欧洲药典附录

第二部分、附录附录1 溶液的澄清度 .................................
附录2 溶液颜色检查 .................................
附录3 旋光度 .......................................
附录4 铵盐检查法 ...................................
附录5 氯化物检查法 .................................
附录6 硫酸盐灰分 ...................................
附录7 铁 ...........................................
附录8 重金属 .......................................
附录9 干燥失重 .....................................
附录10 硫酸盐检查法 ................ 错误!未定义书签。

附录11 红外吸收分光光度法............................
附录12 pH测定.......................................
附录13 滴定 .........................................
附录14 氯化物鉴别反应 ...............................
附录15 指示剂颜色与溶液pH 的关系....................
附录1 溶液的澄清度
在内径15～25mm，平底，无色、透明、中性玻璃管中，加入等量的供试溶液与浊度标准液，使液位的深度都为40mm，按如下所述方法进行比较。

浊度标准液制备5分钟后，以色散自然光照射浊度标准溶液和供试溶液，在黑色背景下从垂直方向观察、比较澄清度或浑浊程度。

色散自然光必须较容易区分浊度标准溶液Ⅰ与水，浊度标准溶液Ⅱ与浊度标准溶液Ⅰ。

如果供试溶液的澄清、透明程度与水相同，或者与所用溶剂相同，或者其澄清度不超过Ⅰ号浊度标准溶液，那么可判定该溶液为澄清。

试剂：
硫酸肼溶液：取1.0g硫酸肼溶于水，加水稀释至100.0ml，静置4～6小时。

乌洛托品（六亚甲基四胺）溶液?：在100ml容量平中，以25.0ml水溶解2.5g乌洛托品。

浊度标准贮备液：在存放乌洛托品溶液的100ml容量瓶中，加25.0ml的硫酸肼溶液。

混合，静置24小时，贮存在无表面要求的玻璃容器中，可在2个月内使用。

该浊度液不得黏附玻璃，用前必须充分摇匀。

浊度标准原液：取浊度标准贮备液15ml，加水稀释、定容至1000ml。

该液临用前制备，至多保存24小时。

浊度标准液：由浊度标准原液与水按表1-1配制,即得。

本液应临用前配制。

附录2 溶液颜色检查
按本药典规定，用下面两种方法之一可以检出溶液在棕色-黄色-红色范围内的颜色。

如果溶液A的外观与水或所用溶剂相同，或者颜色浅于标准比色液B
9
，则可判定溶液A为无色。

方法I
用外径为12mm的无色、透明中性玻璃管取2ml的供试溶液，与相同玻璃管中的2ml的水，或2ml本文所规定的标准比色液（见标准比色液表）进行比较。

在散射自然光，白色的背景下，水平观察比较颜色。

方法Ⅱ
用同样平底、内径为15～25mm的无色透明中性玻璃管，液位的深度为40mm，将供试溶液与水或溶剂或本文中规定的标准比色液（见标准比色液表）对比。

在散射自然光，白色的背景下，垂直地观察比较颜色。

贮备液
黄色液称取46克氯化铁，加大约900ml盐酸溶液（25ml浓盐酸和975ml水混和）溶解，继续添加，并定容1000.0ml。

滴定并以上述盐酸溶液调整，使黄色液每毫升含45.0mg FeCl
3﹒6H
2
O。

避光保存。

滴定在一个配有磨口塞的250ml锥形瓶内，加入10.0ml黄色液，15ml 水，5ml 浓盐酸和4g碘化钾，塞上瓶塞，在暗处放置15分钟，再加100ml 水。

用0.1M的硫代硫
酸钠标准溶液滴定游离的碘，在滴定接近终点时加0.5ml淀粉试液作指示剂。

1ml 0.1M的硫代硫酸钠标准溶液相当于27.03mg FeCl
3﹒6H
2
O。

红色液称取60克氯化钴，加大约900ml盐酸溶液（25ml浓盐酸和975ml水混和）溶解，继续添加，并定容1000.0ml。

滴定并以上述盐酸溶液调整，使红色液每毫升含59.5mg CoCl
2﹒6H
2
O。

滴定在一个配有磨口塞的250ml锥形瓶内，加入5.0ml红色液，5ml稀过氧化氢溶液和10ml 300g/l的氢氧化钠溶液，缓慢煮沸10分钟，冷却后，加60ml稀硫酸和2g碘化钾，塞上瓶塞，缓慢摇动锥形瓶，使沉淀溶解完全。

