山楂标准汤剂的HPLC特征图谱研究
复方山楂口服液提取方法及其指纹图谱研究的开题报告
复方山楂口服液提取方法及其指纹图谱研究的开题
报告
一、研究背景
首先，山楂是一种中药材，拥有广泛的应用价值，主要用于治疗胃肠道不适、消化不良、肝脏疾病等。
复方山楂口服液是一种常用的中药制剂，采用多种中草药，其中山楂为主要成分，常用于治疗心脑血管疾病，具有降血脂、降血压、调节血糖等功效。
其次，指纹图谱是一种现代中药研究的重要手段，是根据复杂的中药体系进行多方位分析、反映药物质量的综合研究方法。
目前，指纹图谱已经成为衡量中药质量是否稳定的重要工具之一，因此，研究复方山楂口服液的指纹图谱，不仅可以从质量上保证制剂的稳定性，也可以为该制剂的药效研究提供支持。
二、研究内容
本次研究的主要内容为：复方山楂口服液的提取方法及其指纹图谱研究。
具体包括以下几个方面：
1. 复方山楂口服液的提取方法研究
旨在建立一种高效、稳定、可重复的复方山楂口服液提取方法，优化提取工艺参数，探究不同提取溶剂和提取时间对提取效果的影响，并确定最优提取条件。
2. 复方山楂口服液中有效成分的定量测定
采用高效液相色谱-质谱联用技术对复方山楂口服液中的有效成分进行定量分析，建立定量分析方法，并对不同批次的制剂进行对比分析。
3. 复方山楂口服液指纹图谱的建立及分析
采用高效液相色谱技术对复方山楂口服液进行指纹图谱建立，建立指纹图谱数据库，探究不同制剂之间的相似性和差异性，为该制剂的质量控制提供依据。
三、研究意义
本研究旨在探究复方山楂口服液的提取方法及其指纹图谱研究，为复方山楂口服液的质量控制提供科学依据，保证该制剂的稳定性及安全性，为该制剂的药效研究提供支持。
同时，该研究对于其他中药制剂的质量控制研究也有一定的参考意义。
HPLC法同时测定山楂叶提取物中的7种主要成分
齐 鲁 药 事 Ｑｉ ｈｒ ａ ｕｉ ｌ ｆａ ｓ ０ ９Ｖ ｌ ８ Ｎｏ１ ｌ Ｐ ａｍ ｃ ｔａＡ ｆｉ ０ ｏ ２ ， ． ｕ ｅ ｃ ｒ２
ＨＰ Ｃ法 同 时测定 山楂 叶提 取物 中的 ７种 主 要成 分 Ｌ
梁恕坤 ， 庆 霞 冯 尚彩 付 ，
（ 东临 沂 师 范 学 院 ， 东 临 沂 ２ ６ ０ ；．临 沂市 人 民 医院 ， 东 临 沂 ２６ ０ ） 山 山 ７０ ５ １ 山 ７ ０ ３
Ａ ：Ｏ ～ Ｏ ， ２ ％ ～ １ ０ ． ｅｆ ｗ ａｅｗａ ． ｍＬ ・ｍｉ～ ． ｅＤＡＤ ｅｅｔｒｗａ ｅｅｇ ｈｗａ ｅ ｔ ６ ｎ ｄ ｒ ｇＯ ２ ｍｉ， ８ Ｂ：０ ０ ％ Ｔｈ ｌ ｒｔ ｓ１０ ｏ ｎ Ｔｈ ｄ ｔｃｏ ｖｌｎ ｔ ｓｓｔ ０ ｍ ｕｉ ￣ ０ ｎ ａ３ ｎ
（ ｈｎ ｏ ｇＬｎ ｉ ｒ ｌ Ｓ ａ ｄ ｎ ｉｙ Ｎｏ ｍａ Ｕｎ ｖ ｒ ｉｙ Ｌ ｎ ｉ２ ６ ０ ｉ ｙ ７ ０ ５ １ Ｐｅ ｐ ｅｓ Ｈｏ ｐ ｔ ｉ ｙ ， ｎ ｉ ６ ０ ） ａｏ ２
Ａ Ｒ Ｂ ＡＣｒ Ｏ脚 咖 ：
Ⅶ
Ｔ ｓａ ｌ ｈ ａ ＬＣ ｍｅｈ ｄ ｔ ｅｅ ｍｉ ｅ ｓ ｌ ｎ ｏ ｌ ｌ ｃ ｓ ｌｉ ｘｎ，ｈ ｍｎ ｓ ｌｉ ｘｎ，ｕ ｉ ｖ— ｏ ｅ ｔｂ ｉ ｎ ＨＰ ｔ ｏ ｏ ｄ ｔ ｒ ｎ ｉ ｔ ｅ ｕｙ ｇ ｕ ｏ ｙｖｔ ｉ ｒ ａ ｏ ｙｖｔ ｉ ｒ ｔ ｓ ｍｕ ａ ｅ ｅ ｎ， ｉ
ｉ １４ ０ ． ５％和 ９ ． ７ ， ＲＳ 分 别 为 １ ２ 、 ． ８ 、 ． ５ 、． ９ 、 ＿ ２ 、 ． １ 和 １ ４ （ ＝ ６ 。结 论 该方 法简便 、 ８ ３ 其 Ｄ ． ６ １ ２ １ ３ ％ １ ４ ｌ ３ １ ５ ．４ ）
HPLC测定山楂中熊果酸的含量
浸泡 ２次 ， 每次 １ Ｌ 浸泡 ２ｍｎ ， 弃石油醚 ， ０ｍ （ ｉ）倾 挥尽 溶剂 ，
残渣加 甲醇溶解 ， 移 至 １ Ｌ量瓶 中， 甲醇 至刻 度 ， 转 ０ｍ 加 摇
ＲＳ ： ７ 。 Ｄ ０． ％
４ 讨 论
４ １ 取 熊 果 酸 对 照 品溶 液 ， ２０— Ｏ ｍ， 长 范 围 内 进 ． 在 ０ ４ ０ｎ 波
３ ６ 重 现 性 实验 ．
行扫描 ， 结果显 示 在 ２０ ｎ １ ｍ波 长处 有 最 大吸 收 ， 文献 一 与
致 。
取 同一 山楂样品 ５份 ， 上述 提取方 法测 定 含量 ， 按 结果
ＲＳ ＝ １ ３ 。 Ｄ ．％
４ ２ 本 法 经 索 氏 提取 ４ｈ 所 含 熊 果 酸 已 基 本 提 取 完 全 ， ． ， 可 用 于 山楂 中熊 果 酸 的 含量 测 定 。
参 考 文献 ：
［ ］ 中药大辞典（ １ 上册 ） Ｍ］ 上海科学技术 出版社 ，９ ６ １０ ［ ． １８ ：７ ． ［ ］ 刘成红 ， ２ 刘 云． Ｌ ＨＰ Ｃ测定马鞭草 中熊 果酸的含量 ［ ］ 中国 Ｊ．
分别精密 吸取 对照品溶 液与样 品溶 液各 １ ， ０ 注入 高
相 液 相 色 谱 仪 ， 定 ， 品 与 对 照 品 在 同一 保 留位 置 上 ， 一 测 样 有 相 应 的 色 谱 图 ， 表 ２ 按 外 标 法 以 峰 面 积 计算 。 见 ，
表２
４ ０ ６ 进 行 线 性 回 归 ， 回 归 方 程 ： ： １ ．０ ＋ ．９ ） 得 Ｙ ６ ８ ７４Ｘ ４ ７ ２４３ｒ ０ ９ ９８ 线 性 范 围 为 ：．０ ４ ０６ ｇ １．３ ： ．９ ， ０ ２ ８— ．９ 。 ４
_ 山楂提取物的质量标准研究_山楂提取物的质量标准研究
1． 2 试药及药品 芦丁对照品［中国药品生物制 品检定所，批号： 100080 － 200707，紫外分光光度法 （ UV） 含量为92． 5% ］； 山楂对照药材（ 中国药品生 物制品检定所，批号： 121138 － 200905 ） ； 金丝桃苷 （ 中 国 药 品 生 物 制 品 检 定 所，批 号： 111521 － 201004） ； 牡荆素鼠李糖苷（ 中国药品生物制品检定 所，批号： 111668 － 200401） ； 硅胶 GF254 （ 青岛海洋 化工厂分厂，批号： 20100808） ； 枸橼酸（ 中国药品生 物制品检定所，批号： 100396 － 200301） ； 所用化学试 剂均为分析纯。
表 1 山楂提取物样品信息汇总
编号
样品名称
样品信息
1
山楂提取物（ 山西 1）
山西康立生药业有限公司提供，批号： 01
2
山楂提取物（ 山西 2）
山西康立生药业有限公司提供，批号： 02
3
山楂提取物（ 山西 3）
山西康立生药业有限公司提供，批号： 03
4
山楂提取物（ 陕西） 陕西瑞康生物工程有限公司提供，批号： 20110720
5
山楂提取物（ 自制 1）
自制，药材产地山西，批号： 20110913
6
山楂提取物（ 自制 2）
自制，药材产地山东，批号： 20110915
