光合仪模式使用说明

LI-6400便携式光合仪的使用说明

1. 仪器使用功能

LI-6400并非单一用于研究植物光合作用，他同时包括光合、呼吸（分为植物呼吸和土壤呼吸）、蒸腾、荧光等多项测量功能，多项功能的完全集成使得LI-6400成为生态学研究领域上重要的必不可少的基础研究设备。其测量参数包括：净光合速率（Pn）、气孔导度（Gs）、蒸腾速率（Ts）、细胞间隙CO2浓度（Ci）、大气CO2浓度（Ca）、光量子通量密度（PFD）、叶温（TL）、相对空气湿度（RH）。如果配备6400-40叶绿素荧光叶室，可测试以下参数：最大荧光（Fm）、初始荧光（Fo）、可变荧光（Fv）、光化学猝灭（qP）、非化学猝灭（qN）。此外，进行自动测量的基础上还可以进一步计算饱和点、补偿点等多项重要生理生态指标。

表1 LI-6400参数表

（主机显示屏测量菜单显示的参数说明，A-L是行号）

3. 仪器使用流程

3.1仪器安装连接，并连接好进气管缓冲瓶。

3.2打开位于主机右侧的电源开关。

3.3仪器在启动后将显示

“Is the IRGA connected?(Y/N)”选择Y

3.4叶室配置选择：

选择目前安装的叶室配置，如已经安装了标准叶室，请选择Factory default，然后回车。

如果安装了荧光叶室，请选择6400-40 Default Flurometer，然后回车。

如果安装了土壤叶室，请选择6400-09 soil Chamber，然后回车。

其他叶室方法相同，只需要选择不同的叶室就可以了。

3.5调零

向SCRUB方向拧紧碱石灰管和干燥管上端的螺母。关闭叶室，即压下黑色手柄，并旋紧固定螺丝即可。

在主菜单按F3按钮选“Calib Menu”项

①选“Flow Meter Zero”项（调气流量为零），回车

等待流速的电压读数基本稳定，用F1、F2上下调节，至读数基本稳定，且在-0.5—0.5范围内，按EXIT按钮退出。

②选“IRGA Zero”（红外线气体分析仪探头调零），回车

等待CO2浓度和H2O浓度的下降，至读数基本稳定（一般在20分钟左右），按F3“Auto All ”进行自动调节，结束后“Exit ”退出。

③选“View Store Zeros Spans”，回车后按F1“Store”来保存，按“Y”来确定后按F5“Exit ”退出。按“escape”，回到主菜单。

3.6手动测量

按F4“New Measurements”菜单进入测量菜单。

设定文件：按F1“Open Logfile”建立新文件。回车后输入自己设定的文件名。当显示屏出现提示“Enter Remark”时，输入需要的标记（英文，用于标记样地、植物种类、样品号等）。继续回车，文件设置结束。在夹入叶片之前如果光合值大于0.5或小于-0.5，那么应该按F5“Match”进行匹配。

测量：选取需要测量的植物叶片（3-5次重复）。测量时间请尽量选择晴朗的天气条件，上午10：00-11：30左右最好，如果您的植物叶片是处于温室内、室内或生长箱内，由于其叶片气孔没有完全开放，需要先用饱和光强来进行气孔诱导，方法可以是采用大瓦数的灯泡来照射（大致需要20分钟的时间），或者在室外

有光条件下活化（会小于20分钟），也可采用6400-02B或6400-40荧光叶室来进行气孔的诱导开放（这种方法有其缺点，因为我们往往需要很多次重复和样地，这样会多花很多时间。）。

向Bypass方向拧紧碱石灰管和干燥管上端的螺母。夹上叶片（尽量让叶片充满整个叶室空间，此时测量的植物叶片面积为6cm2，如果无法充满，需要用叶面积仪来确定叶面积，并在测量菜单状态下按数字“3”并按F1来修改叶片面积），关闭叶室（即压下黑色手柄），并旋紧固定螺丝即可（切记不要过紧）。

等待C行PHOTO读数稳定后即可记录（大约在30秒-1分钟左右，判断标准是小数点后最后一位数字的波动在0.2左右，注意，如果是室内测量，波动会大一些）。记录方法是按F1“LOG”按钮或者按分析仪手柄上的黑色按钮2秒即可记录一组数据。

换叶片进行下一次测量。重复。

3.7自动测量与环境条件控制

LI-6400可以控制的环境条件包括温度、CO2浓度、光强等。一般而言，需要控制环境条件的实验有两种情况。一种是环境变化剧烈，无法准确进行同等环境条件的测量。另一种情况是进行光曲线和ACI曲线测量。

第一、简单环境控制。只需要在手动测量时，按数字来切换菜单。具体各菜单情况如下图所示。

图2 测量菜单下功能键分布图

温度控制：按数字2，按F4菜单控制温度（输入需要的温度回车即可，注意温度控制范围是环境温度的上下6度）。

光强控制：本功能在标准叶室配置下无法完成，此时需要连接6400-02B红蓝光源。并重新启动机器选择6400-02B CHAMBER配置。启动后其他同标准叶室。在测量菜单下按数字“2”，按F5按钮选择“Quantum Flux”回车，输入您需要的光强值即可。

CO2控制：需要连接上CO2注入系统，并在主菜单下选择F3“Calib”按钮进入校准菜单。此时应该把叶室关闭拧紧，把CO2过滤管的螺丝拧到“SCRUB”状态。利用上下箭头选择“CO2 Mixer Calibrate”，回车后，等待系统自动进行校准后，回到测量菜单，按数字2，按F3设置REF CO2浓度即

可进行测量。测定完成后，关闭气流、温度、光强控制，退到主菜单。

第二、自动测量。

光曲线：夹上叶片气孔开放后的叶片，建立新文件后，匹配。测量菜单下按数字5，按F1，选择LIGHT CURVE，回车，并输入光强梯度（例如2000 1500 1200 1000 800 600 400 200 100 50 20 0）。进一步输入最小等待时间（例如120秒）和最大等待时间（240秒）。输入匹配值（例如20PPM），回车，

机器即进入自动测量，测量后关闭文件。退出。（注意此测量要求CO2浓度变化不大，否则应该控制其浓度）。

ACI曲线：同于光曲线，不同点是选择“ACI CURVE”，设置浓度梯度举例（380 300 200 100 50 380 380 400 600 800）。其他相同。

3.8.数据输出

将计算机与仪器连接，把仪器状态调整（主菜单下按F5“UTILITY”进入应用菜单，选择“FILE EXCHANGE”，回车即可。）

取出随机带的软件光盘，在计算机上安装WINFX软件。安装完毕后启动此软件。并选择CONNECT。后把LI-6400内的“USER”文件夹下的数据文件拖到计算机中的某个文件夹下即可。使用此文件时只需要打开EXCEL软件，文件扩展名选择所有文件，选择分隔符为逗号，并打开文件，即可使用数据。

3.9关闭仪器

按“ESCAPE”按钮退回到主菜单下，叶室留一点缝隙，关闭主机。取出电池充电（注：如使用中电不足，仪器会出现声音提示和文字提示，需更换电池。更换电池时，应先将一只电池换好，然后再换另一只电池。）

注意事项

1. 一旦部分干燥剂颜色发红需要立即更换；

3. 阳光下需将荧光屏遮盖，否则会影响其寿命；

4. 注意仪器保养，轻拿轻放，信号线尽量保持伸展，勿扭曲，否则易使接口不牢，线头从接口处滑出；

5. 测量时显示“IRGA not ready”，此时需检查探头各处是否接牢；