用0.1M的硫代硫酸钠标准溶液滴定游离的碘，在滴定接近终点时加入0.5ml淀粉试液作为指示剂。

溶液变成粉红色时到达滴定终点。

1ml0.1M的硫代硫酸钠标准溶液相当于23.79mg CoCl
2﹒6H
2
O。

蓝色液称取63克硫酸铜加大约900ml盐酸溶液（25ml浓盐酸和975ml水混和）溶解，继续添加，并定容1000.0ml。

滴定并以上述盐酸溶液调整，使蓝色液每毫升含62.4mg CuSO
4﹒5H
2
O。

滴定在一个配有磨口塞的250ml锥形瓶内，加入10.0ml蓝色液，50ml水，12ml 稀醋酸和3g碘化钾。

用0.1M的硫代硫酸钠标准溶液滴定游离碘，在滴定接近终点时加入0.5ml淀粉试液作为指示剂。

当溶液变为轻微的淡褐色时到达滴定终点。

1ml0.1M的硫代硫酸钠标准溶液相当于24.97mg CuSO
4﹒5H
2
O。

颜色标准溶液
用3种贮备液制备5种颜色标准液。

如表2-1。

方法I和方法Ⅱ的标准比色液
用5种颜色标准溶液，制备以下各种颜色的标准比色液。

储存
对于方法I，标准比色液在外径为12mm的无色透明中性封口的玻璃管中储存，避光。

对于方法Ⅱ，使用前直接从颜色标准液制备标准比色液。

仪器和试剂：
附录3 旋光度
旋光是手性物质的特性，即能使偏振光的平面旋转。

右旋物质的旋光度为正的（+），即右旋物质可以使偏振光平面顺时针方向旋转；左旋物质的旋光度为负的（-）。

精确的旋光度是指,在温度t下，波长为λ的光透过长1m或含1kg/m3旋光活性物质的液体，所发生的旋转，用弧度(rad)表示。

实际操作中，旋光度常用mrad ﹒m2﹒kg-1表示。

本药典采用以下常规定义
纯液体旋光度：旋光度以角度(°)表示，即20℃下，1dm长测定管的纯液体使钠光谱D线（λ＝589.3nm）的偏振光平面所旋转的角度；对于溶液，按专论规定方法制备。

液体旋光度：测定即20℃下，1dm长的测定管的含待测液体的溶液使钠光谱D线（λ＝589.3nm）的偏振光平面所旋转的角度(°)，即溶液旋光度。

溶液中液体旋光度，由溶液旋光度除以溶液中被检测液体的密度（g/cm3）计算得出。

固体物质的旋光度：测定20℃下，1dm长测定管的含被测物质1g/ml的溶液使钠光谱D线（λ＝589.3nm）的偏振光平面所旋转的角度，即溶液旋光度。

溶液中固体物质的旋光度由溶液的旋光度计算得出。

溶液中某物质的旋光度与溶剂和浓度有关。

按本药典采用的惯例，旋光度不标注单位；它的实际单位为
(°)﹒ml﹒dm-1﹒g-1。

本药典的旋光度同国际标准单位旋光度的换算关系如下：
如果专论有特别要求，按要求选择温度（可能不是20℃）和波长。

旋光计的读数必须精确到0.01°。

测量范围通常由鉴定用石英片检查；测量范围内线性由蔗糖溶液检查。

方法
20±0.5℃下，旋光计调零，用钠光谱的D线（λ＝589.3nm）测定，或者按专论要求的温度测定旋光度。

测定液体的旋光度，测定前放入封闭的空测定管，调零；测定固体的旋光度，测定前放入盛有所用溶剂测定管，调零。

按下式计算旋光度：
纯液体旋光度：
溶液中物质的旋光度：c为浓度，单位g/l。

按下式计算以g/l为单位的溶解物质的浓度c，或以m/m百分比为单位的浓度c′：= 20 ± 0.5°C下，旋光度读数，单位度（°）
l = 测定管长度，单位dm。