2 方法与结果 2. 1 TLC 鉴别 2. 1. 1 对 照 药 材 溶 液 的 制 备 取 山 楂 对 照 药 材 1. 0 g，加水 50 mL，加热回流 3 h，放冷，滤过，滤液蒸 干，残渣加 1 mL 甲醇溶解，作为对照药材溶液。 2. 1. 2 供试品溶液的制备 取本品粉末 1. 0 g，加 甲醇 10 mL，超声处理 30 min，滤过，滤液蒸干，残渣 加 1 mL 甲醇溶解，作为供试品溶液。 2. 1. 3 山楂提取物的 TLC 鉴别 吸取上述两种溶 液各 5 μL，分别点于同一硅胶 GF254 薄层板上，以三 氯甲烷 － 甲醇 － 甲酸（ 10∶1∶0. 1） 为展开剂，展开，取 出，晾干，置紫外 光 灯 （ 254 nm） 下 检 视 （ 见 图 1 ） 。 供试品色谱中可见与山楂对照药材色谱相应的位置 上显相同颜色的荧光斑点。 2. 2 特征图谱的研究［5，6］ 经调研，山楂提取物的 生产工艺均采用水煎煮法，有机酸类物质是其主要 成分，故山楂提取物的特征图谱应以有机酸类物质 为主进行建立。 2. 2. 1 色谱条件与系统适用性 固定相以十八烷 基硅烷键合硅胶为填充剂 （ Thermo C18 ，4. 6 mm × 250 mm，5 μm） ； 以 0. 05 mol·L － 1 磷酸二氢铵（ pH
HPLC法同时测定山楂中的山楂酸、齐墩果酸和熊果酸
山楂 为 蔷 薇 科 植 物 山 里 红 （ ｒｔｅｕ ｉｎｔ ｉａ Ｃａａｇ ｓ ｎａｉ ｄ ｐ ｆ
Ｂ ｎ ｅｖｒ ｍａｏ Ｅ Ｂ ） 山楂 （ ｒ ｔｅ ｕ ｉｎ ｔ ｉ ａ ｕ ｇ ａ． ｊｒＮ． ． ｒ和 Ｃ ａａｇ ｓ ｎ ａｉ ｄ ｐ ｆ
ＨＰ Ｃ 法 同 时 测 定 山 楂 中 的 山 楂 Ｌ 酸 、 墩 果 酸 和 熊 果 酸 齐
王嫦 鹤 ， 秉 华 ， 张 刘 芳 ， 长 根 （ 西省食 品药 品检 验 徐 陕
所 ， 西 西 安 ７０ ６ ） 陕 １ ０ １
摘 要 ： 的 建 立 山楂 中 山楂 酸 、 目 齐墩 果 酸 和 熊果 酸 的 反 相 高 效 液相 分 析 法 ， 山楂 的 质 量 控 制 提 供 依 据 。方 法 色 谱 柱 ： 为
０ １ ３ ． ５ ０ １ ３ ． ５ ０ ３ ６ ． ０ ０ ３ ６ ． ０ ０ ３ ６ ． ０ ０ ４ ９ ． ５ ０ ４５ ． ９
０． ７ ４５ ０． ６１ ４ ０． １ ６０ ０ ６ ７ ． ０ ０ ６ ９ ． ０ ０ ７ ２ ． ６ ０ ７ ５ ． ５
９ ． ９ ８ ６ ９ ．３ ９ ４ １ １ ３ ０ ．Ｏ ９ ．３ ９ ５ １０ ５ ０ ．６ ９ ．５ ９ ６ ９． ６ ８ ２ ９ ． ９ ３ １ ．１
Ｂ ｅ） 干 燥 果 实 。 山 楂 为 药 食 同 源 植 物 ， 酸 、 ， ｇ． 的 性 甘 味 温 ， 脾 、 、 经 ， 床 上 主要 用于 治疗 肉食积 滞 、 归 胃 肝 临
胃脘 胀 满 、 痢 腹 痛 、 气 瘀 痛 等 疾 病口 。现 代 药 理 泻 疝 ］
９
０ ３ ２ ． ０
山楂化学成分及高效液相色谱分析方法研究进展
Hale Waihona Puke 山楂中含有人体必需的微量元素铁、钙 、铬、锰 、锌、镍 、 钴， 不同种 的山楂其所含微量 元素 的含 量略有差异。 ２ 高效液 相色谱分析方 法研 究 ２ １ 以熊果酸为对 照品 ． 熊 果酸 属三萜类 化合物 ， 以从多种 中草药 中提 得， 可 具有 强心、 降脂 、 降糖 、 抗癌 等生理活性 ， 有重要 的药 用开发价值 。 近 年发现熊 果酸除有抗 炎、 抗突变活性 外， 对多种恶性 肿瘤细 胞 亦有 强烈 的毒杀 效应 ， 并有 诱导 癌细 胞分化 的能 力： 。 因此具有 良好的开 发前 景 。 目前， 熊果酸含 量的测 定多采用 比
关键词 ：山楂；化学成分；Ｈ Ｌ ；综述 ＰＣ
中 图分 类 号 ：Ｒ ８ 、 ２ ４１ 文 献 标 识 码 ：Ｄ 文 章 编 号 ：１０ ．３ ４２０ ）１ ０ ３０ ０ ５５０ （０ ６ １－ ９ ．３ ０
山楂为蔷薇科 山楂属植物 山里红 Ｃａ ａｇ ｓｐ ｎ ａ ｉ ｉａ ｒ ｔｅ ｕ ｉ ｎ ｔｆ ｄ Ｂｅ ｇ． ｌ ｊ ｌ 叵Ｂ ． 山楂 Ｐ ｎ ａ ｉ ｉ ａＢ ｅ 的干燥成 ｌ Ｏ＂ ｌ ￣ ｒ或 ｉｎ ｔｆ ｄ ｇ ． 熟果实， 通称 （ 山楂 。它 主产 于我国北方， 北） 是一种 常用中药， 具有消食健 胃和行气 散瘀 的功 能，临床上用于 消食化滞 、活血 化瘀 。 近年来， 更广泛 用于治疗 心血管疾 病和 抗菌消炎， 引起 国 内外学者的注意和重视。 山楂主要成 分为黄酮类和有机酸类化 合物“。现代药 理研 究表 明， 山楂黄酮 、黄烷 及有机酸等成 分 具有降血压 、降血脂 、改善心肌缺血 、降低胆 固醇含量 、降低 血 小板聚集率 、抗脂质过氧化 、抗心率不齐、抗癌 和利 尿等多
高效液相色谱法(HPLC)测定山楂片中的熊果酸和齐墩果酸
６ ０ ， Ｌ ｒ０９ ９１ ａ ｄ１ ． ｂ ／ － ０ ｇｍ （ ＝ ． ９４ ，ｅｐ ｃ ｖｌ． ｈ ｖｒｇ ｃｖｒ ｐ ｒ ｎ ０ ｍ （＝ ． ） ｎ ２５ ｔ ｍＬ ２ ０ ＿ Ｌ ｒ０９ ）ｒｓｅｔ ｅ Ｔ ｅ ｅａｅ ｅ ｏｅｙ ｅｃ ｔ ９ ｇ ／ ９ ｉ ｙ ａ ｒ ｅ ｗ ｒ ９ ．６ ａｄ９ ． ｅｅ ９０ ％ ｎ ９１ ７％． ｅＲ Ｄ ｗ ｒ １ ３ （ ＝ ） ｎ ． ｔ Ｓ ｅｅ ． ％ ｎ ５ ａｄ２ ９％ （ ＝ ） ｅｐｃｉ ｌ Ｔ ｅｍ ｔｏｓ Ｓ ｕｔ ｈ ４ ４ ｎ ５ ，ｒ ｅｔ ｅ ｈ ｅ ｄ ｉ ｓ ｖ ｙ． ｈ ｉｓ —
（． ｍ ￣ ０ ， ｍ ， Ｖｄ ｔ ｔ ｎｗ ｖｌ ｇ １ ｍ． ｈ ｅｔ ｏ ｉ ｈ ｓ ｗ ｓ ｅ ｏ— ａｅ（ ｊｓ ｄ ４６ ｍ ２０ｍｍ ５ ）Ｕ ｅ ｃ ｏ ａｅ ｎｔ ２ ０ｎ Ｔ ｅｂｓ ｍ ｂｌ ｐ ａｅ ａ ｍ ｔ ｌｗ ｔ ａ ｕｔ ｅｉ ｅ ｓ ｅ ｈ ｒｄ ｅ
合 于 山楂 片 中熊 果 酸和 齐墩 果 酸含 量 的 测 定 。
关键词 ： 高效液相 色谱 法； 山楂 片； 熊果酸 ； 齐墩果酸 ； 测定
ＴＨＥ ＤＥＴＥＲＭ Ｉ ＮＡ１ ’ ０Ｎ ０ ＵＲＳ ０ＬＩ ＡＣＩ Ａ Ｄ Ｃ Ｄ ０Ｌ匕 Ａ ０ｌ ＪＣ ＡＣｌ ｌ ＨＡＷ Ｉ Ｄ为蔷薇科 落叶小 乔木 ， 又名红果 。 山楂 的营养 十分丰富 ， 所含钙 、 ｎ居各类水果 第一位 ， ｖ 山楂还 富含
Ａｂｓｒ ｃ ：Ａ ｔ ｏ ｏ ｈ ｅｅ ｍｉａ ｉｎ ｏ ｒｏｉ ｃｄ ａ ｄ ｏ ｅ ｎ ｌ ｃ ｄ ｉ ａ ｉｃ ｙｈ ｇ ｅ ｏ ｍａ ｃ ｔａ ｔ ｍｅｈ ｄ ｆｒｔｅ ｄ ｔｒ ｎ ｔ ｆｕ ｓ ｌｃａ ｉ ｎ ｌａ ｏ ｉ ａ ｉ ｎ ｈ ｗ ｐｅ ｅ ｂ ｉｈ ｐ ｒ ｒ ｎ ｅ ｏ ｃ ｆ ｌｑ ｉ ｈ ｏ ｔｇ ａ ｈ ａ ｅ ｎ ｅ ｔｂｌ ｈ ｄ． ｅｃ ｒ ｍａｏ ｒ ｐ ｙｃ ｎ ｉ ｏ ｓｆ ｌ ｗ： ｐｅｓｌ ｉ ｕｄ ｃ ｒ ｍａｏ ｒ ｐ ｙｈ ｓｂ ｅ ｓａ ｉ ｅ Ｔｈ ｈ ｏ ｔ ｇ ａ ｈ ｏ ｄｔ ｎｓａ ｏｌ ｓ ｉ ｏ Ｈｙ ｒｉ ＢＤＳ Ｃｌｅ ｎ ｕ ｓ ｏ ｌ ｍ
