011(015)045【总页数】4页(P8447-8450)【关键词】人脐血;单个核细胞;密度梯度离心法;羟乙基淀粉;两步法【作者】郭继强;刘爱兵;沈丹【作者单位】武警总医院医学实验中心,北京市,100039;武警总医院医学实验中心,北京市,100039;武警总医院医学实验中心,北京市,100039【正文语种】中文【中图分类】R394.20 引言脐血(脐带血)是获取临床治疗级干细胞的常用来源之一[1]。
2018年广州市科学研究计划一般项目立项结果
广东省人民医院(广东 省医学科学院)
陆靖 祝光湖 韦相才 赵文忠 杨正梅 穆利霞
邓盾 勾红潮
赖多 张晓爱
张木 姚春鹏 陆展华
于琳 邹宏达
崔阳
吴海军
陈浩 谢永标 刘宇斌
20
本项目经费于立项 后一次性拨付。
广东财经大学
基于遥感技术和地球化学的广州 市地质灾害成因及防治研究
广东财经大学
脉冲分数阶微分方程相关问题前 沿研究
广东财经大学
基于碟式芯片的食品动物源性成 分鉴别高通量检测技术研究与应
用
广东产品质量监督检验 研究院
广州市售水产品污染物数据库的 建立及基于聚类分析法的污染综
合评价
广东出入境检验检疫局 检验检疫技术中心
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高粱
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廖开怀 曾安
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一种临床用自然杀伤细胞的制备方法
专利名称:一种临床用自然杀伤细胞的制备方法
专利类型:发明专利
发明人:刁小娟,宋芳,孙健,刘照军,孙旭燕,庄肃静,雒猛,杨卫娟,王龙,洪凡真
申请号:CN202210011909.1
申请日:20220107
公开号:CN114058584A
公开日:
20220218
专利内容由知识产权出版社提供
摘要:本发明属于生物医学技术领域,具体涉及一种临床用自然杀伤细胞的制备方法,主要包括以下步骤:步骤一、从脐带血中分选CD34+标记的脐带血造血干细胞,并获得剩余单个核细胞;步骤二、剩余单个核细胞成份的优化;步骤三、NK细胞的培养和扩增;步骤四、细胞数量及细胞表型鉴定。
本发明首先分离出脐带血中的自体血浆及单个核细胞,其次利用磁珠法分选出单个核细胞中以CD34+为表面标记的造血干细胞,获得造血干细胞的同时,也收获了除造血干细胞以外的剩余成份,用此剩余成份及自体血浆培养NK细胞,实现了资源的合理利用,使得同一份脐带血既可以进行造血干细胞回输,又可以培养出符合临床需求的具有抗肿瘤活性的NK细胞,适于广泛推广应用。
申请人:山东省齐鲁干细胞工程有限公司
地址:250102 山东省济南市高新区港兴三路1109号
国籍:CN
代理机构:北京轻创知识产权代理有限公司
代理人:王东旭
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自体血液回输机
2.其他适合血液回收利用的情况
① 患者为稀有血型或有多种抗体,难以获得异体血 ② 因道义、宗教或其它原因拒绝异体输血又同意术中自体血回输
禁忌症
1. 恶性肿瘤患者 2. 患者伴有败血症、镰状细胞贫血 3. 血液被消毒液、细菌、羊水污染等 4. 回收血液出血大量溶血时 5. 血液流出血管外超过6小时
自体输血新技术的发展前景和展望
术中回收式自体输血适应症
1.估计术中出血量大于患者血容量15%的无菌手术 ① 创伤出血:大血管损伤、胸腔内出血、肝破裂、脾破裂、脊柱外伤
等 ② 心脏、大血管外科手术 ③ 骨科:全髋置换术、骨折切开复位内固定术、脊柱手术(脊柱融合
术、畸形矫正)等 ④ 妇产科:异位妊娠破裂大出血等手术 ⑤ 腹部外科:肝脾手术、门脉高压分流术、肝移植术等 ⑥ 泌尿外科:耻骨后前列腺根治切除术、膀胱切除术、肾切除术 ⑦ 神经外科:动静脉畸形、动脉瘤、原发性癫痫、脑外伤手术等 ⑧ 头与颈大手术
自体输血的优点
