血液及骨髓液标本细菌学检验

血液及骨髓液标本细菌学检验标准操作程序

1.检验目的

规范血液及骨髓标本细菌学检验，确保检验结果准确可靠。

2.适用范围

血液及骨髓液培养

3. 标本采集与运送

3.1 标本采集

3.1.1 无菌操作采集静脉血标本无需更换针头直接注入血培养瓶中。

3.1.2 釆血时间

3.1.2.1 发热初期或高峰期时抽血；

3.1.2.2 使用抗生素之前。已使用抗生素者，下一次使用之前。

3.1.3 采血频率

3.1.3.1 急性脓毒症：10min内从不同部位采集2-3套。

3.1.3.2 急性心内膜炎：1-2h内从3个不同体位采集3套。

3.1.3.2 亚急性心内膜炎：从3个分离部位采3套，间隔≥15min，如24h为阴性，要再采3套。

3.1.3.3 原因不明发热：从不同体位采2-3套，间隔≥60min，如24h为阴性，要再采3套。3. 1.4 采血量以培养基的1/10-1/5为宜,新生儿一次采血0.5m1，儿童1-5ml，成人8-10m1。

3.1.5 骨髓标本严格无菌操作，对穿刺一侧部位准备同外科切口，用骨髓穿刺针从髂骨采集。采集量一般为1-2ml。

3.2 标本运送

3.2.1 采集标本后立即送到细菌室，不能及时送检可置室温，切勿放于冰箱。

3.2.2 冬季血培养瓶送检过程应采取一定的保温措施。

3.2.3 在细菌室下班时间，标本应送急诊化验室进行标本保温。

4. 检验步骤

4.1 培养：扫描血培养瓶的条码，将血培养瓶置BACT／Alert 3D全自动血培养系统中培养。

4.2 阳性血培养瓶转种：当有菌生长时，仪器发出阳性报警，立即在生物安全柜中用无菌注射器抽取瓶内培养液直接涂片革兰染色，镜检，以电话方式告知临床医生镜检结果并登记危急值登记本。同时转种血平板。

4.3 培养：血平板置于35℃培养箱培养18一48h。

4.4 培养结果观察：正常人的血液是无菌的，有菌落形成即为可疑致病菌，从琼脂平板上挑取可疑致病菌落进行涂片染色镜检。除极少引起感染的微球菌和需氧芽孢杆菌外，均需要进行细菌鉴定和药敏。

5. 临床意义

血液标本的培养是诊断菌血症的基本而重要的方法，若从患者血液中检出细菌，一般视为病原菌感染，提示有菌血症。