中药抗烟曲霉菌的研究

中药抗烟曲霉菌的研究

发表时间：2014-11-24T10:20:09.233Z 来源：《世界复合医学》2014年第3期供稿作者：荀彦1 刘金辉[导读] 烟曲霉菌是导致免疫低下患者肺部感染、侵袭性肺曲霉病（IPA）等深部感染的常见真菌，特别是IPA 死亡率高达80%-90%，预后差。

荀彦1 刘金辉21.南昌大学第一临床医学院临床112 班；2.南昌大学医学院微生物学教研室南昌 330000

【摘要】烟曲霉菌是导致免疫低下患者肺部感染、侵袭性肺曲霉病（IPA）等深部感染的常见真菌。近年来随着侵入性治疗的运用、骨髓移植、广谱抗生素的滥用等情况，烟曲霉感染呈上升趋势。中药抗菌的特殊机理，不易产生耐药性，中药用于治疗烟曲霉菌感染，对于临床很有实际意义。本文总结近年资料后，对烟曲霉的致病，中药抗烟曲霉菌的效果，机制及相关影响因素进行探讨。

【关键词】中药抗菌；烟曲霉菌

【中图分类号】R435.72【文献标识码】A【文章编号】1276-7808（2014）03-040-02 烟曲霉菌是导致免疫低下患者肺部感染、侵袭性肺曲霉病（IPA）等深部感染的常见真菌，特别是IPA 死亡率高达80%-90%，预后差。

近年来，由于脏器移植患者增加，艾滋病发病率迅速增长和广谱抗生素、免疫抑制剂及激素的大量应用，IPA 的发病率有明显上升趋势[1]。

因中药抗菌的特殊机理，不易产生耐药性，中药抗曲霉菌研究引起了广泛兴趣。中药用于治疗深部真菌感染的深入探讨研究，特别是棘手的烟曲霉菌，目前还是研究较少的领域，而对临床治疗的进行很有实际意义。本文在总结近年资料后，对烟曲霉的致病，中药抗烟曲霉菌的效果，机制及影响因素进行探讨。

1 烟曲霉菌致病1.1 曲霉致病机制侵袭力是真菌致病因素的重要组成部分[2]，曲霉侵袭机体的过程多数都是机体吸入曲霉的孢子，孢子生长成菌丝进一步侵袭组织引发各种严重临床症状。

烟曲霉菌菌丝片段和孢子被吸入气道后，致少量细胞因子甚至抑制细胞因子产生，不能使足够的炎症细胞向局部趋化，逃避吞噬，长期存活、芽生、释放大量过敏原，引起哮喘发作或过敏性支气管肺曲霉病（ABPA）等[3]。

1.2 曲霉致病因子[4]1.

2.1 胞壁及外膜等相关成分曲霉的细胞壁拥有大量的多糖成分，β（1-3）葡聚糖是其胞壁中最主要的结构，组成基本骨架，它可以被宿主细胞识别，通过激活激活蛋白1（activator protein 1）激活宿主的炎症反应。

曲霉表面一层突起的疏水蛋白，利于曲霉的黏附和定植。

曲霉孢子还表达细胞色素成分，能帮助曲霉抵御紫外线，氧自由基。色素缺乏的孢子易被补体结合、吞噬细胞吞噬且对抗真菌药物敏感。

曲霉的细胞壁至少含有九种糖基磷脂酰肌醇相连的蛋白（GPI-linked protein）连接于多糖形成的骨架上，对曲霉的正常生长甚为重要。其合成相关的重要基因突变后，曲霉菌丝生成速度下降。

1.2.2 曲霉产生的毒素曲霉的基因较原核生物要复杂得多，毒素的种类也非常复杂。主要包括：①胶霉毒素（gliotoxin）；②烟曲霉素（fumagillin）；③其他毒素：烟曲霉文（fumigaclavine C）、可弥漫性物质（diffusiblesubstance）、局限曲霉素（restrictocin）、核糖毒素（ribotoxin）等。

