间接原子吸收法测定硫酸小诺霉素

按 上述 实 验 方法 进 行 测 定 ， 以吸 光度 Ａ 对硫 酸 小诺 霉素 浓 度 Ｃ做 图 （ 见图 １ ） 。其 线 性 回归 方 程 为 ｙ一
０ ． １ ９ ７ ５ ｘ＋ ０ ． ０ ０ ０ ０ ８ ， 相 关 系数 为０ ． ９ ９ ９ ８ 。 结 果 表
３ ０ ℃温度 范 围 内 ， 吸光 度 值 随温 度增 加 而增 加 ； ３ ０
镍是 随 温度 升 高 分解 造 成 的［ ７ ］ ， 且 随 温度 升 高 ， 氨 水
∞ ０
分解挥发 得越来越 多， 对 反应不利 ， 所 以 本 文 选 择 ３ ５ ℃ 为反应 温 度 。
硫酸 小诺 霉素 浓度 Ｉ ｍ ｇ ． ｍ Ｌ ：
图 ｉ 以 硫 酸 小 诺 霉 素 为标 准 的工 作 曲 线
硫 酸 小 诺 霉 素标 准 储 备 液 （ ５ ｍｇ ／ ｍＬ） ： 用 中 国
药 品生 物 制 品 检 定 所 的标 准 品 配制 而成 ， 冰 箱 内 保
用 ＡＡＳ法 测 定 生 成 物 中 Ｎｉ 的量 ， 可 间 接 确 定
硫 酸小 诺 霉 素 的含 量 。
存， 用 时稀 释成 １ ． ０ ｍｇ ／ ｍＬ的标 准 使用 液 。氨性 镍
２ ． ３ 沉淀 剂 用 量 的影 响 本 文所 用 沉 淀剂 为 氨性 镍 试 剂 及 二 硫 化 碳 ， 实 验 中分 别 研 究其 用 量对 沉 淀 反应 的影 响 。 结 果表 明 ： 当二 硫 化 碳 小 于 ０ ． ０ ８ ｍＬ 时 ， 反 应不充分 ， 沉 淀 量 少， 吸 光 度值 较 小 ； 当 二硫 化 碳 大 于 ０ ． ０ ８ ｍＬ时 ， 反
其 线 性 回 归
０ ０ ０ ０
０ ． ９ ９ ９ ８ 。结 果 表 明 ， Ｎｉ 在 １ ～１ ２￣ ｔ ｇ ／ ｍＬ范 围 内符 合 Ｂ ｅ ｅ ｒ定 律 。按 下 式求 出硫 酸小 诺 霉 素 的含 量
质量 。
２ 结 果 与 讨 论
２ ． １ 温 度 的影 响 平 行 移取 １ ． ５ ｍＬ硫 酸 小 诺霉 素 溶 液 于多 支 １ Ｏ ｍＬ离 心 试 管 中 ， 其 余 步 骤 按 上 述 方 法 在 不 同 温 度 下反 应 后测 定 其 吸光 度 ， 结 果 如 图 ３所 示 。 表 明在 ０
学 仪 器厂 ） ； 镍 空心 阴极 灯 （ 上 海 电光 厂 ） 。
水 溶性 的二 （ 单） 烷 基二 硫 代 氨基 甲酸镍 ］ ：
２ Ｒ２ ＮＨ ＋ ＣＳ ２ ＋ Ｎｉ 一 （ Ｒ２ ＮＣＳ Ｓ） ２ Ｎｉ ＋２ Ｈ ２ ＲＮＨ２ ＋ ＣＳ ２ ＋ Ｎｉ 一 （ ＲＮＨ ＣＳ Ｓ） ２ Ｎｉ ＋２ Ｈ
图 ３ 反 应 温 度 的影 响
Ｆｉ ｇ ． ３ Ｅｆ ｆ ｅ ｃ ｔ ｏ ｆ ｒ ｅ ａ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ｒ ｅ ｍｐ ｅ ｒ ａ ｔ ｕ ｒ ｅ
２ ． ２ 反 应 时 间 的影 响 本 文 对反 应 时 间 的影 响做 了实 验 ， 结果 表 明 ， 在
３ ５ ℃水 浴 中 １ ５ ｍｉ ｎ即可 完 全反 应 ， 而在 室 温 （ １ ８ ℃） 条 件 下需 ５ ０ ｍｉ ｎ才 能 完 全 反 应 。 所 以 ， 本 文 选 择 反 应 时 间为 ２ ０ ｍｉ ｎ （ ３ ５ ℃水 浴 中 ） 。