20 = 20 °C 下溶液密度，单位g/cm3,本药典在2.2.5节中以相对密度代替密度。

c = 溶解物质的浓度，单位g/l。

c′?= 溶解物质的浓度，单位g/l。

附录4 铵盐检查法
除非另有规定，通常用方法A。

方法A
供试溶液：在比色管中用14ml水溶解规定质量的供试品，必要时加入稀释的氢氧化钠溶液使溶解，用水稀释至15ml。

再加0.3ml碱性碘化汞钾试液。

)，加5ml水和0.3ml碱性碘化汞钾试液。

标准溶液：取10ml的标准铵溶液(1ppmNH
4
两溶液摇匀后分别用塞子塞住比色管。

5分钟后，供试溶液中的黄色不得比标准溶液中的颜色更深。

方法B
在25ml有盖子2的广口瓶中，加入规定数量的供试品细粉，使其溶解或悬浮在1ml 的水中，加0.30g重氧化镁。

取一片5mm的正方形银锰纸，滴几滴水使其湿润，铺在瓶口，然后立即盖上聚乙烯瓶盖。

漩涡混和，防止液体溅出，在40℃下放置30分钟。

如银锰纸显示灰色，其颜色不得比，规定量的标准铵溶液（1ppmNH4），加1ml的水，0.3克氧化镁制成的标准溶液的银锰纸的颜色更深。

附录5 氯化物检查法
供试溶液：15ml待测溶液，加1ml稀硝酸于测试管中，混合，然后将混合溶液倒入装有1ml硝酸银溶液的比色管中。

标准溶液：10ml的氯化物标准液（5ppm Cl），加5ml水，加1ml稀硝酸，混合，然后将混合溶液倒入装有1ml硝酸银溶液的比色管中。

黑色背景下对比两份溶液的颜色。

避光放置5分钟后，供试溶液中的乳白色不得比标准溶液更深。

附录6 硫酸盐灰分
将坩埚（由铂、瓷或石英制成）在600±50℃灼烧30分钟，取出放入已放置硅胶的干燥器内，冷却后称重。

将规定量的供试品置于上述坩埚内，称重。

加少量硫酸（通常1ml）湿润供试品，按要求温度缓慢加热，直至供试品完全炭化。

冷却后，加少量硫酸润湿残渣，继续加热到没有白烟冒出。

再在600±50℃灼烧至完全灰化。

操作过程中应避免燃着。

取出坩埚置于已放置硅胶的干燥器内冷却，冷却后称重，计算残渣的重量。

如果残渣超过规定，除有其他规定，重复以上操作，直至恒重。

附录7 铁
供试溶液:将规定数量的供试品溶于水中，并用水稀释至10ml,或者直接用10ml规定溶液。

加2ml 200g/l的柠檬酸溶液和0.1ml的硫醇基乙酸（硫乙醇酸），混合，加氨水使偏碱性，再用水稀释至20ml。

供试溶液：10ml的标准铁溶液（1ppm Fe）按供试溶液的方法制备成20ml标准溶液，
5分钟后，供试溶液中的粉红色不得比标准溶液深。

附录8 重金属
方法A
供试溶液：12ml待测水溶液，2ml pH为3.5的缓冲溶液，混合后加1.2ml的硫代乙酰胺试液，立即混合。

对照溶液：10ml的标准铅溶液（1ppm or 2ppm Pb）， 2ml pH为3.5的缓冲溶液， 2ml 的待测液，混合后加1.2ml的硫代乙酰胺试液，立即混合。