高效液相色谱法测定山楂制品中苯甲酸、山梨酸、糖精钠
Ｆ ＯＯＤ Ｓ ＥＮＣＥ＆Ｔ ＣＩ ＥＣＨＮＯＬ ＯＧＹ
高效液相色谱法测定山楂制品中苯甲酸 ＼ 山梨酸 ＼ 糖精钠
宗 万 里 。杨 元 萍
（ 威海 市产 品质量监 督 检验 所 ，山东 威海 ２ ４ ０ ） ６ ２ ９
摘 要 ： 液相 色谱 法 测定 山楂 片 中苯 甲酸 、 梨酸 、 对 山 糖精 钠 进 行 了方 法优 化 ． 色谱 条 件进 行 了调 整 。 用 对 采
２ 结果 与讨 论 ２１色谱 图 ．
片样 品 中添加 ｌＯ ／ Ｏ ｍｇＬ苯 甲酸 、 山梨酸 、 精钠 标 准溶液 糖 １ｍ ， ． Ｌ 即样 品加标量 为 １ ｍ ／ ｇ ２ ２ ｇ ｋ 。按上述 提取步骤 进行提
重复 ４次 。按 １ 色谱 条件进 行测定 ， ． ２ 精密度和 回收率 在 １ ． 谱 条 件 下。得 到苯 甲酸 、 ２色 山梨 酸 、 精 钠标 取 ， 糖 ， 采 准样 品 、 白样 品 、 白加标 样 品 的色谱 图，如 图 １ 示， 计 算结 果列 于表 ２ 由表 ２数 据可 知 ， 用本 方法 苯 甲酸 、 空 空 所
地 将 山楂 制 品 中的果 胶 较好 的沉 淀 。从 而 使样 品处理 液 得 到很 好 的过滤 ， 且 提高 了样 品 的提 取率 ， 并 在确 保 了实 验 准确 度 的 同时 ， 快 了工作 速 度 ， 高 了工作 效 率 。 加 提
１ 实验 部分
检测器 ： 外检 测器 ． 紫 波长 ２ ０ ｍ。 ３ｎ １ 溶液 配制 ． ３
≥９ ％， 生 物有 抑 制作 用， 因而被 广泛 用做食 品防腐 剂 。苯 甲酸 的 准 品 ： ９ 国家标 准物 质 中心 ；
代 谢 产 物 结 构稳 定 ， 人 体 中难 以分 解 ， 量 摄 人 会对 人 在 过
山楂HPLC指纹图谱研究
ＧＡＯ Ｘｉ ｎ ｋ ａ ｉ ， ＨＵＡＮＧ Ｙｕ ｅ ｃ ｈｕ ｎ ， ＣＡＯ Ｚｉ ｆ ｅ ｎ ｇ ， Ｗ ＥＩ Ｇａ ｎｇ
［ １ ． Ｉ ｎ ｉｎ ｆ ｉ ｔ ｕ ｓ （ Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ ） Ｃ ｏ ． ，Ｌ ｔ ｄ ． ，Ｊ ｉ ａ ｎ ｇ ｍ ｅ ｎ ５ ２ ９ １ ５ ６ ，Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ ； ２ ． Ｇ ｕ ａ ｎ ｇ ｚ ｈ ｏ ｕ Ｕ ｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙ ｏ ｆ Ｃ ｈ ｉ ｎ ｅ ｓ ｅ Ｍｅ ｄ ｉ ｃ ｉ ｎ ｅ ，Ｇ ｕ ａ ｎ ｇ ｚ ｈ ｏ ｕ ５ １ ０ ０ ０ ６，Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ ；
［ １ ．无限极 （ 中国） 有 限公 司，广东 江门 ５ ２ ９ １ ５ ６ ； ２ ．广 Ｊ ， Ｉ 、 ｌ 中医药大学，广 东 广州 ５ １ ０ ０ ０ ６ ；３ ．广 州中医药大学 第一附属医院，广东 广 州 ５ １ ０ ４ ０ ５ ］
［ 摘要 ］ 目的 ：优化 山楂高效液相色谱指纹 图谱分析方法 。方法 ：色谱柱为 Ｚ Ｏ Ｒ Ｂ Ａ Ｘ Ｓ Ｂ Ｃ 柱 ；流动相 为乙腈
Ｈ Ｐ Ｌ Ｃ ． Ｍｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ｓ ：ＨＰ Ｌ Ｃ ｗ ａ ｓ ｐ ｅ ｒ ｆ ｏ ｒ ｍ ｅ ｄ ｗ ｉ ｔ ｈ ｔ ｈ ｅ Ｚ Ｏ Ｒ Ｂ Ａ Ｘ Ｓ Ｂ Ｃ ｌ ８ ，ｔ ｈ ｅ ａ ｃ ｅ ｔ ｏ ｎ ｉ ｔ ｒ ｉ ｌ ｅ 一 １ ％ ａ ｃ ｅ ｔ ＿ ￣ ｃ ａ ｃ ｉ ｄ ｓ ｏ ｌ ｕ ｔ ｉ ｏ ｎ （ ｇ ｒ ａ ｄ ｉ ｅ ｎ ｔ ｅ ｌ ｕ ｔ ｉ ｏ ｎ ）
ｗ ａ ｓ ｅ ｍｐ ｌ ｏ ｙ ｅ ｄ ａ ｓ ａ ｍｏ ｂ ｉ ｌ ｅ ｐ ｈ ａ ｓ ｅ， ｄ ｅ ｔ ｅ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ｗ ａ ｖ ｅ ｌ ｅ ｎ ｇ ｔ ｈ ｗ ａ ｓ ２ ３ ８ ｎ ｍ， ｃ ｏ ｌ ｕ ｍｎ ｔ ｅ ｍｐ ｅ ｒ ａ ｔ ｕ ｒ ｅ ｗ ａ ｓ ３ ５℃ ，ａ ｎ ｄ ｌ ｆ ｏ ｗ ｒ ａ ｔ ｅ ｗ ａ ｓ １ ． ０ ｍＬ・ ｍｉ ｎ～． Ｔ ｈ ｅ ｓ ｉ ｍｉ ｌ ａ ｒ ｉ ｔ ｙ ｗ ａ ｓ ｅ ｖ ａ ｌ ｕ ａ ｔ ｅ ｄ ｏ ｎ ｔ ｈ ｅ ｓ ｉ ｍｉ ｌ ａ ｒ ｉ ｔ ｙ ｅ ｖ ａ ｌ ｕ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｓ ｙ ｓ ｔ ｅ ｍ ｏｒ ｆ ｃ ｈ ｒ ｏ ｍａ ｔ ｏ ｒａ ｇ ｐ ｈ ｉ ｃ ｉ ｆ ｎ ｇ ｅ ｐｒ ｒ ｉ ｎ ｔ ｏ ｆ ｔ ｒ ａ ｄ ｉ ｔ ｉ ｏ ｎ ａ ｌ
山楂破壁饮片的hplc指纹图谱研究
北方药学 2019 年第 16 卷第 12 期
1
·药品质量及检验·
山楂破壁饮片的 HPLC 指纹图谱研究
曹晓俊 史军杰 甘均龙 彭丽华 陈炜璇 徐吉银 成金乐 * （中山市中智药业集团有限公司 中山
548237）
摘要：目的：建立山楂破壁饮片的高效液相（HPLC）指纹图谱，分析破壁饮片成品与中间体破壁粉及原料的化学相关性，为其整体 质量评价提供依据。方法：采用 C18 柱，流动相为甲醇-乙腈-0.1%甲酸溶液，梯度洗脱流速为 0.7mL/min，检测波长为 280nm，柱温为 30益。结果：建立了以 11 个色谱峰为共有峰的山楂破壁饮片 HPLC 指纹图谱共有模式，指认了绿原酸、金丝桃苷 2 个共有峰；山楂 破壁饮片与其破壁粉体（中间品）、传统饮片（原料）的图谱基本一致，相似度大于 0.99。结论：建立的方法稳定、可靠、重复性好，可 用于山楂破壁饮片整体质量分析。 关键词：山楂 破壁饮片 指纹图谱 高效液相色谱
中图分类号：R284.1
文献标识码：A
文章编号：1672-8351（2019）12-0001-04