度 法［ ６ ］ 等 方法 ， 用 原 子 吸 收法进 行 测 定未 见 报道 。
１ ． ２ 仪 器 的最 佳 测定 条 件
波长 ２ ３ ２ ． ０ ｎ ｍ； 灯 电流 ５ ｍＡ ； 光谱 通 带 １ ． ０ Ｆ ｉ ｍ； 空 气 流量 ４ ． ５ Ｌ ／ ｍｉ ｎ； 乙炔 流量 １ Ｌ ／ ｍｉ ｎ 。 １ ． ３ 方 法 原理
１ ． ４ 实验 方法 依 次 移取 一定 量 的 硫 酸 小诺 霉 素 溶 液 和 ３ ｍＬ 氨性镍溶液置于 １ ０ ｍＬ离 心 试 管 中 ， 加入 ０ ． １ ｍＬ Ｃ Ｓ ， 再加入适量水 ， 使反应体系总体积均为 ８ ｍＬ。 摇匀， 置于 ３ ５ ℃温 水 浴 中静 置 ２ Ｏ ａｉ ｒ ｎ ， 离 心 分 离 后 弃去上清液， 沉淀， 用 丙 酮一 水（ 体 积 比 １： ４ ） 溶 液 洗 涤 ３次 （ 每 次用 ４ ｍＬ） 。 然后 ， 将 沉 淀溶 于 ３ ｍＬ ＨＣ ｌ 中， 用 Ｈ Ｏ稀释至 ２ ５ ｍＬ， 摇匀， 以 同浓 度 的盐 酸溶 液 为空 白， 喷 入空 气一 乙炔 火 焰 ， 测定 其 吸 光度 。 １ ． ５ 工作 曲线 的 绘 制
Ｍ ａ＝Ｍ × １ ４ １ ７ ． ５ ／ （ ２ ． ５×５ ８ ． ６ ９ ） 。
８
６
４
２
０
式中： １ ４ １ ７ ． ５为 硫 酸 小 诺 霉 素 的 摩 尔 质 量 ； ２ ． ５为
硫 酸 小 诺 霉 素 与 Ｎｉ 的 摩 尔 比， ５ ８ ． ６ ９为 Ｎｉ 的 原 子
：
的量 ， 间接 求 出硫 酸 小诺 霉 素 的 量 。 该 方 法用 于实 际 样 品测 定 ， 获 得满 意 结果 。
１ 实 验 部 分
伯胺 、 仲胺 可 与二 硫 化碳 和 镍 离子 反 应 ， 生 成非
１ ． １ 主要 仪 器 与试 剂 ｗＦ Ｘ— Ｉ Ｆ ２型原 子 吸 收分 光 光 度计 （ 北 京 第 二 光
试剂 ： 溶解 ５ ０ ｇ乙 酸 铵 和 １ ． ２ ５ ｇ六 水 合 氯 化镍 于
７ ５ ｍＬ 蒸 馏 水 中 ， 加入 ５ Ｏ ｍＬ ５ Ｏ 氢 氧 化 钠 溶 液 和 ５ Ｏ ｍＬ 氨 水 （ 密度 为 ０ ． ９ ０ ） ， 用 蒸馏 水 稀 释 至 ２ ５ ０ ｍＬ。 １：１ 盐 酸， 二 硫 化碳 。 以上 试 剂均 为 分 析纯 ， 水 为 市售 二 次 蒸 馏水 。
硫 酸小 诺 霉 素分 子 结构 中含 有两 个 伯 胺基 与三 个 仲胺 基 ， 其 结构 式 如 下 。
本 方 法 是 基 于强 碱 性 条 件 下 ， 硫 酸小 诺 霉 素 与 二硫 化 碳 和镍 离 子反 应 生成 非 水 溶性 的二 （ 单） 烷基
二 硫 代 氨 基 甲 酸镍 ， 离 心 分 离后 通 过 测 定 沉 淀 中镍
９ ８ ． ４ ～１ Ｏ ２ ． ８ ， ＲＳ Ｄ为 １ ．３ ９ 。
关
键
词： 间接 原 子吸 收 法 ； 硫 酸 小诺 霉素 ； 强碱性 条 件
文献 标 识码 ： Ａ 文 章 编号 ： １ ０ ０ ０ — ２ ７ ４ Ｘ（ ２ ０ ０ ３ ） ０ ４ － ０ ４ ３ １ — ０ ４
～
１ ． ５ ． １ 以硫 酸 小诺 霉 素 为标 准 的 工作 曲线 分 别
移取 ０ ． ０ ５ ， ０ ． ５， １ ． ０， １ ． ５ ， ２ ． ０ ， ２ ． ５ ， ３ ． ０， ３ ． ５ ｍＬ 的