空白溶液：10ml的水，2ml pH为3.5的缓冲溶液，2ml的测试溶液。

混合后加1.2ml的硫代乙酰胺试液，立即混合，同空白溶液比较，对照溶液显浅棕色。

2分钟后，供试的溶液颜色不得比对照溶液深。

方法B
用含最少量水的溶剂（例如含15％水的二氧杂环乙烷或含15％水的丙酮）溶解规定量的供试品，制成待测液
供试溶液：12ml待测液， 2ml pH为3.5的缓冲溶液，混合后加1.2ml的硫代乙酰胺试液，立即混合。

对照溶液：10ml的标准铅溶液（1ppm or 2ppm Pb）， 2ml pH为3.5的缓冲溶液， 2ml 的待测液，混合后加1.2ml的硫代乙酰胺试液，立即混合。

空白溶液：10ml的水，2ml pH为3.5的缓冲溶液，2ml的测试溶液。

混合后加1.2ml 的硫代乙酰胺试液，立即混合，同空白溶液比较，对照溶液显浅棕色。

2分钟后，供试溶液的颜色不得比对照溶液深。

方法C
供试溶液：规定量（不超过2g）的待检测物质置于坩埚内，加4ml的250g/l的硫酸镁溶液（稀硫酸溶解硫酸镁），玻璃棒搅拌混和，小心加热。

如果混合物还是液体，则在水浴中蒸发使其干燥。

连续加热灼烧，灼烧温度不超过800℃，直到获得白色或灰白色的残渣。

取出，冷却后以稀硫酸润湿残渣，加热蒸发后继续灼烧，灼烧的总时间不能超过2小时。

取出，冷却。

如法制取2份残渣，分别加入5ml稀盐酸，0.1ml的酚酞试液，然后滴加氨水，直到粉红色出现。

冷却，滴加冰醋酸至颜色消失，颜色消失后再多加0.5ml 冰醋酸。

必要时过滤，并洗涤残渣。

加水稀释至20ml，制成待测液。

取12ml该待测液，加2ml pH3.5的缓冲溶液，混和，加1.2ml硫代乙酰胺试液，立即混合，制成供试溶液。

对照溶液：4ml 250g/l的硫酸镁溶液（稀硫酸溶解硫酸镁），规定量的标准铅溶液（10ppmPb）。

按供试溶液的制备方法，加热灼烧，加盐酸，加酚酞试液，加氨水及冰醋酸等，并用水稀释至20ml。

取10ml的该溶液，加2ml待测液，2ml pH3.5的缓冲溶液，混合。

加1.2ml的硫代乙酰胺试液，立即混合。

空白溶液：10ml的水，加2ml待测液，2ml pH3.5的缓冲溶液，混合。

加1.2ml硫代乙酰胺试液，立即混合。

同空白溶液比较，对照溶液显浅棕色。

2分钟后，供试溶液的颜色不得比对照溶液深。

方法D
供试溶液：在坩埚内，充分的混合规定量的待检测物质和0.5克的氧化镁R1，灼烧退去红色，直至出现白色和灰白色的物质。

如果灼烧30分钟后仍有颜色，取出冷却，用玻璃棒混和，继续加热。

如有必要，重复此项操作。

在800℃加热约1小时。

分别制备两份残渣，各加5mL溶液（等体积的盐酸R1和水混和），加0.1ml酚酞试液，滴加氨水直至有粉红色出现。

冷却，加冰醋酸直到溶液褪去颜色，再多加0.5ml冰醋酸。

如有必要，过滤并洗涤残渣。

加水稀释至20ml，制成待测液。

取12ml待测液，加2ml pH3.5的缓冲溶液，混允，加1.2ml硫代乙酰胺试液，立即混合。

对照溶液：0.5克的氧化镁R1，加上规定量的标准铅溶液（10ppmPb），在100～105℃烘箱内干燥，然后按供试溶液的制备方法灼烧，加盐酸，加酚酞试液，加氨水及冰醋酸等。