对患者有利 1.防止输血引起的感染性疾病 2.防止细胞和血浆蛋白抗原引起的同种免疫 3.防止同种抗体引起的发热及变态反应疾病 4.防止发生GVHD 5.反复的自身采血,可增强骨髓功能 6.节约用血 7.不必担心输血副作用 8.解决某些宗教人员、稀有血液人员的输血问题
自体输血的优点
对血液中心和输血部门有利 1.稀少血型患者能得到适合血液 2.较少输血使用量 3.适用于血液供应困难的偏远地区 4.关系到增加全社会必需用血的血液供给量
一、我院自体输血的基本现状 二、自体血液回收机简介 三、自体输血新技术的发展前景和展望
脐血SP-D测定及其与自发早产儿预后的关系
脐血SP-D测定及其与自发早产儿预后的关系
王伟
【期刊名称】《当代医学》
【年(卷),期】2013(000)003
【摘要】目的测定自发早产儿脐血SP-D的浓度,随访早产儿住院时间,探讨脐带血SP-D浓度与早产儿住院时间的相关性。
方法母孕23至32周分娩的早产儿165名,和46名健康足月儿入选本实验。
利用酶联免疫吸附试验(ELISA)技术测定其脐带血中SP-D浓度。
随访早产儿住院时间。
结果自发早产儿脐带血SP-D浓度明显升高,差异具有统计学意义;早产儿脐带血SP-D浓度和ICU住院时间呈正相关。
结论新生儿血清SP-D浓度的升高可能参与了自发早产的过程,脐带血SP-D浓度可作为判断早产儿严重程度的指标之一。
【总页数】2页(P27-28)
【作者】王伟
【作者单位】453000 河南省新乡市中心医院儿科
【正文语种】中文
【相关文献】
1.脐血血气分析和乳酸测定对早产儿窒息的诊断意义 [J], 邢子君;周宁;梁燕清
2.早产儿脐血血脂水平测定 [J], 陈翠芳;霍灵;饶锦绣;刘锦萍;吕志红
3.脐血NF-kB及MBP检测对早产儿脑白质损伤的早期诊断及其与预后的关系 [J], 王智英;霍海花;吕红艳;栗庆芳
4.自体脐血单个核细胞回输早产儿:免疫功能及预后 [J], 杨春燕;许平;李宝云;杨
玉军;贾焕荣;周丽英;杨巧芝;
5.自体脐血单个核细胞回输早产儿:免疫功能及预后 [J], 杨春燕;许平;李宝云;杨玉军;贾焕荣;周丽英;杨巧芝
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自 体脐血单个核细胞回输早产儿:免疫功能及预后
杨 春 燕 ,许 平 ,李宝 云 ,杨 玉 军 ,贾焕 荣 ,周 丽英 ,杨 巧 芝( 聊城 市人 民 医院 , 山东省聊 城 市 2 5 2 0 0 0 )
文章 亮点 : 1 早产儿脐静 脉穿刺采血量 较少 ,但 是脐血分离 后单个核细 胞数量可满足 早产儿 自身的需要 ,不需要体外扩 增 。
扬春燕, 聊城 市人 民 医院 , 山 东省 聊城 市 2 5 2 0 0 0
通讯 作 者 :许 平 ,聊 城 市 人 民 医院 , 山 东省聊 城 市
2 5 2 0 0 0 中图分类号: R3 9 4 . 2
文献标识码: B
吸道 感染 的发 病率 。
关键 词 :
于细 跑 :移植 :早 产 L :细跑 免疫 :体液 免疫 ;瞬盘 移植 ;造 盘干 缅 瞻
中国组织工程研 究
1 . C RT E R. O r g
Ch i n e s eJ o u na r l o fT i s s u eEn g i n e e r i ngRes ea r c h J u l y 2 , 2 01 5 V o L1 9 ,No . 28
Au t o l o g o u s u mbi l i c a l c o r d b l o o d mo n o n u c l e a r c e l l t r a n s f u s i on i n p r e t e r m c h i l d r e n :
2 T细 胞亚 群检 测是 观察 机体 细胞 免疫 水平 的重 要方法 ,脐 血 单个 核细 胞移植 后 1周 C D 4 、C D 4 / C D 8增 高 ,
提 示 机体 细胞 免疫 功能较 移植 前 改善 。 3 脐血 单个 核 细胞移 植 能够减 慢 I g G 下 降水 平 ,减少 呼吸 机 的使用 率 ,缩短 住 院时 间 ,减 低小 婴儿 的反 复呼