Study on HPLC fingerprint of the Ultrafine Granular Powder of Crataegi Fructus Cao Xiaojun Shi Junjie Gan Junlong Peng Lihua Chen Weixuan Xu Jiyin Cheng Jinle* （Zhongshan Zhongzhi Pharmaceutical Group, Zhongshan 528437 Guangdong, China） Abstract：Objective：To establish the HPLC fingerprint of the Ultrafine Granular Powder of Crataegi Fructus，and analyze the chemical composition relativity between the Ultrafine Granular Powder （UGP）, Ultrafine Powder （UP）and its decoction pieces （DP），helping to evaluate its quality. Methods：RP -HPLC method was performed on an C18 column with a gradient elution composed of methanol acetonitrile-0.1% formic acid at the flow rate of 0.7mL·min-1. The column temperature was set at 30益，while the detective wavelength
不同产地山楂叶HPLC指纹图谱比较分析
◊药物分析◊不同产地山楂叶h p l c指纹图谱比较分析高婧1>2，王领弟3，李艳荣1，潘海峰1(1.承德医学院河北省中药研究与开发重点实验室，河北承德067000;2.承德市食品药品检验检测中心，河北承德067000;3.承德医学院附属医院药剂科，河北承德067000)摘要：目的建立不同产地的山楂叶50%乙醇提取物的HPLC指纹图谱，并对其中5种主要成分进行含量测定,结合聚类分析评价不同产地的山楂叶药材质量。
方法采用DiamonsilC18(4.6m m x250 mm,5^un)色谱柱；以乙腈■0.1%冰酸酸-四氢味喃体系梯度洗脱;检测波长320 nm;流速0.9 mL •miiT1;柱温30丈；应用中药色谱指纹图谱相似度评价系统建立HPLC指纹图谱进行评价，用SPSS 19.0统计软件进行聚类分析。
结果标定出山楂叶HPLC指纹图谱共有峰7个,相似度0.09~0.90;聚类分析后，可以区分不同产地山楂叶，最终以19批主产地的山楂叶为样本，重新建立山楂叶50%乙醇提取物HPLC指纹图谱，标定出共有峰11个,相似度均大于0.85;对25批山楂叶提取物5种主要成分进行含量测定，结果显示主产区山楂叶的质量比较稳定。
结论建立的山楂叶HPLC指纹图谱重现性和特征性较好,能够快速鉴别山楂叶。
应用SPSS 19.0聚类分析软件，可以较全面的反映不同产地山楂叶化学成分的差异，为其质量控制提供实验依据。
关键词：山楂叶提取物;指纹图谱;含量测定doi：10.3969/j.issn.1009 -6469.2018.01.009HPLC fingerprint comparative analysis of the hawthornleaf from different regionsGAOJing1’2,WANGLingdi3,LI Yanrong1,PAN Haifeng1(1.Hebei Province，Chinese Medicine Research ami Development Key Laboratory，Chengde，Hebei067000 ,China;2. Chengde Food and Drug Inspection arin Testing Center ,Chengde, Hebei067000 , China;3.Department op Pharmacy,Chengde Medical College Affiliatee Hospital,Chennde,Hebei067000 ’China)A bstract ：O bjective To establish HPLC fingerprints of 50%ethanol extract from hawthorn leaves from different regions,to determinefive kinds of m ain composition content，and to evaluate the qualities of hawthorn leaves from different regions combining with clusteringanalysis. M ethods The method was performed on a Diamonsil C1column(4. 6 m m x250 m m，5 jxm). The mobile phase was set in agradient elution model consisting of acetonitrile ,0. 1% glacial acetic acid and tetrahydrofuran at a flow rate of 0. 9 mL • min 1. The detection wavelength was 320 nm,and the column temperature was 30 . HPLC fingerprint was established for evaluation with the similarity evaluation system f or chromatographic fingerprint of TCM and clustering analysis was made by SPSS 19. 0 soft^vare. Results Sevenpeaks were selected as the common peaks in the fingerprint and the similarity of samples was 0. 09 to 0. 90. The result of clustering analysis could be used to distinguish ha"wthorn leaves from different regions,and eventually 19 batches of ha"wthorn leaves from main producing areas were chosen as samples and HPLC fingerprints of 50% ethanol extract from hawthorn leaves were re-tion of 11 common peaks were determined，and the similarity was greater than 0. 