并加水稀释至20ml。

取10ml的该溶液，加2ml待测液，2ml pH3.5的缓冲溶液，混合。

加1.2ml的硫代乙酰胺试液，立即混合。

空白溶液：10ml的水，加2ml待测液，2ml pH3.5的缓冲溶液，混合。

加1.2ml的硫代乙酰胺试液，立即混合。

同空白溶液比较，对照溶液显浅棕色。

2分钟后，供试溶液的颜色不得比对照溶液深。

方法E
溶解规定量的待测物质于30ml水中，按下图准备过滤装置，调整注射器容量为50ml，在盘子上放置一个孔径为3μm过滤薄膜，过滤器上有一个前置过滤器（图8-1）。

图8-1重金属检查装置（标出尺寸的单位为mm）
取出活塞，将供试溶液注入注射器，均匀用力压活塞，使供试溶液全部通过滤膜，移开活塞前置的过滤装置，观察薄膜是否被杂质污染，如有杂质，重复以上操作。

在预过滤的溶液中加入pH3.5的缓冲剂2ml ，加上1.2ml 的硫代乙酰胺溶液，混和后静止10分钟 ，再按照上面的方法进行过滤，过滤液先经过滤膜再经过预滤装置。

均匀压滤，取出用滤纸干燥。

用同样的方法取规定量的标准铅溶液（1ppmPb ），制备一个标准铅斑。

供试溶液的铅斑颜色不得比标准铅斑深。

附录9 干燥失重
干燥失重是重量的减少，用m/m 的百分比来表示。

方法：将规定重量的供试品放在预先干燥的称量瓶中，按照下列要求进行干燥，干燥供试品至恒重，或者按照下列操作之一，干燥规定的时间。

a ） 在干燥器中：在常温，常压下，以无氧化二磷干燥。

b ） 真空干燥：室温下，在压力为1.5～2.5 kPa ，放置无氧化二磷的真空干燥箱内干
燥。

c ） 要求温度范围内真空干燥：在专论规定温度范围内，在压力为1.5～2.5 kPa ，放
置无氧化二磷的真空干燥箱内干燥。

d ） 在要求温度范围内的干燥箱内干燥：在专论规定的温度范围内干燥。

e ） 高真空干燥：在专论规定的温度范围内，压力不超过0.1 kPa ，放置无氧化二磷的
真空干燥箱内干燥。

如果有其他要求的条件，根据专论中的具体规定操作。

干燥失重可按如下公式计算：
干燥失重（%）=a
b c b --×100 a: 称量瓶重量（g ）
b: 干燥前称量瓶与样品的共同重量（g ）
c: 干燥后称量瓶与样品的共同重量（g ）
附录10 硫酸盐检查法
本项检查的所有溶液都要用蒸馏水配制。