硫 酸小 诺 霉 素标 准 使 用 溶 液于 １ ０ ｍＬ离 心试 管 中 ，
Ｃ Ｓ 和 Ｎｉ 反 应 生成 非水 溶性 的二 （ 单） 烷 基二 硫 代氨 基 甲酸镍 ， 离心 分 离后 ， 通 过 测 定沉 淀 生 成 物 中 Ｎｉ 的量 ， 间接 确 定硫 酸 小诺 霉 素 的含 量 。 本 法 线性 范 围 为 ７ ￣４ ４ ０￣ ｇ ／ ｍＬ， Ｒ一０ ． ９ ９ ９ ８ ， 回收 率 为
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２ ０ ０ ３年 ８ 月
西北 大学学 报（ 自然科学版 ）
Ｊ ｏ ｕ ｒ ｎ ａ ｌ ｏ ｆ Ｎｏ ｒ ｔ ｈ ｗｅ ｓ ｔ Ｕｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙ（ Ｎａ ｔ ｕ ｒ ａ ｌ Ｓ ｃ ｉ ｅ ｎ ｃ ｅ Ｅｄ ｉ ｔ ｉ ｏ ｎ ）
中图分 类 号 ： Ｏ６ ５ ７ ． ３
硫 酸 小 诺 霉 素 为 氨 基 糖 甙 类 广 谱抗 生 素 ， 主 要 用 于革 兰 氏 阴性菌 ， 如 大 肠杆 菌 、 绿 脓杆 菌 等 感染 引 起 的败 血症 、 支气管炎、 支气 管 扩张 症 、 肺炎、 腹膜 炎 等， 对 革 兰 氏 阳性 菌 （ 如 葡 萄 球 菌 和链 球 菌 ） 所 引起 的感 染 亦 有效 ， 所 以 临床 应 用较 为 广泛 。但是 ， 大剂 量使 用 可 能 引起 听力 障 碍 、 耳鸣、 眩晕 等 听神 经 损 害 及 肾 脏损 害 ， 因此 对 其 含量 的精 确 测 定 具 有 重要 意 义。 药 品标 准 Ｌ １ ］ 规 定用 微 生 物检 定 法 ， 但 该 法 烦 琐 费 时。 据 报道 ， 对 硫 酸小 诺 霉 素 的测定 方 法 有紫 外 分光 光 度 法 ］ 、 ＨＰ Ｌ Ｃ法 ［ ４ ］ 、 薄 层 扫 描法 ［ ５ ］ 、 荧 光分 光 光
～４ ５ ℃之 间 ， 吸 光度 值 基 本 恒 定 ； 超过 ４ ５ ℃， 吸 光 度 值 逐 渐 下 降 。这是 由于 生成 的二 烷 基二 硫 氨基 甲酸
Ｏ ０ Ｏ ０
明， 硫 酸 小诺 霉 素在 ７ ～４ ４ ０ ｆ ｇ ／ ｍＬ 范 围 内 符 合
Ｂ ｅ ｅ ｒ定 律 。
收 稿 日期 ： ２ ０ ０ ２ — ０ ５ — １ ８
作者简 介 ： 郎惠云（ １ ９ ４ ２ 一 ） ， 女， 陕西高 陵人 ， 西北大学教 授 ， 从 事原子光谱 及药 物分析研究 。
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西北大学学 报（ 自然 科 学 版 ）
第 ３ ３卷
／ ℃
１ ． ５ ． ２ 以 Ｎｉ 为标 准 的 工作 曲 线 分 别 移取 含 有 ０ ， ２ ５ ， ５ ０ ， １ ０ ０ ， １ ５ ０ ， ２ ０ ０ ， ２ ５ ０ ， ３ ０ ０ ｔ ｌ ｇ的标 准氯 化镍 溶 液于 ２ ５ ｍＬ 比色管 中 ， 加入 ３ ｍＬ １： １的盐 酸溶 液 ， 用 水 稀 释 至 刻度 ， 摇匀 ， 喷入 空气一 乙炔 火 焰 ， 测 定 其 吸光度 ， 以 吸 光 度 对 Ｎｉ 浓 度Ｃ 做 图（ 见 图 ２） 。