85. The results of the de main components showed t hat the qualities of hawthorn leaves from main producing areas were stable. Conclusions HPLC fingerprintof hawthorn leaf is good in repeatability and characterization，which can be used for rapid identification analysis with SPSS 19. 0 software can demonstrate the differences in chemical composition of hawthorn leaves fromdifferent regions andprovide reference for the quality control.Keywords:hawthorn leaf extract;fingerprint;content determination基金项目：河北省高等学校科学技术研究重点项目（ZD2015097)河北省中医药管理局课题（2017216 )承德市科学技术研究与发展计划项目 (2101A043);承德市科学技术研究与发展计划项目（216〇6A016)作者简介:高婧，女，硕士研究生通信作者:潘海峰，女，教授，硕士生导师，研究方向：中药分析，E-mail:ph£2301@163. com山楂叶为蔷薇科植物山里红（^>0〇^扣眶^- ifida Bge. var. major N, E. Br.)歲也礙{ Crataegus p in a id a Sge.)的干燥叶，夏、秋二季采收，晾干。
高效液相色谱法测定山楂合剂中枸橼酸的含量
高效液相色谱法测定山楂合剂中枸橼酸的含量目的：建立高效液相色谱法测定山楂合剂中枸橼酸的含量。
方法：采用Agilent C18色谱柱(ZORBAX SB－C18 4.6mm×250mm，5μm)；流动相为0.5％NH4H2PO4水溶液(用磷酸调节pH至2.8)；检测波长为210nm，流速为1.0mL ／min，柱温为25℃。
结果：枸橼酸进样量在0.058～29.0μg(r=0.99999)范围内与峰面积线性关系良好，平均加样回收率为99.29％，RSD=0.56％(n=9)。
结论：本法简便、快速、专属性强、重现性好；可作为山楂合剂的质量控制方法。
标签：枸橼酸；高效液相色谱法；山楂合剂；含量测定山楂合剂是由山楂、乌梅、陈皮等药制成，具有消食健胃、理气健脾、安蛔的功效。
质量标准中没有规定含量测定方法。
本文根据《中国药典》2005年版一部“山楂”和“乌梅”项下选择枸橼酸为质量控制指标，采用HPLC法测定山楂与乌梅的主要成分——枸橼酸的含量。
获得满意的结果。
1仪器与药品高效液相色谱仪(美国Agilent 1100系列仪)。
包括自动进样装置、VWD可变紫外检测器、柱温箱等；METTLERAE240型电子分析天平。
除高效液相色谱检测所用试剂为色谱纯外，其他试剂均为分析纯。
枸橼酸对照品(CHEMSERVICE Lot：281－76A，纯度99％，含1分子的结晶水[C6H8O7·H2O]，分子量为：210)；山楂合剂由本院制剂室配制(批号070523、070718、070722)。
2方法与结果2.1色谱条件色谱柱：Agilent C18色谱柱(Z()RBAX SB－C18 4.6mm×250mm，5pm)；流动相：0.5％NH4H2PO4水溶液(用磷酸调节pH至2.8)；流速：1.0mL／min；柱温：25℃；检测波长：210nm；进样量：5μl。
理论板数按枸橼酸峰计算为5000。
2.2溶液的制备精密称取枸橼酸对照品64.08mg(实际含量＝64.8×99％×192÷210=58.0mg)，置10mL量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，即得每1mL中含枸橼酸5.8mg的溶液(贮备液)，分别精密吸取溶液(贮备液)①0.01mL、②0.05mL、③0.1mL、④0.5mL、⑤1mL、⑥5mL；分别置5mL量瓶中，加水稀释至刻度，分别得每1mL含①0.0116mg、②0.058mg、③0.116mg、④0.58mg、⑤1.16mg、⑥5.8mg的对照品溶液。
HPLC法测定山楂炮制前后10种有机酸成分的含量
[4-5]
伤均具有保护作用 ，此外还有抗菌、抗氧化和血
[6]
脂血糖调节作用等 。有机酸有一定的刺激性，临床
测定的方法，旨在为今后研究山楂炮制前后的有机
酸成分变化规律提供条件和参考。 1 材料
1260 型高效液相色谱仪，二极管阵列检测器 （美国安捷伦科技有限公司），MSE6.6S-OCE-DM 型
定，计算草酸、酒石酸、苹果酸、乳酸、柠檬酸、琥珀
酸、没食子酸、原儿茶酸、香草酸、咖啡酸的平均加 样回收率和 RSD，见表 2。 2.6 样品测定 取生山楂饮片及其炮制品，按 2.3 项下方法制备供试品溶液，平行 3 份，按 2.1 项下色
谱条件测定，采用外标法计算各样品中上述 10 种
有机酸成分的含量。见表 3。
２０21 年 7 月第 38 卷第 7 期
天津中医药
Jul. ２０21, Ｖｏｌ．38 Ｎｏ．7
Ｔｉａｎｊｉｎ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ
935
： DOI 10.11656/j.issn.1672-1519.2021.07.24
HPLC 法测定山楂炮制前后 10 种有机酸 成分的含量
937
表 1 山楂中 10 种有机酸成分的回归分析、线性范围、 相关系数
Tab.1 Regression analysis，linear range and correlation coefficient of ten organic acid components in CP
有机酸 n
回归方程
草酸
8.原儿茶酸，9.香草酸，10.咖啡酸。 图 1 山楂的 HPLC 色谱图 Fig.1 HPLC chromatograms of CP
基于UHPLC-Q ExactiveOrbitrap-MS法的山楂不同部位化学成分分析
457. 3676[ M+H] +
+
山楂酸
C30 H48 O4
473. 3625[ M+H] +
+
枸橼酸
C6 H8 O7
191. 0193[ M-H] -
+
绿原酸
C16 H18 O9
353. 0867[ M-H] -
+
牡荆素鼠李糖苷
C27 H30 O14
577. 1551[ M-H] -Fra bibliotek+
金丝桃苷
C21 H20 O12
1 实 验
症; 山楂核消食, 散结, 催生, 用于食积不化, 疝气, 睾丸偏 坠, 难产[1-2] 。 历版 《中国药典》 对山楂肉与山楂叶均分别收