供试溶液：取1.5ml 的标准硫酸盐溶液（10ppmSO 4）R1，加1ml 250g/l 氯化钡溶液，
摇匀，放置1分钟。

加15ml 待测液和0.5ml 的醋酸。

标准溶液：用供试溶液的制备方法，以15ml 的标准硫酸盐溶液（10ppmSO 4）代替待
测液。

5分钟后，供试溶液中的乳白色不得比标准溶液深。

附录11 红外吸收分光光度法
红外光谱频率在4000～670 cm-1之间（2.5～15.4μm），有时也低至200cm-1(50μm) 。

傅立叶变换红外分光光度计使用复色光源，利用傅立叶变换计算出随入射光频率变化的原始光谱。

也可以使用其他检测领域中配有单色光源系统的红外分光光度计。

通常由对比透射光和入射光的强度来获得光谱。

吸光率（A）值为透光率（T）的倒数取log10对数的值。

T =
I
=入射光强度
I =透射光强度
制备样品
记录吸光率或透光率
用下列方法制备样品。

液体：制成两盐片间的液膜或由透明的液体池盛装的样品，也可以直接用红外光照射待测液体。

悬浊液或乳浊液
用适合的溶剂溶解样品。

选择合适的浓度和液体池光程以便得到满意的光谱。

通常，液体浓度为10～100g/l，液体池光程为0.1～0.5mm。

在参比光路中放入与溶液相同的溶剂池以补偿溶液中溶剂的吸收。

固体
使待检物质分散在适合的溶液中（研磨），或者分散在固体中（卤化物压片）；根据专论要求，将熔融的待检物质滴在两盐片之间制成薄膜，然后测定光谱。

A研磨法
用少量样品粉末加少量石蜡或者其他适合的液体研磨；通常用5～10mg样品加1滴石蜡研磨，磨好后压入两盐片之间测定光谱。

B压片法
除非另有规定，1～2mg待检测物质加300～400mg干燥的溴化钾或氯化钾细粉，共同磨碎。

通常该量的样品足够成压成一个直径为13 mm压片，并得到合适的光谱强度。

仔
)压力下压片。

导致坏片的原因很细磨碎混合物，均匀的铺在模子里,在800MPa(8 t·cm
?2
多，如过多或太少的研磨，吸潮，分散媒介物中有其他杂质，没有进行充分研磨和颗粒的尺寸不够小等。

除非另有规定，不好的压片要弃用：用肉眼观察，压片的透明度不均匀；或没有补偿的情况下，在2000cm-1 (5 μm)左右缺少特殊吸收带，透光率低于75%。

气体
气体样品在光程100mm的气体池中测试，通过适合的活塞或针形阀门（连接在盛有被检测气体的容器和吸收池之间），抽空吸收池中的气体，注入规定压力的被检测气体。

必要时，加入惰性非红外活性气体（例如，氮气或氩气），调节气体池压力为大气压，再进
行红外检测。

检测过程中，要注意避免水，二氧化碳或空气中其他气体的吸收干扰，如果条件允许，在参比光路中放入与样品相同的抽空或充有非红外活性气体吸收池，进行红外检测。

记录漫反射系数
当专论有该项要求时，按下列方法制备样品。

液体
根据专论要求，用适合的溶剂溶解供试品，涂在溴化铊-碘化铊板或适当的检测板上蒸干溶剂。

固体
将供试品放在溴化铊-碘化铊板或适合的检测板上，应使供试品与板均匀接触。

记录衰减全反射
使供试品与衰减全反射比棱镜紧密接触。

利用参照物质鉴别
待检测物质和参照物质以同样的方法制样，相同操作条件下检测4000～670cm-1的（2.5～15 μm）范围内红外光谱。

将检测物质光谱的最小透光值（最大吸收值）所处的位置和尺寸与参照物质（CRS）的光谱进行比较。

当固体样品光谱的最小透光值（最大吸收值）所处的位置与参照物质光谱不同时，用同种方法处理样品和参照物质，使它们能够形成同样的结晶或形态，或按照专论规定的方法进行操作，然后记录光谱。

利用标准光谱鉴别
分辨性能的控制
对于色散形光谱仪，记录约0.04μm2870 cm-1(3.48 μm)处的最大透光率百分比A 与2849.5cm-1(3.51um)处的最小透光率百分比B之间的差值x必须大于18；在1589cm-1(6.29um)处的最大透光率百分比C与1583 cm-1（6.32um）处的最小透光率百分比D之间的差值y，必须大于12。

图12-1 聚苯乙烯红外光谱图
较验波数范围
以聚苯乙烯膜校验波数范围，其最小透光率（最大吸光率）的波数见表12-1。

方法根据参照光谱/参照物质的要求制备样品。

按照参照光谱的操作条件（通常为校验分辨率的操作条件）操作，检测并记录样品光谱图。

样品光谱的吸收带位置和尺寸应和参照光谱一致。

气体中的杂质
分析气体中的杂质，选择适合光程（例如1～20cm）的气体池，按气体项下的规定充满待测气体，进行红外检测。

根据专论中规定的方法进行杂质检测与定量。

附录12 pH测定
pH常代表水溶液中氢离子的浓度。

在实际的应用中，它是一个实验数值。

供试溶液
的pH与标准溶液（pH
S ）的关系用下式表示。

E为供试液池的电位，单位为伏特，E
S
是已
知pH（pHs）溶液池电位，单位为伏特。

k为单位pH变化引起的电位变化，单位为伏特，
pH电位由测定浸入待测溶液中的两个个电极的电位差测得：一个是对氢离子灵敏的电极(通常是玻璃电极)，另一个为参比电极（例如，甘汞电极）。

