常见临床标本的细菌学检验ppt课件

4、痰
BA
菌落分类、编号、染色
TB培养 罗氏斜面（先消化处理） 4%NaOH 6%H2SO4
BA（直径=9.0cm，接种量0.01ml） 注：将`）
沉渣
革兰氏染色
无菌落
报告：无菌生长
BA 有菌落
染色镜检 菌落计数
报告：检出***菌 **个/ml
沙门氏菌
煌绿增菌液 亚硒酸盐增液
沙—志
G.N 碱性蛋白胨水
志贺氏菌 霍乱弧菌
革兰氏染色
球菌 G+杆菌:根据菌落特征, 细菌染色性,形态排列选择恰 当生化反应,免疫学反应及动 物试验 报告
G-杆菌
KIA
菌落描述:颜色,大小,溶血性,透明度,硬度,润 湿度,表面光滑度,粘稠度,凸起度,边缘整齐度
根据KIA结果选择适当生化反应项目
2、作结核杆菌培养，留 取24h尿，将沉淀部分送检。
3、肾盂尿，应标明右、左，每侧分3 份留联（导尿管插入输尿管。）
4、通常宜取清晨第一次尿。
5、采集后应立即送检，接种，一般不 得超过1h，冰箱保存，不过6h。
四、常见临床标本鉴定程序
»
色镜检
• 1血液→酚红葡萄糖肉汤
染色镜检 变浊、色、 质→ BA→ 菌落→ 染
2、方法要恰当,标本应来自真正的感染部位，避 免其它微生物特别是正常微生物的污染。
3、所有采集的标本均应置于无菌容器中（灭菌 不能使用消毒剂）加入适当保存液 。
4、标本应尽快接种（最好是床边接种），若必 须传送时，应根据培养目的作保温、冷藏、厌 氧运送。防止污染及扩散。
5、检样不宜过少，否则易干燥死亡。
（六）胆汁：
1、行十二指肠引流水收集“胆汁 乙”10-15ml。
胆汁甲—胆总管（
）
胆汁乙—胆素（柠黄色）
胆汁丙—肝胆管（金黄色）
胆汁丁—十二指肠（ ）
（七）穿刺液：
1：原则上由临床医 生先穿刺获得。
2：采样量：胸水， 腹水：5-10ml
3：如需抗凝： 3.8%枸橼酸钠。1：10
（八）尿液：
1、一般用导尿.5-10ml， 也可用中段尿.（应消注明），留中段尿 应冲洗尿道口/外阴部（1：1000高锰酸 钾，2%红汞.1：1000新洁尔灭，先消 毒液冲洗，再无菌纱布或干棉球拭干）。
<1万/ml（或2种以上菌）污染，1-10万/ml可疑
>10万/ml感染
无可疑菌落 报告：无致
SS、MaC（强弱各1个） 病菌生长
6、粪便 （含肛拭子）
可疑菌落 （透明/半、 无酸色）
增菌（一般不进行）
T.T增菌液（四硫磺酸盐肉汤） M.M增菌液(MgCL2孔雀绿肉汤) S.F增菌液（亚硫酸盐肉汤）
奥梅梁斯基法则： *10L
100cm2 5’→10L A A·t t →
100*50
N XX个/M3= A·t →39.32N 100*5
*10
50000N *1000=
A·t（49.0； 20’）
结果报告应注明 “普通琼脂平板培
养”/“血琼
肠杆菌科各属KIA结果
斜面 底层 产气 力
埃希氏菌属 /-
A/K A
+/-
志贺氏菌属
K
A
-
沙门氏菌属
K
A
+/-
枸橼酸盐菌属
d
A
+
克雷伯氏菌属
A
A
+
肠杆菌属 +
A
A
+
欧文氏菌属 +/-
K/A A
-/+
有菌落
•
• • • • •
• 2穿刺液→
• • •
无改变→BA
报告：无菌生长
无菌落
无菌落
BA
有菌落→染色镜检
变浊、色、质→BA→菌落→染色镜检
血肉汤→ 染色
有菌落
无改变→BA→
报告：无菌生长
无菌落
BA 3，拭子（咽、脓）
菌落分类、 编号、染色 镜检
染色镜检 注：接种血平板时，拭子作原划线、接种 环划开
4 、如病人已实施治疗，应在酚红葡萄糖肉 汤中加入相应对抗剂。
磺胺类药物→对氨基苯甲酸5mg/100ml.
青霉素→2u青霉素酶/ml
其他抗生素→MgSO4 5mg/100ml
（二）粪便：
1、应尽量在用药前自然排便； 取有胧血、粘液部分2-3 g（新鲜）液壮便应 取絮壮物1-2ml于无菌广口瓶中。
2、如无法获取粪便，应用直肠拭子， 小儿入肛门2-3cm。成人入肛门45cm.取直肠粘液入无菌试管/保存液。
3、如需保送运送测量PH7.0甘油 PSB中（0.033mol/L PSB与等体 积甘油混匀。PH7.0)
( 三）、脓汁
1、创伤：先以无菌N·S 清洗创口周围，再以棉签来取脓汁/分泌 物→脓拭子置无菌试管。
2、脓肿：先消毒患部表面 皮肤，再以注射器抽吸/切开脓时接留脓 汁1-2ml置无菌试管。
3、厌氧菌：一定要由伤口 深处取样，半小时内接种完毕。
+/+ I
M
Vi
C
+七叶 +
——
— —— +
+
-/+ I MAN SUC C U
P_ A
_
_
_
I项“+”非沙门氏菌 I项“+”非志贺氏菌
+
-/- → I
葡
C
不动杆菌
绿脓杆菌
+/- → 一般不会出现，可考虑接种不当， 空
气污染
根据生化反应结果，结合相应血清学实验 报告结果
五、空气细菌计数
• 将直径9 .0cm/普通琼脂平板/血琼脂平板按五点法/三点法打开盖暴露20’， 盖好→37℃ 24h计数菌落数，称出平均每个板菌落数N
三、常见标本的采集（一般由临床 医师执行）
（一）血液： 1、一般在发热高峰期采集（发
热初期1-2天，此时阳性率较高）尽量在实施 血清疗法、化学疗法和抗生素疗法之前进行。
2、采血部位：一般为静脉（动 脉阳性率更高些）。
3、采血量：5-1ml，直接加入 酚红葡萄糖肉汤中（血/肉汤=1：10）（防止 血凝、稀释Ab等因子）如不能直接接种应置入 已灭菌适量20%枸橼酸盐瓶中。尽快送检。
（四）咽拭子：
1、由咽部扁桃体处采集 分泌物（注意部位、方式）
2、如凝为白喉患者，则 应先除去咽不表层分泌物去深层组织分泌 物，再取样。
3、凝为百日咳患者，可 采用咳碟法。
（五）痰：
1、先让病人用清水嗉口数次， 以除去口腔内大量杂菌。
2、取清晨第一口咳出的痰， （晨痰）
3、作结核杆菌培养可收集 24h痰。（冰箱保存）
常见临床标本的细菌学检验
• 一、常见临床标本 1、血液 2、尿液 3、粪便、肛拭子 4、脓汁及脓拭子 5、穿刺液（胸水、腹水、心包液、关节液、 6、痰 7、胆汁 8、咽拭子 9、空气
脑脊液、鞘膜液）
二、标本采集的一般原则
1、应在病程的一定阶段（一般为发病早期）尽 可能在施实抗生素疗法、化学方法、血清学疗 法之前采集标本。