录, 山楂核在 《中华本草》 中有收载。 山楂不同部位( 山楂肉、
山楂叶、 山楂核) 功效有所不同, 在用药时会有所区别。 现有
文献分别研究了山楂肉、 山楂叶等各部位的化学成分, 尚没有
NING Su-yun1 , MENG Mei-dai2 , WANG Peng2 , WANG Yi1 , ZHANG Fu-sheng2 (1 Shanxi Pharmaceutical Vocational College, Shanxi Taiyuan 030031; 2 Modern Research Center of
No.
RT / min
1
5. 07
2
6. 18
3
7. 10
4
12. 77
5
29. 91
6
30. 43
7
1. 73
8
5. 06
9
山楂HPLC指纹图谱研究
山楂HPLC指纹图谱研究龙凤;谢镇山;高新开;黄月纯;曹子丰;魏刚【摘要】目的:优化山楂高效液相色谱指纹图谱分析方法.方法:色谱柱为ZORBAX SB C18柱;流动相为乙腈-1％乙酸溶液,梯度洗脱;检测波长为238 nm;柱温为35℃;流速为1.0 mL· min-1.采用中药色谱指纹图谱相似度评价软件(2004A版)进行相似度评价.结果:不同来源的10批山楂样品均标示出12个共有峰;10批样品的相似度为0.964 ～0.995,提示山楂成分质量较稳定.结论:本方法准确可靠、重复性好,为山楂质量控制提供了依据.【期刊名称】《中国现代中药》【年(卷),期】2016(018)012【总页数】4页(P1598-1601)【关键词】山楂;指纹图谱;高效液相色谱法【作者】龙凤;谢镇山;高新开;黄月纯;曹子丰;魏刚【作者单位】无限极(中国)有限公司,广东江门529156;广州中医药大学,广东广州510006;无限极(中国)有限公司,广东江门529156;广州中医药大学第一附属医院,广东广州 510405;无限极(中国)有限公司,广东江门529156;广州中医药大学,广东广州 510006【正文语种】中文山楂为蔷薇科植物山里红Crataegus pinnatifida Bge.var.major N.E.Br.或山楂Crataegus pinnatifida Bge.的干燥成熟果实。
味酸、甘，性微温，归脾、胃、肝经，具有消食健胃、行气散瘀、化浊降脂的功能，用于肉食积滞、胃脘胀满、泻痢腹痛、瘀血经闭、产后瘀阻、心腹刺痛、胸痹心痛、疝气疼痛、高脂血症等[1]。
山楂化学成分主要为有机酸[2-4]、黄酮[2]、三萜[3]等成分。
现代药理学研究表明山楂有强心、降血压、降血脂、增加冠状动脉流量、抗肿瘤等作用[5]。
目前山楂的质量研究包括黄酮及有机酸含量测定[6-7]，亦有指纹图谱研究报道[8-10]。
本实验优化色谱条件，建立了山楂HPLC指纹图谱，为山楂质量控制提供参考。
HPLC法同时测定山楂提取物中齐墩果酸和熊果酸的含量
HPLC法同时测定山楂提取物中齐墩果酸和熊果酸的含量毛玲;韦国兵;叶霁;周柏伦;林轶男【摘要】目的：采用H PLC法建立山楂提取物中齐墩果酸和熊果酸的含量测定方法，为山楂提取物的质量控制提供依据。
方法 Agilent Zorbax SB C18色谱柱（250 mm ×4．6 mm ，5μm），流速0．8 ml／min ，柱温25℃，以甲醇（A）唱0．06 mol／L乙酸铵溶液（B ）（85∶15，V／V ）为流动相，等度洗脱30 min ，检测波长210 nm。
结果齐墩果酸和熊果酸分别在0．496～2．480μg、0．498～9．960μg范围内与峰面积呈良好线性关系（r＞0．9995），经重复性、精密度、加样回收率、稳定性试验，结果均符合《中华人民共和国药典》（2015年版）方法验证的要求。
结论该方法可为山楂提取物及其制剂的质量控制提供依据。
%Objective To establish a HPLC method for simultaneous determination of oleanolic acid and ursolic acid and provide the basis for quality control of Hawthorn extract .Methods Chromatographic separation was performed on Agilent Zorbax SB C18 column(250 mm × 4 .6 mm ,5μm) with mobile phase of methanol (A)-0 .06 mol/L ammonium acetate solution (B) (85∶15 ,V/V ) un der isocratic elution for 30 min .The flow rate was set at 0 .8 ml/min and the detection was set at the wavelength of 210 nm .Results Oleanolic acid and ursolic acid showed good linearity (r>0 .999 5) in the ranges of 0 .496-2.480 g and 0 .498-9 .960g ,respectively .Repeatability ,precision ,recovery and stability were conform to the method valida-tion requirements of China Pharmacopoeia .Conclusion The method could provide the basis for the quality control of Hawthorn extract and its preparation .【期刊名称】《药学实践杂志》【年(卷),期】2016(034)006【总页数】4页(P537-539,555)【关键词】山楂提取物;齐墩果酸;熊果酸;质量控制;高效液相色谱法【作者】毛玲;韦国兵;叶霁;周柏伦;林轶男【作者单位】江西中医药大学药学院，江西南昌 330004; 第二军医大学药学院，上海200433;江西中医药大学药学院，江西南昌 330004;第二军医大学药学院，上海200433;第二军医大学药学院，上海200433; 广东药科大学中药学院，广东广州510006;上海交通大学药学院，上海 200240【正文语种】中文【中图分类】R284.1中药山楂的原植物为蔷薇科植物山里红(Crataegus pinnatifid Bge.var.majorN.E.Br.)或山楂(Crataegus pinnatifida Bge.)的干燥成熟果实[1]。
山楂药材黄酮类成分HPLC指纹图谱的研究
山楂药材黄酮类成分HPLC指纹图谱的研究
陈宝龙;郑朝华;陈玉英
【期刊名称】《中国新药杂志》
【年(卷),期】2005(14)1