仪器测量仪器是一个输入电阻值至少为电极100倍的伏特计。

通常为pH单位，其灵敏度至少为0.05 pH单位或者0.003V电压。

方法除非本文另有规定，所有的测量都在同一的温度范围内（20～25℃pH。

如需温度校准，参照厂商的仪器使用说明。

用邻苯二甲酸氢钾缓冲溶液（储备标准液）和另
一种不同pHpH值，其误差不得大于0.05pH单位。

将电极浸入到被测溶液里，在与缓冲溶液相同的条件下读取数据。

当仪器频繁使用时，应定期校准。

如果使用不频繁，则应每次测量前校准。

所有供试溶液和标准缓冲溶液必须用无二氧化碳水配制。

制备标准缓冲溶液
0.05M草酸钾：称取12.61gC
4H
3
KO
8
,2H
2
O用无二氧化碳水溶解,并稀释至1000.0ml。

25℃饱和酒石酸氢钾：在25℃用无二氧化碳水溶解过量的C
4H
5
KO
6
,用力振摇。

过滤
或倾倒出清夜。

在使用前制备。

0.05M的柠檬酸二氢钾：称取11.41g C
6H
7
KO
7
,用无二氧化碳水溶解并稀释到
1000.0ml. 在使用前制备。

0.05M的邻苯二甲酸氢钾：称取10.13g在110～135℃烘干1 h的C
8H
5
KO
4
，用无二
氧化碳水溶解，并稀释至1000.0ml。

0.025M磷酸二氢钾+0.025M的磷酸氢二钠：称取3.39gKH
2PO
4
和3.53g Na
2
HPO
4
, 均在110～130℃下干燥2小时，用无二氧化
碳水溶解，并稀释到1000.0ml。

0.0087M磷酸二氢钾+0.0303M磷酸氢二钠：称取1.18g KH
2PO
4
和4.30g Na
2
HPO
4
, 均在在110～130℃下干燥2小时，用无二氧
化碳水溶解，并稀释到1000.0ml。