主题 词 :
文章编号: 2 0 9 .4 5 3 4 4 ( 2 0 1 5 ) 2 8 " - 0 4 5 7 2 ・ 0 4 稿 件接 受:2 0 1 5 - 0 5 - 1 1
婴 n 巍 生 : 血 于缅 瞧移 植 :免疫 细 跑 ;免疫 体 液 摘 要 背景 :脐 血 中富含造 血干 , 祖 细胞 ,有 很 强的增 殖 、分化 及形 成集 落 的能力 ,在 刺激 骨髓 造血 功 能、提 高血 细
i m m une f unc t i on and pr ognosi s
Y a n g C h u n - y a n , X u P i n g , L i B a o - y u n , Y a n g Y u  ̄ u n . J i a H u a n — r o n g , Z h o u L i — y i n g , Y a n g Qi a o - z h i ( L i a o c h e n g P e o p l e ’ S H o s p i t a l , L J a o c h e n g 2 5 2 0 0 0 , S h a n d o n g P r o v i n c e , C h i n a )
杨春 燕 许平 .李宝 云.杨玉 军 .费 焕荣 .躅丽英 .杨 巧芝 自体晓 血单 个核 镪咆 回输 早产 儿 :免 疫功 能及 预
后【 J 1 . 中国组织 I程 研究 .2 0 1 5 .1 9 ( 2 a ) : 4 5 7 2 - 4 5 7 5 . d o i : l O . 3 9 6 9  ̄ . i s s n . 2 0 9 5 - 4 3 4 4 . 2 0 1 5 . 2 8 . 0 2 6
h t t p: I A '  ̄NW . c r t er . or g
胞活 力和 数量 、促 进免 疫细 胞发 育成 熟 ,维持 机体 免疫平 衡 等方 面发 挥重 要作 用 。 目的:探 讨 自体脐 血单个 核细 胞 移植对 早 产儿 免疫功 能及 预 后 的影响 。 方法 :选 取 2 0 1 0年 7月至 2 0 1 2年 7月 出生立 即入住 NI CU病房 ,体质量 ≤ 1 5 0 0 g的早产 儿 6 2例 ,根据 患儿 家长 自愿 性原 则分 为治疗 组 和对 照组 ;治疗 组娩 出后 立 即经 脐 静脉 穿刺 收集 脐血 , 4 h内送 中心 实验 室密 度 梯 度离 心后 回输 早产 儿体 内 :治疗 前后 监测 细胞 免疫 、体 液免 疫指 标及 相关 临床指 标 。 结 果 与结 论 :治疗 组治疗 1周 复查 时细胞 免疫 指标 C D 4 、CD 4 / C D 8水平 较前 明显 升 高 ,较 对 照组 比较 差异 有 显 著性 意义 ( 户 0 . 0 1 ,0 . 0 3 ) ,而 CD 8变 化不 明显 。治疗 1 周 后 两组 早产 儿的 体液 免疫 指标 I g M 水 平均 较 治 疗 前 升高 ,但 以对照 组升 高 明显( P = 0 . 0 O ) ;I g A水 平 改变不 明显 , I g G 水平 下 降 ,以对照 组下 降 明显( 尸 0 . 0 2 ) ; 住 院 期 间, 治疗组 的重 症感 染发 病率 为 1 3 %,较 对照 组( 1 6 %) 低 ,但 差异 无显 著性 意义 ; 治疗组 需机 械通 气 患儿 比例 、平 均住 院时 间与对 照 组 比较 差异 有显 著性 意义 ( P <0 . o 5 ) 。两 组早 产儿 均随 访至 1 2个 月 ,治疗 组 中反 复呼 吸道感 染 的发病 人数 为 0例 ,而对 照组 为 1 例 ,两者 比较 差异 有显 著性 意义 <0 . 0 5 ) 。结果 表 明 自 体 脐血 干 细胞移 植有 利于 改善 机 体细胞 免疫 功 能 , 减慢 I g G下 降水 平 ,减 少呼 吸机 的使 用率 ,缩 短住 院 时间 , 减 低 小婴儿 的反 复 呼吸道 感染 的发 病率 。