【摘要】目的:采用高效液相色谱法建立山楂药材黄酮类成分指纹图谱.方法:以Licrospher C18 ODS柱(200mm×4.6mm,5μm)为色谱柱,采用水和乙腈溶液梯度洗脱,流速0.9mL·min-1,检测波长210nm.结果:精密度和重复性试验中,峰面积大于10%的共有峰的相对峰面积的RSD均小于5%,符合<中药注射剂色谱指纹图谱实验研究技术指南(试行)>中相关要求.结论:本方法可作为控制山楂药材内在质量的标准.
【总页数】3页(P80-82)
【作者】陈宝龙;郑朝华;陈玉英
【作者单位】河南省洛阳正骨研究所,洛阳,471002;中国药科大学分析化学教研室,南京,210009;中国药科大学分析化学教研室,南京,210009
【正文语种】中文
【中图分类】R282.71;R284.1
【相关文献】
1.建立黄芪药材中黄酮类成分HPLC指纹图谱的方法 [J], 汤灿辉;何群
2.建立黄芪药材中黄酮类成分HPLC指纹图谱的方法 [J], 汤灿辉;何群;
3.黄芪破壁饮片的DNA条形码鉴别与黄酮类成分HPLC指纹图谱研究 [J], 王艳;
彭丽华;郑夏生;成金乐
4.山楂药材黄酮类成分毛细管电泳指纹图谱研究 [J], 陈宝龙;郑朝华;陈玉英
5.黑豆药材的HPLC指纹图谱建立及5种异黄酮类成分的含量测定 [J], 郭千祥; 梁幼玲; 史旭华; 白俊其; 黄娟; 黄志海; 丘小惠
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山楂高效液相指纹图谱研究
山楂高效液相指纹图谱研究
汤树良;杨滨;黄璐琦;罗永明;张文惠
【期刊名称】《中国实验方剂学杂志》
【年(卷),期】2004(10)4
【摘要】目的 :建立山楂药材高效液相色谱指纹图谱。
方
法 :SymmetryShieldWaters RP1 8柱 ,乙腈 0 5 %醋酸水液梯度洗脱 ,流速 1
0ml·min- 1 ,检测波长 35 5nm ,柱温4 0℃。
结果与讨论 :建立了山楂药材高效液相色谱指纹图谱。
【总页数】5页(P9-13)
【关键词】山楂;HPLC;指纹图谱
【作者】汤树良;杨滨;黄璐琦;罗永明;张文惠
【作者单位】中国中医研究院中药研究所;江西中医学院
【正文语种】中文
【中图分类】R284.1
【相关文献】
1.山楂叶超高效液相色谱指纹图谱及聚类分析研究 [J], 杨明宇;李明臣;徐宝欣;高婧;李艳荣;潘海峰
2.基于高效液相色谱图谱结合化学计量学的红参指纹图谱研究 [J], 董坤园; 于澎; 熊金路; 钱圳; 许天阳
3.康艾注射液中间产品人参提取液中人参皂苷Rg1和人参皂苷Re的含量测定方法
及高效液相指纹图谱研究 [J], 李建英; 李晓彤; 翁红; 王道新; 纪丽岩; 祁宇祥; 王波; 米广明
4.地黄配方颗粒高效液相色谱指纹图谱及红外图谱研究 [J], 潘广洲
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山楂标准汤剂的HPLC特征图谱研究作者：郝磊孙福仁高晗李雪利田方李振江李军山来源：《河北工业科技》2019年第06期摘要：为了进一步研究山楂配方颗粒的质量控制方法，以山楂标准汤剂为研究对象，采用高效液相色谱仪与GL science C18（4.6 mm×250 mm，5.0 μm）色谱柱，以乙腈-0.4%磷酸为流动相，柱温为30 ℃，流速为1.0 mL/min，检测波长为254 nm，应用特征图谱技术以及中药指纹图谱相似度评价软件提取山楂标准汤剂特征图谱中的特征成分。
研究表明，15批山楂标准汤剂中共确定了7个特征峰，分离度较好，且峰面积较大，易于识别，使用参照物标定了3个特征峰成分，各共有峰相对保留时间的RSD值小于2.5%。
所建立的山楂标准汤剂HPLC特征图谱方法可靠、稳定，为山楂配方颗粒质量控制提供了一定的参考。
关键词：中药化学;山楂标准汤剂;特征图谱;绿原酸;金丝桃苷;异槲皮苷中图分类号：R284.1;文献标志码：Adoi： 10.7535/hbgykj.2019yx06009文章编号：1008-1534（2019）06-0422-07Abstract：In order to study the quality control method of Crataegi fructus formula granules， the standard decoction of Crata-egi fructus is taken as the research object，the GL science C18（4.6mm×250 mm，5.0 μm） chromatograms column are used. Acetonitrile-0.4% phosphoric acid is mobile phase， the column temperature is 30 ℃， the flow rate is 1.0 mL/min， and the detection wavelength is 254 nm. The characteristic components in the characteristic of the standard decoction of;Crataegi fructus are extracted by using characteristic atlas technology and similarity evaluation software of traditional Chinese medicine fingerprint. The results show that there are 7 characteristic peaks in 15 batches of Crataegi fructus standard decoction. The separation degree is good， and the peak area is large and easy to identify. Three characteristic peaks are calibrated with reference substance. RSD value of relative retention time of each common peak is less than 2.5%. The established characteristic chromatographic method of Crataegi fructus standard decoction is reliable and stable， which provides a reference for the quality control of Crataegi fructus formula granules.Keywords：chemistry of Chinese material medica; the standard dection of Crataegi fructurs; feature chromatograms; chlorogenic acid; hypericin; isoquercetin山楂為蔷薇科植物山里红Cralaegus pinnatifida.Bge.var.major N.E.Br.或山楂Crataegus pinnatifida Bge.的干燥成熟果[1]。