0.01M的硼酸钠：称取3.80g Na
2B
4
O
7
,10H
2
O，用无二氧化碳水溶解，并稀释到1000.0ml。

密封保存，避免同空气中二氧化碳
接触。

0.025M碳酸钠+0.025M碳酸氢钠溶液：称取2.64g Na
2CO
3
和2.09g NaHCO
3
，用无二氧化碳水溶解、稀释至1000.0ml。

附录13 滴定
A 法 电位滴定
在电位滴定中，随滴定液的不断增加，浸入待测液的两个电极的电压不断变化，从而决定了滴定终点。

这两个电极可以都为指示电极或一个指示电极，一个参比电极。

电位通常是在零或者电流接近零时测量。

仪器： 仪器（一个简单的电位计或者电子设备）包括可以读出最接近微伏的伏特计。

指示电极的选择由被测物质决定，可能是玻璃或者是金属电极（例如，铂、金、银、汞）。

参比电极是通常为玻璃-甘汞电极或者银-氯化银电极。

除非另有规定，酸基物质的滴定，通常使用玻璃-甘汞电极或者玻璃-银-氯化银组合电极。

方法： 绘出连续添加滴定液的电位变化曲线，在滴定超过预期等当点时，滴定终点电位出现明显变化。

B 法 直接滴定 (一)、高氯酸直接滴定
高氯酸直接滴定检验说明了通过非水滴定来测量供试品的含量。

除有特殊规定外，精密称取各药品项下规定的干燥供试品（与干燥失重同条件干燥）置于锥形瓶中。

加入规定量的水和/或甲酸，将样品溶解，再加入规定量的冰醋酸。

向溶液中加入0.5ml 结晶紫或α奈酚苯甲醇指示剂。

用0.1N 的高氯酸滴定至终点，若采用结晶紫指示剂溶液由紫色经蓝色变为蓝绿色，若用α奈酚苯甲醇指示剂，溶液由棕变绿。

通过减去空白试验所用的量来计算供试品消耗的高氯酸的量。

滴定液的配制及注意事项 （1）0.1M 高氯酸
制备： 在温度低于20℃条件下，取非水滴定用冰醋酸1000ml ，缓缓加入高氯酸8.7ml 后，静置一小时。

取本溶液3.0ml 快速测定含水量，将含水量用A （w/v%）表示。

向混合溶液中缓缓加入[]2.25)03.0(⨯-A ml 醋酐，边加边振荡。

将此溶液静置24小时后，按以下方法标定。

标定： 精密称量约0.5g 邻苯二甲酸氢钾（预先在105℃下干燥4小时，在硅胶干燥器中冷却），溶解在80ml 非水滴定用冰醋酸中，加入3滴结晶紫指示剂，用如上配制的高氯酸滴定液滴定至蓝色，并将滴定结果用空白实验校正。

计算常数为：每1ml ，0.1N 高氯酸相当于20.422mg 邻苯二甲酸氢钾。

注意事项：储存于密封环境下，以防吸潮。

精密量取8.5ml高氯酸是有困难的，因为高氯酸具有粘性。

在温度17～20℃条件下，用10ml移液管取8.5ml高氯酸逐滴滴入冰醋酸中，并用冰醋酸洗涤移液管。

加入醋酐使高氯酸中的水反应生成醋酸。

将溶液在密封条件下静置2天，使溶液中的水充分反应后，再进行标定。

若存放时间超过几个月，应重新标定。

因冰醋酸体积随温度而变化，故标定温度应在17～20℃（±3℃）。

（2）冰醋酸
应使用优质冰醋酸。

在空白滴定时消耗的高氯酸比平时多的情况下，应重新检查各试剂及溶液的质量。

在本论中指出：如：含量%（干基）：高于98.5%（干燥供试品0.2g，0.1M 高氯酸溶液1ml相当于8.909mg丙氨酸），是说：与干燥失重同条件下干燥的样品，其氨基酸含量高于98.5%。

实验条件为，取精密称定约0.2g的干燥供试品（在干燥失重条件下干燥），将其溶解在一定量的甲酸中，并加冰醋酸，依以上方法测定，并以：0.1M高氯酸溶液1ml相当于8.909mg丙氨酸为条件，计算供试样品含量。

(二)、氢氧化钠或盐酸直接滴定
精密称取各药品项下规定的干燥供试品（与干燥失重同条件干燥）置于锥形瓶中。

加100ml水，加热使其溶解。

冷却至室温，加入规定量指示剂，用0.1M的氢氧化钠或0.1M盐酸溶液滴定至终点。

须进行空白试验以校正。

附录14 氯化物鉴别反应
a）
相当于2 mg氯化物(Cl)的供试品溶于2ml水，或取2ml规定溶液，以稀硝酸酸化，加0.4ml硝酸银溶液R1.摇匀后放置。

出现白色絮状沉淀物。

离心，每次以1ml 水洗涤沉淀，洗涤3次。

在光线较弱处，迅速进行此操作，尽管在离心、洗涤过程中上清夜可能不清澈。

使沉淀悬浮在2ml水中，加1.5ml稀氨水，沉淀应很快溶解，较大颗粒沉淀可能溶解稍慢。

b）
取相当于15mg氯化物(Cl) 或规定量的供试品，置于试管内，加0.2g重铬酸钾，1ml硫酸。

将1ml二苯基卡巴肼浸湿的滤纸条，盖在试管口。

滤纸条变为紫红色。

浸湿的滤纸条不得接触重铬酸钾。

附录15 指示剂颜色与溶液pH 的关系
除非另有规定，取10ml供试溶液，按表16-1加0.1ml指示剂。