这些毒素可以抑制DNA、蛋白质的合成或抑制免疫反应，或者破坏局部的组织，而利于曲霉的生长繁殖。

曲霉感染的过程相当复杂，单纯抑制其中某个基因的表达常难取得预期效果。基因组学，蛋白组学的研究可能会带来新的进展。

1.3 曲霉耐药性的产生有研究表明随着烟曲霉生物膜的成熟，对普通抗菌药物的敏感性进一步下降。据实验研究，与游离的孢子相比，在烟曲霉生物膜形成的过程中，药物外排泵基因和唑类靶酶基因表达量的逐渐升高可能对其抗药性增加有所影响[5]。

陈剑等的研究发现长期服用伊曲康唑的患者体内烟曲霉对伊曲康唑产生获得性耐药以及停药后回复敏感，可能系其14α脱甲基酶第220位M220I 的替换，即基因发生突变[6]。

对于侵袭性肺曲霉病，现在一般的抗菌药物如伏立康唑、伊曲康唑，也只有50%~70%的有效，多建议几种抗生素联合用药[7]。但多种常用抗生素的临床治疗效果愈发不佳，副作用大，对本就因免疫力低下而患烟曲霉病的病人更不适合。现临床上肺曲霉病大多数就是在原有肺部疾患的基础上或长期使用抗生素和激素后继发感染。故探寻并总结中药治疗方法以资解决这一问题。

2.中药汤剂的抑菌2.1 中药汤剂对烟曲霉体外抑菌实验有报道认为中药方剂四君子汤可以抑制体外培养的烟曲霉菌的生长[8]。以一定剂量的四君子汤和氟康唑处理的1000 个烟曲霉菌孢子涂布在沙氏固体培养基培养源凿，计算并比较烟曲霉菌生长形成的菌落数量、菌落大小、镜下计数孢子柄与孢子的数量。结果显示，与对照组相比，四君子汤和氟康唑可以显著降低烟曲霉菌的菌落数量和菌落大小、抑制孢子柄与孢子的的形成（P<0.05），结果呈现剂量-效应关系。提示四君子汤在治疗烟曲霉菌所致的肺部感染具有潜在的应用价值。

王刚生等应用试管药基法，测定中药提取组合物胶囊对念珠菌（白念、热带、克柔氏）、曲霉（烟曲、黄曲）的最小抑菌浓度（MIC），结果发现中药提取组合物胶囊对致病性念珠菌及曲霉体外均有很强的抗菌活性[9]。

还有研究通过微量液基稀释法分别测定中药活性成分肉桂醛和柠檬醛对常见深部条件致病菌黄曲霉、烟曲霉的抗菌活性。肉桂醛对黄曲霉、烟曲霉MIC 分别为0.01μg/ml，0.050μg/ml，柠檬醛对黄曲霉、烟曲霉的MIC 分别为：2.600μg/ml、0.650μg/ml。证明中药活性成分肉桂醛和柠檬醛具有高效抗曲霉作用[10]。

2.2 中药对烟曲霉体内抑菌试验任金贤等复制粒细胞减少期并发IPA 大鼠模型进行研究，证明黄芪多糖（APS）能够提高该模型大鼠的胸腺免疫功能，可能减轻环磷酰胺免疫抑制和曲霉感染的程度。黄芪多糖联合两性霉素B 注射组半乳甘露聚糖值也明显更低，说明其联合治疗粒细胞减少大鼠并发烟曲霉病有减轻疾病程度的作用[11]。

研究发现四君子汤对侵袭性肺曲霉病（IPA）模型小鼠的作用[12]：将小鼠随机分成8 组，建立 IPA 模型后分别给小鼠灌服高、中、低不同剂量四君子汤及酮康唑 7d，于第 8 天处死，取肺、肝、脾、肾做组织烟曲霉培养及病理切片，观察各脏器烟曲霉菌的培养情况及病理变化，同时另取小鼠做生存实验。结果显示，不同剂量四君子汤治疗组小鼠各脏器烟曲霉的菌落数均比 IPA 模型组少，烟曲霉色素明显减弱，以中剂量组最为明显；病理切片结果显示，IPA 模型组肺组织可见大量菌丝，中剂量和高剂量四君子汤组肺组织未见菌丝，低剂量组可见少量菌丝。生存实验表明，中剂量四君子汤组小鼠的生存时间及质量明显优于 IPA 模型组。结论：四君子汤可缓解 IPA 小鼠的肺组织病理损伤，明显减缓 IPA 的发展，尤以中、高剂量组明显。