山楂中含有多种黄酮类成分，如牡荆素鼠李糖苷、槲皮素、金丝桃苷、槲皮素-3-O-β-D-6-乙酰基吡喃葡萄糖苷、槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷及槲皮素-3-O-β-D-6-乙酰基吡喃阿洛糖苷;还含有枸橼酸、牡荆素、熊果酸、绿原酸等有机酸类[2-3]。
山楂为常用中药，临床应用广泛。
现代药理学研究表明，山楂具有抗炎、抗氧化、抗肿瘤、降血压等功效，山楂中的总黄酮对动物心肌缺血具有治疗作用，所含的有机酸具有促进消化等功效[4-5]。
已有研究表明，使用HPLC建立指纹图谱方法可用于对不同植物来源山楂药材的鉴别[6-7]。
彭灿等[8]采用乙腈-冰乙酸缓冲溶液，对山楂中的有机酸类成分进行了指纹图谱分析，建立的指纹图谱方法符合相关要求;邹录惠等[9]利用固相萃取SPE技术，结合HPLC指纹图谱方法，对山楂药材中的总黄酮类成分进行分析，确定了10个共有峰成分，并指认了4个共有峰;李晓亮等[10]对不同产地的山楂叶进行了指纹图谱分析，发现山西晋城山楂叶的色谱峰较多。
目前，未见山楂标准汤剂特征图谱的相关文献。
本文以由不同产地山楂饮片制备而成的标准汤剂为研究对象，通过建立特征图谱方法，对不同产地的山楂标准汤剂进行分析，以期为山楂配方颗粒的质量控制提供参考。
1;主要仪器与试剂1.1;仪器岛津LC-20AT高效液相色谱仪，日本岛津株式会社提供;GL science C18色谱柱（4.6mm×250 mm，5.0 μm）;CP225D型电子分析天平，赛多利斯公司提供;KH3200E型超声波清洗器，昆山禾创超声仪器有限公司提供;电加热套，北京科伟永兴仪器有限公司提供;真空旋转蒸发仪，上海申科生物技术有限公司提供;LGJ-12压盖型真空冷冻干燥机，河南兄弟仪器设备有限公司提供;圆底烧瓶，量筒，烧杯。
1.2;试剂绿原酸对照品，批号为110737-201516，购自中国药品生物制品检定所;金丝桃苷对照品，批号为111521-201005，购自中国药品生物制品检定所;异槲皮苷对照品，批号为111809-201105，购自中国药品生物制品检定所;磷酸，分析纯，批号为20170309，天津市科密欧化学试剂有限公司提供;甲醇，色谱纯，批号为20170313，天津市科密欧化学试剂有限公司提供;乙腈，色谱纯，批号为20171213，天津市科密欧化学试剂有限公司提供;水为自制纯化水。
1.3;15批山楂标准汤剂的制备1.3.1;山楂饮片来源15批山楂饮片采购于山西、河北、山东产地的市场，经企业质控中心检验，15批饮片均符合《中华人民共和国药典》2015版“山楂”项下的相关要求[1]。
详见表1。
1.3.2;山楂标准汤剂制备方法分别取15批山楂饮片约100.0 g，除去可见异物（石头、尘土等），转移至圆底烧瓶中，加入饮片量8倍的水，浸泡30 min。
大火加热至沸腾，改小火煎煮30 min，过0.074 mm滤网，将滤液快速冷却。
在药渣中加入饮片量6倍的水，大火加热至沸腾，改小火煎煮20 min，过0.074 mm滤网，将滤液快速冷却。
合并2次煎液。
将提取液用旋转蒸发仪于60 ℃浓缩，浓缩至生药量与浓缩液体积比约为1∶3时为宜。
将浓缩液使用冷冻干燥机干燥。
2;方法与结果2.1;色谱条件岛津LC-20AT高效液相色谱仪，色谱柱为 GL science C18（4.6 mm×250 mm，5.0 μm），流速为1.0 mL/min，柱温为30 ℃，检测波长为254 nm，进样量为10 μL，流动相为乙腈（A）-0.4%磷酸（B）。
梯度洗脱程序见表2。
2.2;对照品溶液的制备取绿原酸、金丝桃苷、异槲皮苷对照品，精密称定4，4.5，2 mg，转移至50 mL容量瓶中。
加入50%（体积分数，下同）的甲醇制成每1 mL含80 μg的绿原酸溶液，加甲醇制成每1 mL含90 μg的金丝桃苷溶液，加甲醇制成每1 mL含40 μg的异槲皮苷溶液，作为对照品溶液。
2.3;供试品溶液的制备取标准汤剂0.40 g，精密称定，置于具塞锥形瓶中。
精密加入70%甲醇25 mL，超声处理（功率为250 W，频率为40 kHz）30 min，再称定质量，用70%甲醇补足减失的质量，摇匀，过滤，即得。
2.4;方法学考察2.4.1;精密度考察取山楂标准汤剂样品（S9）0.40 g，按供试品溶液制备项下所述方法制备供试品溶液，依照“2.1”项所述色谱条件，连续进样测定5次。
将所得色谱图导入2008版《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》，并以共有色谱峰5为参照，计算各特征峰的相对保留时间与相对峰面积的RSD值。
特征峰相对保留时间的RSD值为0.00%～0.27%，相对峰面积的RSD值为0.00%～2.35%，均小于5.00%。
说明该仪器的精密度符合分析方法的要求，详见表3和表4。
2.4.2;重复性考察取山楂标准汤剂（S9）0.40 g，按供试品溶液制备所述方法，平行制备5个样品溶液，依照“2.1”项所述色谱条件进行测定。
将所得色谱图导入2008版《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》，以共有色谱峰5为参照，计算各特征峰的相对保留时间与相对峰面积的RSD值。
特征峰相对保留时间的RSD值为0.00%～0.86%，相对峰面积的RSD值为0.00%～3.05%，均小于5.00%，说明该方法的重复性符合分析方法要求，详见表5和表6。
2.4.3;稳定性考察取山楂标准汤剂（S9）0.40 g，按供试品溶液制备所述方法，制备样品溶液，依照“2.1”项所述色谱条件，对同一样品溶液分别于0，2，4，6，8 h测定。
将所得色谱图导入2008版《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》，并以色谱峰5为参照，计算各特征峰相对保留时间与相对峰面积的RSD值。
特征峰相对保留时间的RSD值为0.00%～0.89%，相对峰面积的RSD 值为0.00%～2.95%，均小于5.00%，说明样品在8 h以内测定，稳定性符合分析方法的要求。
详见表7和表8。
2.5;15批山楂标准汤剂特征图谱的测定对15批山楂标准汤剂按照“2.1”项所述色谱条件进行样品处理及测定，结果见图1。